JPS594994B2 - 発酵法によるｌ−メチオニンの製造法 - Google Patents
発酵法によるｌ−メチオニンの製造法Info
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- JPS594994B2 JPS594994B2 JP13616680A JP13616680A JPS594994B2 JP S594994 B2 JPS594994 B2 JP S594994B2 JP 13616680 A JP13616680 A JP 13616680A JP 13616680 A JP13616680 A JP 13616680A JP S594994 B2 JPS594994 B2 JP S594994B2
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Description
【発明の詳細な説明】
この発明は発酵法によるＬ−メチオニンの製造法に関し
、詳しくは、メタノールを炭素源とする発酵法によるＬ
−メチオニンの製造法に関する。
、詳しくは、メタノールを炭素源とする発酵法によるＬ
−メチオニンの製造法に関する。
メタノールを炭素源とする発酵法によるし一メチオニン
の製造法については、プロタミノバクタ−属、シュード
モナス属およびアクロモバクタ−属のエチオニンに耐性
を有する変異株がＬ−メチオニンを生産することが知ら
れている（特開昭５Ｏ−３１０９２）。
の製造法については、プロタミノバクタ−属、シュード
モナス属およびアクロモバクタ−属のエチオニンに耐性
を有する変異株がＬ−メチオニンを生産することが知ら
れている（特開昭５Ｏ−３１０９２）。
本発明者らは、メチロモナス属に属し、エチオニオンお
よびα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸に耐性を有する
変異株が、メタノールを炭素源としてより高い効率でＬ
−メチオニンを生産することを見い出した。
よびα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸に耐性を有する
変異株が、メタノールを炭素源としてより高い効率でＬ
−メチオニンを生産することを見い出した。
即ちこの発明は、メチロモナス
（Ｍｅｔｈｙｌ ｏｍｏｎａｓ ） 属に属し、エチオ
ニンおよびα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸に耐性を
有し、Ｌ−メチオニン生産能を有する変異株を、炭素源
としてメタノールを使用して培養し、培地中に生成、蓄
積されたし一メチオニンを採取することを特徴とする発
酵法によるし一メチオニンの製造法である。
ニンおよびα−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸に耐性を
有し、Ｌ−メチオニン生産能を有する変異株を、炭素源
としてメタノールを使用して培養し、培地中に生成、蓄
積されたし一メチオニンを採取することを特徴とする発
酵法によるし一メチオニンの製造法である。
本発明において使用される変異株は、上に述べたように
、メチロモナス属に属し、エチオニンおよびα−アミノ
−β−ヒドロキシ吉草酸ｔこ耐性を有する変異株である
。
、メチロモナス属に属し、エチオニンおよびα−アミノ
−β−ヒドロキシ吉草酸ｔこ耐性を有する変異株である
。
このような変異株は、Ｎ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−
ニトロソグアニジンに接触せしめる等の通常の変異方法
により得られる。
ニトロソグアニジンに接触せしめる等の通常の変異方法
により得られる。
変異処理後、エチオニンおよびα−アミノ−β−ヒドロ
キシ吉草酸に耐性を有する変異株を選別する方法は、そ
の親株が生育できないような量のエチオニン又はα−ア
ミノ−β−ヒドロキシ吉草酸を含有する培地中又は培地
上に生育できるような変異株を分離すればよい。
キシ吉草酸に耐性を有する変異株を選別する方法は、そ
の親株が生育できないような量のエチオニン又はα−ア
ミノ−β−ヒドロキシ吉草酸を含有する培地中又は培地
上に生育できるような変異株を分離すればよい。
本発明の変異株を具体的に例示すれば、以下のものがあ
る。
る。
メチロモナス・チオメドゲネス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎ
ａｓ ｔｈｉｏｍｅｄｏｇｅｎｅｓ） ＯＥＡ ９（Ａ
Ｊ１１６２７）（ＦＥＲＭ−Ｐ５７２１）（エチオニン
耐性、α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性） 上記例示の変異株は、野性株ＯＭ３３ （ＡＪｌ １６
２５ ） （ＦＥＲＭ−Ｐ ５７１９ ）を親株として
変異誘導されたものである。
ａｓ ｔｈｉｏｍｅｄｏｇｅｎｅｓ） ＯＥＡ ９（Ａ
Ｊ１１６２７）（ＦＥＲＭ−Ｐ５７２１）（エチオニン
耐性、α−アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性） 上記例示の変異株は、野性株ＯＭ３３ （ＡＪｌ １６
２５ ） （ＦＥＲＭ−Ｐ ５７１９ ）を親株として
変異誘導されたものである。
０Ｍ３３は新菌種であり、その菌学的性質は以下のとお
りである。
りである。
０Ｍ３３の菌学的性質
（ａ） 形態
１）細胞の形および大きさ：
桿菌０．３〜０．５ Ｘ Ｏ，６〜２．５μ２）細胞の
多形性の有無；なし。
多形性の有無；なし。
３）運動性の有無：あり、極鞭毛。
４）胞子の有無：なし。
５）ダラムの染色性、陰性。
６）抗酸性：陰性。
（ｂ） 各培地における生育状態
１）肉汁寒天平板培養（メタノール１．０チ入）＝１〜
２１ｆｔ７ｒＬ、円形、凸円状、金縁、円滑、半透明〜
不透明、混光、バタ一様光沢、均質、黄味臼〜うす黄色
。
２１ｆｔ７ｒＬ、円形、凸円状、金縁、円滑、半透明〜
不透明、混光、バタ一様光沢、均質、黄味臼〜うす黄色
。
２）肉汁寒天斜面培養（メタノール１．０％人）：中程
度の生育、薄膜状、糸状、うす黄色〜うす茶色。
度の生育、薄膜状、糸状、うす黄色〜うす茶色。
３）肉汁液体培養（メタノール１．０係人）：均一に濁
る、わずかに粉状沈澱がある、表面に膜は形成しない。
る、わずかに粉状沈澱がある、表面に膜は形成しない。
４）肉汁ゼラチン穿刺培養：液化しない。
５）リドマス・ミルク：変化なし。
６）その他：メタノールを含有しない肉汁培地では生育
しない。
しない。
（ｃ）生理学的性質
１）硝酸塩の還元：弱く還元する。
２）脱窒反応：陰性。
３）ＭＲテスト：陰性。
４）ＶＰテスト：陰性。
５）インドールの生成：陰性。
６）硫化水素の生成：陰性。
７）デンプンの加水分解：陰性。
８）クエン酸の利用：
Ｋｏｓｅｒ培地で利用しない。
Ｃｈｒ １ｓｔｅｎｓｅｎ培地で利用しない。
９）無機窒素源の利用：
硝酸塩を利用する。
アンモニウム塩を利用する。
１０）色素の生成：生成しない。
１１）ウレアーゼ：陰性。
１２）オキシダーゼ：陽性。
１３）カタラーゼ：陽性。
１４）生育の範囲：
温度 ３０℃で生育するが３７℃で生育しない。
ｐＨ６〜９゜
１５）酸素に対する態度：好気性。
１６）０−Ｆテスト（Ｈｕｇｈ ＆ Ｌｅｉｆｓｏｎ法
による）： 酸を生成しない。
による）： 酸を生成しない。
１７）糖類から酸およびガスの生成の有無：酸の生成
ガスの生成 Ｌ−アラビノース −− Ｄ−キシロース −− Ｄ−グルコース −− Ｄ−マンノース −− Ｄ−フラクトース −− 麦芽糖 −− ショ糖 −− 乳糖 −− トレハロース −− Ｄ−ソルビット −− Ｄ−マンニット −− イノジット −− グリセリン −− デンプン −− ラフィノース −− アトニット −− サリシン −− ズルシット −− ラムノース − １８）マロン酸の利用： （Ｅｗｉｎｇ ｅｔ ａｌ、の方法） １９）フェニルアラニンのデアミナーゼ反応：陰性（Ｅ
ｗｉｎｇ ｅｔ ａｌ 、の方法）２０デ力ルボキシラ
ーゼ反応： （ＭΦ１１ｅｒ−の方法） リジン：陰性 オルニチン：陰性 アルギニン：陰性 ２１）アルギニンジヒドロラーゼ反応： 陰性（５ｔａｎｉｅｒ ｅｔ ａｌ 、の方法）２２）
Ｐｏｌｙ−β−ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｃの蓄積
の有無： 蓄積しない。
ガスの生成 Ｌ−アラビノース −− Ｄ−キシロース −− Ｄ−グルコース −− Ｄ−マンノース −− Ｄ−フラクトース −− 麦芽糖 −− ショ糖 −− 乳糖 −− トレハロース −− Ｄ−ソルビット −− Ｄ−マンニット −− イノジット −− グリセリン −− デンプン −− ラフィノース −− アトニット −− サリシン −− ズルシット −− ラムノース − １８）マロン酸の利用： （Ｅｗｉｎｇ ｅｔ ａｌ、の方法） １９）フェニルアラニンのデアミナーゼ反応：陰性（Ｅ
ｗｉｎｇ ｅｔ ａｌ 、の方法）２０デ力ルボキシラ
ーゼ反応： （ＭΦ１１ｅｒ−の方法） リジン：陰性 オルニチン：陰性 アルギニン：陰性 ２１）アルギニンジヒドロラーゼ反応： 陰性（５ｔａｎｉｅｒ ｅｔ ａｌ 、の方法）２２）
Ｐｏｌｙ−β−ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｃの蓄積
の有無： 蓄積しない。
２３）下記の化合物の資化性（５ｔａｎｉｅｒの培地に
よる） Ｄ−グルコース −メサコン酸 −トレ
ハロース −エリスリトール −２−ケ
ト−ブレコン酸 −２，３−フ゛チレフグリコ→レーメ
ソーイノシット −メタ−安息香酸 −Ｌ
→マリン −ノラー安息香酸 −β−アラ
ニン −トリプタミンＤＬ−７’／喀ン
−α−アミルアミンベタイン −Ｄ
Ｌ−乳酸 り乳酸クーアラビノース −トフラクトースサツカロー
ス −マロン酸 プロピオン酸 −テストステロン酪 酸
−セロビオース ア、ユツト −ＤＬ−β−・イド口
−オキシブチレート プロピレングリコ→し −Ｌ−ヒスチジン
−エタノ→し −パントテン酸
−Ｄ−キシロース −酢 酸
−Ｄ−リボース −コハク酸
−Ｌ−ラムノース −クエン酸
−ホリソル喝−ト８０ −Ｌ−オル
ニチン −レブリン酸 −５−
ケトーク’／ｌ／：Ｉン酸 −シトラコン酸
−Ｌ−リジン −メソ−酒石酸 −Ｌ
−アラニン −Ｄ（−）−酒石酸 −ズルシ
ット −ソルビトール −メタノール
＆メチルアミン ＋ジメチルアミン、エタノールアミン
、ギ酸、トリメチルアミン、ジエチルアミン、エチルア
ミン、ホルムアミドおよびホルムアルデヒド、グリセロ
ール、ピルビン酸、ラクトースは資化しない。
よる） Ｄ−グルコース −メサコン酸 −トレ
ハロース −エリスリトール −２−ケ
ト−ブレコン酸 −２，３−フ゛チレフグリコ→レーメ
ソーイノシット −メタ−安息香酸 −Ｌ
→マリン −ノラー安息香酸 −β−アラ
ニン −トリプタミンＤＬ−７’／喀ン
−α−アミルアミンベタイン −Ｄ
Ｌ−乳酸 り乳酸クーアラビノース −トフラクトースサツカロー
ス −マロン酸 プロピオン酸 −テストステロン酪 酸
−セロビオース ア、ユツト −ＤＬ−β−・イド口
−オキシブチレート プロピレングリコ→し −Ｌ−ヒスチジン
−エタノ→し −パントテン酸
−Ｄ−キシロース −酢 酸
−Ｄ−リボース −コハク酸
−Ｌ−ラムノース −クエン酸
−ホリソル喝−ト８０ −Ｌ−オル
ニチン −レブリン酸 −５−
ケトーク’／ｌ／：Ｉン酸 −シトラコン酸
−Ｌ−リジン −メソ−酒石酸 −Ｌ
−アラニン −Ｄ（−）−酒石酸 −ズルシ
ット −ソルビトール −メタノール
＆メチルアミン ＋ジメチルアミン、エタノールアミン
、ギ酸、トリメチルアミン、ジエチルアミン、エチルア
ミン、ホルムアミドおよびホルムアルデヒド、グリセロ
ール、ピルビン酸、ラクトースは資化しない。
２４）ＤＮＡのＧＣ含有量：５１．６％（Ｔｍ法）。
２５） ３−へキュスロース・フォスフェートシンター
ゼ活性を有する。
ゼ活性を有する。
２６）ハイドロキシピルベート・レダクターゼ活性を有
さない。
さない。
０Ｍ３３の固定
０Ｍ３３はグラム陰性で極鞭毛を有する運動性の桿菌で
、メタノール、モノメチルアミンのみを炭素源として資
化できるが、その他の炭素源は資化できない。
、メタノール、モノメチルアミンのみを炭素源として資
化できるが、その他の炭素源は資化できない。
メタノールの資化経路としてリブロースモリノン酸経路
を利用し、セリン経路は利用しない。
を利用し、セリン経路は利用しない。
ｒＢＥＲＧＥＹＳＭＡＮＵＡＬＯＦＤＥＴＥＲＭＩ−Ｎ
ＡＴＩＶＥ ＢＡＣＴＥＲＩＯＬＯＧＹＪ第８版によれ
ば、本菌株はメチロモナス属に属する。
ＡＴＩＶＥ ＢＡＣＴＥＲＩＯＬＯＧＹＪ第８版によれ
ば、本菌株はメチロモナス属に属する。
同文献に記載されたメチロモナス属に属する菌株は、い
ずれもメタンを炭素源として利用できるが、本菌株は利
用できない点が大きく異なっている。
ずれもメタンを炭素源として利用できるが、本菌株は利
用できない点が大きく異なっている。
一方、同文献には記載されていないが、近年メチロモナ
ス属に属すると同定された微生物としてメチロモナス・
メタノロボランス（大野、浜田、高田、熱井、Ｊ 、
Ｆｅｒｍｅｎｔ 、 Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 ５５ 。
ス属に属すると同定された微生物としてメチロモナス・
メタノロボランス（大野、浜田、高田、熱井、Ｊ 、
Ｆｅｒｍｅｎｔ 、 Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 ５５ 。
２９５（１９７７））、メチロモナス・アミノファシェ
ンス（賭方、和泉、河盛、浅野、谷、Ｊ。
ンス（賭方、和泉、河盛、浅野、谷、Ｊ。
Ｆｅｒｍｅｎｔ 、 Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 、 ５５、
４４４（１９７７））、メチルモナス・メタノロフイラ
（銘木、キューン、ベルグルンド、ウンデン、ベデン、
Ｊ 、 Ｆｅｒｍｅｎｔ 、 Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 ５
５、４５９（１９７７））、メチロモナス・メチロポー
ラ（河野、沖、封材、尼崎、Ｊ 、 Ｇｅｎ 、 Ａｐ
ｐｌ 。
４４４（１９７７））、メチルモナス・メタノロフイラ
（銘木、キューン、ベルグルンド、ウンデン、ベデン、
Ｊ 、 Ｆｅｒｍｅｎｔ 、 Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 ５
５、４５９（１９７７））、メチロモナス・メチロポー
ラ（河野、沖、封材、尼崎、Ｊ 、 Ｇｅｎ 、 Ａｐ
ｐｌ 。
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ 、 、ユ９，１１（１９７３））
、メチロモナス・サラシカ（白木らＪ 、 Ｆｅｒｍｅ
ｎｔ 。
、メチロモナス・サラシカ（白木らＪ 、 Ｆｅｒｍｅ
ｎｔ 。
Ｔｅｃｈｎｏｌ 、 、 ５８、９９ （１９８０）
）、メチロモナス・クララ（ホーンローゼルら、 Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ 、 Ａｐｐｌ ｉｅｄ Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌ ａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 、
６、１６７ （１９７８） ）、メチロモナスＭ１５
（ザーム、ワグナ− Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ 、 Ａｐｐｌ ｉｅｄ 、 Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ。
）、メチロモナス・クララ（ホーンローゼルら、 Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ 、 Ａｐｐｌ ｉｅｄ Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌ ａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 、
６、１６７ （１９７８） ）、メチロモナスＭ１５
（ザーム、ワグナ− Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ 、 Ａｐｐｌ ｉｅｄ 、 Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ。
２．１４７（１９７５））が知られているが、本菌株は
これらいずれの菌株とも性質を異にしている。
これらいずれの菌株とも性質を異にしている。
即ち、メチロモナス・メタノロボランスは、水溶性色素
を生成すること、メチルアミンの資化性がない点が本菌
株と異なっている。
を生成すること、メチルアミンの資化性がない点が本菌
株と異なっている。
メチロモナス・アミノファシェンスは、アセトインの生
成（ＶＰテスト）がみられること、３７℃で生育するこ
と、ポリベータハイドロキシ酪酸の蓄積がみられること
、メチルアミンの資化性がないことが本菌株と異なり、
メチロモナス・メタノロフイラとは、アセトインの生成
がみられること、３７℃で生育すること、メチルアミン
の資化性がないことが本菌株と異なっている。
成（ＶＰテスト）がみられること、３７℃で生育するこ
と、ポリベータハイドロキシ酪酸の蓄積がみられること
、メチルアミンの資化性がないことが本菌株と異なり、
メチロモナス・メタノロフイラとは、アセトインの生成
がみられること、３７℃で生育すること、メチルアミン
の資化性がないことが本菌株と異なっている。
さらに、メチロモナス・メチロポーラは、メチルアミン
の資化性がないこと、メチロモナス・サラシカは生育に
ＮａＣｌおよびビタミンＢ１□を要求すること、３７℃
で生育すること、ＧＣ含量が４３．８−４７．３％と低
い点、ホルムアルデヒドの資化性を有することなどが異
なっている。
の資化性がないこと、メチロモナス・サラシカは生育に
ＮａＣｌおよびビタミンＢ１□を要求すること、３７℃
で生育すること、ＧＣ含量が４３．８−４７．３％と低
い点、ホルムアルデヒドの資化性を有することなどが異
なっている。
またメチロモナス・クララは、メタンの資化性を有する
こと、モノメチルアミンの資化性を有さないこと、３７
℃で生育すること、ＧＣ含量が低いことなどが、メチロ
モナスＭ１５は４２℃でも生育すること、メチルアミン
の資化性がない点などが本菌株とは異なっている。
こと、モノメチルアミンの資化性を有さないこと、３７
℃で生育すること、ＧＣ含量が低いことなどが、メチロ
モナスＭ１５は４２℃でも生育すること、メチルアミン
の資化性がない点などが本菌株とは異なっている。
以上の結果により本菌をメチロモナス属に属する新菌種
と固定し、メチロモナス・チオメドゲネスと命名した。
と固定し、メチロモナス・チオメドゲネスと命名した。
このような変異株を培養する培地としては、メタノール
炭素源として含有するほかは、通常の培地が使用できる
。
炭素源として含有するほかは、通常の培地が使用できる
。
即ち、炭素源としてメタノール窒素源、無機イオンおよ
び必要によりアミノ酸、有機酸等の有機微量栄養素を含
有するものである窒素源としては、アンモニアガス、ア
ンモニア水アンモニウム塩、硝酸、硝酸塩等が好ましい
。
び必要によりアミノ酸、有機酸等の有機微量栄養素を含
有するものである窒素源としては、アンモニアガス、ア
ンモニア水アンモニウム塩、硝酸、硝酸塩等が好ましい
。
有機微量栄養素としてビタミンＢ１２を使用すれば、よ
りよい結果が得られる。
りよい結果が得られる。
又、金儲無機、又は有機化合物を培地に添加すれば、よ
り望ましい結果が得られる場合が多い。
り望ましい結果が得られる場合が多い。
メタノールは、培地中の濃度があまり高くならないよう
、遂次補給添加するのが好ましい。
、遂次補給添加するのが好ましい。
培養は好気的条件下で行うのが好ましく、培養の間ｐＨ
を５ないし８に調節し、温度を２５ないし３５℃とすれ
ば、より好ましい結果が得られる。
を５ないし８に調節し、温度を２５ないし３５℃とすれ
ば、より好ましい結果が得られる。
かくして２ないし５日間も培養すれば、培地中に著量の
Ｌ−メチオニンが蓄積される。
Ｌ−メチオニンが蓄積される。
培養液よりＬ−メチオニンを採取する方法としては、イ
オン交換樹脂を用いる方法等の通常の方法が適用できる
。
オン交換樹脂を用いる方法等の通常の方法が適用できる
。
実施例 １
１ 変異株の誘導
メチロモナス・チオメドゲネス０Ｍ３３の菌体を、２５
０ｐｇ／ｒｔｔｌのＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニ
トロソグアニジンを含有する０、１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ
７，０）にけん濁し、３０℃に１５分間保った。
０ｐｇ／ｒｔｔｌのＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニ
トロソグアニジンを含有する０、１Ｍ燐酸緩衝液（ｐＨ
７，０）にけん濁し、３０℃に１５分間保った。
エチオニン耐性を獲得した変異株を分別し、これより最
もＬ−メチオニンの生産性の高い変異株ＯＥＩ ２０（
ＡＪ １１６２６）（ＦＥＲＭ−Ｐ ５７２０ ）を得
た。
もＬ−メチオニンの生産性の高い変異株ＯＥＩ ２０（
ＡＪ １１６２６）（ＦＥＲＭ−Ｐ ５７２０ ）を得
た。
０Ｅ１２０を、Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロ−Ｎ−ニトロソ
グアニジンを用いて上記と同様に変異処理し、更にα−
アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性も獲得した変異株を
得た。
グアニジンを用いて上記と同様に変異処理し、更にα−
アミノ−β−ヒドロキシ吉草酸耐性も獲得した変異株を
得た。
これより、最もＬ−メチオニンの生産性の高い変異株０
ＥＡ９を得た。
ＥＡ９を得た。
２０ＥＡ９の薬剤耐性度
１１当り、メタノール１０ｇ、（ＮＨ４）２ＳＯ４３，
Ｏｇ、に２ＨＰ０．２、Ｏｇ、 ＮａＣＡ１．０＆ 、
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，２ｇ、ビタミン混合液１０１
１Ｌｌを含み、更にＬ−エチオニン又はＤＬ−α−アミ
ノ−β−ヒドロキシ吉草酸を第１表に示す量添加した培
地を調製し、このｐＨを７．０に調節した培地の４ゴを
試験管に入れ加熱殺菌した。
Ｏｇ、に２ＨＰ０．２、Ｏｇ、 ＮａＣＡ１．０＆ 、
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，２ｇ、ビタミン混合液１０１
１Ｌｌを含み、更にＬ−エチオニン又はＤＬ−α−アミ
ノ−β−ヒドロキシ吉草酸を第１表に示す量添加した培
地を調製し、このｐＨを７．０に調節した培地の４ゴを
試験管に入れ加熱殺菌した。
これに第１表に示す試験菌株を接種し、２８℃にて２！
Ｌ時間、振とうしつつ培養した。
Ｌ時間、振とうしつつ培養した。
培養後、培養液の６１０ｎｍにおける吸光度を測定して
生育度とした。
生育度とした。
結果を第１表に示す。３ Ｌ−メチオニン生産試験
５００ｒＩＬｌ容振盪フラスコに純水１１当り（ＮＨ４
）２ＳＯ４５，１，に２ＨＰＯ４４，１゜Ｍｇ５０４−
７Ｈ２００，２ｇ、ＮａＣｌ ｌ、Ｏｇ、ＦｅＣｌ３・
６Ｈ２０１０ｍ１！、ＭｎＣｌ２・４Ｈ２０２，０ｒｎ
９および酵母エキス２．０ｇをそれぞれ含有し、ｐＨを
Ｈ２ＳＯ４にて７．０に調節した生産培地５０１１Ｌｌ
を仕込んだ。
）２ＳＯ４５，１，に２ＨＰＯ４４，１゜Ｍｇ５０４−
７Ｈ２００，２ｇ、ＮａＣｌ ｌ、Ｏｇ、ＦｅＣｌ３・
６Ｈ２０１０ｍ１！、ＭｎＣｌ２・４Ｈ２０２，０ｒｎ
９および酵母エキス２．０ｇをそれぞれ含有し、ｐＨを
Ｈ２ＳＯ４にて７．０に調節した生産培地５０１１Ｌｌ
を仕込んだ。
これを１２１℃にて１０分間殺菌後、別途殺菌したメタ
ノールを最終濃度として１０ ｇ／ｌとなるように添加
した。
ノールを最終濃度として１０ ｇ／ｌとなるように添加
した。
これに上記と同組成の培地４罰を含む試験管を用いて２
８℃にて２４時間培養した第２表に示す菌株を接種し、
２８℃で振盪培養を行なった。
８℃にて２４時間培養した第２表に示す菌株を接種し、
２８℃で振盪培養を行なった。
培養２４時間後、別途殺菌したメタノールおよびＣａ
ＣＯ３を最終濃度としていずれも２０ ｊ９／１３とな
るように添加した。
ＣＯ３を最終濃度としていずれも２０ ｊ９／１３とな
るように添加した。
さらに培養４８時間後メタノールを２０ ｇ／ｌとなる
ように添加して培養を続けた。
ように添加して培養を続けた。
培養９０時間後に培養液中に生成蓄積されたし一メチオ
ニンを測定した。
ニンを測定した。
結果は第２表に示す通りである。
（Ｌ−メチオニン蓄積量は培地中に既に含有しているＬ
−メチオニン量を差引いた値を示しており、以下の実症
例においても同様である。
−メチオニン量を差引いた値を示しており、以下の実症
例においても同様である。
）実姉例 ２
実姉例１に示した生差培地に第３表に示す量のビタミン
Ｂ１□を添加し、実施例１に示した方法によりメチロモ
ナス・チオメドゲネス０ＥＡ９を培養した。
Ｂ１□を添加し、実施例１に示した方法によりメチロモ
ナス・チオメドゲネス０ＥＡ９を培養した。
９０時間培養したところ、第３表に示すようにＬ−メチ
オニンが蓄積した。
オニンが蓄積した。
実施例 ３
実姉例１に示した生産培地に第４表に足置の含硫黄化合
物を含有せしめ、実症例１に示した方法によりメチロモ
ナス・チオメドゲネス０ＥＡ９を培養した。
物を含有せしめ、実症例１に示した方法によりメチロモ
ナス・チオメドゲネス０ＥＡ９を培養した。
９０時間培養したところ、第４表に示すようにＬ−メチ
オニンが蓄積した。
オニンが蓄積した。
Claims (1)
- １ メチロモナス（Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ ） Ｆ
Ｅに属し、エチオニンおよびα−アミノ−β−ヒドロキ
シ吉草酸に耐性を有し、Ｌ−メチオニン生産能を有する
変異株を、炭素源としてメタノールを使用して培養し、
培地中に生成、蓄積されたＬ−メチオニンを採取するこ
とを特徴とする発酵法によるＬ−メチオニンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13616680A JPS594994B2 (ja) | 1980-09-30 | 1980-09-30 | 発酵法によるｌ−メチオニンの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13616680A JPS594994B2 (ja) | 1980-09-30 | 1980-09-30 | 発酵法によるｌ−メチオニンの製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5763096A JPS5763096A (en) | 1982-04-16 |
| JPS594994B2 true JPS594994B2 (ja) | 1984-02-02 |
Family
ID=15168858
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13616680A Expired JPS594994B2 (ja) | 1980-09-30 | 1980-09-30 | 発酵法によるｌ−メチオニンの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS594994B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2012010635A (ja) * | 2010-06-30 | 2012-01-19 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 含硫α−アミノ酸化合物の製造法 |
-
1980
- 1980-09-30 JP JP13616680A patent/JPS594994B2/ja not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5763096A (en) | 1982-04-16 |
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