JPS60207590A - 静菌物質ｇｉｆ−１及びその製造法 - Google Patents
静菌物質ｇｉｆ−１及びその製造法Info
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- JPS60207590A JPS60207590A JP59062222A JP6222284A JPS60207590A JP S60207590 A JPS60207590 A JP S60207590A JP 59062222 A JP59062222 A JP 59062222A JP 6222284 A JP6222284 A JP 6222284A JP S60207590 A JPS60207590 A JP S60207590A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は静菌物質ＧＩＦ−１及びその製造法に関するも
のである。
のである。
本発明者らは、昆虫寄生菌群微生物を取扱中たまたま昆
虫寄生菌群微生物を静菌させる細菌の存在を知り、該細
菌を検索したところバチルス・セレウスに属する細菌で
おることを確認し、更に該細菌の生産する静菌物質につ
いて研究したところ、該物質が新規物質であることを確
認し、これをＧＩＦ−１と命名し、本発明を完成するに
到った。
虫寄生菌群微生物を静菌させる細菌の存在を知り、該細
菌を検索したところバチルス・セレウスに属する細菌で
おることを確認し、更に該細菌の生産する静菌物質につ
いて研究したところ、該物質が新規物質であることを確
認し、これをＧＩＦ−１と命名し、本発明を完成するに
到った。
本発明で使用する歯はＧＩＦ−１を生産するものであれ
ばいずれでもよいが、例示としてはＢａｃｉｌｌｕｓ
ｅｅｒｅｕｓ ＢＷかあけられる。Ｂａｃｉｌｌｕｓｃ
ｅｒｅｕ＠８Ｗは新たに分離された新鉋抹であり、微工
研にＦＥＲＭ Ｐ−７２４２として寄託され、また菌学
的性質の概要は次の通シである。
ばいずれでもよいが、例示としてはＢａｃｉｌｌｕｓ
ｅｅｒｅｕｓ ＢＷかあけられる。Ｂａｃｉｌｌｕｓｃ
ｅｒｅｕ＠８Ｗは新たに分離された新鉋抹であり、微工
研にＦＥＲＭ Ｐ−７２４２として寄託され、また菌学
的性質の概要は次の通シである。
ダラム染色 十
胞子染色 」−
Ｖ−Ｐｔｅｓｔ＋
カタラーゼテスト ＋
オキシダーゼテスト ＋
５０℃における生育 −
熱耐性テスト（８０℃６０分）＋（生育）Ｅｇｇ−Ｙｏ
ｌｋ ｒｅａｃｔｉｏｎ ＋バチルス・セレウスＳＷな
どは生Ｈする適宜の培地で培養される。培地としては次
の組成のものか例示される。
ｌｋ ｒｅａｃｔｉｏｎ ＋バチルス・セレウスＳＷな
どは生Ｈする適宜の培地で培養される。培地としては次
の組成のものか例示される。
（培地１）
ポリはプトン ６ ％
イースト・エキストラクト ０．５チ
頓ａｃＡ Ｏ，５チ
脱イオン水 ９６ｔＩｂ
（ｐｉ（＝７．０）
（Ｌ培地）
パクト・トリプトン １ チ
イースト・エキストラクト ０．５チ
ＮａＣ１α５チ
（ｐｉ（＝′ｌＱ）
（ＭＹ培地）
ラクトース １％
ポリはゾトン ０．５チ
イースト・エキストラクト ０．３％
マルト・エキストラクト ０．３％
（０，０５Ｍリン酸バッファーによシー＝７．０に調整
） また、これら培地以外でも、炭素源、望素源、微量栄養
素を適宜含有した細菌培地等が有効に使用される。
） また、これら培地以外でも、炭素源、望素源、微量栄養
素を適宜含有した細菌培地等が有効に使用される。
培養は２０〜４０℃、好ましくは２５〜３０℃で２〜５
日間振とう培養、通気培養、静置培養など好気的に培養
される。
日間振とう培養、通気培養、静置培養など好気的に培養
される。
得られた培養液は７，５００ ｒｐｍＸｌ ０分の遠心
分離により菌体が分離される。
分離により菌体が分離される。
この培養ろ液は、好ましくは、更に濃縮される。
得られた培養ろ液に最終１チになるように塩化カルシウ
ムを添加し、生じる沈澱を２．５００ ｒｐｍＸ１０分
の遠心分離により取得し、得られた沈殿性１００ｍＭＥ
ＤＴＡ−０，０５Ｍ）リスーＨＣｔバッファー（ｌｌｌ
Ｈ８，０）Ｋ溶解し、これをα０５Ｍ燐酸緩衝液（…＝
７．０）に対して透析し、内液に最終８０チになるよう
にエタノールを加えた。
ムを添加し、生じる沈澱を２．５００ ｒｐｍＸ１０分
の遠心分離により取得し、得られた沈殿性１００ｍＭＥ
ＤＴＡ−０，０５Ｍ）リスーＨＣｔバッファー（ｌｌｌ
Ｈ８，０）Ｋ溶解し、これをα０５Ｍ燐酸緩衝液（…＝
７．０）に対して透析し、内液に最終８０チになるよう
にエタノールを加えた。
沈澱物を除去し、得られた上澄液を真空乾燥し、脱イオ
ン水に溶解し、塩酸を加え、ｐＨ５に調整し、沈澱物を
生成させた。
ン水に溶解し、塩酸を加え、ｐＨ５に調整し、沈澱物を
生成させた。
得られた沈澱物を０．０５ Ｍ ＮａＨＣＯｌに溶解し
、脱イオン水に対し透析し、内液をセファデックスＧ
−１００／Ｈ，０に通した。
、脱イオン水に対し透析し、内液をセファデックスＧ
−１００／Ｈ，０に通した。
通過液に最終８０チになるようにエタノールを加え、２
〜３日４℃に放置すると白色結晶沈澱物が生成する。
〜３日４℃に放置すると白色結晶沈澱物が生成する。
これを真空で乾燥させ、顕微鏡で観察すると、白色柱状
微細結晶を呈する、ＧＩＦ−１が得られた。
微細結晶を呈する、ＧＩＦ−１が得られた。
次に、ＧＩＦ−１の理化学的性質を示す。
１、 分子量：質量分析機による測定で分子量は１０５
７であった。
７であった。
Ｚ 物質の色及び性状：白色柱状微細結晶３、融点：２
１０〜２１５℃で薄茶色に多少収縮し、２６４〜２６９
℃で磯茶色となり、２４０〜２４５℃で炭化する。
１０〜２１５℃で薄茶色に多少収縮し、２６４〜２６９
℃で磯茶色となり、２４０〜２４５℃で炭化する。
４、紫外線吸収スペクトル二本物質２．８チ水溶液の紫
外線吸収スペクトルは第１図に示す通り。
外線吸収スペクトルは第１図に示す通り。
５、赤外線吸収スペクトル：第２図に示す通り。
６、溶剤に対する溶解性：水、メタノール、エタノール
、ｔ−ブタノールに可溶。
、ｔ−ブタノールに可溶。
ｎ−ブタノール、アセトン、エチルアセテート、エーテ
ル、クロロホルム、ベンゼン、４塩化炭素、石油エーテ
ルに不溶。
ル、クロロホルム、ベンゼン、４塩化炭素、石油エーテ
ルに不溶。
ｌ 呈色反応：
ＣＢＢテスト ＋
・ｅ・・・・・・・ ・
キサントプロティンテスト ＋
アダム・キーライラッテスト −
エーリツヒテスト −
ピューレットテスト ＋
８、性質の区別二本物質１．４岬／−水でｐＨ＝７．６
である。
である。
９ アミノ酸組成二アミノ酸分析機によるアミノ酸組成
は次の通シである。
は次の通シである。
１０、脂肪酸二本物質は少量の脂肪酸を構成成分とする
。
。
次に、ＧＩＦ−１の抗菌活性を示す。
次の培地を用いて各種微生物に対する抗菌活性をみた。
表１〜４にその結果を示す。
細菌（一般）用培地
肉エキス １０ｔ
ペプトン １０ｆ
ＮａＣＬ ５ を
水 １ｔ
（１））１７．２・）
ミコバクテリウム用培地
グリセロール ｉｏｒ
ポリペプトン １０ｔ
カザミノ酸 ５ｆ
酵母エキス ５ｆ
Ｎａ２ＨＰＯ４ｏ、 ５ を
水 １ｔ
（ｐＨ１７，２）
真菌用培地
ラクトース ｉｏｒ
ポリはプトン ５ｆ
酵母エキス ３を
麦芽エキス ６ｆ
０．０５Ｍ燐酸緩衝液 １ｔ
（ｐＨ７，０）
操作：ミクロタイタープレート上で２７℃ ３〜７日培
養による。
養による。
表１
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ５ｕｂｔｉｌｉａ ＩＡＭ １２０
６ ＞６２５ＩＡＭ１０６９ ＞６２５ ＩＡＭ １１４５ ＞６２５ ＩＡＭ １１６８ ＞６２５ ＩＡＭ １１６９ ＞６２５ ＩＡＭ １２０７ ＞６２５ ＩＡＭ １２１２ ＞６２５ ＩＡＭ １２１３ ＞６２５ ＩＡＭ １２５９ ＞６２５ １ＡＭ １２６０ ＞６２５ ＩＡＭ １１０６０ ＞６２５ ＩＡＭ １２０２１ ＞６２５ ＩＡＭ １２１１Ｂ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓＩＡＭ
１１０５４ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｉｘａ ＩＡＭ １２１
０ ＞６２５Ｂａｅｉｌｌｕ＋ｓ ｃｅｒｅｕｓ ＩＡ
Ｍ １０２９ ＞６２５ＩＡＭ １０７２ ＞６２５ ＩＡＭ １１１０ ＞６２５ ＩＡＦｉ！ １６５６ ＞６２５ ＩＡＭ １７２９ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ｌＡｌ１！
１１９４ ）６２５Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒ
ｉｕｍＩＡＭ１１６６ １９ 表２ −Ｅ５ｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＩＡＭ １２６
Ｂ ＞６２５ＩＡＭ １０６３ ＞６２５ ８ｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃ＠ｓｅ＠ｎｉＩＡＭ １２
１４２ ＞６２５ Ｐｒｏｔ＠ｕｓ ｖｕｌｇａｒｉａ ＩＡＭ １０２５
＞６２５Ｐｉｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏ
ａａＰＡＯ１＞６２５ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｉ ａｕｒｓ＋ｕ＋５ＮＩ
ＨＪ ２０９Ｐ ＞６２５ Ｍ１ｃｒｏｃｏｃｅｕｓ ｌｕｔｅｕｍ ＩＡＭ １０
５６ ）６２５Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｎｉｃｏｔ
ｉａｎａａＩＡＭ １２！１４２ ＞６２５ Ｎｏｃａｒｄｉａ ｏｐａｃａ ＩＡＭ １２１２３
＞６２５１ ｌ Ｉ ＃ ＡＴＣＣ２８９９６５９ ＃ ｌ ＡＴＣＣ２８９９７１９，５ １〃 ＣＢＳ １５３ １９．５ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｔｈｒｏｍｂｏｉｄｅｓＡ
ＴＣＣ１２５８７３９ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｎａｎｏｄｅｓＣＢ８１５
４ １９５ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｎａｎｏｄｅ＋５ＣＢ８１
８５ １９．５ ＩＦ０４９２８ １９．５ 〃 ＡＴＣＣ１６４９６５９ Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｖｉｒｅｎｓ−ＩＡＭ５０６
１ ５９ Ｍｕｅｏｒ ｒｏｕｘｉａｎｕｍ ＩＡＭ ６１！＋１
７８Ｍｕｃｏｒ ｊａｖａｎｉｃｕａ ＩＡＭ ６０
８７ １５６Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ ｖｅｒｒｕｃａ
ｒｉａＩＡＭ５０６！＋ ７８ ＩＡＭ １２２０７ １９．５ Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ ｃａｓｔａｌｌｉｉＩＡＭ
４９７７ ７Ｂ Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ ＩＡＭ ４９６
７ ５９Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｗｉｎｇｅｉ ＩＡＭ
４９８５ １９５Ｋｌｏｓｅｋｅｒａ ａｆｒｉｃａｎ
ａＩＡＭ ４９８４ ５９ ８ａｃｅｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＩ
ＡＭ４１２５ ５９ 次に本発明の実施例を示す。
６ ＞６２５ＩＡＭ１０６９ ＞６２５ ＩＡＭ １１４５ ＞６２５ ＩＡＭ １１６８ ＞６２５ ＩＡＭ １１６９ ＞６２５ ＩＡＭ １２０７ ＞６２５ ＩＡＭ １２１２ ＞６２５ ＩＡＭ １２１３ ＞６２５ ＩＡＭ １２５９ ＞６２５ １ＡＭ １２６０ ＞６２５ ＩＡＭ １１０６０ ＞６２５ ＩＡＭ １２０２１ ＞６２５ ＩＡＭ １２１１Ｂ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓＩＡＭ
１１０５４ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｌｙｍｉｘａ ＩＡＭ １２１
０ ＞６２５Ｂａｅｉｌｌｕ＋ｓ ｃｅｒｅｕｓ ＩＡ
Ｍ １０２９ ＞６２５ＩＡＭ １０７２ ＞６２５ ＩＡＭ １１１０ ＞６２５ ＩＡＦｉ！ １６５６ ＞６２５ ＩＡＭ １７２９ ＞６２５ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａｇｕｌａｎｓ ｌＡｌ１！
１１９４ ）６２５Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒ
ｉｕｍＩＡＭ１１６６ １９ 表２ −Ｅ５ｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＩＡＭ １２６
Ｂ ＞６２５ＩＡＭ １０６３ ＞６２５ ８ｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃ＠ｓｅ＠ｎｉＩＡＭ １２
１４２ ＞６２５ Ｐｒｏｔ＠ｕｓ ｖｕｌｇａｒｉａ ＩＡＭ １０２５
＞６２５Ｐｉｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏ
ａａＰＡＯ１＞６２５ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｉ ａｕｒｓ＋ｕ＋５ＮＩ
ＨＪ ２０９Ｐ ＞６２５ Ｍ１ｃｒｏｃｏｃｅｕｓ ｌｕｔｅｕｍ ＩＡＭ １０
５６ ）６２５Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ ｎｉｃｏｔ
ｉａｎａａＩＡＭ １２！１４２ ＞６２５ Ｎｏｃａｒｄｉａ ｏｐａｃａ ＩＡＭ １２１２３
＞６２５１ ｌ Ｉ ＃ ＡＴＣＣ２８９９６５９ ＃ ｌ ＡＴＣＣ２８９９７１９，５ １〃 ＣＢＳ １５３ １９．５ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｔｈｒｏｍｂｏｉｄｅｓＡ
ＴＣＣ１２５８７３９ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｎａｎｏｄｅｓＣＢ８１５
４ １９５ Ｃｏｎｉｄｉｏｂｏｌｕｓ ｎａｎｏｄｅ＋５ＣＢ８１
８５ １９．５ ＩＦ０４９２８ １９．５ 〃 ＡＴＣＣ１６４９６５９ Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ ｖｉｒｅｎｓ−ＩＡＭ５０６
１ ５９ Ｍｕｅｏｒ ｒｏｕｘｉａｎｕｍ ＩＡＭ ６１！＋１
７８Ｍｕｃｏｒ ｊａｖａｎｉｃｕａ ＩＡＭ ６０
８７ １５６Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ ｖｅｒｒｕｃａ
ｒｉａＩＡＭ５０６！＋ ７８ ＩＡＭ １２２０７ １９．５ Ｄｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓ ｃａｓｔａｌｌｉｉＩＡＭ
４９７７ ７Ｂ Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ａｎｏｍａｌａ ＩＡＭ ４９６
７ ５９Ｈａｎｓｅｎｕｌａ ｗｉｎｇｅｉ ＩＡＭ
４９８５ １９５Ｋｌｏｓｅｋｅｒａ ａｆｒｉｃａｎ
ａＩＡＭ ４９８４ ５９ ８ａｃｅｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＩ
ＡＭ４１２５ ５９ 次に本発明の実施例を示す。
実施例１゜
バチラス・セレウスＳＷ、ＦＥＢＭＰ−７２４２を前記
培地１に接種し、２７℃で３日間振とう培養した。
培地１に接種し、２７℃で３日間振とう培養した。
得られた培養液を乙５００ ｒｐｍＸｌ ０分の遠心分
離を行い、得られた培養ｐ液に最終１チになるように塩
化カルシウムを添加し、２，５００ ｒｐｍ Ｘ１０分
の遠心分離を行い、沈澱物を取得する。得られた沈澱物
は１００ｍＭＥＤＴＡ−０，０５Ｍ）リスーＨＣｔバッ
ファー（−８，０）に溶解し、これを０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐｌ（＝７．０）に対して透析し、内液に最終８
０チになるようにエタノールを加えた。
離を行い、得られた培養ｐ液に最終１チになるように塩
化カルシウムを添加し、２，５００ ｒｐｍ Ｘ１０分
の遠心分離を行い、沈澱物を取得する。得られた沈澱物
は１００ｍＭＥＤＴＡ−０，０５Ｍ）リスーＨＣｔバッ
ファー（−８，０）に溶解し、これを０．０５Ｍ燐酸緩
衝液（ｐｌ（＝７．０）に対して透析し、内液に最終８
０チになるようにエタノールを加えた。
沈澱物を除去し、得られた上澄液を真空乾燥し、脱イオ
ン水に溶解し、塩酸を加え、ｐＩ″Ｉ６に調整し、沈澱
物を生成させた。
ン水に溶解し、塩酸を加え、ｐＩ″Ｉ６に調整し、沈澱
物を生成させた。
得られた沈澱物を０．０５ Ｍ ＮａＨＣＯ３に溶解し
、脱イオン水に対し透析し、内液をセファデックスＧ
−１００／Ｈ，Ｏに通した。
、脱イオン水に対し透析し、内液をセファデックスＧ
−１００／Ｈ，Ｏに通した。
通過液に最終８０チになるようにエタノールを加え、２
〜３日４℃に放置すると白色結晶沈澱物が生成する。
〜３日４℃に放置すると白色結晶沈澱物が生成する。
これを真空で乾燥させ、顕微鏡で観察すると、白色柱状
微細結晶を呈する、ＧＩＦ−１が得られた。
微細結晶を呈する、ＧＩＦ−１が得られた。
第１図はＧＩＦ−１の紫外線吸収スはクトルを示す図で
、第２図はＧＩＦ−１の赤外線吸収スはクトルを示す図
である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男
、第２図はＧＩＦ−１の赤外線吸収スはクトルを示す図
である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男
Claims (2)
- （１）下記の理化学的性質を有する静菌物質ＧＩＦ−１
゜ １、分子量：質量分析機による測定で分子量は１０５７
であった。 ２、物質の色及び性状：白色柱状微細結晶３、融点：２
１０〜２１５℃で薄茶色に多少収縮し、２６４〜２３９
℃で濃茶色となシ、２４０〜２４５℃で炭化する。 ４、紫外線吸収スペクトル二本物質２．８％水溶液の紫
外線吸収スペクトルは第１図に示す通り。 ５、赤外線吸収スペクトル：第２図に示す通シ。 ６ 溶剤に対する溶解性：水、メタノール、エタノール
、ｔ−ブタノールに可溶。 ｎ−ブタノール、アセトン、エチルアセテート、エーテ
ル、クロロホルム、ベンゼン、４塩化炭素、石油エーテ
ルに不溶。 ｌ 呈色反応： ＣＢＢテスト ＋ ・・・・・・・・・ ・ キサントプロティンテスト ＋ アダム争キーウイツツテスト − エーリツヒテスト − ピューレットテスト ＋ ８、性質の区別二本物質１．４ Ｗ ／ ｄ水で−＝１
６である。 ９ アミノ酸組成二アミノ酸分析機によるアミノ酸組成
は次の通りである。 １０、脂肪酸二本物質は少量の脂肪酸を構成成分とする
。 - （２）バチルス属に属するＧＩＦ−１生産菌を培養し、
ＧＩＦ−１を採取することを特徴とする静菌物質ＧＩＦ
−１の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59062222A JPS60207590A (ja) | 1984-03-31 | 1984-03-31 | 静菌物質ｇｉｆ−１及びその製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59062222A JPS60207590A (ja) | 1984-03-31 | 1984-03-31 | 静菌物質ｇｉｆ−１及びその製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60207590A true JPS60207590A (ja) | 1985-10-19 |
Family
ID=13193905
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59062222A Pending JPS60207590A (ja) | 1984-03-31 | 1984-03-31 | 静菌物質ｇｉｆ−１及びその製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60207590A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0193608A1 (en) * | 1984-04-25 | 1986-09-10 | Kibun Co. Ltd. | Gif-2 and its preparation |
-
1984
- 1984-03-31 JP JP59062222A patent/JPS60207590A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0193608A1 (en) * | 1984-04-25 | 1986-09-10 | Kibun Co. Ltd. | Gif-2 and its preparation |
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