JPS59198986A - Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法 - Google Patents
Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法Info
- Publication number
- JPS59198986A JPS59198986A JP7302883A JP7302883A JPS59198986A JP S59198986 A JPS59198986 A JP S59198986A JP 7302883 A JP7302883 A JP 7302883A JP 7302883 A JP7302883 A JP 7302883A JP S59198986 A JPS59198986 A JP S59198986A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- serine
- carboxymethyl
- cysteine
- reaction
- tryptophan
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、Ｓ−カルボキシメチル−Ｌ−システィンの製
造法に関する。更に詳しくは、ｌ・リブトファン・シン
ターゼの存在下でチオグリコール酸とＬ−セリンからＳ
−カルボキシメチル−Ｌ−システィンを製造する方法に
関する。
造法に関する。更に詳しくは、ｌ・リブトファン・シン
ターゼの存在下でチオグリコール酸とＬ−セリンからＳ
−カルボキシメチル−Ｌ−システィンを製造する方法に
関する。
Ｓ−カルボキシメチル−Ｌ−７ステインは医薬として有
用であり、現在は有機合成法によって製造されている。
用であり、現在は有機合成法によって製造されている。
有機合成法で製造されるＳ−カルボキシメチル−Ｔ、−
システィンはＤ Ｔ、型であり、医薬として有効なＬ型
を得るには光学分割が必要である。本発明の方法では、
安価なチオグリコール酸およびＬ−セリンを原料にして
一段の反応で医薬として有用なＬ型のみが得られる利点
を有する。
システィンはＤ Ｔ、型であり、医薬として有効なＬ型
を得るには光学分割が必要である。本発明の方法では、
安価なチオグリコール酸およびＬ−セリンを原料にして
一段の反応で医薬として有用なＬ型のみが得られる利点
を有する。
トリプトファン・シンターゼ＋ｄ細菌やカビ類に存在す
る酵素でインドール化合物とセリンからトリプトファン
等を合成する多機能酵素の一種である。本酵素の生産微
生物としては、例えば、エシェリヒア＄コリＡＴＣＣ１
５４９１、ノイロスポラ・クラツプＡＴＣＣ１４６９２
などを挙げることが出来る。
る酵素でインドール化合物とセリンからトリプトファン
等を合成する多機能酵素の一種である。本酵素の生産微
生物としては、例えば、エシェリヒア＄コリＡＴＣＣ１
５４９１、ノイロスポラ・クラツプＡＴＣＣ１４６９２
などを挙げることが出来る。
エシェリヒア・コリの培養菌体からのトリプトファン・
シンターゼの抽出法については、Ｔｈｅ Ｊｏ−ｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙＸＶｏｌ ２５２゜煮１９，６５９４〜６５９９頁（
１９７７年）、ノイロスポラ・クラッナの培養菌体から
の抽出法については、同Ｖｏ１．２５０．漸８．２９４
１〜２９４６ （１９７５年）に詳細に記載されてい
る。
シンターゼの抽出法については、Ｔｈｅ Ｊｏ−ｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ
ｙＸＶｏｌ ２５２゜煮１９，６５９４〜６５９９頁（
１９７７年）、ノイロスポラ・クラッナの培養菌体から
の抽出法については、同Ｖｏ１．２５０．漸８．２９４
１〜２９４６ （１９７５年）に詳細に記載されてい
る。
本発明に使用されるトリプトファン・シンターゼは必ず
しも純粋である必要はない。す々わち、本酵素の生産菌
の培養液から遠心分離などの方法により課取した生菌体
、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処
理などの処理により得られた菌体処理物、更にはこれら
の菌体よりの抽出物並０・に該抽出物より得られる酵素
の１１１製物であっても利用可能である。寸だ、こね、
らの固定化酵素寸たは固定化菌体でもよい。
しも純粋である必要はない。す々わち、本酵素の生産菌
の培養液から遠心分離などの方法により課取した生菌体
、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処
理などの処理により得られた菌体処理物、更にはこれら
の菌体よりの抽出物並０・に該抽出物より得られる酵素
の１１１製物であっても利用可能である。寸だ、こね、
らの固定化酵素寸たは固定化菌体でもよい。
トリプ］・ファン・シンターゼ生産菌を培養するための
培地としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応
じて少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地土
たは天然培地の倒れも使用可能である。菌株によっては
少量のｌ−ＩＪブトファン、インドニルまたはアノトラ
ニル酸を培地（（添加する必要がある。培地のｐＨは微
生物によって異なるが、細菌の場合（は中性才たは微ア
ルカリ性、酵母寸たけカビの場合１は中性寸たは微アル
カリ性がよい。培養温度は通常３０〜３７℃である。
培地としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応
じて少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地土
たは天然培地の倒れも使用可能である。菌株によっては
少量のｌ−ＩＪブトファン、インドニルまたはアノトラ
ニル酸を培地（（添加する必要がある。培地のｐＨは微
生物によって異なるが、細菌の場合（は中性才たは微ア
ルカリ性、酵母寸たけカビの場合１は中性寸たは微アル
カリ性がよい。培養温度は通常３０〜３７℃である。
本発明に使用するＩ、−セリンは遊離のＬ−セリンでも
その塩でもよい。寸たＤ Ｌ−セリンでもよいが、その
場合、ＤＬ−セリンの中のＤ−セリンは反応しない。
その塩でもよい。寸たＤ Ｌ−セリンでもよいが、その
場合、ＤＬ−セリンの中のＤ−セリンは反応しない。
チオグリコール酸も遊離型でも塩でもよい。
捷た使用する酵素によっては補酵素のピリドキサール燐
酸を微量添加した方が望まｊ〜い。
酸を微量添加した方が望まｊ〜い。
反応の温度は２０〜４０℃、望−ましくけ３０〜６７℃
がよい。
がよい。
反応液のｐＨは６０〜１００、望ましくは８０〜８５が
よい。
よい。
本発明の方法によって製造されるＳ−カルボキシメチル
−Ｌ−システィンは医薬として有用である。
−Ｌ−システィンは医薬として有用である。
以下実施例により更に本発明を説明する。
実施例１
ゴム栓付試験管に、２×１０−４モル濃度のピリドキサ
ール燐酸水溶液０．１ ｎｒｌ！、 ２ ｍｇ／ｍｌ
！の結晶トリプトファン・シンターゼ溶液（溶媒は下記
の通り） （：Ｊ、２ｍ１ｉ、 ０．１モル濃度のＬ
−セリンを含む０．２モル燐酸カリウム緩衝液（１）Ｈ
８，Ｏ） ０．３ ｄ、。
ール燐酸水溶液０．１ ｎｒｌ！、 ２ ｍｇ／ｍｌ
！の結晶トリプトファン・シンターゼ溶液（溶媒は下記
の通り） （：Ｊ、２ｍ１ｉ、 ０．１モル濃度のＬ
−セリンを含む０．２モル燐酸カリウム緩衝液（１）Ｈ
８，Ｏ） ０．３ ｄ、。
更に、０１１モル濃のチオグリコール酸ナトリウムを含
む０２モル燐酸カリウム緩衝液（＋）Ｈ８，Ｏ）０、８
、？Ｉｌを順次加え、窒素気流中で３０℃、１０時間
反応させた。なお、結晶トリプトファン・シンターゼを
溶解させた溶媒の組成は次の通りである。
む０２モル燐酸カリウム緩衝液（＋）Ｈ８，Ｏ）０、８
、？Ｉｌを順次加え、窒素気流中で３０℃、１０時間
反応させた。なお、結晶トリプトファン・シンターゼを
溶解させた溶媒の組成は次の通りである。
溶Ｓ相成
０２モル燐酸カリウム緩衝液（ｐＨ７，８） ５
ｔｒｄ２Ｘ１０−’ モルピリドキザール燐酸水溶液 ５ ｍ９／ ｍｅ 濃度の牛血清アルブミ／を含む５０
ミリモルの燐酸カリウム緩衝液 （ｐＨ７，８） １ ｍ
ｌ！５０ミリモル濃度のＥＤＴＡ −２に＋水溶液 １
ｍｌ庶糖 ２７ ディチオスレイトール ２マイク
ロモル水を加えて１０ｍ１とする。
ｔｒｄ２Ｘ１０−’ モルピリドキザール燐酸水溶液 ５ ｍ９／ ｍｅ 濃度の牛血清アルブミ／を含む５０
ミリモルの燐酸カリウム緩衝液 （ｐＨ７，８） １ ｍ
ｌ！５０ミリモル濃度のＥＤＴＡ −２に＋水溶液 １
ｍｌ庶糖 ２７ ディチオスレイトール ２マイク
ロモル水を加えて１０ｍ１とする。
反応後、シリカゲルの薄層クロマト（ＤＣ−Ｆｅｒｔｉ
−ｇｐｌａｔｔｅｎ ＫＩＥＳＥＴ、 ＧＥＬ６０ Ｆ
−２５４）溶媒ｎ−ブタノール、耐酸、水（１２：３：
５）、２５℃で展開後、ニンヒドリンで発色、５０℃で
３０分間放置後、高車製作所製、三波長クロマトスキャ
ナー（反射光測定）で定量し、反応液中に０．４マイク
ロモルのＳ−カルボキシメチルシスティンが生成した事
が判った。
−ｇｐｌａｔｔｅｎ ＫＩＥＳＥＴ、 ＧＥＬ６０ Ｆ
−２５４）溶媒ｎ−ブタノール、耐酸、水（１２：３：
５）、２５℃で展開後、ニンヒドリンで発色、５０℃で
３０分間放置後、高車製作所製、三波長クロマトスキャ
ナー（反射光測定）で定量し、反応液中に０．４マイク
ロモルのＳ−カルボキシメチルシスティンが生成した事
が判った。
実施例２
実施例１と同じ反応条件であるが、実施例１の１００倍
の規模で反応を行なった。反応後、カラムクロマトグラ
フィーを使って反応生成物を分離、活性炭で精製後減圧
濃縮し、再結晶の後、白色の結晶を得た。この結晶の元
素分析、赤外および紫外吸収スペクトル、ＮＭＲ１旋光
度の測定等の結果から、この結晶はＳ−カルボキシメチ
ル−Ｌ −システィンであることが判明した。
の規模で反応を行なった。反応後、カラムクロマトグラ
フィーを使って反応生成物を分離、活性炭で精製後減圧
濃縮し、再結晶の後、白色の結晶を得た。この結晶の元
素分析、赤外および紫外吸収スペクトル、ＮＭＲ１旋光
度の測定等の結果から、この結晶はＳ−カルボキシメチ
ル−Ｌ −システィンであることが判明した。
特許出願人
三井東圧化学株式会社
Claims (1)
- トリプトファン・シンターゼの存在下にチオグリコール
酸ト■・−セリンからＳ−カルボキシメチル−■、−シ
スティンを製造することを特徴とするＳ−カルボキシメ
チル−Ｔ、−システィンの製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7302883A JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7302883A JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59198986A true JPS59198986A (ja) | 1984-11-10 |
Family
ID=13506478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7302883A Pending JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS59198986A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0754759A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-01-22 | Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated | S-phenyl-l-cysteine production process |
-
1983
- 1983-04-27 JP JP7302883A patent/JPS59198986A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0754759A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-01-22 | Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated | S-phenyl-l-cysteine production process |
| US5756319A (en) * | 1995-07-18 | 1998-05-26 | Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. | Production process of S-phenyl-L-cysteine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Morino et al. | [54] Tryptophanase (Escherichia coli B) | |
| SchÖTT et al. | Purification and some properties of tryptophan synthase inactivase II from yeast | |
| JPS59198986A (ja) | Ｓ−カルボキシメチル−ｌ−システインの製造法 | |
| US4605625A (en) | Process for producing S-adenosyl-L-homocysteine | |
| JPH0657149B2 (ja) | ウレア−ゼ及びその製造法 | |
| FR2518988A1 (fr) | Procede pour preparer la l-threonine | |
| JPH05308984A (ja) | Ｌ−タガトースの製造方法 | |
| JPH0254077B2 (ja) | ||
| JPS6262157B2 (ja) | ||
| JPH02276586A (ja) | Ｄ‐ホモフエニルアラニンの製造法 | |
| JPS58209991A (ja) | ペプチド又はペプチド誘導体の合成法 | |
| JPH0254076B2 (ja) | ||
| JPS6219098A (ja) | セリンのｄｌ混合物からｄ−体を分取する方法 | |
| JPH0453512B2 (ja) | ||
| KR830002328B1 (ko) | 효소에 의한 l-트리프토판의 제조방법 | |
| JPS6043393A (ja) | Ｌ−フエニルアラニンの製法 | |
| JPH0260318B2 (ja) | ||
| JPS5816677A (ja) | セリン・ラセマ−ゼの保存方法 | |
| KR0183447B1 (ko) | 신균주 바실러스 엘케이-1 | |
| JPH0424992B2 (ja) | ||
| Mozzarelli et al. | Functional properties of immobilized pyridoxal 5’-phosphate-dependent enzymes probed by absorption microspectrophotometry | |
| JPS623792A (ja) | Ｌ−アミノ酸の製造方法 | |
| JPS6394989A (ja) | アセチルＣｏＡの製造法 | |
| Bojanowski | Comparison of Tryptophanases Purified from Sphaerophorus Fundiliformis and Sphaerophorus Varius | |
| Nozaki et al. | Chapter VI Separation and Purification of Proteins |