JPS5826821A - 組織接着剤並びにその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ファクターＸ［［ｌｅ金含有る人間のまたは
動物の蛋白質、線維素原および抗生物質を基礎とする組
織接着剤並びにその製造方法に関する。

既に、オーストリア特許第３５９．６５２号および同第
３５９．６５３号明細書から線維素原およびファクター
Ｘｍ’ｒ含有する組織接着剤の製造方法が公知であり、
この方法の場合にはファクターＸＩと線維素原および場
合によってはアルブミンとの特定の濃度比を調整しそし
てその製剤を低温凝結または凍結真空乾燥する。この製
剤は本質的に満足させる性質、即ち接着部への高い荷重
許容性および良好な分解性を有している。しかし、゛こ
の製剤は抗菌能力の点で改善することが望まれている。

確に、米国特許第２．５３３．００４号明細書に並びに
フェリンゲル（Ｆｅｌｌｉｎｇｅｔ）等によって雑誌１
ゞ結核病用医者（Ｄｅｒ　Ｔｕｂｅｒｋｕｌｏｓｅａｒ
ｚｔ）“、６／ｌ　ｌ。

（１９５２）において既に、線維素原溶液を抗生物質と
混合しそしてそれを傷用接着剤として用いることが提案
されている。しかし思人のペットの所で初めて調整する
この溶液には、充分な安定性がなく且つこのものから形
成された線維素凝塊に荷重許容性がない。

更に、ベラシュ（ＢＨｓｃｈ）等の研究〔ゞ１整形外科
および災害外科の為の文庫（Ａｒｃｈｉｖ　ｆｕｒ　ｏ
ｒｔｈｏ−ｐＫｄｉｓｃｈｅ　ｕｎｄ　Ｕｎｆａｌｌ−
Ｃｈｉｒｕｒｇｉｅ）”　、第９０巻（１９７７）、第
６３〜７５頁〕から、骨欠損部の補充の為に骨移植片と
関連して線維素抜着剤系を使用することが公知であるが
、この場合には線維素原溶液にトロンビンを加えること
によって選択された場合、即ち骨の凹みの所に直接的に
線維素を形成する。この場合必要に応じて、ネオマイシ
ンの市販の組合せ製剤も粉末状態で添加する。

またＰＣＴ−出願８０１０　Ｏ０８３によれば、線維素
原−抗生物質−ゲルを調整し、その際患者のベットの所
で調整すべき、氷点沈殿物と抗生物質としてのドプラミ
シンおよびケンタミシンとの混合物を使用することも公
知である。

本発明者自身の実験によって、線維素原、ファクターＸ
■および抗生物質を含有する前述の公知組織接着剤が所
望の性質組合せ、即ち接着部の高い荷重許容性と抗菌能
力とのそれを有しておらず、抗生物質とファクターＸＩ
との間に不利な相互作用が生じ、結果的に線維素原の架
橋能力が著しく減退しそして凝固能力に不利な影響を受
けることが判った。それ故に、負傷面あるいは組織面で
の接着剤の強度および接合能力が小さい。

公知の製剤の他の欠点は、組織の所への抗生物質の付与
を迅速に行ない、その結果抗生物質の遅効性が、長時間
に亘って作用を及ぼしそして高い有効物質付与率を達成
するのに充分でないことにある。

本発明は、それらの欠点および困難を回避することを目
的としそして性質の上述の組合せを満足させそして抗生
物質のより良い効能を保証する、人間または動物を出所
とする組織接着剤を造ることを課題としている。

この設定された課題は、初めに規定した種類の組織接着
剤の場合に、ファクターＸＩと線維毒腺トノ比が、１ｇ
の線維毒腺当りのファクターＸ■の単位数で表現して、
少なくとも５００であシそしてアミノグリコシド、ベー
タラクタム、ポリペプチドおよびテトラサイクリンを包
含する群の内の抗生物質が含有されていることによって
解決される。

低温凝結した組織接着剤の場合には、ファクターＸｌ’
ｅ少なくとも４０単位／ｍｌ　の量で含有しているのが
好ましい。

他の実施形態によれば、凍結真空乾燥した組織接着剤の
場合には、少なくとも３３重量％の線維毒腺を含有して
おシ、その際にファクターＸＩが少なくとも１７０単位
／ｇ（凍結乾燥物）の量で存在している。

合目的には、アプロチニン、α２−アンチプラスミン、
α２−マクログロブリン、α、−アンチトリプシン、ε
−アミノカプロン酸およびトラ不キサ／酸なる群の内の
プラスミン−抑制剤あるいはプラスミノケンー賦活剤−
抑制剤を追加的に含有している。

組織接着剤が二成分製剤として存在しており、最初の成
分にファクターＸＩＩＩ、線維毒腺およびプラスミン−
抑制剤あるいはプラスミノケンー賦活剤−抑制剤が含ま
れており、他方、二番目の成分には抗生物質、トロンビ
ンおよび二価のカルシウムが含まれているのが有利であ
る。　　　　−抗生物質が難溶性の誘導体の形で含まれ
ているのが特に有利である。この実施形態の変形は、難
溶性誘導体の他に易溶解性のものも場合によっては組織
接着剤の両方の成分中に分けて使用することより成る。

この実施形態は、易溶解性誘導体が迅速に付与され、高
い初期効力を保証し、他方、難溶性のものが長期の効力
の根拠と成る。

更に本発明は、組織接着剤の製造方法に於て、線維毒腺
含有の血漿留分中においてファクターＸ■と線維毒腺と
の濃度比をファクターＸＩの添加によって、１ｇの線維
毒腺当りのブアクタ−Ｘ■の単位数で表現して、少なく
とも５００に調整し、その土で抗生物質を添加しそして
その製剤を低温凝結または凍結真空乾燥する点で変更し
ている上記製造方法に関する。

他の変法によれば、線維毒腺含有血漿留分中においてフ
ァクターＸ■と線維軍属どの濃度比をファクターＸ■の
添加によって、１ｇの線維毒腺当りのファクターＸ■の
単位数で表現して、少なくとも５００に調整し、その土
でその製剤を低温凝結または凍結真空乾燥しそして融か
すかまたは水を加えて液体状に戻した後に抗生物質含有
溶液と一諸にする。この実施形態の場合には、抗生物質
を融かした後に添加するかまたは水の添加で液体状に戻
した溶液を添加することができる。しかしながらこの実
施形態の場合には、ファクターＸ■の最低濃度を下回ら
ないように注意するべきである。

即ち、４０単位／ｍ１　以上であるべきでちる。

線維毒腺血漿留分の緩衝溶液での洗浄も行なう本発明の
有利な１つの実施形態によれば、その洗浄工程を２００
単位のファクターＸＩＩＩ／ｇ（線維毒腺）なるファク
ターＸ■濃度に達するまで実施し、その上でファクター
ＸＩを濃縮物または凍結乾燥物の状態で添加して少なく
とも３００単位／ｇ（線維毒腺）の量にする。

本発明の組織接着剤あるいはその製造方法を以下の実施
例にて更に詳細に説明する。

実施例１： 人間の凍結した新鮮な血漿から２℃に加温することによ
って氷点沈殿物（ｘｏＯｇ）を得、遠心分離によって分
離しセしてＮａ３−クエン酸塩、Ｎａｃ１１グリセリン
、グリコーゼ、アプロチニンおよびヘパリンを含有する
緩衝溶液中において６．５のＰｌｆ（−値のもとて２度
洗浄しそして分離した沈殿物をグリシン含有緩衝溶液（
２５５ｍｌ）　　に７．９のＰＨ−値のもとて溶解すへ
この溶液のファクターＸ■と線維毒腺との比が２２６単
位（ファクターＸＩＩＩ）／ｇ　（線維毒腺）であるこ
とが判る。５００単位／ｇ（線維毒腺）より多い本発明
に従い望まれる比に調整する為に、この溶液に粉末状態
の９０００単位のファクターＸ■製剤を添加し、それに
よって溶液の濃度を今度は８２６単位（ファクターＸＩ
ＩＩ）／ｇ　（線維毒腺）に濃くする。、この溶液を殺
菌沢過し、次に１．７ｇのケンタミシンを殺菌条件下に
添加し、その混合物を最終容器（２，５ｍ１）中に充填
し、低温凝結しそして凍結真空乾燥する。

実施例２： 氷点沈殿物からの組織接着剤ベースの製造を、実施例１
と同様に実施するが、氷点沈殿物を１度洗浄した後に３
７℃に加温することによって液化させそして粉末状態の
１３．６００単位のファクターＸＩを添加する。この場
合には、９６７単位（ファクターＸＩ［ｌ）／ｇ（線維
毒腺）なるファクターＸ■と線維毒腺この比が得られる
。

この溶液に抗生物質として５．６７　ｇの７−〔（チェ
ニル）−（２１−アセトアミドクーセファロスポラン酸
を添加する。こうして得られる懸濁物を最終容器（１ｍ
ｌ）中に充填しそして低温凝固させる。

ファクターＸ■は、充填した製剤中に８７乍位／ｍｌ　
　の量で含まれている。

実施例１および２に従って製造された組織接着剤の適用
は、融かしたあるいは水の添加で液状に戻した混合物を
トロンビンおよびカルシウム−クロライドと混合しそし
て接合すべき組織に塗布する。両方の成分を接合すべき
組織または充填するべき組織に別々に塗布することも可
能である。

実施例３： 実施例１に従う方法を、抗生物質を添加するまで繰返え
す。洗浄した沈殿物を緩衝溶液に溶解した後に殺菌し、
最終容器（２，５ｍ１）に充填し、低温凝結させそして
凍結真空乾燥し、それによって本発明の組織接着剤の最
初の成分を貯蔵可能とする。第２成分は、塗布前にトロ
ンビンおよび塩化カルシウムから７−［：（チェニル）
−（２１−アセトアミドクーセファロスポラン酸（３０
ｍｇ／ｍ　ｌ　）の添加によって調整する。

実施例４： 実施例２の先行工程を繰返えす。但し、氷点沈殿物の溶
解後にケンタミシン（１，８ｇ）を添加し、その溶液を
最終容器（１ｍ１）に充填しそして低温凝結させる。従
って、本発明の接着剤の最初の成分は貯蔵可能な状態で
ある。１ｍｌの塩化カルシ・ラム／トロンビン−溶液当
り３０．、、、ｍ　ｇの７−〔（チェニル）−（２１−
アセトアミドクーセファロスポラン酸を含有する第２成
分を、適用前に製造する。

実施例１〜４に従って添加したアプロチニンの代りにプ
ラスミン−抑制剤あるいはプラスミノケンー賦活剤−抑
制剤として以下の内の１種または２種以上を使用する：
α２−アンチプラスミン、Ｃ２−マクログロフリン、α
、−アンチトリフンン、ε−アミノカプロン酸およびト
ラ不キサン酸。

本発明に従って製造される組織接着剤は、人間または動
物の組織または機関部分を、非常に改善された抗菌効果
のもとて傷の手当および止血をする為に、縫合すずに接
合するのに一般に用いることができる。

本発明の組織接着剤の同様に改善された抗菌効果の他に
改善された接着性質は、以下の表に総括した比較例から
判る。この場合、ファクターＸ■／線維毒腺−此の大き
い本発明の組織接着剤の架橋度を大きいファクターＸＩ
［ｌ／線線維凍原比を有していない公知の組織接着剤の
架橋度と、種々の抗生物質をそれぞれ使用して比較して
いる。α−架橋度はナトリウム−ラウリルサルフェート
−（ＳＤＳ）−ポリアクリルアミド−ゲル検電法によっ
て測定する。この測定は、１ｍ１当りに４０μｍｏｌの
Ｃａｃ１２と１５ＮＩＨ一単位〔健康単位の米国ナショ
ナル・インステイテユート（ＵＳ　ＮａｔｉｏｎａｌＩ
ｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｈｅａｌｔｈ−Ｅｉｎｋｅｉ
ｔｅｎ））のトロンビンを含有する溶液と同じ量の組織
接着剤と混合した後に該混合物を３７℃のもとに制御維
持するようにして実施する。α−架橋度を、尿素、ナト
リウム−ドデシル−サルフェートおよびβ−メルカプト
エタノールの混合物を添加することによって反応および
蛋白質中に含まれる二硫化物橋の還元分解を中止した後
にゲル電検法によって測定する。

表の別の部分では、本発明の組織接着剤のトロンボエラ
ストグラフィーでのクロット強度（Ｃ１ｏｔ−ｆｅｓｔ
ｉｇｋｅｉｔ）を公知のものに比較している。その際に
ケンタミシンを抗生物質として使用している。

更に表中には、抗生物質としてケンタミシンを用いた場
合について、本発明の組織接着物の引裂強度と公知のも
のとの比較値を示しである。

線維床α−架橋（３７℃で６０分後） でのクロット強度 引裂強度　（ｇ／ｃｍ） 最後に、実施例４に従って製造された組織接着剤からの
抗生物質付与に関する比較も実施し、その際に試験管内
実験において７２時間後に既に８５チのケンタミシンが
、接着剤で製造されたクロットから付与される。９６時
間後にはケンタミシンの付与はもはや認められず、他方
７−〔（チェニル）−（２１−アセトアミドクーセファ
ロスポラン酸は８日後でも認めることができる。

第１頁の続き ０発　明　者　トーマス・ゼーリツヒ オーストリア国ウィーン・ギム ナジウムシュトラーセ１５／７ ０発　明　者　イエンドラ・リンナラ オーストリア国つィーン・ラヴ エンデルヴ工−り２４

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１ファクターＸｎＩｆ：含有する人間のまたは動物
   の蛋白質、線維素原および抗生物質を基礎とする低温凝
   結したあるいは凍結真空乾燥した組織接着剤において、
   ファクターＸＩ［［と線維素原との比が、１ｇの線維素
   原当りのファクターＸ■の単位数で表現して、少なくと
   も５００でありそしてアミノグリコシド、ベータラクタ
   ム、ポリペプチドおよびテトラサイクリンを包含する群
   の内の抗生物質を含有していることを特徴とする、上記
   組織接着剤。 （２）　　ファクターＸｌ１ｌヲ少なくとも４ｏ単＠　
   ／　ｍｌの量で含有している特許請求の範囲第１項記載
   の低温凝固した組織接着剤。 （３）　　少なくとも３３重量％の線維素原を含有して
   おり、その際にファクターＸ■が少なくとも１７０単位
   ／ｇ（凍結乾燥物）の量で存在している特許請求の範囲
   第１項記載の凍結真空乾燥した組織接着剤。 （４）追加的に、アプロチニン、α２−アンチプラスミ
   ン、α２−マクログロブリン、α、−アンチトリプシン
   、ε−アミノカプロン酸およびトラネキサン酸なる群の
   内のプラスミン−抑制剤あるいはプラスミノケンー賦活
   剤−抑制剤を含有している特許請求の範囲第１項記載の
   ゛低温凝結したあるいは凍結真空乾燥した組織接着剤。 （５）　　二成分製剤として存在しており、最初の成分
   にはファクターＸ■、線維素原およびプラスミン−抑制
   剤あるいはプラスミノケンー賦活剤−抑制剤が含まれて
   おシ、他方、二番目の成分には抗生物質、トロンビンお
   よび二価のカルシウムが含まれている特許請求の範囲第
   １項から第４項までのいずれか一つに記載の組・緑液着
   剤。 （６）　　抗生物質が難溶性の誘導体の形で含まれてい
   る特許請求の範囲第１項記載の低温凝結したあるいは凍
   結真空乾燥した組織接着剤。 （７）　　ファクターＸＩＩＩ含有する人間のまたは動
   物の蛋白質、線維素原、プラスミン−抑制剤あるいはプ
   ラスミノケンー賦活剤−抑制剤および、アミノグリコシ
   ド、ベータラクタム、ポリペプチドおよびテトラサイク
   リンを包含する群の内の抗生物質を基礎とする低温凝結
   したあるいは凍結真空乾燥した組織接着剤を製造するに
   当って、線維素原含有の血漿留分中においてファクター
   ＸＩと線維素原との濃度比をファクタ二Ｘ■の添加によ
   って１ｇの線維素原当りのファクターＸＩ［［の単位数
   で表現して、少なくとも５００に調整し、その土で抗生
   物質を添加しそしてその製剤を低温凝結または凍結真空
   乾燥することを特徴とする、上記組織接着剤の製造方法
   。 （８）線維素原含有血漿留分中において、ファクターＸ
   Ｉと線維素原との濃度比をファクターＸ■の添加によっ
   て、１ｇＯ線維素原当りのファクターＸＨの単位数で表
   現して、少なくとも５００に調整し、その土でその製剤
   を低温凝結または凍結真空乾燥しそして融かすかまたは
   水を加えて液体状に戻しに後に抗生物質含有溶液と一諸
   を２００単位のファクターＸＩＩＩ／ｇ　（線維素原）
   なるファクターＸ■濃度に達するまで実施し、その土で
   ファクターＸＩＩＩ′ｆ！ｒ：濃縮物または凍結乾燥物
   の状態で添加して少なくとも３００単位／ｇ（線維素原
   ）の量にする特許請求の範囲第７項または第８項記載の
   方法。