JPS60207058A - 抗体又は抗原不溶化担体 - Google Patents
抗体又は抗原不溶化担体Info
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- JPS60207058A JPS60207058A JP6499184A JP6499184A JPS60207058A JP S60207058 A JPS60207058 A JP S60207058A JP 6499184 A JP6499184 A JP 6499184A JP 6499184 A JP6499184 A JP 6499184A JP S60207058 A JPS60207058 A JP S60207058A
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- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
この発明は、免疫測定用の抗体又は抗原不溶化担体に関
する。さらに詳しくは抗体又は抗原を小球もしくは小片
状の担体に固定化してなる酵素免疫測定法（以下、Ｅ工
Ａ ）に適した抗体又は抗原不溶化担体に関する。
する。さらに詳しくは抗体又は抗原を小球もしくは小片
状の担体に固定化してなる酵素免疫測定法（以下、Ｅ工
Ａ ）に適した抗体又は抗原不溶化担体に関する。
（ロ）従来技術
抗原−抗体反応を利用した免疫測定法として近年ＥＩＡ
が行なわれるようになっている。そしてかかるＥ工Ａに
おいて抗体又は抗原をガラス小球、ガラス小片、シリコ
ンディスク、合成樹脂小球等に固定化してなる抗体又は
抗原不溶化担体が用いられるようになっておりインスリ
ン、癌胎児性抗原、ＨＢｅ抗原、ＨＢｅ抗体等のμｍチ
ン測定用のキットに多用されている。
が行なわれるようになっている。そしてかかるＥ工Ａに
おいて抗体又は抗原をガラス小球、ガラス小片、シリコ
ンディスク、合成樹脂小球等に固定化してなる抗体又は
抗原不溶化担体が用いられるようになっておりインスリ
ン、癌胎児性抗原、ＨＢｅ抗原、ＨＢｅ抗体等のμｍチ
ン測定用のキットに多用されている。
かかる不溶化担体上用いた測定線、一般的に、免疫反応
用測定液を注入した所定の反応容器内に、■被検体と抗
体不溶化担体とを加えて第１段の抗原−抗体反応を行な
わせた後所定の酵素で標識した抗体をさらに加えて第２
段の抗原−抗体反応を行なわせ次いて反応後の担体を充
分洗浄してＢ／Ｆ分離した後、別に用意した酵素反応用
容器内に移してそこで酵素活性を測定する方法（非競合
サンドインチ法）や、■被検体と抗体又は抗原不溶化担
体との反応の際に所定の酵素でｌ！識した抗原又は抗体
を存在せしめ次いで反応後の担体を充分洗浄してＢ／Ｆ
分離した後、別に用意した酵素反応用客器内に移してそ
こで酵素活性を測定する方法（競合法）によシ行なわ昨
ている。
用測定液を注入した所定の反応容器内に、■被検体と抗
体不溶化担体とを加えて第１段の抗原−抗体反応を行な
わせた後所定の酵素で標識した抗体をさらに加えて第２
段の抗原−抗体反応を行なわせ次いて反応後の担体を充
分洗浄してＢ／Ｆ分離した後、別に用意した酵素反応用
容器内に移してそこで酵素活性を測定する方法（非競合
サンドインチ法）や、■被検体と抗体又は抗原不溶化担
体との反応の際に所定の酵素でｌ！識した抗原又は抗体
を存在せしめ次いで反応後の担体を充分洗浄してＢ／Ｆ
分離した後、別に用意した酵素反応用客器内に移してそ
こで酵素活性を測定する方法（競合法）によシ行なわ昨
ている。
しかしながら、かような測定において性、上記のごとく
抗原−抗体反応させた担体をＢ／Ｆ分離した後、別の酵
素反応客器内に移動させる必要があり、しかも従来この
処理は反応容器を傾斜させたシピンセットを用いたシす
る手作業金要するものであるため測定操作に多くの時間
と労力がかかるという不都合があった。
抗原−抗体反応させた担体をＢ／Ｆ分離した後、別の酵
素反応客器内に移動させる必要があり、しかも従来この
処理は反応容器を傾斜させたシピンセットを用いたシす
る手作業金要するものであるため測定操作に多くの時間
と労力がかかるという不都合があった。
この点に関し、最近不溶化担体ことに小球状の不溶化担
体の移動を自動化するため小′Ｒを真空吸着して移動さ
せる方法や装置も提案されているが、吸着方式に訃いて
は吸着が必ずしも充分に行なわれなｉ場合があると共に
動力に真空ポンプを必要とする点不利でＴｏ〕、また新
生児フレテン症のマススクリーニング等のように微量の
検体（血液等）が付着し九口紙小片を免疫反応用測定液
中に混入して被検体を導入する方法においては、この残
存口紙片と担体とを区別して吸着できず、酵素反応用賽
器内にこの口紙小片が持ち込まれてしまう等の不都合が
あった。
体の移動を自動化するため小′Ｒを真空吸着して移動さ
せる方法や装置も提案されているが、吸着方式に訃いて
は吸着が必ずしも充分に行なわれなｉ場合があると共に
動力に真空ポンプを必要とする点不利でＴｏ〕、また新
生児フレテン症のマススクリーニング等のように微量の
検体（血液等）が付着し九口紙小片を免疫反応用測定液
中に混入して被検体を導入する方法においては、この残
存口紙片と担体とを区別して吸着できず、酵素反応用賽
器内にこの口紙小片が持ち込まれてしまう等の不都合が
あった。
（７９目的
この発明線、かような状況に鑑みなされたものであシ、
反応容器間の分離移動を簡便に行なうことができる抗体
又は抗原不溶化担体を提供することを一つの目的とする
ものである。
反応容器間の分離移動を簡便に行なうことができる抗体
又は抗原不溶化担体を提供することを一つの目的とする
ものである。
←）構成
かくしてこの発明によれに、抗体又は抗原を小球もしく
は小片状の担体に固定化してなる免疫測定用の抗体又は
抗原不溶化担体において、上記小球もしくは小片状の担
体内に強磁性体を封入したことを特徴とする抗体又は抗
原不溶化担体が提供される。
は小片状の担体に固定化してなる免疫測定用の抗体又は
抗原不溶化担体において、上記小球もしくは小片状の担
体内に強磁性体を封入したことを特徴とする抗体又は抗
原不溶化担体が提供される。
この発明における強磁性体としてｔｉ鉄、コバμト、ニ
ッケル等の金属や永久磁石材料が挙げられ、通常、磁化
していない金属を用いるのが、分離・脱離の制御の点で
好ましい。これら社粉末状で封入されていてもよいが通
常小塊状のものを用いるのが製造上好ましい。かかる小
塊状の強磁性体としては直径２〜４ｍ＋程度の粒状のも
のが適切である。
ッケル等の金属や永久磁石材料が挙げられ、通常、磁化
していない金属を用いるのが、分離・脱離の制御の点で
好ましい。これら社粉末状で封入されていてもよいが通
常小塊状のものを用いるのが製造上好ましい。かかる小
塊状の強磁性体としては直径２〜４ｍ＋程度の粒状のも
のが適切である。
この強磁性体の外周に所望の材質からなる担体層を被覆
した後この表面に所望の抗体又拡抗原を固定化すること
によシこの発明の抗体又祉抗原不溶化担体が得られる。
した後この表面に所望の抗体又拡抗原を固定化すること
によシこの発明の抗体又祉抗原不溶化担体が得られる。
被覆する担体層の材質として唸、従来の抗体又は抗原不
溶化担体に用いられたものと同じものでよく、例えは、
ガラスや合成樹脂が挙げられる。ただしこれ以外にも抗
体又は抗原を固定できかつ水性媒体中で安定な固体なら
ば使用可能である。これらのうち合成樹脂を用いるのが
好ましく具体例としてはポリスチレンが挙げられる。
溶化担体に用いられたものと同じものでよく、例えは、
ガラスや合成樹脂が挙げられる。ただしこれ以外にも抗
体又は抗原を固定できかつ水性媒体中で安定な固体なら
ば使用可能である。これらのうち合成樹脂を用いるのが
好ましく具体例としてはポリスチレンが挙げられる。
被覆方法は、ガラス管用いる際には、溶融ガラスを所定
の成形型内に流し込むと共にこの内に上記強磁性体を導
入し徐冷する方法や強磁性体の外周に低Ｍア〃コキシシ
フンの含水低級アルコール溶液を塗布し乾燥させてゲル
状膜を形成しこの処理を複数回くり返して所定厚みの水
酸化シラン系ガラス様ゲル膜管形成させたりこれをさら
に加熱処理して酸化物ガラス膜に変換させる方法等が挙
けられる。一方合成樹脂の場合にも溶融樹脂を成形製内
に流し込むと共に強磁性体を導入して成形する方法や溶
液塗布法によシ強磁性体の外周に樹脂層を成長させる方
法等が挙げられる。
の成形型内に流し込むと共にこの内に上記強磁性体を導
入し徐冷する方法や強磁性体の外周に低Ｍア〃コキシシ
フンの含水低級アルコール溶液を塗布し乾燥させてゲル
状膜を形成しこの処理を複数回くり返して所定厚みの水
酸化シラン系ガラス様ゲル膜管形成させたりこれをさら
に加熱処理して酸化物ガラス膜に変換させる方法等が挙
けられる。一方合成樹脂の場合にも溶融樹脂を成形製内
に流し込むと共に強磁性体を導入して成形する方法や溶
液塗布法によシ強磁性体の外周に樹脂層を成長させる方
法等が挙げられる。
このようにして得られる強磁性体封入担体の形状は小球
状又は小片状である。通常、表面積の点で小球状とする
のが好ましく、例えばその直径は３〜６■程度が適当で
ある。
状又は小片状である。通常、表面積の点で小球状とする
のが好ましく、例えばその直径は３〜６■程度が適当で
ある。
上記担体表面への抗体又社抗原の固定化方法自体社当該
分野で公知の方法によシ行なうことができる。この固定
化は主として化学結合によるものと物理的吸着によるも
のとに大別される。化学結合による方法の代表例として
は、表面ことにガラス素材の表面に酸又はアμカリ処理
により水酸基を導入した後γ−アミノグロビルトリエト
キシシフンのごときシランカップリング剤を反応させ次
いでグルタルアルデヒドを用いて所望の抗体又は抗原を
担体に化学結合させる方法が挙げられ、物理吸着による
方法としては所望の抗体又は抗原の溶液中に強磁性体封
入担体を浸漬し長時間放置する方法が挙げられる。いず
れの方法においても担体表面を粗面化しておくことが好
ましく、場合によっては担体層形成時に多数の小突起を
形成した形状とすることもできる。ことにかような小突
起状の担体を用いた抗体又は抗原不溶化担体の使用時の
移動は真空吸着・では困難であるが、この発明によれば
容易に行なうことができる。
分野で公知の方法によシ行なうことができる。この固定
化は主として化学結合によるものと物理的吸着によるも
のとに大別される。化学結合による方法の代表例として
は、表面ことにガラス素材の表面に酸又はアμカリ処理
により水酸基を導入した後γ−アミノグロビルトリエト
キシシフンのごときシランカップリング剤を反応させ次
いでグルタルアルデヒドを用いて所望の抗体又は抗原を
担体に化学結合させる方法が挙げられ、物理吸着による
方法としては所望の抗体又は抗原の溶液中に強磁性体封
入担体を浸漬し長時間放置する方法が挙げられる。いず
れの方法においても担体表面を粗面化しておくことが好
ましく、場合によっては担体層形成時に多数の小突起を
形成した形状とすることもできる。ことにかような小突
起状の担体を用いた抗体又は抗原不溶化担体の使用時の
移動は真空吸着・では困難であるが、この発明によれば
容易に行なうことができる。
固定化する抗体や抗原は当該分野で知られた所望のもの
１に選択すればよく、その具体例としては、抗インスリ
ン抗体、抗ＡＦＰ抗体、抗フェリチン抗体、抗ＣＥＡ抗
体、抗ＴＳＨ抗体、抗ＨＢｅ抗体等やこれに対応する抗
原等が挙げられる。
１に選択すればよく、その具体例としては、抗インスリ
ン抗体、抗ＡＦＰ抗体、抗フェリチン抗体、抗ＣＥＡ抗
体、抗ＴＳＨ抗体、抗ＨＢｅ抗体等やこれに対応する抗
原等が挙げられる。
以下、この発明を実施例によシ説明する。
（ホ）実施例
第１図は、この発明の抗体不溶化担体の具体例を示す切
欠斜視図である。図において抗体不溶化担体（１）は、
ポリスチレンからなる小球状担体（２）の内に鉄材から
なる小球状の強磁性体（３）を封入してなシさらにその
表面に抗インスリン抗体を物理吸着によシ固定化してな
る。この抗体不溶化担体の直径は約５糊でＴｏ）内部に
封入した強磁性体の直径は約２．５ｆｉである。
欠斜視図である。図において抗体不溶化担体（１）は、
ポリスチレンからなる小球状担体（２）の内に鉄材から
なる小球状の強磁性体（３）を封入してなシさらにその
表面に抗インスリン抗体を物理吸着によシ固定化してな
る。この抗体不溶化担体の直径は約５糊でＴｏ）内部に
封入した強磁性体の直径は約２．５ｆｉである。
かかる抗体不溶化担体（１）によるインスリンのに工Ａ
測定について以下説明する。
測定について以下説明する。
まず、第２図Ａのごとく抗体不溶化担体（１）を免疫反
応用容器（４）内で被検体次いでべ〃オキシダーゼ標識
体インスリン抗体と反応させて２段階の免疫反応を行な
わせた後、反応溶液（５〕の除去及び担体（１）の洗浄
により第２図Ｂのどと（Ｂ／Ｆ分離を行なう。次いでこ
の担体（１） を酵素反応用容器（））に移動するが、
この際電磁石（６）をＯＮした状態で挿入することによ
り第２図Ｃ，Ｄ、Ｅのように電磁石（６）と担体内の強
磁性体（３）との吸着作用により簡便に担体（１）を取
シ出し、かつ第２図Ｆのごとく電磁石（６）ｉＯＦＦす
ることによシ簡便に担体（１） １ｉ−酵素反応容器（
））内に導入することができる。移動の完了した担体（
１）に酵素反応用溶液（８）が第２図Ｇのように注入さ
れて担体（１）表面に結合した標識酵素（ぺμオキシダ
ーゼ）による酵素反応が行なわれ、この活性が波長４９
２ｎｍの吸光光度の測定にょシ算出され次いで被検体中
のインスリン濃度が算出されることとなる。
応用容器（４）内で被検体次いでべ〃オキシダーゼ標識
体インスリン抗体と反応させて２段階の免疫反応を行な
わせた後、反応溶液（５〕の除去及び担体（１）の洗浄
により第２図Ｂのどと（Ｂ／Ｆ分離を行なう。次いでこ
の担体（１） を酵素反応用容器（））に移動するが、
この際電磁石（６）をＯＮした状態で挿入することによ
り第２図Ｃ，Ｄ、Ｅのように電磁石（６）と担体内の強
磁性体（３）との吸着作用により簡便に担体（１）を取
シ出し、かつ第２図Ｆのごとく電磁石（６）ｉＯＦＦす
ることによシ簡便に担体（１） １ｉ−酵素反応容器（
））内に導入することができる。移動の完了した担体（
１）に酵素反応用溶液（８）が第２図Ｇのように注入さ
れて担体（１）表面に結合した標識酵素（ぺμオキシダ
ーゼ）による酵素反応が行なわれ、この活性が波長４９
２ｎｍの吸光光度の測定にょシ算出され次いで被検体中
のインスリン濃度が算出されることとなる。
従って、免疫反応用容器（４）から酵素反応用容器（ツ
）への担体の分離移動が容器自体を移動や傾斜させるこ
となくしかもピンセット等を用いることなく容器内に挿
入しうる電磁石素子を用いることで、簡便に行なわれる
こととなる。もちろん１容器外部から非接触で担体を分
離移動することもできる。
）への担体の分離移動が容器自体を移動や傾斜させるこ
となくしかもピンセット等を用いることなく容器内に挿
入しうる電磁石素子を用いることで、簡便に行なわれる
こととなる。もちろん１容器外部から非接触で担体を分
離移動することもできる。
（へ）効果
以上述べたようにこの発明の抗体父性抗原不溶化担体に
よれば、Ｅ工Ａの測定操作をよシ簡略化しうるものであ
る。さらにかかる担体を用いた際には、吸着式の移動方
式に比して、担体形状を吸着用ノズル先端に適合化させ
る必要はなく表面積増大のために種々の形状とすること
が可能である。
よれば、Ｅ工Ａの測定操作をよシ簡略化しうるものであ
る。さらにかかる担体を用いた際には、吸着式の移動方
式に比して、担体形状を吸着用ノズル先端に適合化させ
る必要はなく表面積増大のために種々の形状とすること
が可能である。
さらに電磁石による吸着分離機構は簡便に自動化するこ
とができるので、自動Ｅ工Ａ装置用の抗体又は抗原不溶
化担体として今後の用途拡大が期待されるものである。
とができるので、自動Ｅ工Ａ装置用の抗体又は抗原不溶
化担体として今後の用途拡大が期待されるものである。
なお、必要に応じて抗体又は抗原不溶化担体を一測定時
に複数個使用することもでき、この際にも同様に簡便に
分離移動することができる。。
に複数個使用することもでき、この際にも同様に簡便に
分離移動することができる。。
第１図は、この発明の抗体不溶化担体の具体例を示す切
欠斜視図、第２図は、この抗体不溶化担体を用いたＥ工
Ａの操作を示す説明図である。 （１）・・・抗体不溶化担体、 （２）・・・小球状担体、 （３）・・・強磁性体。 ！Ｑ、７’７′、う 代理人 弁理士 野河信太 １１ ；、 １゜
欠斜視図、第２図は、この抗体不溶化担体を用いたＥ工
Ａの操作を示す説明図である。 （１）・・・抗体不溶化担体、 （２）・・・小球状担体、 （３）・・・強磁性体。 ！Ｑ、７’７′、う 代理人 弁理士 野河信太 １１ ；、 １゜
Claims (1)
- （１）抗体又は抗原を小球もしくは小片状の担体に固定
化してなる免疫測定用の抗体又は抗原不溶化担体におい
て、 上記小球もしくは小片状の担体内に強磁性体を封入した
ことを特徴とする抗体又は抗原不溶化担体。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6499184A JPS60207058A (ja) | 1984-03-30 | 1984-03-30 | 抗体又は抗原不溶化担体 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6499184A JPS60207058A (ja) | 1984-03-30 | 1984-03-30 | 抗体又は抗原不溶化担体 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60207058A true JPS60207058A (ja) | 1985-10-18 |
Family
ID=13274029
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6499184A Pending JPS60207058A (ja) | 1984-03-30 | 1984-03-30 | 抗体又は抗原不溶化担体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60207058A (ja) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62133354A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-06-16 | Nitsuteku:Kk | Ｅｉａ分析装置の撹拌装置 |
| JPS6296570U (ja) * | 1985-12-06 | 1987-06-19 | ||
| JPS62102169U (ja) * | 1985-12-18 | 1987-06-29 | ||
| JPS62184354A (ja) * | 1986-02-10 | 1987-08-12 | Nitsuteku:Kk | 抗原一抗体不溶化担体 |
| JPS62286533A (ja) * | 1986-06-03 | 1987-12-12 | Tokuyama Soda Co Ltd | 診断用凝集反応試薬の担体 |
| JPH01502133A (ja) * | 1986-10-14 | 1989-07-27 | セローノ ダイアグノスティクス パートナーズ | 生物学的流体中における抗原又は抗体を測定するための自動分析装置 |
| JPH01273584A (ja) * | 1988-04-26 | 1989-11-01 | Nippon Telegr & Teleph Corp <Ntt> | 検体捕集方法及び捕集装置 |
| WO1993010455A1 (en) * | 1991-11-21 | 1993-05-27 | Cirrus Diagnostics, Inc. | Improved centrifuge vessel for automated solid-phase immunoassay |
| US5439650A (en) * | 1988-12-09 | 1995-08-08 | Seiko Instruments Inc. | Reaction vessel |
| US5698450A (en) * | 1986-10-14 | 1997-12-16 | Ringrose; Anthony | Method for measuring antigens or antibodies in biological fluids |
-
1984
- 1984-03-30 JP JP6499184A patent/JPS60207058A/ja active Pending
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62133354A (ja) * | 1985-12-06 | 1987-06-16 | Nitsuteku:Kk | Ｅｉａ分析装置の撹拌装置 |
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| JPH0528784B2 (ja) * | 1985-12-06 | 1993-04-27 | Nittec Co Ltd | |
| JPS62102169U (ja) * | 1985-12-18 | 1987-06-29 | ||
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| JPS62286533A (ja) * | 1986-06-03 | 1987-12-12 | Tokuyama Soda Co Ltd | 診断用凝集反応試薬の担体 |
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