JPS59198986A - S−カルボキシメチル−l−システインの製造法 - Google Patents
S−カルボキシメチル−l−システインの製造法Info
- Publication number
- JPS59198986A JPS59198986A JP7302883A JP7302883A JPS59198986A JP S59198986 A JPS59198986 A JP S59198986A JP 7302883 A JP7302883 A JP 7302883A JP 7302883 A JP7302883 A JP 7302883A JP S59198986 A JPS59198986 A JP S59198986A
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- JP
- Japan
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- serine
- carboxymethyl
- cysteine
- reaction
- tryptophan
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- Pending
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、S−カルボキシメチル−L−システィンの製
造法に関する。更に詳しくは、l・リブトファン・シン
ターゼの存在下でチオグリコール酸とL−セリンからS
−カルボキシメチル−L−システィンを製造する方法に
関する。
造法に関する。更に詳しくは、l・リブトファン・シン
ターゼの存在下でチオグリコール酸とL−セリンからS
−カルボキシメチル−L−システィンを製造する方法に
関する。
S−カルボキシメチル−L−7ステインは医薬として有
用であり、現在は有機合成法によって製造されている。
用であり、現在は有機合成法によって製造されている。
有機合成法で製造されるS−カルボキシメチル−T、−
システィンはD T、型であり、医薬として有効なL型
を得るには光学分割が必要である。本発明の方法では、
安価なチオグリコール酸およびL−セリンを原料にして
一段の反応で医薬として有用なL型のみが得られる利点
を有する。
システィンはD T、型であり、医薬として有効なL型
を得るには光学分割が必要である。本発明の方法では、
安価なチオグリコール酸およびL−セリンを原料にして
一段の反応で医薬として有用なL型のみが得られる利点
を有する。
トリプトファン・シンターゼ+d細菌やカビ類に存在す
る酵素でインドール化合物とセリンからトリプトファン
等を合成する多機能酵素の一種である。本酵素の生産微
生物としては、例えば、エシェリヒア$コリATCC1
5491、ノイロスポラ・クラツプATCC14692
などを挙げることが出来る。
る酵素でインドール化合物とセリンからトリプトファン
等を合成する多機能酵素の一種である。本酵素の生産微
生物としては、例えば、エシェリヒア$コリATCC1
5491、ノイロスポラ・クラツプATCC14692
などを挙げることが出来る。
エシェリヒア・コリの培養菌体からのトリプトファン・
シンターゼの抽出法については、The Jo−urn
al of Biological Chemistr
yXVol 252゜煮19,6594〜6599頁(
1977年)、ノイロスポラ・クラッナの培養菌体から
の抽出法については、同Vo1.250.漸8.294
1〜2946 (1975年)に詳細に記載されてい
る。
シンターゼの抽出法については、The Jo−urn
al of Biological Chemistr
yXVol 252゜煮19,6594〜6599頁(
1977年)、ノイロスポラ・クラッナの培養菌体から
の抽出法については、同Vo1.250.漸8.294
1〜2946 (1975年)に詳細に記載されてい
る。
本発明に使用されるトリプトファン・シンターゼは必ず
しも純粋である必要はない。す々わち、本酵素の生産菌
の培養液から遠心分離などの方法により課取した生菌体
、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処
理などの処理により得られた菌体処理物、更にはこれら
の菌体よりの抽出物並0・に該抽出物より得られる酵素
の111製物であっても利用可能である。寸だ、こね、
らの固定化酵素寸たは固定化菌体でもよい。
しも純粋である必要はない。す々わち、本酵素の生産菌
の培養液から遠心分離などの方法により課取した生菌体
、その乾燥菌体あるいは菌体を磨砕、自己消化、音波処
理などの処理により得られた菌体処理物、更にはこれら
の菌体よりの抽出物並0・に該抽出物より得られる酵素
の111製物であっても利用可能である。寸だ、こね、
らの固定化酵素寸たは固定化菌体でもよい。
トリプ]・ファン・シンターゼ生産菌を培養するための
培地としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応
じて少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地土
たは天然培地の倒れも使用可能である。菌株によっては
少量のl−IJブトファン、インドニルまたはアノトラ
ニル酸を培地((添加する必要がある。培地のpHは微
生物によって異なるが、細菌の場合(は中性才たは微ア
ルカリ性、酵母寸たけカビの場合1は中性寸たは微アル
カリ性がよい。培養温度は通常30〜37℃である。
培地としては、炭素源、窒素源、無機物および必要に応
じて少量の微量栄養素を含むものであれば、合成培地土
たは天然培地の倒れも使用可能である。菌株によっては
少量のl−IJブトファン、インドニルまたはアノトラ
ニル酸を培地((添加する必要がある。培地のpHは微
生物によって異なるが、細菌の場合(は中性才たは微ア
ルカリ性、酵母寸たけカビの場合1は中性寸たは微アル
カリ性がよい。培養温度は通常30〜37℃である。
本発明に使用するI、−セリンは遊離のL−セリンでも
その塩でもよい。寸たD L−セリンでもよいが、その
場合、DL−セリンの中のD−セリンは反応しない。
その塩でもよい。寸たD L−セリンでもよいが、その
場合、DL−セリンの中のD−セリンは反応しない。
チオグリコール酸も遊離型でも塩でもよい。
捷た使用する酵素によっては補酵素のピリドキサール燐
酸を微量添加した方が望まj〜い。
酸を微量添加した方が望まj〜い。
反応の温度は20〜40℃、望−ましくけ30〜67℃
がよい。
がよい。
反応液のpHは60〜100、望ましくは80〜85が
よい。
よい。
本発明の方法によって製造されるS−カルボキシメチル
−L−システィンは医薬として有用である。
−L−システィンは医薬として有用である。
以下実施例により更に本発明を説明する。
実施例1
ゴム栓付試験管に、2×10−4モル濃度のピリドキサ
ール燐酸水溶液0.1 nrl!、 2 mg/ml
!の結晶トリプトファン・シンターゼ溶液(溶媒は下記
の通り) (:J、2m1i、 0.1モル濃度のL
−セリンを含む0.2モル燐酸カリウム緩衝液(1)H
8,O) 0.3 d、。
ール燐酸水溶液0.1 nrl!、 2 mg/ml
!の結晶トリプトファン・シンターゼ溶液(溶媒は下記
の通り) (:J、2m1i、 0.1モル濃度のL
−セリンを含む0.2モル燐酸カリウム緩衝液(1)H
8,O) 0.3 d、。
更に、011モル濃のチオグリコール酸ナトリウムを含
む02モル燐酸カリウム緩衝液(+)H8,O)0、8
、?Ilを順次加え、窒素気流中で30℃、10時間
反応させた。なお、結晶トリプトファン・シンターゼを
溶解させた溶媒の組成は次の通りである。
む02モル燐酸カリウム緩衝液(+)H8,O)0、8
、?Ilを順次加え、窒素気流中で30℃、10時間
反応させた。なお、結晶トリプトファン・シンターゼを
溶解させた溶媒の組成は次の通りである。
溶S相成
02モル燐酸カリウム緩衝液(pH7,8) 5
trd2X10−’ モルピリドキザール燐酸水溶液 5 m9/ me 濃度の牛血清アルブミ/を含む50
ミリモルの燐酸カリウム緩衝液 (pH7,8) 1 m
l!50ミリモル濃度のEDTA −2に+水溶液 1
ml庶糖 27 ディチオスレイトール 2マイク
ロモル水を加えて10m1とする。
trd2X10−’ モルピリドキザール燐酸水溶液 5 m9/ me 濃度の牛血清アルブミ/を含む50
ミリモルの燐酸カリウム緩衝液 (pH7,8) 1 m
l!50ミリモル濃度のEDTA −2に+水溶液 1
ml庶糖 27 ディチオスレイトール 2マイク
ロモル水を加えて10m1とする。
反応後、シリカゲルの薄層クロマト(DC−Ferti
−gplatten KIESET、 GEL60 F
−254)溶媒n−ブタノール、耐酸、水(12:3:
5)、25℃で展開後、ニンヒドリンで発色、50℃で
30分間放置後、高車製作所製、三波長クロマトスキャ
ナー(反射光測定)で定量し、反応液中に0.4マイク
ロモルのS−カルボキシメチルシスティンが生成した事
が判った。
−gplatten KIESET、 GEL60 F
−254)溶媒n−ブタノール、耐酸、水(12:3:
5)、25℃で展開後、ニンヒドリンで発色、50℃で
30分間放置後、高車製作所製、三波長クロマトスキャ
ナー(反射光測定)で定量し、反応液中に0.4マイク
ロモルのS−カルボキシメチルシスティンが生成した事
が判った。
実施例2
実施例1と同じ反応条件であるが、実施例1の100倍
の規模で反応を行なった。反応後、カラムクロマトグラ
フィーを使って反応生成物を分離、活性炭で精製後減圧
濃縮し、再結晶の後、白色の結晶を得た。この結晶の元
素分析、赤外および紫外吸収スペクトル、NMR1旋光
度の測定等の結果から、この結晶はS−カルボキシメチ
ル−L −システィンであることが判明した。
の規模で反応を行なった。反応後、カラムクロマトグラ
フィーを使って反応生成物を分離、活性炭で精製後減圧
濃縮し、再結晶の後、白色の結晶を得た。この結晶の元
素分析、赤外および紫外吸収スペクトル、NMR1旋光
度の測定等の結果から、この結晶はS−カルボキシメチ
ル−L −システィンであることが判明した。
特許出願人
三井東圧化学株式会社
Claims (1)
- トリプトファン・シンターゼの存在下にチオグリコール
酸ト■・−セリンからS−カルボキシメチル−■、−シ
スティンを製造することを特徴とするS−カルボキシメ
チル−T、−システィンの製造法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7302883A JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | S−カルボキシメチル−l−システインの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP7302883A JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | S−カルボキシメチル−l−システインの製造法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS59198986A true JPS59198986A (ja) | 1984-11-10 |
Family
ID=13506478
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP7302883A Pending JPS59198986A (ja) | 1983-04-27 | 1983-04-27 | S−カルボキシメチル−l−システインの製造法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS59198986A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0754759A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-01-22 | Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated | S-phenyl-l-cysteine production process |
-
1983
- 1983-04-27 JP JP7302883A patent/JPS59198986A/ja active Pending
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0754759A1 (en) * | 1995-07-18 | 1997-01-22 | Mitsui Toatsu Chemicals, Incorporated | S-phenyl-l-cysteine production process |
US5756319A (en) * | 1995-07-18 | 1998-05-26 | Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. | Production process of S-phenyl-L-cysteine |
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