JPS606627B2 - ムラサキ科植物の組織培養方法 - Google Patents
ムラサキ科植物の組織培養方法Info
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- JPS606627B2 JPS606627B2 JP55136769A JP13676980A JPS606627B2 JP S606627 B2 JPS606627 B2 JP S606627B2 JP 55136769 A JP55136769 A JP 55136769A JP 13676980 A JP13676980 A JP 13676980A JP S606627 B2 JPS606627 B2 JP S606627B2
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- Japan
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- plants
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- agar
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Description
【発明の詳細な説明】
この発明はシコニン等のナフトキノン系の色素を含有す
るムラサキ科の植物の組織培養法に関する。
るムラサキ科の植物の組織培養法に関する。
さらに詳しくは特定の成分を含有する液体培地を使用す
ることにより、ムラサキ科の植物を効率よく組織培養す
る方法に関する。ムラサキ科の植物であるムラサキの根
には式（Ｒ＝ＯＨ、ＯＣＯＣ＆など）で示されるシコニ
ン（Ｒ＝ＯＨ）等のナフトキノン系の化合物が含まれて
おり、従来から「紫根」と呼ばれ漢方薬に用いられてい
る。
ることにより、ムラサキ科の植物を効率よく組織培養す
る方法に関する。ムラサキ科の植物であるムラサキの根
には式（Ｒ＝ＯＨ、ＯＣＯＣ＆など）で示されるシコニ
ン（Ｒ＝ＯＨ）等のナフトキノン系の化合物が含まれて
おり、従来から「紫根」と呼ばれ漢方薬に用いられてい
る。
すなわちゴマ油等の油脂によって紫根からシコニンその
他の化合物を抽出して得られる軟膏は、紫雲管と呼ばれ
各種皮膚疾患、功湯、火傷、痔疾等の症状に用いられ、
抗炎症作用、肉芽形成促進作用等であることが知られて
いる。しかしながら紫根から抽出できるシコニン等の薬
効成分は徴量であり、またムラサキの栽培には時間がか
かり、自然環境や天候にも左右される等の問題があり、
その安定供給が危ぶまれている。
他の化合物を抽出して得られる軟膏は、紫雲管と呼ばれ
各種皮膚疾患、功湯、火傷、痔疾等の症状に用いられ、
抗炎症作用、肉芽形成促進作用等であることが知られて
いる。しかしながら紫根から抽出できるシコニン等の薬
効成分は徴量であり、またムラサキの栽培には時間がか
かり、自然環境や天候にも左右される等の問題があり、
その安定供給が危ぶまれている。
そこで本発明者らは大量生産に適している液体培地を用
い．て同様にカルスを生育させる方法を検討し、まずリ
ンスマィャ−・スクーグの培地に寒天を添加することな
く、液体堵地の形態でムラサキの組織培養に使用したが
、カルスはある程度増殖するものの、シコニン等の色素
生成量は少量であり、また生成量のバラッキが大きく、
安定した収量を確保することができなかった。本発明者
らはムラサキ科の植物の組織培養に適し、かつシコニン
等のナフトキノン系化合物が多量に生成する液体塔地に
ついて更に検討を重ねた結果、培地中に特定の成分を添
加することにより、増殖が速やかに行なわれ、ナフトキ
ノン系化合物が多量に生成し、その生成量のバラッキも
少なく、安定した生産を確実に行うことができることを
見出し、この発明を完成するに至った。
い．て同様にカルスを生育させる方法を検討し、まずリ
ンスマィャ−・スクーグの培地に寒天を添加することな
く、液体堵地の形態でムラサキの組織培養に使用したが
、カルスはある程度増殖するものの、シコニン等の色素
生成量は少量であり、また生成量のバラッキが大きく、
安定した収量を確保することができなかった。本発明者
らはムラサキ科の植物の組織培養に適し、かつシコニン
等のナフトキノン系化合物が多量に生成する液体塔地に
ついて更に検討を重ねた結果、培地中に特定の成分を添
加することにより、増殖が速やかに行なわれ、ナフトキ
ノン系化合物が多量に生成し、その生成量のバラッキも
少なく、安定した生産を確実に行うことができることを
見出し、この発明を完成するに至った。
すなわち、この発明は寒天を含有する液体塔地を用いる
ことを特徴とするムラサキ科に属する植物の組織培養方
法に関する。この発明が適用される植物は、ムラサキ科
に属する植物であり、とくにムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐ
ｅｒｍｕｍ ｅｒれｈｒｏｒｈｉｚｏｎＳｉｅｂ．ｅｔ
Ｚｕｃｃ．）が好適に使用される。
ことを特徴とするムラサキ科に属する植物の組織培養方
法に関する。この発明が適用される植物は、ムラサキ科
に属する植物であり、とくにムラサキ（Ｌｉｔｈｏｓｐ
ｅｒｍｕｍ ｅｒれｈｒｏｒｈｉｚｏｎＳｉｅｂ．ｅｔ
Ｚｕｃｃ．）が好適に使用される。
使用される液体塔地は寒天が添加された培地であれば通
常植物の組織培養に用いられる培地のにいずれもが使用
できる。
常植物の組織培養に用いられる培地のにいずれもが使用
できる。
例えばホワイトの培地、ムラシゲをスクーグの培地ある
いはリンスマイャー・スク−グの培地、ヘラ−の堵地あ
るいはゴートレの培地およびそれらの故変培地などが用
いられる。添加される寒天は精製されたものが好ましく
、別途殺菌した後に、液体培地に添加される。
いはリンスマイャー・スク−グの培地、ヘラ−の堵地あ
るいはゴートレの培地およびそれらの故変培地などが用
いられる。添加される寒天は精製されたものが好ましく
、別途殺菌した後に、液体培地に添加される。
寒天の液体培地への添加量は、液体塔地１ムーこ対して
約０．１〜１００夕、とくに約２〜５０夕が好ましい。
０．１タ未満ではシコニン等の色素の生成量が少なくな
り、また１００夕を越えると培地の流動性が悪くなり、
大量生産には望ましくない。
約０．１〜１００夕、とくに約２〜５０夕が好ましい。
０．１タ未満ではシコニン等の色素の生成量が少なくな
り、また１００夕を越えると培地の流動性が悪くなり、
大量生産には望ましくない。
この発明の好適な組織培養方法を例示すると、ムラサキ
科に属する植物の植物体の一部、例えば根、葉、茎、種
子から採取された組織片を殺菌後、リンスマィャー・ス
クーグの寒天固体培地上に暦床して、予めカルス化させ
、次にこのカルスを寒天の添加された液体塔地に投入し
て組織培養が行われる。
科に属する植物の植物体の一部、例えば根、葉、茎、種
子から採取された組織片を殺菌後、リンスマィャー・ス
クーグの寒天固体培地上に暦床して、予めカルス化させ
、次にこのカルスを寒天の添加された液体塔地に投入し
て組織培養が行われる。
この発明の培養中は、必ずしも光は必要ではなく、かえ
って膳所での培養がカルスの色素生成に望ましい。
って膳所での培養がカルスの色素生成に望ましい。
培養温度は約１０〜３０００トとくに約２３〜２５００
が好適である。
が好適である。
１ｏｏ０末満ではシコニン系色素の生成は強く抑制され
、３０００を越えると、同様に抑制される。
、３０００を越えると、同様に抑制される。
この発明によれば、ムラサキ科の植物の細胞・組織を液
体培地で効率よく増殖することができる。
体培地で効率よく増殖することができる。
とくにムラサキの幼植物を用いて組織培養することによ
り、シコニン等のナフトキノン系の色素及びその他の薬
効成分を有するカルスを得ることが可能である。またこ
の発明で使用される培地は、液体であり、生成したカル
スを渚地から分離するにはデカンテーション、炉過等の
簡便な操作を採用することができ、カルスからシコニン
等の有効成分を抽出する方法としては、従来から紫根の
抽出に用いられている方法を採用することができる。
り、シコニン等のナフトキノン系の色素及びその他の薬
効成分を有するカルスを得ることが可能である。またこ
の発明で使用される培地は、液体であり、生成したカル
スを渚地から分離するにはデカンテーション、炉過等の
簡便な操作を採用することができ、カルスからシコニン
等の有効成分を抽出する方法としては、従来から紫根の
抽出に用いられている方法を採用することができる。
以下この発明を実施例により示す。
実施例１〜７及び比較例
この実施例にはリンスマィャ−’スクーグの培地（ただ
しサツカロース３０多′夕、インドール酢酸ｌＡＭ「
カィネチン１０りＭを含む）を基本培地として用いる。
しサツカロース３０多′夕、インドール酢酸ｌＡＭ「
カィネチン１０りＭを含む）を基本培地として用いる。
この基本培地を予め滅菌するため、１２０００で２０分
間加熱し、自然冷却後その３０のとを同様にオ−トクレ
ーブ滅菌した寒天粉末１５の９〜１５００の９を含む１
００のとェルレンマイャーフラスコに分注した。この寒
天を加えた液体培地に、上記の基本堵地を用いて予めけ
ん濁培養したムラサキの培養細胞を前述のフラスコ１本
あたり約０．２タ植種し、培養温度２５二○、暗黒下、
回転数１０仇ｐｍの往復式振とう機上で３週間培養を実
施した。培養終了後収穫した全細胞の重量は、炉取した
細胞と寒天の混合物から添加した寒天量に相当する重量
を差し引いて求めた。培養細胞中に生成されたシコニン
系化合物の抽出は、収穫した新鮮細胞に、フラスコ１本
あたりクロロホルム３０の‘と適当量の海砂を加えて乳
鉢をすりつぶし、一夜放置後、抽出液を炉別、残澄にさ
らにクロロホルム３０の‘を加えて一夜抽出、次いで１
回目と２回目の抽出液を合わせ、無水硫酸マグネシウム
によって脱水後、減圧濃縮して一定とした。この０．０
１〜０．０５の‘を試験管にとり、溶媒を留去して後２
．５％ＫＯＨを５地加え、数分間振とうする。この液の
吸光度を６２かのの波長で測定し「別にシコニンを用い
て同様の方法で作成した検量線から試料中に含有される
シコニン及びシコニン誘導体の総含量をシコニソとして
計算した。なお含量は培養フラスコ５個から得られた測
定値の平均値で表わした。この実験結果を表１に示す。
表１の結果から、液内培養したムラサキの培養細胞のシ
コニン系化合物の生成量は液体塔地への寒天の添加によ
り著しく増加し、寒天添加量が２％のときは寒天無添加
の対照区に比べフラスコあたりのシコニン収量が９．４
倍に増加することがわかつた。表１
間加熱し、自然冷却後その３０のとを同様にオ−トクレ
ーブ滅菌した寒天粉末１５の９〜１５００の９を含む１
００のとェルレンマイャーフラスコに分注した。この寒
天を加えた液体培地に、上記の基本堵地を用いて予めけ
ん濁培養したムラサキの培養細胞を前述のフラスコ１本
あたり約０．２タ植種し、培養温度２５二○、暗黒下、
回転数１０仇ｐｍの往復式振とう機上で３週間培養を実
施した。培養終了後収穫した全細胞の重量は、炉取した
細胞と寒天の混合物から添加した寒天量に相当する重量
を差し引いて求めた。培養細胞中に生成されたシコニン
系化合物の抽出は、収穫した新鮮細胞に、フラスコ１本
あたりクロロホルム３０の‘と適当量の海砂を加えて乳
鉢をすりつぶし、一夜放置後、抽出液を炉別、残澄にさ
らにクロロホルム３０の‘を加えて一夜抽出、次いで１
回目と２回目の抽出液を合わせ、無水硫酸マグネシウム
によって脱水後、減圧濃縮して一定とした。この０．０
１〜０．０５の‘を試験管にとり、溶媒を留去して後２
．５％ＫＯＨを５地加え、数分間振とうする。この液の
吸光度を６２かのの波長で測定し「別にシコニンを用い
て同様の方法で作成した検量線から試料中に含有される
シコニン及びシコニン誘導体の総含量をシコニソとして
計算した。なお含量は培養フラスコ５個から得られた測
定値の平均値で表わした。この実験結果を表１に示す。
表１の結果から、液内培養したムラサキの培養細胞のシ
コニン系化合物の生成量は液体塔地への寒天の添加によ
り著しく増加し、寒天添加量が２％のときは寒天無添加
の対照区に比べフラスコあたりのシコニン収量が９．４
倍に増加することがわかつた。表１
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 寒天を含有する液体培地を用いることを特徴とする
ムラサキ科に属する植物の組織培養方法。 ２ 液体培地が、液体培地１ｌに対して寒天を０．１〜
１００ｇ添加してなる液体培地であることを特徴とする
特許請求の範囲第１項記載の組織培養方法。 ３ ムラサキ科の植物が、ムラサキ （Ｌｉｔｈｏｓｐｅｒｍｕｍ ｅｒｙｔｈｒｏｒｈｉｚ
ｏｎ Ｓｉｅｂ．ｅｔ Ｚｕｃｃ．）であることを特徴
とする特許請求の範囲第１項または第２項記載の組織培
養方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55136769A JPS606627B2 (ja) | 1980-10-02 | 1980-10-02 | ムラサキ科植物の組織培養方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55136769A JPS606627B2 (ja) | 1980-10-02 | 1980-10-02 | ムラサキ科植物の組織培養方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5763081A JPS5763081A (en) | 1982-04-16 |
| JPS606627B2 true JPS606627B2 (ja) | 1985-02-19 |
Family
ID=15183076
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55136769A Expired JPS606627B2 (ja) | 1980-10-02 | 1980-10-02 | ムラサキ科植物の組織培養方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS606627B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0071999B1 (en) * | 1981-08-11 | 1986-03-26 | Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. | Method for producing secondary metabolites of plants |
-
1980
- 1980-10-02 JP JP55136769A patent/JPS606627B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5763081A (en) | 1982-04-16 |
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