JPS60160884A - 酵素安定化法 - Google Patents
酵素安定化法Info
- Publication number
- JPS60160884A JPS60160884A JP1504984A JP1504984A JPS60160884A JP S60160884 A JPS60160884 A JP S60160884A JP 1504984 A JP1504984 A JP 1504984A JP 1504984 A JP1504984 A JP 1504984A JP S60160884 A JPS60160884 A JP S60160884A
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- JP
- Japan
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- moles
- stabilization method
- alkyl
- enzyme stabilization
- fatty acid
- Prior art date
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- Pending
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、酵素の安定化法に係るものである。
最近酵素の有効性が注目されて、医薬用、工業用、農業
加工用１食品加工用等の用途をはじめ、家庭用にも用い
られる等、その利用範囲は広範に及んでいる。
加工用１食品加工用等の用途をはじめ、家庭用にも用い
られる等、その利用範囲は広範に及んでいる。
本発明は、酵素、特にアルカリプロテアーゼの安定化に
係るものである。アルカリプロテアーゼは近年洗剤用酵
素として広く用いられており、またその他食品加工、繊
維処理などの工業用酵素として広く用いられている０例
えば、昭和５７年２月３０附工業技術院微生物工業技術
研究所へ国際゛＾’；；ＩＩ；（寄託番号微工研条寄第
９３号）されたバチルス屈ＮＫＳ−２１号菌の類から産
生されるアルカリプロテアーゼＡＰＩ−２１はこれらの
用途において優れた特性を持っており、ＡＰＩ−２１の
性状については特開昭５８−１３４９９０および４、シ
願昭５８−９００８４号に記載されている。
係るものである。アルカリプロテアーゼは近年洗剤用酵
素として広く用いられており、またその他食品加工、繊
維処理などの工業用酵素として広く用いられている０例
えば、昭和５７年２月３０附工業技術院微生物工業技術
研究所へ国際゛＾’；；ＩＩ；（寄託番号微工研条寄第
９３号）されたバチルス屈ＮＫＳ−２１号菌の類から産
生されるアルカリプロテアーゼＡＰＩ−２１はこれらの
用途において優れた特性を持っており、ＡＰＩ−２１の
性状については特開昭５８−１３４９９０および４、シ
願昭５８−９００８４号に記載されている。
本発明者はアルカリプロテアーゼに水溶性カルシウムｊ
ｌ！と非イオン界面活性剤を併用添加することにより、
水溶液中での酵素安定性が著しく向上すること、また造
粒した後の貯蔵安定性および更に種々の成分の混在する
中性乃至アルカリ性溶液中における安定性も著しく向上
することを見出した。
ｌ！と非イオン界面活性剤を併用添加することにより、
水溶液中での酵素安定性が著しく向上すること、また造
粒した後の貯蔵安定性および更に種々の成分の混在する
中性乃至アルカリ性溶液中における安定性も著しく向上
することを見出した。
即ち、本発明においては、水溶性カルシウム３１３０．
１〜２０重量％、および非イオン性界面活性剤０．１〜
６０重量％を上記酵素に添加する。これはそのまま、ま
たは造粒して用いられるが、用いるカルシウム塩として
は水溶性であれば何れのカルシウム塩も用いることが出
来るが、その中から特に好ましいものを例示として示せ
ば、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸二水素カ
ルシウム、硝酸カルシウム、クエン酸カルシウム、グル
コン酸カルシウム、コハク酸カルシウム等を挙げること
が出来る。また非イオン界面活性剤としては、平均炭素
数８〜２０のアルキル基またはアルケニル基を有し、１
〜２０モルのエチレンオキサイドを４１加したポリオキ
シエチレンアルキルまたはアルケニルエーテル、高級脂
肪酸に１〜２０モルのエチレンオキサイドを付加したポ
リオキシエチレン高級脂肪酸エステル、平均炭素数６〜
１８のアルキル基を有し、１〜２０モルのエチレンオキ
サイドをイτ１加したポリオキシエチレンアルキルフェ
ニルエーテル、平均炭素数８〜２０のアルキル基または
アルケニル基を有し、１〜２−０モルのプロピレンオキ
サイドを付加したポリオキシプロピレンアルキルまたは
アルケニルエーテル、高級脂肪酸に１〜２０モルのプロ
ピレンオキサイドを伺加したポリオキシプロピレン高級
脂肪酸エステル、・１１均炭素数８〜２ｏのアルキル基
またはアルケニル基を有し、１〜２０モルのブチレンオ
キサイドをイ＋ｊ加したポリオキシブチレンアルキルま
たはアルケニルエーテル、高級脂肪酸に１〜２０モルの
ブチレンオキサイドを付加したポリオキシブチレン高級
脂肪酸エステル、平均炭素数８〜２０のアルキル基また
はアルケニル基を有し、総和で１〜３０モルのエチレン
オキサイドとプロピレンオキサイドあるいはエチレンオ
キサイドとブチレンオキサイドを付加した非イオン界面
活性剤（エチレンオキサイドとプロピレンオキサイドま
たはブチレンオキサイドとの比は０．１／９．１１〜９
゜９１０．１ ）等を挙げることが出来る。
１〜２０重量％、および非イオン性界面活性剤０．１〜
６０重量％を上記酵素に添加する。これはそのまま、ま
たは造粒して用いられるが、用いるカルシウム塩として
は水溶性であれば何れのカルシウム塩も用いることが出
来るが、その中から特に好ましいものを例示として示せ
ば、塩化カルシウム、硫酸カルシウム、リン酸二水素カ
ルシウム、硝酸カルシウム、クエン酸カルシウム、グル
コン酸カルシウム、コハク酸カルシウム等を挙げること
が出来る。また非イオン界面活性剤としては、平均炭素
数８〜２０のアルキル基またはアルケニル基を有し、１
〜２０モルのエチレンオキサイドを４１加したポリオキ
シエチレンアルキルまたはアルケニルエーテル、高級脂
肪酸に１〜２０モルのエチレンオキサイドを付加したポ
リオキシエチレン高級脂肪酸エステル、平均炭素数６〜
１８のアルキル基を有し、１〜２０モルのエチレンオキ
サイドをイτ１加したポリオキシエチレンアルキルフェ
ニルエーテル、平均炭素数８〜２０のアルキル基または
アルケニル基を有し、１〜２−０モルのプロピレンオキ
サイドを付加したポリオキシプロピレンアルキルまたは
アルケニルエーテル、高級脂肪酸に１〜２０モルのプロ
ピレンオキサイドを伺加したポリオキシプロピレン高級
脂肪酸エステル、・１１均炭素数８〜２ｏのアルキル基
またはアルケニル基を有し、１〜２０モルのブチレンオ
キサイドをイ＋ｊ加したポリオキシブチレンアルキルま
たはアルケニルエーテル、高級脂肪酸に１〜２０モルの
ブチレンオキサイドを付加したポリオキシブチレン高級
脂肪酸エステル、平均炭素数８〜２０のアルキル基また
はアルケニル基を有し、総和で１〜３０モルのエチレン
オキサイドとプロピレンオキサイドあるいはエチレンオ
キサイドとブチレンオキサイドを付加した非イオン界面
活性剤（エチレンオキサイドとプロピレンオキサイドま
たはブチレンオキサイドとの比は０．１／９．１１〜９
゜９１０．１ ）等を挙げることが出来る。
本発明に係わるｉ′１素製剤は、乾燥酵素に上記安定剤
水溶液を添加した組成物として用いられ、通常造粒して
から用いられる。用いる造粒法としては、押出造粒、転
勤造粒、遠心流動造粒、またはスプレィドライヤー決算
任意の方法を用いることが出来る。また場合により、得
られた造粒品にコーティングを施して用いる。
水溶液を添加した組成物として用いられ、通常造粒して
から用いられる。用いる造粒法としては、押出造粒、転
勤造粒、遠心流動造粒、またはスプレィドライヤー決算
任意の方法を用いることが出来る。また場合により、得
られた造粒品にコーティングを施して用いる。
また本発明に係わる酵素製剤は、造粒を施さず上記安定
剤水溶液を添加した組成物として溶液状態で用いること
が出来る。
剤水溶液を添加した組成物として溶液状態で用いること
が出来る。
以下実施例により本発明を説明するが、以下においては
、酵素の安定性に影響を及ぼしその失活を起すことで知
られる、洗剤の主成分である直鎖アルキルベンゼンスル
ホン酸ナトリウム（以下ＬＡｓと呼ぶ）の存在下におけ
る、本発明による酵素の安定化効果を示すものである。
、酵素の安定性に影響を及ぼしその失活を起すことで知
られる、洗剤の主成分である直鎖アルキルベンゼンスル
ホン酸ナトリウム（以下ＬＡｓと呼ぶ）の存在下におけ
る、本発明による酵素の安定化効果を示すものである。
尚本発明は以下の実施例に限定されるものではないこと
は言うまでもない。
は言うまでもない。
実施例 Ｉ
ＬＡＳ（Ｃ−１２アルキル） ３００ ｍｇ／ｌの存在
下においテ＋ ｐＨ１０、温度３０℃にてカルシウム塩
および非イオン界面活性剤の共存下、ＡＰＩ−２１水溶
液をθ 時間および２５時間放置後に酵素活性を常法〔
萩原法（カゼイン・フォリン呈色法）；赤堀四部編「酵
素研究法」第２４ 、２３８ページ（朝会書店、昭和４
５年）〕により測定し、その酵素活性を０時間の活性を
１００とする相対活性をめて安定化効果を算出した。
下においテ＋ ｐＨ１０、温度３０℃にてカルシウム塩
および非イオン界面活性剤の共存下、ＡＰＩ−２１水溶
液をθ 時間および２５時間放置後に酵素活性を常法〔
萩原法（カゼイン・フォリン呈色法）；赤堀四部編「酵
素研究法」第２４ 、２３８ページ（朝会書店、昭和４
５年）〕により測定し、その酵素活性を０時間の活性を
１００とする相対活性をめて安定化効果を算出した。
即ち、ＬＡＳ、Ｃａ＋＋およびまたは非イオン界面活に
１剤をそれぞれＰＨ１０の緩衝溶液にて調製した溶液と
、あらかじめｐＨ１０の緩衝溶液にて調製した１′１２
素溶液を所定部になるように３０℃にて混合し、Ｏまた
は２５ 時間放置後の酵素活性を測定して、第１表の結
果を得た。
１剤をそれぞれＰＨ１０の緩衝溶液にて調製した溶液と
、あらかじめｐＨ１０の緩衝溶液にて調製した１′１２
素溶液を所定部になるように３０℃にて混合し、Ｏまた
は２５ 時間放置後の酵素活性を測定して、第１表の結
果を得た。
Ｊ、記より、Ｃａ”＋と非イオン界面活性剤の併用によ
り安定化効果の大きいことが知られる。
り安定化効果の大きいことが知られる。
実施例 ２
次いでｃａ”ｉ度を４．５ Ｘ １０ ｍｇ／Ｉ と定
め、非イオン界面活性剤濃度を変化させた場合の本発明
による安定化効果を調べた。使用薬剤および実験条件は
実施例１と同一である。但し、相対活性の測定は２２時
間後に行った。その結果を第２表に示した。
め、非イオン界面活性剤濃度を変化させた場合の本発明
による安定化効果を調べた。使用薬剤および実験条件は
実施例１と同一である。但し、相対活性の測定は２２時
間後に行った。その結果を第２表に示した。
第 １ 表
商品名、ｎ＝＋２）
第 ２ 表
り記の如く、本発明によれば、Ｃａ”＋と非イオン性界
面活性剤の併用により、洗濯条件下において、アルカリ
プロテアーゼＡＰＩ−２１に対して優れた安定化効果を
与えることが出来ることが知られる。
面活性剤の併用により、洗濯条件下において、アルカリ
プロテアーゼＡＰＩ−２１に対して優れた安定化効果を
与えることが出来ることが知られる。
出願人 昭和電工株式会社
Claims (9)
- （１） アルカリプロテアーゼ製剤（粒または溶液）に
安定剤として、水溶性力・ｊ、シウム塩０．１〜２０重
量％および非イオン界面活性剤０．１〜６０重量％を添
加することを特徴とする酵素安定化法。 - （２） 上記アルカリプロテアーゼがアルカリ性領域で
カゼインを加水分解し、最適ｐＨ１ｏ〜１１、最適作用
温度４５〜５０℃、ゲルろ適法による分子量約２２．０
００、紫外線吸収スペクトルの極大吸収２７５〜２８２
ｎｍおよび第５図に示した赤外線吸収スペクトルの特
性を有するアルカリプロテアーゼＡＰＩ−２１である特
許請求の範囲第１項記載の酵素安定化法。 - （３） 」二記カルシウム塩が塩化カルシウム、硫酸カ
ルシウム、リン酸二水素カルシウム、および／または硝
酸カルシウムである特許請求の範囲第１項記載の酵素安
定化法。 - （４） 、Ｌ、記カルシウム塩が有機カルボン酸Ｉｌｌ
である特許請求の範囲第１項記載の酵素安定化法。 - （５） 上記非イオン界面活性剤が平均炭素数８〜２０
のアルキル基またはアルケニル基を有し、１〜２０モル
のエチレンオキサイドを付加したポリオキシエチレンア
ルキルまたはアルケニルエーテル、または高級脂肪酸に
１〜２０モルのエチレンオキサイドを付加したポリオキ
シエチレン高級脂肋酪エステルである特許請求の範囲第
１項記載の酵素安定化法。 - （６） ｌ記非イオン界面活性剤が平均炭素数６〜１８
のアルキル基を有し、１〜２０モルのエチレンオキサイ
ドを付加したポリオキシエチレンアルキルフェニルエー
テルである特許請求の範囲！ＪＳ １ダ１記載の酵素安
定化法。 - （７）上記非イオン界面活性剤が平均炭素数８〜２０の
アルキル基またはアルケニル基を有し、１〜２０モルの
プロピレンオキサイドを付加したポリオキシプロピレン
アルキルまたはアルケニルエーテル、または高級脂肪酸
に１〜２０モルのプロピレンオキサイドを付加したポリ
オキシプロピレン高級脂肪酸エステルである特許請求の
範囲第１項記載の酵素安定化法。 - （８） 」−記載イオン界面活性剤が平均炭素数８〜２
０のアルキル基またはアルケニル基を有し、１〜２０モ
ルのブチレンオキサイドを４＝Ｊ加したポリオキシブチ
レンアルキルまたはアルケニルエーテル、または高級脂
肪酸に１〜２０モルのブチレンオキサイドを付加したポ
リオキシブチレン高級脂肪酸エステルである特許請求の
範囲ＷＳ１項記載の酵素安定化法。 - （９） 上記非イオン界面活性剤が平均炭素数８〜２０
のアルキル基またはアルケニル基、（を右し、総和で１
〜３０モルのエチレンオキサイドとプロピレンオキサイ
ドあるいはエチレンオキサイドとブチレンオキサイドを
付加した非イオン界面活性剤（エチレンオキサイドとプ
ロピレンオキサイドまたはブチレンオキサイドとの比は
０．１／Ｌ９〜９．９７０．１ ）である特許請求の範
囲第１項記載の酵素安定化法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1504984A JPS60160884A (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 酵素安定化法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1504984A JPS60160884A (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 酵素安定化法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60160884A true JPS60160884A (ja) | 1985-08-22 |
Family
ID=11877973
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1504984A Pending JPS60160884A (ja) | 1984-02-01 | 1984-02-01 | 酵素安定化法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60160884A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01192869A (ja) * | 1988-01-26 | 1989-08-02 | Kenichi Kawasaki | 絹製品洗浄用液体洗剤 |
| JPH01502957A (ja) * | 1987-04-10 | 1989-10-12 | アムジエン・インコーポレーテツド | スブチリシンアナログ |
| US5032503A (en) * | 1988-06-22 | 1991-07-16 | Microgenics Corporation | Liquid single reagent for air enzyme complementation assay |
| JPH03180181A (ja) * | 1986-08-22 | 1991-08-06 | Cetus Corp | 熱安定性核酸ポリメラーゼ組成物 |
-
1984
- 1984-02-01 JP JP1504984A patent/JPS60160884A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH03180181A (ja) * | 1986-08-22 | 1991-08-06 | Cetus Corp | 熱安定性核酸ポリメラーゼ組成物 |
| JPH01502957A (ja) * | 1987-04-10 | 1989-10-12 | アムジエン・インコーポレーテツド | スブチリシンアナログ |
| JPH01192869A (ja) * | 1988-01-26 | 1989-08-02 | Kenichi Kawasaki | 絹製品洗浄用液体洗剤 |
| US5032503A (en) * | 1988-06-22 | 1991-07-16 | Microgenics Corporation | Liquid single reagent for air enzyme complementation assay |
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