JPS5886440A - ホルムアルデヒドの定量法 - Google Patents
ホルムアルデヒドの定量法Info
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- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、極微量のホルムアルデヒドを定量することが
可能外ホルムアルデヒドの定量法に関するＯ ホルムアルデヒドは、フェノール樹脂、尿素ｍ脂、メラ
ミン樹脂、アニリン樹脂およびカゼイン樹脂などの合成
樹脂製造原料、繊維の強化、製紙の際の紙の強化、フィ
ルムの硬化、エチレングリコール、ウロトロピンなどの
原料、ゴム、薬品、染料などの原料として用いられるほ
か、殺菌剤、防腐剤などにも用いられている。
可能外ホルムアルデヒドの定量法に関するＯ ホルムアルデヒドは、フェノール樹脂、尿素ｍ脂、メラ
ミン樹脂、アニリン樹脂およびカゼイン樹脂などの合成
樹脂製造原料、繊維の強化、製紙の際の紙の強化、フィ
ルムの硬化、エチレングリコール、ウロトロピンなどの
原料、ゴム、薬品、染料などの原料として用いられるほ
か、殺菌剤、防腐剤などにも用いられている。
また、食器、合板家具および衣料品などの生活用品の中
には微量のホルムアルデヒドを発生または溶出するもの
があることが知られているが、このホルムアルデヒドは
人体に有害で、皮膚のかぶれ、発＝Ｐ＝の原因ともなる
。
には微量のホルムアルデヒドを発生または溶出するもの
があることが知られているが、このホルムアルデヒドは
人体に有害で、皮膚のかぶれ、発＝Ｐ＝の原因ともなる
。
このようなことからホルムアルデヒドの定量は、上述し
た産業分野において、および衛生化学的な立場から重要
である。
た産業分野において、および衛生化学的な立場から重要
である。
また、ホルムアルデヒドは、いくつかの酵素反ルの過程
において、反応生成物として生ずるので該酵素反応にお
ける酵素の活性や該酵素反応前の基質の濃度を測定する
ためにも、ホルムアルデヒドの定量は重要である。
において、反応生成物として生ずるので該酵素反応にお
ける酵素の活性や該酵素反応前の基質の濃度を測定する
ためにも、ホルムアルデヒドの定量は重要である。
従来、このようなホルムアルデヒドの定量法としてはい
くつ−Ｉ！為の方法が知られているが、いずれも検出感
度が低いため、充分に満足しうるものではない。即ち■
アンモニウム塩Ｑ存在下でアセチルアセトン試薬と反応
し、生成するディアセチルディヒドロルチジンを比色定
量する方法〔ティ・ナツシュ（Ｔ ｅ Ｎａ５ｈ ）
： バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ、
：ｆ、 ）第５５巻、第４’ ／ 、ｇ 〜ｌＡ２／頁
、１ｑｓｓ年〕、■硫酸酸性下、クロモトロブ酸す）
ＩＪウムと加熱反応して、この呈色を比色定置する方法
（イー・サミキ等（Ｋ 拳Ｓａｍｉｃｈｉ ａｔ ａｌ
、）：アナリテイカル・ケミストリー（Ａｎａｌ、Ｃｈ
ｅｍ、）第３≠巻、第１≠１０〜／≠ｇμ頁、１９ご２
年〕、■アルカリ性下で≠−アミノー３−ヒドラシノー
！−メルカプト−７，２，≠−トリアゾールと反応後、
過ヨウ素酸で酸化し、呈色液を比色する方法〔アール−
ジー・デイケンソン等（Ｒ，Ｇ、 Ｄｉｃｈθｎθ０ｎ
ｅｔ ａｌ、） ：ケミカル・コミニケーション（Ｃｈ
ｅｍ。
くつ−Ｉ！為の方法が知られているが、いずれも検出感
度が低いため、充分に満足しうるものではない。即ち■
アンモニウム塩Ｑ存在下でアセチルアセトン試薬と反応
し、生成するディアセチルディヒドロルチジンを比色定
量する方法〔ティ・ナツシュ（Ｔ ｅ Ｎａ５ｈ ）
： バイオケミカル・ジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ、
：ｆ、 ）第５５巻、第４’ ／ 、ｇ 〜ｌＡ２／頁
、１ｑｓｓ年〕、■硫酸酸性下、クロモトロブ酸す）
ＩＪウムと加熱反応して、この呈色を比色定置する方法
（イー・サミキ等（Ｋ 拳Ｓａｍｉｃｈｉ ａｔ ａｌ
、）：アナリテイカル・ケミストリー（Ａｎａｌ、Ｃｈ
ｅｍ、）第３≠巻、第１≠１０〜／≠ｇμ頁、１９ご２
年〕、■アルカリ性下で≠−アミノー３−ヒドラシノー
！−メルカプト−７，２，≠−トリアゾールと反応後、
過ヨウ素酸で酸化し、呈色液を比色する方法〔アール−
ジー・デイケンソン等（Ｒ，Ｇ、 Ｄｉｃｈθｎθ０ｎ
ｅｔ ａｌ、） ：ケミカル・コミニケーション（Ｃｈ
ｅｍ。
Ｃｏｍｍ、）第１７／９〜／７２０頁、／９７θ年〕お
よびホルムアルデヒド・デヒドロゲナーゼＭＡＤＥの生
成物を比色定量する方法〔ゼット・ビー拳ロース等（Ｚ
、Ｂ、 Ｒｏｓｅ ａｔ ａｌ、 ）メソーズ−イア
−：Ｘ−７’ｄ’イモｔｌｌジー（Ｍｅｔｈｏａｓ ｉ
ｎ Ｋｎｚｙｔｎｏｌｏｇｙ）第９巻、第３！７〜３６
０頁、／９乙６年〕などがあるが、これらは呈色物質の
発色率が低く、検出感度が悪いため極微量のホルムアル
デヒドを検出出来ないと云う欠点を有している。またア
ンモニウム塩の存在下でアセチルアセトン試薬と反応し
、生成するディアセチルディヒドロルチジンを螢光測定
する１方法〔ニス・ベルマン（８，Ｂｅｌｍａｎ）：ア
ナリテイ男・ケミ力・アクタ（Ａｎａｌ、 Ｃｈｉｍ。
よびホルムアルデヒド・デヒドロゲナーゼＭＡＤＥの生
成物を比色定量する方法〔ゼット・ビー拳ロース等（Ｚ
、Ｂ、 Ｒｏｓｅ ａｔ ａｌ、 ）メソーズ−イア
−：Ｘ−７’ｄ’イモｔｌｌジー（Ｍｅｔｈｏａｓ ｉ
ｎ Ｋｎｚｙｔｎｏｌｏｇｙ）第９巻、第３！７〜３６
０頁、／９乙６年〕などがあるが、これらは呈色物質の
発色率が低く、検出感度が悪いため極微量のホルムアル
デヒドを検出出来ないと云う欠点を有している。またア
ンモニウム塩の存在下でアセチルアセトン試薬と反応し
、生成するディアセチルディヒドロルチジンを螢光測定
する１方法〔ニス・ベルマン（８，Ｂｅｌｍａｎ）：ア
ナリテイ男・ケミ力・アクタ（Ａｎａｌ、 Ｃｈｉｍ。
Ａｃｔａ ）第２９巻、第１２０〜／２６頁、７９６３
年〕も、螢光物質の螢光強度が低く、検出感度が悪いた
め極微量のホルムアルデヒドを検出出来ないと云う欠点
を有している。
年〕も、螢光物質の螢光強度が低く、検出感度が悪いた
め極微量のホルムアルデヒドを検出出来ないと云う欠点
を有している。
そこで、本発明者らは、極微量のホルムアルデヒドを、
感度良く検出できる方法について種々検討を重ねた結果
、前記公知のアセチルアセトン試薬を用いるホルムアル
デヒドの螢光測定による定量法を実際する際に、血清ア
ルブミン、特に牛血清アルブミンを添加する事によシ、
螢光物質の螢光強度を著しく増加し、該定量法における
ホルムアルデヒドの検出感度をｌθ数倍増加せしめ、極
微量のホルムアルデヒドも感度良く検出出来ることを知
シ、この知見に基いて本発明を完成した。
感度良く検出できる方法について種々検討を重ねた結果
、前記公知のアセチルアセトン試薬を用いるホルムアル
デヒドの螢光測定による定量法を実際する際に、血清ア
ルブミン、特に牛血清アルブミンを添加する事によシ、
螢光物質の螢光強度を著しく増加し、該定量法における
ホルムアルデヒドの検出感度をｌθ数倍増加せしめ、極
微量のホルムアルデヒドも感度良く検出出来ることを知
シ、この知見に基いて本発明を完成した。
すなわち、本発明は、ホルムアルデヒドと反応して螢光
物質を生成する試薬を、ホルムアルデヒド含有液に作用
させ、生成する該螢光物質を螢光測定することによシホ
ルムアルデヒドを定量する方法に於いて、血清アルブミ
ンを添加使用することを特徴とするホルムアルデヒドの
定量法である。
物質を生成する試薬を、ホルムアルデヒド含有液に作用
させ、生成する該螢光物質を螢光測定することによシホ
ルムアルデヒドを定量する方法に於いて、血清アルブミ
ンを添加使用することを特徴とするホルムアルデヒドの
定量法である。
以下１、本発明の詳細な説明する。
先ず、ホルムアルデヒドと反応して螢光物質を生成する
試薬の調製法、および該試薬をホルムアルデヒド含有液
に作用させ、生成する螢光物質を測定する手段は、公知
の方法〔ティ・ナツシュ（Ｔ。
試薬の調製法、および該試薬をホルムアルデヒド含有液
に作用させ、生成する螢光物質を測定する手段は、公知
の方法〔ティ・ナツシュ（Ｔ。
Ｎａ＃ｈ ） ；バイオケミカル−ジャーナル（ＢｉＯ
ｃｈｅｍ 。
ｃｈｅｍ 。
Ｊ、）第３３巻、第弘＃−４４２／頁、／９ｊ３年参照
〕または該方法に準じた方法によシ行うことができる。
〕または該方法に準じた方法によシ行うことができる。
即ち、試薬の調製は、アセチルアセトンまたはりチウム
アセチルアセトネート、アンモニウムアセチルアセトネ
ートなどのアセチルアセトンの塩類、またはアセトアセ
チックメチルエステル、アセトアセチックエチルエステ
ルなどのアセトアセチックエステル類などの化合物を、
アセチルアセトン濃度が０．００／〜Ｏ１１モル濃度と
なるように酢酸アンモニウム緩衝液、またはリン酸アン
モニウム緩衝液に溶解する。ここに用いられる酢酸アン
モニウム緩衝液は０． ／〜３．０モル濃度、特に２モ
ル濃度の酢酸アンモニウム溶液を、酢酸またはアンモニ
ア溶液でｐＨμ〜ｔ１特にｐＨＪ：ｊ〜ｔ、ｊに調製し
たものを使用する。またリン酸アンモニウム緩衝液も０
． ／〜３．θモル濃度、特に２モル濃度のリン酸アン
モニウム溶液を、リン酸またはアンモニア溶液でｐＨｌ
ｌ−〜？、特にｐＨ，５：ｊ〜７！に調製したものを使
用する。
アセチルアセトネート、アンモニウムアセチルアセトネ
ートなどのアセチルアセトンの塩類、またはアセトアセ
チックメチルエステル、アセトアセチックエチルエステ
ルなどのアセトアセチックエステル類などの化合物を、
アセチルアセトン濃度が０．００／〜Ｏ１１モル濃度と
なるように酢酸アンモニウム緩衝液、またはリン酸アン
モニウム緩衝液に溶解する。ここに用いられる酢酸アン
モニウム緩衝液は０． ／〜３．０モル濃度、特に２モ
ル濃度の酢酸アンモニウム溶液を、酢酸またはアンモニ
ア溶液でｐＨμ〜ｔ１特にｐＨＪ：ｊ〜ｔ、ｊに調製し
たものを使用する。またリン酸アンモニウム緩衝液も０
． ／〜３．θモル濃度、特に２モル濃度のリン酸アン
モニウム溶液を、リン酸またはアンモニア溶液でｐＨｌ
ｌ−〜？、特にｐＨ，５：ｊ〜７！に調製したものを使
用する。
上記の如く調製した試薬とホルムアルデヒド含有液との
反応は、２０−ｔ！Ｉ″θ℃の温度でｊ時間〜λ分保持
する条件で行う。温度が低いときは保持時間を長く、逆
に温度が高いときは保持時間を短くする。例えば２０℃
で５時間、３７℃で≠θ分、５２℃で５分保持する。
反応は、２０−ｔ！Ｉ″θ℃の温度でｊ時間〜λ分保持
する条件で行う。温度が低いときは保持時間を長く、逆
に温度が高いときは保持時間を短くする。例えば２０℃
で５時間、３７℃で≠θ分、５２℃で５分保持する。
上記試薬とホルムアルデヒド含有液とを反応させれば、
該反応液中にディアセチルディヒドロルチジンなどの螢
光物質が生成するので、該螢光物質に特有な励起波長（
例えばグθθ〜４４１−２０ｎ、特に≠ｌθ〜４’ ／
ｊ ｎｍの波長）の光を照射し、特有の螢光波長（例
えば≠７７０−４２０ｎ、特に≠１０−≠ｆ ｊ ｎｍ
の波長）を用いて、該反応液を螢光測定する。
該反応液中にディアセチルディヒドロルチジンなどの螢
光物質が生成するので、該螢光物質に特有な励起波長（
例えばグθθ〜４４１−２０ｎ、特に≠ｌθ〜４’ ／
ｊ ｎｍの波長）の光を照射し、特有の螢光波長（例
えば≠７７０−４２０ｎ、特に≠１０−≠ｆ ｊ ｎｍ
の波長）を用いて、該反応液を螢光測定する。
本発明は上記の如くホルムアルデヒドの螢光測定法にお
いて、血清アルブミンを添加するのであるが、この添加
試薬の糧類は極めて重要であって、他の卵蛋白（例えば
ニワトリ卵白アルブミン）や血清蛋白（例えば人−廖−
グロブリン、牛−β−グロブリン、牛−α−グロブリン
）では前記反応液の螢光強度を増大する効果は得られな
い（後述の実験例コ第１表参照）。
いて、血清アルブミンを添加するのであるが、この添加
試薬の糧類は極めて重要であって、他の卵蛋白（例えば
ニワトリ卵白アルブミン）や血清蛋白（例えば人−廖−
グロブリン、牛−β−グロブリン、牛−α−グロブリン
）では前記反応液の螢光強度を増大する効果は得られな
い（後述の実験例コ第１表参照）。
本発明に用いる血清アルブミンとしては、人、馬、豚、
牛、ヤギ、犬、ウサギ、ネズミ、モルモット、ニワトリ
およびハトなどの血清アルブミンが挙げられるが、特に
牛血清アルブミンが螢光強度の増大効果が著しく優れて
いるので好ましい（後述の実験例コ第１表参照）。
牛、ヤギ、犬、ウサギ、ネズミ、モルモット、ニワトリ
およびハトなどの血清アルブミンが挙げられるが、特に
牛血清アルブミンが螢光強度の増大効果が著しく優れて
いるので好ましい（後述の実験例コ第１表参照）。
期
血清アルブミンの添加時崎は■ホルムアルデヒドと反応
して螢光物質を生成する試薬を調製するときに添加して
もよいし、■ホルムアルデヒド含有液に予かしめ添加し
ても良いし、■ホルムアルデヒドと反応して螢光物質を
生成する試薬とホルムアルデヒド含有液とを混合し反応
せしめるとき、または反応が終了した後に、添加しても
良い。血清アルブミンの添加量は上記反応液に対して０
．／〜３チ、特に０．ｔ 〜／、ｔ！ｈ％ （Ｗ／Ｖ
）トナル！ ウに添加する。
して螢光物質を生成する試薬を調製するときに添加して
もよいし、■ホルムアルデヒド含有液に予かしめ添加し
ても良いし、■ホルムアルデヒドと反応して螢光物質を
生成する試薬とホルムアルデヒド含有液とを混合し反応
せしめるとき、または反応が終了した後に、添加しても
良い。血清アルブミンの添加量は上記反応液に対して０
．／〜３チ、特に０．ｔ 〜／、ｔ！ｈ％ （Ｗ／Ｖ
）トナル！ ウに添加する。
このようにして、従来公知のホルムアルデヒドの螢光測
定法においては、ホルムアルデヒドの濃・′１１． を 度が約／θｌ／、２ｄ以上でなければ精度良く測定する
ことが出来ないと報告されているが、本発明によれば２
４７ ｎｔ／２ ｄの極めて薄い濃度でも精度良く測定
することができる。ところでアセチルアセトン、その塩
類またはアセトアセチックエステル類は、種々のアルデ
ヒド類と反応し、反応液中に螢光物質を生成するので、
該反応はホルムアルデヒドに特異的な反応ではない。例
えば、アセトアルデヒドと反応し、励起波長３４ Ｊ−
ｎｍ、螢光波長４Ｚ４ｊｎｍの螢光を示す。しかしなが
ら、この場合に血清アルブミンを添加使用しても、螢光
増強は認められない。このことから血清アルブミンの添
加使用による螢光増強効果はホルムアルデヒドとの反応
に際してのみ認められるものであることが明らかである
。
定法においては、ホルムアルデヒドの濃・′１１． を 度が約／θｌ／、２ｄ以上でなければ精度良く測定する
ことが出来ないと報告されているが、本発明によれば２
４７ ｎｔ／２ ｄの極めて薄い濃度でも精度良く測定
することができる。ところでアセチルアセトン、その塩
類またはアセトアセチックエステル類は、種々のアルデ
ヒド類と反応し、反応液中に螢光物質を生成するので、
該反応はホルムアルデヒドに特異的な反応ではない。例
えば、アセトアルデヒドと反応し、励起波長３４ Ｊ−
ｎｍ、螢光波長４Ｚ４ｊｎｍの螢光を示す。しかしなが
ら、この場合に血清アルブミンを添加使用しても、螢光
増強は認められない。このことから血清アルブミンの添
加使用による螢光増強効果はホルムアルデヒドとの反応
に際してのみ認められるものであることが明らかである
。
また、臨床化学の分野では、尿酸などの特定基質を、ウ
リカーゼなどの酸化酵素を用いて分解し、生成する過酸
化水素をアルコール及びカタラーゼの存在下でホルムア
ルデヒドに転換させ、該ホルムアルデヒドを定量し、こ
の定量値から尿酸などの特定基質を定量することが広く
行なわれているが、本発明はこのホルムアルデヒドの定
量にも適用することができる。従って、本発明によれば
前記特定基質の微量分析が可能となる。
リカーゼなどの酸化酵素を用いて分解し、生成する過酸
化水素をアルコール及びカタラーゼの存在下でホルムア
ルデヒドに転換させ、該ホルムアルデヒドを定量し、こ
の定量値から尿酸などの特定基質を定量することが広く
行なわれているが、本発明はこのホルムアルデヒドの定
量にも適用することができる。従って、本発明によれば
前記特定基質の微量分析が可能となる。
以下、実験例および実施例を示して、本発明の詳細な説
明する。
明する。
実験例１
ホルムアルデヒドと相対螢光強度の相関を求めこれを基
にして標準検量線を作成する。
にして標準検量線を作成する。
■試薬の調製
（１）アセチルアセトン試薬
２モル・酢酸アンモニウム緩衝液（酢酸を加えてｐＨ６
，０に調製したもの）にアセチルアセトンを２−加え、
攪拌溶解後全量を同じ緩衝液で／ｌとする。
，０に調製したもの）にアセチルアセトンを２−加え、
攪拌溶解後全量を同じ緩衝液で／ｌとする。
（２）ホルムアルデヒド［準液
ホルムアルデヒドを２ｄ中に、コ、乙７、よ３≠、１０
、ｔ７、ｌ乙、０／、 ２／、３１１．２乙、乙？、３
３．３ ｔ、ｒｏ、ｏｔ、ｔ、ｌθｔ、７．１３３．≠
ナノグラム（ｎｌ）含有するように、蒸溜水に溶解する
。
、ｔ７、ｌ乙、０／、 ２／、３１１．２乙、乙？、３
３．３ ｔ、ｒｏ、ｏｔ、ｔ、ｌθｔ、７．１３３．≠
ナノグラム（ｎｌ）含有するように、蒸溜水に溶解する
。
（３）牛血清アルブミン溶液
牛血清アルブミン（シグマ社製）の、ｇ％（Ｗ／Ｗ）水
溶液 ■ホルムアルデヒドの測定 上述の各種濃度のホルムアルデヒド溶液（標準液）コｄ
それぞれに、上述したアセチルアセトン試薬２−を加え
、充分に攪拌後、３７℃でｔｉ、。
溶液 ■ホルムアルデヒドの測定 上述の各種濃度のホルムアルデヒド溶液（標準液）コｄ
それぞれに、上述したアセチルアセトン試薬２−を加え
、充分に攪拌後、３７℃でｔｉ、。
分間反応する。次いで得られた反応物に、牛血清アルブ
ミン溶液０．７ ｄを加えたのち励起波長≠ｌｊｎｍ、
螢光波長４ｃｒｏｒ、ｍで螢光測定した。
ミン溶液０．７ ｄを加えたのち励起波長≠ｌｊｎｍ、
螢光波長４ｃｒｏｒ、ｍで螢光測定した。
なお比較のため、牛血清アルブミン溶液０． ｊ ＊１
の代シに水０．３”ｄを上記反応物に加えたのち励起波
長≠／ｊｎｍ、螢光波長ｊ ／ ０１１ｍで螢光測定し
た。
の代シに水０．３”ｄを上記反応物に加えたのち励起波
長≠／ｊｎｍ、螢光波長ｊ ／ ０１１ｍで螢光測定し
た。
ホルムアルデヒド／３１≠ｎｆ／′、２−の場合の、励
起波長≠／ ｊ ｎｍに於るそれぞれの螢光スペクトル
を調べた結果、第１図に示す如き結果が得られた。
起波長≠／ ｊ ｎｍに於るそれぞれの螢光スペクトル
を調べた結果、第１図に示す如き結果が得られた。
即ち第１図はアセチルアセトン試薬とポルムアルデヒド
含有液とを反応し得られた反応物の螢光スペクトルを示
す図で、上の曲線Ａは牛血清アルブミンを添加使用した
本発明の区分を示し、下の曲線１はそれを添加使用しな
い従来法の区分を示す。
含有液とを反応し得られた反応物の螢光スペクトルを示
す図で、上の曲線Ａは牛血清アルブミンを添加使用した
本発明の区分を示し、下の曲線１はそれを添加使用しな
い従来法の区分を示す。
なお、牛血清アルブミンのみの螢光Ｃはこの領域で極め
て小さい。
て小さい。
いずれの区分も
分光螢光光度計二日本分光製ＦＰ！３０型励起波長；４
Ｌ／ｊｎｍ１スリット／θｎｍ螢光ニスリット、２０
ｎｍ 、セレクター（５ｅｌｓｃｔｏｒ ）×ｌθ、セ
ンステイビテイ（５ｅｎｓｔｉｖｉｔｙ） Ｘ／θ、−
−パリアブ／ｌ／ （Ｖａｒｉａｂｌｅ ）♂螢光波長
：≠Ｊ’ Ｑ ｎｍ （但し、血清アルブミン無添加の
従来法の区分はｊ ／ Ｏｎｍ ）なおブランク値は上
記操作において、ホルムアルデヒド溶液２−に代えて、
蒸溜水コ―を用いる以外は全く同様にして測定したもの
である。
Ｌ／ｊｎｍ１スリット／θｎｍ螢光ニスリット、２０
ｎｍ 、セレクター（５ｅｌｓｃｔｏｒ ）×ｌθ、セ
ンステイビテイ（５ｅｎｓｔｉｖｉｔｙ） Ｘ／θ、−
−パリアブ／ｌ／ （Ｖａｒｉａｂｌｅ ）♂螢光波長
：≠Ｊ’ Ｑ ｎｍ （但し、血清アルブミン無添加の
従来法の区分はｊ ／ Ｏｎｍ ）なおブランク値は上
記操作において、ホルムアルデヒド溶液２−に代えて、
蒸溜水コ―を用いる以外は全く同様にして測定したもの
である。
そして、得られた≠、ｆＱｎｍに於ける相対螢光強度値
よシブランク値を差し引いた相対螢光強度値とホルムア
ルデヒドの相関を求めたところ、第２図に示す如き結果
が得られた。
よシブランク値を差し引いた相対螢光強度値とホルムア
ルデヒドの相関を求めたところ、第２図に示す如き結果
が得られた。
上記第１図の結果から、牛血清アルブミンを添加使用し
た本発明の区分は、牛血清アルブミンを添加使用しない
従来法の区分に比べて、相対螢光強度（ピーク高さ）が
約７０倍も増大していることが判る。
た本発明の区分は、牛血清アルブミンを添加使用しない
従来法の区分に比べて、相対螢光強度（ピーク高さ）が
約７０倍も増大していることが判る。
また第２図の結果から、ホルムアルデヒド量と相対螢光
強度値との間には、本発明の区分も従来法の区分も直線
的な相関があるが、従来法の区分はホルムアルデヒド量
に対する螢光強度値が非常に低く、従ってホルムアルデ
ヒド量が２６．７ｎ？以下では精度良く定量することが
できない危険性を有する。これに対して本発明の区分は
ホルムアルデヒド量に対する相対螢光強度値が非常に高
く、従ってホルムアルデヒド量が２．（’７１１ｆと従
来法の７０分のｌの極微量の場合でも充分定量すること
ができる。
強度値との間には、本発明の区分も従来法の区分も直線
的な相関があるが、従来法の区分はホルムアルデヒド量
に対する螢光強度値が非常に低く、従ってホルムアルデ
ヒド量が２６．７ｎ？以下では精度良く定量することが
できない危険性を有する。これに対して本発明の区分は
ホルムアルデヒド量に対する相対螢光強度値が非常に高
く、従ってホルムアルデヒド量が２．（’７１１ｆと従
来法の７０分のｌの極微量の場合でも充分定量すること
ができる。
寒験例コ
上記実験例／の「■ホルムアルデヒドの測定」の欄にお
いて、「牛血清アルブミン溶液０．３ ｍｌ Ｊに代え
て、後記第７表記載の「添加物溶液０．７ ｍｌ Ｊを
用いる以外は全く同様にして螢光測定したところ、第１
表に記載の如き結果が得られた。
いて、「牛血清アルブミン溶液０．３ ｍｌ Ｊに代え
て、後記第７表記載の「添加物溶液０．７ ｍｌ Ｊを
用いる以外は全く同様にして螢光測定したところ、第１
表に記載の如き結果が得られた。
この結果から、牛血清アルブミンが特に優れている−“
ことが判る。
ことが判る。
第 ／ 表
添 加 物 相対螢光強度無添加（コント
ロール） ／牛血清アルブミン
ｌよコ人 ｌ
３．３モルモット Ｉ よ！ネズ
ミ ＃ ＩＡ／卵白アルブ
ミン ／人−γ−グロブリン
／牛−β−Ｉ ／ 牛−α― ｌ ／ 実施例／ 極微量のホルムアルデヒド含有試料液２−に実験例１で
調製したアセチルアセトン試薬２ ｍｌを加え、充分攪
拌した後３７℃で≠Ｏ分間螢光反応を行なわせ、次いで
得られた反応液に実験例／で調なおブランク値は、上記
操作においてホルムアルデヒド含有試料液２ｄに代えて
蒸溜水２−を用いる以外は全く同様にして螢光測定した
ものである。
ロール） ／牛血清アルブミン
ｌよコ人 ｌ
３．３モルモット Ｉ よ！ネズ
ミ ＃ ＩＡ／卵白アルブ
ミン ／人−γ−グロブリン
／牛−β−Ｉ ／ 牛−α― ｌ ／ 実施例／ 極微量のホルムアルデヒド含有試料液２−に実験例１で
調製したアセチルアセトン試薬２ ｍｌを加え、充分攪
拌した後３７℃で≠Ｏ分間螢光反応を行なわせ、次いで
得られた反応液に実験例／で調なおブランク値は、上記
操作においてホルムアルデヒド含有試料液２ｄに代えて
蒸溜水２−を用いる以外は全く同様にして螢光測定した
ものである。
そして、得られたｌ／−？θｎｍにおける相対螢光強度
値からブランク値を差し引いた値はｔ２ｒであった。こ
の値を第一図の検量線を使ってホルムアルデヒド量を求
めると、試料２ｄ中に／、Ｓ’、、２ｎｆのホルムアル
デヒドが含有されていることが判明した。
値からブランク値を差し引いた値はｔ２ｒであった。こ
の値を第一図の検量線を使ってホルムアルデヒド量を求
めると、試料２ｄ中に／、Ｓ’、、２ｎｆのホルムアル
デヒドが含有されていることが判明した。
実施例２
アセチルアセトン０．２１ｄ１牛血清アルブミン（シダ
ｉ社製） ０．７ ｆを、リン酸２アンモニウム／θｖ
１ｒ！チリン酸０．３ ｍ 、メタノール／θ−、カタ
ラーゼ（シグマ社製）１０■、ウリカーゼ（ベーリンー
ガー社製）２岬とともに蒸溜水に溶解し、全量をｌｏθ
ｄとし、濾過し、発色試薬を調製した。
ｉ社製） ０．７ ｆを、リン酸２アンモニウム／θｖ
１ｒ！チリン酸０．３ ｍ 、メタノール／θ−、カタ
ラーゼ（シグマ社製）１０■、ウリカーゼ（ベーリンー
ガー社製）２岬とともに蒸溜水に溶解し、全量をｌｏθ
ｄとし、濾過し、発色試薬を調製した。
次に血清コマイク四リットル（μｔ）に上記発色試薬ｌ
ｉｄを加え、３７℃でぶ０分反応後、室温で７３分放置
したのち励起波長≠／ Ｑ ｎｍ 、螢光波長≠２０ｎ
ｍで螢光沖ｌ定した。
ｉｄを加え、３７℃でぶ０分反応後、室温で７３分放置
したのち励起波長≠／ Ｑ ｎｍ 、螢光波長≠２０ｎ
ｍで螢光沖ｌ定した。
一方、尿酸標準液（シグマ社製、！■／１００ｍ１）コ
μＬを、上記血清コμｔに代えて用い同様に螢光測定し
た。血清及び尿酸標準液のブランク値は、ウリカーゼを
含有しない発色試薬≠ｒｒｔｌを、上記発色試薬≠１に
代えて用い同様に螢光測定した。
μＬを、上記血清コμｔに代えて用い同様に螢光測定し
た。血清及び尿酸標準液のブランク値は、ウリカーゼを
含有しない発色試薬≠ｒｒｔｌを、上記発色試薬≠１に
代えて用い同様に螢光測定した。
次いで、血清の相対螢光強度値から血清ブランク値を差
し引き、尿酸標準液の相対螢光強度値から尿酸標準液の
ブランク値を差し引いた値で除して、３倍すると、血清
／θＯ−中の尿酸■が得られる。
し引き、尿酸標準液の相対螢光強度値から尿酸標準液の
ブランク値を差し引いた値で除して、３倍すると、血清
／θＯ−中の尿酸■が得られる。
上記血清について、その尿酸含量を定量したところ、４
４１■／１００−の値が得られた。
４１■／１００−の値が得られた。
この結果から、極めて微量の血清試料で、特定物質を精
度良く測定できることが判る。
度良く測定できることが判る。
Claims (3)
- （１）ホルムアルデヒドと反応して螢光物質を生成する
試薬を、ホルムアルデヒ・ド含有液に作用させ、生成す
る該螢光物質を螢光測定することによりホルムアルデヒ
ドを定量する方法に於いてＶ匍清アルブミンを添加使用
することを特徴とするホルムアルデヒドの定量法。 - （２）血清アルブミンが牛血清アルブミンである特許請
求の範囲第１項記載の定量法。 - （３）ホルムアルデヒドと反応して螢光物質を生成する
試薬がアセチルアセトン試薬である特許請求の範囲第１
項または第２項記載の定量法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184492A JPS5886440A (ja) | 1981-11-19 | 1981-11-19 | ホルムアルデヒドの定量法 |
| US06/441,926 US4438206A (en) | 1981-11-19 | 1982-11-15 | Method for determination of formaldehyde |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184492A JPS5886440A (ja) | 1981-11-19 | 1981-11-19 | ホルムアルデヒドの定量法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5886440A true JPS5886440A (ja) | 1983-05-24 |
| JPS6342736B2 JPS6342736B2 (ja) | 1988-08-25 |
Family
ID=16154118
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56184492A Granted JPS5886440A (ja) | 1981-11-19 | 1981-11-19 | ホルムアルデヒドの定量法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4438206A (ja) |
| JP (1) | JPS5886440A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010271085A (ja) * | 2009-05-19 | 2010-12-02 | Dowa Holdings Co Ltd | ホルムアルデヒドの測定方法及びホルムアルデヒドの測定装置 |
| CN102590116A (zh) * | 2012-02-20 | 2012-07-18 | 山东巨业精细化工有限公司 | 印染用无醛固色剂中甲醛含量的测定方法 |
| CN104034682A (zh) * | 2014-06-27 | 2014-09-10 | 宜特科技(昆山)电子有限公司 | 内饰材料甲醛释放量测定方法 |
| CN109239039A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-01-18 | 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 一种基于荧光探针的乙醛检测方法及其应用 |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4511658A (en) * | 1983-02-28 | 1985-04-16 | Kansas State University Research Foundation | Colorimetric detector for formaldehyde vapor |
| JPS6027856A (ja) * | 1983-07-26 | 1985-02-12 | Kikkoman Corp | ホルムアルデヒドの定量法 |
| AT4098U1 (de) * | 1999-12-13 | 2001-01-25 | Adalbert Dipl Ing Dr Prior | Schnelltest zur formaldehydbestimmung |
| US6436716B1 (en) * | 2000-05-30 | 2002-08-20 | Integrated Biomedical Technology, Inc. | Aldehyde test strip |
| US6835573B2 (en) * | 2001-08-29 | 2004-12-28 | Husky Injection Molding Systems Ltd. | Method and device for testing aldehyde in polyester polymer |
| US7087434B2 (en) * | 2002-12-20 | 2006-08-08 | Gas Technology Institute | Automatic portable formaldehyde analyzer |
| CN101718706B (zh) * | 2009-12-07 | 2012-04-25 | 扬州大学 | 空气中甲醛现场快速检测的测试剂 |
| CN102353673A (zh) * | 2011-09-30 | 2012-02-15 | 哈尔滨工业大学 | 甲醛检测试纸及其制备方法 |
| AR098203A1 (es) * | 2013-11-13 | 2016-05-18 | Dow Global Technologies Llc | Reactivo de ensayo de formaldehído |
| US9772287B2 (en) | 2014-04-16 | 2017-09-26 | Saudi Arabian Oil Company | Sensor for monitoring for the presence and measurement of aqueous aldehyde biocides |
| EP3160361B1 (en) | 2014-06-27 | 2019-04-10 | Pulse Health LLC | Analysis cartridge and method for using same |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4204839A (en) | 1978-08-09 | 1980-05-27 | Eastman Kodak Company | Fluorimetric analysis method for bilirubin |
-
1981
- 1981-11-19 JP JP56184492A patent/JPS5886440A/ja active Granted
-
1982
- 1982-11-15 US US06/441,926 patent/US4438206A/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010271085A (ja) * | 2009-05-19 | 2010-12-02 | Dowa Holdings Co Ltd | ホルムアルデヒドの測定方法及びホルムアルデヒドの測定装置 |
| CN102590116A (zh) * | 2012-02-20 | 2012-07-18 | 山东巨业精细化工有限公司 | 印染用无醛固色剂中甲醛含量的测定方法 |
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| CN109239039A (zh) * | 2018-09-30 | 2019-01-18 | 河南省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 一种基于荧光探针的乙醛检测方法及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4438206A (en) | 1984-03-20 |
| JPS6342736B2 (ja) | 1988-08-25 |
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