JPS594990B2 - 抗生物質グロボマイシン - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新抗生質グロボマイシン（ＧＩＯｂＯ−Ｍｙｃ
ｉｎ）に関するものである。

本発明者らは京都市左京区の土壌から分離したＥ．ｌ３
９ｌ２株、東京都大田区の土壌から分離した▲１５６３
１株、山形県東田川郡の土壌から分離した煮１７８３４
株、神奈川県鎌倉市の土壌から分離した▲１５０３７株
などの放線菌が新抗生物質グロボマイシンを生産するこ
とを見出した。また、グロボマイシンが細菌、特にグラ
ム陰性細菌に対して既知の抗生物質に対して耐性な臨床
分離株を含めて、抗菌力を有していることを見出した。

従つてグロボマイシンはこれらの細菌に起因するヒト、
動物、または植物の疾病の予防あるいは治療に用いられ
る。グロボマイシンを生産する上記４株の放線菌の形態
学的特徴、培養基上の諸性質、生理学的性質、炭素源の
何化性はそれぞれ第１〜４表に示す通りである。

なお、可溶性色素はすべて０．０５ＮＨＣＩ又は０．０
５ＮＮａ０Ｈで色調の変化がない。

以上の性質から明らかなようにグロボマイシン生産性を
有する放線菌４株はお互いにかなり性質の異なつた菌株
であり、それぞれの菌株について既知放線菌との比較検
討を行つた結果は下記の通りである。（１）煮１３９１
２株：本菌株と最も近縁な菌株として挙げられるのは、
ストレプトマイセス・ハルステデイ（ＳｔｒｅｐｔＯｍ
ｙｃｅｓｈａｌｓｔｅｄｉｉ）〔インターナシヨナル・
ジヤーナル・オブ・システマチツク・バクテリオロジ一
（ＩｎｔｅｒｎａｔｉＯｎａｌＪＯｕｒｎａｌＯｆＳｙ
ｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉＯｌＯｇｙ）１８巻６
９頁および２７９頁（１９６８）、１９巻３９１頁（１
９６９）、２２巻２６５頁（１９７２）〕である。

従つて煮１３９１２株をストレプトマイセス・ハルステ
デイの標準菌株であるＡＴＣＣｌ３４９９株と同時培養
により比較した結果、蕉１３９１２株が茶色味を帯びた
灰色の気菌糸を着生するのに対し、ＡＴＣＣｌ３４９９
株は灰色の気菌糸を着生すること、生理学的性質として
、ミルクのペプトン化が共に陽性であるがぷ１３９１２
株の場合の最終…は４．４であるのに対してＡＴＣＣｌ
３４９９株ではＰＨ７．２である点、炭素源の同化性に
おいてＤ−セロビオースが煮１３９１２株で陰性、ＡＴ
ＣＣｌ３４９９株が陽性である点などで若干の相違が認
められたが、その他の形態学的特徴、培養基上の諸性状
、生理学的性質、炭素源の同化性において極めて一致し
た性質を示したので、Ｅ．ｌ３９ｌ２株はストレプトマ
イセス・ハルステデイと同定され、ストレプトマイセス
・ハルステデイｆ）．１３９１２と命名された。

なおストレプトマイセス・ハルステデイは既にカルボマ
イシン（ＣａｒｂＯｍｙｃｉｎ）、カルボマイシンＢ（
ＣａｒｂＯｍｙｃｉｎＢ）、エンカリン１グループ（Ｅ
ｎｃａｌｉｎｅｇｒＯｕｐ）、セフアマイシンＡ，Ｂ（
ＣｅｐｈａｍｙｃｉｎＡ，Ｂ）などの抗生物質の生産菌
として知られているが、これらの抗生物質は本発明の抗
生物質グロボマイシンと明らかに異なつている。（２）
煮１５６３１株：本菌株はその気菌糸が湿潤、黒褐色化
する点でいわゆるハイグロスコピツク（ＨｙｇｒＯｓｃ
Ｏｐｉｃ）なストレプトマイセスのグループに入れられ
るが、Ａ１デーツ（Ａ．Ｄｉｅｔｚ）の報告ゼ・アクチ
ノミセーテスリザ・バウンダリー・マイクロオーガニズ
ム、（ＴｈｅＡｃｔｉｎＯｍｙｃｅｔｅｓ，ＴｈｅＢＯ
ｕｎｄａｒｙＭｉｃｒＯＯｒｇａｎｉｓｍｓｌ凸版印刷
、１８３頁、１９７６年）によればハイグロスコピツク
なストレプトマイセスの中、胞子表面の平滑な種はスト
レプトマイセス・ネオハイグロスコピカスと命名するこ
とが提唱されており、従来、ストレプトマイセス・ハイ
グロスコピカス・バル・アングストマイセチカス（Ｓｔ
ｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｖａｒ．ａｎｇｕｓｔｍｙｃｅｔ
ｉｃｕｓ）、ストレプトマイセス・プラテンシスと命名
されていた菌株がこれに属するとされている。

しかしながらグロボマイシン生産菌の煮１５６３１株は
ハイグロスコピツクで胞子表面が平滑である性質ではこ
れらと一致するが他の形態学的、生理学的諸性質はこれ
らの菌と異なり新しい亜種と同定され、ストレプトマイ
セス・ネオハイグロスコピカス・サブスピーシーズ・グ
ロボマイセチカス（ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｎｅＯｈ
ｙｇｒＯｓｃＯｐｉｃｕｓｓｕｐｓｐ．ｇｌＯｂＯｍｙ
ｃｅｔｉｃｕｓ）煮１５６３１と命名された。

３）煮１７８３４：本菌株は顕微鏡下観察による形態学
的特徴や、各種培地上での気菌糸の色等から近縁な菌株
としてストレプトマイセス・カルノーサス（Ｓｔｒｅｐ
ｔＯｍｙｃｅｓｃａｒｎＯｓｕｓ）〔インターナシヨナ
ル・ジヤーナル・オブ・システマチツク・バクテリオロ
ジ一（ＩｎｔｅｒｎａｔｉＯｎａｌＪＯｕｒｎａｌＯｆ
ＳｙｓｔｅｍａｔｉｃＢａｃｔｅｒｉＯＩＯｇｙ）１９
巻４１２頁（１９６９）〕が挙げられる。

従つて煮１７８３４株をストレプトマイセス・カルノー
サスの標準株であるＩＦＯｌ３Ｏ２５株と同時培養によ
り比較した結果、グリセリン・アスパラギン寒天、殿粉
無機塩寒天、普通寒天上で、ｆ）．１７８３４株がそれ
ぞれ明るい茶灰、灰昧茶、白色の気菌糸を着生するのに
対し、ストレプトマイセス・カルノーサスではこれらの
培地上で気菌糸の着生が認められないこと、蕉１７８３
４株が多くの培地中に可溶性色素を産生するがストレプ
トマイセス・カルノーサスはシェークロース硝酸塩寒天
中に薄黄茶の可溶性色素を出す以外、可溶性色素の産生
が見られないこと、生理学的性質において、硝酸塩の還
元、ゼラチンの液化で相反する性質を有すること、更に
炭素源の同化性において、ブリドハム・ゴトリープ寒天
培地を基礎培地として各種炭素源を添加しても、両菌株
共不明瞭な生育しか示さない点では共通しているが、Ｄ
−キシロース、Ｄ−フラグドーズ、Ｄ−ガラクトース、
Ｄ−マンノース、マルトース、メリビオース、可溶性殿
粉などを麗１７８３４株が利用し、ストレプトマイセス
・カルノーサスが利用しない点、逆に煮１７８３４株の
利用しないコハク酸ソーダをストレプトマイセス・カル
ノーサスが利用する点などで異なる。

以上の結果から両菌株は同一種と見なすことは出来ない
と考えられ、ｆ）．１７８３４株はその分離土壌の採取
地の名に因んでストレプトマイセス・ハグロネンシス（
ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｓｈａｇｒｃｎｅｎｓｉｓ）ｆ
）．１７８３４と命名された。

（４）▲１５０３７：本菌株は車軸状分枝を有すること
からストレプトバーチシリウム属に属し、既知菌株の中
、ストレプトバーチシリウム・シンナモネウム（Ｓｔｒ
ｅｐｔＯｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍｃｉｎｎａｍＯｎｅ
ｕｍ）〔ＳＡ″ワークスマン：Ｉ′ゼ０アクチノミセー
テス７、ザ・ウイリアム・アンド・ウイルキンス・カン
パニー、ボルチモア、（Ｓ．Ａ．Ｗａｋｓｍａｎ″Ｔｈ
ｅＡｃｔｉｎＯｍｙｃｅｔｅｓｌ／／ＴｈｅＷｉｌｌｉ
ａｍｓ＆ＷｉｌｋｉｎｓＣＯｍｐａｎｙｌＢａＩｔｉｍ
Ｏｒｅ）、第２巻、１９５頁、１９６１年〕が最も近縁
な菌株として挙げられる。従つて、煮１５０３７株をス
トレプトバーチシリウム・シンナモネウムの標準株であ
るＩＳＰ５ＯＯ５株と同時に培養して比較した結果、シ
ユクロース硝酸塩寒天培地、グリセリン・アスパラギン
寒天培地上での発育がＩＳＰ５ＯＯ５株で悪いこと、硝
酸塩の還元、殿粉の加水分解、ミルクの疑固ペプトン化
がＩＳＰ５ＯＯ５株で、陰性であること、Ｄ−ガラクト
ースの利用性が▲１５０３７株で陰性、ＳＰ５ＯＯ５株
で陽性である点等で異なる以外は両菌株は極めて一致し
た性質を示したので煮１５０３７株はストレプトバーチ
シリウム・シンナモネウムと同定され、ストレプトバー
チシリウム・シンナモネウム麗１５０３７と命名された
。

なお、ストレプトバーチシリウム・シンナモネウムはフ
アンギクロミン（ＦｕｎｇｉｃｈｒＯｍｉｎ）、…卜１
４５、ＨＡ−１７６、ＨＡ−１０６、ネジナマイシン（
Ｎｅｇｉｎａｍｙｃｉｎ）などの抗生物質の生産菌とし
て知られているが、これらのいずれの抗生物質も本発明
のグロボマイシンと全く異なる性質を有するものである
。なお煮１３９１２、ｆ）．１５６３１、煮１７８３４
、および煮１５０３７株はいずれも通産省工業技術院微
生物工業技術研究所に寄託されており、その微生物受託
番号はそれぞれ微工研菌寄第４０６３、同第４０６０、
同第４０６１、同第４０６２号である。

以上、グロボマイシンの生産菌について説明したが、放
線菌の諸性質は一定したものではなく、自然的、人工的
に容易に変化することは周知の通りであり、本発明で使
用し得る菌株は、ストレプトマイセス属およびストレプ
トバーチシリウム属に属する、グロボマイシンを生産す
る菌株すべてを包含するものである。

本発明の方法における培養は一般放線菌における培養方
法に準じて行われ、液体培地での振盪培養、あるいは通
気攪拌培養によるのが好ましい。

培地成分としては放線菌の栄養源として公知のものが使
用され、たとえば炭素源としてブドウ糖、グリセリン、
マルトース、シユクロース、ラクトース、デキストリン
、殿粉、大豆油、綿実油、チキンオイル、オートミルな
どが、窒素源として、大豆粉、落花生粉、綿実粉、魚粉
、コーン・スチープ・リツカ一、ベプトン、肉工キズ、
イースト、イーストエキス、硝酸ソーダ、硝酸アンモニ
ウム、硫酸アンモニウムなどが、また無機塩としては、
食塩、燐酸塩、炭酸カルシウムなどが使用される。また
必要に応じて、タチガレン（３−ヒドロキシ５−メチル
イソオキサゾール、三共（株）社製）、微量の金属塩が
添加される。液体培養に際してはシリコン油、植物油、
界面活性剤などが消泡剤として適宜使用される。培地の
ＰＨは中性附近、培養温度は２０〜３５℃、特に２７℃
前後が好ましい。培養の経過に伴つて培養液中に生産さ
れるグロボマイシンの力価は大腸菌、エツシエリキア・
コリＳＡＮＫ７ｌ５７３株を被検菌とするデイスク検定
法によつて定量される。通常３ないし５日間の培養でグ
ロボマイシンの生産量は最高に達する。グロボマイシン
は培養液中の主として液体部分に存在する。培養終了後
、菌体その他の固形部分をけいそう土をろ過助剤とする
ろ過操作、あるいは遠心分離によつて除去し、その炉液
あるいは上清中に存在するグロボマイシンはその理化学
的性状を利用することにより抽出、精製することが出来
る。培養淵液中のグロボマイシンは水と混和しない溶媒
、たとえばｎ−ブタノール、酢酸エチル、メチルイソブ
チルケトン、ベンゼン、クロロホルム、メチレンクロラ
イドなどで抽出することが有利である。又、培養淵液中
のグロボマイシンは吸着剤を用いて採取することが出来
る。吸着剤としては活性炭末あるいは吸着用特殊樹脂デ
ユオライトＳ−３０（ダイアモンド・アルカリ社製）、
アンバーライトＸＡＤ−２（ローム・アンド・ハース社
製）、あるいはダイアイオンＨＰ−２０（三菱化成社製
）などが使用される。これらの吸着剤に吸着したグロボ
マイシンはメタノール水、アセトン水などの溶媒で溶出
される。更に、この有機溶媒による抽出、吸着剤による
吸脱着に加えて、アルミナ、シリカゲル、セフアデツク
スＬＨ−２０（フアルマシア社製）などを用いたカラム
クロマトグラフイ一あるいは適当な溶媒を用いた向流分
配法などを適宜組合わせてグロボマイシンを精製するこ
とが出来る。このような有機溶媒中の有効成分は減圧下
で濃縮乾固し、グロボマイシンを含む粗粉末として得ら
れる。更に純度の高いグロボマイシンを得るためにはシ
リカゲルを用いた調製用薄層クロマトグラフイ一が効果
的である。又、グロボマイシンの粗粉末は、アセトニト
リルなどの溶媒に加温溶解し結晶化させることが出来、
溶媒による再結を繰り返すことにより無色針の結晶が得
られる。このようにして得られたグロボマイシンの特性
は下記の通りである。

１）物質の色ど形状：無色、針状結晶 ２）融点：１１５℃ ３）比旋光度：〔α〕ＭＯ＝−０．０４９（Ｃ＝１、ク
ロロホルム）４）元素分析値： 実測値；Ｃ，５６６．Ｏ（！）；Ｈ，８．６９％；Ｎ，
ｌＯ．２２％計算値：Ｃ３２Ｈ５７Ｎ５Ｏ，・Ｈ２Ｏと
してＣ，５７．Ｏ６％；Ｈ，８．６７％；Ｎ，ｌＯ．４
ＯＯｌ） ５）分子量：６５５（ＦＤ質量分析、Ｍ＋１＝６５６か
ら算出）６）分子式：Ｃ３２Ｈ５７Ｎ５Ｏ９ ７）紫外線吸収スペクトル（第１図）： メタノール中５０μ９／ａの濃度で測定して末端吸収の
み。

８）赤外線吸収スペクトル（第２図）： クロロホルム中で測定した時の主な吸収ピークは３４０
０１２９００１１７４０、１６７０、１５５０ｃＴｎ−
１に存在する。

９）核磁気共鳴スペクトル（第３図）： 重クロロホルム中で外部基準としてＴＭＳ（テトラメチ
ルシラン）を用いて測定した核磁気共鳴スペクトルは第
３図に示す通りである。

１０）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルム
、アセトニトリルに易溶、ベンゼンに可溶、水に難溶。

１１）呈色反応：シリカゲル薄層クロマトグラフイ一上
で、５０％硫酸で茶褐色、過マンガン酸カリを脱色する
。

ニンヒドリン、ペプチド試薬、２，４−ジニトロフエニ
ルヒドラジン陰性。１２）アミノ酸分析：６Ｎ−ＨＣＩ
ｌｌＯ５℃、１８時間の加水分解でセリン、グリシン、
スレオニン、およびアロイゾロイシンのアミノ酸を与え
る。

１３）抗菌力リエツシエリキア・コリ、クレブシエラ・
ニユーモニエ、シゲラ・デイセンテリエ、シゲラ・フレ
クシネリ、シゲラ・ゾンネ、サルモネラ・タイフイ、サ
ルモネラ・パラタイフイ、サルモネラ・エンテリタイデ
イス、セラチア・マルセツセンスを含む主としてグラム
陰性細菌に対して抗菌活性を有する。

１４）シリカゲル薄層クロマトグラフイ一（タルク社製
薄層プレートＦ２５４、厚さ０．２５朋）でグロボマイ
シンは展開溶媒としてクロロホルム−メタノール（１０
：１）を用いた時のＲｆ値は０．２５、酢酸エチル−ア
セトニトリル（１：１）ではＲｆ値０．３５を示す。

１５）グロボマイシンの抗菌スペクトルは第５表に示す
通りである。

１６）マウスに対する毒性は弱く、皮下注射で２００即
／Ｋｇでも死亡するマウスはなかつた。

上記の性状よりグロボマイシンは既知の文献上のいかな
る物質とも一致しない新規抗生物質であることが明らか
である。

以上から、グロボマイシンは各種細菌感染性疾患を対照
とする抗菌剤として使用される。

その投与形態としては皮下注射、静脈内注射、筋肉注射
、坐剤などによる非経口投与法あるいは錠剤、カプセル
剤、散剤、顆粒剤などによる経口投与法があげられる。
投与量は対象疾患、投与経路および投与回数などによつ
て異なるが、例えば成人に対しては通常は１日５０η乃
至２０００Ｗ９を１回または数回に分けて投与するのが
好ましい。次に、グロボマイシンの製造法を実施例を挙
げて説明するが、本発明はもちろん、これらの方法によ
つて製造されたグロボマイシンに限定されるものではな
く、培養基の種類、培養条件、採取・精製方法などを大
巾に変えて製造し得る上記性状を有するグロボマイシン
に関するものであることは云うまでもない。

実施例 １ 麦芽工キズ・イースト寒天培地に斜面培養した煮１３９
１２株をグルコース１％、可溶性殿粉２％、イーストエ
キス０．５％、ポリペプトン（大五栄養化学社製）０．
５（ｆｌ）、大豆油０．５（：ｆ）、炭酸カルシウム０
．２％、消泡剤としてデイスフオームＣＢ４４２（日本
油脂社製）０．０１％、を含む培地（滅菌前ＰＨ７．２
）８０ｄを５００ｄ容ヘソ付三角フラスコに入れ１２０
℃、５０分滅菌、冷却後接種し、２７℃にて３日間回転
振盪培養を行つて種培養液とした。

この種培養液３００ＷＬＩをグリセリン４．５％、レン
ダーエキス（ミクニ化学産業社製）２．０％、フエザー
ミール（ヤマコ飼料社製）１．０％、炭酸カルシウム０
．２％、タチガレン０．１％、デイスフオームＣＢ４２
２Ｏ．Ｏｌ％を含む培地（滅菌後ＰＨ６．５〜６．６）
１５１を入れた３０２容ジヤーフアーメンタ一４基にそ
れぞれ接種し、回転数毎分２００回転、通気量毎分１５
１１内圧１．１Ｋｇ／ｄ１温度２７±１℃にて９６時間
培養を行い、グロボマイシンの生産量は４μ９／Ｍｌｌ
に達した。この培養液にセライト５４５（ジヨーンズ・
マンビル社製）６００９を加えてＰ過し、この戸液６５
１にメチレンクロライド６５ｊを加えて抽出した。グロ
ボマイシンを含むメチレンクロライド抽出液は減圧下に
て溶媒を留去して２００ｍ１迄濃縮した。この濃縮液を
２００ｄ０）０．０５ＮＨＣ！および２００ｄの２俤重
曹液で各１回、１００ｍ１の飽和食塩水で２回洗浄した
後、芒硝を加えて脱水し、約５ＷＬ１迄濃縮した。この
濃縮液に５００ｄ（７１）ｎ−ヘキサンを加えて、１３
．４９の油状沈殿物を得た。この沈殿物をメタノール１
％を含むクロロホルム少量に溶かし、同じ溶媒で５０９
のシリカゲルを担体として調製したカラムに吸着させ、
メタノール１〜２％を含むクロロホルムで展開溶出を行
い、１．８１の活性区分を得た。これを減圧下、溶媒を
留去・濃縮・乾固して１．８５９の粉末とした。この粉
末を用いて上記と同じ条件で１５９のシリカゲルを用い
て再クロマトグラフイ一を行い、１〜２％のメタノール
を含むクロロホルムで展開・溶出を行い、３．４１の活
性溶出区分を得て、減圧下濃縮・乾固することにより６
６４Ｔｆ！ｆのグロボマイシンの粗粉末とした。この粗
粉末のクロロホルム溶液をシリカゲル薄層プレート（タ
ルク社製、Ｆ２５４、厚さ０．２５１ｍ１）に画線塗布
し酢酸エチル−アセトニトリル（２：１）で１５ＣＴＩ
Ｌ１２回展開した後、グロボマイシンの存在する部分を
掻き取り２％メタノール−クロロホルムでシリカゲルか
ら抽出して、濃縮・乾固することにより純度６０（Ｆ６
のグロボマイシン１３０〜を得た。実施例 ２ 実施例１と同様にして３０１容ジヤーフアーメンタ一２
基を用いて培養した培養液に１％セライト５４５を加え
てろ過し、３０１の培養戸液を得た。

これを３０１（７）ＸＡＤ−２のカラムに通し、グロボ
マイシンを吸着させ、６２の水で水洗後６０％のアセト
ン水で溶出を行つた。活性区分３２を減圧下濃縮し、１
．６１とし、等量のメチレンクロライドで抽出、溶媒を
留去して５０ｍ１の油状物質とした。この油状物質を少
量の酢酸エチルに溶解し、１１のエチル−エーテルを加
えて、生ずる沈殿物を除去した。エーテル可溶部を減圧
下で濃縮・乾固し、３０ａの油状物質を得て、これを少
量の酢酸エチルに溶解し１１０）ｎ−ヘキサン中に攪拌
しながら滴下し１時間攪拌を続け、油状沈殿物としてグ
ロボマイシンを回収した。この沈殿物を１１の酢酸エチ
ルに溶解し、各５００ｄの１％重曹水、ＰＨ３．Ｏの水
、飽和食塩水で洗浄した後、芒硝を加えて脱水した。こ
の酢酸エチル溶液を濃縮・乾固することにより培養淵液
からの収率８９％で純度１．４３％のグロボマイシンの
油状物質７９を得た。この油状物質からの精製は実施例
１と同様にして、シリカゲルクロマトグラフイ一にて行
つた。実施例 ３ 実施例１の種培養培地を用い、煮１３９１２株を斜面培
養から８０ＷＬＩの培地を含む５００ｄ容ヘソ付三角フ
ラスコに接種し３日間培養した後、同一種培養培地５０
０Ｔ！１１の入つた２１容三角フラスコに移して、２日
間培養し５０１を含む１００１容タンクに接種し、４２
時間培養後生産培地（実施例１に同じ）３００１を含む
６００ノ容タンクへ移した。

それぞれ２％接種量で２７℃で培養を行つた。本培養は
２７℃、通気量毎分１５０！、回転数毎分１１０〜１５
０回転で１２０時間行つた。この場合のグロボマイシン
の培養液中生産力価は１０μ９／ａに達した。得られた
培養液３１５１に１％のセライトを加えてろ過し、炉液
３００１を得た。Ｐ液からメチレンクレライド２００′
を用いてグロボマイシンを抽出し、得られた１９０１の
抽出液を減圧下で濃縮し、３００ｄとした。培養戸液か
らの収量は８０（ｆ）で２．４９のグロボマイシンを含
有していた。これをそれぞれ５００ａ００．０５ＮＨＣ
２および２％重曹水で、更に２００ｄの飽和食塩水で２
回順次洗浄した後、芒硝で脱水した。減圧下溶媒を留去
濃縮した後、２１のｎ−ヘキサン中に滴下してグロボマ
イシン２．２８ｇを含む油状物質７６．３ｇを得た。こ
の油状物質を少量のクロロホルムに溶解して２００９の
シリカゲルを用いメタノール１（ｆｌ）を含むクロ゛口
ホルムで調製したカラムに吸着させてメタノール１〜２
（ｆｌ）を含むクロロホルムで展開・溶出を行つた。活
性溶出区分３．４１を集め、濃縮し更に各１５０９，４
５９の担体を用いたシリカゲルクロマトグラフイ一を前
者はアセトニトリルを後者はメタノール１〜２％含有ク
ロロホルムを展開溶出溶媒として用いて行い、それぞれ
４１１５．６１活性溶出区分を得た。後者の活性区分を
濃縮・乾固して２１９のグロボマイシン粗粉末とした。
この粗粉末からアセトニトリルを溶媒として再結を繰り
返すことにより精製されたグロボマイシンの無色針状結
晶１．０ｇを培養涙液からの収率３１．７％で得ること
力咄来た。次に製剤例を示す。

上記処方の粉末を混合し、３０メツシユのふるいを通し
た後、この粉末３５０Ｔｆ９を２号ゼラチンカプセルに
入れ、カプセル剤とした。

製剤例 ２注射剤 グロボマイシン５０Ｔ１９をＮ，Ｎ−ジメチルアセトア
ミド０．３ｄに溶解し、次いで１／１５Ｍ燐酸緩衝液（
ＰＨ６．９）４．７ｍ１を加え、５ｄアンプルに封入し
、常法に従つて滅菌し注射剤とした。

【図面の簡単な説明】

第１、第２および第３図はグロボマイシンの紫外線吸収
スペクトル、赤外線吸収スペクトルおよび核磁気共鳴ス
ペクトルをそれぞれ示すものである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 下記の理化学的性状を有する抗生物質グロボマイシ
   ン（Ｇｌｏｂｏｍｙｃｉｎ）。 １）物質の色と形状：無色、針状結晶 ２）融点：１１５℃ ３）比旋光度：〔α〕＾２＾５＿Ｄ°＝−０．０４９（
   ｃ＝１、クロロホルム）４）元素分析値： 実測値；Ｃ、５６．６０％、Ｈ、８．６９％；Ｈ、１０
   ．２２％計算値；Ｃ＿３＿２Ｈ＿５＿７Ｎ＿５Ｏ＿９・
   Ｈ＿２ＯとしてＣ、５７．０６％；Ｈ、８．７６％；Ｎ
   、１０．４０％５）分子量：６５５（ＦＤ質量分析、Ｍ
   ＋１＝６５６から算出）６）分子式：Ｃ＿３＿２Ｈ＿５
   ＿７Ｎ＿５Ｏ＿９７）紫外線吸収スペクトル（第１図）
   ：メタノール中５０μｇ／ｍｌの濃度で測定して末端吸
   収のみ。 ８）赤外線吸収スペクトル（第２図）： クロロホルム中で測定した時の主な吸収ピークは３４０
   ０、２９００、１７４０、１６７０、１５５０ｃｍ＾−
   ＾１に存在する。 ９）核磁気共鳴スペクトル（第３図）： 重クロロホルム中で外部基準としてＴＭＳ（テトラメチ
   ルシラン）を用いて測定した核磁気共鳴スペクトルは第
   ３図に示す通りである。 １０）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルム
   、アセトニトリルに易溶、ベンゼンに可溶、水に難溶。 １１）呈色反応：シリカゲル薄層クロマトグラフィー上
   で、５０％硫酸で茶褐色、過マンガン酸カリを脱色する
   。 ニンヒドリン、ペプチド試薬、２，４−ジニトロフェニ
   ルヒドラジン陰性。１２）アミノ酸分析：６Ｎ−ＨＣｌ
   、１０５℃、１８時間の加水分解でセリン、グリシン、
   スレオニン、およびアロイソロイシンのアミノ酸を与え
   る。 １３）抗菌力：エッシユリキア・コリ、クレプシエラ・
   ニユーモニエ、シゲラ・デイセンテリエ、シゲラ・フレ
   クシネリ、シゲラ・ゾンネ、サルモネラ・タイフィ、サ
   ルモネラ・パラタイフィ、サルモネラ・エンテリタイデ
   イス、セラチア・マルセツセンスを含む主としてグラム
   陰性細菌に対して抗菌活性を有する。 ２ 抗生物質グロボマイシンからなる抗菌剤。 ここではグロボマイシンは次の特性を有する。１）物質
   の色と形状：無色、針状結晶 ２）融点：１１５℃ ３）比旋光度：〔α〕Ｄ＾２＾５＿Ｄ°＝−０．０４９
   （ｃ＝１、クロロホルム）４）元素分析値： 実測値；Ｃ、５６．６０％；Ｈ、８．６９％；Ｎ、１０
   ．２２％計算値；Ｃ＿３＿２Ｈ＿５＿７Ｎ＿５Ｏ＿９・
   Ｈ＿２ＯとしてＣ、５７．０６％；Ｈ、８．７６％；Ｎ
   、１０．４０％５）分子量：６５５（ＦＤ質量分析、Ｍ
   ＋１＝６５６から算出）６）分子式：Ｃ＿３＿２Ｈ＿５
   ＿７Ｎ＿５Ｏ＿９７）紫外線吸収スペクトル（第１図）
   ：メタノール中５０μｇ／ｍｌの濃度で測定して末端吸
   収のみ。 ８）赤外線吸収スペクトル（第２図）： クロロホルム中で測定した時の主な吸収ピークは３４０
   ０、２９００、１７４０、１６７０、１５５０ｃｍ＾−
   ＾１に存在する。 ９）核磁気共鳴スペクトル（第３図）： 重クロロホルム中で外部基準としてＴＭＳ（テトラメチ
   ルシラン）を用いて測定した核磁気共鳴スペクトルは第
   ３図に示す通りである。 １０）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルム
   、アセトニトリルに易溶、ベンゼンに可溶、水に難溶。 １１）呈色反応：シリカゲル薄層クロマトグラフィー上
   で、５０％硫酸で茶褐色、過マンガン酸カリを脱色する
   。 ニンヒドリン、ペプチド試薬、２，４−ジニトロフェニ
   ルヒドラジン陰性。１２）アミノ酸分析：６Ｎ−ＨＣｌ
   、１０５℃、１８時間の加水分解でセリン、グリシン、
   スレオニン、およびアロイソロイシンのアミノ酸を与え
   る。 １３）抗菌力：エッシユリキア・コリ、クレブシエラ・
   ニユーモニエ、シゲラ・デイセンテリエ、シゲラ・フレ
   クシネリ、シゲラ・ゾンネ、サルモネラ・タイフィ、サ
   ルモネラ・パラタイフィ、サルモネラ・エンテリタイデ
   イス、セラチア・マルセツセンスを含む主としてグラム
   陰性細菌に対して抗菌活性を有する。 ３ 細菌に起因するヒト、動物、または植物の疾病に対
   して適用される特許請求の範囲第２項記載の抗菌剤。 ４ ストレプトマイセス属、またはストレプトバーチシ
   リウム属に属するグロボマイシン生産菌を培養して、グ
   ロボマイシンを単離することよりなる、グロボマイシン
   の製造法。 こゝではグロボマイシンは次の特性を有する。１）物質
   の色と形状：無色、針状結晶 ２）融点：１１５℃ ３）比旋光度：〔α〕＾２＾５＿Ｄ°＝−０．０４９（
   ｃ＝１、クロロホルム）４）元素分析値： 実測値；Ｃ、５６．６０％；Ｈ、８．６９％；Ｈ、１０
   ．２２％計算値；Ｃ＿３＿２Ｈ＿５＿７Ｎ＿５Ｏ＿９・
   Ｈ＿２ＯとしてＣ、５７．０６％；Ｈ、８．７６％；Ｎ
   、１０．４０％ ５）分子量：６５５（ＦＤ質量分析、Ｍ＋１＝６５６か
   ら算出）６）分子式：Ｃ＿３＿２Ｈ＿５＿７Ｎ＿５Ｏ＿
   ９７）紫外線吸収スペクトル（第１図）：メタノール中
   ５０μｇ／ｍｌの濃度で測定して末端吸収のみ。 ８）赤外線吸収スペクトル（第２図）： クロロホルム中で測定した時の主な吸収ピークは３４０
   ０、２９００、１７４０、１６７０、１５５０ｃｍ＾−
   ＾１に存在する。 ９）核磁気共鳴スペクトル（第３図）： 重クロロホルム中で外部基準としてＴＭＳ（テトラメチ
   ルシラン）を用いて測定した核磁気共鳴スペクトルは第
   ３図に示す通りである。 １０）溶解性：メタノール、酢酸エチル、クロロホルム
   、アセトニトリルに易溶、ベンゼンに可溶、水に難溶。 １１）呈色反応：シリカゲル薄層クロマトグラフィー上
   で、５０％硫酸で茶褐色、過マンガン酸カリを脱色する
   。 ニンヒドリン、ペプチド試薬、２，４−ジニトロフェニ
   ルヒドラジン陰性。１２）アミノ酸分析：６Ｎ−ＨＣｌ
   、１０５℃、１８時間の加水分解でセリン、グリシン、
   スレオニン、およびアロイソロイシンのアミノ酸を与え
   る。 １３）抗菌力：エッシユリキア・コリ、クレブシエラ・
   ニユーモニエ、シゲラ・デイセンテリエ、シゲラ・フレ
   クシネリ、シゲラ・ゾンネ、サルモネラ・タイフィ、サ
   ルモネラ・パラタイフィ、サルモネラ・エンテリタイデ
   イス、セラチア・マルセツセンスを含む主としてグラム
   陰性細菌に対して抗菌活性を有する。 ５ ストレプトマイセス属またはストレプトバーチシリ
   ウム属に属するグロボマイシン生産菌が、ストレプトマ
   イセス、ハルステデイ、ストレプトマイセス・ネオハイ
   グロスコピカス・サブスピーシーズ・グロボマイセチカ
   ス、ストレプトマイセス・ハグロネンシス、ストレプト
   バーチシリウム・シンナモネウムである特許請求の範囲
   第４項記載の製造法。 ６ ストレプトマイセス属、またはストレプトバーチシ
   リウム属に属するグロボマイシン生産菌がストレプトマ
   イセス・ハルステデイＮｏ．１３９１２（微工研菌寄第
   ４０６３号）、ストレプトマイセス・ネオハイグロスコ
   ピカス・サブスピーシーズ・グロボマイセチカスＮｏ．
   １５６３１（微工研菌寄第４０６０号）、ストレプトマ
   イセス・ハグロネンシスＮｏ．１７８３４（微工研菌寄
   第４０６１号）、ストレプトバーチシリウム・シンナモ
   ネウムＮｏ．１５０３７（微工研菌寄第４０６２号）で
   ある特許請求の範囲第５項記載の製造法。