RU2677858C2 - Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами - Google Patents

Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами Download PDF

Info

Publication number
RU2677858C2
RU2677858C2 RU2017123462A RU2017123462A RU2677858C2 RU 2677858 C2 RU2677858 C2 RU 2677858C2 RU 2017123462 A RU2017123462 A RU 2017123462A RU 2017123462 A RU2017123462 A RU 2017123462A RU 2677858 C2 RU2677858 C2 RU 2677858C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ficin
tris
vion
buffer
hcl
Prior art date
Application number
RU2017123462A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2017123462A3 (ru
RU2017123462A (ru
Inventor
Марина Геннадьевна Холявка
Валерий Григорьевич Артюхов
Виктория Александровна Королева
Original Assignee
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") filed Critical федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ")
Priority to RU2017123462A priority Critical patent/RU2677858C2/ru
Publication of RU2017123462A3 publication Critical patent/RU2017123462A3/ru
Publication of RU2017123462A publication Critical patent/RU2017123462A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2677858C2 publication Critical patent/RU2677858C2/ru

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/74Synthetic polymeric materials
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46Hydrolases (3)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицины и химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства на основе фицина, обладающего ранозаживляющим и регенерирующим действием, согласно которому осуществляют иммобилизацию фицина в буферном растворе на матрицу ионообменных волокон ВИОН КН-1 в соотношении 20 мл буферного раствора фицина в концентрации 1 мг/мл на 1 г волокон, при этом в качестве буферного раствора используют 0.05 М трис-HCl буфер с рН 7,0; далее проводят инкубирование в течение 24 часов при комнатной температуре с периодическим перемешиванием; а затем промывают образовавшийся осадок 0.05 М трис-HCl буфером с рН 7,0 до отсутствия в промывных водах фицина. Изобретение обеспечивает сокращение расхода ранозаживляющего средства за счет его высокой стабильности и пролонгированного действия. 7 ил.

Description

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано при изготовлении лекарственных средств, обладающих регенерирующим и ранозаживляющим действием. Препарат стабилен при хранении, обладает пролонгированным антимикробным и адсорбирующим действием.
Актуальной задачей современной медицины является проблема лечения гнойных ран, что связано с распространенностью ран различной этиологии, гнойными осложнениями, высокой летальностью, большими материальными затратами на лечение. По данным некоторых авторов от всех хирургических заболеваний гнойные осложнения составляют 30-35%, а летальность от них достигает 25%.
Лекарственные препараты на основе ферментов, применяемые при лечении гнойных ран, на российском рынке представлены незначительной группой лекарственных средств. Ферменты, входящие в их состав, способствуют быстрому энзиматическому очищению ран, лизису некроза и сгустков крови. Однако использование многих ферментов в свободном состоянии (в растворе) не дает высокого эффекта, т.к. фермент нестабилен в таких условиях, достаточно быстро инактивируется, не обеспечивает длительного контакта с раневой поверхностью и эффективного всасывания активного вещества. Наиболее эффективными композициями являются гели, мази и повязки, позволяющие при локальном воздействии на рану одновременно влиять на патогенную микрофлору и стимулировать процессы заживления. В хирургической практике широко применяются следующие средства: отечественный препарат "Левомеколь", из зарубежных препаратов "Фибролан", "Ируксол" и "Ируксол моно", курс лечения которыми является достаточно дорогостоящим [Патент RU 2191574, МПК А61Р 17/02, А61K 31/00, опубл. 27.10.2002].
Несмотря на разработку и внедрение новых методов лечения гнойных ран, использование лекарственных средств под повязкой является сегодня основным благодаря его доступности, простоте применения и экономической выгоде.
На сегодняшний день для воздействия на многообразие микроорганизмов, которые вызывают гнойно-воспалительный процесс, используют средства местного применения с антибиотиками и антисептиками. Однако следует отметить, что массовое, а порой бесконтрольное их применение приводит сначала к появлению, а затем к преобладанию в ране резистентной к ним микрофлоры [Патент RU 2542373, МПК А61Р 31/04, А61Р 17/02, А61K 9/06, А61K 47/48, А61K 47/34, А61K 31/4164, А61R 31/14, опубл. 20.02.2015].
Целью изобретения является создание высокоэффективного лекарственного средства, обладающего одновременно противовоспалительным, регенераторным и репаративным действием, позволяющего лечить гнойные и длительно незаживающие раны различной этиологии, не вызывая аллергических реакций.
В качестве прототипа служил СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ГНОЙНО-НЕКРОТИЧЕСКИХ РАН (SU 1814764, МПК А61K 31/557, А61K 47/48, опубл. 20.03.1995), включающий иммобилизацию ферментного препарата, с целью повышения лечебного эффекта средства, иммобилизацию проводили путем обработки 2%-ного геля хитозана 2%-ным раствором глутарового альдегида в фосфатном буфере при рН 7.5, взятых в соотношении 1:1, выдерживания его при температуре 18-20°С в течение 30 мин, после чего пропускали через гель экстракт гепатопанкреаса камчатского краба, содержащего комплекс ферментов.
Технический результат заключается в разработке способа получения нового ранозаживляющего и регенерирующего материала на основе фицина, который позволит сократить расход ранозаживляющего средства благодаря высокой стабильности препарата при температурах выше физиологических и его пролонгированному действию.
Действующим веществом предлагаемого средства является фицин, который обладает противовоспалительным действием и ускоряет процессы регенерации тканей. Фицин (КФ 3.4.22.3) - протеолитический фермент, выделенный из плодов, стеблей и листьев тропических растений рода Ficus, принадлежит к группе цистеиновых протеаз. Фермент имеет широкую субстратную специфичность и гидролизует казеин с большей скоростью, чем папаин или трипсин; предпочтительно гидролизует в белках связи тирозина и фенилаланина, в то же время совершенно не наблюдается процесс расщепление по связям аргинина и лизина. Фицин проявляет высокую активность в широком диапазоне значений рН (6.5-9.5). Его изоэлектрическая точка составляет 9.0. Фермент устойчив к денатурирующему влиянию мочевины, инактивируется при 80°С. Способность фицина воздействовать на белковые компоненты как мышечной, так и соединительной тканей делает фермент перспективным для медицины и ветеринарии, при этом он действует гораздо более эффективно, чем папаин и бромелайн [Мосолов В.В. Протеолитические ферменты. - М.: Наука, 1971. - 404 с.]. Кроме того, в качестве носителя для иммобилизации фицина (основы повязки) нами были выбраны ионообменные волокна ВИОН - ранозаживляющие материалы, характеризующиеся высокой степенью сорбции, очищающие и дезинфицирующие рану [Патент RU 2229311, МПК A61L 15/00, A61L 15/16, A61L 15/22, опубл. 27.05.2004].
Технический результат достигается тем, что в способе получения гетерогенного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами, включающем иммобилизацию ферментного препарата в буферном растворе, инкубирование и промывку, согласно изобретению, иммобилизацию фицина проводят на матрицу ионообменных волокон ВИОН КН-1 в соотношении 20 мл раствора фермента в концентрации 1 мг/мл на 1 г волокон; в качестве буферного раствора для иммобилизации на ВИОН КН-1 используют трис-HCl буфер (рН 7.0); инкубация проводится в течение 24 часов при комнатной температуре с периодическим перемешиванием; образовавшийся осадок промывают использованным при иммобилизации буфером до отсутствия в промывных водах белка.
Фиг. 1. Структура элементарного звена катеонита ВИОН КН-1 (а) и анионита ВИОН АН-1 (б). Фиг. 2. Приведена диаграмма содержания белка в препаратах фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: цитратный. 2 - ацетатный, 3 - трис-HCl, 4 - глициновый, 5 - боратный, 6 - боратный с добавлением КСl. Фиг. 3. Приведена диаграмма общей активности препаратов фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: цитратный. 2 - ацетатный, 3 - трис-НСl, 4 - глициновый, 5 - боратный, 6 - боратный с добавлением КСl. Фиг. 4. Приведена диаграмма удельной активности препаратов фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: цитратный. 2 - ацетатный, 3 - трис-НСl, 4 - глициновый, 5 - боратный, 6 - боратный с добавлением КСl. Фиг. 5. Приведена диаграмма содержания белка в препаратах фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: 1 - цитратный (1 мг/мл), 2 - цитратный (10 мг/мл), 3 - ацетатный (1 мг/мл), 4 - ацетатный (10 мг/мл), 5 - трис-НСl (1 мг/мл), 6 - трис-НСl (10 мг/мл), 7 - глициновый (1 мг/мл), 8 - глициновый (10 мг/мл). Фиг. 6. Приведена диаграмма общей активности препаратов фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: 1 - цитратный (1 мг/мл), 2 - цитратный (10 мг/мл), 3-ацетатный (1 мг/мл), 4 - ацетатный (10 мг/мл), 5 - трис-НСl (1 мг/мл), 6 - трис-НСl (10 мг/мл), 7 - глициновый (1 мг/мл), 8 - глициновый (10 мг/мл). Фиг. 7. Приведена диаграмма удельной активности препаратов фицина, иммобилизованных на ВИОН КН-1: 1 - цитратный (1 мг/мл), 2 - цитратный (10 мг/мл), 3 - ацетатный (1 мг/мл), 4 - ацетатный (10 мг/мл), 5 - трис-НСl (1 мг/мл), 6 - трис-НСl (10 мг/мл), 7 - глициновый (1 мг/мл), 8 - глициновый (10 мг/мл).
В качестве объекта исследования был выбран фицин быка фирмы «Sigma-Aldrich», субстратом для гидролиза служил азоказеин фирмы «Sigma-Aldrich», носителями для иммобилизации - ионообменные волокна ВИОН КН-1 и ВИОН АН-1 (фиг. 1А и 1Б, соответственно). Содержание белка в препаратах определяли методом Лоури [Lowry О.Н., Rosebrough N.J., Faar A.L., Randall R.J. Protein measurement with folin-phenol reagent // J. Biol. Chem. - 1951. - V. 193. - P. 265-275.]. Методики подготовки носителей подробно описаны в работе [Kovaleva Т.A., Kholyavka M.G., Takha A.S. Development of a Heterogenous Biocatalyst on the basis of Immobilized Inulinase Preparation from Kluyveromyces marxianus // Biotechnology in Russia. - 2007. - №3. - P. 106-116]. Статистическую обработку полученных результатов проводили при уровне значимости 5% с использованием t-критерия Стьюдента.
На первом этапе экспериментов для получения гетерогенных биокатализаторов на основе фицина, иммобилизованного на матрице ионообменных волокон ВИОН КН-1 и ВИОН АН-1, в качестве иммобилизационной среды мы использовали следующие буферные растворы: 0.05 М глициновый (рН 8.6-10.0), 0.2 М ацетатный (рН 4.0-5.0), 0.1 М цитратный (рН 3.0-6.0), 0.1 фосфатный (рН 6.0-8.0), 0.05 М боратный буфер с добавлением KCl (рН 8.0-10.0), 0.1 М боратный буфер без добавления KCl (8.0-10.0) и 0.05 М трис-HCl буфер (рН 7.0-9.3), 0.1 карбонатный (9.0-10.0).
В ходе выполнения эксперимента по определению содержания белка было выявлено, что сорбция белка на матрице ионообменного волокна ВИОН КН-1 происходит при использовании цитратного (рН 3.0-4.0), ацетатного (4.0-5.0), трис-HCl (рН 7.0), глицинового (рН 8.6-9.0), боратного (рН 9.0-10.0) и боратного с добавлением KCl (рН 10.0) буферов.
Установлено, что наибольшее содержание белка (в мг на г носителя) в препаратах фицина, иммобилизованных на матрице ионообменных волокон ВИОН КН-1, наблюдается при иммобилизации в следующих буферных растворах: цитратный (рН 3.0-4.0), глициновый (рН 8.6), боратный (рН 9.0-10.0) (фиг. 2).
Высокую общую активность (в ед на мл раствора) показали препараты фицина, приготовленные с помощью ацетатного буфера (рН 4.0 и 5.0), трис-HCl буфера (рН 7.0) и глицинового буфера (рН 8.6) (фиг. 3).
Максимальная удельная активность (в ед на мг белка) гетерогенного биокатализатора на основе фицина, сорбированного на матрице ионообменного волокна ВИОН КН-1, наблюдается при использовании ацетатного буфера (рН 5.0) и трис-HCl буфера (рН 7.0) (фиг. 4).
При разработке гетерогенного биокатализатора на основе фицина, иммобилизованного на матрице ионообменного волокна ВИОН АН-1, выяснилось, что активность полученных препаратов существенно ниже, чем при иммобилизации фермента на ВИОН КН-1, поэтому в дальнейших исследованиях ВИОН АН-1 не использовался.
На втором этапе эксперимента мы увеличили концентрацию фицина в иммобилизационной среде в 10 раз и использовали цитратный (рН 4.0.), ацетатный (рН 4.0-5.0), трис-HCl (рН 7.0) и глициновый (рН 8.6) буферы. Наибольшее содержание белка (по сравнению с препаратами, где исходная концентрация белка в иммобилизационной системе равнялась 1 мг/мл) наблюдалось в препаратах, сорбированных с использованием следующих буферных систем: ацетатный (рН 4.0-5.0), трис-HCl (рН 7.0) и глициновый (рН 8.6) буферы (фиг. 5). Удельная активность гетерогенных биокатализаторов с концентрацией фермента 10 мг/мл в ходе иммобилизации оказалась существенно ниже по сравнению с препаратами, полученными при концентрации энзима 1 мг/мл. Общая активность образцов при использовании концентрации фицина 10 мг/мл была выше лишь для ацетатного буфера (рН 5.0) в сравнении с концентрацией 1 мг/мл (фиг. 6 и 7).
Технология синтеза ВИОН КН-1, тканых и нетканых прошивных полотен из него известна и легко осуществима на заводах по производству полиакрилонитрильного волокна [Патент RU 2102544, МПК D01F 11/04, C08J 5/20, опубл. 20.01.1998]. Сочетание недорогих компонентов позволит сделать доступным этот технологичный метод для отечественных лабораторий.
Известно, что иммобилизация фермента на нерастворимом носителе позволяет решить несколько важных задач для медицины: 1) получение препаратов пролонгированного действия, благодаря стабилизации и увеличению времени полужизни фермента, 2) решение проблемы диффузии вещества в организме, 3) направленное регулирование оптимумов функционирования препарата (температурный оптимум, оптимум рН).
Нами разработана методика получения ранозаживляющего и регенерирующего гетерогенного препарата медицинского и ветеринарного назначения на основе фицина и ионообменного волокна ВИОН КН-1. Препарат обладает выраженным разрушающим эффектом по отношению к бактериальным биопленкам, что характеризует его как эффективное средство борьбы с гнойными осложнениями ран, вызванными микроорганизмами различных таксономических групп. Кроме того, препарат не проявляет цито- и генотоксических свойств по отношению к клеткам пациентов.
Предлагаемый нами продукт - современная безопасная альтернатива антибиотикам и химиопрепаратам при лечении ран и раневых инфекций, в том числе устойчивых к действию антибиотиков.

Claims (1)

  1. Способ получения средства, обладающего ранозаживляющим и регенерирующим действием, на основе фицина, включающий иммобилизацию фицина в буферном растворе на матрицу ионообменных волокон ВИОН КН-1 в соотношении 20 мл буферного раствора фицина в концентрации 1 мг/мл на 1 г волокон, при этом в качестве буферного раствора используют 0.05 М трис-HCl буфер с рН 7,0; инкубирование в течение 24 часов при комнатной температуре с периодическим перемешиванием; промывание образовавшегося осадка 0.05 М трис-HCl буфером с рН 7,0 до отсутствия в промывных водах фицина.
RU2017123462A 2017-07-03 2017-07-03 Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами RU2677858C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017123462A RU2677858C2 (ru) 2017-07-03 2017-07-03 Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017123462A RU2677858C2 (ru) 2017-07-03 2017-07-03 Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2017123462A3 RU2017123462A3 (ru) 2019-01-10
RU2017123462A RU2017123462A (ru) 2019-01-10
RU2677858C2 true RU2677858C2 (ru) 2019-01-22

Family

ID=64977339

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2017123462A RU2677858C2 (ru) 2017-07-03 2017-07-03 Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2677858C2 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2744457C1 (ru) * 2020-07-28 2021-03-09 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения иммобилизованного ферментного препарата на основе фицина, гиалуроновой кислоты и полисахаридов, модифицированных виниловыми мономерами
RU2769243C1 (ru) * 2021-05-26 2022-03-29 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина и низкомолекулярного хитозана
RU2771183C1 (ru) * 2021-08-13 2022-04-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения препарата фицина в геле на основе карбоксиметилцеллюлозы
RU2792784C1 (ru) * 2022-07-28 2023-03-24 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения гибридного препарата фицина и n-малеоилхитозана в виде густого раствора

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2229311C2 (ru) * 2001-11-22 2004-05-27 Общество с ограниченной ответственностью "Айтуар -НП" Ранозаживляющий материал

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2229311C2 (ru) * 2001-11-22 2004-05-27 Общество с ограниченной ответственностью "Айтуар -НП" Ранозаживляющий материал

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Yildiz H. et al. Catalase immobilization in cellulose acetate beads and determination of its hydrogen peroxide decomposition level by using a catalase biosensor / Artificial Cells Blood Substitutes and Biotechnology, 2004, V.32, N.3, pp.443-452. *
Ташмухамедова Ш.С. и др. ИФА стафилококкового токсина с применением полиамидных микропористых мембран / Вопросы медицинской химии, 1996, Т.42, N.1, с.39-45. *
Холякова М.Г. и др. Гетерогенные биокатализаторы на основе трипсина, иммобилизованного на матрице ионообменных волокон / МЕДИАЛЬ, 2015, Т.15, N.1, с.294. *
Холякова М.Г. и др. Гетерогенные биокатализаторы на основе фицина, иммобилизованного на матрице хитозана / МЕДИАЛЬ, 2015, Т.15, N.1, с.293. *
Холякова М.Г. и др. Гетерогенные биокатализаторы на основе фицина, иммобилизованного на матрице хитозана / МЕДИАЛЬ, 2015, Т.15, N.1, с.293. Холякова М.Г. и др. Гетерогенные биокатализаторы на основе трипсина, иммобилизованного на матрице ионообменных волокон / МЕДИАЛЬ, 2015, Т.15, N.1, с.294. Yildiz H. et al. Catalase immobilization in cellulose acetate beads and determination of its hydrogen peroxide decomposition level by using a catalase biosensor / Artificial Cells Blood Substitutes and Biotechnology, 2004, V.32, N.3, pp.443-452. Ташмухамедова Ш.С. и др. ИФА стафилококкового токсина с применением полиамидных микропористых мембран / Вопросы медицинской химии, 1996, Т.42, N.1, с.39-45. *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2744457C1 (ru) * 2020-07-28 2021-03-09 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения иммобилизованного ферментного препарата на основе фицина, гиалуроновой кислоты и полисахаридов, модифицированных виниловыми мономерами
RU2769243C1 (ru) * 2021-05-26 2022-03-29 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина и низкомолекулярного хитозана
RU2771183C1 (ru) * 2021-08-13 2022-04-28 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения препарата фицина в геле на основе карбоксиметилцеллюлозы
RU2792784C1 (ru) * 2022-07-28 2023-03-24 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения гибридного препарата фицина и n-малеоилхитозана в виде густого раствора
RU2792783C1 (ru) * 2022-07-28 2023-03-24 федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный университет" (ФГБОУ ВО "ВГУ") Способ получения гибридного препарата фицина и ацетата хитозана в виде густого раствора
RU2813131C1 (ru) * 2023-07-21 2024-02-06 Общество с ограниченной ответственностью "Айтуар-НП" Ранозаживляющий материал, обладающий антимикробными свойствами, и способ его получения

Also Published As

Publication number Publication date
RU2017123462A3 (ru) 2019-01-10
RU2017123462A (ru) 2019-01-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Baidamshina et al. Anti-biofilm and wound-healing activity of chitosan-immobilized Ficin
US6056955A (en) Topical treatment of streptococcal infections
AU2005305461B2 (en) Debriding composition from bromelain and methods of production thereof
RU2677858C2 (ru) Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина, обладающего ранозаживляющими и регенерирующими свойствами
Martínez et al. Immobilized keratinase and enrofloxacin loaded on pectin PVA cryogel patches for antimicrobial treatment
Dosadina et al. The effect of immobilization, drying and storage on the activity of proteinases immobilized on modified cellulose and chitosan
Gudmundsdóttir et al. Potential use of Atlantic cod trypsin in biomedicine
CN107929719B (zh) 一种冻干人血浆活化凝血因子vii浓制剂的大规模生产制备方法
EP1345634A2 (en) Removal of targeted proteases with proteinaceous wound dressings containing growth factors
JPH02219571A (ja) 修飾プロテアーゼ及びその製造法
CN107254460B (zh) 一种羧甲基壳聚糖/海藻酸钠复合海绵固定化木瓜蛋白酶及其应用
RU2677343C2 (ru) Способ получения гетерогенного препарата на основе бромелайна, обладающего ранозаживляющими свойствами
RU2712690C1 (ru) Способ получения препарата папаина в геле на основе пищевого хитозана и сукцината хитозана
RU2677873C2 (ru) Способ получения гетерогенного препарата на основе папаина
RU2771183C1 (ru) Способ получения препарата фицина в геле на основе карбоксиметилцеллюлозы
KR100377279B1 (ko) 트롬빈의제조방법
RU2792785C1 (ru) Способ получения композиционного препарата бромелайна и альгината натрия в виде густого раствора
RU2769243C1 (ru) Способ получения гетерогенного ферментного препарата на основе фицина и низкомолекулярного хитозана
RU2678435C2 (ru) Способ получения гетерогенного препарата на основе коллагеназы и хитозана
RU2792783C1 (ru) Способ получения гибридного препарата фицина и ацетата хитозана в виде густого раствора
RU2712528C1 (ru) Способ получения препарата коллагеназы в геле на основе пищевого хитозана и сукцината хитозана
RU2788455C1 (ru) Способ получения композиционного препарата папаина и альгината натрия в виде густого раствора
Slovakova Kinetic, stability, and activity of the nanoparticles-immobilized enzymes
RU2795425C1 (ru) Способ получения гибридного препарата папаина и карбоксиметилцеллюлозы в виде густого раствора
RU2819793C1 (ru) Способ получения гибридного препарата бромелайна и аскорбата хитозана в виде густого раствора

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20200704