JPS6015286B2

JPS6015286B2 - ユリ種苗の大量増殖法

Info

Publication number: JPS6015286B2
Application number: JP53088100A
Authority: JP
Inventors: 正愛三澤; 眞策高山
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1978-07-19
Filing date: 1978-07-19
Publication date: 1985-04-18
Also published as: JPS5515734A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は組織培養によるュリ種苗の大量増殖法に関する
。

ュリはュリ料に属し、ャマュリ（Ｌｉｌｉ山ｍａ川ａｔ
ｕｍ），テッポウユリ（Ｌｉｌｉ皿ｌｏｎｇｉｆｌｏｍ
ｍ），力ノコユリ（Ｌｊｌｉ山ｍｓｐｅｃｌｏｓｍｍ）
，スカシユリ（Ｌｉｌｉ肌ｍｅｌｅ袋ｎｓ），ササユリ
（ＬｉｌｉｕｍＭａｋｊｎｏｉ）｝，ヒメユリ（Ｌｍｍ
ｍｃｏｎｃｏｌｏｒ）など多くの品種があって、いずれ
も観賞用として広く愛好され、本邦における生産量は、
テツポユリを中心として、カノコユリ，ヤマュリなど年
間約１億３０００万球に達している。

ュリは自然増殖率が低いため、球根分割，リン片挿し、
茎挿し、ムカゴ利用，播種等によって人工増殖が行われ
ている（ハルトマンおよびケスター，ｐｌａｎｔＰｒｏ
ｐａｇａｔｉｏｎ，ＰｒｉｍｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃ
ｔｉｃｅｓ．３ｄＥｄｉｔｉｏｎ．ＰｒｅｎｔｉｃｅＨ
ａｌｌ、Ｉｎｃ．１９７５）。しかし、これらの増殖法
は多数の親株と人手を要するばかりでなく、ウイルス病
の蔓延によって花の品質低下をきたす危険もあり、必ず
しも増殖法として満足できるものはない。組織培養によ
るュリ種苗の繁殖に関する研究は、これらの欠点を是正
すべく始められているが、今日までに試みられている組
織培養の手法では、種苗の作成に多大の労力と時間を必
要とし、また、増殖率もさほど高いものとはいえない。
比較的能率の良い報告として注目される、シモンズとカ
ミングス（Ｐｒｏｐａ鱗ｔｉｏｎｏｆＬｉｌｉ肌ＨｙＭ
ｄｓ，□，ＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＰｌａｎｔｌｅｔ
ｓｆｒｏｍｂｕｌｂ−ｓｃａｌｅＣａｌｌ雌Ｃｕｌｔ川
ｅＳｆｏｒｍＣｒｅａＳｅｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｒ
ｏｔｅｓ．ＳｃｉｅｎｔｉａＨｏｒｔｉｃｕｌｔｍａｅ
５，１６１−１７０（１９７６））の手法は、１夕（乾
燥重量として）のカルスから年間６×ｌび２倍の増殖が
可能であるとされている。しかし、一般に、長期間総代
を続けたカルスは再分化館が低下する懐向を示すほか、
変異出現率が通常の栄養繁殖に比べ高い等の問題があり
、これらの点に関して充分な検討がなされていない現状
では、この手法を実用的に用いることには問題がある。
アンダ−ソン（ＲａｐｉｄＰｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆ
Ｌｉｌｉｕｍｃｖ，ＲｅｄＣａｒｐｅｔ，ｌｎＶｉｔｒ
ｏ１３１４５（１９７７））は、リン片基部切片を継代
することにより、中程度の大きさの球根１球から半年間
で１０方情に増殖できる手法を提唱している。この手法
は、しかしながら、操作の全過程に人手を用いた球根分
割ならびに寒天培地上への組織切片の直床が必要となる
ため、実際には１０万倍に増殖することは決して容易な
ことではない。本発明者らは、組織培養によるュリ種苗
の大量増殖法について、実用的な技術の開発を目的とし
て種々研究した結果、次のＡ〜Ｄの工程によりュリ属植
物を組織培養すればュリ種苗として使用できる子球を大
量に安価に、しかも短期間で供給することができること
を見出し本発明を完成するに至つた。風ュリ属植物の組
織片を固体培地上で培養し子球を形成させる。

【Ｂ｝この子球のリン片を分離し、生長促進物質を含有
する団体培地上に移植して培養しリン片を分化させリン
片塊を得る。

｛Ｃ｝リン片塊をさらに液体培地で振糧，損梓培養し、
個々のリン片を把大させた後、分離する。

‘Ｄ｝分離したリン片を固体培地または液体培地で静瞳
培養するか、あるいは液体培地中で振盤，灘梓培養して
種苗として使用できる子球を形成させる。本発明によれ
ば、従来の球根分割、リン片挿し、茎挿し、ムカゴ利用
、播種等による人工増殖法や、ュリの組織培養法と較べ
て、はるかに大量かつ安価な種苗の生産が可能であるほ
か、得られる種苗の品質がきわめて安定しており、また
種々の植物病からの保護が容易であり、健全種苗の育成
ができるなどの利点を有する。

また、本発明方法で得られた種苗は低温下での保存が可
能であり、種苗出荷の調節が可能である。なお、植物の
組織培養において液体振鶴培養を行う例（特関昭４８−
８０７８針号公報，特関昭５１−１２９８８号公報など
）はあるが、′これらの方法は、得られる培養物から有
効成分を取出すことが目的であり、本発明のごとく園芸
植物の種苗生産に液体振濠培養法を用いたものではない
。

以下、本発明を詳細に説明する。

本発明は次のＡ〜Ｄ工程からなる組織培養法によるュリ
種苗の大量増殖法である。

■ュリ属植物の組織片を固体塔地上で培養し子球を形成
させる。ュリ属植物の組織片としては、ュリ属植物の茎
，葉，花弁，賄，花糸，子爵，花榎，芽，リン片，根ま
たはその他の組織を小片（５×５肌〜５０×５物舷）に
切断したものが用いられる。

この組織片は表面を、たとえば次亜塩素酸ソーダ，エチ
ルアルコールなどで殺菌処理したのち無菌水でよく洗っ
て使用する。固体培地としては通常植物の組織培養に用
いられる培地であればいかなるものも使用できる。

たとえばホワイト（Ｗｈｉに）氏塔地，ヘフー（Ｈｅｌ
ｌｅｒ）氏培地，ムラシゲ・スクーグ（Ｍｕｒａｓｈｉ
繋−ｓｋｏｏｇ）氏培地，リンスマイャ−・スクーグ（
Ｌｉｎｓｍａｌｅｒ−ｓｋｏｏｇ）氏培地など、あるい
はこれらを基本塔地としてこれらに種々の改変を加えた
ものなどが用いられる。固体状にするためには寒天を用
いる。茎葉および根の分化を促進させるためには、ベン
ジルァデニン，カィネチン，ナフタレン酢酸，インドー
ル酢酸，２，４ージクロルフェノキシ酢酸などの生育調
質物質を添加して行うとよい。これら生育調節物質の添
加量は、生育調節物質の種類，植物の種類，培養段階に
よってそれぞれ異なるが、一般に０．１〜３０の９／そ
程度でよい。培地のｐＨは４．０〜８．５が好適である
。培養中、光は必ずしも必要ではないが、照明下に培養
するとさらに良い結果が得られる場合もある。照明下に
行う場合は２００〜１００００ルクスの光量で行うとよ
い。以下Ｂ〜Ｄにおける培養においても上記塔地，生育
調節物質は適宜用いられ、照明も適宜行なわれる。固体
塔地２〜１０の‘当り上記小片１個の割合で暦床後１０
〜３ぷ○で２０〜６０日間静暦培養すると、１〜数個の
子球が分化してくる。

このとき根が分化してくるものもあるが僅少であり、後
の培養にはさしつかえない。‘Ｂ’上記で生じた子球の
リン片を分離し、生長促進物質を含有する固体培地上に
移植し、リン片を分化させリン片塊を得る。生長促進物
質としてはカィネチン（１〜１０雌／そ），ベンジルア
デニン（０．３〜１０の９／そ）またはその他のサィト
カイニンが用いられる。

固体培地としては風頃に記載と同様のものが用いられる
。固体塔地２〜１０泌当りリン片１個を贋床後、１０〜
３５℃で２０〜６０日間静置培養するとリン片が数多く
分化し、多数のリン片を主体とする塊が得られる。

このとき根が分化してくるものもあるが僅少であり、後
の培養にはさしつかえない。‘Ｃ’上記で得られるリン
片塊を、さらに液体培地で振濠，健梓培養し個々のリン
片を急速に把大させた後、分離する。

液体培地としては風項に記載と同様のもので寒天を含ま
ないものが用いられる。

培養は滅菌液体培地を含むフラスコまたは培養槽にリン
片魂を移植し行う。

フラスコを用いる場合はたとえば３００の‘客ヱルレン
マイヤーフラスコに３０〜２００松上程度の液体培地と
、培地１００の‘当り１〜５個のリン片塊を入れ１０〜
３５ｑｏで毎分１４０〜２５０回転の振濠法で培養を行
う。培養槽を用いて行う場合は、培養槽として微生物の
培養に用いる発酵槽がそのままで利用できる。たとえば
３〆客の発酵槽を用いる場合は１〜２その液体培地と渚
地２夕当り１〜５個のリン片塊を発酵槽に入れ１０〜３
５℃で毎分２５０〜６５０回転で燈拝し、毎分０．５〜
３その無菌空気を通気しつつ培養する。このようなフラ
スコまたは培養槽による液体培養により、リン片および
根がさらに分化してくるとともに急速な生育を示す。

この液体培養を続けることによって、各々のリン片を継
続的に把大させることはできるが、それまで培養を続け
るためには、より長時間を要することになる。従って、
各々のリン片を分離して薪しい培地へ暦床できる程度に
生育した時期、すなわち培養開始後２０〜４０日目で培
養を止め、把大したリン片魂を取り出して、各リン片を
無菌的に分離して次の工程に移す。【功分離したリン片
を固体培地または液体塔地で静贋培養するか、あるいは
液体培地で振鶴培養することによって新しい子球を分化
、肥大させ、種苗として使用できる植物体にまで生育さ
せる。

固体培地、液体培地は■項に記載と同様の培地およびに
｝項に記載と同様のものが用いられる。

静置培養の場合は１０〜３５午０で３０〜１００日間行
い、液体振盤培養の場合は１０〜３５ｑｏで２０〜５０
日間、毎分１４０〜２５０回転の振濠法で行う。

かくして得られる種苗を保存しておく場合は、さらに培
養期間を延長するなり、０〜１び０の低温に置くとよい
。

このようにして得られる種苗について通常の栽培を行う
と、健全かつ均質な植物体で、美しい花を咲かせるもの
を得ることができる。

本発明法によれば、従来の栄養繁殖法と較べてはるかに
能率の良いことはもちろんのこと、従釆の組織培養法と
較べて著しく省力化が達成され、しかも繁殖能率も高く
、ュリ種苗を容易に大量増殖することが可能である。

例えば、中程度の球根１球からの１年間の増殖率は、常
法により計算すればカノコュリで１２５億倍、ヤマユリ
で３兆２４００億倍もの種苗を得ることができることに
なる。次に実施例について説明する。実施例１ャマュリの球根を３０％次亜塩素酸ソーダ（有効塩素量
３％）および７０％エタノールで表面殺菌後、５肋四方
に切り、下記第１表の組成を有する寒天塔地１０の‘を
含む直径２５肌深さ１２．５ｃｍの試験管に試験管１本
当り１個層床させ、２５００，２５００ルクスの照明下
で４５日間培養する。

第１表．硝酸アンモニウム１６５０のｏ硝酸カリウム１９００
〃塩化カルシウム・２水塩４４０〃硫酸マグネシウム・
７水塩３７０″リン酸第一カリウム１７０〃Ｎａ２ＥＤ
ＴＡ・２水塩３７．３〃硫酸第一鉄・７水塩２７．８〃
ホウ酸６．２〃硫酸マンガン・４水塩２２．３〃硫酸亜
鉛・７水塩１．０３〃ョウ化カリウム０．８３″モリブ
デン酸ソーダ・２水塩０．２５〃硫酸第一銅０．０２５
〃塩化コバルト０．０２５″ビタミンＢＯ．４０〃イノ
シトール１００〃塩酸ピリドキシン０．５０〃ニコチン
酸０．５０〃グリシン２．００〃シユークロース３０．
０夕寒天８．０夕ナフタリン酢酸０．１の９上記成分を
脱イオン水に溶かして１そとし、ｐＨ６．３に調整し、
殺菌する。

この培養によって子球が分化し、１切片につき１〜５個
の子球が分化した塊，が得られる。

この塊を殺菌したメスとピンセットでリン片を分割し、
その１つを１０の９／そのカイネチンを含む５０の‘の
寒天培地（第１表組成の培地にカィネチン１０の上を添
加したもの）を含む直径９肌，深さ２肌のシャーレに移
植する。これを２５０，２５００ルクス照明下５０日間
培養すると、２５川固のリン片を主体とする撚りとなる
。この塊りのリン片は、リン片の大きさとして長さ０．
１〜１．０弧に達しているが、このままでは分割して子
球形成の材料として用いることはできない。この塊を１
００のＺの液体培地（第１表組成の培地から寒天を除き
、シュークロースの添加量を９０夕としたもの）を含む
３００の上客のコニカル・ビーカーに１個移植する。こ
れを毎分１８０回転，振中５伽のロータリーシェーカー
上で、２５℃，３００ルクスの蛍光灯照明下で培養を行
うと、２５日後に０．５〜４．０肌に生育したリン片を
主体とする塊となる。根は出ているものもあるが、この
段階では僅かである。この塊を無菌的に取出し、滅菌ピ
ンセットを用いて個々のリン片を分割し、直径９肌、深
さ２肌のべトリ皿中の寒天培地（第１表組成の培地のう
ちシュークロースを９０のこ変更した培地）５０の‘に
１シャーレ当り１９固のリン片を移植し、２５ｏｏ，６
０日間静置培養すると、暦床したリン片から子球および
根が新生するとともに著しく肥大し、球根が形成される
。かくしてユリの種苗が得られる。本実施例では中程度
の球根のリン片１枚から１２０日間で１万個のリン片が
得られ、これらはさらに６０日間寒天上で培養すること
によって約２５００の固の種苗を形成した。

形成された種苗は土壌に移植し通常の栽培法により生育
，開花せしめることができた。実施例２実施例１において増殖，肥大したリン片を贋床する直径
９肌，深さ２弧のべトリ皿の寒天塔地に替えて、１００
似の液体培地（第１表組成の培地から寒天を除いた培地
）を含む３００の‘ェルレンマイャー・フラスコにフラ
スコ当りリン片１３固を移植し、２５ｑ０，３０日間毎
分１８０回転，振中５肌のロータリーシェーカ−上で振
とう培養すると実施例１とほぼ同数のュリ種苗が得られ
た。

本実施例によれば実施例１と較べ省力化が可能となった
。実施例３実施例１において、液体培養を３〆客のガラ
ス製４・型培養槽を用い、培地を２そとし、通気量毎分
２そで２５日間行う以外は実施例１と同様に行うと、中
程度の大きさの球根のリン片１枚から実施例１と同様約
１２０日間で約１０００針固のリン片が得られた。

これらのリン片は実施例２の液体塔地を入れたェルレン
マィャーフラスコに替えて２その液体培地を入れた３そ
客のガラス製小型培養槽を用いて２５ｑ０，通気量毎分
１そで５０日間鷹梓培養することによって、約２５００
の固の種苗を形成した。実施例４実施例１において、ャ
マュ川こ替えて、カノコュリの球根のリン片を用い、培
地のカィネチンに替えてペンジルアデニン１の９を用い
、液体培養を実施例３と同様に行う以外は実施例１と同
様に行って、中程度の球根１球から１２０日間で１００
０００個のリン片を作ることができ、その後、実施例３
の３そ容のガラス製４・型培養槽に替えて２０そのガラ
ス製４・型培養槽を用い、培地を１５そとし、通気量毎
分７そで５０日間培養することによって、約２５０００
の固の種苗が得られた。

実施例５実施例１において、ャマュ川こ替えてテッポウユリの球
根のリン片を用い、実施例１と同様寒天塔地上で子球を
形成した。

Claims

【特許請求の範囲】

１ユリ属植物の組織片を固体培地上で培養し子球を形
成させ、この子球のリン片を分離し、生長促進物質を含
有する固体培地上に移植し、リン片を分化させリン片塊
を得、このリン片塊をさらに液体培地で振盪，撹拌培養
し、個々のリン片を肥大させた後分離し、分離したリン
片を固体培地または液体培地で静置培養するか、あるい
は液体培地で振盪，撹拌培養して子球を形成させること
を特徴とするユリ種苗の大量増殖法。