JPS58144322A - 抗腫瘍性ニ−ム樹皮抽出精製物およびその製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 １、発明の背景 技術分野 本発明は抗腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物およびその製造
法に関する。

さらに詳しくは、本発明はニーム樹皮の熱水抽出物を特
定の方法で精製して得られる抗腫瘍性ニーム樹皮抽出精
製物およびその製造法に関するものである。本発明の抽
出精製物は癌の治療薬として有用である。

先行技術 従来ニーム抽出物が種々な薬理作用を有することは知ら
れている。即ち、ニームの樹皮、葉部、花部、果実、枝
部、根皮または樹脂を水または親水性溶媒で抽出するか
あるいは微粉砕して皮ｆｆ１４ｆヒ粧料を得る方法（特
公昭５２−２８８５３．同５２−２８８５４および同５
３−１０１２５）、上記ニーム原料を親水性溶媒および
（または）熱水で抽出して抗菌作用、胃腸・肝臓機能改
善作用を有する成分を得る方法（特公昭５３−１０１２
４）および上記ニーム原料を疎水性溶媒で抽出して皮膚
疾患およびリュウマチの治療に有効な成分を得る方法（
特公昭５３−１３６８９　）が報告されている。

本発明者等は先にニーム樹皮の熱水抽出物が抗腫瘍作用
を有することを見い出したが、さらに研究を進めた結果
、ニーム樹皮熱水抽出物を特定の方法で処理した抽出精
製物が一層強い抗腫瘍作用を有することを知り本発明を
完成した。

■１発明の目的 従って本発明の目的は、制癌剤とし７て有用なニーム樹
皮抽出精製物を提供することにある。本発明の抽出精製
物は新規な物質てらって後述する如く、ザルコーマ１８
０腹水型および固形型マウス多植腫瘍詑びにメスＡ固形
型マウス移植腫瘍に対し１強い抑制活性を示し、特に定
着固形腫瘍に対して著効を示す。

本発明の目的はさらに上記ニーム樹皮抽出精製物の製造
法を提供することにある。

■１発明の詳細な説明 本発明は第１に、ニーム樹皮を熱水で抽出し、該抽出物
をアルコール沈澱法または透析膜法により精製し、得ら
れた精製物を水に溶解し、該水溶液を分画分子量約ｌＸ
１０５〜１×１０５乃至１×１０３〜２Ｘ１０　　の分
子篩剤を用いて分子篩処理し、３つに分れる多糖体画分
のうち、最初の両分を採取して得られる抗腫瘍性ニーム
樹皮抽出精製物である。この抽出精製物は下記の物理化
学的特性を有する。

（イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末または淡黄褐色粉末である。

（ロ）赤外線吸収スペクトル 第１図に示す通シである（実施例１における抽出精製物
）。

ＩＲｖＫＪ３ｒａｍ−’　：　３４００　、１６３０　
、１０３０ａＸ ０う　紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを示
す。

に）　溶解性 水に可溶でメタノール、エタノール、アセトン、エーテ
ル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキサ
／等の有機溶媒に不溶でおる。

０う　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加により青緑色を呈する。

本発明は第２に、ニーム樹皮を熱水で抽出し、該抽出物
をアルコール沈澱法または透析膜法により精製し、得ら
れた精製物を水に溶解し、該水溶液を分画分子量約ｌＸ
ｌ０−ＩＸＩＯ乃至ｌＸＩＯ３〜２Ｘ１０５の分子篩剤
を用いて分子篩処理し、３つに分れる多糖体画分のうち
、最初の両分を採取して得られる上記の物理化学的特性
を有する抗腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物の製造法である
。

本発明は第３に、上記分子篩処理がケ９ル濾過てあシ、
上記分子篩剤がグル濾過剤である上記ニーム樹皮抽出精
製物の製造法である。

本発明は第４に、上記グル濾過剤がデキストランケ８ル
、ポリアクリルアミドケ°ル、親水性ポリビニル系ケ゛
ルまたは多孔性ガラスピーズである上記ニーム樹皮抽出
精製物の製造法である。

本発明方法の原料植物であるニームは学名をメリア・ア
ザノラクタ・リンネ（Ｍｅｌｉａ　ａｚａｄｉｒａｃｈ
ｔａＬｉｎｎ、）まだはアザノラクタ　インディカ　ノ
ヤス（Ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ　１ｎｄｉｃａ　Ｊｕｓ
ｓ　）　　といい、熱帯地域に自生する高さ１０ｍ以上
に達する木本植物である。

本発明の方法においては、ニームの樹皮の熱水抽出液を
原料として使用する。ニーム樹皮を熱水で抽出処理する
操作は常法に従って行なわれる。即ち、細断したニーム
樹皮に熱水を加えるか、あるいは、ニーム樹皮に水を加
え、その混合物を加熱沸騰させることによって実施され
る。加熱は沸騰水浴中または直火で行うことができる。

抽出時間は原料の品質等に従って適宜決定されるが通常
■乃至４８時間である。抽出終了後、抽出混合物を濾過
することにょ９抽出液が得られる。かくしてイクられた
ニーム樹皮熱水抽出液には多量の不純物が含まれている
ので本発明の分子篩処理工程に供する前に、アルコール
沈澱法線たは透析膜法により、該抽出液を精製するのが
望ましい。例えば、アルコール沈澱法で精製する場合に
は、上記抽出７夜（てメタノール、エタノールのような
アルコールを加え、生成した沈澱を常法にょ９、例えば
遠心分離により採取する。透析膜法により精製する場合
は、該抽出液を透析膜に入れ、水につけて透析し、透析
内液を所望により濃縮乾固するがまたは凍結乾燥して抽
出物を得る。透析膜としては分画分子−量５０，０００
以下のもの、例えばスペクトラ・ボア１〜６（スペクト
ラム・メディカル・インダストリーズ社製品）、ビスキ
ング・チューブ（ユニオンカー・ぐイト社製品）′う：
使用される。アルコール沈澱法またけ透析膜法で精製し
て得られた抽出物を水に溶解して本発明方法の原料であ
るニーム樹皮熱水抽出液とする。さらに、ニーム樹皮の
、執水抽出処理に先立って、ニーム樹皮を有機溶媒およ
び（！たは）常温の水で抽出、’、、ｊ、処理すること
により、不要成分を予め除去しておくことも望ましい。

抽出前処理に使用する溶媒としてはメタノール、エタノ
−・ル、ノロツクノール、ヒリジ／、アセトンのような
極性有機溶媒、ベンゼン、ｌ−ルエ／、キシレン、ｎ−
へキサン、クロロボルム、四塩化炭素、酢酸エチルのよ
うな非極性有機溶媒□・あげられる。本発明の方法にお
ける分子篩・処理は望ましくはケ゛ル濾過剤を用いたり
・ル濾過によって行なわれる。ケ゛ルｐ過剤は分画分子
量約ｌＸＩＯ３〜Ｉ　Ｘ　ｌ　０５乃至Ｉ　Ｘ　１０３
〜２　Ｘ　１０５（７）　モノ／’ｌ”　ｆｆ　ＪＴＪ
　０れ、デキストラング９ル、ポリアクリルアミドヶゞ
ル、ポリビニル系のポリマーク゛ル、多孔性ガラスピー
ズ等が好適に使用される。これらは例えばセファデック
スＧ−１，００、Ｇ−２００（ファルマ／ア社製品、ス
エーデ／）、バイオヶ゛ルＰ−１，００（パ・イ（−ラ
、ド社製品、米国）、トヨパーツＬＨ込ｌ−５０（東洋
曹達工業社製品、日本）等の製品名で市販さ、ｆｌ。

ている。これらのグル濾過剤を充填したカラムシ（前述
したニーム樹皮熱水抽出液を通し、蒸留水て溶離すると
多糖体が３つの両分に分画される。最初に溶出する画分
を集め、蒸留乾固または凍結乾燥すると目的とする抽出
精製物が得られる。

参考までに、上で得られた抽出精製物をさらに、万両分
子量約ｌＸ１０５〜２×１０５乃至ｌＸｌ０’〜８×１
０５のグルｐ過剤（例えばセファデックスＧ　−２００
。

七フアクリルＳ　−３００ｒ　ハイ、ｔ　’ｙ”　ルＰ
　−３００、）ヨ・ぐ−ルＨＷ−６０等）を充填したカ
ラムにかけ蒸留水で溶離すると多糖体がさらに２つの両
分に分画される。最初に溶出する両分を多糖体Ａ１後に
溶出する画分を多糖体Ｂとする。これらの多糖体は次の
構造および特性を有する。

多才病体Ａ イ）構造 α−（１→４）−グルカノの主鎖にアラビノースがα−
（１→６）結合し、グルコースとアラビノースの構成割
合が約５．１の中性多糖体。

口）色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

ハ）ｇ手解性 水に可溶で、メタノール、エタノール、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキ
サン等の有機溶媒に不溶である。

二）呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加によｐ青緑色を呈する。

ホ）分子量 セファデックスＧ−２００カラムケ８ルクロマトグラフ
イで単一のピークを与え、分子量は約９４．０００であ
る。

へ）比旋光度 〔α〕ａ２．−３５°（ｃ＝０．４　、　Ｈ２Ｏ）ト）
赤外線吸収スペクトル 第２図に示す通りである。

ＩＲｖＫＢ”ｃｍ’：　３４００．２９３０．１６２０
ａｘ チ）紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみ金示
す。

１ハ　ｉ５Ｃ核磁気共鳴スペクトル 重水中で外部基準にＴＭＳ　（テトラメチル／ラン）を
使用して測定した１００ＭＨｚ　　Ｃ核磁気共鳴スペク
トルは第３図の通りである。

多糖体Ｂ イ）構造 α−（１→４）−グルカンを主鎖とし、主鎖中にβ−（
１→３）フコースを含み、分枝としてα−（１→６）ア
ラビノースを有し、グルコース、アラビノースおよびフ
コースの構成割合が約５：２：１の中性多糖体。

口）色と形状 凍結乾燥品は白色粉末である。

ハ）　溶解性 水に可溶で、メタノール、エタノニル、アセトン、エー
テル、クロロホルム、酢酸エチル、べ／・ゼンおよびヘ
キザ、／等の有機溶媒に不溶である。

；）−゛−色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
素の添加により青緑色を呈する。

ホ）分子量 セファデックスＧ−２００カラムケ８ルクロマトグラフ
イで単一のピークを与え、分子量は約２１．０００であ
る。

へ）比旋光度 〔α）、、−４６°（ｃ＝０．２８．Ｈ２Ｏ）ト）赤外
線吸収スペクトル 第４図に示す通シである。

ＩＲνＫＢｒｃｉ１：　３４００，２９３０．１６３０
ａｘ チ）紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極太を示さず、末端吸収のみを示
す。

１乃　　Ｃ核磁気共鳴スペクトル 重水中で外部基準にＴＭＳ　（テトラメチル／ラン）を
使用【２て測定した１　００　ＭＨｚ　”Ｃ核磁気共鳴
スペクトルは第５図の通りである。

本発明の抽出精製物は上記多糖体Ａおよび多糖体Ｂの混
合物とみることができ、薬理試験の結宋、ザルコーマ１
８０腹水型および固形型マウス移枦腫瘍並びにメスＡ固
形型マウス移植腫瘍に対して顕著な阻止作用を有するこ
とが確認された。また上記多糖体ＡおよびＢも同様の薬
理活性を示した。

従って制癌剤として使用する場合には、本発明の抽出精
製物をさらに多糖体Ａと多糖体Ｂとに分離する必要はな
く、両者の混合物の状態で、即ち、本発明の抽出精製物
の状態で使用するのが実際的である。

次に、本発明の抽出精製物の試験例を示す。

試験例１ （試料調製） リン酸緩衝食塩水（ギブコ社製、リン酸９．５ｍＭヲ含
む；　ＰＢＳ　）に０．５％カルボキ７メチルセルロー
ス（ＣＭＣ）を懸濁させた溶液に所定濃度になるように
試料を溶解させた。

（ザルコーマ１８０ガ／細胞移植）、、。

ＩＣＲマウス腹腔中で継代培養したザルコーマ１８０ガ
ン細胞を腹水とともにとり出し、生理食塩水で適当に希
釈して細胞数が１．　ＯＸ　１０　イＵＬ／ｍｌとなる
ように調製した。この細胞懸濁液のＯ］−を４退会雄Ｉ
ＣＲマウス腹腔へ注射器を用いて移植した。

従って１匹あたシの移植細胞数は１．０Ｘ１０７個であ
る。

（試料投与） ザルコーマ１８０ガン細胞を移植した次の日より１日１
回連続４日間、上に調製した試料を注射器を用いて腹腔
に０．１　ｒｎｌ、投与した。１試料１９度につき６匹
のマウスを使用した。対照は試料の溶剤として用いた上
記ＣＭＣ人り　ＰＢＳを同様に投与したものとした。投
与量の表示はマウス体重１　ｋｇあたシの〜数とした。

（効果の判定法） ガン細胞移植後７臼目にそれぞれのマウスの体重を測定
した。次に腹腔に貯まりた腹水を余計とり出した後のマ
ウスの体重を測定した。腹水採取前後の体重の差を腹水
量とする。採取した腹水をヘマトクリット管に吸い込ま
せ、ヘマトクリット測定用ローターを用いて、低温で遠
心分離し、血液のへマドクリット値に相当するアサイド
クリ。

ト値を得た（腹水中に占めるガン細胞の割合）。

腹水量にこの値を乗ずれば全腹水中の細胞の容量が得ら
れる。これを全細胞容量（トータル・ｉＰ　ラクト・セ
ル・ボリュウム：　ＴＰＣＶ　）とする。対照では、全
腹水量は６〜１０ｍ７！、ＴＰＣＶは、１．６〜２５−
となった。

試料投与マウスのＴＰＣＶと対照投与マウスのＴＰＣＶ
の比（Ｔ／Ｃ）をとって１００〜６６チのものｆ：ガン
に対する効果なしく〜）、６５〜４１％のものをやや有
効（＋）、４０〜１１％のものを有効（＋＋）、１０〜
０％のものを著効（１＋ｌ）とする。結果を表１に示す
。

表　　１ （マウス） ２５　　　　１　　５２　　１　　　（→　　１１１ｉ
ｏｏ　　１　　（→　１ 試験例２ （ザルコーマ１８０ガン細胞移植） 試験例１と同様にして１０×１０８個／ゴの細胞懸濁液
を調製した。この懸濁液のＯ，ｌ　ｍ７！を４退会、雄
ＩＣＲマウス背部皮下に注射器を用いて細胞を移植した
。

（効果判定法） （１）　　ガン細胞移植後２１日月に成長したガン組織
を摘出し、その重量を測定した（１群６匹の平均値）。

この重量と対照のものとの比（Ｔ／Ｃ）をとって効果判
定を行った。対照のがン組織重量１・」、３０〜４５１
であった。比の値が１００〜７１係のものを無効（−）
、７０へ・５１％のものをやや有効（＋）、５０〜２１
％のものを有効（」＋）、２０〜Ｏ係のものを著効（什
）としだ。結果を表２に示す。

表　　２ （マウス） （２）上記判定法（１）において、ガン細胞移植後２１
白目にガン組織を摘出する代りに、３５日目にガン組織
を摘出する以外は上記判定法（１）と全く同様の方法で
効果を判定した。結果を表３に示す。

表１乃至表３から明らかなように、本発明の抽出精製物
は、ザルコーマ１８０移植ガンに対して強い抑制効果を
有している。

試験例３゜ 定着固形ガンに対する効果 （１）ザルコーマ１８０細胞１×１０個を雄性ＩＣＲマ
ウス（５匹）背部皮下に移植し、飼育した。

周形腫瘍が完全に定着し、１〜２ｚ程の大きさとなった
１０日目から１日１回、５日間マウス腹腔内に所定酸の
試料を投与した。移植後２１日目に腫瘍部を切りとりそ
の重量部を対照針と比較し、試験例２の方法に従って効
果を判定した。結果を（マウス） （２）上記方法において、移植後２１日目に腫瘍部を摘
出する代りに３５日目に腫瘍部を摘出する以外は上記方
法と全く同様にして定着固形ガンに対する効果を測定し
た。結果を表５に示す。

試験例４゜ 対する効果 試験例２および３と同様の条件でザルコーマ　　　　゛
１８０固形型ガンに対する本発明の抽出精製物の経口投
与による効果を測定した。但し、移植細胞数は２　Ｘ　
１０６個／マウスとし、判定は３２日目の重量測定によ
り行なった。また、試料の投与は、所定濃度の試料を０
．１ｄ／回／マウスずつゾンデを用いて強制的に胃内に
行なった。結果を表６に示すＯ 表６から、経口投与によっても２５０　ｍＱＡ９　で抗
腫瘍効果を有していることが明らかである。

試験例５゜ Ｂａ１ｂ／Ｃマウス腹腔中で継代培養したメスＡ繊１ｆ
ｆｆｌ肉腫（Ｍｅｔｈ　Ａ　ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ
　）細胞を腹水とともにと９出し、生理食塩水で適当に
希釈し、細胞数が１．０Ｘ１０　個／−となるように調
製した。この細胞懸濁液の０．１−を５退会雄Ｂａ１ｂ
／Ｃマウス背部皮下に注射器を用いて移植した。−匹当
シの移植細胞数は１．ＯＸ　１０６個である。試料は、
試験例２および３と同様にして調製し、所定の投与口に
腹腔内に投与した。判定は腫瘍細胞移植２１日目に腫瘍
組織を切り出し、その重量を測定することによって行な
った。結果を表７に示す。

１間開５８−１４４３２２（８） 表７に示すように、同系腫瘍であるメスＡ繊帷肉腫に対
しても、本発明の抽出精製物は２５〜１００ｍ９／に９
．８〜１０回投与で腫瘍の増殖を有意に抑制する。

試験例６゜ 急性毒性 本発明の抽出精製物を体重２０±１ｇ−ＯｒｃＲｒｇ性
マウスに投与して急性毒性試験を行なった結果、ＬＤ５
ｏ値は、腹腔内投与で６００　ｍ９７に９以上、経口投
Ａｊでは１０００１号／ｋｇ以上であった。

上記の薬理試験の結果からも明らかなように、本発明の
抽出精製物は顕著な抗腫瘍性を有し、毒性は極めて低い
ので、制癌剤として優れた性質を有する。また、定着固
形ガンに対して特に強い抑制効果を有することから本発
明の抽出精製物は免疫賦活型の抗腫瘍作用を有すると考
えられる。

本発明の抽出精製物は、各種の癌疾患に灯し−〔有効で
あシ、投与量は、症状、年令、体重なとによって異なる
が、通常は成人に対して１日１００〜２５００ｍ９であ
り、１〜４回に分けて投与することができる。

本発明の抽出精製物は任意所要の製剤用担体または賦形
剤を用いて経口または非経口投与用に製剤化される。

経口投与用の錠剤、散剤、カプセル剤、顆粒剤等は慣用
の賦形剤例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、と
うもろこしでんぷん、馬鈴薯でんぷん、砂糖、ラクトー
ス、タルク、ステアリン酸マグネシウム、アラビアゴム
等を含有していてもよい。経口投与用液体製剤は水性ま
たは油性懸濁液、溶液、シロップ、エリキシル剤その他
であってもよい。

注射用製剤は溶液または懸濁液の形態であり、懸濁化剤
、安定剤または分散剤のような処方剤を含んでいてもよ
く、滅菌蒸留水、精油たとえばピーナツツ油、とうもろ
こし油あるいは非水溶媒１．７１Ｊエチレングリコール
、ポリプロピレングリコール等を含有していてもよい。

直腸内投与のためには坐剤用組成物の形で提供され、周
知の製剤担体たとえばポリエチレングリコール、ラノリ
ン、ココナツト油等を含何していてもよい。

次に参考例および実施例を示して本発明をさらに具体的
に説明する。

参考例 （１）　　ニーム樹皮乾燥品５０Ｆ！−をベンゼン（５
００ｍ７！Ｘ３）およびメタノール＜　５００ｍ１Ｘ３
　）を用いて室温で２４時間抽出前処理し、得られた抽
出残渣を熱水２００ｍ７！で３回抽出処理した。得られ
た抽出液を合し、ロータリーエバポレーターで濃縮乾固
し、１９６０．５■の粉末を得た。

（２）上記（１）で得られた粉末１０００　’ＩＩ９を
水２０〇−に溶解し、得られた水溶液に純エタノールを
攪拌しながら室温で徐々に加え、水溶液中のエタノール
濃度が８０係になったときに添加をやめ、生成した沈澱
を遠心分離によシ採、取し、５９４．５ｍｑの褐色粉末
を得た。

（３）上記（１）で得られた粉末５００　ｍｇを水５０
　ｍｅにとかし、この水溶液をスペクトラ　ポア６（分
画分子葉５０，０００）に入れ、水に対して透析した。

透析内液をロータリーエバポレーターを用いて濃縮乾固
して褐色の粉末３１０　ｍ９を得た。

実施例１ 上記参考例（２）まだは（３）で得られたニーム樹皮熱
水抽出物１０２Ｃ１９を２０ｍ１の蒸留水に溶解し、セ
ファデックスＧ−１００を充填したカラム（直径７、０
　ｃｍ、長さ３５．０ｃｍ）に注ぎ、蒸留水を用いてグ
ル濾過を行った。フェノール硫酸法で溶出液中の糖含量
を定量しつつケ゛ル濾過を行うと、多糖体は３つに分画
される。最初に溶出する両分から溶媒を留去し、目的と
するニーム樹皮抽出精製物２７３ｍ９が得られた。

参考までに、上記抽出精製物の５０ｍｇを５ｒｎｌの蒸
留水に溶解し、セファデックスＧ−２００を充填したカ
ラム（直径４．０　ｃｍ、長さ５０．　Ｏｔｘ　）に注
ぎ蒸留水を用いてケ゛ルｐ過を行った。フェノール硫酸
法で溶出液中の糖含量を定量しつつケ゛ル濾過を行うと
多糖体は２つに分画された。最初に溶出する両分より多
糖体Ａが１８ｍ９、次いで溶出する画分より多糖体Ｂが
１６ｒｎ９得られた。上記多糖体ＡおよびＢは、高速液
体クロマトおよび電気泳動でそれぞれ単一の化合物であ
ることを確認した。

上記本発明方法の実施例１において、ケ゛ル濾過剤セフ
ァデックＧ−１００の代りにバイオヶゝルｐ−１００を
使用しても同様の結果が得られた。

■９発明の具体的効果 上に詳述した如く、本発明によれば第１に、抗腫瘍性ニ
ーム樹皮抽出精製物が提供される。本抽出精製物は文献
未載の物質であって試験例で示しだように、ザルコーマ
１８０腹水型および固形型マウス移植腫瘍並びにメスＡ
固形型マウス移植腫瘍等に対して強い抑制活性を示し、
毒性は非常（こ低いので制癌剤として有用である。

本発明によれば第２に、上記抽出精製物のφ２１告法が
提供される。即ち、該抽出精製物は、ニー）、樹皮を熱
水で抽出し、該抽出物をアルコール沈澱法まだは透析膜
法によシ精製し、得られた精製物を水に溶解し、該水溶
液を分画分子量約１×１０３〜１×１０乃至１×１０〜
２×１０　の分子篩剤を用いて分子篩処理し、３つに分
れる多糖類の画分のうち、最初の画分を採取することに
よって得られる。

本発明によれば第３に、上記抽出精製物の有利な製造法
が提供される。即ち、上記分子篩処理がケ°ル瀘過であ
り、上記分子篩がケ゛ル瀘過剤である上記抽出精製物の
製造法が提供される。

本発明によれば第４に、上記抽出精製物のさらに有利な
製造法が提供される。即ち、上記ケ中ルｐ過剤がデキス
トランケゞル、ポリアクリルアミドゲル、親水性ポリビ
ニル系ケゝルまたは多孔性ガラスピーズである上記抽出
精製物の製造法が提供される。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の抗腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物（実施
例１の精製物）の赤外線吸収スペクトルを示ｔ。 第２図は多糖体Ａの赤夕本線吸収スペクトルを示１２、
第３図は同物質の　Ｃ核磁気共鳴ス被りトルを示す。第
４図は多糖体Ｂの赤外線吸収スペクトルを示し、第５図
は同物質の　Ｃ核磁気共鳴スペクトルを示す。 特許出願人　テルモ株式会社

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）　　ニーム樹皮を熱水で抽出し、該抽出物をアル
   コール沈澱法または透析膜法により精製し、得られた精
   製物を水に溶解し、該水溶液を分画分子量約１×１０〜
   １×１０乃至ｌＸ１０〜２×１０の分子篩剤を用いて分
   子篩処理し、３つに分れる多糖体画分のうち、最初の両
   分を採取して得られる抗腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物。 この抽出精製物は次の物理化学的特性を有する。 （イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末又は淡黄褐色粉末である。 （ロ）赤外線吸収スペクトル 第１図に示す通りである（実施例１における抽出精製物
   ）。 ＩＲｖＫ”（ｙｌ−’　：　３４００　、１６３０　、
   １０３０ａｘ （ハ）紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず末端吸収のみを示す
   。 に）溶解性 水に可溶でメタノール、エタノール、アセトン、エーテ
   ル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼンおよびヘキサ
   ン等の有機溶媒に不溶である。 ０→　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に陽性でヨウ
   素の添加により青緑色を！する。
2. （２）　　ニーム樹皮を熱水で抽出し、該抽出物をアル
   コール沈澱法または透析膜法により祐製し、得られた精
   製物を水に溶解し、該水溶液を分画分子量約Ｉ　Ｘ　１
   ０’〜Ｉ　Ｘ　１０”乃至Ｉ　Ｘ　１０３〜２　Ｘ　１
   ０”の分子篩剤を用いて分子篩処理し、３つに分れる多
   糖体画分のうち、最初の両分を採取して得られる前記の
   物理化学的特性を有する抗腫瘍性ニーノー樹皮抽出精製
   物の製造法。 （イ）　色と形状 凍結乾燥品は白色粉末または淡黄褐色粉末である。 （ロ）赤外線吸収スペクトル 第１図に示す通りである（実施例１における抽出精製物
   ）。 ＩＲｖＫＢｒ（ｚ−１：　３４００　、１６３０　、１
   ０３０ａｘ （ハ）紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを示
   す。 に）　溶解性 水に可溶でメタノール、エタノール、アセトン、エーテ
   ル、クロロホルム、酢酸エチル、べ／ゼンおよびヘキサ
   ン等の有機溶媒に不溶である。 （イ）　呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応に腸性でヨウ
   素の添加により青緑色を呈する。
3. （３）上記分子篩処理がケ゛ルｐ過であシ、上記分子篩
   剤がケ゛ル濾過剤である特許請求の範囲第２項記載の抗
   腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物の製造法。 アクリルアミドグル、親水性ポリビニル系グルまたは多
   孔性ガラスピーズである特許請求の範囲第３項記載の抗
   腫瘍性ニーム樹皮抽出精製物の製造法。