JPS5840093A - 有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法 - Google Patents
有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法Info
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- JPS5840093A JPS5840093A JP13589181A JP13589181A JPS5840093A JP S5840093 A JPS5840093 A JP S5840093A JP 13589181 A JP13589181 A JP 13589181A JP 13589181 A JP13589181 A JP 13589181A JP S5840093 A JPS5840093 A JP S5840093A
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/56—Lactic acid
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- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は右旋性乳酸の製造方法に関し、更に詳しくは好
熱性有胞子細菌を、熱が少い培地で好気的に培養した後
、そのままか、または固定化して、糖が多い培地と接触
させて非好気的に保つことによる右旋性乳酸の製造方法
に関する。
熱性有胞子細菌を、熱が少い培地で好気的に培養した後
、そのままか、または固定化して、糖が多い培地と接触
させて非好気的に保つことによる右旋性乳酸の製造方法
に関する。
乳酸には、右旋性、左旋性および両者が等量混合したラ
セミ性のものがあり、化学合成法によれば、ラセミ性の
もののみを生じ、従来の発酵法でも、おおむねラセミ性
のものが得られていた。
セミ性のものがあり、化学合成法によれば、ラセミ性の
もののみを生じ、従来の発酵法でも、おおむねラセミ性
のものが得られていた。
近年、保健上の理由から、右旋性乳酸の需要が高まり、
その製造が検討されるようになった。合成法によらない
乳酸の製造となると、乳酸菌、もしくはケカビ類による
発酵法を考えるのが常識である。右旋性乳酸製造がむつ
かしいのは、左旋性乳酸やラセミ性乳酸を作る乳酸菌や
、旋光性乳酸をラセミ化する作用がある雑菌が混入する
と、純粋な右旋性乳酸にならない点にある。
その製造が検討されるようになった。合成法によらない
乳酸の製造となると、乳酸菌、もしくはケカビ類による
発酵法を考えるのが常識である。右旋性乳酸製造がむつ
かしいのは、左旋性乳酸やラセミ性乳酸を作る乳酸菌や
、旋光性乳酸をラセミ化する作用がある雑菌が混入する
と、純粋な右旋性乳酸にならない点にある。
この困難を乗り切るためには、右旋性乳酸のみを作る乳
酸菌を完全純粋培養するか、或は殆どの雑菌が生育でき
ないような高温で、この種の菌を培養すればよい。
酸菌を完全純粋培養するか、或は殆どの雑菌が生育でき
ないような高温で、この種の菌を培養すればよい。
ところが、高熱性の強力な乳酸菌は、すべて、左旋性な
いしラセミ性の乳酸を作る性質を持ち、好熱性で、右旋
性乳酸を作るラクトバチルス・サリバリウス（Ｌａｃｔ
ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ストレプ
トコックス・テルモフイルス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｃｏｃ
ｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）などは発酵力が弱
くて、問題にならない。
いしラセミ性の乳酸を作る性質を持ち、好熱性で、右旋
性乳酸を作るラクトバチルス・サリバリウス（Ｌａｃｔ
ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）、ストレプ
トコックス・テルモフイルス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｃｏｃ
ｃｕｓ ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ）などは発酵力が弱
くて、問題にならない。
そこで、現在の所では、右旋性乳酸を作る中温性の菌を
、厳重な菌学的管理の下に純粋培養する■なく、このよ
うな事をすれば、当然、製品が高価なものになる。
、厳重な菌学的管理の下に純粋培養する■なく、このよ
うな事をすれば、当然、製品が高価なものになる。
そこで本発明者は従来の常識を破り、乳酸菌でもケカビ
でもない、好熱性有胞子細菌に着目した。この種の菌が
非好気状態で乳酸発酵をおこなうことは公知の事実であ
るが、発酵力が微弱であると考えられて来たため、従来
、これらが乳酸製造に使われた事はない。
でもない、好熱性有胞子細菌に着目した。この種の菌が
非好気状態で乳酸発酵をおこなうことは公知の事実であ
るが、発酵力が微弱であると考えられて来たため、従来
、これらが乳酸製造に使われた事はない。
しかし、研究の結果、この種の菌の中には、細胞当りの
発酵力が強いものがあるが、非好気状態では、単位容積
当りの細胞数の点で、乳酸菌に遥に劣るので、結果とし
て発酵力が弱いように見えるものであることが見出され
た。
発酵力が強いものがあるが、非好気状態では、単位容積
当りの細胞数の点で、乳酸菌に遥に劣るので、結果とし
て発酵力が弱いように見えるものであることが見出され
た。
１バチルス・コアグランスも、バチルス・ステアロテル
モフイルスも好気的に培養すれば、多量の菌体を生ずる
。そこで、培地に、これらの菌を接種して好気的に培養
し、多量の菌体を生じさせてから、酸素の供給を停止し
て、非好気的に培養したところ、乳酸菌なみの乳酸生成
能を示した。
モフイルスも好気的に培養すれば、多量の菌体を生ずる
。そこで、培地に、これらの菌を接種して好気的に培養
し、多量の菌体を生じさせてから、酸素の供給を停止し
て、非好気的に培養したところ、乳酸菌なみの乳酸生成
能を示した。
しかし、多量の糖の存在下に、好気培養すると酢酸を主
とする揮発酸を生じ、これが乳酸の品質を著しく損うこ
とがわかった。そこで、好気培養の段階では、なるべく
糖を減らし、非好気的な本培養に際しては充分に糖を供
給することを試みたところ、極めて安全に右旋性乳酸が
得られることがわかった。
とする揮発酸を生じ、これが乳酸の品質を著しく損うこ
とがわかった。そこで、好気培養の段階では、なるべく
糖を減らし、非好気的な本培養に際しては充分に糖を供
給することを試みたところ、極めて安全に右旋性乳酸が
得られることがわかった。
好気培養の段階では、糖を全く与えなくてもよいが、そ
の場合は、菌体が生ずるための力源として有機窒素化合
物が消費される。従って、価格の点も考え合わせて培地
組成を決めればよいが、糖は２％以内であることが望ま
しい。通気量は多いほどよいが、経済性を考慮して決め
ればよい。
の場合は、菌体が生ずるための力源として有機窒素化合
物が消費される。従って、価格の点も考え合わせて培地
組成を決めればよいが、糖は２％以内であることが望ま
しい。通気量は多いほどよいが、経済性を考慮して決め
ればよい。
本培養の場合の糖の濃度については、糖が略々１００％
乳酸に転化するものとして計算すればよい。また、本培
養に当っては酸素供給をおこなわず、非好気状態にすれ
ばよく、特に完全嫌気状態にする必要はない。
乳酸に転化するものとして計算すればよい。また、本培
養に当っては酸素供給をおこなわず、非好気状態にすれ
ばよく、特に完全嫌気状態にする必要はない。
好気培養に際してｐＨが低いと胞子が形成されず、菌が
死滅しやすいが、中性付近ないし弱塩基性であると胞子
を形成し、極めて安定な菌体となる。要は本培養に際し
て単位容積当りの活性菌数をふやせば良いのであるから
、菌を固定化した後、本培養に移すことは極めて有効で
あり、特に、この場合、胞子形成をして居ると、固定化
工程中に殆ど死滅しないので具合が良い。固定化された
胞子を本培養に移せば、胞子が発芽、増殖してゲルの中
で確実に微小コロニーを生じ、単位容積当りの菌数が増
加する結果になる。
死滅しやすいが、中性付近ないし弱塩基性であると胞子
を形成し、極めて安定な菌体となる。要は本培養に際し
て単位容積当りの活性菌数をふやせば良いのであるから
、菌を固定化した後、本培養に移すことは極めて有効で
あり、特に、この場合、胞子形成をして居ると、固定化
工程中に殆ど死滅しないので具合が良い。固定化された
胞子を本培養に移せば、胞子が発芽、増殖してゲルの中
で確実に微小コロニーを生じ、単位容積当りの菌数が増
加する結果になる。
以上の理由により、好気培養段階の培地のｐＨは低くな
いことが望ましい。本培養の場合は、胞子形成というこ
とは無いが、ｐＨが低いと菌の活性が衰えるので、やは
り、中性付近であることが好ましい。
いことが望ましい。本培養の場合は、胞子形成というこ
とは無いが、ｐＨが低いと菌の活性が衰えるので、やは
り、中性付近であることが好ましい。
次に菌の名称についてであるが、好気的にも非好気的に
も生育し、原則として菌膜を作らず、乳酸発酵能力があ
る好熱性細菌の内、３０℃ないし６０℃で生育するもの
が、バチルス・コアグランス、３０℃では生育せず、７
０℃或はそれ以上でも生育するものが、バチルス・ステ
アロテルモフイルスと呼ばれており、両菌とも、多くの
異名を持っているが、近年はバチルス・コアグランスお
よびバチルス・ステアロテルモフィルスの２種に統一さ
れるようになっており、仮に保存機関での名称が、バチ
ルス・テルモアシドランス（Ｂａ−ｃｉｌｌｕｓ ｔｈ
ｅｒｍｏａｃ１ｄｕｒａｎ１１）、バチルス・カリドラ
クチス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｉｄｏｌａｃｔｉｓ
）、ラクトバチルス・テルモフイルス（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏ−ｐｈｉｌｕｓ）などの旧
名となっていても、５０℃以上でよく生育し、胞子形成
能力および右旋性乳酸生産能力がある細菌であれば、本
発明の方法に使うことができる。
も生育し、原則として菌膜を作らず、乳酸発酵能力があ
る好熱性細菌の内、３０℃ないし６０℃で生育するもの
が、バチルス・コアグランス、３０℃では生育せず、７
０℃或はそれ以上でも生育するものが、バチルス・ステ
アロテルモフイルスと呼ばれており、両菌とも、多くの
異名を持っているが、近年はバチルス・コアグランスお
よびバチルス・ステアロテルモフィルスの２種に統一さ
れるようになっており、仮に保存機関での名称が、バチ
ルス・テルモアシドランス（Ｂａ−ｃｉｌｌｕｓ ｔｈ
ｅｒｍｏａｃ１ｄｕｒａｎ１１）、バチルス・カリドラ
クチス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃａｌｉｄｏｌａｃｔｉｓ
）、ラクトバチルス・テルモフイルス（Ｌａｃｔｏｂａ
ｃｉｌｌｕｓ ｔｈｅｒｍｏ−ｐｈｉｌｕｓ）などの旧
名となっていても、５０℃以上でよく生育し、胞子形成
能力および右旋性乳酸生産能力がある細菌であれば、本
発明の方法に使うことができる。
乳酸発酵性能に優劣があるが、この種の菌は自然界に広
く分布しており、本発明の方法は特定の菌株を必要とす
るものではない。酸はエキス、ペプトン、ブドウ糖を含
む液体培地に土壌などを接種して５０℃以上で非好気的
に培養し、菌は生育してｐＨが低下したものを平板培養
すれば容易に分離することができ、幾つかの株を配合し
て使用してもよい。
く分布しており、本発明の方法は特定の菌株を必要とす
るものではない。酸はエキス、ペプトン、ブドウ糖を含
む液体培地に土壌などを接種して５０℃以上で非好気的
に培養し、菌は生育してｐＨが低下したものを平板培養
すれば容易に分離することができ、幾つかの株を配合し
て使用してもよい。
以上、本発明の方法を要約すれば次のとおりである。
胞子形成能力および右旋性乳酸生産能力がある好熱性細
菌、即ちバチルス・コアグランスまたはバチルス・ステ
アロテルモフィルスに属する細菌を、糖分が多すぎず、
ｐＨが低すぎない培地で好気的に培要して菌体を増蝕さ
せると共に胞子を形成させ、そのままか、もしくは胞子
を含む菌体を常法により固定化し、或は固定化後乾燥し
たものを、多量の糖を含む培地と接触させ、極端なｐＨ
低下を防ぎつつ、使用菌は発芽、増殖するが、雑菌は増
殖しにくいような高温に保持して右旋性乳酸を生成させ
た後、常法により乳酸を抽出精製すればよい。
菌、即ちバチルス・コアグランスまたはバチルス・ステ
アロテルモフィルスに属する細菌を、糖分が多すぎず、
ｐＨが低すぎない培地で好気的に培要して菌体を増蝕さ
せると共に胞子を形成させ、そのままか、もしくは胞子
を含む菌体を常法により固定化し、或は固定化後乾燥し
たものを、多量の糖を含む培地と接触させ、極端なｐＨ
低下を防ぎつつ、使用菌は発芽、増殖するが、雑菌は増
殖しにくいような高温に保持して右旋性乳酸を生成させ
た後、常法により乳酸を抽出精製すればよい。
以下、実施例について述べる。
実施例 １
５００ｍｌ容の振とうフラスコに、リン酸第２カリウム
（Ｋ２ＨＰＯ４）０．１％、硫酸マグネシウム（ＭｇＳ
Ｏ４・７Ｈ２Ｏ）０．０５％、硫酸第１鉄（ＦｅＳＯ４
・７Ｈ２Ｏ）０．０１％、コーンスチーブ４％、酵母エ
キス１％、結晶ブドウ糖０．５％、沈降炭酸カルシウム
（ＣａＣＯ３）０．２５％から成る液体培地を１００ｍ
ｌ入れて、１１５℃に１５分間加熱滅菌し、バチルス・
コアグランス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｎ）ＴＡＭ １１
９４ を１白金耳接種して４１℃で３６時間振とう培養
したところ、培地１ｍｌ 当り２．１×１０９個の菌体
を生じ、胞子形成率は９２％であった。なお、初発ｐＨ
は６．８、培養終了後のｐＨは８．４であった。
（Ｋ２ＨＰＯ４）０．１％、硫酸マグネシウム（ＭｇＳ
Ｏ４・７Ｈ２Ｏ）０．０５％、硫酸第１鉄（ＦｅＳＯ４
・７Ｈ２Ｏ）０．０１％、コーンスチーブ４％、酵母エ
キス１％、結晶ブドウ糖０．５％、沈降炭酸カルシウム
（ＣａＣＯ３）０．２５％から成る液体培地を１００ｍ
ｌ入れて、１１５℃に１５分間加熱滅菌し、バチルス・
コアグランス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｎ）ＴＡＭ １１
９４ を１白金耳接種して４１℃で３６時間振とう培養
したところ、培地１ｍｌ 当り２．１×１０９個の菌体
を生じ、胞子形成率は９２％であった。なお、初発ｐＨ
は６．８、培養終了後のｐＨは８．４であった。
このフラスコに無殺菌の結晶ブトウ糖５０ｇ、沈降炭酸
カルシウム２６、水道水４００ｍｌを入れ、更にラセミ
乳酸生酸菌が多数混在している糖みそ０．１ｇを混ぜて
５０℃に５日間保持した後、常法により乳酸を回収した
所、乳酸４６．２ｇが得られ、酵素法により定量した所
、９５．４％が右施性乳酸であった。
カルシウム２６、水道水４００ｍｌを入れ、更にラセミ
乳酸生酸菌が多数混在している糖みそ０．１ｇを混ぜて
５０℃に５日間保持した後、常法により乳酸を回収した
所、乳酸４６．２ｇが得られ、酵素法により定量した所
、９５．４％が右施性乳酸であった。
なお振とう培養をおこなわず、他の点は本実験と同じに
おこった対照実験では、乳酸の取量は２３．５ｇ、右旋
性乳酸は７６．３％であった。
おこった対照実験では、乳酸の取量は２３．５ｇ、右旋
性乳酸は７６．３％であった。
実施例 ２
バチルス・コアグランスの代りにバチルス・ステアロテ
ルモフィルス（Ｂａｃｌｌｕｓ ｓｔｓａｒｏｔｈｅｒ
ｍｏ−ｐｈｉｌｕｓ）ＴＡＭ １２０４３ を用い、振
とう培養温度を６０℃、非好気的に保持する温度を７０
℃とした他は実施例１と同様にしたところ、振とう培養
に於ける菌体取量は倍地１ｍｌ当り１．３×１０９個、
胞子形成率は９６％、乳酸収量は４２．８ｇ、その９８
．６ｇが右施性乳酸であった。振とう培養開始時の液の
ｐＨは６．８、培養終了時のｐＨは８．２であった。尚
、振とう培養をおこなわず、他の点は本実験と同じにお
こなったところ、乳酸の収量は１２．８％、右施性乳酸
は９０．４％であった。炭酸カルシウムを過剰に添加し
て乳酸生成菌を非好気的に培着したり場合のｐＨは、結
始５〜８の間におさまるので、以後特に記さない。
ルモフィルス（Ｂａｃｌｌｕｓ ｓｔｓａｒｏｔｈｅｒ
ｍｏ−ｐｈｉｌｕｓ）ＴＡＭ １２０４３ を用い、振
とう培養温度を６０℃、非好気的に保持する温度を７０
℃とした他は実施例１と同様にしたところ、振とう培養
に於ける菌体取量は倍地１ｍｌ当り１．３×１０９個、
胞子形成率は９６％、乳酸収量は４２．８ｇ、その９８
．６ｇが右施性乳酸であった。振とう培養開始時の液の
ｐＨは６．８、培養終了時のｐＨは８．２であった。尚
、振とう培養をおこなわず、他の点は本実験と同じにお
こなったところ、乳酸の収量は１２．８％、右施性乳酸
は９０．４％であった。炭酸カルシウムを過剰に添加し
て乳酸生成菌を非好気的に培着したり場合のｐＨは、結
始５〜８の間におさまるので、以後特に記さない。
実施例 ３
実施例１および２の振とう培養の工程で得られた胞子を
含む菌体１００ｍｌずつを混合して２００ｍｌとし、こ
れにアルギン酸ナトリウムの４％水溶液１００ｍｌを混
合し、直径０．３ｍｍの円形ノズル１００個を持つ滴下
装置に入れ、２０ｃｍの高さから、塩化カルシウム（Ｃ
ａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）の５％水溶液中に滴下して、直径
約２．５ｍｍの魚卵状にゲル化させ、１０分間、ゆるや
かにかく判しながら放置した後、流水で３０分間洗って
固定化胞子とした。
含む菌体１００ｍｌずつを混合して２００ｍｌとし、こ
れにアルギン酸ナトリウムの４％水溶液１００ｍｌを混
合し、直径０．３ｍｍの円形ノズル１００個を持つ滴下
装置に入れ、２０ｃｍの高さから、塩化カルシウム（Ｃ
ａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ）の５％水溶液中に滴下して、直径
約２．５ｍｍの魚卵状にゲル化させ、１０分間、ゆるや
かにかく判しながら放置した後、流水で３０分間洗って
固定化胞子とした。
デンプン含量７５％の相成キャリバ・デンプン１４０ｇ
に水道水２６０ｍｌおよひノボ（Ｎｏｖｏ）社の液化酵
素製剤テルマミル（Ｔｈｅｒｍａｍｙ１）６０℃ １２
０ｍｇを加えて混合し、１０５℃に５分、９７℃に１２
０分保持してデンプンを液化させ、６０℃に冷却してか
ら塩酸を加えてｐＨを４．５に修正し、ノボ社の糖化酵
素エー・エム・ジー（ＡＭＧ）２００Ｌを０．１５ｍｌ
混合して６０℃に４８時間保持して糖化させた後、前記
の固定化胞子３００ｍｌ、沈降炭酸カルシウム５０ｇ、
コーンスチーブ１５ｇおよび水道水７００ｍｌを加え、
ゆるやかにかく判しながら６０℃に２日、５０℃に３日
保存した。
に水道水２６０ｍｌおよひノボ（Ｎｏｖｏ）社の液化酵
素製剤テルマミル（Ｔｈｅｒｍａｍｙ１）６０℃ １２
０ｍｇを加えて混合し、１０５℃に５分、９７℃に１２
０分保持してデンプンを液化させ、６０℃に冷却してか
ら塩酸を加えてｐＨを４．５に修正し、ノボ社の糖化酵
素エー・エム・ジー（ＡＭＧ）２００Ｌを０．１５ｍｌ
混合して６０℃に４８時間保持して糖化させた後、前記
の固定化胞子３００ｍｌ、沈降炭酸カルシウム５０ｇ、
コーンスチーブ１５ｇおよび水道水７００ｍｌを加え、
ゆるやかにかく判しながら６０℃に２日、５０℃に３日
保存した。
ゲルをこし分けたろ液から、常法により乳酸を回収した
ところ９２．４ｇが得られ、その９８．６％が右旋性で
あった。
ところ９２．４ｇが得られ、その９８．６％が右旋性で
あった。
実施例 ４
実施例３と同じ固定化胞子３００ｍｌを、赤外線併用通
風乾燥機で乾燥してフレーク状となし、３０℃で３０日
間保存したものを、水にふやかして復元し、実施例３の
固定化胞子の代りに用いたところ、乳酸９０．８ｇが得
られ、その９９．０％が右旋性であった。
風乾燥機で乾燥してフレーク状となし、３０℃で３０日
間保存したものを、水にふやかして復元し、実施例３の
固定化胞子の代りに用いたところ、乳酸９０．８ｇが得
られ、その９９．０％が右旋性であった。
実施例 ５
１ｇ中、５×１０９個の胞子を含むバチルス・コアグラ
ンス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＩＦＯ３８８６の乾燥
胞子粉末２０ｇを、４％カラギナン水溶液１００ｌに混
和し、２％塩化カリウム（Ｋｃｌ）水溶液５００ｌ中に
滴下して、直径約３ｍｍの球状ゲルとした。
ンス（Ｂ．ｃｏａｇｕｌａｎｓ）ＩＦＯ３８８６の乾燥
胞子粉末２０ｇを、４％カラギナン水溶液１００ｌに混
和し、２％塩化カリウム（Ｋｃｌ）水溶液５００ｌ中に
滴下して、直径約３ｍｍの球状ゲルとした。
このものを流水でよく洗った後、リン酸第２カリウム（
Ｋ２ＨＰＯ４）０．０２％、硫酸マグネシウム（ＭｇＳ
Ｏ４・７Ｈ２Ｏ）０．０１％、酵母エキス０．２％、コ
ーンスチーブ２％、フドウ糖０．５％を含む液５００ｍ
ｌを入れた１０００ｌ入り開放計器に入れ、毎分１００
ｌの空気を通気しながら４５℃に１２時間保ってゲルの
中に微小コロニーを出現させて、固定化菌体とした。こ
の場合、液のｐＨは初発６．７、培養終了時７．８であ
った。
Ｋ２ＨＰＯ４）０．０２％、硫酸マグネシウム（ＭｇＳ
Ｏ４・７Ｈ２Ｏ）０．０１％、酵母エキス０．２％、コ
ーンスチーブ２％、フドウ糖０．５％を含む液５００ｍ
ｌを入れた１０００ｌ入り開放計器に入れ、毎分１００
ｌの空気を通気しながら４５℃に１２時間保ってゲルの
中に微小コロニーを出現させて、固定化菌体とした。こ
の場合、液のｐＨは初発６．７、培養終了時７．８であ
った。
一方、厚さ３．５ｍｍ、直径４０ｃｍ、高さ４４ｃｍの
硬質ポリエチレン製５０ｌ容の円筒状反応容器５本を、
底から３５ｃｍの所に取りつけた直径２ｃｍ、長さ５ｃ
ｍのポリエチレン製パイプで直列につなぎ、パイプの入
口には、直径１ｍｍの穴を多数あけたこし板を貼って、
固定化菌体の移行を止め、各容器をマグネチック・スタ
ーラーの上に置いた。
硬質ポリエチレン製５０ｌ容の円筒状反応容器５本を、
底から３５ｃｍの所に取りつけた直径２ｃｍ、長さ５ｃ
ｍのポリエチレン製パイプで直列につなぎ、パイプの入
口には、直径１ｍｍの穴を多数あけたこし板を貼って、
固定化菌体の移行を止め、各容器をマグネチック・スタ
ーラーの上に置いた。
この５つの容器に固定化菌体を等分に入れ、合計１００
０ｌの水道水を流して固定化菌体を洗った後、全体を４
５℃の定温室に入れて、ブドウ糖換算糖度１０％、リン
酸第２カリウム（Ｋ２ＨＰＯ４）０．０１％、硫酸マグ
ネシウム（ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）０．００５％、硫酸
第１鉄（ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）０．００１％、酵母エ
キス０．１％、コーンスチープ２％から成る液に炭酸カ
ルシウム（ＣａＣＯ３）を５％の割に懸濁させたものを
毎時１ｌの割に連続的に流し、マグネチック・スターラ
ーでゆるやかにかく判しながら５０℃に保持した。
０ｌの水道水を流して固定化菌体を洗った後、全体を４
５℃の定温室に入れて、ブドウ糖換算糖度１０％、リン
酸第２カリウム（Ｋ２ＨＰＯ４）０．０１％、硫酸マグ
ネシウム（ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）０．００５％、硫酸
第１鉄（ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ）０．００１％、酵母エ
キス０．１％、コーンスチープ２％から成る液に炭酸カ
ルシウム（ＣａＣＯ３）を５％の割に懸濁させたものを
毎時１ｌの割に連続的に流し、マグネチック・スターラ
ーでゆるやかにかく判しながら５０℃に保持した。
約５日後から、一様な液が流出するようになったので、
６日後から１５日後まで１０日間に得られた液２４０ｌ
から、常法により乳酸を回収したところ、２１．３ｋｇ
が得られ、右旋性乳酸の割合は、９６．８％であった。
６日後から１５日後まで１０日間に得られた液２４０ｌ
から、常法により乳酸を回収したところ、２１．３ｋｇ
が得られ、右旋性乳酸の割合は、９６．８％であった。
出願人 中 山 大 樹
（１４）
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 胞子を形成する性質および、糖から右旋性乳酸を作
る能力があり、かつ４５℃以上で生育し得る細菌を、無
機塩類、窒素源を含み、糖を２％以上含まず、ｐＨ４．
４以上１０．０未満の培地に接種して、３０℃以上７５
℃以下で好気的に培養し、得られた胞子を含む菌体を、
そのままか、もしくは固定化した後、無機塩類、窒素源
および糖を含むｐＨ４．０以上８．２未満の培地と接触
させ、４１℃以上７５℃以下に非好気的に保つことを特
徴とする有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法。 ２ 胞子を形成する性質および、糖から右旋性乳酸を作
る能力があり、かつ４５℃以上で生育し得る細菌として
、バチルス・コアグランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏａ
ｇｕｌａｎｓ）およびバチルス・ステアロテルモフイル
ス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｔｅ−ａｒｏｔｈｏｒｍｏｐ
ｈｉｌｕｓ）を用いることを特徴とする特許請求の範囲
第１項記載の有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法。 ３ 糖から右旋性乳酸を作る能力があり、かつ４５℃以
上で生育しイ得る細菌の胞子を含む菌体を固定化した後
、乾燥したものを用いることを特徴とする特許請求の節
囲第１項記載の有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13589181A JPS606200B2 (ja) | 1981-08-29 | 1981-08-29 | 有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13589181A JPS606200B2 (ja) | 1981-08-29 | 1981-08-29 | 有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5840093A true JPS5840093A (ja) | 1983-03-08 |
| JPS606200B2 JPS606200B2 (ja) | 1985-02-16 |
Family
ID=15162210
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP13589181A Expired JPS606200B2 (ja) | 1981-08-29 | 1981-08-29 | 有胞子細菌による右旋性乳酸の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS606200B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5079164A (en) * | 1989-03-10 | 1992-01-07 | Jungbunzlauer Aktiengesellschaft | Microorganism of the species bacillus ciaguans |
| EP0770684A2 (en) | 1995-10-27 | 1997-05-02 | Shimadzu Corporation | Method for producing L-lactic acid with high optical purity using bacillus strains |
| US8492127B2 (en) | 2010-05-20 | 2013-07-23 | Shanghai Jiao Tong University | Bacillus coagulans strains and their applications in L-lactic acid production |
| DE102017101220A1 (de) | 2017-01-23 | 2018-07-26 | Thyssenkrupp Ag | Minimalmedium zur fermentativen Umsetzung von Mono- und/oder Disacchariden zu Milchsäure mit Bacillus coagulans-Stämmen |
-
1981
- 1981-08-29 JP JP13589181A patent/JPS606200B2/ja not_active Expired
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5079164A (en) * | 1989-03-10 | 1992-01-07 | Jungbunzlauer Aktiengesellschaft | Microorganism of the species bacillus ciaguans |
| EP0770684A2 (en) | 1995-10-27 | 1997-05-02 | Shimadzu Corporation | Method for producing L-lactic acid with high optical purity using bacillus strains |
| US8492127B2 (en) | 2010-05-20 | 2013-07-23 | Shanghai Jiao Tong University | Bacillus coagulans strains and their applications in L-lactic acid production |
| DE102017101220A1 (de) | 2017-01-23 | 2018-07-26 | Thyssenkrupp Ag | Minimalmedium zur fermentativen Umsetzung von Mono- und/oder Disacchariden zu Milchsäure mit Bacillus coagulans-Stämmen |
| DE102017101220B4 (de) | 2017-01-23 | 2019-03-21 | Thyssenkrupp Ag | Minimalmedium zur fermentativen Umsetzung von Mono- und/oder Disacchariden zu Milchsäure mit Bacillus coagulans-Stämmen |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS606200B2 (ja) | 1985-02-16 |
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