JPS60155194A - 動物用の成長促進剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、経済的に重要な動物における飼料利用および
成長の改善に門遅し、％に、１ｉＩ＋ｌ料利用および／
または動物の成長の効率を改良するのに有用な化合物、
このような化合物を含有する組成物および動物にこの化
合物を投与することによる動物の飼料利用および／また
は成長の効率の改良法を与える。 世界中でひき続き食物としての動物蛋白が必要とされて
いる。この生産効率を改良する一つの方法は、摂取され
た飼料のオリ用率を改良する動物飼料添加物を使用し、
それによって同じ飼育期間で、あるいは同じｈｌの摂取
飼料から、その動物においてよシ大きな体重の増加をも
たらすものである。 他の方法としてはこのような効果を有する物質の注射、
皮下移植または飲料水への混入がある。 チロトロピン放出ホルモン＜１’ＲＨ）は、多くの桟の
動物に任在し、Ｌ−ピログルタミル−Ｌ−ヒスチジル−
Ｌ−プロリンアミドとして同定された天然に生ずるトリ
ペプチドである。それは、前ＭＩＮＴ叩体からのチロト
ロピンの放出を刺激し、また一定の種においてはその動
物の成長を調節する成長ホルモンの解放を刺激すること
も知られている視床下部神経ホルモンである。 ７°ＲＨについてはこれまでに羊と牛とに注射によって
投与して飼料の利用および成長を改良する試みがなされ
、また乳の産出を増すために牝牛にも投与されている。 また最近では、発行されたヨーロッパ特許出願第００８
０８５４号に、飼料利用と成長を改良するために’１’
ＲＨを経口投与によりにわとりに使用することが記載さ
れている。 本発明者らは今回、ＴＲＨのある同族体、特にヒスチジ
ルアミノば残基がピリジルアラニル残基によって置換さ
れている同族体がはるかに改良された成長促進および／
または飼料利用改良特性を有し、このためにこれらの同
族体が畜牛、羊、豚および家禽のような経済的に重要な
食物源動物（′（投与するのに有用であることを発見し
た。また、乳汁分泌の刺激にＴＲＨを包含させることに
よって、これらの化合物は牝牛の乳の生産を改良するの
に有用である。 このよう＆（、本発明に従えば式： のＬ−ピログルタミル−ピリジルアラニル−Ｌ−プロリ
ンアミド類およびその生理学的に受容できる塩が得られ
る。 （式中、ノシ１はＩ１％Ｃ；、−Ｃ，アルキル基、Ｃ”
３−ｃ。 シクロアルキルノ；ｕ、Ｃ２Ｃｓアルコキシアルキル基
筐たはアリール基であり；そして Ｘｔ−Ｌ、Ｉｉ、ハロゲン、　（、’ｌ−に４アルキル
基またはＣ，−ｃ、アルコキシ基である。１ 本発明の化合物中、ピログルタミルおよびプロリンアミ
ドアミノ酸残基はともに天然に生ずるＬ−異性体として
イ子在する。しかしながらピリジルアラニル残基はＬま
たはＤ異性体として、またはＤＬラセミ混合物として存
在することができ、本発明はその混合物と同様に分離し
た各ジアステレオマーを包含する。 上記の定義中、］・ログンには、弗素、塩素、臭素およ
び沃素が含まれる。アリール基は場合によＦ）ＯＥ、ハ
ロゲン、Ｃ，−Ｃ，アルキル基またはＣ３−ｃｍアルコ
キシ基によって置換されたフェニル基を意味する。 本発明はまた、成長促進および／または飼料利用改善量
の式（１１の化合物を加えた栄養的に平均のとれた飼料
組成物より成る動物用の飼料組成物をも与える。 本発明はまた濃縮飼料添加物および、適当な希釈剤また
はキャリヤーとともに式（１１の化合物を含有する獣医
学的組成物、例えば皮下注入物および注射用組成物、を
含む組成物をも与える。また式（１）の化合物または式
（１）の化合物を含有する組成物をその動物に投与する
ことより成る、経済的に重要な動物の飼料オリ用または
成長の効率を改良しまたは牝牛の乳の生産を増す方法を
も包含する。 特に好ましい化合物は、ＸがＨであってｇｌが水素であ
る式（１）の化合物である。 本発明の’ｌ＆に幻ましい化合物の一つはＬ−ピログル
タミル−ＤＬ−２−ピリジルアラニル−Ｌ−プロリンア
ミドである。 式（１）の化合物は、アミノ（ａ化学の標準的な結合お
よび保護技術を用い”ｔ　４・ｌり青される。このよう
な方法は、当技術分野Ｋ　Ｈ１！ｌした人々には周知で
あり、例えば１９６１年にジョン・ウィリー・アンド・
サンズ（Ｊｏｈｎ　Ｓ’％１Ｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ
　）、ニューヨーク、によシ出版されたグリーンシュタ
イン（Ｇｒｅｇｎｓｔｅｉｎ　）およびライニラＣＷｉ
ｎｉｔｚ）のしケミストリー、オブ・ジ・アミノ・アシ
ズ（Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｎｉｎｏ　
Ａｃ１ｄｓ　）　Ｊのようなこの問題に関する標準的な
教科７ｊＫ記載されている。 我々が、容易ＶＣ適用できることを見出した合成経路の
一つでは、Ｎ−保謙されたピリジルアラニン誘導体を使
用し、まずこれをＬ−プロリンアミドに結合させ、この
結合さｕ１ｔジペプチドを脱保繰し、次にＬ−ピログル
タミン酸に結合させる。 この経路を次の反応上８に示すが、ここで、Ｐは選択的
に除去することのできる窒素保躾基をあられし、Ｉｔ’
およびＸは先に定義した通りである。 （Ｖ） この方法の最初の段階として、株数されたピリジルアラ
ニン誘導体（幻をＬ−プロリンアミドまたはそのＮ−置
換訪導体（ｉｌｌ）　（ここでＲ′は先に定義した通り
である）しこ結合させる。この結合反応は、場合によっ
て１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在に２いて、
一般的な試薬を用いて、例えばＮ、Ｎ−ジシクロへキシ
ルカルボジイミドを用いて行なうことができる。典型的
には等モル量の試薬を不活性イＮＵ打６媒、例えばジメ
チルホルムアミドに加えて、反応が事実上完了するまで
数時間（−夜で通常十分である）この反応を進行させる
。次に通常の洗浄およびクロマトグラフィー技術を用い
て、結合したジペプチド（ＩＶ）ヲ単１１ＰＬ、保詭基
Ｐを除去する。脱保設に用いる争件は当然、使用される
特定の゛アミノー保護基に依存し、使用する媒質は無水
または水性であってよ＜、ｉｌｌ定の場合にはこれは棟
々の強度までの敵性または塩基性であろ９゜ 本発明者らがｉ＋ζ当であることを見出した保映基の例
は、ベンジルオキシカルボニル基（この基は触１ｓＫよ
る水添分解または氷／ＩＦｒＲ中の臭化水素の溶液を用
いた処理によって除去される）またはｔ−ブチルオキシ
カルボニル基（この基は保殺されているジペプチド生成
物を室温で数分間トリフルオル酢酸に溶解させることＶ
Ｃ，Ｊ：り除去さＲ’Ｌる）である。遊離のジペプチド
（Ｖ）を最後にＬ−ピログルタミン酸に結合させる。こ
の結合はＬ−ピログルタミン酸の活性化エステル、例え
ば２，４．５−トリクロルフェニルエステルを用いるこ
とによって行なうのが便利である。この反応は典型的に
は、不活性有機溶媒（例えばジメチルホルムアミド）中
の両反応体を室温で一仮かくはんすることによって行な
う。生成物を単離し、もし必要があれば常法で（例えば
イオン交換またはゲルー濾過クロマトグラフィーを用い
て）精製する。 上記の順序において、ラセミ体のり、Ｌ−ピリジルアラ
ニン残基から出発するとぎは生成物は二つのジアステレ
オマーの混合物として単離される。 しかしながら、二つの個々の異性体を製造することも可
能である。このことは最後の結合段階の前に、保ｄされ
ているジペプチド（１ｖ）の二つのジアステレオマーを
分離することによって行なうことができ、この場合には
分離した両８４性体の保護基をはずして先にｖｈべたよ
うなピログルタミル残基に結合させて二つのトリペプチ
ド異性体を１ｑる。 しかしながら、個々の異性体は最終的なトリペプチド生
成物（１）のジアステレオマーを分離することにより製
造するのが好ましい。各々の場合に、分離は、例えばシ
リカ上のカラムまたは分取ノηりａマドグラフィーを用
いるかま１ζは逆相シリカ上の高圧液体クロマトグラフ
ィー（／ｌＰ　Ｌ　Ｃ）　Ｋよって行なうことができる
。天然のＬ−異性体を含有゛する化合物はｒ！γ素消化
に対するそのより大きな／ｉ’Ａ受性によって識別され
、一方り一異性体を含有する化合物はこの消化に対して
より耐性である。 別法では、好ましくはＮ−保護された詩心体のようなＬ
−ピログルタミン酸をまずピリジルアラニン残基に結合
させ、その結果得られるジペプチドを次にＬ−プロリン
アミド残基（ＩＩＩ）に結合させる。最後に、もし存在
するならば件部Ｔｏを除去する。この経路を以ｆの反応
工程に示す。この工程中、Ｐは選択的に除去し得る窒素
保護基であって、Ｉｔ”およびＸは先に定義した通りで
ある：（■）（〜Ｉ）　（■） （Ｗ） 第一段階では、場合によりＮ−保獲されているＬ−ピロ
グルタミン酸（Ｖｌ）を活性化エステル、例えばＮ−ヒ
ドロキシこはく酸イミドエステルに変え、ピリジルアラ
ニン残基（Ｖｌｌ）に結合させる。ピリジルアラニンの
塩、例えばナトリウム塩は、便利に用いることがごき、
この塩はカルボン酸官能ノ、Ｈ′Ｃ対フーる遮ｌｉ、ｆ
ｔノ吉とり、−Ｃ作用して、特別の保睡詮よび脱保詭段
階の必要がなくなる。これに代わるものとじ−Ｃピリジ
ルアラニンのエステルを使用することができるが、この
場合はジペプチド（νｌ）を得るためには結合した生成
物を加水分解することが必要であろう。Ｌ−ピログルタ
ミン酸に対する好＆ｌＳ合な窒素保ｄ基は、Ｎ−ベンジ
ルオキシカルボニル基またはｔ−ブチルオキシカルボニ
ル基テある。これらの基の存在によりピログルタミル窒
素原子を包含する望ましくない反応を妨げると同時に、
次に絖く単離および精製工程を助りる有機溶晶中の溶解
度が改良される。結合したジペブチ）”　（Ｖｌ）は、
例えば、先に述べたＮ、Ｎ−ジシクロへキシルカルボジ
イミドのような縮合試薬を用いて、Ｌ−プロリンアミド
残基（ＩＩＩ）と反応させる。 最後にトリペプチド（ＩＫ）の保映基をはずすと式中の
化合物が４１ら扛る。保護基Ｐがベンジルオキシカルボ
ニル基である場合には、この反応は活性炭上のパラジウ
ム触媒の存在における逼常の水添分解によって簡単に行
なわれる。 この別経路の別の変形では、場合により保護されたＬ−
ピログルタミル−ピリジルアラニンジペプチド（■）を
Ｌ−プロリンベンジルエステルに結合させる。次にベン
ジル保護基を水素化によって除去しくもし存在するなら
ば屋素保穫基Ｐとともに）、トリペプチド生成物を、結
合試薬として例えばジシクロへキシルカルボジイミドを
用いてアミンＲ’ＮＨ２と反応させて、式（１）の所望
のアミドを得る。 上に述べた各方法に必要な出発物質は、一般に公知の化
合物である。特に、Ｌ−ピログルタミン酸とそのＮ−保
腹誘導体およびＬ−プロリンアミドは周知である。Ｌ−
置換Ｌ−プロリンアミド類は、標準法を用いて適当なア
ミンＮ１１Ｒ’と反応させることにより、Ｌ−プロリン
エステル類から容易に製造される。１２−ピリジルアラ
ニンは公知の化合物である。Ｘが水素以外のものである
式（Ｖｌｌ）のピリジルアラニン誘導体は、適当な置換
ハロメチル−ピリジンから出発して同様にして製造され
る。Ｎ−保腰誘導体（［ｌ）は文献に記載されたような
標準法によって容易に製造される。 式（１１の化合物の成長促進効果は、まず、マウスに非
経口投与することによって評価される。体重の増加を１
３日にわたって検査し、それらのマウスの状態を未処理
の対照のそれと比較する。 さらに、にわとりに投与することによって成長促進特性
および飼料利用におりる改良を証明する。 本化合物を飼料に硝加して、この飼料を耐化直後から試
験の完了まで自由に近寄れるようにしてひよこに与える
。生後３および４週間目に鳥の体重をはかシ、この生体
の体重の増加を未処理の対＋１は群と比較して生体体重
の増加の６分率での改良を得る。消費された飼料の量を
試験完了時のその群の動物の生体の体重で割って飼料変
換率（体重をｌ　ｋｇ増すのに要する飼料の量の尺度を
与えるンを得、これもまた対照群と比較し、飼料変換率
の改良を百分率として計算する。 本発明の化合物は、経口または非経口的に投与すること
ができるが、その経口活性のためＶこ、これらは動物に
供給する飼料に賂加することにより投与するのが便利で
ある。本化合物は補光栄養に、または毎日の飼料配給せ
の全部または一部のみに添加することができる。実際に
は、普通の混合飼料に添加するのが、より便利であるた
め好ましい。 極く少量の本発明の化合物しか必要でないため、飼料全
体に平均して分配するように注意をしなくてはならず、
このことは、例えば本化合物の溶液をセルロース粉末の
ような不活性キャリヤー物質上に吸着させてからこれを
乾燥させ、得られる粉末を飼料と混合することにより行
なわれる。 ＋１準的な獣医学的方法ＩＣ従って、各々その動物の栄
養的な要求を満たすのに十分な遇で、例えば、とうもろ
こし、小麦または大麦のような穀粒：魚または肉の副産
物のような蛋白質源：脂肪；ビタミン類およびミネラル
類：を含有している通當の動物飼料を使用することがで
きろ。 本発明の化合物が特に有利であることがわかった一つの
７１′＃殊な用法は、家禽、特ＶＬＬＶ（わとりの飼料
４・１」用の効率を改良丈ろことおよび／ｌたは成長を
促進することである。この場合には、飼料１　ｋｇあた
り５ないし５　（１，０００μｇという飼料オリ川改良
および／または成長促進剤Ｊｊがイ↓すら２するようシ
（本発明の化合物を胴材に重加するが、１ｋｇあたり５
０ないし５．ＵＯＯμＩの水準がさらに有用であυ、Ｌ
ｋｇあたり１００ないしｉ、ｏｏｏμ、′ｌが最も有用
であろう。この飼料は普通、自由に摂取させ、Ｍｌｌ化
後後例えば土俵−Ｈのひよこ）から、畜殺まで、または
重殺直前１で家禽に与えられ、これによって動物の成長
を通して本化合物が連続して投与される。当然のことな
がら、鳥が成長するにりれてその飼料摂取量は増大し、
どの特定の動物に摂取される本化合物の蓋も増大する。 従って、例えばｌＩｃｇあｆｃす５００μｙの化合物を
含有する飼料を与えられるにわとりの場合には、化合物
の一日の平均摂取殖は詳化後の最初の数日のほぼｌＯμ
ｙから、生後４週での約５０μ！！まで変化する。 必要とされる添加物が少量であるため、本発明の化合物
は極めて経済的である。その上、本化合物は上記のよつ
に飼料中で連続的な条件で投与することが可能であるが
、本化合物を断続的に、あるいは動物の成長の間の特定
の期間に、投与することも可能である。 本化合物は非経口的に（例えば静脈内または皮下注射あ
るいは皮下移４ｆｔによって）または徐放性装置とし１
投与することもできる。このような技術は牛のような比
較的大きな動物についてより有用であろう。本化合物は
飼料とは別に、例えばペースト、粉末、顆粒、ジュース
、シロップまたは濃縮物として、投与してもよく、また
これらは−かたまりまたは−なめ分の飼料またはある棹
の抽尤栄養内に混入させるかまたは飲料水またはある種
の他の飲み物、例えば乳に加えてもよい。 その他の桑品、例えば抗生物質、抗コクシジウムｎＨた
は他の桑１２りをｔｉｒ実ならば飼料またはｉｌ成物中
に、式＜１）の化合物とともに含有させて付加的な効能
を得ることもできる。上記の組成物はすべて受容できる
獣医学的方法に従って製造され、本化合物の有効投与量
をその動物に与えるのに十分な量の式中の化合物を含有
している。 本発明を以下の実施例によって具体的に説明する。 実施例１ ド Ｎ（α）−ヘンシルオキシカルボニル−Ｄ、Ｌ−２−ピ
リジルアラ＝　：ｙ　（Ｊ、Ｇｅｎ、Ｃｈｓｎｔ、ＵＳ
　ＳＲ＋４０．２４８８（１９７９）、アガノヴアＣＡ
ｙα−ｎｏｖａ）らの方法によりり、Ｌ−２−ピリジル
アラ二／から製造した、４５０ｍ９．１．５ミリモル〕
をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍ／）に溶解さ
せ、この溶液を０℃に冷却した。Ｌ−プロリンアミド（
２２７〜、１．５ミリモル）、トリエチルアミン（０，
２１＋／、１．５ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾト
リアゾール水和物（２３０ｍｆｊ、１５ミリモル）、お
よびＮ　、　Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミド（
３４０１１１＆、１．６５ミリモル）を加えて、溶液を
一夜かくはんし、室温まであたためた。溶媒を蒸発させ
、残留物をジクロルメタン（５ＯＮ）に溶解させて、飽
和重炭醒ナトＩＪウム溶液（６Ｘ　２５ａｔ／）で洗浄
した。溶媒を蒸発させて、粗生成物ををらにセファデッ
クスＧ１０（商標）上のゲル濾過クロマトグラフにかけ
、５チの酢酸水溶液で溶！’ｉ！ｔ　して精製した。ス
薗当な分画をプールして蒸発させ、水とトルエンとを加
えて共沸蒸留によって痕跡量の酢酸を除去すると、表題
化合物が白色同体として得られた（４５０＋１１ｇ、７
３％）、融点７９−８１℃。 分析％： 実６１り値：　Ｃ，６１，６５：＃、６．２０；Ｎ、１
３．３３Ｎ（α）−ヘンシルオキシカルボニル−Ｄ、Ｌ
−２−ピリジルアラニル−Ｌ−プロリンアミド（３９６
ｍり、１ミリモル）を、４５％＜Ｗ／Ｖ）臭化水素を含
有する氷酢酸（８ｍｌ）に溶解させ、溶液を１時間かく
はんした。次にジエチルエーテル（３０ｍｌ）を加える
と、保護基のはずれたジイプチドが黄色固体として沈で
んした。エーテルを傾潟して、残留物をＮ、Ｎ−ジメチ
ルホルムアミドＣ４ｍ１りに俗解させた。Ｌ−ピログル
タミン酸２，４．５−トリクロルフェニルエステル（４
０（１＆、１．３２ミリモル）を加えて溶液を０℃まで
冷却した。この溶液の７ＪＨを、トリエチルアミンの添
加によって９に調整し、混合物を一夜かくはんし２て室
温まであたためた。溶媒を蒸発させて生成物を２５％の
酢酸水溶液に溶解させた。溶液を、アセテート形のアン
バーライト（商標）ＩＲ４５イオン交換樹脂のカラム（
ＩＸ５Ｃｒｎ）を数回通過きせて臭化物イオンを除去し
た後、蒸発させた。生成物をセファデックス（商標）　
Ｇ　１０上のゲル濾過クロマトグラフにかけ、５％酢酸
水溶液で溶離して精製した。適当な分画をプールして蒸
発させ、水とトルエンを用いて共沸させることにより痕
跡量の溶媒を除いて、表題トリイプチドを白色固体（２
８１〜、６７％）として得た。融点１３０−１３５℃。 分析％： 実測値：　Ｃ，５２，３１：ｌｉ、６．１６：Ｎ、１６
．１９（１）　ジアステレオマーの分離は、展開系とし
てクロロホルム、メタノールおよび０．８８０７ンモニ
ア（９０：１０：１）の混合物を用いるシリカ平板上の
分取層クロマトグラフィーによって行なった。ＵＶ消尽
によって識別した適当なバンドの各々を別々に各平板か
ら除去して、メタノールとともに１時間かくはんするこ
とによって抽出した。 シリカを濾過によって各々から除去し、溶媒を蒸発させ
た。残留物を各々水に俗解させ、セファデックス（商標
）カラムを通して流下させ水で溶離した。過当な分画を
プールとして蒸発させ、凍結乾燥はせると、純粋な分離
されたジアステレオマーが各々微細な白色粉末として得
られた。 （１１７造の／ｊ￥定は酵素による消化を基にした〔ジ
エイ・エイチ・ジョーンズ（Ｊ、Ｉｉ、Ｊｏｎｇｓ）お
よびダブリュー・アイ・ラメージ（Ｗ、　Ｉ　、Ｒａｍ
ａ　ｇ　ｅ　）、Ｉｎｔ。 Ｊ、Ｐｅｐｔｉｄｅ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｒｅｓ、、Ｌ　
４　（１９７９）を参照のこと〕。 （２）　これに代わるジアステレオマーの分離法では、
移動相として水／メタノール（８０：２０）混合物を用
いる、逆相オクタデシルシリル−シリカカラム上の分取
ＨＰＬＣを使用した。適当な分画を合わせ蒸発させると
上記の分取層クロマトグラフイー法（１）によって精製
した物質とすべての点で同一の、各々の純粋な分離され
たジアステレオマーが得られた。 融点１２０−１２３℃Ｒｆ　（シリカ：クロロホルム、
メタノール；酢酸、１０：２：ｌ）０．３３゜ｊ８乳（
三 実測値：　Ｃ，５３，５０；）ｉ、５．９３：Ｎ、１７
．２７二ルーＬ−プロリンアミド １→１Ｌ点１２１−１２３℃　ｌｌｆ　（シリカ；クロ
ロホルム、メタノール、酢酸、１０：２：１）０．２８
゜分析％： 実測値：　Ｃ，ｓ４．ｏｃ＋；ｌｌ、６．ｏ３；Ｎ、ｘ
７．ｓｓチル は、矢内原ら、Ｊ、Ａ４ｅｄ、Ｃｈｅｍ、、１６　３７
３（１９７３）の方法に従って製造した。 水酸化ナトリウム溶液（３＃、１０ｍ７）中の２−ビリ
ジルアラニンニ塩酸塩水和物（２，５７ＬＯ３０１モル
）の溶液を、２０−２２℃に保ちながらかくはんされて
いるジメチルホルムアミド（２０ｍｇ）中のＮ−（ベン
ジルオキシカルボニル−Ｌ−ピログルタミル・Ｎ−ヒド
ロキシこはく酸イミドエステルの溶液に１０分かけて滴
加した。こうして得た無色の乳濁液を２０℃で５時間か
くはんした。溶媒を除去すると固体残留物が得られたの
で、これを水Ｃ３５ｍ１）に溶解させ、希塩ａ（１＃。 １０ｍ１）を加えることにより中和した。この溶液を蒸
発乾固し、残留物をイソ−プロパツール（１００ｍｌ）
とともにかくはんして吸引濾過し、こうして得た固体を
ジエチルエーテルで洗浄して１ｃ空下で乾燥さぜると、
生成物が白色同体（１９ｇ）として得られた。融点２１
４−５℃、〔α’ｌ］”０＋６．３’（Ｃ＝１．ジメチ
ルホルムアミド中）。 分析％： 実測値：　Ｃ，６０，８４；７／、５．１９；Ｎ、１０
．１３Ｌ−プーリ／アミド（１，４４Ｌ　Ｏ，０１２６
モル）を、２５℃でかくはんさＪしているジメチルホル
ムアミド（５Ｑｍ／；）中のＮ−ベンジルオキシカルボ
ニル−Ｌ−ピログルタミル−ｎ、ｒ、−２−ピリジルア
ラニン（４，５４、！ｉ’、０．０１１５モル）の）１
−３濁液に加えた。こうして得た透明な溶液に、ジメチ
ルホルムアミド（１０ｆｌ／）中のＮ　、　Ｎ′−ジシ
クロへヤシル力ルポジイミド（２，６Ｌ　Ｏ，０１２６
モル）の溶液を−ｇｒに加え、混合物を２５℃で２０時
間かくはんした。得られる暗色の６１液を濾過し、蒸発
させて残留物を母、これを刀Ｉ炭Ｃ役ナトリウム水溶液
（５す、１５Ｕｎｅ）とともにかくはんした。このｍＶ
　？２液をクロロホルム（３ｘｔｏ。 ＋ｉ６）で抽出し、合わせた抽出物をｔｐｉＥ　ｒｆ＆
マグネシウム上で乾燥させ、蒸発させると粗生成物（６
，８Ｆ）が得られた。このものはざらに精製することな
く、直接法の股陥・に使用した。 １０％の活性炭上のパラジウム触媒を含有するテトラヒ
ドロ７ラン／水混合物（１：１．２５０ｍ１　）　中の
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ピログルタミル−
Ｄ、Ｌ−２−ピリジルアラニル−Ｌ−プーリ／アミド（
６，８ｇ、０．０１３８モル）の溶液を、２５℃、１気
圧水素で、薄層クロマトグラフィーの分析結果が反応が
完了したことを示す１で水素化した。こうして得られる
懸濁液を濾過し、濾液を蒸発させてガム状物を得た。こ
のものを水（１００ｒ／Ｌｌ）に溶解させ、再濾過し、
再蒸発させて粗生成物を泡沫（４，５１として得た。 次にこのものを、実施例１（２）のようにして精製して
同一生成物を得た。 （５）　ジアステレオマーの分離 この工程は上記の（４）の粗生成物について、実施例２
に記載した方法で実施した。得られた生成物は、その実
施例の生成物と同一であった。 エタノール（５００７ｎＪ）中のナトリウム（２３Ｌ　
１．０モル）の溶液に、２５℃でジエチルアセタミドマ
ロネート（１０６，５Ｌ　０．４９モル）を加えた。こ
の溶液に、無水エタノール（１５０ｍｅ）中のスラリー
として２−クロルメチル−６−メチルピリジン塩酸ｍ　
［０，４９モル、ペイカー（１３ａｋｅｒ）ら、Ｊ　、
Ｃｈｅｍ、Ｓｏ　ｃ　、Ｃｈｅｒｎ、Ｃｏｍｒｎ、　、
　３５９８（１９５８）の方法によって製造〕を加えた
。混合物を２４時間かくはんした後、７５℃に２０時間
加熱した。次に溶媒を蒸発させ、残留物をジエチルエー
テルで抽出した。この溶液を蒸発させ、粗生成物を、石
油エーテルおよび酢酸エチルの混合物から占結晶させた
。さらに、メタノール／水１：３および酢酸エチル／石
油エーテルからの丙結晶により２−（ジエチルアセタミ
ドマロニル）メチル−６−メチルピリジｙ（４０，１ｇ
）を１４Ｉだ。 この生成物を、６Ｎ塩１讃中で２６時間、ｉｏｏ℃に加
熱した後、具空下での蒸発の前に３日間２５℃に放置す
ると、所望の生成物が白色固体として得られた（３６．
５ｇ、２９．６％）、融点２２８−２３１℃（分解）、
〔参考文献：ハンソリツク（ｌ１ａｎｚｌｉｋ）ら、Ｊ
、Ｍｅｄ　、Ｃｈｅｍ、、２２，４２４．１９７９］」
■Ｊ」 実測値：　Ｃ，４２，６：Ｉｉ、５．２５：Ｎ、１１．
２７Ｃｏ　Ｈ１２Ａ’ｔ　Ｏｔ・２　ＨＣｌの必要値：
　Ｃ，４２，７１：ＩＩ、　５．５７　；ｎ、　１１．
（Ｊ７このものは、上記（１）で製造した６−メチルピ
リド−２−イルアラニンニ塩酸塩（２，５３ｇ、０．０
１モル）から出発して、上記の実施例３（２）に記載し
たものと同じ方法によって製造した。表題化合物は吸湿
性の高い固体として得られ、これ以上精製することなし
に次の＆Ｉ潰に直接使用した。 このものは、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍｊ
’）中のＬ−プロリンアミド（０，６４Ｌ５．５８ミリ
モル）およびＮ−ペンジルオキシヵルホニルーＬ−ピロ
グルタミル−Ｄ、Ｌ−（６−メチルピリド−２−イル〕
アラニン（２，３７、？、５、５８　ミＩＪモル）から
出発し＃　、　Ｎ’−ジシクロヘキシカルボジイミド（
１，２６ｇ、６．１３ミリモル）を用いて、上記の実施
例３（３）に記載したと同じ方法で製造した。わｌ生成
物を前記のようにして精製すると、表題化合物（２，６
２＆　）が得られた（石動相として０．１％ＣＷ／Ｖ）
酢酸アンモニウム水溶液／メタノール（１：１）を用い
る逆相オクタデシルシリル−シリカカラム上のＩＩ　Ｐ
　Ｌ　Ｃにより７３％の純度と評価はれた）　Ｒｆ（シ
リカ；クロロホルム、メタノール、酢酸、１０：２°１
）０．４２および０．４７゜ ミド このものは、１０％の７古性戻上のパラジウム１１Ｉ虫
媒（５０ｍｇ　）を合宿するテトラヒドロフラン／水混
合′吻（１：１、ｌ（ｌＱｍＡ）中のＮ−ベンジルオキ
シカルボニル−Ｌ−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−（６−メ
チルピリド−２−イル）アラニル−Ｌ−プロリンアミド
（２，６＆）の水添分解により、上記の実施例３（４）
に記載した方法によって製造した。 同じ精製法によって表題化合物を白色無足形固体（１，
３５ｇ）として得た。 （５）　ジアステレオマーの分離 この分離は、上記（４）の粗生成物について、実施例２
（２）に記載した方法によって一実施し、二つのジアス
テレオマーを白色無定形固体として得た。Ｒｆ（シリカ
；クロロホルム、メタノール、酢酸、１０：２：１）０
．２３゜ 実施例５ （１ン２−メチル−４−メトキシピリジン−Ｎ−オキシ
ド ２５℃の無水メタノール（１４０ｕｕ）中のプトリウム
（４，６ｇ、０．２モル）の溶液に、４−ニトロ−２−
ピコリン−Ｎ−オキシド（３１ｇ、０．２モル）を添加
した。この混合物を１％時間かくはんした後、濾過した
。濾液を蒸発させ、残留物を酢酸エチルで抽出した。溶
液を濾過し、蒸発させて油性の残留物を蒸留すると、表
題化合物（２５，７１１９２％）が得られた。沸点１５
０℃（０，２朋ＨＰ）。 （２１２−−アセトギシメテルー４−メトキシビリジ、
乙 大型冷却機をとりつけた１リツトルの広口フラスコ中の
２−メチル−４−メトキシ−ピリジン−Ｎ−オキシド（
２３ｇ、０．１６５モル）に、かくはんしながら水冷無
水酢酸（３５ｍ／４．０．３７モル）を加えた。この混
合物を室温まであたためるとその間に敢しい発熱反応が
起こった。暗色の７１（、合物を１時間かくはんした後
、過剰な無水酢酸を蒸発させ、残留物をＸ（留すると、
表題化合物（２３，２６Ｉ、７８％）がイリられた。沸
点１２５℃（０，１朋１１ｆ）。 （３）２−ヒドロキシメチル−４−メトキンピリシイ ａＭＪｍｌｌ（Ｊ　ｏ　ｏ蛯）中の２−アセトキシメチ
ル−４−メトキシピリジン（２０，７２ｇ、　０．１１
４モル）の溶液を１時間加熱還流させた。得られる溶液
を減圧下で濃縮し、炭酸カリウムの添加によって残留物
を中和した。この混合物をジクロルメタンで抽出し、有
機溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させて濾過し蒸発
させて、淡色の粘稠な油を得た。この曲を放置すると固
化し、表題化合物（１０，６ｆｌ、６７％）が得られた
。沸点１３５℃（０，１朋ＩＩ、）。 酸塩 この化合物を、２−ヒドロキシメチル−４−メトキシピ
リジン（上記の（３）で製造したもの４４．０５ｇ、０
．３１７モル）および塩化チオニル（５００ｍｅ）から
出発して、ベイカー（Ｂａｋｅｒ）ら、Ｊ。 Ｃｈｅｔｎ、、Ｓｏｃ、、Ｃｈｅｍ、Ｃｏｒｒｖｎ、　
、　３５９８　、１９５８の方法によって製造すると、
表題化合物が赤みがかった固体、４６．！ｉ’（７５％
）として得られた。これをこれ以上精製することなく次
の製造に直接使用した。 水素化ナトリウム（油中の６０％分散液２３ｇ、０．５
３モル）を窒素下で乾燥へギサンで洗浄し７て油を除き
、固体を乾燥Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍ
／）中に懸濁させた。０℃まで冷却後、乾燥Ｎ、Ｎ−ジ
メチルホルムアミド（１２５ｒｎｔ）中のジエチルアセ
タミドマロネート（５４ｇ、０．２５モル）の溶液を４
５分かけて滴加した。次にこの懸濁液を室温まであたた
めて、１時間かくはんしたつ次に２−クロルメチル−４
−メトキシピリジン塩酸塩（４５ｇ、０．２３モル）を
斂回に分けて加えた。発熱反応が起こり、混合物を１時
間かくはんした。きらに別の水素化ナトリウムのアリコ
ート（６０％分散液５ＬＯ−１２５モル）を加えて反応
を完了させ、混合物を１５℃で１６時間かくはんした。 溶媒を真空下で除去し、残留物を水（３５０ｍ／）で便
利した。２Ｎ塩酸の添加によってｐＨを７に調整し、ｆ
ｉａ！過によって沈でんを集めた。粗生成物を酢酸エチ
ルおよびヘキサノの混合物から肖結晶させて、表題化合
物（２０゜３１１２６％）をイｑた。Ｒｆ　（シリカ；
トルエン、酢酸エチル、１：１）０．１５゜ ２−（ジエチルアセタミドマロニルコメチル−４−メト
キシビリジ７Ｃ１０，ＯＬ　２９．６ミリモル）を、２
Ｎ塩酸（２５０ｍＡりとともに４時間かくはんし加熱し
て還流させた。次いで溶媒を真空下で除去しエタノール
との共沸蒸留によって痕跡量の水を除去して表題化合物
（７，８ｇ、９８％）を得た。これを次の段階に直接使
用した。ＲｆＣシリカ、１Ｍ酢酸アンモニウム、エタノ
ール、１：４）０．２５゜ ３Ｎ塩酸（１，０Ｍ）中の（４−メトキシピリド−２−
イル）アラニンニ塩酸塩（０，２６（１，１ミリモル）
の溶液を、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドＣ３ｒｕｌ）
中のＬ−ピログルタミン酸−２，４゜５−トリクロルフ
ェニルエステルの溶液に加えた。 この混合物を１％時間かくはんした抜水（５次１）中に
注ぎ、ジクロルメタンで抽出した。この水溶液をｐＨ３
，５に調整し、ジクロルメタンで再抽出した。真空下で
水性層を蒸発させるとガム状物が得られたので、これを
メタノールに？ｇＭζせ、少量の沈でんから濾過分Ｍｉ
＃　した。蒸発により白色の無定形固体が得られ、こＪ
Ｌをさらに精製することなく次の段階に使用した。Ｒｆ
（シリカ、Ｉ　Ａｉ酢酸アンモニウム、エタノール、１
：４）０．４゜Ｌ−ピログルタミル−Ｄ　、　Ｌ　−（
４−メトキシピリド−２−イル）アラニン（３，０７１
，１０ミリモル）を乾燥ｉ’Ｊ、Ｎ−ジメチルホルムア
ミド（２０ｍｌ）Ｋ溶１’＋’（サセ、Ｌ−プロリンア
ミド（１，２５，９、ｌ　１　ミＩＪモル）を加えた。 この混合′１勿に、かくはんしながら、乾ｅ：Ｎ　、　
＃−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中の、Ａ’　、
　Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミド（２，２６ｇ
、１１ミリモル）を添加した。２４時間後に溶液をｄ’
！過して、沈でんした固体を除去し、溶婬を真空下で除
去した。 残留物を水に溶解させて、クロロホルムで抽出した。こ
の重機浴液を硫酸ナトリウム上で乾燥きせ、蒸発させて
ガム状物を得た。これをシリカ上のカラムクロマトグラ
フにかけ、クロロホルム中１％のメタノール（体積で）
を用い、徐々にクロロホルム中１０チメタノールまで増
大させて溶離することによりさらに精製した。適当な分
画を合わせて蒸発させると、表題化合物の各ジアステレ
オマーの純粋な試料が得られた。 Ｌ　、　Ｌ　、　Ｌ−異性体は収ｉ６５０ｍＦ（１６％
）、融点２０５℃、であった。 Ｒｆ（シリカ；クロロホルム、メタノ−＃、０．８８０
アンモニア、８０：２０：１）０．４５゜このものは、
乾燥Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＡり中の、
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ピログルタミル−
Ｄ、Ｌ−２−ピリジルアラニン（２，ＯｊＪ、５ミリモ
ル）、Ｌ−プロリンエチルアミド（０，６４５’、５ミ
リモル〕およびＮ　、　＃’−ジシクロへキシルカルボ
ジイミド（１，０３ｊｌ、５　ミリモル）から出発して
、実施例３（３）に記載した方法によって製造した。７
２時間後に、反応を先述の通りに達成して粗生成物を得
た。これをこれ以上精製することなく次の段階に直接使
用した。収ｉ２．７ｇ。 Ｒｆ　（シリカ；クロロホルム、メタノール、酢酸、１
０：２：１）０．６゜ このものはテトラヒドロフラン／水１：ｌ混合物（５０
Ｉｌｌｌ）中の、上記（１）からの粗製Ｎ−ベンジルオ
キシカルボニル−Ｌ−ピログルタミル−Ｄ。 Ｌ−２−ピリジル７ラニルーＬ−−プロリンエチルアミ
ド（１，２５ｇ）を用いて、実施例３（４）に記１１々
した方法により製造した。反応が完了したとき、濾過お
よびＡ９下での蒸発を行なうと褐色の油（９００ｍＦ）
が得られた。Ｒｆ　（シリカ；クロロホルム、メタノー
ル、酢酸、１０：２：１）０．２２および０．２５゜ （３）　ジアステレオマーの分離 この分離は、移動相として、水／メタノール８７　：１
３中の０．１％Ｖ／Ｖ酢酸混合物を使用すること以外実
施例２（２）に記載した方法により実施した。カラムか
ら溶出する適当な分画を合わせて、Ｌ−ピロダルタミル
ーＬ−２−ピリジルアラニル−Ｌ−プロリンメチルアミ
ドの純粋な試料を白色無定形固体として得た。 この化合物は、プロリンエチルアミドの代りにプロリン
エチルアミド（０，８，９，５，６ミリモル）から出発
して実施例６に記載した方法によって製造した。こうし
て得ｆｃＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ピログル
タミル−１）　、　Ｌ　−２−ピリジルアラニル−Ｌ−
プロリンエチルアミドを水添分解すると、赤褐色固体と
して生成物が得られた。 二つのジアステレオマーのｆＨ’Ｒおよび分離は、先述
したような分取ＨＰＬＣによって行なった。 Ｒｆ　（シ！Ｉ力；クロロホルム、メタノール、酢酸、
１０　：　２　：　１　）　０．４゜ 実施例８ この化合物は、プロリンメチルアミドの代りに、プロリ
ンフェニルアミド（１，０５、！ｉ’、５．５ミリモル
）から出発して実施例６に記載した方法により８１！造
した。こうして得たＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ
−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−２−ピリジルアラニル−Ｌ
−プロリンフェニルアミドの水添分角Ｔによって表題化
合物を固体として得た（１．６８ｇ）。 二つのジアステレオマーの５１製および分離をクロ

【１
ポルム／メタノール９：１で溶隔するシリカ（２００１
）上のカラムクロマトグラフィーによって行なうと、Ｌ
−ピログルタミル−Ｌ−２−ピリジルアラニル−Ｌ−’
７”ロリンフェニルアミド、融点９５−９８℃、が得ら
れた。 １１ｆ（ンＩＪ力；クロロホルム、メタノール９：１）
０．３５゜ 実施例９ （１）　−Ｌ−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−２−ピリジル
アラニン 乾燥Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミドＣ２０ｍ１）中のＬ
−ピログルタミン酸−２，４，５−）ジクロルフェニル
エステル（７，７５ｇ、２５ミリモル〕の懸濁液に、２
５℃で３Ｎ水酸化ナトリウム溶液（１０ｍｌ）中の２−
ピリジルアラニンニ塩酸塩水和物（２，，５７１１１０
ミリモル）の溶液を加えた。 ｉｆ％　召物の温度は４２℃まで上列し、この溶液を１
Ｘ時間かくはんしてから、水（１０ｏｍｘ）中に注いだ
。２ＭＨｃｌの添加によってｐＨを３．５に調れ、これ
をメタノール（５０ｙ＋６）で油料した。上澄みを濾過
し、蒸発きせると白色の固体が（ｊＪらｉｌ、これをＮ
、Ｎ−ジメチルホルムアミドを用いた共沸蒸留によって
乾燥させた。この物質は十分に純粋であって次の製造に
直接使用できた。 ＲｆＣシリカ；エタノール、ｘＭＩＲ’ｒ４／アンモニ
ウム、４　：　１　）　０．３゜ 乾燥Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍｊり中のＬ
−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−２−ピリジルアラニン（１
０ミリモル）の５１ト濁液をかくはんして、これに室温
で、Ｌ−プロリンベンジルエステル塩酵塩（２，３ｇ、
１０ミリモル）を加え、次いでＮ−メチルモルホリン（
１，１ｇ、１１ミリモル）を加えた。５分後に乾ｔ’ｂ
Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍｌ）中のＮ、Ｎ
’−ジシクロへキ／ル力ルポジイミド（２，２Ｌ１１ミ
リモル）の溶液を加えた。７２時間後にこの懸濁液を濾
過し、溶液を真空下で蒸発させると油が得られた。これ
を水（６０ｍ／）に加えて、＋ｖｉｙｉ液をジクロルメ
タン（３Ｘ７０ｍＩりで抽出した。合わせた抽出物を炭
酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で
乾燥させ、真空下で蒸発はせて、表題化合物（４，２ｇ
）を得た。シリカ上のカラムクロマトグラフにかけ、ク
ロロホルム／メタノール（９：１）で溶離することによ
ってさらに精製すると、生成物が無定形固体（３，６ｇ
、７８％）として得られ、これを直接法の段階に使用し
た。 Ｒｆ　（シリカ：クロロホルム・、メタノール、９：１
）０．３５および０．４０゜ Ｌ−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−２−ピリジルアラニル−
Ｌ−プロリンベンジルエステル（］−０ｎを、テトラヒ
ドロフラフ（３０ｍＪ）と水Ｃ２０ｍ１）との？ａ合物
に溶解させて、活性炭ｉｏｏｍｐ上の１０％パラジウム
を加えた。混合物を、出発物質が残留しなくなるまで大
気圧で水素下でかくはんした。濾過および真空下での蒸
発を行なうと、表題化合物（７ｘｏｍｐ）が得らｉＬだ
が、このものは十分に純粋で次の製造に使用することが
できた。 ＲｆＣシリカ；エタノール、１Ｍ酢酸アンモニウム、４
：１）Ｑ３７および０．４５゜ （４）　Ｌ−ピログルタミル−Ｄ、Ｌ−２−ビリジ八０
℃で、乾燥ジクロルメタ７Ｃ５０ｍ、ｌ）中のＬ−ピロ
グルタミル−１）　、　Ｌ　−２−ピリジルアラニル−
Ｌ−プロリン（３，０，！ｉ’、８ミリモル）および】
−ヒドロギシペンゾトリアゾール水利物（２−１６〃、
１６ミリモル）の溶液に、乾燥ジクロルメタン（５ｏｍ
／４）中のＮ、Ｎ−ジシクロへキンル力ルポジイミド（
１，８１Ｌ　８．８ミリモル）を添加した。５分後に、
乾（■ジクロルメタ７Ｃ１０ｄ）中の２−メトキシエチ
ルアミン（０，６６ｇ、８．８ミリモル）の溶液を滴加
して、混合物を２５℃で３時間かくはんした。沈でんし
た固体な聞過によって除去し、溶液を蒸発させた。残留
物をクロロホルムに溶解させ、炭酸水素すｌ−ＩＪウム
溶液で洗浄し、硫酸す）　ＩＪウム上で乾燥はせ、真墾
下で蒸発させて粗生成物を得た。部分精製および異性体
の分離はシリカ上のカラムクロマトグラフィーによって
行なった。個々のジアステレオマーを含有する適当な分
画を合わせて蒸発させ、各々をイオン交換クロマトグラ
フ〔バイオ−ラド（Ｂｉｏ−Ｒａｄ）ＡＧ　５０ＷＬ−
Ｘ８Ｃ商品名）陽イオン交換樹脂〕にかけ、生成物を水
中の２％Ｖ／Ｖピリジンで溶離することによってさら【
て精製した。）風当な分画の蒸発によって表題化α物の
２つのジアステレオマーを吸湿性の高い白色無定形固体
として得た。 ＲｆＣシリカ；クロロホルム、メタノール、アンモニア
、８０：２０：１）０．４０および０．４５゜実施例１
０ 実施例１ないし９の最終生成物を、用且水準２．５ｍ９
７に９７日で皮下投与することにより、マウスにおける
成長促進活性について評価した。マウスは、均等な体重
分布が得られるように５つの箱に、１５匹づつの動物の
処理ｔ１トに分ける。水および小動物用飼料は自由に摂
取烙せた。本化合物の投与は１４日間毎日行なう。動物
は箱ごと毎日体重を測定し、実験の終りに処理動物の生
体の体重の増加を未処理の対照と比較して、体重増加の
百分率での改良を計算する。結果は次の通りである：ブ
ロイラー用の水禽１ＩｉＩ科組成物を次の糺成でｌｐ４
へした。 ！戊　分　％ とうもろこし　４９・０ 小友　１乏、０ にしん　４．０ 肉および・け（分　８．０ 大豆　２５．０ 液体）１°１ｌｌ１３　１．５ メチオニン　０．１６ 塙　０．２５ ビタミン予イ４Ｊｉン１ち合物　０６２実施例１の化合
物（５５ｍ＆）をメタノール（３００ｍｌ）に溶解させ
、これをメタノール（１２００ｍｌ）中のアヴイセルＣ
Ａｖｉｃｅｌ）（商標、１００．！ｉ’）のスラリーに
加えた。この混合物を１時間かくはんしてから、回転蒸
発器を用いてメタノールを除去した。こうして得た粉末
を上記の飼料２５に９と児全に混合して予備混合物とし
、これを最後に別の同一飼料８５ｋｇと混合して、飼料
１にｇあたり実施例１の化合物５００μｇを含有する生
成物１１０榴を得た。典型的な分析（飼料として与えた
ものとして） 油（％）　５．２１ 蛋白質（％）　２２．６５ 繊維（％）３．５ エネルギー含有量ＣＭＪ／Ｉｒｇ）　１２７１実施例１
の化合物を、１５０．４５０．９００および２０００μ
Ｉ／混合飼料ｋｇＯ量で含Ｍする飼料組成物と同様にし
て製糸した。同様にして実施例２ないし９の化合物を含
有する組成物を製造した。 実施例１２ 家禽における上記の各実施例の化合物の成長促進および
飼料効率改良特性は、次の生後−日のブロイラーのひな
を用いる飼養試験によって示される。 にわとりは、各々１６階のおりをもつ２つのブロックに
分けられている、換気孔をつけ温度調節をした２つの部
屋に入れる。生後−日の性別したブロイラー糧のひよこ
を、性別によって、指定された雄または雌のおりの各々
に１５羽づつ配分する。処理および対照は、各処理体制
に対して８つのおりが使用され各処理が各ブロックで２
度行なわれるように各おりに無作為に配分される。 種々の量の本発明の化合物を含有する飼料組成物を実施
例１１に記載したようにして製造し、これらを、自由に
摂取させるようにしてひよこに与える。死亡数と各おり
に供給した飼料の量を記録する。生後３週問および４週
間目に全部の烏の重重なはかり、食べなかった飼料の全
重量を記録する。鳥の生体の体重の増加を１算して、未
処理の差を出す。同様にして、消費された飼料の量をそ
の群の動物の生体の体重で割って、飼料変換率（これに
より体重を１ｋｇ増大きせるのに必要な飼料の量の尺度
が得られる）を出し、これもまた対照群と比較して、チ
差異を計算する。 こうした試験で得た結果は、１５０ないし２０００μｇ
／ｊｃ９の水準で飼料に添加したとき実施例１の化合物
かにわとりの成長の増大および飼料変換効率の改良に有
効であることを示した。 特許出願人　ファイザー・コーポレーショ；／（外５名
） 第１頁の続き ■Ｉｎｔ、ＣＩ、４　識別記号　庁内整用［相］発　明
　者　マイケル・ジョン・ウ　イギリス国イツテイ　ク
ローズ１３

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. （１）　一般式： 〔式中、ｒｉ’はＨ，ＣＩ　Ｃｍアルキル基、ｃ、−Ｃ
   。 シクロアルキル基、Ｇ２　（’８アルコキシアルキル基
   まだはアリール基であシ；そして ＸはＨ１ハロゲン、Ｃ，−Ｃ，アルキル基またはＣＩ　
   Ｃ４アルコキシ基である〕 のＬ−ピログルタミル−ピリジルアラニル−Ｌ−プロリ
   ンアミド類およびその生理学的’Ｆ９容できる塩。
2. （２）ＸがＨである、特許請求の範囲第１項に記載の化
   合物。
3. （３）Ｒ１がＨである、特許請求の範囲第１または２項
   に記載の化合物。
4. （４）Ｌ−ピログルタミル−ＤＬ−２−ビリジルア２ニ
   ル−Ｌ−プロリンアミドである特許請求の範囲第１項に
   記載の化合物。
5. （５）式： ％式％ （式中Ｒ′およびＸは特許請求の範囲第１項で定義した
   通シである）のピリジルアラニル−Ｌ−プロリンアミド
   を、Ｌ−ピリグルタミン［またはその活性化エステルと
   反応させ、場合によｐこの生成物の生理学的に受答でき
   る塩を形成させることより成る、特許請求の範囲第１項
   に記載の式（１）の化合物を製造する方法。
6. （６）式： Ｐ （式中、Ｘは特許、ｉｌス京の範囲第１項で定義した通
   りであシ、Ｐは水素または、選択的に除去し得る窒素保
   護基である）のＬ−ピログルタミル−２−ピリジルアラ
   ニルｐ２ｊｖ体を、式： （式中Ｒ１は特許請求の範囲第１項で定義した通りであ
   る）のＬ−プロリンアミドまたはそのＮ−エステルと反
   応させて、ベンジル基および存在するならば窒素保護基
   を除去し、そして式Ｒ″ＮＢ。 のアミンと反応させ：そして場合によりこの生成物の生
   理学的に受容できる塩を形成させることよシ成る、特許
   請求の範囲第１項に記載の式（１）の化合物の製造方法
   。
7. （７）成長促進または飼料利用改良特性特許請求の範囲
   第１項に記載の式中の化合物を含んでいる、栄養的につ
   りおいのとれた飼料ｉ放物より成る動物用の飼料組成物
   。
8. （８）濃縮した飼料添加物および、特許請求の範囲第１
   項に記載の式（１）の化合物ならびに適当な希釈剤また
   はキャリヤーを含有する獣医学的組成物、を含む組成物
   。
9. （９）　有効量の特ａ′ｆ請求の範囲第１項に記載の式
   （１１の化合物またはその組成物を動物に投与すること
   より成る、経済的に重要な動物の飼料利用または成長の
   効率を改良し、または牝牛の乳の生産を増す方法。 （ト）特許請求の範囲第１ないし４項のいずれかに記載
   の化合物を飼料１ｋｇあたり５０ないし５０００μｙ含
   む栄養的に平均のとれた飼料組成物を投与することより
   成る、家禽の飼料オＵ用または成長の効率を改良する方
   法。