JPS5885163A - 蛋白質分析用一体型多層分析要素 - Google Patents
蛋白質分析用一体型多層分析要素Info
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- JPS5885163A JPS5885163A JP56184080A JP18408081A JPS5885163A JP S5885163 A JPS5885163 A JP S5885163A JP 56184080 A JP56184080 A JP 56184080A JP 18408081 A JP18408081 A JP 18408081A JP S5885163 A JPS5885163 A JP S5885163A
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- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
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- G01N33/526—Multi-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
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- G—PHYSICS
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- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
- G01N33/6827—Total protein determination, e.g. albumin in urine
- G01N33/683—Total protein determination, e.g. albumin in urine involving metal ions
- G01N33/6833—Copper, e.g. Folin-, Lowry-, biuret methods
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
料中の蛋白質分析用の一体型多層分析要素に関するもの
である。
である。
液体試料中の総蛋白質の分析は、従来、ビウレット反応
を利用したｉｌｌＦ液法（ＩＩ式法）により行われてい
た（たとえば、管厚、副島著、′蛋白質の定置法曹、宇
金出版センター（／タ７７）＃照）。
を利用したｉｌｌＦ液法（ＩＩ式法）により行われてい
た（たとえば、管厚、副島著、′蛋白質の定置法曹、宇
金出版センター（／タ７７）＃照）。
この温式法は有用ではあるが、操作が煩雑であり、高価
で複雑な分析装置を必要としまた、分析に賛する時間が
長いという欠点があった。このような灘弐法に代わるも
のと・して、低コストで簡易かつ迅速に分析が可能な乾
式法と呼ばれる方法およびそれに用いられる分析要素が
提案されている。たとえば、特開昭ｊ≠一１０／３タを
号には、液体試料を受容して定量的に拡げるための展開
層と、試料を保持し発色反応が行われる試薬層とな有す
る一体型多層分析要素において、該試薬層が実實的にト
ナリウムイオンを含まず、使用条件下で賛意内を一約ｌ
ユＯＫするのに十分な皺の塩基と、アルカリ保―性ポリ
マーとを含むことを特徴とする、ビウレット反応を乾式
一体化した分析要素が開示されている。このような乾式
一体型分析要素において試薬層にナトリウムイオンが含
まれていると、試薬層を塗布形成する際、迩布液が相分
離をおこし易く、また顔布面が均一になり難いなど塗布
性に蝋点がある。しかもナトリウムイオンが含まれてい
る試薬層は吸湿性が高く、そのために性能劣化が起こり
黄変速度が早いという欠点があゐ。したがって、このよ
うな一体型分析要素においては、従来の溶液法において
一般的に用いられているビウレット試薬、すなわち、ロ
ッシェル塩（酒石酸ナトリウムカリウム）や水酸化ナト
リウム等のナトリウムイオン源を含むビウレット試薬を
そのまま用いることはできなかった。
で複雑な分析装置を必要としまた、分析に賛する時間が
長いという欠点があった。このような灘弐法に代わるも
のと・して、低コストで簡易かつ迅速に分析が可能な乾
式法と呼ばれる方法およびそれに用いられる分析要素が
提案されている。たとえば、特開昭ｊ≠一１０／３タを
号には、液体試料を受容して定量的に拡げるための展開
層と、試料を保持し発色反応が行われる試薬層とな有す
る一体型多層分析要素において、該試薬層が実實的にト
ナリウムイオンを含まず、使用条件下で賛意内を一約ｌ
ユＯＫするのに十分な皺の塩基と、アルカリ保―性ポリ
マーとを含むことを特徴とする、ビウレット反応を乾式
一体化した分析要素が開示されている。このような乾式
一体型分析要素において試薬層にナトリウムイオンが含
まれていると、試薬層を塗布形成する際、迩布液が相分
離をおこし易く、また顔布面が均一になり難いなど塗布
性に蝋点がある。しかもナトリウムイオンが含まれてい
る試薬層は吸湿性が高く、そのために性能劣化が起こり
黄変速度が早いという欠点があゐ。したがって、このよ
うな一体型分析要素においては、従来の溶液法において
一般的に用いられているビウレット試薬、すなわち、ロ
ッシェル塩（酒石酸ナトリウムカリウム）や水酸化ナト
リウム等のナトリウムイオン源を含むビウレット試薬を
そのまま用いることはできなかった。
本２Ａ＃ＪＡ者は、ナトリウムイオンを含有する従来の
一般的なビウレット試薬を用いる、安定な総蛋白質分析
用一体型分析要素について鋭意研宛を行い、ある種の化
合物を試製層に含有させることＫより目的とする安定な
分析要素が得られることの知見を得て本ＪＡ明を完成す
るに至った。
一般的なビウレット試薬を用いる、安定な総蛋白質分析
用一体型分析要素について鋭意研宛を行い、ある種の化
合物を試製層に含有させることＫより目的とする安定な
分析要素が得られることの知見を得て本ＪＡ明を完成す
るに至った。
本発明は、ぜクレット反応を用いる、液体試料中の蛋白
質分析用一体型多層分析要素において、試層層が、酒石
酸ナトリクムカリウム塩、第二銅塩、使用条件下で要素
内を一約／二〇以上にする塩基、耐アルカリ性ぼりマー
およびアルカリ金属イオン錯化剤を含んでいることを特
徴とする蛋白質分析用一体型多層分析要素である。
質分析用一体型多層分析要素において、試層層が、酒石
酸ナトリクムカリウム塩、第二銅塩、使用条件下で要素
内を一約／二〇以上にする塩基、耐アルカリ性ぼりマー
およびアルカリ金属イオン錯化剤を含んでいることを特
徴とする蛋白質分析用一体型多層分析要素である。
本発明の多層分析要素の基本構造は、透明支持体、試薬
層、試料展開層がこの順にあるように構成されたもので
ある。試料展開層は分析要素の最外面に位置して液体試
料が点着される面であり、その作用は、適用された液体
試料の容量とは無関係に、単位面積当りほぼ一定容瀘の
液体試料を試薬層に供給するものである。本発明に用い
られる多層分析要素の基本構造自体は、液体試料中の特
定化学成分を乾式で、かつ迅速、簡便に定置する材料と
しての多層分析要素として公知であり、たとえば、特開
昭ｊコー３４ｔｒ♂号、特開昭Ｊ−Ｊ−−／４１１３Ｊ
−１ｈ号、Ｃｌ１ｎｌｃａｌ ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＸＶ
ｏｌ、２４ｔ。
層、試料展開層がこの順にあるように構成されたもので
ある。試料展開層は分析要素の最外面に位置して液体試
料が点着される面であり、その作用は、適用された液体
試料の容量とは無関係に、単位面積当りほぼ一定容瀘の
液体試料を試薬層に供給するものである。本発明に用い
られる多層分析要素の基本構造自体は、液体試料中の特
定化学成分を乾式で、かつ迅速、簡便に定置する材料と
しての多層分析要素として公知であり、たとえば、特開
昭ｊコー３４ｔｒ♂号、特開昭Ｊ−Ｊ−−／４１１３Ｊ
−１ｈ号、Ｃｌ１ｎｌｃａｌ ＣｈｅｍｉｓｔｒｙＸＶ
ｏｌ、２４ｔ。
Ａ♂、７３３３〜７３５０頁（／？７ｆ）などに詳細に
説明されている。
説明されている。
本発明の試＃Ｉｉ層のビウレット試薬成分として用いら
れる酒石酸ナトリウムカリウム塩は、溶液法に通常用い
られているＣｕ＋＋イオン錯化安定剤であり、最も人手
が８１ｔであり、かつ安価である。
れる酒石酸ナトリウムカリウム塩は、溶液法に通常用い
られているＣｕ＋＋イオン錯化安定剤であり、最も人手
が８１ｔであり、かつ安価である。
本発明多層分析ｇｓｉ索の試薬層には、心壁に応じて池
の酒石酸塩、たとえばナトリウム塩、カリウム塩、アン
モニウム塩、リチウム塩等を共存させてもよい。第二Ｔ
ｈ塩としては、水溶性第二＃Ｉ＃ｉ、たとえば、硫酸第
二銅、硝酸第二銅、塩化第二銅１臭化第二鋪、ヨウ化第
二綱、酢＃第二鋼等が用いられる。また、使用条件下で
要素内を一約７２．θ以上にするための塩基としては、
たとえば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化
リチウム、水酸化カルシタム等が用いられる。
の酒石酸塩、たとえばナトリウム塩、カリウム塩、アン
モニウム塩、リチウム塩等を共存させてもよい。第二Ｔ
ｈ塩としては、水溶性第二＃Ｉ＃ｉ、たとえば、硫酸第
二銅、硝酸第二銅、塩化第二銅１臭化第二鋪、ヨウ化第
二綱、酢＃第二鋼等が用いられる。また、使用条件下で
要素内を一約７２．θ以上にするための塩基としては、
たとえば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化
リチウム、水酸化カルシタム等が用いられる。
本発明多ノー分析要素の試薬層に用いられる耐アルカリ
性ポリマーは、ビウレット試薬組成物を担持するための
ものであり、たとえば、ア、ｆａ−ス、スターチ、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビエルピリソン、メチル１ルロ
ース、メチルヒドロヤ７プロビルセルロース、ホリヒエ
ルアルコール等、するいはこれらの−リマ−を構成する
、２種以上の峰ツマ−から得られる共重合体、あるいは
Ｉリマープレｙド等が用いられるＯ 本発明は、ナトリウムイオン源化合物を含有するビウレ
ット試薬と耐アルカリ性ポリマーから成る試製層の安定
性を改良するために、すなわち、試薬層に長期間にわた
って高アルカリ性条件生成能力な保持させるために、ア
ルカリ金属イオン細化剤を試薬層に含有せしめたことを
特徴とするものである０このようなアルカリ金属イオン
細化剤としては、４リアルキレンダリコール、クリグテ
ート、クツクンエーテルなどが有効である。ポリアルキ
レングリコールとしては、ポリエチレングリゴール、ボ
リア’ｗ−ピレングリコールが典型的なものであり、特
に分子蓋へｏｏｏ−ｓ、ｏｏｏ程度のものが好ましい。
性ポリマーは、ビウレット試薬組成物を担持するための
ものであり、たとえば、ア、ｆａ−ス、スターチ、ポリ
ビニルピロリドン、ポリビエルピリソン、メチル１ルロ
ース、メチルヒドロヤ７プロビルセルロース、ホリヒエ
ルアルコール等、するいはこれらの−リマ−を構成する
、２種以上の峰ツマ−から得られる共重合体、あるいは
Ｉリマープレｙド等が用いられるＯ 本発明は、ナトリウムイオン源化合物を含有するビウレ
ット試薬と耐アルカリ性ポリマーから成る試製層の安定
性を改良するために、すなわち、試薬層に長期間にわた
って高アルカリ性条件生成能力な保持させるために、ア
ルカリ金属イオン細化剤を試薬層に含有せしめたことを
特徴とするものである０このようなアルカリ金属イオン
細化剤としては、４リアルキレンダリコール、クリグテ
ート、クツクンエーテルなどが有効である。ポリアルキ
レングリコールとしては、ポリエチレングリゴール、ボ
リア’ｗ−ピレングリコールが典型的なものであり、特
に分子蓋へｏｏｏ−ｓ、ｏｏｏ程度のものが好ましい。
またクリグテート、クラウンエーテルの具体例としては
、≠、／３−ノデシルー／ 、７．１０．／６−テト２
オキサ−弘、／３−ノアデシクロオクタデカン（たとえ
ば、メルク社製［Ｋｒｙｐｔｏ月ｘ、２．２Ｊ（登録商
標））、／、４’。
、≠、／３−ノデシルー／ 、７．１０．／６−テト２
オキサ−弘、／３−ノアデシクロオクタデカン（たとえ
ば、メルク社製［Ｋｒｙｐｔｏ月ｘ、２．２Ｊ（登録商
標））、／、４’。
１０− ）ジオ中サーフ、７３−シアデシクロペンタデ
カン（たとえば、メルク社製１”ｋｒｙｐｔｏｆ ｌｘ
２／ Ｊ（登録商標））、／ 、４ｔ、７ｅ１０．／
３−−４ンタオキｔシクロペンタデカン（／ｊ−タラク
ン−ｊ）、ｌ、弘、７．１０．／３．／６−ヘキサオ午
サシクロオクタデカン（７？−クラウン−６）などが挙
げられる。
カン（たとえば、メルク社製１”ｋｒｙｐｔｏｆ ｌｘ
２／ Ｊ（登録商標））、／ 、４ｔ、７ｅ１０．／
３−−４ンタオキｔシクロペンタデカン（／ｊ−タラク
ン−ｊ）、ｌ、弘、７．１０．／３．／６−ヘキサオ午
サシクロオクタデカン（７？−クラウン−６）などが挙
げられる。
本発明多層分析要素の試薬層に含まれる・酒石酸ナトリ
クムカリクム塩の置は、耐アルカリ性ぼりマー重置に対
して７０〜７０％、好ましくは、２０〜ｊ０−である。
クムカリクム塩の置は、耐アルカリ性ぼりマー重置に対
して７０〜７０％、好ましくは、２０〜ｊ０−である。
使用条件において試薬層内の−を約７２以上にするのに
必要な塩基の量は、耐アルカリ性ポリマー重量に対して
Ｊ−Ｎ３０％、好重しくは７０〜３０％である。また、
試薬層を長期間安定に保持するのに必要なアル、カリ金
属イオン錯化剤の皺は、耐アルカリ性ポリマー重量に対
して３〜１００％、好ましくはｐＮｚｏｓである。
必要な塩基の量は、耐アルカリ性ポリマー重量に対して
Ｊ−Ｎ３０％、好重しくは７０〜３０％である。また、
試薬層を長期間安定に保持するのに必要なアル、カリ金
属イオン錯化剤の皺は、耐アルカリ性ポリマー重量に対
して３〜１００％、好ましくはｐＮｚｏｓである。
本発明において用いられるアルカリ金属イオン錯化剤は
、ナトリクムイオンを含有する試薬層の安定性を着しく
改良向上させるものであるが、ナトリクムイオｙを実質
的に含まない試薬層に含有させた場合にもその安定性を
向上させることができる。
、ナトリクムイオンを含有する試薬層の安定性を着しく
改良向上させるものであるが、ナトリクムイオｙを実質
的に含まない試薬層に含有させた場合にもその安定性を
向上させることができる。
本発明の分析要素は、公知の種々の手法によシ作製され
る。たとえば、ポリエチレンテレフタレート、ポリカー
−ネート、ポリビニル化合物のよりな一すマーから成る
透明支持体に１試薬層成分を含有する水性液を乾燥膜厚
λ〜ｊＯｐｍ８度となるように塗布し、この試薬層の上
に展開層を形成すればよい。展開層としては、特開昭ぴ
ター５３ｇに号記載のメンブランフィルタ；４リマーオ
クロピーズ、ガラスミクロピーズをゼラチン等の親水性
バインダーで空隙を有するように固定した多孔性層や、
特開昭３３−タＯｇｊり号記載の水で膨潤しない有機ポ
リオ−ミクロビーズを水で膨潤しない有機ポリマー接着
剤で点接触状に接着して形成させた連続空隙含有多孔性
層などの非繊維多孔性展開層、あるいは特開昭ｊ ｊ−
−／１ａｌｌ−３３１゜号記載の織物から成る展開層の
ような繊維多孔性展開層が有利に用いられる。
る。たとえば、ポリエチレンテレフタレート、ポリカー
−ネート、ポリビニル化合物のよりな一すマーから成る
透明支持体に１試薬層成分を含有する水性液を乾燥膜厚
λ〜ｊＯｐｍ８度となるように塗布し、この試薬層の上
に展開層を形成すればよい。展開層としては、特開昭ぴ
ター５３ｇに号記載のメンブランフィルタ；４リマーオ
クロピーズ、ガラスミクロピーズをゼラチン等の親水性
バインダーで空隙を有するように固定した多孔性層や、
特開昭３３−タＯｇｊり号記載の水で膨潤しない有機ポ
リオ−ミクロビーズを水で膨潤しない有機ポリマー接着
剤で点接触状に接着して形成させた連続空隙含有多孔性
層などの非繊維多孔性展開層、あるいは特開昭ｊ ｊ−
−／１ａｌｌ−３３１゜号記載の織物から成る展開層の
ような繊維多孔性展開層が有利に用いられる。
本発明の分析要素には、接着層、光反射層、−過層等、
一般に一体型多層分析要素において設けられることがあ
る種々の層を、所望によシ設けておいてもよい。
一般に一体型多層分析要素において設けられることがあ
る種々の層を、所望によシ設けておいてもよい。
本発明の総蛋白質分析用一体型多へ分析ｌ！素を用いて
試料液体中の総蛋白質を測定するには展開層上に試料液
３〜１０μｔ１好ましくは７〜．２０μｚｔ一点着し、
必要により３０℃〜ｊＯ℃、好ましくは３／℃〜≠θ℃
で７〜２０分、好ましくは／〜１０分間Ｓ度インキュベ
ーションを行った後、透明支持体側から７００ ＝ ｌ
＝ ３０ ｎ ｍの範囲の光のうちで条件に応じた適宜
な波長の光を通過させるフィルターを通して反射光学濃
度を測定し、検量線から蛋白質機度を求めればよい。ま
た、あらかじめ色見本を作成しておき、視覚的に比較す
ることにより中窓量的な測定を行うこともできる、以下
実施例によυ本発明を更に詳細に説明する。
試料液体中の総蛋白質を測定するには展開層上に試料液
３〜１０μｔ１好ましくは７〜．２０μｚｔ一点着し、
必要により３０℃〜ｊＯ℃、好ましくは３／℃〜≠θ℃
で７〜２０分、好ましくは／〜１０分間Ｓ度インキュベ
ーションを行った後、透明支持体側から７００ ＝ ｌ
＝ ３０ ｎ ｍの範囲の光のうちで条件に応じた適宜
な波長の光を通過させるフィルターを通して反射光学濃
度を測定し、検量線から蛋白質機度を求めればよい。ま
た、あらかじめ色見本を作成しておき、視覚的に比較す
ることにより中窓量的な測定を行うこともできる、以下
実施例によυ本発明を更に詳細に説明する。
実施例／
水酸化ナトリウム／、３！９（０，０３モル）、水酸化
リチウム／、ｔＩ−２９Ｃ０，０３モル）及びロッシェ
ル塩（酒石酸ナトリウムカリウム塩）ｌＡｊ９（０，０
２モル）を３０−の水に溶解し、次いで硫酸鋼ｊ水塩３
．．２４／−９の２０４水溶液を上記ロツシエル塩／塩
基水溶液に攪拌下に添加して、ピウレ７００．０００
）水溶液にポリエチレングリコール（平均分子ｉ／ｊ０
０）を添加したポＩＪ−ｖ−溶液（乙Ｑ））をビウレッ
ト試薬溶液に攪拌上混合した３ポリエチレングリコール
ハポリビニルピロリドン量の０〜ｌＩｔ％を用いた。
リチウム／、ｔＩ−２９Ｃ０，０３モル）及びロッシェ
ル塩（酒石酸ナトリウムカリウム塩）ｌＡｊ９（０，０
２モル）を３０−の水に溶解し、次いで硫酸鋼ｊ水塩３
．．２４／−９の２０４水溶液を上記ロツシエル塩／塩
基水溶液に攪拌下に添加して、ピウレ７００．０００
）水溶液にポリエチレングリコール（平均分子ｉ／ｊ０
０）を添加したポＩＪ−ｖ−溶液（乙Ｑ））をビウレッ
ト試薬溶液に攪拌上混合した３ポリエチレングリコール
ハポリビニルピロリドン量の０〜ｌＩｔ％を用いた。
更ニサーファクタント１０Ｇ（ｐ−ノニルフェノキシポ
リグリシドール）／ｇを加え試薬層塗布液を調製した。
リグリシドール）／ｇを加え試薬層塗布液を調製した。
この塗布液を、ニトロセルロースとゼラチンの混合物の
溶液を用いた下塗りによシ親水化処理した厚さ／ざ０μ
ｍのポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）透明支持体
上にナイフエラノコ−ターで乾燥膜厚３０μｍとなるよ
うに塗布した。
溶液を用いた下塗りによシ親水化処理した厚さ／ざ０μ
ｍのポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）透明支持体
上にナイフエラノコ−ターで乾燥膜厚３０μｍとなるよ
うに塗布した。
かくして得られた試薬層を水で湿らせて膨潤させておき
、綿ブロード織布（１００双子）を圧着乾燥して、蛋白
實分析用一体型多層分析要素を作製した。
、綿ブロード織布（１００双子）を圧着乾燥して、蛋白
實分析用一体型多層分析要素を作製した。
比較例／
水酸化リチウ＾！Ａ２ｇＣＯ１７０モル）、酒石酸２．
１ｌ−９Ｃ０，０，２ｓｈル）、硫酸銅ｊ水塩３．Ｊ≠
ｑを用いてビウレット試薬溶液を作製し、ポリエチレン
グリコール會添加しないヂリマー溶液を用いた＃１かは
、実施例／と同様にして多層分析要素を作製した。
１ｌ−９Ｃ０，０，２ｓｈル）、硫酸銅ｊ水塩３．Ｊ≠
ｑを用いてビウレット試薬溶液を作製し、ポリエチレン
グリコール會添加しないヂリマー溶液を用いた＃１かは
、実施例／と同様にして多層分析要素を作製した。
試験法
蛋白質分析用一体型多層分析要素のｃ価は、７９／ｄｔ
アルプ建ン生理食塩水溶液１ＯｐＬｆ点着し、３７℃で
３分間インキュベートした後、！！ｒＯｎｒｓのフィル
ターを通して透明支持体側より反射光学濃度を測定する
ことにより行った。温度３ｊ℃、相対！度ｔｉ−ｏｘの
雰囲気中に多層分析要素を所定時間放置した後得られる
ヒ記反射光学濃度の値と、多層分析要素作製直後の反射
光学濃度の値との比を発色率とした。結果を次表に示す
。
アルプ建ン生理食塩水溶液１ＯｐＬｆ点着し、３７℃で
３分間インキュベートした後、！！ｒＯｎｒｓのフィル
ターを通して透明支持体側より反射光学濃度を測定する
ことにより行った。温度３ｊ℃、相対！度ｔｉ−ｏｘの
雰囲気中に多層分析要素を所定時間放置した後得られる
ヒ記反射光学濃度の値と、多層分析要素作製直後の反射
光学濃度の値との比を発色率とした。結果を次表に示す
。
実施例 ／−Ａ ／ チ ７！７
／−Ｂ ２ ％ ♂ ３７−
ｏ ３ ％ ｒｒ／−Ｄ
弘チ ｔり 対照 ０ ６６ 比較例 Ｑ １０実
施例！ 実施例／において塩基として水酸化リチウムを、ｌ’４
Ｌり添加し弘チのポリエチレングリコール（平均分子量
２０００ ）を含むポリビニルピロリドンを用いて同様
の蛋白質分析用多層分析要素を作製したつ 本分析要Ｘを３ｊ’Ｃ≠０−の温湿度下で／カバ間保存
したところ分析要素作製時の発色濃度との比較による発
色率は９７％であった。又３ｌ℃乾燥剤存在下における
／カバ後の発色率は７００チであった。
／−Ｂ ２ ％ ♂ ３７−
ｏ ３ ％ ｒｒ／−Ｄ
弘チ ｔり 対照 ０ ６６ 比較例 Ｑ １０実
施例！ 実施例／において塩基として水酸化リチウムを、ｌ’４
Ｌり添加し弘チのポリエチレングリコール（平均分子量
２０００ ）を含むポリビニルピロリドンを用いて同様
の蛋白質分析用多層分析要素を作製したつ 本分析要Ｘを３ｊ’Ｃ≠０−の温湿度下で／カバ間保存
したところ分析要素作製時の発色濃度との比較による発
色率は９７％であった。又３ｌ℃乾燥剤存在下における
／カバ後の発色率は７００チであった。
この多層分析要素に各種濃度の蛋白質（アルジミン）水
溶液１０ｐＬを点着し、前記試験法による評価を行つ九
。
溶液１０ｐＬを点着し、前記試験法による評価を行つ九
。
蛋白質量（ｑ／ｄｔ ） 反射光学濃度（Ｊ！；Ｏ
ｎｍ）ｏ ｏ、４Ｌｏｉ ム３ ｏ、ｙ−ｇ。
ｎｍ）ｏ ｏ、４Ｌｏｉ ム３ ｏ、ｙ−ｇ。
／コ ０． ！ ３０２ ｊ
Ｏ，乙３ｊ２０ ０、♂
２０ ７Ｊ” ０．９／３；／ ００
０．９り≠実施例３ 実施例／において、ポリエチレングリコールの替りに／
よ一りラウンーｊｔ−ポリマー重量に対して≠Ｏｃｓ添
加し、実施例／と同様にして蛋白質分析用多層分析要素
を作成した。
Ｏ，乙３ｊ２０ ０、♂
２０ ７Ｊ” ０．９／３；／ ００
０．９り≠実施例３ 実施例／において、ポリエチレングリコールの替りに／
よ一りラウンーｊｔ−ポリマー重量に対して≠Ｏｃｓ添
加し、実施例／と同様にして蛋白質分析用多層分析要素
を作成した。
３ｊＣ４ｔＯ％の温湿度下に／カ月保存後の発色率は’
ｒ ６． ｓであった。
ｒ ６． ｓであった。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 ビウレット反応を用いる。液体試料中の蛋白質分析用一
体型多層分析要素において、 試薬層が、酒石酸ナトリウムカリクム塩、第二銅塩、使
用条件下で要素内ｔｐＢ約７２．Ｏ以上にする塩基、耐
アルカリ性４リマーおよびアルカリ金属イオン錯化剤を
含んでいることを特徴とする蛋白質分析用一体型多層分
析要素。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184080A JPS5885163A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 蛋白質分析用一体型多層分析要素 |
| US06/441,062 US4435362A (en) | 1981-11-17 | 1982-11-12 | Integral multilayer analytical element for the assay of total protein |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56184080A JPS5885163A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 蛋白質分析用一体型多層分析要素 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5885163A true JPS5885163A (ja) | 1983-05-21 |
Family
ID=16147036
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56184080A Pending JPS5885163A (ja) | 1981-11-17 | 1981-11-17 | 蛋白質分析用一体型多層分析要素 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4435362A (ja) |
| JP (1) | JPS5885163A (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS59143959A (ja) * | 1983-02-07 | 1984-08-17 | Fuji Photo Film Co Ltd | 乾式分析要素 |
| JPS614959A (ja) * | 1984-06-19 | 1986-01-10 | Fuji Photo Film Co Ltd | 一体型多層分析要素 |
| US5240735A (en) * | 1988-09-30 | 1993-08-31 | Miles Inc. | Method of manufacturing a test article for the determination of protein |
| EP1662260A4 (en) * | 2003-09-03 | 2006-10-25 | Arkray Inc | PROTEIN ANALYSIS METHOD AND PROTEIN REAGENT USED IN SUCH A METHOD |
| CN110794146A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-02-14 | 无锡锦帛诚医疗器械科技有限公司 | 一种用于体外诊断的总蛋白定量检测干片 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3104209A (en) | 1960-02-02 | 1963-09-17 | Fermco Lab Inc | Composition for determination of glucose |
| US3310382A (en) | 1963-02-04 | 1967-03-21 | George R Kingsley | Biuret reagent |
| AR204182A1 (es) | 1973-12-20 | 1975-11-28 | Boehringer Mannheim Gmbh | Tira de ensayo para la comprobacion de substancias de actividad peroxidica en los liquidos del cuerpo |
| US4132528A (en) | 1978-01-03 | 1979-01-02 | Eastman Kodak Company | Analytical element for the analysis of liquids under high pH conditions |
-
1981
- 1981-11-17 JP JP56184080A patent/JPS5885163A/ja active Pending
-
1982
- 1982-11-12 US US06/441,062 patent/US4435362A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4435362A (en) | 1984-03-06 |
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