JPS58165784A - 多孔スクリ−ニング・アセンブリ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は免疫学的検定操作てお（・て有用な多孔スクリ
ーニング装置て関する。より詳細てはハイブリッドマス
（ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ　）の如きハイブリッド、細胞
培養菌のスクリーニングに適したスクリーニング・アセ
ノブ１月で関するっ本発明はまた免疫学的検定操作に有
用であり免疫原性物質を吸着するようになされた要素を
有するキャリア・プレートて関する、 モノクローン抗毒素はガンの治療を含めて柚々　　　　
　　　１σ）用途に対して研究されている。モノクロー
ン抗毒素はバイブリドマスがら大量に生産されろこと（
８） はよ（知られている。ハイブリドマはガン細胞を抗毒素
生成細胞と共に接合することによって生成されるバイブ
リド細胞である。これらのハイブリドマは特定の抗毒素
を大量に生成することができるので実験において特定の
ハイブリドマの存在を感知二Ｆ−）よび定量できること
ｊ４望ましいことでムる。

ある棟のハイブリドマを探索することは退屈でかつ時間
を消費する。実験室においである抗毒素の探索はマウス
に抗原を注射することから始まる。

この抗原に抗毒素が生成する。マウスの肺臓を除去した
後に肺臓細胞はガン細胞と混ぜられる。ガン細胞と肺臓
細胞を混ぜる過程の後に研究者がこれらの混ぜられた細
胞が実際に所望の抗毒素を作っているかを検知しなけれ
ばならないことは理解されるであろう、研究者が使用し
た細胞０）つちのほんの少数の部分を混ぜるだけでハイ
ブリッドが形成される。この７σ１合された細胞の探索
（末適正な同定を行うため（（通常は組み合わされた肺
臓細胞およびガン細胞を神々の区分に分配する作業を包
含する。結局研究者は単にハイブリドマを分離しく９） ようとするだけではなく更に抗毒素に対する探索を生み
出すハイブリドマを分前する。したがって研究者はこれ
らの分離を行うために多（の区画されたトレイあろいけ
試験管に頼らなければなｐ）ない。

ハイブリドマによって生じるモノクロナ抗毒素の如き柚
々のタンパク質の検索および定量においては研究者は１
つあるいはそれ以上のトレイに頼らなければならない。

例えば研究者（工ＥＬＩＳＡ（ｅｎｚｙｍｅ−１ｉｎｋ
ｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ）また
はＲＩ　Ａ　（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏ　ａｓｓａｙ　
）すなわち標識免疫検定を用いることができろっこれら
の免疫検定は当業者には周知である。これらの両方の検
定は多数の隔室または孔を含む試験装置を使うことがで
きしたがって各々の操作手順をマイクロタイタ（ｍｉｃ
ｒｏｔｉｔｅｒ　）基準で同時眞行うことができろ。

例エハシュライヒア・シュニル社（Ｓｃｈｌｅｌｃｈｅ
ｒａｎｄ　５ｈｕｅｌ　ｌ　Ｉｎｃ、　）はＤＮＡ／Ｈ
ＮＡの交雑の研究に直接応用されろ９６０マイクロサン
プル７）　過多枝管を用いている。またクレープ等は基
材粘着性（］０） ノフイフロプラストと同様にリンパ球のレフＩＪカ・グ
レーティングを許容する装置を発表し７ている（ＫＩｅ
ｂｅ、ＲｃｂｅｒＬ　Ｊ、＋ｅｔ　ａｌ、＋　Ｒｅｐｌ
ｉｃａ　Ｐｌａｔｉｎｇｏｆ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｄ　Ｍａ
ｍｍａｌｉａｎ　Ｃｅ１ｌｓ、　Ｉ）Ｉ）、２７１−１
８０）。　この研究において著者等は９６の孔をもつマ
イクロタイタ・プレートを有するＥＬＩＳＡ検定法を用
いている。

これらσ）検定方法においては生物学的物質の探索にお
いて抗原または抗毒素を連鎖するためにビーズが用いら
れる。例えばリットン・バイオネテイクス・ラボラトリ
・プロダクツ（ＬｉｌｔｏｎＢｉｏｎｅｌ、ｉｃｓ　Ｌ
ｄｈｏｒａｔｏｒｙ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）はＴｏ）（Ｏ
Ｈグルーグの抗原に対して探索可能な抗毒素の存在のた
めのリンパ液標本の迅速なスクリーニングに用いられる
バイオビーズ・トリートメン１−（Ｂ１０−ＢＥＡＤ　
ＴＭ）の使用を発表している。これらのビーズはリット
マン・パイオネティクスの装置に用いられろマグネット
の要素を含んでいる。マイクロタイタ・システム社（Ｍ
　１ｃｏｒ　−ＭｅｒｌｉａＳｙｓ１ｐｍ＋Ｉｎｃ、）
はＭＩＣおよびバクテリア同定装（］１） 置を発表しておりこの設置は多数の孔を有するトンはタ
ンパク質（抗原または抗毒素）がピンの表面に吸着する
ようになされている。、（７かしながら細長（されたピ
ンは孔の中の流体に浸されろと毛細管作用を起す。した
がってピンへ移送されｌ流体の稍確度は低下する。さら
にカバーが孔を有するトレイか［）職外された後に流体
は時〜ピンか１７−）シたたり落る。これは流体が隣接
する孔の中へ混入する結果となる。

上述の装置が周知であってかつ使用されているがハイブ
リドマの如き生物学的＃Ｊ負のスクリーニングて用いる
多孔装置の改善が求められている。

本発明はそのような改善に関するものである。

本発明の多孔スクリーニング・アセンブ月工多数の独立
した孔と多数のポストラ有しかつトレイの上に設けられ
ろキャリア・プレートとから構成　　　　　、１される
。各々のポストは孔と整合されかつ端末部に整合された
孔の中１（垂下する拡大された部分を（１２） 有しているう拡大された部分は免疫原性がある物質を表
面上に捕捉するようになされている。

本発明の仲の観、Ｉｉｌ、ｉは独立した多数の孔を有す
るトレイを包含する多孔スクリーニング・アセンブリで
ある。キャリア・プレートがトレイの上に置かれかつ多
数のポストを有している。各々のポストは孔と整合され
かつ整合された孔の中へ垂下する端末部に着脱自在に連
結された部分を損金しているう着脱自在な部分は表面に
免疫原性の物質を捕捉するようになされている。本発明
の前述したＷ蜘の好ましい実施例において、トレイは縦
横の列に直交配列された９６の孔を有しておりまた孔と
整合するように対応した数のポストを有するキャリア・
プレート乞有している。各々のポストはポストθ）端末
部に着脱自在に連結されたほぼ球形状のビーズを含んで
いる。このビーズはタンパク質を荷（こ表面（Ｃ吸着す
るようになされており、この目的のために、ビーズはプ
ラスチックで形成されろＱ）か好ましくスチレン・アク
リロニトリルが特に好ましい。ビーズの代りにほぼ平ら
なディス（１３） りをタンパク質吸着のために用いろことがでとる５本発
明の他の観点は実質的には上述のようなキャリア・プレ
ートを有する免疫学的検査に有用なキャリアｅプレート
を包含する。

本発明の他の観、壱は流体を内部に保持するようになさ
れたトレイを有する免疫学的に有用な多孔スクリーニン
グ・アセンブリを包含する。キャリア・プレートは分離
されかつ独立しトレイの中へ垂下する多数のポケットを
含むトレイの上に位置される。各々のポケットは免疫原
性の物質を表面に吸着するようになされた表面を有する
着脱自在な胴体を内部に収容している。各々のポケット
はまた流体はポケットの中へ侵入するか胴体はポケット
の中て留りかつ胴体をポケットか１１−）欧外せるよう
にする装置を含んで（・る。

本発明の更に別の観点はほぼ上述のようなポケットを内
部て有するキャリア・グレートを包含する免疫学的検定
操作に有用なキャリア・プレートである。

本発明の原理によれば生物学的な物質のスクリ（１４） −ニングのためにマイクロタイタのすべてσ）孔の処理
が同時に行える。ＥＬＬＳＡまたはＲＩＡの如き免疫学
的検査法を用いろことによって本発明は抗毒素を生産す
るハイブリドマ・セルを含む孔の同定を行うようにする
。本発明はまたスクリーニング・アセンブリのいずれの
孔がハイブリドマ・せルおるいは特定のモノクロナル抗
毒素を有シテいるかを決定するσ〕に用いろことができ
ろ。本発明は現在研究者が用いている極めて少数の孔に
代えて好ましくは９６個の孔を１つの段階で処理できろ
うさら（Ｃ本発明のビーズまたはディスクを用いると極
めて少量の流体だけが個〜のテストの完丁した子しから
弓１き出される。すなわちビーズあるいはディスク上に
留っている流体だけが孔から除去されろっタンバク賀を
吸着した９６個の基材を同時に他の多孔または多数の試
験管へ移送できろことは免疫学的検査の遂行におけろ材
料および労力の節約に貢献することは明らかであろう。

本発明の装置の構造は無菌状態の流体化同時に移送する
際の多数０〕孔の間の混合を排除あるいは最少化（１５
） する。本発明の構成要素は経済的に作られるために使用
稜は使い捨てすることが明細である。

次に図面、特に第１図および第２図、を参照すると免疫
学的な処置に有用な多孔スクリーニング・アセンブリ２
５が示されている。このアセンブリは２つの一般的な要
素から成っている。すなわちキャリア・プレート２６と
、第２図により明確に示されるように本発明の装置の使
用時にキャリア・プレート２６が定置されるトレイ２８
と、がら成っている。

トレイ２８は平坦な面の上で支持されろほぼ平らな本体
部２９を有している。本体部２９の内側に深い空所ろＯ
が形成されていてウェブろ１が空所ろＯを包囲している
っ空所３０の中ては分離して独立している複数個の孔６
２が形成されている。

孔６２は円筒形状Ｏ）側壁を有するのが好ましくかつｌ
・レイ本体部の中の球状の底部ろ４を包含しておりした
がって流体が孔の中に溜まることができ　　　　　　）
ろっ孔３２はトレイの中で縦横の直交配列になされろの
が好ましい。この実施例においてはトレイ（１６） には９６個の孔が設けられそれらは各々が８個の孔を有
する１２０列に配列されている。独立したそｈぞれの孔
がビーズ４４を覆うために必要とされろ溶液の量を極力
小さくするためにトレイの中に設けられていることは理
解されろであろう。孔は第２図に示すようにその全てを
１つの犬とな空所３０の底部に設けろこともできるし、
または。

第２ａ図に示すように各々の横列が隔壁６５で分離され
てもよいしあるいは第１図に示すように１つあるいは２
つの横列が分離されてもよい。単一の空所を用いる利、
壱（ま全ての孔を浸すのに一定の容量の溶液を１度だけ
加えるだけでよいことであるう分離された横列の利点は
個々の横列を制御して用いろことができろ意匠あろが各
々の横列に溶液を別々に加えなければならない、１列あ
るいは２列な分離するのは制御できることと溶液を満た
す操作を減らすことができろという折衷案である。

各々の孔の容積は多くの要因によって変るが、ここに説
明する実施例においては各々の孔が約１００μｔ（０，
１ｍｇ）の流体を保持できる容量を（１７） 有するのが好まし℃・。費用を最小化させかつ使い捨て
のトレイにするためにトレイな熱可塑性材料で形成する
のが好ましい。

使用する溶液を最小化するためにトレイを形成するのに
選定されろ材料はポリプロピレン、ポリエチレン等の非
タンパク質吸着材料で１′／ｌ−られるのが好ましいっ キャリア・プレート２６は隆起した壁４１に包囲された
ほぼ平１且な支持体４０を含んでいろう壁４１の寸法は
キャリア・プレートをトレイ２８ｏ〕上に定置すること
ができろ寸法でありしたがって壁４１は第２図により明
確に示されろようにトレイの壁３６を鈍囲する。支持体
４０から突出しているのは複数個の注４２であろうこれ
らの柱はトレイの孔ろ２と同様のパターンで配列されて
いてその数はトレイの孔の数にほぼ対応している。この
実施例においては９６の柱が各々が８個の柱を有する１
２の横列で直交配列されている。

第２図に示すようにキャリア・プレートがトレイに定置
されると各々の柱はトレイの孔の中に垂（１８） 下する。すべてのポストは整合性および均一性が保たれ
ろように同一の直径および長さを有するのが好ましい。

本発明の好ましい実施例において（土、はぼ球形のビー
ズ４４が各々のポストの末端に連結されておりしたがっ
てキャリア拳プレートがトレイの−」二に定置された時
にビーズが孔の中に最も深（まで垂下する。ビーズが孔
の中に入るようにするためにビーズの直径は約３．２　
ｍｓとされろ。しかしながらこの値は状況によって変化
する。ビーズの材料（まスチレン・アクリロニトリル、
ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリスチレンなどのプ
ラスチックから選定される、しかしながら、一般的にキ
ャリア争プレート２６の材質に関りなくビーズ４４はビ
ーズの表向にたん白質を吸着するような材質から形成さ
れなければならないうたん白質という用語は、ここにお
いては、どのような免疫学的な物質、たとえば抗原また
は抗毒素であろうともその定義の中に含まれろ。ビーズ
の旧料はたん白質と疎水性の結合を達成ししたかつてた
ん白質がビーズ制料の表面に強固に吸着されるよう（１
つ） １ｃもＣ）でなければならないっプラスチック材料がビ
ーズと接触する適宜に調整された流体媒体がらたん白質
を吸着する条件を満足することが判明しポリスチレン等
のプラスチック制料を用いろことができろう ＲＩＡの如きある種の免疫学的な処理操作においては、
自動機器が各々の試験管の中でたん白質が結合している
ビーズを要求する。このために本発明はビーズかあるい
はビーズとポストをキャリア・プレートから取外して更
に免疫学的操作を行うために試験管の中に収容する機構
を提供するう伝えば、他のビーズおよびポストの実施例
を第６図に示す。ポスト４２ａはギヤリア・プレート（
図示せず）の胴部４０ａに連結された状態で示されてい
るっこのポストはポストの主要部の直径から大幅に小さ
くなされた直径な有するネック部　　　　　　、１４６
を包含【−でいろうネック部４６の減少された直径（ま
折れ易い構造を提供し７シたがってビーズ（２０） ４４ａおよびボス）４２ａの胴部４５’計芥易にポスト
の他の部分から切り離されろ。ビーズのキャリア・プレ
ートからの取外しは手動で行ってもよいしもし必要があ
れば適宜な自動あるいは半自動の装置によって行うこと
ができろ。第１９図を詳細に参照すると、ポスト部４５
を有するビーズ４４ａが次の免疫学的試験操作のために
試験管４６の底部に収容されている状態が示されて（・
るっ第４図乃至第６図はキャリア・プレートからビーズ
を取り外すための本発明の他の実施例を示すっこθ）実
施例においては、ビーズとポストの全ての構造体′？：
取り外すことができる。この実施例において、キャリア
・グレートの胴部４０１〕は１ヒ゛−ズ４４１〕が取す
イ」けられている各々のボス）４２ｂの上方に隆起した
部分５０を包含している。中空ノ９１ＴＴ　５１が各々
の隆起した部分σ）内側に設けられろっ下板５２は′＋
姐な胴部４０１〕の下に摺動自在に設けられろ。この下
板はボス）　４．２１）の直径よりもわずかに大きな直
径を有する孔５４を包含する。ポストの下板５２への連
結な糺持するため（２１） にフランジ５５がボス）４２ｂの内方端部に連結されろ
、フラッジ５５は孔５４よりも太きブＩ直径を有してい
て空所５１の中に結上つ−（いろっ孔５４と連通してい
るのはより大きな孔５６であって孔５４に近接して設け
られろ。孔５６はフランジ５５よりも大きな直径を有し
ている。第４図および第５図におし・てはポストかキャ
リア・プレートに連結されたままの状態が示されている
。

キャリア・プレートからポストおよびビーズの構造体を
取り外すために平■且な胴部４０１）は摺動運動して移
動されしたがってフランジ５５が大きな開口５６上に移
動する。この移動は第６図に示されている。この状態に
おいて、フラッジ５５は大きな開口５６を通って落下し
したがって合成されたポストおよびビ７ズの構造体はキ
ャリア・プレートから分離される。今説明している実施
例においてはギヤリア・プレートの全てのポストは上述
の態様でキャリア・プレートに連結されかつキャリア・
プレートから分離されることは理解されるであろう、 （２２） 次に第７図を参照すると、キャリーｒ・プレートから取
外し可能なポストおよびビーズの構造体の他の実施例か
示されてし・ろ、この実施例において、ビーズ４４Ｃを
有するボスｌ−４２Ｃは内方端部に２股のバネ部材６０
を持っているう平坦な胴部４０Ｃには貫通開口６２を有
する隆起した環状部６１が形成されている。バネ部拐６
０は■通量ロ６２の中に装着されろためにわずかに圧縮
されているのか分るであろう。この圧縮によって緊密な
かつ接触した装着がなされろ。プレー１−４　Ｄ　Ｃか
ら糺み合わされたポストおよびビーズを即外すために使
用者は適宜に設計された工具を用いてバネ部セを下方に
押圧して開口６２からポスト情よぴビーズＯ）構造体を
軽く突くことができろ。

ポストからビーズ構造体１すかあるいはキャリア・プレ
ートから糾み合わされたポストおよびビーズの構造体を
取外すための他の形態および機構が本発明の範囲に含ま
れることは理解されよう、。

次に第８図乃至第１２図を参照すると１本発明の曲の実
施例特に他のキャリア・プレートか示さく２３） れている。第８図に示す多孔スクリーニング・アセンブ
リ７０はキャリア・プレート７１と標準的なマイクロタ
イタ・ブレー）　（ｍｉｃｒｏｔｉｔｅｒ　ｐｌａｌｐ
）７２を包含している。この実施例においてプレート７
２は直交配列された９６個の分離されかつ独立した孔７
４を有しておりこのプレート７２は第１図σ月・レイ２
８にほぼ類似している。キャリア・プレート７１は、第
９図により明確に示されるように、第２の頂部壁と第２
の頂部壁７６よりわずかに上方に設けられろ第１の壁面
７５との２重のＤ）部壁を有するほぼ逆カップ状の部材
である。

側壁７８はトレイ−ヒの位置決めをする囲まれた空所を
形成する２重の頂部壁を包囲し２ている。この実施例に
おいて、トレイの中の孔７４に幾何学的に対応する９６
個のポスト８０が第１の頂部壁７５に連結されろ、各々
のポストは第２の頂部壁の中の孔８２を貫通し、で伸長
するう孔８２はポスト８０の直径よりもわずかに大きな
直径を有している。　　　　　　　、１各々のポストの
端末部（（は着脱自在にボス１４１￥！２り付けられた
ディスク８４か設けられる。各々の（２４） ディスクはポスト８０の直径よりも太きノ、仁直径を有
する平ｆｉ’Ｈなボタン状の部材でなけれはｔｃｒ−）
ないが同時１（孔７４の内側に容易に装着できろもので
なければならない、ディスクは止め金部材（図示せず）
によってポストの端末部上で保持されろ。

止め金部材は以下により詳細に記明するように軸方向に
導かれろ力を加えろことによってディスクがポストから
分離されろことを許容するっディスク８４は前述のビー
ズと同様の機能で外側表面」二にタンパク質を吸着する
ことができろ。したがってビーズ構造体を形成する時に
述べたと同様の材料がディスクの形成に用いられろうハ
ンドル８５がキャリア・プレート７１に連結されて１又
扱（・および使用の便宜を計っているっ 第１０図如ハ、キャリア・プレート７１がプレート７２
の土に位置してボス）ｌ−３０か孔７４の中に垂下しさ
らにディスク８４か孔の底部に接近している状態が示さ
れている。側壁７Ｂはプレート７２の壁面上に装着して
いる。

第１１図て示すように、ハンドル８５を１一方へ（？５
） 引くと第２の頂部壁７６が卯−１の頂部壁７５から分離
されろ。この状態になると、ボス）８０はプレート７２
の上方にある第２の頂部壁の孔）３２を通って２０，１
の頂部壁と共に上方へ滑動する、孔８２よりも大きな直
径を有するディスク８４は結局第２Ｑ）頂部壁７６に当
接することが解るであろう。

ハンドル８５を更に上方へ引（ど第１２図により明確に
示されろようにディスクかポストから分離されろ。更に
ハンドルを−Ｌ方へ引いて第１の頂部壁をトレイから離
れろ方向へ引くとディスクは孔７４σ）底部に沈む。も
しディスクを各々の孔から取り除く必要がある場合には
第２の頂壁面７６を１−　レイ７９から取外すことがで
きろ、本発明の他の実施例か第１６図乃至第１８図に示
されているっ特に稠１１乙図を参照すると、こ０９例に
おいてはキャリア・プレート９０が包含されている。プ
レート９０は胴部９１を包囲する下方へ垂下している壁
９２を有するほぼ平坦な支持体９１を包含している。同
様に胴部９１から下方へ垂下しているのは分離されかつ
独立した複数個の（２６） ポケット９４であろうこれらのポケットは前述の実施例
において述べた如ぎのビーズ９５を保持するに十分なよ
うに太き（なされろっこの実施例においてポケットは縦
横に直交配列されていてポケットの数は９６個あるのが
好ましい。各々のボケソ旨末以下に説明するようにトレ
イσ）孔の中に設けられろポケットの端部の端末部に１
つあるいはツレｆｌＪ二のスロット９７を有している。

スロット９７はビーズ９５の直径よりも小さな水平距離
を有しておりしたがって流体はポケットの中へ侵入する
ことかで゛きろがビーズは使用中にポケットの底部に保
持されろ。各々のポケットの反対側には大きな開口９８
が設けられておりこの開口９８はビーズを収容しかつポ
ケットからビーズを覗除く：（十分な大きさＫなされろ
。

ギヤリア・プレート９０が前述のトレイに類似したトレ
イの上に位置し分前されかつ独立した孔１０１を有して
いる状態か示されている。各々のポケットは流体１０２
’ｉｊ内部に収容している孔の１つの中に垂下している
。この流体は各々のボケ（２７） ソトのスロット９７を通ってポケットの中に侵入しさら
にポケットの中に収容されているビーズ９５を浸す。ビ
ーズ９５は表面にタンパク雀を吸着するようになされて
おり前述した拐料から形成されろσ〕が好ましい。第１
５図によって流体１０２のレベルは大きな開口９Ｂを経
て流体かポケットから流出しないように維持されろこと
が分るであろう。

第１６図および第１４図のキャリア壷プレートの実施例
は勿論多くの異った型の流体支持プレートすなわちトレ
イに用いることかで゛きる。そのような異った型のトレ
イの１例が第１６図に示されておりトレイ１０５は１つ
の連続（またカップ状の空所１０６を有している。空所
１０６に置かれた流体１［１１１Ｂは同時に全てのビー
ズ９５を浸す。この型のトレイ１０５は種々の免疫学的
検査手順の段階の間のビーズの種々の洗浄に用−・ろこ
とかできる５　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　、１免疫学的検査の間にビーズ９５が
処理された後は、ビーズをキャリア・プレートから取除
きＲｌＡ（２８） 検査の如き次のテストのために個々の試験管の中に定置
するのが望ましい。そのためにキャリア・プレート９０
は前述のように流体を収容しているトレイから取外され
ろ順番にポケット９４に対応している多く１７）試験管
１１２を収容するラック１１０がキャリア・プレー）９
０の胴部９１の上に尚゛かれろ。試験管１１２の開口端
部１１４はポケットの中の大ぎな開口９８上に整合され
したがって、第１７図により明確に示すように、ポケッ
トと試験管の間の連通が達成されろ。ランク１１０が試
験管をポケット９４と整合させてキャリア・プレート９
０の」二に置かれると組み合わされたアセンブリを急速
に転倒させこれによって第１８図に示すようにビーズ９
５かポケットから試験管の中に落下するっ試験管１１２
はつ℃・で個々に取外されてＦ（ＬＡ装置で検査にかけ
られろっ第１９図は、前述の如く、試験管１１２と同様
に別の検査をする目的のために処理されたビーズを内部
に収容している試験管４６を示している。

前述の如く本発明は免疫学的検査の方法によつ（２９） て種々の生物学的物質の検査および定量に用いることか
で・ぎろがモノクロナル（ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ　）抗
毒素の検査に十分用いることができしたがって特殊なハ
イブリドマ拳セ／Ｉ／　（ｈｙｂｒｉｄｏｍａ　ｃｅｌ
ｌ　’）に用いることがでとる。特に、抗毒素を生産す
るハイブリドマ・セルの入った孔の中で同定を行うとい
う簡便な検査を本発明によって行うことができる。

そのような同定は抗毒素および抗原と免疫学的物質を吸
着するビーズ、ディスクなどのタンパク質処理法との間
の相互作用によって可能となる。本発明を用いたより完
全なスクリーニング・テストは特殊なモノクロナル抗毒
素を生産するハイブリドマ・セルを含むノ・イブリドマ
・セルを収容する孔によって決定される。

前述した簡便なテストの例は、勿論これて本発明が限定
されろもので（工ないが、次のようなものである。すな
わち、ｍ」述の実施例のいずれかのキャリア・プレート
がビーズまたはディスクあるいはタンパク質を吸着する
ことができる物体を包含しておりこのキャリア・プレー
トがＨＡＴ　（ヒポ（３０） ギザノチン、アミノプテリン、チミジンを含む）流体媒
体によって被層されたノ・イブリドマ・セルを収容した
孔を好ましく１・１９６個有するトレイの−にに設置さ
れる。ビーズがキャリア・フ”レートの」−で用いられ
ろならば、媒体はビーズを浸す。この段階は１５分乃全
４５分の間に終え通常は室温でかつ無菌状態で行われろ
。この浸す段階の後に内側友）ろいは表向にビーズを有
するキャリア・プレートがハイブリドマ・セルを収容し
ている孔から取除かれ第１６図て示すトレイ１０５のよ
うなトレイの−」二に置かれろ。このトレイはビーズか
浸出によって洗浄される選定された緩衝浴液によって、
備ださ」１．る。この浸出段階は２回もしく、・まろ回
繰り返されろ、洗浄に引き続き処理されたビーズを有す
るキャリア・プレー目ま好ましくは９６のＪＩＪ４Ｔす
る別のトレイに浸される。各々の孔は前述σ）ようにハ
イブリドマ媒体から抗毒素を吸着していないビーズ上の
全ての表面を占有する化学桑品の浴液を収容している。

使用されろ化学桑品の例はエタノール・ジアミンまたは
ポリビニール・（３］） ピロリジンである。この段階の後にビーズは前述のよう
に再び洗浄されるかこれは必須の条件ではなく１５分乃
至４５分の間で終了する状況に依存′ｆろものであろう
そＱ〕後処理されたビーズを有するキャリア・プレート
は好ましくは９６の孔を有する仙のトレイの上に置かれ
るっ例えは免疫学的検査方法がＩ−（Ｉ　Ａテストであ
れば各々の孔は１２５−アイ−ラベルドープロチイン−
エイ（１２５−１−Ｉａｌ＋ｅｌｅｄ　−ｐｒｏｔｅｉ
ｎ　Ａ’）　ｈるいは１２５−アイーラベルドーアンチ
マウスーアンチボデイ（１２５−Ｉ−Ｉａｂｅｌｅｄ−
ａｎｔｉｍｏｕｓｅａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　）として知
られろ媒体を含むのが好ましい。洗浄後ビーズはキャリ
ア・プレートから分離されて試験管等によって周知のＲ
ＩＡ法に従ったガンマ・カウンタへ運ばれるっ反対にＥ
ＬｉＳＡ法が用いられるのであればトレイの孔はエンチ
ーム・ラベルド・プロティンＡ　（ｅｎｚｙｍｅ−１ａ
ｂｅｌｅｄ−ｐｒｏｔｅｉｎ　Ａ）で満ｒミされろかあ
るいはエンチーム・ラベルド・アンチマウス　　　　　
　　）−７７チボデイ（ｅｎｚｙｍｅ−１ａ？＋ｅｌｅ
ｄ’−ａｎ　ｔ　ｉ　ｍｏｕｓａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ　
）で満たされるのが好ましい。培養お（３２） よび洗浄の移反応したビーズ（キャリア・プレートと一
体にブｆっているかまたは分離されている）はトレイの
中て置かれろ。孔は色原体て連鎖されたエンチーム基材
で満たされている。呈色反応が進行すると後者のトレイ
の孔は分光測光器かあるいは目視によってでも周知のＥ
ＬｉＳＡ法に従って読み取ることかできろ。他の検査方
法も本発明の多孔アセ／ブリおよびその構成要素を利用
することができることは理解されよう。

こσ）ように本発明は免疫学的検査手順において有用で
ありかつ研究者か生物学的物体の検査および定量におい
て多数の標本の同時処理において用いろことができる多
孔スクリーニング装置を提供するものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の多孔スクリーニング・アセンブリの実
施例を示す斜視図であって使用前に互に離れているトレ
イおよびキャリア・プレートラ示ず。 第２図は第１図の実施例の要素が組み立てられ（３３） た状態を示す断面図。 第２ａ図は第２図に類似した断面図であって他の例のト
レイを示す。 第ろ図はキャリア・プレートのポストおよびビーズの構
成を示す側面図っ 鉋、４図はキャリアのプレートから取外すことができろ
他のポストおよびビーズの構成の拡大側面図。 第５図は第４図の線５−５に沿った断面図っ第６図は第
５図と同様な断面図であるがポストが移動されてキャリ
ア・プレートから覗外し可能な状態を示すっ 第７図はキャリア・プレートから階外し可能なポストお
よびビーズの他の構成を示す側面図。 第８図は本発明のキャリア・プレートの他の構成を示す
斜視図。 第９図は第８図のキャリア・プレートおよびトレイの萼
素の部分的断面を示す側面図。 第１０図は互に組み立てられた第８図の要素を示す側面
図っ （３４） 邪、１１図は第８図の糺みｑてられた戦素を示１１−倶
１面図でル）ってディスクのキャリア・プレートからの
咽外しの段階を示−１−。 第１２図は第８図の装置の側１′￥１１図で゛あってデ
ィスクかキャリア・プレートから完全にを除かれてトレ
イの孔の中に残っている状態を示す。 第１６図は本発明のキャリア・プレートの仙θ）実施例
を示す余１視図っ グう、１４図は第１６図のキャリア・プレートＯ）側面
図。 第１５図は第１６図のキャリア・プレートが第１図に示
すトレイと同様のトレイ−トに絹み立てし）れている状
態を示す側面図。 第１６図は第１６図Ｑ〕キャリア・プレートが独立した
孔を有さないトレイ上に洗浄のために配置列された状態
を示す倶ｊ面図。 第１７図は第１６図のキャリア・プレートに幾（ｉ”］
学的に対応する試験管のランクがギヤリア・グレートの
頂部に置かれた状態を示す側面図。 第１８図は第１７図のアセンブリがビーズが試（３５） 験管の中に落下するように転倒されている状態を示す側
面図。 第１９図は試験管の中に収容されているポストおよびビ
ーズを示す側面図である。 ２６・・・キャリア・プレート、　　２８・・・トレイ
、ろ２・・・孔部、　４２・ポスト、４４・・・ビーズ
。 ４６・・・首部、　　８４・・・ディスクっ特許出願人
　　ベクトン・テイッキノソンーア／ト・カンパニー 、ｊ （３６）

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）流体を内部に保持するようになされた分離されか
   つ独立した複数個の孔部を、有するトレイと、該トレイ
   の上に位置しており複数個のポストを有するキャリア・
   プレートと、から成る多孔スクリーニング・アセンブリ
   で力）って、各々の前記ポストは前記孔部と整合しかつ
   該孔部の中に垂下しており、各々のポストは端末部にほ
   ぼ球形状のビーズを有して”おり、該ビーズが表面にタ
   ンパク質を吸着するようになされている多孔スクリーニ
   ング書アセンブリ。 （２：　　特許請求の範囲第１項に記載のアセンブリ（
   でおいて、前記孔部および前記ポストが縦横の列に直交
   配列されていることを特徴とする多孔スクリーニング・
   アセンブリっ （３）　　特許請求の範囲第２項に記載のアセンブリ１
   （おいて、前記トレイおよびキャリア・プレート（１） が９６個の対応する孔部およびポストをそれぞれ有して
   いることを特徴とする多孔スクリーニング・アセンブリ
   っ （４）特許請求の範囲第２項に記載のアセンブリにおい
   て、前記孔部の各〜σ〕横列が流体隔壁によって分離さ
   れておりこれによって前記孔部な収容するほぼ平行な複
   数個の溝を形成することを特徴とする多孔スクリーニン
   グ・アセンブリっ（５１特許請求の範囲第２項に記載の
   アセンブリにおいて、前記孔部の少くとも１つの横列が
   前記トレイの仙の横列から分離されていることを特徴と
   する多孔スクリーニング・アセンブリ。 （６）特許請求の範囲第１項に記載のアセンブリにおい
   て、前記ビーズが前記ポストに着脱自在に連結されてい
   ることを特徴とする多孔スクリーニング・アセンブリっ （７）特許請求の範囲第６項に記載のアセンブリにおい
   て、各々のポストがポストが折れて前記ビーズが前記キ
   ャリア・プレートから取り外されるようにするための細
   くなったネック部を有するこＣ２） とを特徴とする多孔スクリーニング・アセンブリっ（８
   ）特許請求の範囲第１項に記載のアセンブリにおいて、
   前記ポストが前記キャリア・プレートに着脱自在に連結
   されていることを特徴とする多孔スクリーニング・アセ
   ンブリ。 （９）特許請求の範囲第１項に記載のアセンブリにおい
   て、前記ビーズがプラスチックで形成されていることを
   特徴とする 多孔スクリーニング・アセンブリ。 （ｌ　Ｏ＋　　特許請求の範囲第９項に記載のアセンブ
   リにおいて、前記ビーズがスチレン・アクリロニトリル
   から形成されろことを特徴とする多孔スクリーニング・
   アセンブリ。 旧）　特許請求の範囲第１項に記載のアセンブリにおい
   て、前記キャリア・プレートが全てスチレ／・アクリロ
   ニトリルから形成されることを特徴とする多孔スクリー
   ニング・アセンブリ。 Ｏｚ　　独立した複数個の孔部優性するトレイと、該ト
   レイ０）１１に設けられ複数個のポストを有するキャリ
   ア・プレートと、から構成され。 （３） 各々のポストは前記孔部と整合しかつ整合した孔部の中
   へ垂下する拡大された部分を端末部に有しており、前記
   拡大された部分が表面に免疫学的検定物質を捕捉するよ
   うに７．ｃされている多孔スクリーニング−アセンブリ
   。 １１３）特許請求の範囲第１２項に記載のアセンブリに
   おいて前記鉱夫された部分がディスクであることを特徴
   とする多孔スクリーニング・アセンブリ。 （１４）独立した複数個の孔部な有するトレイと。 該トレイの」二テ設けられ複数個のポストを有するキャ
   リア・プレートと、から成り各々θ）ポストは前記孔部
   と整合しかつ前記ポストの端末部に着脱自在に連結され
   前記整合された孔部の中へ垂下する端部な有しており、
   該端部か表面に免疫学的検定物質を捕捉するようになさ
   れている多孔スクリーニング・アセンブリー （１５）はぼ平坦な受持体と、該支持体の１而から、１ 突出′１−ろ複数個のポストと、から成り、各４のポス
   トか端末部に免疫学的検定物質ヲ表面に捕捉す（４） ろようになされた拡大された部分を有することを特徴と
   する多孔スクリーニング・アセンブリ。 （１６）特許請求の範囲第１５項に記載のアセンブリに
   おいて、前記拡大された部分がほぼ球形状のビーズであ
   ることを特徴とする多孔スクリーニング拳アセンブリ。 ０７）　　特許請求の範囲第１５項に記載のアセンブリ
   において、前記拡大された部分かディスクであることを
   特徴とする多孔スクリーニング・アセンブリ、 （１８）特許請求の範囲第１５項に記載のアセノブ１月
   （おいて前記拡大された部分が前記ボス）［着脱自在に
   連結されていることを特徴とする多孔スクリーニング・
   アセンブリ。 ０９）特許請求の範囲第１５項に記載のアセンブリにお
   （・て前記ポストか前記支持体に着脱自在に連結されて
   いることを特徴とする多孔スクリーニング−アセンブリ
   っ （２、特許請求の範囲第１５項に記載のアセンブリにお
   いて、前記拡大された部分がプラスチック（５） から形成されて（・ることを特徴とする多孔スクリーニ
   ング・アセンブリ。 （２、特許請求の範囲第２０項に記載のアセンブリにお
   いて、前記拡大された部分がスチレン・アクリロニトリ
   ルかｈ形成されていることを特徴とする多孔スクリーニ
   ング・アセンブリ。 （ｚ２、特許請求の範囲第１５項に記載のアセンブＩＪ
   　［おいて、前記支持体がスチレン・アクリロニトリル
   から形成されろことを特徴とする多孔スクリーニング・
   アセンブリ、 （２３）流体を内部に保持するようになされたトレイト
   、該トレイの上に設けられ該トレイの中へ垂下する隔離
   されかつ独立した複数個のポケットを包含するキャリア
   ・プレートと、から成り、各々のポケットはタンパク質
   を吸着するようになされた表面な有する着脱自在な胴部
   な内部に収容しており、また各々のポケットは前記トレ
   イの中へ垂下して端部に前記胴部よりも小さくかつ流体
   のポケットの中への流入を許容するようになされた開口
   部を有しており、さらに各々のポケットは前記（６） 胴部がポケットがら嘔外されることを許容する取外し装
   置を有するようになされている多孔スクリー二ノグーア
   センブリ。 （２４１特許請求の範囲第２６項に記載のアセンブリに
   おいて、前記暇外し装置が前記開口部の反対１則θ）ポ
   ケットの中の第２０）開口であり該第２の開］］が前記
   胴部よりも太き（なされることを特徴とする多孔スクリ
   ーニング・アセンブリっ（２４ｉ）　　％−許請求の範
   囲第２６項に記載のアセツブ１月ｔこおいて、前記胴部
   がほぼ球形状のプラスチン・り・ビーズであ、ることを
   特徴とする多孔スクリーニング−アセンブリ。 （２ｆｉｌ　　特許請求の範囲第２６項に記載のアセン
   ブリにおいて、前記トレイが前記ポケットと整合する隔
   離されかつ独立した複数個の孔部な有しておりしたがっ
   て各々のポケットに対して１つの孔部が設けられろよう
   になされていることを特徴とする多孔スクリーニング・
   アセンブリ。 （２７）はぼ平坦な支持体と、該支持体の中に設けられ
   る隔離されかつ独立した複数個のポケットと、（７） 免疫学的検査物質を捕捉するようになされた表面を有し
   て（・て各々のポケットの中に設けられろ脱着可能な脱
   着部と、から成り各々のポケットが前記脱着部がポケッ
   トの中にある間に流体がポケットに侵入することを許容
   しかつポケットが！−１＠記脱着部が卿除かれることを
   許容する装置を含むようになされている多孔スクリーニ
   ング・了センブリ。