JPS5892691A - インタ−フエロンの安定化法 - Google Patents
インタ−フエロンの安定化法Info
- Publication number
- JPS5892691A JPS5892691A JP19098981A JP19098981A JPS5892691A JP S5892691 A JPS5892691 A JP S5892691A JP 19098981 A JP19098981 A JP 19098981A JP 19098981 A JP19098981 A JP 19098981A JP S5892691 A JPS5892691 A JP S5892691A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- interferon
- cyclodextrin
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- added
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
インターフェロンは、ウィルスあるいはその他の物質の
刺激によシヒトを含む動物細胞亡ら産生される糖−蛋白
質である。このものは間接的な作用でウィルスの増殖を
阻止することが知られてお）、さらに麺優に対する治療
効果が認められることから医薬としての応用の可能性に
多大な期待が寄せられている。
刺激によシヒトを含む動物細胞亡ら産生される糖−蛋白
質である。このものは間接的な作用でウィルスの増殖を
阻止することが知られてお）、さらに麺優に対する治療
効果が認められることから医薬としての応用の可能性に
多大な期待が寄せられている。
ヒトのインターフェロンを大量に得る方法として、ヒト
９フフ球、ヒト＃＃芽ｌｌ１ｆｌ胞又はヒト株化り／パ
芽球細胞等を大量に集め、これらの細胞に過当な刺激を
与えて産生させる。あるいは組み換えＤＮＡ技術を用い
ることによってプラス建ツドＤＩムにヒトインターフェ
ロン遺伝子を挿入するととによって微生物にヒト【／タ
ー７エロンを産生させることによっても得られる。
９フフ球、ヒト＃＃芽ｌｌ１ｆｌ胞又はヒト株化り／パ
芽球細胞等を大量に集め、これらの細胞に過当な刺激を
与えて産生させる。あるいは組み換えＤＮＡ技術を用い
ることによってプラス建ツドＤＩムにヒトインターフェ
ロン遺伝子を挿入するととによって微生物にヒト【／タ
ー７エロンを産生させることによっても得られる。
現在、インターフェロンはα型、β型、ｒ型に分類され
てお）白血球や株化リンパ芽球により生産されるのが主
としてα蓋であり、纏維芽細胞により生産される、のが
β型、主として細胞分裂剤（ｎｉｔ、ｏｇｅｎ）によ）
＠発されりンバ球の一成分であるＴ−細胞によって生産
されるのがｒ製である。以後インターフェロンの名称は
α型、β型、ｒｍで呼ぶこととする。
てお）白血球や株化リンパ芽球により生産されるのが主
としてα蓋であり、纏維芽細胞により生産される、のが
β型、主として細胞分裂剤（ｎｉｔ、ｏｇｅｎ）によ）
＠発されりンバ球の一成分であるＴ−細胞によって生産
されるのがｒ製である。以後インターフェロンの名称は
α型、β型、ｒｍで呼ぶこととする。
これらインターフェロンは一般にイオン交換クロマトグ
ラフィー、塩析、無機担体への吸着、アフイニテイクロ
マトグラフイー、金属キレートンロマトグ２フィー等の
精製手段を適用して！ＩＩＪ１１ｉされる。特に遺伝子
組み換、先手法によって微生物によシ生産されるインタ
ーフェロンは一般に菌体内に蓄積されるため、菌体から
抽出され九段階ではヒトに対して抗原性の＾い蛋白質あ
るいは発熱性物質（パイロジエン）を多く含んでいる。
ラフィー、塩析、無機担体への吸着、アフイニテイクロ
マトグラフイー、金属キレートンロマトグ２フィー等の
精製手段を適用して！ＩＩＪ１１ｉされる。特に遺伝子
組み換、先手法によって微生物によシ生産されるインタ
ーフェロンは一般に菌体内に蓄積されるため、菌体から
抽出され九段階ではヒトに対して抗原性の＾い蛋白質あ
るいは発熱性物質（パイロジエン）を多く含んでいる。
従って精製がさらに１ｉ１−である。しかるにインター
フェロンの安定性はきわめて乏しく各１１ＩＩＩＩＩ１
段階での活性の損失が大きい問題である。
フェロンの安定性はきわめて乏しく各１１ＩＩＩＩＩ１
段階での活性の損失が大きい問題である。
従来、インターフェロ／の安定性に寄与する物質はいく
つか知られている。それらは以下の様なものである。
つか知られている。それらは以下の様なものである。
１）インターフェロンへは熱失活に対しドデシル硫酸ｙ
−１（８１８） Ｋより安定化される。
−１（８１８） Ｋより安定化される。
しかしＢＤＢは蛋白との結會が強固であ）除去が不可能
であるため臨床的価値を低める。
であるため臨床的価値を低める。
Ｍ）イ：ｙｆｉ−７ｘａンαおよびβはランタン系金属
塩、★ルシウム塩によ）熱安定性が高められる。
塩、★ルシウム塩によ）熱安定性が高められる。
３）インターフェロンＩはテオクト酸ヤＮ−アーチにシ
スティンによって剪断応力にょる失活を藺止する。
スティンによって剪断応力にょる失活を藺止する。
４）インターフェロンαはトリスヒドロキシメチルアき
ツメタン、ポリすキシエチレン、ポリオ中ジグｐピレン
共重金体、ポリエチレ／グリ；−ルＯ様なポリエチレン
系非イオ／界拘活性剤、抗生物質、縦素鎖４〜１Ｇの有
機酸、キレート剤、および芳香族アミノ酸によ抄凍緒乾
燥時に安定化される。
ツメタン、ポリすキシエチレン、ポリオ中ジグｐピレン
共重金体、ポリエチレ／グリ；−ルＯ様なポリエチレン
系非イオ／界拘活性剤、抗生物質、縦素鎖４〜１Ｇの有
機酸、キレート剤、および芳香族アミノ酸によ抄凍緒乾
燥時に安定化される。
１）インターフェロンβはエチレングリコールと共に４
℃で最期間貯蔵し得る。
℃で最期間貯蔵し得る。
インターフェロンのさらに優れた安定化法の開発が０ぞ
まれており、この目的の丸めに検討の結果、インターフ
ェロンはシクロデキストリンと共存せしめることによっ
て安定化されることがわかった。
まれており、この目的の丸めに検討の結果、インターフ
ェロンはシクロデキストリンと共存せしめることによっ
て安定化されることがわかった。
シクロデキストリンは３種類が知られていて、これらは
α型、β型、ｒ型と呼ばれているが。
α型、β型、ｒ型と呼ばれているが。
これらの性質を第１ＮＫまとめて示す。
第１表 シクロデキストリンの性質
濃を形成するグルコースユニット数６ ７
８分子量 ９７３ １１３５ １２９
７績晶形（水から晶出） 針状 プリズ律 グリズ
確濠解性 ＃／１ ＠ Ｏ―水 ２５℃ １４５ １
８５ ２１℃本発−によればインターフェロンの溶液
中にシクロデキストリンを共存せしめることによって、
インターフェロ／は安定に存在する。
８分子量 ９７３ １１３５ １２９
７績晶形（水から晶出） 針状 プリズ律 グリズ
確濠解性 ＃／１ ＠ Ｏ―水 ２５℃ １４５ １
８５ ２１℃本発−によればインターフェロンの溶液
中にシクロデキストリンを共存せしめることによって、
インターフェロ／は安定に存在する。
シクロデキストリンの使用紘実麺例に示されるように員
度が濃い稠インターフェロンの安定化が計られるが、最
大はその醪解度によって制１ａｉｉｔｔ、Ｑ、１〜ｘＬ
５％（ａｇ）、０．１〜１．８１ｇ（／Ｗ）、α１〜２
３饅Ｃｒ１ｊｌ＆）で用いられる。
度が濃い稠インターフェロンの安定化が計られるが、最
大はその醪解度によって制１ａｉｉｔｔ、Ｑ、１〜ｘＬ
５％（ａｇ）、０．１〜１．８１ｇ（／Ｗ）、α１〜２
３饅Ｃｒ１ｊｌ＆）で用いられる。
インターフェロ／の精製あるいは保存中の如何なる段階
にシクロデキストリンを加えてもよい。
にシクロデキストリンを加えてもよい。
＝８８２−
インターフェロンを含有する水ｉｎｉのｐｌｉはインタ
ーフェロンαおよびβについては２から９の範囲でｒＩ
ｉｌＫついて紘６からＳのｆｌｉＢＩＫ−する必要があ
抄、この範囲外では失活が著しい。
ーフェロンαおよびβについては２から９の範囲でｒＩ
ｉｌＫついて紘６からＳのｆｌｉＢＩＫ−する必要があ
抄、この範囲外では失活が著しい。
又濠楓は低い方が好ましく安定化剤のない系で紘ｏ−ｇ
ｏ℃の範囲で取り扱・われるが後に実施例で示す通りシ
フロブキストリ／を添加することくより０〜３０℃でも
実用的に取扱−うことがで亀る。又シクロデキストリン
はインターフェロンＯ臨床的価値を損危うことがないの
で精製の途上での安定化のみならず最終製品の保存にも
適用できる。又添加量Ｏ上限は、医薬として許容される
量で限定されるが、特に制作用の認められないＩ、その
溶解度によってｗｋｉされる。本発明におけるインター
フェロン活性０１１１１定はジエンクラー・スＦマテイ
テイス・ウィルス（ｖ＠５ｉｃｕｌａｒ ５ｔＯｍｔｉ
ｔｉａυ１ｒｕａ）とヒト羊膜由来のＷｉａｈ細胞を用
い九細胞変性（ｃｐｉｃ）阻止、色素取込み法によって
測定した。又、このインターフェロンカ価は標準試料か
ら国際単位（ＩＵ）に換算し九ものである。
ｏ℃の範囲で取り扱・われるが後に実施例で示す通りシ
フロブキストリ／を添加することくより０〜３０℃でも
実用的に取扱−うことがで亀る。又シクロデキストリン
はインターフェロンＯ臨床的価値を損危うことがないの
で精製の途上での安定化のみならず最終製品の保存にも
適用できる。又添加量Ｏ上限は、医薬として許容される
量で限定されるが、特に制作用の認められないＩ、その
溶解度によってｗｋｉされる。本発明におけるインター
フェロン活性０１１１１定はジエンクラー・スＦマテイ
テイス・ウィルス（ｖ＠５ｉｃｕｌａｒ ５ｔＯｍｔｉ
ｔｉａυ１ｒｕａ）とヒト羊膜由来のＷｉａｈ細胞を用
い九細胞変性（ｃｐｉｃ）阻止、色素取込み法によって
測定した。又、このインターフェロンカ価は標準試料か
ら国際単位（ＩＵ）に換算し九ものである。
以下本発明の態様を実施例によって説明する〇実施例１
、 インターフェロン活性が２Ｘ１０’ｕｎｉｔ／−で蛋白
は２噌／−であるインターフェロンβ含有液にシクロデ
キストリンを添加して４０℃１時間放置後の活性の推移
を第１図に示し友。又α−シクロデキストリンを１５％
添加した系にお叶るインターフェロンの温度安定性を第
２図に示しえ。
、 インターフェロン活性が２Ｘ１０’ｕｎｉｔ／−で蛋白
は２噌／−であるインターフェロンβ含有液にシクロデ
キストリンを添加して４０℃１時間放置後の活性の推移
を第１図に示し友。又α−シクロデキストリンを１５％
添加した系にお叶るインターフェロンの温度安定性を第
２図に示しえ。
実施例２
ヒトリンパ芽球細胞であるナマルバ細胞なＲ’ｌ’ＭＸ
−１６４０培地にツスイＩＩ）を基礎培地とし仔牛血清
を含む培地で３７℃で培養しセンダイウィルス（ｉｖＪ
）４ｃよって１１１発、讃生させ九インターフェロ／を
含有する培養液からｓｉｍを除去し、ｐＨ２，０でウィ
ルスを失活させ丸木１１ＩＩＩ［を得え、−この培養液
はインターフェロン活性として３００００ｕ／ａｇ、蛋
白質としてａｓｓｉｍが含有されている。
−１６４０培地にツスイＩＩ）を基礎培地とし仔牛血清
を含む培地で３７℃で培養しセンダイウィルス（ｉｖＪ
）４ｃよって１１１発、讃生させ九インターフェロ／を
含有する培養液からｓｉｍを除去し、ｐＨ２，０でウィ
ルスを失活させ丸木１１ＩＩＩ［を得え、−この培養液
はインターフェロン活性として３００００ｕ／ａｇ、蛋
白質としてａｓｓｉｍが含有されている。
ζＯ液にα−シクロデキストリンをｚ５−添加し丸糸に
おけるインターフェロンの温度安定性を非添加系と比較
し九結果を第３図に示し丸。
おけるインターフェロンの温度安定性を非添加系と比較
し九結果を第３図に示し丸。
なおヒトリンパ芽球細胞によって生産されるインターフ
ェロンはα型とβ蓋の混合物であると言われているがそ
の組成比については明らかで杜ない。一般にはα型の方
がβ蓋よシもその開会が多いと言われる。
ェロンはα型とβ蓋の混合物であると言われているがそ
の組成比については明らかで杜ない。一般にはα型の方
がβ蓋よシもその開会が多いと言われる。
第１図はシクロデキストリノ濃度とイ／メーフエｐ）の
活性の関係を示す。 １：α−シクロデキストリン ２；β−シク四デキスト
リン ３：ｒ−シクロデキストリンｓａｇはα−シクロ
デキストリンの２５−添加（４）と無添加（５）Ｋおけ
るインター７エロ／βのインターフェロン活性と温度の
関係を示す。 嬉３＠はα−シクロデキストリンの２５チ添加（６）と
無添加（７）におけるナマルバ細胞由来のインターフェ
ロン活性と温度の関係を示す。 ３１月【 ぐＣン ｓ３図
活性の関係を示す。 １：α−シクロデキストリン ２；β−シク四デキスト
リン ３：ｒ−シクロデキストリンｓａｇはα−シクロ
デキストリンの２５−添加（４）と無添加（５）Ｋおけ
るインター７エロ／βのインターフェロン活性と温度の
関係を示す。 嬉３＠はα−シクロデキストリンの２５チ添加（６）と
無添加（７）におけるナマルバ細胞由来のインターフェ
ロン活性と温度の関係を示す。 ３１月【 ぐＣン ｓ３図
Claims (1)
- シクロデキストリンをインターフェロンと共存せしめる
ことを特徴とするインターフェロンの安定化法。−
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19098981A JPS5892691A (ja) | 1981-11-28 | 1981-11-28 | インタ−フエロンの安定化法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19098981A JPS5892691A (ja) | 1981-11-28 | 1981-11-28 | インタ−フエロンの安定化法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5892691A true JPS5892691A (ja) | 1983-06-02 |
Family
ID=16267005
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19098981A Pending JPS5892691A (ja) | 1981-11-28 | 1981-11-28 | インタ−フエロンの安定化法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5892691A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3520228A1 (de) * | 1984-06-06 | 1985-12-12 | Hayashibara Biochem Lab | Wasserloesliche bioaktive trockenfeststoffzusammensetzung, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische praeparate |
| US5151265A (en) * | 1987-11-03 | 1992-09-29 | Genentech, Inc. | Gamma interferon formulation |
| WO2012115538A1 (ru) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном |
-
1981
- 1981-11-28 JP JP19098981A patent/JPS5892691A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3520228A1 (de) * | 1984-06-06 | 1985-12-12 | Hayashibara Biochem Lab | Wasserloesliche bioaktive trockenfeststoffzusammensetzung, verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende pharmazeutische praeparate |
| FR2565490A1 (fr) * | 1984-06-06 | 1985-12-13 | Hayashibara Biochem Lab | Solide sec hydrosoluble renfermant une substance proteinique bioactive |
| DE3520228C2 (de) * | 1984-06-06 | 1994-02-24 | Hayashibara Biochem Lab | Wasserlösliche bioaktive Trockenfeststoffzusammensetzung, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate |
| US5151265A (en) * | 1987-11-03 | 1992-09-29 | Genentech, Inc. | Gamma interferon formulation |
| WO2012115538A1 (ru) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Общество С Ограниченной Ответственностью "Научно-Исследовательская Компания "Медбиофарм" | Клатратный комплекс циклодекстрина или арабиногалактана с 9-фенил-симм-октагидроселеноксантеном |
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