JPS59225064A - 生理活性物質固定化用担体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、生理活性物質の固定化に用いられる担体に関
する。

酵素、補酵素、酵素阻害剤、ホルモン、抗菌剤。

抗原、抗体などの生理活性物質渣ポリアクリルアミド、
セルロース、アガロース、ガラスなどの担体に固定化し
たものは化学反応触媒５分離精製用の特異的吸着体、臨
床検査用材料、医療用材料などとして使用されている。

たとえば、　Ｗｅｌｉｋｙら（Ｎ、Ｗｅｌｉｋｙ、　Ｆ
、Ｓ、［ｌｒｏｗｎ　。

ａｎｄ　Ｅ、Ｃ，Ｄａｌｅ＋　Ａｒｃｈｉｖｅｓ　ｏｆ
　Ｂｉｏｃｈｍｉｓｔｒｙ　　ａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉ
ｃｓ、匪１〜８　（１９６９）　）はカルボキシメチル
化セルロースの微粉末にジシクロへキシルカルボジイミ
ドを用いてパーオキシダーゼを固定化している。セルロ
ースは、酵素などの生理活性物質と温和な条件で反応し
うるカルボキシル基。

エポキシ基などの官能基を導入しうる点で好ましい担体
ではあるが、微粉末状のセルロースは、取扱いにくく化
学反応触媒２分離精製用の特異的吸着体として工業的に
利用するには適していない。

本発明者らは、この点にかんがみセルロースからなる生
理活性物質固定化用担体について種々検討したところ、
単糸繊度０．５〜３０デニール、糸長１龍以上の再生セ
ルロース繊維集合体を生理活性物質固定化用担体として
使用した場合、取扱いやすく、かつ生理活性が高い固定
化物が得られることを見出し１本発明に到達したもので
ある。

本発明におけるセルロースとはグルコースがβ−１，４
−グルコシド結合した多糖類のことである。

再生グルコースは植物原料から取り出したパルプを熔解
し、再生して得られるものであり、ビスコ−スレーコン
５銅アンモニアレーヨン、　ケン化アセテートなどが含
まれる。

本発明に用いられる生理活性物質とは、たとえば酵素、
補酵素、酵素阻害剤、プロ酵素、ホルモン、抗生物質、
殺菌剤、抗癌剤、免疫反応生理活性物質等動植物などの
生理機能に重要な影響を与える物質をいう。

酵素としては、たとえばアルコール脱水素酵素。

乳酸脱水素酵素、グルコース−６−リン酸脱水素酵素、
グルコースオキシターゼ、ルシフェラーゼ。

Ｌ−アミノ酸オキシターゼ、カタラーゼ、チロシナーゼ
、パーオキシターゼなどの酸化還元酵素。

ヘキソキナーゼ、ピルビン酸脱水酵素、カルバメートキ
ナーゼ、アセテートキナーゼ、リボヌクレアーゼなどの
トランスフェラーゼ９　リパーゼ、アセチルコリンエス
テラーゼ、ステロイドエステラーゼ、アミラーゼ、セル
ラーゼ、デクストラナ−ゼ、インベルターゼ、ペプシン
、レニン、トリプシン、キモトリプシン、パパイン、フ
ィシン、トロンビン、カリクレイン、ストレプトキナー
ゼ。

ウロキナーゼ、プラスミン、プリクラーゼ。アスパラキ
ナーゼ、ウレアーゼ、ペニンリンアミダ−ゼ、アビラー
ゼなどの加水分解酵素、ピルヒン酸デカルボキシラーゼ
、アルバルターセ、スレオニンデアミナーゼなどのりア
ーゼ、グルコースイソメラーゼなどのイソメラーゼ、チ
ロシル−ＴＲＮ八シへセターゼ、アセチル−ＣｏＡシン
セターゼなどのりガーゼがあげられる。

補酵素としては、たとえばピリドキサールリン酸、ニコ
チンアデニンジヌクレオチドなどがあげられる。

酵素阻害剤としては、たとえばオホムコイドＫｕｎｉＬ
ｚ大豆トリプシン阻害剤、アプロチニン、アンチトロピ
ン■、α２−マクログロブリン、α１−アンチトリプシ
ン、αｉ　−アンチプラスミン。

プラスミノーゲンアンチアクチヘーター、ヘパリンなど
があげられる。

プロ酵素としては、たとえばプラスミノーゲン。

プロスロンビン、血液凝固第Ｘ■因子などがあげられる
。

ホルモンとしては、たとえばコルチゾン、テストロン、
エストロン、エストラジオール、プロゲステロン、イン
シュリン、ツマスタチン、ゴナドトロピンなどがあげら
れる。

抗生物質としては、たとえばクロキサシリン。

シクロキサシリン、フルクロキサシリン、アンピシリン
、ヘタシリン、タランビシリン、シクラシリン、アモキ
シシリン、ビブメシリナム、ピペラジリンなどのペニシ
リン類、セファロリジン、セファログリシン、セファレ
キシン、セファゾリン。

セファピリン、セフラジン、セフラゾール、セフオキシ
チン、セファトリジンなどのセファロスポリン類、スト
レプトマイシン、カナマイシン、フラジオマイシン、パ
ロモマイシン、ゲンタマイシン、ベカナマイシン、リボ
スタマイシン、ジベカシン、アミカシン、トブラマイシ
ン、スペクチノマイシンなどのアミノグリコシド類、オ
キシテトラサイクリン、テトラサイクリン、デメチルク
ロルテトラサイクリン、メタサイクリン、ドキシサイク
リン、メタサイクリンなどのテトラサイクリン類、エリ
スロマイシン、キクサマイシン、オレアンドマイシン、
スピラマイシン、ジョサマイシン、ミデカマイシンなど
のマクロライド類、リンコマイシン、タリンダマイシン
なとのリンコマイシン類、ミカマイシン、グラミシジン
Ｓ、グラミシジンなどのアンチグラム陽性バクテリア類
、コリスチン、ポリミキシンＢなどのポリミキシン類。

バイオマイシン、カブレオマイシン、エンビオマイシン
、サイクロセリンなどのアンチミコノへクテリウム類、
アムホテリシンＢ、ピマリシンなどのポリエンマクロラ
イド類、リファンピシン、ピロールニドリン、マイトマ
イシンＣ，アクチノマイシン、プレオマイシン、ダウノ
ルビシン、ドキソルビシン、ネオカルチノスタチンなど
があげられる。

殺菌剤としては、たとえばアクリノール、アクリルフラ
ビンなどの色素製剤、ニトロフラゾンなどのフラン製剤
、塩化ベンザルコニウム、塩化ヘンゼトニウムなどの第
４級アンモニウム塩、クロルヘキシンジンなどのグアニ
ジウム塩、ボビドンコードなどのコードの錯体１アルキ
ルジアミノエチルグリシン塩酸塩のような両性界面活性
剤などがあげられる。

抗癌剤としては、たとえばニトロゲンマスタード、ニト
ロミン、クロラムブシル、−１１′イクロフォスファミ
ド、メルフアラン、ウラシルマスタード。

マンノムスチン、ドーパン、　ＢＣＮＵ、　　）リエチ
レンメラミン、チオ−Ｔ［！ＰＡ、　Ａｚａ　−ＴＥＰ
Ａ　、　　トレニモン、インプロキュオン、ブスルファ
ン、ジメチルミレラン、ビボスルファン、エトグルシド
、エボキシプロビジン、エボキシピベラジン、ヘキサメ
チルメラミン、ジブロモマンニト−ル、ビボブロマンな
どのアルキル化剤７葉酸、アミノプリテンメトトレキセ
ート、グアニン、８−アザガニン。

６−メルカプトプリン、アザチオプリン、ウラシル、５
−フルオロウラシル５　シタラビン、アザセリン、ジア
ゾマイシンなどの代謝拮抗剤、アクチノマイシンＤ、サ
クロマイシン、マイトマイシンＣ，ダウノマイシン、プ
レオマイシン、クロモマイシン、カルジノフィリンなど
の抗生物質、５−ＨＰ、ＩＱ−１などの合成剤、チオテ
ハ、シクロホスファミド５　ドキソルビシン。ダウノル
ビシン。

ネオカルチノスタンなどの植物成分、１（ｇ−へマドポ
ルフィリン、　　Ｃｏ−プロトポルフィリン、ステイル
ベストロール、ヒドロキシウレア、プロカルバジン、メ
チルグリョキザルービスーグアニルヒドラゾン、Ｌ−ア
スパラギナーゼなどがあげられる。

免疫反応性物質とは、たとえば抗原、抗体のような免疫
学的な結合を生成しうるものをいう。抗原とは抗原抗体
反応を誘起しうる物質のことであり。

一般的にはペプチド、蛋白、多糖類、グルコプロティン
、ステロイドなどである。抗体とは抗原の刺激により生
体内に作られ抗原と特異的に結合する蛋白質のことであ
り、その化学的な実態は免疫グロブリンである。このよ
うな免疫反応性物質としては、たとえば糸状菌、酵母、
原生動物、ビールスのような微生物、それらの免疫学的
活性成分。

人および動物から分離された抗体、血清成分、毒素、ホ
ルモン、酵素、アルカロイド、細胞１組織の抽出物、血
液細胞、レクヂンなどがあげられる。

上記のような生理活性物質を後述するような固定化処理
によって支持しうる物質のことを、生理活性物質固定化
用担体といい、それ自体は生理活性を有せず、生理活性
物質が固定化されてはじめて生理活性を呈するようなも
のである。

本発明における繊維集合体とは、たとえばステープル、
紡績糸、不織布、織物、編物などの短繊維長繊維の集合
体をいう。繊維集合体を形成する単糸の繊度は０．５〜
３０デニール、好ましくは１〜２０デニール、糸長は１
問以上、好ましくは５ｍｍ以上、特に好ましくは２０ｍ
ｍ以上であることが必要である。繊度が０．５デニ一ル
未満の場合は。

強力が小さくなり、また製造が容易でない。一方３０デ
ニールをこえる場合は１重量あたりの表面積が小さくな
り、少量の生理活性物質しか固定化できない。糸長が１
ｍｍ未満の場合は微粉末のように取扱いにくくなる。

本発明における単糸繊度０．５〜３０デニ一ル１糸長１
ｍｍ以上の再生セルロース繊維集合体は、たとえば繊維
学会編「繊維便覧原ｉ１４編および基礎編」（昭和４９
年、丸善）に記載されているような公知の方法で製造す
ることができる。

再生セルロース繊維集合体への生理活性物質の固定化は
共有結合方法あるいはイオン結合法により行うことがで
きる。共有結合法により生理活性物質を固定化する場合
には再生セルロース繊維集合体にたとえばイミドヵーボ
ナ−１・基、イソンアナート基、エポキシ基、ホルミル
基、Ｍクロリド基、酸無水物基、アミノ基、カルボキシ
ル基、ジアゾニウム基、アジド基などの反応生官能基を
導入し、しかるのち生理活性物質を反応させることによ
り行うことができる。

再生セルロース繊維集合体へのイミトカーボナート基の
導入は、再生セルロース繊維集合体とブロムシアンとを
水溶液中で好ましくはｐ１１８〜１４゜とくに好ましく
はｐＨ１０〜１３１反応温度は好ましくは一５〜２０℃
、とくに好ましくは０〜１５”Ｃ１反応時間は好ましく
は１〜３０分、とくに好ましくは２〜２０分の条件で反
応させることにより行うことができる。なおｐｌ＋の調
節はホスフェートハソファーあるいは水酸化ナトリウム
などのアルカリを添加することにより行うことができる
。

再生セルロース繊維集合体へのイソシアナート基の導入
はへキサメチレンジイソシアナート、４゜４′−ジフェ
ニルメタンジイソシアナート、トルエンジイソアアナー
トキシレンジイソシアナートフェニレンジイソシアナー
トなどのポリイソアアナートをジメチルホルムアミド、
メチルエチルケント、テトラヒドロフランあるいはそれ
らの混合溶媒に好ましくは約０．１〜５０重量、とくに
好ましくは０．５〜２０重量％の濃度に溶解し、必要に
応じてＮ−メチルモルホリンあるいはトリエチレンジア
ミンなどの触媒を好ましくは約０．００１〜１０重量％
、とくに好ましくは０．０１〜０．１重量％添加し、得
られた溶液にて再生セルロース繊維集合体を好ましくは
約２０〜１２０℃、と（に好ましくは４（１−９０°Ｃ
にて、好ましくは約５分〜２４時間、とくに好ましくは
２０分〜１０時間処理することにより行うことができる
。

再生セルロース繊維集合体へのエポキシ基の導入は水酸
化ナトリウムのようなアルカリを水、アセトン、メタノ
ール、エタノール、イソプロノくノール、トルエンある
いはこれらの混合溶媒に好ましくは約０．１〜２０重量
％、とくに好ましく（よ０．５〜１０重量％の濃度にな
るように溶解し、得られた溶液で再生セルロース繊維集
合体を好ましくは０〜８０℃、とくに好ましくは１０〜
４０°Ｃの温度で好ましくは約１分〜５時間、特に好ま
しくはｌＯ分〜２時間処理して再生セルロースをアルカ
リ化した後、エピクロルヒドリン、エピブロモヒドリン
などのハロゲン化グリシジルあるし）はエチレングリコ
ール、テトラメチレングリコ−Ｊし。

ジエチレングリコール、グリセリン、ペンタエリスリト
ールなどのポリオールのポリグリシジルエーテルなどを
好ましくは１〜４重量％、とくに好ましくは５〜２０重
量％の濃度になるように反応系に添加して、好ましくは
１０−”９０°Ｃ１とくに好ましく２０〜７０°Ｃの温
度で好ましく２分〜２日間とくに好ましく２０分〜１日
間処理することにより行うことができる。

再生セルロース繊維集合体への酸無水物基の導入は無水
マレイン酸／メチルビニルエーテル共重合体、無水マレ
イン酸／スチレン共重合体、無水マレイン酸／イソブチ
レン共重合体をアセトン。

テトラヒドロフラン、ベンゼン、トルエン、ジメチルホ
ルムアミド、ジメチルスルホキシドあるいはこれらの混
合溶媒に好ましくは約０．１〜３０重量％、とくに好ま
しくは０．５〜ｌＯ重量％の濃度に溶解し、必要に応じ
て硫酸、塩酸、酢酸などを触媒として好ましく約０．０
１〜１０重量％、とくに好ましくは０．０５〜２重量％
添加し、得られた溶液にて再生セルロース繊維集合体を
好ましくは約θ〜１００°Ｃ１とくに好ましくは２０〜
８０℃で。

好ましくは約１０分〜２４時間、とくに好ましくは３０
分〜１０時間処理することにより行うことができる。

再生セルロース繊維集合体へのホルミル基の導入はグル
タルアルデヒド、グリオキザール、ジアルデヒドでんぷ
んなどのポリアルデヒドを塩酸。

硫酸、酢酸などの酸性水溶液に好ましく約　０．１〜５
０重量％、とくに好ましくは０．５〜２０重量％の濃度
になるように熔解し、得られた溶液でもって、再生セル
ロース繊維集合体を好ましくは約−２０〜１００℃、と
くに好ましくはＯ〜８０゛Ｃで好ましく約５分〜２４時
間、とくに好ましくはｌＯ分〜１０時間処理することに
より行うことができる。

再生セルロース繊維集合体への酸クロリド基の導入は塩
化アジポイル、塩化テレフタロイル、塩化シアヌルなど
の酸塩化物を水、アセトン、テトラヒドロフラン、ベン
ゼン、トルエンあるいはこれらの混合溶媒にこのましく
約０．１〜５０ｉ量％。

と（に好ましくは０．５〜２０重量％濃度になるように
溶解し、得られた溶液にて再生セルロース繊維集合体を
好ましくは約−２０〜９０℃、とくに好ましくは０〜７
０℃の温度で好ましくは約１分〜２４時間、とくに好ま
しくは５分〜ｌＯ時間処理することにより行うことがで
きる。この際、必要に応じて炭酸ナトリウム、水酸化ナ
トリウム等のアルカリを添加するのが望ましい。

再生セルロース繊維集合体へのアミノ基の導入はβ−ア
ミノアセタルデヒドジメチルアセクール。

β−アミノアセタルデヒドジエチルアセクールなどのア
ミノアセタールを好ましくは約０．１〜１２規定、とく
に好ましくは０．５〜１０規定の塩酸。

硫酸などの酸性水溶液に好ましくは約１〜２０重量％、
とくに好ましくは、２〜１０重量％の濃度になるように
熔解し、得られた溶液にて再生セルロース繊維集合体を
好ましくは０〜１００°Ｃ１とくに好ましくは２０〜８
０℃にて好ましくは１〜４８時間、とくに好ましくは２
〜２４時間処理することにより行うことができる。

再生セルロース繊維集合体へのカルボキシル基の導入は
水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリを１
に、アセトン、メタノール、エタノール、イソプロパツ
ール、トルエンあるいはこれらの混合溶媒に好ましくは
約０．１〜２０重量％。

とくに好ましくは０．５〜１０重量％の濃度になるよう
に溶解し、得られた溶液中で再生セルロース繊維集合体
を好ましく０〜８０°Ｃ９とくに好ましくは１０〜４０
℃の温度で好ましく約１分〜５時間、とくに好ましくは
１０分〜２時間処理して再生セルロースをアルカリ化し
た後、α−クロル酢酸α−ブロモ酢酸、α−コード酢酸
などのα−ハロ酢酸を好ましく０．１〜５０重量％、と
くに好ましくは０．５〜２０重量％の濃度になるように
反応系に加えて好ましくは０〜１００℃、とくに好まし
くは４０〜８０°Ｃの温度で好ましく１〜２４時間。

とくに好ましくは２〜１２時間処理することにより行う
ことができる。

再生セルロース繊維集合体へのジアゾニウム基あるいは
アジド基の導入は、カルボキシル基が導入された再生セ
ルロース繊維集合体をＷ、Ｅ、１ｌａｒｎｂｙ及びＨ，
Ｆｉｌｉｐｐｕｓｓｏｎの方法（Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ
　ｅｔＢｉｏｐｈｙｓｉｃａ　Ａｃｔａ　＋　２２０巻
、３４３頁＜　１９７０年）〕に従ってまずベンジンあ
るいはヒドラジンにより処理し、しかるのち亜硝酸によ
り処理することにより行うことができる。

種々の反応性官能基の導入方法のうち１反応試薬が取扱
いやずく２反応による機械的強度の低下が少なく、かつ
、生理活性物質を失活させることが少ない点で、エポキ
シ基、＃クロリド基、＠無水物基、カルボキシル基を導
入するのが好ましい。

このようにして反応性官能基が導入された再生セルロー
ス繊維集合体への生理活性物質の共有結合による固定化
は、生理活性物質を水あるいはメタノール、エタノール
、プロパツール、アセトン。

テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメチルスルホキシ
ド、ジメチルホルムアミドなどの水と混合しうる溶媒と
水との混合液に溶解するかあるいは分散し、得られた液
にて再生セルロース繊維集合体を好ましくは一２０〜１
００℃、とくに好ましくは０〜８０℃にて、好ましくは
５分〜１００時間。

とくに好ましくは１０分〜８０時間処理することにより
行うことができる。その際、ｐ■を好ましくは２〜１２
．とくに好ましくは４〜１０に調節するため、ホスフェ
ートあるいはアセテートなどの緩衝液を用いてもよいし
、あるいは塩酸、水酸化ナトリウムなどを添加してもよ
い。

この際、必要に応じてＮ、Ｎ′−ジシクロヘキシルカー
ポジイミト、１−シクロへキシル−５−（２−モルホリ
ノエチル）−カーポジイミドーメ）−Ｐ−）ルエンスル
ホネート、１−エチル−５−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）−カーポジイミド［酸塩、Ｎ−シクロへキシル−
５−フェニルイソオキゾリウム−３′−スルホネート、
６−クロロ−１−Ｐ−クロルヘンゼンースルホニルオキ
シベンゾトリアゾール、ジフェニルホスホリルアジドな
どの脱水縮合剤を好ましくは約０．５〜２００ｇ／ｌ、
とくに好ましくは１〜１００ｇ／　ｙの濃度になるよう
に添加することができる。

生理活性物質を共有結合により固定化する場合に、必要
に応じて、立体障害を少なくすることにより固定化され
た生理活性物質の生理活性を高める目的でスペーサーを
反応性官能基を有する再生セルロース繊維集合体と生理
活性物質の間に挿入することができる。スペーサーとし
ては１反応性官能基と生理活性物質のいずれにも反応し
うるカルホキシル基、アミノ基などの活性水素を含む基
を少なくとも２個有する化合物が好ましい。スぺ−サー
としては、たとえばアジピン酸９両末端にカルボキシル
基を有するポリエチレングリコール。

アルギン酸、カルボキシメチルセルロース。ポリアクリ
ル酸、ポリメタクリル酸、マレイン酸−メチルビニルエ
ーテル共重合体、マレイン酸−スチレン共重合体、マレ
イン酸−イソブチレン共重合体３マレイン酸−エチレン
共重合体、ポリグルタミン酸などのポリカルボン酸、ヘ
キザメチレンジアミン、ポリエチレンイミン、ポリリジ
ン、キトサン、両末端にアミノ基を有するポリエチレン
グリコール、ポリビニルアミン、アミノアセタール化ポ
リビニルアルコールなどのポリアミンがあげられる。反
応性官能基とスペーサーとの反応は。

反応性官能基と生理活性物質を直接反応させる条件と同
様の条件で行うことができる。

生理活性物質を再生セルロース繊維集合体にイオン結合
により固定化するには再生セルロース繊維集合体に、前
述の方法により、たとえばアミノ基、カルボキシル基な
どのイオン交換基を導入し。

しかるのちこのイオン交換基に生理活性物質をイオン結
合させればよい。生理活性物質のイオン結合による固定
化は、前述の共有結合による固定化の条件と同様の条件
で行うことができる。

このようにして生理活性物質が固定化された再生セルロ
ース繊維集合体は、たとえば化学反応触媒２分離・精製
用の特異的吸着体、臨床検査用材料、医用利料などとし
て使用することができる。

すなわち、生理活性物質として酵素が固定化された再生
セル０−ス繊維集合体は化学反応触媒として用いること
ができる。たとえばチロシナーセが固定化されたものは
Ｔ＝−ＤＯＰＡの製造に２アミラーゼやセルラーセが固
定化されたものはグルココースの製造に、アスパルター
ゼが固定化されたものはＬ−アスパラギン酸の製造に、
アセテートキナーゼやカルバメートキナーゼが固定化さ
れたものはＡＴＰの再生に、グリコースイソメラーゼが
固定化されたものは果糖の製造に用いることができる。

また、生理活性物質が固定化された再生セルロース繊維
集合体は分％１１精製用の特異的吸着体として用いるこ
とができる。たとえば酵素が固定化されたものは、補酵
素、酵素阻害剤の分離精製に。

補酵素あるいは酵素阻害剤が固定化されたものは酵素の
分離精製に、ホルモンが固定化されたものはホルモンレ
セプターの分離精製に、抗原が固定化されたものは抗体
の分＋Ｗ精製に、抗体が固定化されたものは抗原の分離
精製に用いることができる。またそれらの特異的吸着体
はエンザイムイミュノアノセイおよびラジオイミュノア
ソセイ用臨床検査材料として、甲状腺刺激ホルモン、甲
状腺ホルモン、インスリン、ステロイドホルモン、ヒト
胎盤性ゴナドトロピン、アンギオテンシン、α−フェト
プロテイン、フェリチン、　ｌｌＢｓ抗原などの定量に
用いることができる。そして表１に示されるように、そ
れらの特異的吸着体を用いて体液より種々の有害物質を
除去することにより種々の疾患を治療することができる
。

また、生理活性物質を固定化した再生セルロース繊維集
合体は、医療用材料として用いられる。

たとえば、ウロキナーセ、ストレプトキナーセ。

ブリノラーゼ、プラスンなどの線溶活性酵素、ヘパリン
、アンチトロンビンＩＩＩなどの血液凝固系阻害剤が固
定化されたものは、抗血栓成形材料として、血管留置カ
テーテル、バイパスチューブ、ドレンカテーテルなどに
用いることができる。抗生物質、殺菌剤などの抗菌物質
が固定化されたものは、抗菌性材料として導尿カテーテ
ルなどに用いることができる。抗癌剤が固定化されたも
のは。

癌の局所療法剤として使用することができる。

尚、このようにして得られた生理活性物質を固定した再
生セルロース繊維の強度および伸度は。

原料として使用した再生セルロース７０〜９８％を保持
しており、上記したような種々の用途の固定用担体とし
ての使用に充分にたえられるものである。

表１　絹ρ州督木ｖ７作焚への応用 表１　　（−７ｊき） 本発明により得られる担体は、取り扱いやすく。

かつ高い生理活性を付与できるという特長があるので前
記のような化学反応触媒５分離精製用の特異的吸着体、
臨床検査用材料、医療用材料などの広範囲な用途を有す
る。

以下実施例をあげて本発明をさらに具体的に説明する。

実施例１ １６．２ｇのビスコースレーヨンフィラメント糸（３０
０デニール１５０フイラメント）を２．５Ｎの水酸化ナ
トリウム水溶液６０ｇと５４０ｇのエタノールの混合溶
媒中において、２０”Ｃで１時間アルカリ処理した後、
この反応系に３０ｇのエピクロルヒドリンを添加し、５
０℃で３時間処理してグリシジル化を行った。反応後、
活性化担体中の過剰のエピクロルヒドリンを水洗して除
去した。このようにして得られた固定化用担体１ｇを抗
Ｂ型肝炎ヒト免疫グロブリン（ＩＩＢｓ抗体）の１′ｏ
１０リン酸緩衝液（’　１／　ＩＯＭ、ｐｉｔ　８．０
＞　１０　　ｍｊｌ！に７℃にて２４時間浸漬したのち
生理食塩水溶液にてよく洗浄した。このようにして得ら
れた抗Ｂ型肝炎ＨＢｓ抗体固定化繊維集合体２００　ｍ
ｇを容量１　　ｍ１４のカラムに充填し、このカラムを
通してＨＢｓ抗原＋１ｆｆｉ　１：２８の血’Ｊｉ２ｍ
Ｉｌを濾過したところ、　ｉｉｔ、過後の血漿抗原量は
１：２３に減少した。このカラムに引続き４回１：２８
の血ａ１２ｍ＊を濾過したところ濾過後の血漿抗原量は
いずれも１；２３に減少した。

比較のため、セルロース粉末について、ビスコースレー
ヨンフィラメント糸と同様にエピクロルヒドリン、引続
き　ｆｌｕｓ抗体を反応させた。　ｌｌＢｓ抗体固定化
セルロース２００ｍｇを容量Ｌ　　ｍｌのカラムに充填
し、このカラムを通してｌｌＢｓ抗原価１：２８の皿頭
２ｍρを濾過したところ止過後の血漿抗原量は１：２４
に減少した。

このカラムに引続き４回（すなわち第２回から第５回）
　　ｌｌＢｓ抗原価１：２８の血漿２ｍｌを濾過したと
ころ濾過後の抗原量は第２回と第３回力月＝２５．第４
回と第５回目が１；２６であった。

なお、　　ＨＢｓ抗原価の測定は、金井、金井編著「臨
床検査法提要」改定増補２８版（金原出版）ｘｘ−４０
に従って行った。

実施例２ １６．２ｇのビスコースレーヨンフィラメント糸。

（３００デニール１５０フイラメント、単糸繊度６デニ
ール、糸長２０　ｃｍ）を、４．８ｇの水酸化ナトリウ
ムを含むメタノール（１７，３重量％）−水（１３，７
重量％）−２−プロパツール（６９重量％）からなる混
合溶媒２９５ｇ中において５２０°Ｃで３５分間処理し
てアルカリ化した後、この反応系に７．５６　ｇのモノ
クロル酢酸を添加し、７０℃で３時間処理してカポキシ
メチル化を行った。反応後２反応系を冷却し、塩酸で処
理し２次いでカルボキシメチルレーヨン糸をｐＨ３１ａ
上になるまで水で繰り返し洗浄した後、乾燥してカルボ
キシメチル化した担体を得た。この担体の無水グルコー
ス１モル当りのカルボキシメチル基の置換度は０．２５
であり、また、その強度および伸度は夫々１．６９　ｇ
　／デニール、　　２０．１％であり、原ビスコースレ
ーヨン糸とほとんど変わらないものであった。

このようにしてカルボキシメチル化された固定化用担体
を硫酸ジヘカシン水溶液（５０ｍｇ（力価）／１００　
　ｍＡ）に１ｐＨを０．ＩＮの水酸化ナトリウム水溶液
を用いて９に調節しなから７“Ｃで２時間浸漬し、硫酸
ジベカシンが固定化された繊維集合体を得た。

この繊維集合体についてＢａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔｉ
ｌｉｓ　ＡＴｃｃ　　６６３３を検定菌として円筒平板
法にて抗菌活性の測定を行ったところ、３７°ｃ、１６
時間後に繊維集合体のまわりに阻止内が認められた。

実施例３ ビスコースレーヨンの長繊維！ｉｔ物（１２０テニ一ル
１５０フイラメント単糸繊度２．４デニールのフィラメ
ント使用、　１０ｃｍＸ　１０ｃｍ＞を２．５Ｎの水酸
化ナトリウム水溶液１０ｇと９０ｇエタノールの混合溶
媒中において、２０℃で１時間処理した。

アルカリ処理織物を塩化シアヌルの含水アセトン溶液（
塩化シアヌル１ｇを水５０　ｍｌとアセトン５０ｍ１！
、の混合液に溶解）と２０°Ｃで１時間反応させた後、
ＩＮの塩酸、引続き水で洗浄した。このようにして酸ク
ロリド基が導入された固定化用担体をウロキナーゼのリ
ン酸緩衝液（ｐＨ７，０゜１／ＩＯＭ、　２０００単位
／　ｍｎ）　　１００　ｍｌｌにより２４時間反応させ
たのち生理食塩水溶液にてよく洗浄した。線溶活性の測
定は、金井、金井編著　「臨床検査法提要」改定増補２
８版（金原出版）Ｖｌ−１０５に従ってフィブリン平板
を作成し、その上に織物片（直径１ｃｍの円形）をおき
、フィブリンの熔解を観察した。その結果、２４時間後
に。

ウロキナーゼが固定化された織物片のまわり　３．０ｃ
ｍにわたって、フィブリンが熔解しているのが認められ
た。

特許出願人　　ユニチカ株式会社

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）セルロースからなる生理活性物質固定化用担体に
   おいて、セルロースが単糸繊度０．５〜３０デニール、
   糸長１ｎ＋ｍ以上の再生セルロース繊維集合体よりなる
   ことを特徴とする生理活性物質固定化用担体。