JPS5862118A - 免疫賦活剤 - Google Patents
免疫賦活剤Info
- Publication number
- JPS5862118A JPS5862118A JP56160280A JP16028081A JPS5862118A JP S5862118 A JPS5862118 A JP S5862118A JP 56160280 A JP56160280 A JP 56160280A JP 16028081 A JP16028081 A JP 16028081A JP S5862118 A JPS5862118 A JP S5862118A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mps
- polysaccharide
- carcinostatic
- substance
- derived
- Prior art date
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- Pending
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- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の制癌性
多糖体を併用し、相乗的に制癌活性を高めた免疫賦活剤
に関するものである。
多糖体を併用し、相乗的に制癌活性を高めた免疫賦活剤
に関するものである。
従来、各種物質の免疫賦活性を用いて癌を破壊もしくは
静止させて、治療する方法が試みられ、なかには実用化
されたものもみられるようになった。
静止させて、治療する方法が試みられ、なかには実用化
されたものもみられるようになった。
なかでも、担子菌類の熱水抽出物は、きわめて広範囲に
わたって、制癌作用のあることが知られている。Ｃ日菌
報１７：５０６〜５１４ 、１９７６）また、細■の生
産する多糖体にも制癌性を有することが分って来た。特
に、本発明者らが、先に見出した高分子多糖類物質ＭＰ
Ｓ−８０やキサンタンガムにはかなり強い制癌性がみら
れるのである。
わたって、制癌作用のあることが知られている。Ｃ日菌
報１７：５０６〜５１４ 、１９７６）また、細■の生
産する多糖体にも制癌性を有することが分って来た。特
に、本発明者らが、先に見出した高分子多糖類物質ＭＰ
Ｓ−８０やキサンタンガムにはかなり強い制癌性がみら
れるのである。
しかしながら、これら制癌剤はすべて直接癌細胞を破壊
するのではなく、間接的な免疫活性を利用するものであ
るために、癌の種類によって制癌性が太きく左右された
り、投与量を多くしても制癌性は高くならないなど、免
疫賦活剤特有の現象がみられたのである。
するのではなく、間接的な免疫活性を利用するものであ
るために、癌の種類によって制癌性が太きく左右された
り、投与量を多くしても制癌性は高くならないなど、免
疫賦活剤特有の現象がみられたのである。
そこで、本発明者らは、これら免疫賦活剤の制癌適用範
囲を拡げ、かつ免疫賦活活性を高めるために鋭意研究し
た結果、担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の制癌性多
糖体を併用することによって制癌活性が高められること
を知ったのである。
囲を拡げ、かつ免疫賦活活性を高めるために鋭意研究し
た結果、担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の制癌性多
糖体を併用することによって制癌活性が高められること
を知ったのである。
本発明は、担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の制癌性
多糖体とからなる免疫賦活剤に関するものである。
多糖体とからなる免疫賦活剤に関するものである。
本発明に用いる担子菌由来の制癌性物質は、各種担子菌
より得られるもので、制癌性があるものであれば、いか
なるものでもよい。日菌報１７：５０６〜５１４．１９
７６に記載された多くの担子菌の熱水抽出物が有効であ
る。特に、レイシ（マンネンタケ）、カワラタケ、サル
ノコシカケ、シイタケ、スエヒロタケなどを１０〜１５
分間煮沸抽出し、熱水部分を硫安飽和し、沈澱部を水に
溶解し、上澄液を透析、凍結乾燥したものが有効である
。
より得られるもので、制癌性があるものであれば、いか
なるものでもよい。日菌報１７：５０６〜５１４．１９
７６に記載された多くの担子菌の熱水抽出物が有効であ
る。特に、レイシ（マンネンタケ）、カワラタケ、サル
ノコシカケ、シイタケ、スエヒロタケなどを１０〜１５
分間煮沸抽出し、熱水部分を硫安飽和し、沈澱部を水に
溶解し、上澄液を透析、凍結乾燥したものが有効である
。
また、本発明に用いる細菌由来の制癌性多糖体としては
、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０とキサンタンガムをあ
げることができる。
、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０とキサンタンガムをあ
げることができる。
次に、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０について記載する
。
。
高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０はラクトバチルス属及び
ストレプトコツカス属に属する高分子多糖類物質ＭＰＳ
−８０生産菌を培養することによって製造することがで
きる。高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０生産薗の具体例と
しては、微工研にを託された菌として、ラクトバチルス
・ニーグルティＮｈ ８５１ 、 ＦＦ、ＲＭ−ＰＨ
ａ５８５１ （ＬａｃｔｏｂａｅｉｌｌｕｓＪｕｇｕｒ
ｔｔ ｍ８５１ 、 ＦＩＲＭ−ＰＮｌ１５８５１ ）
及びストレプトコッカス・サーモフィラスＮｌｌ １２
７ 、 ＦＥＲＭ−ＰＨａ ５８５０ （Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｅｏｅｃｕｓ ｔｈａｒｍｏｐｈｉｌａｓ Ｎｎ１２
７゜ＦＬ：ＲＭ−ＰＮｎ ５８５０ ）が示され、有効
に使用される。
ストレプトコツカス属に属する高分子多糖類物質ＭＰＳ
−８０生産菌を培養することによって製造することがで
きる。高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０生産薗の具体例と
しては、微工研にを託された菌として、ラクトバチルス
・ニーグルティＮｈ ８５１ 、 ＦＦ、ＲＭ−ＰＨ
ａ５８５１ （ＬａｃｔｏｂａｅｉｌｌｕｓＪｕｇｕｒ
ｔｔ ｍ８５１ 、 ＦＩＲＭ−ＰＮｌ１５８５１ ）
及びストレプトコッカス・サーモフィラスＮｌｌ １２
７ 、 ＦＥＲＭ−ＰＨａ ５８５０ （Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｅｏｅｃｕｓ ｔｈａｒｍｏｐｈｉｌａｓ Ｎｎ１２
７゜ＦＬ：ＲＭ−ＰＮｎ ５８５０ ）が示され、有効
に使用される。
高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０は、高分子多糖類物質Ｍ
ＰＳ−８０生産菌を培養した後、培養物の液体区分およ
び菌体区分から分離採取することによって得ることがで
きる。
ＰＳ−８０生産菌を培養した後、培養物の液体区分およ
び菌体区分から分離採取することによって得ることがで
きる。
培養培地としては、いかなる組成の培地でもよいが、脱
脂乳、ホエー等を含有する乳酸菌培養培地が好ましい。
脂乳、ホエー等を含有する乳酸菌培養培地が好ましい。
培養条件としては、例えば、２０℃〜４５℃の静置培養
で十分であり、また、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０生
産菌の生育が可能で高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０を産
生ずる条件であればいかなる条件でもよい。
で十分であり、また、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０生
産菌の生育が可能で高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０を産
生ずる条件であればいかなる条件でもよい。
高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０生産薗の培養物から遠心
分離により液体区分および菌体区分を得、次いで、これ
らから抗ａＳ作用を有する高分子多糖類物質ＭＰＳ−８
０を採取する。液体区分から高分子多糖類物質ＭＰＳ−
８０を採取するには常法によればよく、例として、ゲル
濾過、イオン交換クロマトグラフィー、塩析、溶媒分画
、透析などの操作を単独あるいは適宜併用すればよい。
分離により液体区分および菌体区分を得、次いで、これ
らから抗ａＳ作用を有する高分子多糖類物質ＭＰＳ−８
０を採取する。液体区分から高分子多糖類物質ＭＰＳ−
８０を採取するには常法によればよく、例として、ゲル
濾過、イオン交換クロマトグラフィー、塩析、溶媒分画
、透析などの操作を単独あるいは適宜併用すればよい。
菌体区分から高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０を採取する
には、菌体区分から例えば水抽出を行ない、その後は液
体区分からの採取法に準ずればよい。
には、菌体区分から例えば水抽出を行ない、その後は液
体区分からの採取法に準ずればよい。
一般的には、ホエー培地で一高分子多糖類物質ＭＰＳ−
８０生産菌を培養し、培養終了後、遠心分離にて培養上
置液を得る。
８０生産菌を培養し、培養終了後、遠心分離にて培養上
置液を得る。
次いで、この培養上置液に有機溶媒を添加し、沈澱物を
得る。
得る。
一万、遠心分離にて得られた菌体区分につき水抽出を行
ない、次いで、遠心分離を行ない抽出上澄液を得る。
ない、次いで、遠心分離を行ない抽出上澄液を得る。
この上澄液に有機溶媒を添加し、沈澱物を得る。
このようにして得られた両法澱物を水に溶解した後、同
様に有機溶媒を添加し、再沈澱させる。
様に有機溶媒を添加し、再沈澱させる。
この沈澱物質を適当な緩衝液に溶解した後、同種の緩衝
液で十分緩衝化したイオン交換体に負荷する０次いで、
同種の緩衝液を流し、イオン交換体に吸着されない高分
子多糖類物質を含む通過液を回収し、イオン交換水に対
して透析する。透析内液を凍結乾燥し、精製高分子多糖
類物質ＭＰＳ−８０を得る。
液で十分緩衝化したイオン交換体に負荷する０次いで、
同種の緩衝液を流し、イオン交換体に吸着されない高分
子多糖類物質を含む通過液を回収し、イオン交換水に対
して透析する。透析内液を凍結乾燥し、精製高分子多糖
類物質ＭＰＳ−８０を得る。
ここに得られた高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０は優れた
抗腫瘍作用を有し、抗ｍ瘍剤として有用であり、かつま
た、高粘性であるために、増粘剤として有用である。
抗腫瘍作用を有し、抗ｍ瘍剤として有用であり、かつま
た、高粘性であるために、増粘剤として有用である。
本発明の高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０（９理化学的性
質を次に示す。
質を次に示す。
（１）元素分析
Ｃ：４２．２チ
Ｈ： ６．９Ｔ。
Ｏ：５０．４％
伐）分子量
中 限外濾過法による場合。
Ｓｅｐｈｍｒｏｓｅ ２ Ｂによる限外濾過を行なった
結果を第１図に示した。
結果を第１図に示した。
カラムサイズ２．５ｘ４Ｑ、５ｃｍ；フラクション５．
Ｐ：試料２．５ダ（１ｄ）を負荷；展開剤０．０５ Ｍ
シん酸緩衝液（ｐｉ−１６，０）：の条件により、本物
質はほぼＶｏｉｄ Ｖｏｌｕｍｅ付近に分画される。
Ｐ：試料２．５ダ（１ｄ）を負荷；展開剤０．０５ Ｍ
シん酸緩衝液（ｐｉ−１６，０）：の条件により、本物
質はほぼＶｏｉｄ Ｖｏｌｕｍｅ付近に分画される。
（１１）超遠心法による場合。
０．２Ｍりん酸緩衝液（ＰＨ７，３）に０，１チ濃度で
溶解した試料について超遠心法（設定回転数５１．２０
ＯＲＰＭ）により沈降定数を求めたところ７．９ Ｂ
Ｓ （Ｓ ： Ｓｖｅｄｂｄｒｇ単位）であった。
溶解した試料について超遠心法（設定回転数５１．２０
ＯＲＰＭ）により沈降定数を求めたところ７．９ Ｂ
Ｓ （Ｓ ： Ｓｖｅｄｂｄｒｇ単位）であった。
（５）融 点（分解点）
本物質は２６２℃付近で変色が始まり、２６３〜２６４
”Ｏで黒変する。
”Ｏで黒変する。
（４）比旋光度
〔α〕み８＝＋３五２（Ｃ＝０．５％）（５）紫外部吸
収スペクトル 第２図に示す通りである。
収スペクトル 第２図に示す通りである。
（６）赤外部吸収スはクトル
第３図に示す通りである。
Ｑ）溶剤に対する溶解性
水に可溶、メタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ルに不溶。
ルに不溶。
但） 呈色反応
中 モーリッシュ反応 ＋（１１）アンス
ロン反応 十６１ム システィン−硫
酸反応 ＋（ψ アニリン−塩酸反応
−（Ｖ） カルバゾール−硫酸反応 −（
ｖｉ） エルソンーモルガン反応 −（Ｖ＋１
） ビユレット反応 −（９）塙基
性、酸性、中性の別 本物質の０．１チ〜０．５％水溶液の−は中性である。
ロン反応 十６１ム システィン−硫
酸反応 ＋（ψ アニリン−塩酸反応
−（Ｖ） カルバゾール−硫酸反応 −（
ｖｉ） エルソンーモルガン反応 −（Ｖ＋１
） ビユレット反応 −（９）塙基
性、酸性、中性の別 本物質の０．１チ〜０．５％水溶液の−は中性である。
顛 物質の色
本物質の凍結乾燥物は白色繊維状である。
ａυ 構相糖の種類
５悌ＳＥ−５２（２ｍカラム）を使用し、Ｇ Ｌ Ｃに
よる構成糖の種類を調べた。
よる構成糖の種類を調べた。
条件：昇温１５０℃〜２３０℃（３℃／ｍ１ｎ）試料を
２Ｎ−ＨｚＳＯａで沸とう水中４時間加水分解し、炭酸
バリウムで中和後Ｐ遇した。Ｐ液についてアンバーライ
トＩＲＡ−４１０およびアンバーライ） ＩＲ−１２０
Ｂで脱塩後濃縮乾固し、ＴＭＳ化してＧＬＣにかけた。
２Ｎ−ＨｚＳＯａで沸とう水中４時間加水分解し、炭酸
バリウムで中和後Ｐ遇した。Ｐ液についてアンバーライ
トＩＲＡ−４１０およびアンバーライ） ＩＲ−１２０
Ｂで脱塩後濃縮乾固し、ＴＭＳ化してＧＬＣにかけた。
その結果、本物質の構成糖としてグＪνコース、ガラク
トースが認められた。
トースが認められた。
０３ 構成糖の組成比
試料を２Ｎ−ＨｚＳＯａで沸とう水中４時間〃口水分解
し、炭酸バリウムで中和後テ過し、そのＰ液について酵
素法によシ構成糖の組成比を調べた。その結果グルコー
ス：ガラクトース＝２．２〜１．９：１であった。
し、炭酸バリウムで中和後テ過し、そのＰ液について酵
素法によシ構成糖の組成比を調べた。その結果グルコー
ス：ガラクトース＝２．２〜１．９：１であった。
（１３Ｃ−ＮＭＲスはり） ル（Ｄ、Ｏ中、 ＴＭＳ
基準）（ｐｐｍ） 第４図に結果を示した。
基準）（ｐｐｍ） 第４図に結果を示した。
Ｉ 酵素による分解性
（，０５Ｍ酢酸緩衝液に溶解した本物質について各種酵
素を作用させた。酵素による分解性はソモギー・ネルノ
ン法による還元糖量の増加で判定した。
素を作用させた。酵素による分解性はソモギー・ネルノ
ン法による還元糖量の増加で判定した。
使用した酵素と反応条件
器、 α−Ａｍｙｌａｓｅ（ベーリンガー社）ｐＨ５，
９，５７″Ｏ。
９，５７″Ｏ。
４時間
す、β−Ａｍｙｌａｓ＠（ベーリンガー社）ｐＨ４，８
゜６０℃、４時間 Ｃ０β−Ｇｍｌａｅｔｏｓｉｄａｓ＠（ベーリンガー社
）ｐａ−１４，８゜！１０℃、４時間 ｄ、 Ａｒｎｙｌｏｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ（ベーリ
ンガー社）ｐｉ−１４，８゜３０℃、４時間 ｅ、α−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ（ベーリンガー社
）ｐｉ−１４，８゜３０℃、４時間 上記条件下では１〜・すべてにおいて、還元糖量の増７
Ｊ］１ｆｉ全く認められなかった。
゜６０℃、４時間 Ｃ０β−Ｇｍｌａｅｔｏｓｉｄａｓ＠（ベーリンガー社
）ｐａ−１４，８゜！１０℃、４時間 ｄ、 Ａｒｎｙｌｏｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅ（ベーリ
ンガー社）ｐｉ−１４，８゜３０℃、４時間 ｅ、α−ｇａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅ（ベーリンガー社
）ｐｉ−１４，８゜３０℃、４時間 上記条件下では１〜・すべてにおいて、還元糖量の増７
Ｊ］１ｆｉ全く認められなかった。
ｆｉｎ ＬＤ５゜
ｄｄＹ ５ ｖ♀マウスで平均体重２１．５ｊ’、１群
７匹）を用い、生理食塩水に溶解した試料を各種投与量
で腹腔内に１回投与して１０日間観察しＬＤ５ｏを求め
た。その結果ＬＤ５゜は２００〜／ ｋｇ体重以上であ
った。
７匹）を用い、生理食塩水に溶解した試料を各種投与量
で腹腔内に１回投与して１０日間観察しＬＤ５ｏを求め
た。その結果ＬＤ５゜は２００〜／ ｋｇ体重以上であ
った。
次にキサンタンガムについて記載する。
キサンタンガムは、古くから知られた物質で、その毒性
は十分試験され、現在では、毒性が全くないことが確認
され１食品添加剤として認可され、多くの食品に添加さ
れて、実際に利用されているものである。しがしながら
、キサンタンガムに免疫賦活活性があることは全く知ら
れていなかった。
は十分試験され、現在では、毒性が全くないことが確認
され１食品添加剤として認可され、多くの食品に添加さ
れて、実際に利用されているものである。しがしながら
、キサンタンガムに免疫賦活活性があることは全く知ら
れていなかった。
キサンタンガＡ （Ｘａｎｔｈａｎ Ｇｕｍ）は、１９
６０年代に米国農務省の開発に係るもので、現在では米
国ケルコ社（Ｋｅｌｅｏ Ｃｏ、 ）において大量生産
され、ケルト凹−ル（商品名： Ｋｅｌｔｒｏｌ）の名
称で市販されているので、これを購入すれば、大量入手
し得るものである。
６０年代に米国農務省の開発に係るもので、現在では米
国ケルコ社（Ｋｅｌｅｏ Ｃｏ、 ）において大量生産
され、ケルト凹−ル（商品名： Ｋｅｌｔｒｏｌ）の名
称で市販されているので、これを購入すれば、大量入手
し得るものである。
また、別途生産しようとすればキサントモナス・キャン
はストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐ＠５ｔ
ｒｉｓ）ＮＩＡ８Ｘ１−１−１ を培養して生産する
ことができる。
はストリス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐ＠５ｔ
ｒｉｓ）ＮＩＡ８Ｘ１−１−１ を培養して生産する
ことができる。
キサントモナス・キャンはストリスＮＩＡＳＸ１−１−
１は例えば次の培地Ａ又は培地Ｂで、２８〜３１℃、−
６〜ｚ５で通気攪拌培養される。
１は例えば次の培地Ａ又は培地Ｂで、２８〜３１℃、−
６〜ｚ５で通気攪拌培養される。
培地Ａ
Ｇｌｕｃｏｍ＠２．６％
ホエー透析液 α１−
に工ＨＰＯ４α５チ
Ｍｇ８０ａ７Ｈ２００，ＯＩ Ｔ。
ホエー蛋白分解物 ０．２％
ＰＩ（７，０
培地・Ｂ
Ｇｌａｃｏｓｅ ２ ％
酵母エキス ０．２５チ
はプトン ０．５％
にオＨＰＯ４０，５％
Ｍｔ８０ａ７Ｈ茸０ ０．０１％ｐＨ７，０
得られた培養液は水で希釈し、遠心分離によって菌体及
び不純物を分離除去し、これに多量のアルコールを添加
することによって沈澱物として取得することができる。
び不純物を分離除去し、これに多量のアルコールを添加
することによって沈澱物として取得することができる。
得られた沈澱物は加水とアルコール添加をくりかえすこ
とによって精製することができる。
とによって精製することができる。
このようにして得られる精製キサンタンガムの性状は次
の通りである。
の通りである。
外 観： 黄白色
水 分＝ １１〜１２チ
灰 分： ９〜１０チ
窒 素： １２％
灰化温度：４７０℃
１％蒸留水溶液での測定値は、次の通りである。
屈折率（２０℃）： ｔ５５５２〜１．５３５８表面張
力 ： ７５ ｄｙｎ＠／（３１また、キサンタン
ガムの構造はよく解明され。
力 ： ７５ ｄｙｎ＠／（３１また、キサンタン
ガムの構造はよく解明され。
その主要構成糖はグルコース、マンノース及びグルクロ
ン酸で、そのナトリウム、カリウム又はカルシウム塩か
ら構成され、各構成糖がβ−結合し走置鎖状の多糖体で
、マンノースがある一定間隔でグルコースに側鎖として
結合していると考えられている（食品と科学４．１９７
７．９２〜９６頁）。
ン酸で、そのナトリウム、カリウム又はカルシウム塩か
ら構成され、各構成糖がβ−結合し走置鎖状の多糖体で
、マンノースがある一定間隔でグルコースに側鎖として
結合していると考えられている（食品と科学４．１９７
７．９２〜９６頁）。
本発明においては担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の
制癌性多糖体が併用される。投与は各別でもよいが、両
者を混合して一定剣状として混合投与するのが便利であ
る。
制癌性多糖体が併用される。投与は各別でもよいが、両
者を混合して一定剣状として混合投与するのが便利であ
る。
本発明に用いる担子菌由来の制癌性物質及び細菌由来の
制癌性多糖体はいずれも毒性が着しるしく低いために大
量生体投与が可能であり、投与量は、それぞれ１０〜Ｉ
Ｑ ［１００１９７ｋｇ ／ ｄａｙ程度であり１両
者は混合される。その剣状は散剤、カプセル剤、水剤、
乳剤などで、注射薬、内服薬、生薬などＫよって投与さ
れる。
制癌性多糖体はいずれも毒性が着しるしく低いために大
量生体投与が可能であり、投与量は、それぞれ１０〜Ｉ
Ｑ ［１００１９７ｋｇ ／ ｄａｙ程度であり１両
者は混合される。その剣状は散剤、カプセル剤、水剤、
乳剤などで、注射薬、内服薬、生薬などＫよって投与さ
れる。
次に製造例及び実施例を示す。
製造例ｔ
レイク（マンネンタケ）１＃を１４！の水に入れ、１０
〜１５分間煮沸する。この熱水部分を硫安で飽和させ、
沈澱を得る。沈澱を水で溶解し、遠心分離して上澄液を
得る。この上澄液を透析後凍結乾燥して２？のレイク熱
水抽出物を得る。
〜１５分間煮沸する。この熱水部分を硫安で飽和させ、
沈澱を得る。沈澱を水で溶解し、遠心分離して上澄液を
得る。この上澄液を透析後凍結乾燥して２？のレイク熱
水抽出物を得る。
製造例２
ホエー培地（１０１６９／Ｙホエー粉＋〇、 ５ ％
ｗ／マビール酵母エキス）１０！にＬａｃｔｏｂａｅｔ
ｌｌｕｓＪｕｇｕｒｓｉ ？ＩｋＬ８５１ 、 ＦＥＲ
Ｍ−Ｐ Ｎｎ５８５１を接種し、６７℃で２４時間静置
培養し、培養終了後、遠心分離（１０ｓ０００ ｒｐｍ
ｌ １５ｍ１ｎ）にて培養上澄液９２！を得る。この上
澄液に９９５チェチルアルコールを最終濃度として３５
チ（マ／マ）となるように添加する６本操作により沈澱
物質が緒められるようになり、この沈澱物質を遠心分離
（１０ｅ０００ ｒｐｌ’ｆ１．５ ｍ１ｎ）Ｌ、沈澱
物質１．２ｊ’を得る。
ｗ／マビール酵母エキス）１０！にＬａｃｔｏｂａｅｔ
ｌｌｕｓＪｕｇｕｒｓｉ ？ＩｋＬ８５１ 、 ＦＥＲ
Ｍ−Ｐ Ｎｎ５８５１を接種し、６７℃で２４時間静置
培養し、培養終了後、遠心分離（１０ｓ０００ ｒｐｍ
ｌ １５ｍ１ｎ）にて培養上澄液９２！を得る。この上
澄液に９９５チェチルアルコールを最終濃度として３５
チ（マ／マ）となるように添加する６本操作により沈澱
物質が緒められるようになり、この沈澱物質を遠心分離
（１０ｅ０００ ｒｐｌ’ｆ１．５ ｍ１ｎ）Ｌ、沈澱
物質１．２ｊ’を得る。
この沈澱物質にイオン交換水を刀口え溶解後、不溶性物
質を遠心分離（１０ｅ０００ ｒｐｍ、 １５ ｍ１ｎ
）にて除去する。本操作を計３回繰り返すことにより８
００■の粗精製物が得られる。
質を遠心分離（１０ｅ０００ ｒｐｍ、 １５ ｍ１ｎ
）にて除去する。本操作を計３回繰り返すことにより８
００■の粗精製物が得られる。
ここに得られた粗精製物を０．０５ Ｍりん酸緩衝液（
ｐ）１６．０）に溶解し、同緩衝液で十分に緩衝化シタ
ジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ −セルロ
ース）を充填したカラムに負荷する。同緩衝液を流し、
ＤＥＡＥ−セルロースに非吸着性物質を含む通過液を採
取する。非吸着性物質を含む溶液を凍結乾燥した後、イ
オン交換水に溶解し、イオン交換水に対して１０℃で４
日間、透析チューブにて透析を行なう。透析終了後、透
析内液を凍結乾燥し、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０の
凍結乾燥標品５００■を得る。
ｐ）１６．０）に溶解し、同緩衝液で十分に緩衝化シタ
ジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥＡＥ −セルロ
ース）を充填したカラムに負荷する。同緩衝液を流し、
ＤＥＡＥ−セルロースに非吸着性物質を含む通過液を採
取する。非吸着性物質を含む溶液を凍結乾燥した後、イ
オン交換水に溶解し、イオン交換水に対して１０℃で４
日間、透析チューブにて透析を行なう。透析終了後、透
析内液を凍結乾燥し、高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０の
凍結乾燥標品５００■を得る。
実施例ｔ
ＩＣＲ系５週令の雌性マウスを用い％１群５匹とし、予
め１週間ＩＣＲ系マウスに継代増殖させ九Ｓｔｒｅａｍ
ｓ １８０腹水ａｆｌＪ細胞をＩ Ｘ １５５個腹腔内
に移植し、翌日よシ連続９日間、対照群には生理食塩水
を、試験群には生理食境水に溶解した試験試料を腹腔的
投与した。全投与量はキサンタンガム単独投与群では５
０１９／ｋｇ、キサンタンガなと製造例１で得たレイシ
熱水抽出物併用投与群ではそれぞれ５０Ｉｋｙ／ｋｇ、
レイシ熱水抽出物単独投与群では５０ダ／に９とした。
め１週間ＩＣＲ系マウスに継代増殖させ九Ｓｔｒｅａｍ
ｓ １８０腹水ａｆｌＪ細胞をＩ Ｘ １５５個腹腔内
に移植し、翌日よシ連続９日間、対照群には生理食塩水
を、試験群には生理食境水に溶解した試験試料を腹腔的
投与した。全投与量はキサンタンガム単独投与群では５
０１９／ｋｇ、キサンタンガなと製造例１で得たレイシ
熱水抽出物併用投与群ではそれぞれ５０Ｉｋｙ／ｋｇ、
レイシ熱水抽出物単独投与群では５０ダ／に９とした。
抗腫瘍活性における有効性は、移植後６０日０の生存マ
ウスの菌数で判定した。
ウスの菌数で判定した。
その結果は次の表に示される。
実施例２゜
ＩＣＲ系５週令の雌性マウスを用い、１群５〜６匹とし
、予め１週間ＩＣＲ系マウスに継代増殖させたＳ息ｒｅ
ｏｍａ １８０腹水腫瘍細胞を５Ｘ１０’個皮下に移植
し、翌日より連続９日間、対照群には生理食塩水を、試
験群にれ生理食１水にｆ！Ｉ４Ｍシた試験試料を腹腔的
投与した。全役４量にキサンタンガム単独投与群では７
５■メ切、キサンタンガムと製造例１で得たレイシ熱水
抽ｍ物併用投与群ではそれぞれ７５１１９７にｇ、２５
■／に９．レイシ熱水抽出物単独投与群では２５１ｊ１
ｇ／Ｉｃｇとした。抗腫瘍活性における有効性は、移植
後２１日０Ｋ固型腫瘍の長径、短径を測定し腫瘍面積で
判定した。
、予め１週間ＩＣＲ系マウスに継代増殖させたＳ息ｒｅ
ｏｍａ １８０腹水腫瘍細胞を５Ｘ１０’個皮下に移植
し、翌日より連続９日間、対照群には生理食塩水を、試
験群にれ生理食１水にｆ！Ｉ４Ｍシた試験試料を腹腔的
投与した。全役４量にキサンタンガム単独投与群では７
５■メ切、キサンタンガムと製造例１で得たレイシ熱水
抽ｍ物併用投与群ではそれぞれ７５１１９７にｇ、２５
■／に９．レイシ熱水抽出物単独投与群では２５１ｊ１
ｇ／Ｉｃｇとした。抗腫瘍活性における有効性は、移植
後２１日０Ｋ固型腫瘍の長径、短径を測定し腫瘍面積で
判定した。
その結果は次の表に示される。
第１図は縞分子多４＠類物質ＭＰＳ−８０の限外濾過に
よる展開Ｖである。 １・・・高分子多＃１類物質ＭＰＳ−８０ｂ ＝−Ｂｌ
ｕｅ Ｄｓｘｔｒａｎ 第２図は高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０の紫外部吸収ス
はクトルを、第３図は同じく赤外部吸収スぼクトルを、
第４図は同じ（Ｃ−ＮＭＲスにクトルを示す図である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男
よる展開Ｖである。 １・・・高分子多＃１類物質ＭＰＳ−８０ｂ ＝−Ｂｌ
ｕｅ Ｄｓｘｔｒａｎ 第２図は高分子多糖類物質ＭＰＳ−８０の紫外部吸収ス
はクトルを、第３図は同じく赤外部吸収スぼクトルを、
第４図は同じ（Ｃ−ＮＭＲスにクトルを示す図である。 代理人 弁理士 戸 １）親 男
Claims (1)
- （１） 担子菌由来の制癌性物質と細菌由来の制癌性
多糖体とからなる免疫賦活剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56160280A JPS5862118A (ja) | 1981-10-09 | 1981-10-09 | 免疫賦活剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP56160280A JPS5862118A (ja) | 1981-10-09 | 1981-10-09 | 免疫賦活剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5862118A true JPS5862118A (ja) | 1983-04-13 |
Family
ID=15711572
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56160280A Pending JPS5862118A (ja) | 1981-10-09 | 1981-10-09 | 免疫賦活剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5862118A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6372629A (ja) * | 1986-09-17 | 1988-04-02 | Kyoritsu Yakuhin Kogyo Kk | 霊芝から生理活性エキスを製造する方法 |
| US5721134A (en) * | 1990-12-04 | 1998-02-24 | Il-Yang Pharmaceutical Co., Ltd. | Ganoderma lucidum KCCM 10045 which produces proteoglycan (G009) having effect of antitumor immunity |
| WO2009087368A1 (en) * | 2008-01-04 | 2009-07-16 | The University Of Nottingham | Compositions comprising ganoderma lucidum extracts and uses thereof |
-
1981
- 1981-10-09 JP JP56160280A patent/JPS5862118A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6372629A (ja) * | 1986-09-17 | 1988-04-02 | Kyoritsu Yakuhin Kogyo Kk | 霊芝から生理活性エキスを製造する方法 |
| JPH0351689B2 (ja) * | 1986-09-17 | 1991-08-07 | Kyoritsu Yakuhin Kogyo Kk | |
| US5721134A (en) * | 1990-12-04 | 1998-02-24 | Il-Yang Pharmaceutical Co., Ltd. | Ganoderma lucidum KCCM 10045 which produces proteoglycan (G009) having effect of antitumor immunity |
| WO2009087368A1 (en) * | 2008-01-04 | 2009-07-16 | The University Of Nottingham | Compositions comprising ganoderma lucidum extracts and uses thereof |
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