JPS586477B2 - 乳酸脱水素酵素アイソザイムの分別定量用剤及び分別定量法 - Google Patents
乳酸脱水素酵素アイソザイムの分別定量用剤及び分別定量法Info
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- JPS586477B2 JPS586477B2 JP53082979A JP8297978A JPS586477B2 JP S586477 B2 JPS586477 B2 JP S586477B2 JP 53082979 A JP53082979 A JP 53082979A JP 8297978 A JP8297978 A JP 8297978A JP S586477 B2 JPS586477 B2 JP S586477B2
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- JP
- Japan
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- ldh
- lactate dehydrogenase
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- isozyme
- preparation
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
- C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
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- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
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- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は化合物１，６−ジヒドロニコチンアミドアデニ
ンジヌクレオチドの利用に関するものである。
ンジヌクレオチドの利用に関するものである。
一般に、乳酸脱水素酵素（以下ＬＤＨと略称する）はピ
ルビン酸と乳酸の可逆反応を行う酵素でニコチンアミド
アデニンジヌクレオチド（以下ＮＡＤと略称する）を補
酵素として反応するものとして知られている。
ルビン酸と乳酸の可逆反応を行う酵素でニコチンアミド
アデニンジヌクレオチド（以下ＮＡＤと略称する）を補
酵素として反応するものとして知られている。
このＬＤＨが人間体内にあって、健康な正常人の血清中
にはごく少量存在するだけであるが、悪性腫瘍、心筋硬
塞、肝炎などで著しく上昇し、また各種疾患の悪化、好
転などに伴って特徴的に変化するので、ＬＤＨの活性測
定は疾患の経過観察や、治療効果の判定に大いに役立っ
ているのである。
にはごく少量存在するだけであるが、悪性腫瘍、心筋硬
塞、肝炎などで著しく上昇し、また各種疾患の悪化、好
転などに伴って特徴的に変化するので、ＬＤＨの活性測
定は疾患の経過観察や、治療効果の判定に大いに役立っ
ているのである。
更に、人間のＬＤＨにはＨ型（心筋型）およびＭ型（骨
格筋型）の２種の酵素（サブユニット）があり、通善の
状態ではこのサブユニットの４量体として存在する。
格筋型）の２種の酵素（サブユニット）があり、通善の
状態ではこのサブユニットの４量体として存在する。
サブユニットが２種類あるので４量体を作る組合わせは
５種類あり、これら５種類がＬＤＨのアイソザイムとし
て存在している。
５種類あり、これら５種類がＬＤＨのアイソザイムとし
て存在している。
血清中のＬＤＨが上昇するのは疾患のある臓器からＬＤ
Ｈが溶出されるためであり、肝炎の場合に血清中に溶出
するＬＤＨは肝臓起源のＭ型アイソザイムが大部分を占
め、心筋硬塞の場合は心臓起源のＨ型アイソザイムが大
部分を占める。
Ｈが溶出されるためであり、肝炎の場合に血清中に溶出
するＬＤＨは肝臓起源のＭ型アイソザイムが大部分を占
め、心筋硬塞の場合は心臓起源のＨ型アイソザイムが大
部分を占める。
従って血清中に溶出されるＬＤＨのアイソザイムを電気
泳動等によって分別定量することにより、疾患のある臓
器を推定することができる。
泳動等によって分別定量することにより、疾患のある臓
器を推定することができる。
このようにＬＤＨの活性測定は臨床診断に多用されるに
至っているが、従来の一般的ＬＤＨ活性測定は、ピルビ
ン酸を基質とし、還元型ＮＡＤを補酵素として、これら
を単に血清中に添加し、還元型ＮＡＤの減少量を３４０
ｎｍで測定して、ＬＤＨの全活性を測定していたに過ぎ
ない。
至っているが、従来の一般的ＬＤＨ活性測定は、ピルビ
ン酸を基質とし、還元型ＮＡＤを補酵素として、これら
を単に血清中に添加し、還元型ＮＡＤの減少量を３４０
ｎｍで測定して、ＬＤＨの全活性を測定していたに過ぎ
ない。
この方法では単にＬＤＨの活性が高いか、低いかが測定
できるだけ、換言すれば、体のどこかに疾患があること
が予測できるだけで、体内のどの臓器に疾患があるかを
適確に知ることはできなかった。
できるだけ、換言すれば、体のどこかに疾患があること
が予測できるだけで、体内のどの臓器に疾患があるかを
適確に知ることはできなかった。
電気泳動法によってＬＤＨのアイソザイムを分別定量し
、疾患のある臓器を知ることはできるが、この電気泳動
法はきわめて繁雑な手法により、長時間を必要とする等
の欠点があり、以前から簡便な測定法が望まれていた。
、疾患のある臓器を知ることはできるが、この電気泳動
法はきわめて繁雑な手法により、長時間を必要とする等
の欠点があり、以前から簡便な測定法が望まれていた。
本発明者らは、先にＬＤＨアイソザイムの簡易な分別定
量法を求めて研究した結果、ＬＤＨの活性阻害物質を微
量添加して反応させれば、ＬＤＨは各アイソザイムによ
って活性阻害度が少しづつ異なり、この現象を利用する
ことによって各種の疾患を簡便に推定することが出来る
ことを見い出した。
量法を求めて研究した結果、ＬＤＨの活性阻害物質を微
量添加して反応させれば、ＬＤＨは各アイソザイムによ
って活性阻害度が少しづつ異なり、この現象を利用する
ことによって各種の疾患を簡便に推定することが出来る
ことを見い出した。
しかしこの現象を更に詳細に検討したところ、ＬＤＨの
活性阻害物質は一つの物質ではなく、二つの物質以上で
あり之等の阻害物質含量の変化によって阻害度の異なる
ことが分った。
活性阻害物質は一つの物質ではなく、二つの物質以上で
あり之等の阻害物質含量の変化によって阻害度の異なる
ことが分った。
本発明者らは、これらＬＤＨ活性阻害物質のなかからＬ
ＤＨアイソザイム分別定量に最も有効な物質を単一物質
として単離し、次の式で示される化合物１，６−ジヒド
ロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドであることを
確認し、本発明を完成するに至った。
ＤＨアイソザイム分別定量に最も有効な物質を単一物質
として単離し、次の式で示される化合物１，６−ジヒド
ロニコチンアミドアデニンジヌクレオチドであることを
確認し、本発明を完成するに至った。
即ち、本発明は１，６−ジヒドロニコチンアミドアデニ
ンジヌクレオチド（以下１，６−ＤＨＮＡＤと略称する
）を単一物質としてＬＤＨアイソザイム分別定量に使用
するとき、ＬＤＨアイソザイムに対して全く安定した一
定の阻害を示し、すぐれたＬＤＨアイソザイム分別定量
法を完成するに至った。
ンジヌクレオチド（以下１，６−ＤＨＮＡＤと略称する
）を単一物質としてＬＤＨアイソザイム分別定量に使用
するとき、ＬＤＨアイソザイムに対して全く安定した一
定の阻害を示し、すぐれたＬＤＨアイソザイム分別定量
法を完成するに至った。
この定量用剤は、ピルビン酸を基質とするＬＤＨ活性測
定に際し使用され、試料は１，６一ＤＨＮＡＤにより阻
害を受けた状態のＬＤＨ活性を知り、一方１．６−ＤＨ
ＮＡＤを含まない還元型ＮＡＤのみで測定したＬＤＨの
全活性を知り、両者の比を求めれば予めアイソザイムの
阻害度を求めておいた標準値と対比することによって、
試料中のアイソザイムを簡便に分別定量できることにな
る。
定に際し使用され、試料は１，６一ＤＨＮＡＤにより阻
害を受けた状態のＬＤＨ活性を知り、一方１．６−ＤＨ
ＮＡＤを含まない還元型ＮＡＤのみで測定したＬＤＨの
全活性を知り、両者の比を求めれば予めアイソザイムの
阻害度を求めておいた標準値と対比することによって、
試料中のアイソザイムを簡便に分別定量できることにな
る。
更に詳細に分別定量法を説明する。
ＬＤＨアイソザイムの混在するサンプルについて種々の
活性因子を次の表のように表記することにする。
活性因子を次の表のように表記することにする。
すなわちＡＨ，ＡＭ，Ａは活性測定の際に上記１，６−
ＤＨＮＡＤを含有しない通常の反応液を用いた場合の活
性を表わし、Ａ’Ｈ，Ａ’Ｍ，Ａ’はそれぞれ一定量の
上記１，６−ＤＨＮＡＤを反応液中に共存させた場合の
ＬＤＨ活性を表わす。
ＤＨＮＡＤを含有しない通常の反応液を用いた場合の活
性を表わし、Ａ’Ｈ，Ａ’Ｍ，Ａ’はそれぞれ一定量の
上記１，６−ＤＨＮＡＤを反応液中に共存させた場合の
ＬＤＨ活性を表わす。
また ＲＨ＝ＡＨ／Ａ
ＲＭ＝ＡＭ／Ａ
Ｐ ＝Ａ’／Ａ
ＰＨ＝Ａ’Ｈ／ＡＨ
ＰＭ＝Ａ’Ｍ／ＡＭとすると、
ＰとＲＨの間に次のような関係が成立する。
Ｒ＝Ａ’／Ａ
＝（Ａ’Ｈ＋Ａ’Ｍ）／Ａ
−（ＰＨＡＨ＋ＰＭＡＭ）／Ａ
一ＰＨＲＨ＋ＰＭＲＭ
＝ＰＨＲＨ＋ＰＭ−ＰＭＲＨ
一（ＰＨ−ＰＭ）ＲＨ＋ＰＭ・・・・・・（Ｉ）一式こ
の関係は、第２図のノモグラフに示すように縦軸にＰを
とり、横軸にＲＨをとるとＰ軸切片がＰＭで勾配が（Ｐ
Ｈ−ＰＭ）の直線で表わされる。
の関係は、第２図のノモグラフに示すように縦軸にＰを
とり、横軸にＲＨをとるとＰ軸切片がＰＭで勾配が（Ｐ
Ｈ−ＰＭ）の直線で表わされる。
Ｐは１，６−ＤＨＮＡＤを一定量添加した場合の活性比
であり、ＲＨは全ＬＤＨ活性中に占めるＨ型ＬＤＨの活
性である。
であり、ＲＨは全ＬＤＨ活性中に占めるＨ型ＬＤＨの活
性である。
これにより、活性阻害物質を含有しない反応液（反応液
１）及びある一定濃度の１，６−ＤＨＮＡＤを含む反応
液（反応液２）と、あらかじめアイソザイムの組成のわ
かっている二種のＬＤＨサンプルとを用いて標準線を作
る一方、同様の方法で未知のＬＤＨサンプルを測定し、
得られた活性比Ｐ（Ａ’／Ａ）を標準線にあてはめれば
、そのアイソザイム組成を分別定量することができる。
１）及びある一定濃度の１，６−ＤＨＮＡＤを含む反応
液（反応液２）と、あらかじめアイソザイムの組成のわ
かっている二種のＬＤＨサンプルとを用いて標準線を作
る一方、同様の方法で未知のＬＤＨサンプルを測定し、
得られた活性比Ｐ（Ａ’／Ａ）を標準線にあてはめれば
、そのアイソザイム組成を分別定量することができる。
本発明のＬＤＨアイソザイム分別定量法は阻害剤として
単一物質である１，６−ＤＨＮＡＤのみを含有している
ために、他の阻害性混在物による阻害干渉を全く受ける
ことがなく、その定量値は信頼度のきわめて高いものと
なる。
単一物質である１，６−ＤＨＮＡＤのみを含有している
ために、他の阻害性混在物による阻害干渉を全く受ける
ことがなく、その定量値は信頼度のきわめて高いものと
なる。
本発明の１ ，６−ＤＨＮＡＤはＮＡＤ＋をボロハイド
ライドによる化学的な還元あるいは還元型ＮＡＤをアル
カリ性溶液中に２〜３週閘放置すると、かなりの量の１
．６−ＤＨＮＡＤが生成するので、この溶液中のＮＡＤ
Ｈのみを酵素的に酸化後，ＤＥＡＥ−セルロースカラム
クロマトグラフイーに通して吸着させ、これを緩衝液で
洗滌し、酢酸ソーダ溶液によって溶離する等の方法によ
って得ることができる。
ライドによる化学的な還元あるいは還元型ＮＡＤをアル
カリ性溶液中に２〜３週閘放置すると、かなりの量の１
．６−ＤＨＮＡＤが生成するので、この溶液中のＮＡＤ
Ｈのみを酵素的に酸化後，ＤＥＡＥ−セルロースカラム
クロマトグラフイーに通して吸着させ、これを緩衝液で
洗滌し、酢酸ソーダ溶液によって溶離する等の方法によ
って得ることができる。
次に本発明の試験例及び実施例を示す。
試験例 １
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５ ）に０．８ｍＭ
ピルビン酸ナトリウム０．２ｍＭ還元型ＮＡＤを添加し
た反応液に上記の方法で得た１，６−ＤＨＮＡＤＯ．１
４，０．８１，０．９０，１．２０，４．８０，７．６
μｇ／ｍｌの濃度にそれぞれ添加し、各反応液を調整し
た。
ピルビン酸ナトリウム０．２ｍＭ還元型ＮＡＤを添加し
た反応液に上記の方法で得た１，６−ＤＨＮＡＤＯ．１
４，０．８１，０．９０，１．２０，４．８０，７．６
μｇ／ｍｌの濃度にそれぞれ添加し、各反応液を調整し
た。
これに対して全心臓型ＬＤＨ溶液と全筋肉型ＬＤＨ溶液
を用意し、上記反応液をそれぞれ反応させ、それぞれの
ＬＤＨアイソエンザイムに対して阻害度の差の大きい１
，６−ＤＨＮＡＤの濃度となるかを試験した。
を用意し、上記反応液をそれぞれ反応させ、それぞれの
ＬＤＨアイソエンザイムに対して阻害度の差の大きい１
，６−ＤＨＮＡＤの濃度となるかを試験した。
ＬＤＨの活性は還元型ＮＡＤが３４０ｎｍで吸収があり
、酸化型ＮＡＤが吸収がなくなるので、その差によって
残存活性を求めた。
、酸化型ＮＡＤが吸収がなくなるので、その差によって
残存活性を求めた。
その結果は次の表に示されるが、阻害度の差は阻害剤／
還元型ＮＡＤ＝１／５００〜１／２０の範囲が望ましく
特に１／２５０〜１／３２の範囲の濃度に混合されたＬ
ＤＨアイソザイム分別定量用剤が最適であることが分る
。
還元型ＮＡＤ＝１／５００〜１／２０の範囲が望ましく
特に１／２５０〜１／３２の範囲の濃度に混合されたＬ
ＤＨアイソザイム分別定量用剤が最適であることが分る
。
試験例 ２
０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５）に０．８ｍＭピ
ルビン酸ナトリウム、０．２ｍＭ還元型ＮＡＤ，その１
／２５０の１，６−ＤＨＮＡＤを混合し反応液とした。
ルビン酸ナトリウム、０．２ｍＭ還元型ＮＡＤ，その１
／２５０の１，６−ＤＨＮＡＤを混合し反応液とした。
これに対して、心臓型ＬＤＨと筋肉型ＬＤＨを変量組合
せて試料を作り、これを反応液で処理し、各組合せでど
のような阻害が現れるかをみた。
せて試料を作り、これを反応液で処理し、各組合せでど
のような阻害が現れるかをみた。
その結果は次の表に示されるが、本発明の分別定量用剤
は心臓型二筋肉型の組成を明確に定量できることが明ら
かである。
は心臓型二筋肉型の組成を明確に定量できることが明ら
かである。
実施例 １
（Ｉ） 還元型ＮＡＤを２０％水溶液としこれに１／
１０Ｎ ＮａＯＨ を添加し、ｐＨ１２としこの溶液
を室温で３週間放置した。
１０Ｎ ＮａＯＨ を添加し、ｐＨ１２としこの溶液
を室温で３週間放置した。
上記反応液中のＮＡＤＨのみをＡＤＨとアセトアルデヒ
ドを用いてＮＡＤ＋に酸化後１０ｍＭトリス酢酸バツフ
ァーで緩衝化したＤＥＡＥセルロースカラムに吸着させ
、同バッファーで洗滌し０〜０．２Ｍの酢酸ソーダ濃度
勾配溶出を行い、フラクションＮｏ．５０〜５６に阻害
剤リッチな部分を得た。
ドを用いてＮＡＤ＋に酸化後１０ｍＭトリス酢酸バツフ
ァーで緩衝化したＤＥＡＥセルロースカラムに吸着させ
、同バッファーで洗滌し０〜０．２Ｍの酢酸ソーダ濃度
勾配溶出を行い、フラクションＮｏ．５０〜５６に阻害
剤リッチな部分を得た。
ここに得られた１ ，６−ＤＨＮＡＤのＮＭＲスペクト
ラムは第１図に示す通りである。
ラムは第１図に示す通りである。
（■）次に還元型ＮＡＤに対し、その１／１２５の１，
６−ＤＨＮＡＤを添加しＬＤＨアイソザイム分別定量用
剤とした。
６−ＤＨＮＡＤを添加しＬＤＨアイソザイム分別定量用
剤とした。
実施例 ２
サンプルとして精製された豚ＬＤＨ１（サブユニニット
：ＨＨＨＨ）（ベーリンガー社製）、豚ＬＤＨ５ （サ
ブユニット：ＭＭＭＭ）（ベーリン．ガー社製）及びこ
れらを次の表のような比率で混合したものを用いた。
：ＨＨＨＨ）（ベーリンガー社製）、豚ＬＤＨ５ （サ
ブユニット：ＭＭＭＭ）（ベーリン．ガー社製）及びこ
れらを次の表のような比率で混合したものを用いた。
反応液は０．０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．５），１ｍ
Ｍ ＥＤＴＡ，０．１６ｍＭ ＮＡＤＨ及び０．３
ｍＭピルビン酸ナトリウムを含む反応液（反応液１）お
よび反応液１に１，６−ＤＨＮＡＤを２．６μｇ／ｍｌ
添加したもの（反応液２）を用いた。
Ｍ ＥＤＴＡ，０．１６ｍＭ ＮＡＤＨ及び０．３
ｍＭピルビン酸ナトリウムを含む反応液（反応液１）お
よび反応液１に１，６−ＤＨＮＡＤを２．６μｇ／ｍｌ
添加したもの（反応液２）を用いた。
前記反応液それぞれ３ｍｌに対し、上の表に示すような
酵素標品（蛋白１００μｇ／ｍｌ）を５μｌ加え、２５
℃で反応を開始し、３４０ｎｍの吸収の減少を分光々度
計により測定した。
酵素標品（蛋白１００μｇ／ｍｌ）を５μｌ加え、２５
℃で反応を開始し、３４０ｎｍの吸収の減少を分光々度
計により測定した。
結果を第３図の白丸で示す。
これは豚ＬＤＨ１（Ｈ型１００％）及び豚ＬＤＨ５（Ｍ
型１００％）とから（Ｉ）式によって求めたノモグラフ
（図中の直線）とよく一致した。
型１００％）とから（Ｉ）式によって求めたノモグラフ
（図中の直線）とよく一致した。
第１図は１ ，６−ＤＨＮＡＤのＮＭＲスペクトルで第
２図はＬＤＨ活性阻害度から心臓型アイソザイムの分率
を求めるノモグラフである。 第３図はアイソザイム組成の既知の種々のサンプルに１
，６−ＤＨＮＡＤを作用させた時と作用させない時の活
性比Ｐを求め、心臓型アインザイムの分率に対してプロ
ットしたグラフである。
２図はＬＤＨ活性阻害度から心臓型アイソザイムの分率
を求めるノモグラフである。 第３図はアイソザイム組成の既知の種々のサンプルに１
，６−ＤＨＮＡＤを作用させた時と作用させない時の活
性比Ｐを求め、心臓型アインザイムの分率に対してプロ
ットしたグラフである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ １，６−ジヒドロニコチンアミドアデニンジヌクレ
オチド及び還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチ
ドを含有する乳酸脱水素酵素アイソザイム分別定量用剤
。 ２ ピルビン酸を基質とし、還元型ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドを補酵素とする乳酸脱水素酵素活性
の測定において、１，６−ジヒドロニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチドを共存して測定した乳酸脱水素酵素
活性と、否共存で測定した乳酸脱水素酵素活性との比を
求めることを特徴とする乳酸脱水素酵素アイソザイムの
分別定量法。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP53082979A JPS586477B2 (ja) | 1978-07-10 | 1978-07-10 | 乳酸脱水素酵素アイソザイムの分別定量用剤及び分別定量法 |
| US06/054,416 US4258131A (en) | 1978-07-10 | 1979-07-03 | Method of fractional quantitative determination of isoenzyme of lactic dehydrogenase |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP53082979A JPS586477B2 (ja) | 1978-07-10 | 1978-07-10 | 乳酸脱水素酵素アイソザイムの分別定量用剤及び分別定量法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS559763A JPS559763A (en) | 1980-01-23 |
| JPS586477B2 true JPS586477B2 (ja) | 1983-02-04 |
Family
ID=13789324
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP53082979A Expired JPS586477B2 (ja) | 1978-07-10 | 1978-07-10 | 乳酸脱水素酵素アイソザイムの分別定量用剤及び分別定量法 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4258131A (ja) |
| JP (1) | JPS586477B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6149338U (ja) * | 1984-09-04 | 1986-04-02 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5982398A (ja) * | 1982-11-01 | 1984-05-12 | Toyobo Co Ltd | 補酵素の安定化法 |
| US4654301A (en) * | 1983-06-17 | 1987-03-31 | Health Research, Inc. (Roswell Park Division) | Process for detecting LDHk isozyme activity in human serum for use as a diagnostic aid and for monitoring response to cancer therapy |
| US4558007A (en) * | 1983-06-17 | 1985-12-10 | Health Research, Inc. (Roswell Park Divison) | Process for detecting LDHk isozyme activity in human serum for use as a diagnostic aid and for monitoring response to cancer therapy |
| US5364765A (en) * | 1987-05-28 | 1994-11-15 | Abbott William A | Method and reagent system for assaying isoenzyme profiles |
| US5158873A (en) * | 1987-05-28 | 1992-10-27 | Abbott Laboratories | Method and reagent for determining LD-1 isoenzyme |
| US20030228621A1 (en) * | 2002-05-24 | 2003-12-11 | Yong Qin | Common ligand universal enzyme assay and compositions for use therein |
| US20060166236A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-07-27 | Chong-Sheng Yuan | Allosteric enzyme coupled immunoassay (AECIA) |
| CN114381494B (zh) * | 2021-12-01 | 2023-12-22 | 天津中成佳益生物科技有限公司 | 一种乳酸脱氢酶同工酶1的检测试剂及检测方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4003975A (en) * | 1975-12-08 | 1977-01-18 | Union Carbide Corporation | Solvent extraction of copper values using dihydroxy azoarenes |
| US4006061A (en) * | 1975-12-29 | 1977-02-01 | Monsanto Company | Lactate dehydrogenase determination method |
| US4080263A (en) * | 1976-08-11 | 1978-03-21 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for the rapid quantitative determination of lactate or alanine |
-
1978
- 1978-07-10 JP JP53082979A patent/JPS586477B2/ja not_active Expired
-
1979
- 1979-07-03 US US06/054,416 patent/US4258131A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6149338U (ja) * | 1984-09-04 | 1986-04-02 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4258131A (en) | 1981-03-24 |
| JPS559763A (en) | 1980-01-23 |
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