JPS609495A - 多糖類の分解方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は、多糖類、特に植物細胞壁多糖類をカルボヒド
ラーゼにより分解する方法に関する。

従来技術 特願昭５７−０２１０１９号明細書には、ｓｐｓ−アー
ゼと記載した酵素及び５ＰＳ−アーゼを冴む酵素製剤が
記載されている。

また、特願昭５７−０２１０１９号明細書には、５ｐＳ
−アーゼ及び５ｐｓ−アーゼ含有酵素製剤は果実及び植
物性マツシーを処理する食品加工工業における用途並ひ
にジュース及びワインの加工における澄明化及び糖度低
下の目的に及び野菜の加工における脱水剤として使用し
うろことが記載されている。

更に、特願昭５７−０２１０２０号明細岩−には、プロ
テアーゼを実質的に含まない５ＰＳ−アーゼ製剤を、粗
製蛋白質物質、好ましくは粗製大豆蛋白質から蛋白質を
精製（単離）するため使用しうろことが記載されている
。

発明の概要 本発明により、前記の５ＰＳ−アーゼ製剤が特願昭５７
−０２１０１９号及び同５７−０２１０２０号明細書に
記載されている適用範囲よりはるかに広い適用範囲を有
することが判明した。

第一に、本発明は、ＳＰＳを適切な条件下で分解して、
水性媒体中で蛋白質に、ＳＰＳが分解前に相応する条件
下に同じ蛋白質に結合していたであろうより少ない程度
に結合している分解生成物を生成することができる、実
用しうる形のカルボヒドラーゼである５ＰＳ−アーゼ製
剤（％願昭５７−０２１０１９号明細書参照〕を水性媒
体中で前記５ＰＳ−アーゼ製剤用基質と接触することか
ら成る、多糖類、好ましくは植物細胞壁多糖類をカルボ
ヒドラーゼで分解する方法（但し、特願昭５７−０２１
０１９号及び同５７−０２１０２０号明細書に記載した
分解方法を除く）に関する。

従って、本発明によシ、５ＰＳ−アーゼ製剤が若干の物
質、好ましくは植物性物質、例えば果実、及ヒ蛋白質、
セルロース、ヘミセルロース、（例えばグルカン、キシ
ラン、ガラクタン及びアラパン）、ゴム、ペクチン、脂
質、イヌリン、ポリフェノール、殿粉及びアルギン酸塩
を含む植物廃物の部分的又は完全な液化又は分解及びこ
れらに類似した目的に有用な酵素製剤（下記の表参照）
である。このような類似の目的の例としては、市販のペ
クチナーゼ及びセルラーゼが現在使用されているすべて
の目的が春げられる。以下に若干の例を記載する。

特願昭５７−０２１０２６号明細書に記載した抽出（単
離）法に関して、５ＰＳ−アーゼ製剤が実質的にプロテ
アーゼを含まないことが判る（グロティナーゼを宮めば
、所望の目的生成物、即ち蛋白質が分解されるはずであ
るという理由で）。

同様に、粗製生物材料から蛋白質以外の生物学的物質を
抽出（単離）したい場合には、使用する５ＰＳ−アーゼ
製剤はこの他の生物学的物質を分解する酵素を実質的に
営むべきでない。このような変性５ｐｓ−アーゼ製剤は
、不所望な酵素の選択的不活性化、分溜又は自体公知の
他の方法によって製造される。

従って、本発明の好ましい実施態様は、粗製生物材料か
ら大豆蛋白質及び類似の植物性蛋白質以外の生物学的物
質の単離又は抽出を含み、ｓｐｓ　−アーゼ製剤は前記
の生物学的物質を分解しうる酵素を実質的に含まない。

本発明により、変性５ＰＳ−アーゼ製剤（製剤が抽出又
は単離すべき生物学的物質を分解しうる酵素を実質的に
含まないという意味で変性された）は、粗製生物材料か
ら所定の生物学的物質、例えば酸粉、脂質、香料、眉色
料及びジーースを抽出（単離〕するため有用な酵素製剤
であることが判った。若干の例を以下に記載する。

未変性５ＰＳ−アーゼ製剤及び、精製最終生成物として
望ましい生物学的物質を分解しうる酵素を実質的に宮ま
ないという煮味で変性されたｓｐｓ　−アーゼ製剤の前
記用途に関して、反応生成物（所望の最終生成物であっ
ても、廃棄生成物であっても）を、酵素処理と同時に又
はその後に更に処理することができる。このような処理
の例は、前記の反応生成物のうちの１種が発酵可能の糖
である場合には、アルコール発酵である（例えは下記の
表のセクションＢａ４及びＢｃｌ参照）。

蛋白質以外の物質の抽出（単離）法又は液化法及びこれ
らと類似の方法に関しては、第１図に示した一般的処理
工程図を参照する。

基質は粗製物質中に存在する１種以上の炭水化物である
か、又は完全な粗製物質であってよい。

この基質を、以下に例示する化学的又は物質的前処理、
例えば酸又はアルカリ処理、浸漬、及ｙ又は蒸気を用い
るか若しくは用いないフライング処理に付すことができ
る。

粗製物質を、水を添加するか又は添加しないで、浸軟、
細断、湿式ミリング及び／又は均質化（これらの処理を
すべて第１図に均質化と示す）処理し、この工程の間に
他の添加剤を添加することができる。均質化は種々の効
率で、例えば使用する特定のホモジナイザーについて所
足の最大圧力の一部にすぎない種々の圧力で実施するこ
とができる。第１図にｂｌ、ｂ２、・・・ｂｎで示した
ように、種々の添加剤を均質化の前又は間に添加するこ
とができる。

５ＰＳ−アーゼ製剤を含む反応工程は特定の条件、例え
ば温度、圧力、時間、ＰＨ及び酵素用量の下に実施する
。使用する反応器（例えばバッチ型、プラグ−フロー型
）に関する推奥基準及び攪拌も、必要に応じ適切である
。第１図にｃｌ、ｃ２、・・・Ｃｎとして示したように
一連の添加剤を種々の粗製物質に加えることができる。

分離工程も種々の効率で実施することができる。

多くの工程の間、例えば粗製物質が全体的に液化される
場合に、分離は省くか、又は簡易化される。

種々の分離装置を使用することができる（例えば遠心分
離機、濾過器、限外ν過装置、ハイドロサイクロン、シ
ックナー、篩又はスクリーン、又は簡単なデカンタ−）
。

分離効率とは、固相における絶対的スラッジ含有量と反
応混合物の絶対的スラッジ含有量との割合である。

得られる液相又は固相を更に、脂肪又は油のような成分
を除去するため処理、例えば濃縮、乾燥又は溶剤抽出す
るか、又はバイオマス、アルコール又は他の生成物（酵
素、抗生物質、又は他の有用な成分）の製造のため発酵
させることができる。

次に、５ＰＳ−アーゼ製剤の適用例を看干示し、これら
の適用例の概要を下記のリストに示す。

また、第１表には、第１図に関連する特性を列挙する。

以下余白 Ａ１．トウモロコシ、小麦及びノ々レイショからの殿粉
の抽出 トウモロコシ、小麦、バレイショ及びその他の殿粉を含
む植物から殿粉を抽出する。殿粉分解活性を実質的に有
しない５ＰＳ−アーゼ製剤の適用はトウモロコシを例に
とれば、下記の利点を生じる：１、短い浸漬時間で、殿
粉の遊離が促進される。

２、水の消費を減少することができる。

３、トウモロコシ胚芽油を遊離することなく、トウモロ
コシ胚の遊離が促進される。

４、蛋白質が高純度で得られる。

５、トウモロコシ浸漬水の回収が容易になる。

Ａ　２．　植物材料からの脂質の抽出 植物材料中の脂質は細胞内に抽促され、通常蛋白質に結
合しているので、脂質を、す・９−ゼを実質的に含まな
い５ＰＳ−アーゼ製剤で処理することによって水相中で
抽出することができる。トラモロコシ胚芽油は、通常、
乾燥トウモロコシ胚のへキサン抽出によって単離される
。しかし、湿めったトウモロコシ胚を前記種類の５ＰＳ
−アーゼ製剤で処理する場合、乾燥操作は不必要でおる
。同様に、酵素処理に使用する酵素を前記種類のｓｐｓ
　−アーゼ製剤である場合に、水相におけるオリーブ油
の抽出を改良することができる〔例えば、フッド、フア
ルマシューティカル・アンド・バイオエンジニアリング
（Ｆｏｏｄ　ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎ
ｄＢｌｏｅｎｇｌｎｅｅｒｌｎｇ）、／ｆ６１７２．７
４巻９３〜９４頁参照」。例えば、大豆油、菜種油及び
ヒマワリ油の水性抽出力も同様に改良することができる
。

Ａ　３．　植物材料からのエーテル注油の抽出エーテル
注油を含む植物性物質をエーテル注油を分解しうるか、
又は変化しつる酵素活性を実質的に含まない５ｐｓ−ア
ーゼ製剤の水溶液で抽出すル場合、エーテル注油が極め
て低いコストで高収率で回収される。

Ａ　４．　植物材料からの天然着色剤の抽出着色剤を含
む植物性物質、例えば赤色着色剤であるベタニンを含む
ビートの根又は着色剤を含むつるこけももを、着色剤を
分解しうるが、又は変化しうる酵素活性を実質的に含ま
ない５ＰＳ−アーゼ製剤で処理すると、着色剤が極めて
低いコストで高収率で回収される。

Ａ　５．　グアニールゴムの木からのゴムの抽出生ゴム
を分解しνる酵素活性を実質的に含まない５ＰＳ−アー
ゼ製剤用の基質の別の例は、グアニールゴムの木の根及
び枝の細胞壁材料である。

Ｂ　ａ　１．　糖化殿粉を含む粗製物質の製造カッサバ
及びさつまいも及びその他の殿粉を含む植物材料の糖化
に関して、５ｐｓ−アーゼ製剤を添加すると、糖度の問
題を解決することができる。

５ＰＳ−アーゼ製剤を使用することによって、２５〜３
０％の乾燥固形分を有する殿粉（論濁液を製造すること
ができ、糖化の後、マツシーを発酵して廉価なエタノー
ルを得ることができる。

例Ｂａ１．１ 新鮮な及びすシつぶしたさつまいも（日本産）に基づい
て、２４ｑｂの乾燥固形分を有するマツシュを製造した
。さつ゛まいもの殿粉含有率はその乾燥固形分の約７０
チであることが判った。殿粉１トン当、！７０．５　ｋ
ｇの用量でターマミＪ（Ｔｅ　ｒｍａｍｙ　１　）６０
Ｌの細菌性アミラーゼによる予備液化を、マツシュを９
０℃に加熱することによって実施した。

マツシーを次に９０℃に３０分保持した。反応混合物の
粘度η１を９０℃でハーグ（ＨＡＡＫＥ　）スピンドル
によシ測足した。

その後、反応混合物を５５℃に冷却し、ＰＨを２ＮＨ２
Ｓ０４　でｐＨ２に調節した。次に、糖化をグルコアミ
ラーゼ５ＡＮ１５０（ノボ・インダストリイ社の商品名
〕を殿粉１トン当ｐ１．７５／の用量で添加して開始さ
せた。糖化混合物を３つの部分Ａ。

Ｂ及びＣに分割し、これらを糖度６（１１足前に下記の
ように１５分間酵素処理した： Ａ：　これは対照である。粘度η２を測定した。

第Ｂ　ａ　Ｉｎ表参照 Ｂ：　セルクラスト（Ｃｅ１ｌｕｃｌａｓｔ　）■２０
ＯＮのトリコデルマ−ビリデ（Ｔｒｉｃｏｄｅｒｍａｖ
ｉｒｉｄｅ　）セルラーゼをさつまいもの乾燥物質１ト
ン当シ１　／ｃｇの用量で添加した。糖度η３を測定し
た。第Ｂ　ａ　ｌｌ１表参照。

Ｃ：　、　ＫＲＦ　−６８（７）ＳＰＳ　−７−セ製剤
（％願昭５７−０２１０１９号明細有、参照）をさつま
いもの乾燥物質の１トン当９０．２５ｋｆｌの用量で添
加した。糖度η４を測定した。第Ｂ　ａ　１１１表参照
。

第ＢａＪＨ表−粘　度 反応混合物の粘度をセルクラスト■及びＳＭｌ　５０に
比べて低い用量で５ｐｓ−アーゼで効率良く低下し得た
ことが判る。

Ｂ　ａ　２．　なし及び他の果物の完全液化機械的に破
砕したなし全体をその後５ｐｓ−アーゼ製剤で処理する
と、完全液化が起シ、少量の固体物質を除去した後澄明
ななしジュースが生成する。他の同様の果実、例えばシ
んごについても、同様の方法を使用することができる。

例Ｂａ２．１ 新鮮なシんごをブッヒャー・セントラル（Ｂｕｅｈｅｒ
　Ｃｅｎｔｒａｌ　）ミルで粗くミリングした。

りんごマツシュを次に加熱ジャケット付きタンク中で９
０℃で５分間滅菌し、次に環境温度に冷却した。予めす
りつぶしたりんごを次に鋼玉石装具を付けたフリマ（Ｆ
ｒｙｍａ　）ミルで、マツシュが滑らかな感触になるま
でミリングした。マツシュを再び８０℃で１０分間滅菌
し、５０℃に冷却した。

酵素反応をコントラベス・レオマート （Ｃｏｎｔｒａｖｅｓ　Ｒｈｅｏｍａｔ　）　１５で攪
拌しながら５０℃で３０分間実楕し、同時に粘度測定（
レオメータで速度１３での）や−センテージの読み）を
行なった。酵素反応が終った後、試料１００ｇを採取し
、目盛り付き管中で３０００）ｌ’で１５分間遠心分離
した。これにより、ジーースのパーセンテージ及び沈殿
物のパーセンテージを測定する。

Ｐｔ−１及び’Ｂｒ１ｘ　として屈折計による乾燥物質
のパーセンテージも測定した。第Ｂａ１Ｖ表には、ｓｐ
ｓ　−アーゼの作用、セルクラストと５ＰＳ−アーゼと
の組合せの作用、及びセルクラストとベクチネックス（
Ｐｅｅｔｉｎｅｘ　）との組合せの作用の比較を示す。

５ｐｓ−アーゼ製剤ＫＲＦ　−６８（％願昭５７−０２
１０１９号明細書）を使用した。

以下余白 Ｂ　ａ　３．　果物及び野菜の処理によるジェースの製
造 ５ＰＳ−アーゼ製剤は、若干の果物、ベリー類及び野菜
、例えはにんじん、えんどう、トマト、りんご、なし、
黒すぐ夛、豆類及びキャベツの処理によってジュース金
製造するのに好適でおることが判った。これにより、市
販のペクチナーゼ及びセルラーゼ製剤に比べて、ジュー
ス収率の向上及び着色成分及び香味成分の良好な抽出が
遠地される。

例Ｂａ３．１ ＳＰＳ−アーゼ製剤を市販の常用のセルラーゼ及びペク
チナーゼ製品であるセルクラスＡｏｏＬ及びベクチネッ
ク第３Ｘに対比した例Ｂａ３．１を参照する。その表か
ら、ともにセルクラスト＠５０ｊ／ｂｌｌと併用した場
合に、ベクチネックス■２ＯＵＯ＆／ｂａＣ比べて備か
に５０１１／ｈｌの５ｐｓ−アーゼを用いてジュースの
収率を僅かに改良しうろことが判る。粘度も僅かに低か
った。５ＰＳ−アーゼはベクチネックス↓シ約４０倍有
効でるると思われる。

Ｂ　ａ　４．　さとうきび又はてんさいの抽出又は圧搾
に関する処理 ５ＰＳ−７−ゼ製剤を、抽出又は圧搾の前及び／又は間
にさとうきび又はてんさいの処理に使用する場合、簡単
な抽出工程による収率を改良しうろことが判った。残渣
（しほり殻）　６５ｐｓ−アーゼ製剤で処理し、これに
よりエタノール発酵用原料として使用しうる発酵可能の
糖に部分的に変換する。

例Ｂｍ４．１ ナクスコ７・シーガー・ンアクトリイ （Ｎａｋａｋｏｖ　Ｓｕｇａｒ　Ｆａｅｃｏｒｙ　）で
ＤＯ８−拡散器で連続的向流抽出から得られたてんさい
の残渣（ノクルグ）１０ｋｇをフリ？　（Ｆｒｙｍａ　
）ミル（型ＮＺ−１１０）で２回ミＩＪングした。ミリ
ング操作の間に加工水を加えた。

パルプ３００Ｉをｆ、　Ｂ　ａ　Ｖ表に示したＩ！１２
累用箪で４５℃で１８時間′＃素処理した。乾燥した酵
素生成物（ＫＲＦ　−６８）をバルブに加え、初めの１
時間の間棒で攪拌した。その後、ノクルプを、磁気攪拌
を残りの時間、連続的に実権できる程度に液化した。反
応の終りに、−Ｉを測足しく反応の開始の間ＶＣｐＨ−
補正を行なわなかった）、反応混合物をは明な上澄み液
が得られるまで、遠心分離した。

反応混合物及び上澄み液について乾燥物質を測定した。

これらの結果に基づいて可溶化された乾燥物質のツヤー
センチ〜ジを計算した。すべての計算において、酵素生
成物の可溶性乾燥物質に関して補正した。

上所み液Ａ２．３及び４をイオン交換処理し、炭化化物
組成物用ＨＰＬＣで分析した。

以下余白 反応条件：　Ｍ＝３ｏｏ、ｐ Ｓ＝４．１８％乾燥物質 Ｆ２／Ｓ　前記のとおシ ｐｌ（調整せず Ｔ＝４５チ ｔ＝１８時間 第Ｂ　ａ　Ｖｉ表　ＨＰＬＣデータ 前記第ＢａＶＩ表によシ生成した糖をすべてアルコール
に発酵するか、又は他の目的に使用することができた。

Ｂ＆５０回収可能の量のコーヒー可溶分を増加する処理 インスタントコーヒーの製造中の種々の段階でコーヒー
豆を処理すると、コーヒー可溶分の収率が増加すること
が判−）ｆｃ、　（１例えば、使ったコーヒーの粉末又
は生の豆を酵素で処理して好ましい結果を得ることがで
きる。

Ｂｂｌ　、ｊ）んご又はなしのくもりの防止及び／又は
分解 混濁の形成を防止するため常用のペクチナーゼ及びセル
ラーゼ製剤で予め処理した、１ザ明でなければならない
りんごジュース又はなしジュース及び他の果物ジュース
を製造した後、りんごのくもシ又は同様の果物のくもシ
が現われることがある。

５ＰＳ−アーゼ製剤は主として蛋白質に結合したアラパ
ンから成る、このようなくもりの分解に好適であること
が判った。

例Ｂｂｌ。

セルクラスト０及びペクチネックス０を使用してなしの
缶詰廃物の酵素液化によって製造したなしジュース濃厚
物は、放置すると、くもることが判った。くもシを単離
し、０．０１　Ｎ　Ｈ２ＳＯ４で２４時間加水分解し、
ＨＰＬＣで分析した。クロマトグラムはアラビノース及
び少量のオリゴ糖を示した。

ｐＨ４，５Ｆ）　１ｍＭ　酢酸塩緩衝液中ＯＯ，５％　
Ｗ／ＶＯこの炭水化物を０．０５％ψの酵素濃度の、％
願昭５７”０２１０１９号明紹１書に記載したミｐｓ　
−アーゼ（ＫＲＦ’　−６８十ＫＲＦ　−９２，１：１
）と共に４０℃で３時間製置することによって、初めの
くもシの炭水化物（乾蕗物質）の８４チがアラビノース
に変化したことが判った。

希釈したなし濃厚物（２０°Ｂｒ１ｘ　）を０．１５％
Ｗ／Ｖの酵素用量の前記５ＰＳ−アーゼ又は１チＷ／Ｖ
の用量のクラレックス（Ｃ１ａｒａｘ）■と言われる市
販品で４０℃で２時間処理した。５ＰＳ−アーゼはアラ
パン様くもシの相対的ＨＰＬＣピーク面積を８６チ減少
することができ、クラレックス■（５ｐｓ−アーゼ製剤
よりはるかに高い用量で使用した）での対応する減少は
僅か７８％であった。

Ｂ　ｂ　２．　白ワインの７ず明化剤としての用途著し
く不所望な混濁を示す白ワイン４５ｐｓ−アーゼで有効
に泄明化しうろことが判明した。くもシの物質は主とし
て細胞壁構造蛋白質中のヒドロキシプロリン基に結合し
ているアラビノガラククンから成ることが判った。

Ｂ　ｂ　３．　ｌ５ＳＰＨ又は他の他物性蛋白質の加水
分解生成物の製造 米国特許第４，１００，０２４号明細書又はプロセス−
バイオケミストリイ（Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉＩＩｔｒｙ）。

１４巻Ａ６７（１９７９）、６〜８頁及び１０〜１１頁
に記載されているようにｌ５ＳＰＨ（等電点て可溶性の
大豆蛋白質の加水分解生成物又は他の植物性蛋白質の加
水分解生成物をスラッジから分離する前に、反応混合物
を５ｐｓ−アーゼ製剤で処理することができる。これに
より、−１ｍｌ容易に分離できるようになる。

Ｂ　ｂ　４．　醸造工業におけるマッシング酵素ビール
を製造する際に、原料の炭水化物、例えば麦芽及び大麦
のベーターグルカンは麦芽汁の粘度及び濾過性に影響す
る。マッシング中にｓｐｓ　−アーゼを添加すると、麦
芽汁の粘度が低下し、テ過性及び抽出物の収率が改良さ
れる。更に、マッシング中に５ＰＳ−アーゼを添加する
と、麦芽汁の発酵性及び麦芽汁中の窒素含有率が増加す
る。

例Ｂｂ４．１ 実験室中で、麦芽５０チ及び大麦５０価から成る粗粉５
０Ｉを水２７５ｇと（乾燥物質１５チ）−緒に、下記の
マッシング条件によりマツシングした２５２℃（６０分
）７６３℃（６０分）７７６℃（３０分〕。

５ＰＳ−アーゼの効果を証明するため、マツシング中に
酵素を添加して（マツシーのｐＨ５，５〜ｆｉ、　Ｑ、
）。

４種の試験を行なっ比（下記の表参照）。

ＢＧＵはノコ壽インダストリイ社から得られる、−分析
法Ａ　Ｆ　７０／４−Ｇ　Ｂによシ測定したベーターグ
ルカナーゼ単位である。

ＦＢＧはノボ・インダストリイ社から得られる分析法Ａ
Ｆ７．０．１／２−ＧＢによシ測定した真菌性ベーター
グルカナーゼ単位である。

ＢＧＵとＦＢＧとの差は、酵素側型を行なう際のｐｌ（
であり、ＢＧＵに関してはｐ）ｌ　７．５、Ｆ’ＢＧに
関してはｐｉｌ　５．０でおる。

セレフロはノボ・インダストリイ社から入手しうる１９
８１年７月の情報パンフレットＢ２１４ｂ−ＧＢ１５０
０に記載されている細菌性ベーターグルカナーゼである
。

例Ｂｂ４．２ 実験室中で、麦芽４０％及び大麦５０％から成る粗粉５
０Ｆを水１５０ｇと（乾燥物質２５％）−緒に下記のマ
ッシング条件によシマッシングした；４５℃（６０分）
／６３Ｃ（９０分）７７５℃（１５分）。

５ＰＳ−アーゼの効果を証明するため、マツシング中に
酵素を添加して（マツシュのｐｊｌ　５．５−６．０）
、３種の試験を行なった。

以下糸白 ＢＧＵ及びＦＩ３０の定義は例Ｂｂ４．１に示したとお
りである。前記の表の最後の欄には、５Ｐｓ−アーゼに
由来する活性及び用量だけを示す。

セレミックスはノビ・インダストリイ社から入手しうる
１９８２年２月の情報パンフレット１１２１６ｂ−ＧＢ
ｌｏｏＯに記載されている細菌性ベーターグルカナーゼ
製剤である。

Ｂ　ｂ　５．　ビール発酵及び／又は貯蔵中に使用する
酵素添加剤 ベーターグルカンの含有率を減少し、これにょ９ビール
ｐ過性及びくも９に関するビールの安定性を改良するた
め、麦芽汁の発酵又はビールの貯蔵中に５ＰＳ−アーゼ
を添加することができる。

５ＰＳ−アーゼは冷却くもυの原因となる蛋白質に対す
る影響を与える。

Ｂ　ｂ　６．　アーモンドの殻除去剤 アーモンドの漂白後のアーモンドの殻の機械的除去工程
の間に、アーモンドの殻の伺ｉ４−セントかは除去され
ない。アーモンドを酵素処理すると、前記ノＪ？−セン
テージが減少することが判った。

Ｂ　ｃ　１．　種々の廃物の分解 製造法に関して、大量の炭水化物を含む廃物を形成する
。例えば、水抽出物及び酸沈殿による大豆単離物、大豆
乳及び豆腐の製造に関係する場合である。この点で、例
えば、りんご、なし又は柑橘類からの廃物・ぐルゾも挙
けられる。５ｐｓ−アーゼ製剤はこの炭水化物含有廃物
を完全に液化することができ、エタノール発酵用出発原
料として使用しうる発酵可能の糖を製造することができ
る。

例Ｂｃ１．１ 大豆乳又は豆腐を常法で製造する場合、屡々大豆を沸騰
水中に浸漬し、ミリングし、熱湯で抽出し、その後分離
を行なう。この分離によシ得られる残漬けこの実験に使
用する物麹である。液相は大豆乳であシ、豆腐の製造に
更に使用しうる。

アールス優オリ−７アグリツク（Ａａｒｈｕｓｏｌｌｅ
ｆａｈｒｉｋ　Ａ／Ｓ）から得られる全形の大豆１０ｋ
ｇを７リマミルＭｚ１１０型中で／Ｉｉｌ騰水７０Ｊと
一緒にミリングした。ミリングしたスラリーを次に、周
知の大豆の不快臭を現わす天然豆酵素を不活性化するた
め、８５℃以上に１５分間保持した。

この大豆スラリー５１を実験室中で３００ｘ、１ｉｌＢ
＝重力）で１５分間遠心分離した。分析にょシ残渣は２
０．４５％及び２０．０６％の乾煉物賀（２同側足、計
算した平均値２０．２６％〕を含むことが判った。電極
を物質中に直接挿入する場合、−一メータが４．５０を
示すまで、残渣中に６ＮＨＣ１を徐々に添加し、スパー
チルで処理した。

い二乾燥物負に対して０．５チ及びＶｓ＝乾燥物濁に対
して３．０％の用量の５Ｐｓ−アーゼ（ＫＲＦ’−６８
）と物質２Ｘ２００．？との酵素反応を５００−のビー
カー中で５０℃で実施した。乾燥酵素を物質に加えた。

初めの１〜２時間、攪拌をスパーチルで実施し、その後
物質を磁石で攪拌を連続的に行ないうる程度に液化した
。合計反応時間は２１時間であった。反応の間、浸透圧
側〔アドバンスト・インストルメンツ社（Ａｄｖａｎｃ
ｅｄＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ　Ｉｎｃ、）製アドパンス
トーディギマティック（Ａｄｖａｎｃｅｄ　Ｄｌｇｉｍ
ａｔｌｅ）　３　Ｄ　Ｉ　Ｉ　Ｊで重量オスモル濃度を
測定した。第ＢｃＪ表の結果は反応の経過を示す。実験
の終りに、混合物を３０００Ｘ、９で１５分間遠心分離
した。油層が上澄み液の上部に現われ、その容量を測定
した。スラッジの弛い層は底層として現われる。油を含
む上澄み液をピペットで除去した。油を均質化によって
澄明な水相と合し、乾燥物質の測定のため試料を採取し
た。第Ｂｅ１表に示した結果は、この廃棄生成物を酵素
反応によって液化することができ、粗製油をセクション
Ａ４に示したように製造することができることを明らか
に証明する。油を回収した後、可溶化した残漬を種々の
方法で、例えば有用な化合物に発酵させるか、又は綴縮
し、乾燥し、その後に飼料或いは食品として使用するた
め、又は更に精製した後、有用な生成物を製造するため
使用することができる。

以下余白 Ｂ　ｃ　２．　糖化及び同時発酵 炭水化物を含む植物制料、例えば塊茎類、例えばきくい
も（Ｊｅｒｕｓａｌｅｍ　ａｒｔｉｃｈｏｋｅｓ）、ノ
マレインョ、さつまいも、カッサバ、又はこのような塊
茎からのパルプ、即ち抽出される成分を除去した後に残
留する物質を、５ＰＳ−アーゼ製剤で処理して糖化し、
同時に生成した発酵しうる糖をエタノールに発酵させる
ことができる。

例Ｂｃ２．１ 分解されたイヌリンを含むきくいもの発酵によるエタノ
ールの製造を実験室規模で、５ＰＳ−アーゼ及びイヌリ
ナーゼを用いる同時糖化及びきくいもの４種の異なる前
処理によって試験した。

５ｐｓ−アーゼ； ５ｐｓ−アーゼ製剤ＫＲＦ　−６８（特願昭５７−０２
１０１９号明細書参照）を使用した。

ＬＬＬＬ二工：イヌリナーゼをアスペルギルスｅフイク
ウム（Ａｓｐ、ｆｉｃｕｕｍ　）　（ＣＢＳ　５５５６
５　）の発酵によって製造した。イヌリナーゼ活性をリ
サーチφディスクロージャー　（Ｒｅ！＋ｅａｒｅｈＤ
ｌｉｅｌｏｓｕｒｅ　）４６２１２３４　（１９８１年
１２月）４５６〜４５８頁に記載されているようにして
製造した。

実験室で発酵；予め処理したマッシ＝−（後記）１５０
１１を、製パン用イースト４．５ｇ及び消泡剤として４
％ゾルロニツク（Ｐｌｕｒｏｎｉｅ　）溶液１−を添加
した後に発酵させた。発酵フラスコに９８チ硫酸を含む
ＣＯ□トラップを付け、発酵に続いて、遊離したＣＯ２
による電量損失金測定する。フラスコの内容物を３０℃
で行なった発酵の間攪拌する。

研究する各／？ラメータのため、３個のフラスコを使用
した。

第Ｂｃ１表には、ＣＯ２の遊離による重量損失を、遊離
したＣＯ２１モルがＣ２Ｈ５０Ｈ１モルと等価でろ６ る、即ちＣ０２１ｇ〜Ｃ２Ｈ５０Ｈ〒〒Ｓであると仮定
して、エタノールに換算する。

１ぶめＸ鍜１ 処理Ａ；きくいも１４．ＩＪｇ（乾燥物質２２．８％）
を１４０℃、４〜５気圧で２０分間ヘンゼクック（Ｈｅ
ｎｚｅ−ｃｏｏｋ　）　した。煮沸後の重量はｘ９．ｏ
ｋｇ（乾録物質約１６．９％）でろった＠ブツシュを直
接発酵した。

処理Ｂ：洗浄し、スライスしたきくいもを水と（１：１
）で混合し、ワーソングプレンダー中でブレンドした。

ブツシュを次に８５℃で、ｐ）ｌ二４．５で１時間熱処
理した〇処理Ｃ：Ｂと同じでおるが、−Ｉを調節しなか
った。

処理り二Ｂと同じであるが、熱処理及びｐＨ１ｍ節をし
なかった。

結果： 第Ｂｃ１表の結果は、予め処理したマツシュに５ＰＳ−
アーゼを添加することの、エタノール収率に対する作用
を示す。５ＰＳ−アーゼを際加する場合に、前処理した
マツシーについてエタノール収率の著しい改良が達成さ
れた。

以下余白 Ｂ　ｃ　３．　セルロースの分解 セルロース会有材料、例えは麦わら、例えば小麦の麦わ
ら、おがくず、紙及びリダノセルロースを従来のセルラ
ーゼを用いるよυ５Ｐｓ−アーゼ製剤金用いて者しく加
水分解し９ることが判った。

これを、トリコデルマ・リーセイ（Ｔｒｉｅｈｏｄｅｒ
ｍａｒｅｅｌＩｅｉ　）及び５ｐｓ−アーゼ製剤（特願
昭５７−０２１０１９号明細嚇）によって製造した従来
のセルラーゼであるセルクラス−２００で結晶性セルロ
ース材料アビセル（ＡＶＩＣＥＬ　）　ｋ処理する下記
の災〃由例で示す。

例Ｂｅ３．１ アビセルを水中に懸濁した（乾燥物質２ｏ％）；ｐＨを
５に調節し、温度を５０℃に保持した。２４時間反応さ
せた仮、スラリーを濾過し、還元糖の含有量（グルコー
スＩｎ９／Ｉ　アビセル）を測Ｍした。

セルロース宮有量の５％及び２０％の酵素用量を使用し
て、下記の数値が認められた。

以下余白 第Ｂｃｌ［１表 Ｂ　ｃ　４．　製パン助剤としての用途５ＰＳ−アーゼ
製剤を製パン助剤として好適であることが判明した。ダ
ウの製造前に、乾燥粉に５ＰＳ−アーゼ製剤を添加する
と、容積、クラム及び味に関して品寅の浸れたパンを得
ることができる。添加剤として５ＰＳ−アーゼ製剤を使
用すると、低品質の小麦粉で商品質の・９ンが得られる
。

Ｂ　ｃ　５．　製紙からの亜硫酸廃液の発酵の間のアル
コール収率及びバイオマスの収率の改良エタノール発酵
用の炭水化物源として利用する前に製紙亜硫酸廃液を５
ＰＳ−アーゼ製剤で処理すると、エタノールの収率が改
良されることが判る。

製紙亜硫酸廃液を発酵によってバイオマス、例えは単一
細胞蛋白質の製造に使用することができ、この場合にも
亜硫ｍ廃液を予め５ｐｓ−アーゼ製剤で処理すると、バ
イオマスの収率が改良された。

５ＰＳ−アーゼ製剤の存在による分解及び発酵を同時ぐ
こ実施することができる。

Ｂ　ｃ　６．　生物学的スラッジ生成物の脱水植物原料
から多くの生物学的物質を常法で水で抽出する間に、大
部分膨潤した多糖類から取る多量の不溶性残渣が形成す
る。これは、例えば、大豆乳、豆腐又は大豆単離物を大
豆、脱脂大豆粉又は白色フレークの水抽出によって製造
する場合である。組織を構成する膨潤した多糖類物質を
５ｐｓ−アーゼで軽度に処理して、物質の網目構造を開
放させ、少量の炭水化物を可溶化することができる。物
質を脱水し、その結果、酸素処理なしに得られた生成物
に比べて、乾燥物質官有率の商いスラッジが得られる。

即ち、酵素処理鉱、乾燥による水除去に侠するエネルギ
ー消費が著しく低いという利点を示し、廉価な乾燥動物
飼料又は賞品用バルキング剤する可能性を提供する。

Ｂ　ｃ　７．　練成飼料助剤 練成飼料の加工速度及び消化性を増加するため、新鮮な
練成飼料に酵素を添加することは公知で必る。５ＰＳ−
アーゼ製剤の溶液での処理が公知の酵素練成飼料助剤に
比べて優れていることが判った。

新鮮な練成飼料に水性５ｐｓ−アーゼ製剤を使用するに
は、現在まで詳細なデータを入手できないが、練成飼料
の処理に％足の酵素を使用するのに重要であると、認識
されていることは、糖の放出能及びセルラーゼ活性であ
る。５ＰＳ−アーゼ製剤は実施例で示すように有用なセ
ルラーゼで６９、実施例では結晶性セルロースに対する
５ＰＳ−アーゼ製剤ＫＲＦ　−６８及びトリコデルマ働
す−ゼイからの市販のセルラーゼ（セルクラスト■）の
作用を比較する。更に、下記の実Ｍｔｊ例によって顕著
な糖放出能を証明する。

実施例１ ２個のエルレンマイギーフラスコのそれぞれに、１ｃＩ
ｒＬの細片に切断した芝草１５ｇを入れた。クエン酸塩
緩衝液（ｐＨ＝＝　４．５　）　７５　ｍｌ−を加えた
。微生物安定性を保証するため、ペニシリン０．０３ｇ
及びストレフ°トマイシン０．０３，９を添加した。

■方のフラスコに０．０７３％Ｗ席の５ｐｓ−アーゼ（
ハツチ１３４０）の酵素を加えた。第二のフラスコを振
盪浴中で２０℃で７２時間静置した。

２４時間、４８時間及び７２時間に試料を採取した。試
料を濾過し、総糖分を分析し、下記の結果を得た： 静置混合物に５ｐｓ−アーゼを配合すると、糖がほとん
ど直ちに放出される。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明方法の一般的工程図である。 以下余白

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 ｉ、ｓｐｓを適切な条件下で分解して、水性媒体中で蛋
   白質に、ＳＰＳが分解前に相応する条件下に同じ蛋白質
   に結合していたであろうより少ない程度に結合している
   分解生成物を生成することができる、実用しうる形のカ
   ルボヒドラーゼである５ＰＳ−アーゼ製剤を水・註媒体
   中で前記５ＰＳ−アーゼ用基質と接触させることから成
   る多糖類、特に植物細胞壁をカルボヒドラーゼで分解す
   る方法。 ２、分解に伏いて、粗製生物材料から大豆蛋白質及び類
   縁植物性蛋白質以外の生物学的物質を単離又は抽出し、
   その際５ＰＳ−アーゼ製剤は前記生物学的物質を分解し
   ９る酵素を実質的に含まない特許請求の範囲第１項記載
   の方法。 ３．１種以上の反応生成物（これらが所望の最終生成物
   であっても、廃棄生成物であっても）を、酵素処理と同
   時に、又は酵素処理の後に更に処理する特許請求の範囲
   第１項又は第２項記載の方法。 ４、反応生成物のうち１種が発酵可能の糖である場合、
   アルコール発酵により更に処理する特許請求のポ１）曲
   筆３項記載の方法０