JPS6254701A - グルカン誘導体 - Google Patents
グルカン誘導体Info
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- JPS6254701A JPS6254701A JP10432386A JP10432386A JPS6254701A JP S6254701 A JPS6254701 A JP S6254701A JP 10432386 A JP10432386 A JP 10432386A JP 10432386 A JP10432386 A JP 10432386A JP S6254701 A JPS6254701 A JP S6254701A
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- Japan
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- glucan
- methanol
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- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産業上の利用分野
本発明は抗腫瘍活性を有する新規グルカン誘導体に関し
、抗血瘍剤等医業への使用が期待される。
、抗血瘍剤等医業への使用が期待される。
従来の技術
多くの天然多糖あるいは多糖を主成分とする天然物が、
抗腫瘍活性を示すことが明らかにされている。特に、強
い抗腫瘍活性を示すものとしてし／テナンなどの分枝を
有するβ−１，３−グルカンおよびＢＣＧと結核菌菌体
成分（千原呉部、癌と免疫増強、講談社すイエンティフ
ィク７７〜１１１頁昭和５５年参照。）がある。ＢＣＧ
はウシ型結核菌を無毒化した生国で、必ずしも安全とは
いい難いところから結核菌細胞壁の各種抽出物につき研
究が進められている。
抗腫瘍活性を示すことが明らかにされている。特に、強
い抗腫瘍活性を示すものとしてし／テナンなどの分枝を
有するβ−１，３−グルカンおよびＢＣＧと結核菌菌体
成分（千原呉部、癌と免疫増強、講談社すイエンティフ
ィク７７〜１１１頁昭和５５年参照。）がある。ＢＣＧ
はウシ型結核菌を無毒化した生国で、必ずしも安全とは
いい難いところから結核菌細胞壁の各種抽出物につき研
究が進められている。
゛結核菌細胞壁の多糖部分は、大きく二つに分けられる
（三崎旭、東市部、大阪市立大学生活科学部紀要、２９
，３３．１９８１参照。）その一つは、α−（１→６）
−マンナン主鎖ＫＤ−マンノース。
（三崎旭、東市部、大阪市立大学生活科学部紀要、２９
，３３．１９８１参照。）その一つは、α−（１→６）
−マンナン主鎖ＫＤ−マンノース。
Ｄ−マンノビオース、オリゴアラビナン（オリゴ−α−
（１→５）−Ｄ−アラビノフラナン）の側鎖の付いたも
ので、他の一つはβ−（１→４）−ガラクタン主鎖に、
オリプアラビナンの側鎖の付いた構造であシ、特に後者
の抗腫瘍活性が高いことが知られている。
（１→５）−Ｄ−アラビノフラナン）の側鎖の付いたも
ので、他の一つはβ−（１→４）−ガラクタン主鎖に、
オリプアラビナンの側鎖の付いた構造であシ、特に後者
の抗腫瘍活性が高いことが知られている。
発明が解決しようとする問題点
低コストで容易に製造でき、毒性が少なく抗腫瘍活性の
高い物質の製造が望まれている。
高い物質の製造が望まれている。
問題点を解決するための手段
本発明者は、マンノピラノース、アラビノ７２ノース、
ガラクトピラノースあるいはそれらオリゴマー、例えば
アラビノフラナンをその側鎖に有するグルカンの新規合
成に成功し、このグルカン誘導体が尚い抗腫瘍活性を示
し、制癌剤としての使用が期待できることを見出し、こ
の発見に基いて本発明を完成するに到った。
ガラクトピラノースあるいはそれらオリゴマー、例えば
アラビノフラナンをその側鎖に有するグルカンの新規合
成に成功し、このグルカン誘導体が尚い抗腫瘍活性を示
し、制癌剤としての使用が期待できることを見出し、こ
の発見に基いて本発明を完成するに到った。
本発明のグルカン誘導体の原料グル力／としては分子蓋
１万以上の天然に産するβ−（１→３）−グルカン、例
えばカードラン、パヒマ／、酵母の細胞壁のβ−（１→
３）−グルカン、あるいはセルロース等のβ−（１→４
）−グルカンが採用できる。
１万以上の天然に産するβ−（１→３）−グルカン、例
えばカードラン、パヒマ／、酵母の細胞壁のβ−（１→
３）−グルカン、あるいはセルロース等のβ−（１→４
）−グルカンが採用できる。
これらグルカンの側鎖にマンノピラノース、ガラクトピ
ラノース、アラビノフラノース、あるいはこれら二量体
、三量体等オリゴマーを結合せしめるが、その分校度（
１００グルコース単位当シ結合した枝の数）は５〜６０
程匿である。水溶性を高める点で少なくとも６−位に結
合している方か好筐しい。
ラノース、アラビノフラノース、あるいはこれら二量体
、三量体等オリゴマーを結合せしめるが、その分校度（
１００グルコース単位当シ結合した枝の数）は５〜６０
程匿である。水溶性を高める点で少なくとも６−位に結
合している方か好筐しい。
Ｄ−マンノピラノースまたはＤ−ガラクトピラノースを
分枝させるためにはそれぞれ下記のよりなり一マンノピ
２ノース、Ｄ−ガラクトピラノースのオルトエステルを
調製するとよい。これを例えば２．６−ノメチルピリジ
ニウムノ母−クロレイ）を触媒として、グルカンの水酸
基に縮合せしめ、例えばナトリウムメトキシドのメタノ
ール溶液を用い脱エステル化すると目的とする分校グル
カンが得られる。
分枝させるためにはそれぞれ下記のよりなり一マンノピ
２ノース、Ｄ−ガラクトピラノースのオルトエステルを
調製するとよい。これを例えば２．６−ノメチルピリジ
ニウムノ母−クロレイ）を触媒として、グルカンの水酸
基に縮合せしめ、例えばナトリウムメトキシドのメタノ
ール溶液を用い脱エステル化すると目的とする分校グル
カンが得られる。
また、アラビノース単分枝を導入するためには（１）式
または（ト）式で示されるオルトエステルを、アラビノ
ースオリゴマー分枝を導入するには（Ｉｔ）式またけω
式で示されるオルトエステルを用いｈ 前記同様に主鎖グルカンと加熱還流してその水酸基に縮
合せしめ、必要によシ脱エステル化し、水溶性分枝多糖
とすることができる。さらに、必要によシ透析精製し、
凍結乾燥すると単離できる。
または（ト）式で示されるオルトエステルを、アラビノ
ースオリゴマー分枝を導入するには（Ｉｔ）式またけω
式で示されるオルトエステルを用いｈ 前記同様に主鎖グルカンと加熱還流してその水酸基に縮
合せしめ、必要によシ脱エステル化し、水溶性分枝多糖
とすることができる。さらに、必要によシ透析精製し、
凍結乾燥すると単離できる。
なお、上記主鎖グルカンの水酸基をアセチル等のアシル
で保護することによりその反応性を高めることができる
。アシル基置換度で１〜２．５程度、活性面で好ましく
は２前後のものと原料として採用するとよい。
で保護することによりその反応性を高めることができる
。アシル基置換度で１〜２．５程度、活性面で好ましく
は２前後のものと原料として採用するとよい。
得られた化合物の構造決定のためのメチル化分析は、箱
守法による徹底メチル化の後、加水分解、還元、アセチ
ル化して得られる部分メチル化アルジトールアセテート
をＧＣ−ＭＳ分析する方法を用いるとよい。
守法による徹底メチル化の後、加水分解、還元、アセチ
ル化して得られる部分メチル化アルジトールアセテート
をＧＣ−ＭＳ分析する方法を用いるとよい。
分枝度は数回、例えば２〜３回縮合反応を繰返すことに
よシ３０チとすることができる。
よシ３０チとすることができる。
なお、本願明細書において、Ａｃはアシル基を、Ｅｔは
エチル基を、Ｐｈはフェニル基を、Ｂｚはベンゾイル基
を、それぞれ表わす。
エチル基を、Ｐｈはフェニル基を、Ｂｚはベンゾイル基
を、それぞれ表わす。
実施例
以下、実施例によυ本発明の詳細な説明する。
実施例１
カードラン（β−（ｌ→３）−グルカン、和光紬薬（株
）社製）を、ピリジン中、無水酢酸を用いて７５℃で５
分間アセチル化して得た、置換度（ＤＳ） １．９２の
アセチル化物を、エタノール／水＝１／１に２４時間、
エタノール／水＝３／１に２４時間、エタノール中に４
時間浸漬し、ジエチルエーテルで洗い、減圧乾燥して、
反応に対し活性化処理を行なった。
）社製）を、ピリジン中、無水酢酸を用いて７５℃で５
分間アセチル化して得た、置換度（ＤＳ） １．９２の
アセチル化物を、エタノール／水＝１／１に２４時間、
エタノール／水＝３／１に２４時間、エタノール中に４
時間浸漬し、ジエチルエーテルで洗い、減圧乾燥して、
反応に対し活性化処理を行なった。
活性化した酢酸カードラン０．７ｇ’＆、クロルベンゼ
ン３０ｔｎｌに加え、７０℃で３０〜６０分間加熱し、
膨潤させた。これに、３，５−ジー０−ベンゾイル−（
１，２−０−エチルオルトベンゾイル）−β−Ｄ−アラ
ビノフラノース２．８ ／ｉ ｋクロルベンゼン１０ゴ
に溶解したものと加え、加熱した。
ン３０ｔｎｌに加え、７０℃で３０〜６０分間加熱し、
膨潤させた。これに、３，５−ジー０−ベンゾイル−（
１，２−０−エチルオルトベンゾイル）−β−Ｄ−アラ
ビノフラノース２．８ ／ｉ ｋクロルベンゼン１０ゴ
に溶解したものと加え、加熱した。
クロルベンゼン１０ｄが留出した時に、触媒２，６−シ
メチルピリノニウム・バークロレートを１、θ〜加え、
９０〜１００分間、還流下に加熱反応を行った。反応後
、生成物をメタノールに沈殿させ、生成した沈殿物をメ
タノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した（収ｆｊ
１０．８ｇ）。
メチルピリノニウム・バークロレートを１、θ〜加え、
９０〜１００分間、還流下に加熱反応を行った。反応後
、生成物をメタノールに沈殿させ、生成した沈殿物をメ
タノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した（収ｆｊ
１０．８ｇ）。
得られた乾燥物を再びクロルベンゼン３０ゴに加え、７
０℃で３０〜６０分間、加熱、膨潤させた後、３，５−
ジー０−ベンゾイル−（１，２−０−エチルオルトベン
ゾイル）−β−Ｄ−アラビノフラノース１．３６９およ
び触媒２，６−ジメテルピリノニウム・ノ９−クロレー
ト１０ｒｎ９を加えて加熱し、反応を繰シ返した。反応
後、生成物をメタノールに沈殿させ、゛メタノール、ジ
エチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。
０℃で３０〜６０分間、加熱、膨潤させた後、３，５−
ジー０−ベンゾイル−（１，２−０−エチルオルトベン
ゾイル）−β−Ｄ−アラビノフラノース１．３６９およ
び触媒２，６−ジメテルピリノニウム・ノ９−クロレー
ト１０ｒｎ９を加えて加熱し、反応を繰シ返した。反応
後、生成物をメタノールに沈殿させ、゛メタノール、ジ
エチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。
上記に得られた生成物（約０．５ｇ）を１Ｍナトリウム
メトキシドのメタノール溶液１５０ＷＬｌ！ＫＭ濁し、
１７〜２４時間放置して脱エステル化した。
メトキシドのメタノール溶液１５０ＷＬｌ！ＫＭ濁し、
１７〜２４時間放置して脱エステル化した。
反応終了後、水１００ＷＬｔを加え、メタノールを減圧
化に留去し、ＩＮ塩酸で中和した後、透析に３〜４日間
付した。不溶部分を除去し、水溶液と濃縮、凍結乾燥し
て、水溶性多糖を得た。水可溶性部分と水不溶性部分の
比率は５７．４対４２．６でありた。
化に留去し、ＩＮ塩酸で中和した後、透析に３〜４日間
付した。不溶部分を除去し、水溶液と濃縮、凍結乾燥し
て、水溶性多糖を得た。水可溶性部分と水不溶性部分の
比率は５７．４対４２．６でありた。
本水溶性多糖の糖組成は、アラビノース基／グルコース
基（モル比）＝１／１０．７で、主鎖の１００グルコー
ス単位に対し、９．３個のアラビノフラノース分枝の付
いた構造を示した。
基（モル比）＝１／１０．７で、主鎖の１００グルコー
ス単位に対し、９．３個のアラビノフラノース分枝の付
いた構造を示した。
次に、箱守法（Ｓ、Ｈａｋｏｍｏｒｉ、Ｊ、Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ、、５５ｔ２０５（１９６４）参照。）によシ完全
メチル化し、さらに加水分解、還元、アセチル化により
得られる部分メチル化アルジトール・アセテートを、ガ
スクロマトグラフィー・マススペクトル分析にかけて構
造決定し、表１の結果を得た。分枝度ｎ（主鎖ｌＯＯグ
ルコース単位毎の分枝数）は次式によシ求められる。
ｅｍ、、５５ｔ２０５（１９６４）参照。）によシ完全
メチル化し、さらに加水分解、還元、アセチル化により
得られる部分メチル化アルジトール・アセテートを、ガ
スクロマトグラフィー・マススペクトル分析にかけて構
造決定し、表１の結果を得た。分枝度ｎ（主鎖ｌＯＯグ
ルコース単位毎の分枝数）は次式によシ求められる。
または、
ここに、（２，３，５−Ａ）、（２，４，６−Ｇ）、（
２，６−Ｇ）、（２，４−Ｇ）は、表１に示きれている
、部分メチル化アルジトールアセテートのモル数（相対
値）で、（１）式および（２）式の、分子および分母は
、それぞれ、分枝多糖の分枝数および主鎖グルコース残
基数に比例する値である。（１）式よりｎ ＝ ９．８
％、（２）式よりｎ＝４．１％が得られ、糖組成分析の
値よシ得られたｎ＝ １ ／ １０．７ ＝ ９．３％
と、（１）式より得られた値は良く一致している。
２，６−Ｇ）、（２，４−Ｇ）は、表１に示きれている
、部分メチル化アルジトールアセテートのモル数（相対
値）で、（１）式および（２）式の、分子および分母は
、それぞれ、分枝多糖の分枝数および主鎖グルコース残
基数に比例する値である。（１）式よりｎ ＝ ９．８
％、（２）式よりｎ＝４．１％が得られ、糖組成分析の
値よシ得られたｎ＝ １ ／ １０．７ ＝ ９．３％
と、（１）式より得られた値は良く一致している。
また、分校位置については、（２，４−Ｇ） （グルコ
ース残基のＣ−６位への分校を示す）と（２，６−Ｇ）
（Ｃ−４位への分校を示す）の比よシ、Ｃ−６二〇−４
＝５２：４８となり、Ｃ−６位への分枝がやや多い。
ース残基のＣ−６位への分校を示す）と（２，６−Ｇ）
（Ｃ−４位への分校を示す）の比よシ、Ｃ−６二〇−４
＝５２：４８となり、Ｃ−６位への分枝がやや多い。
実施例２
実施例１と同様に活性化した酢酸カードラン（ＤＳｌ、
９２）０．５．ｌｉｔを、クロルベアゼア７２ｍ１に加
え、５５℃で３０分間加熱して膨潤前処８ｉを行った。
９２）０．５．ｌｉｔを、クロルベアゼア７２ｍ１に加
え、５５℃で３０分間加熱して膨潤前処８ｉを行った。
これに、３−０−ベンゾイル（１，２，５−０−オルト
ベンゾイル）−β−Ｄ−アラビノフラノース０．７９を
加えて加熱し、１６ｒｎｔのクロルペンゼンが留出した
時に、触媒の２，６−ノメチルピリソニウム・ノぐ−ク
ロレート１０ｒｎ９を加え、１２０分間加熱反応させた
。反応終了後、生成物をメタノールにて沈殿させ、沈殿
物をメタノール、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾
燥した（収量０．６．！９）。
ベンゾイル）−β−Ｄ−アラビノフラノース０．７９を
加えて加熱し、１６ｒｎｔのクロルペンゼンが留出した
時に、触媒の２，６−ノメチルピリソニウム・ノぐ−ク
ロレート１０ｒｎ９を加え、１２０分間加熱反応させた
。反応終了後、生成物をメタノールにて沈殿させ、沈殿
物をメタノール、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾
燥した（収量０．６．！９）。
この生成物に対し、加熱膨潤処理および３−〇−ベンソ
イルー（１，２，５−０−、ｔルトヘンソイル）−β−
Ｄ−アラビノフラノースによるアラビノシル化ｔｂり返
した。この生成物を、実施例１と同様に、１Ｍナトリウ
ムメトキシドのメタノール溶液で脱エステル化し、中和
、透析、濃縮凍結乾燥により、水溶性分枝多糖を得た。
イルー（１，２，５−０−、ｔルトヘンソイル）−β−
Ｄ−アラビノフラノースによるアラビノシル化ｔｂり返
した。この生成物を、実施例１と同様に、１Ｍナトリウ
ムメトキシドのメタノール溶液で脱エステル化し、中和
、透析、濃縮凍結乾燥により、水溶性分枝多糖を得た。
中和、透析において不溶部分は全くなく、水溶性部分が
１００％得られた。
１００％得られた。
本分枝多糖を、実施例１に記載したように、メチル化、
加水分解、還元、アセチル化によシ、部分メチル化アル
ジトールアセテートに導き、ガスクロマトグラフィーに
よシその構造とモル比を決定した。その結果を表１に示
す。この場合、側鎖のアラビノース分枝の末端を形成す
る２、３．５− トリー〇−メチルーＤ−アラビニトー
ルアセテートの他に、３，５−ジー〇−メチルーＤ−ア
ラビニトールアセテートおよび２，３−ノー０−メチル
−Ｄ−アシビニトールアセテートが得られ、分校が、オ
リゴアラピナンから成ることがわかった。
加水分解、還元、アセチル化によシ、部分メチル化アル
ジトールアセテートに導き、ガスクロマトグラフィーに
よシその構造とモル比を決定した。その結果を表１に示
す。この場合、側鎖のアラビノース分枝の末端を形成す
る２、３．５− トリー〇−メチルーＤ−アラビニトー
ルアセテートの他に、３，５−ジー〇−メチルーＤ−ア
ラビニトールアセテートおよび２，３−ノー０−メチル
−Ｄ−アシビニトールアセテートが得られ、分校が、オ
リゴアラピナンから成ることがわかった。
分枝長りは
よシ求ｉシ、１．７１となる。
一方、分岐度ｎは（１）式より１６．５チ、（２）式よ
シ１３．０％となｐ、Ｚｏｏグルコース単位当シ、長さ
平均１．７ ｔｈｔ体のα−（１→５）−Ｄ−アラビノ
７ラテンの枝が、１３〜１６．５個付いていることを示
す。その枝の付いている位置は、グルコース残基のＣ−
６位およびＣ−４位で、この場合、はぼ４対１である。
シ１３．０％となｐ、Ｚｏｏグルコース単位当シ、長さ
平均１．７ ｔｈｔ体のα−（１→５）−Ｄ−アラビノ
７ラテンの枝が、１３〜１６．５個付いていることを示
す。その枝の付いている位置は、グルコース残基のＣ−
６位およびＣ−４位で、この場合、はぼ４対１である。
実施例３
市販三酢酸セルロースを、酢酸水溶液に溶解し、温度を
３０〜５０℃で長時間加水分解して、０８２前後の酢酸
セルロースを調製した。得られた酢酸セルロースは、エ
タノール／水（１／１ 、容ｉ比）中に４８時間、エタ
ノール／水（３／１ ）に２４時間、エタノール中に３
時間浸漬し、エーテルで洗い、真空乾燥して活性化した
。
３０〜５０℃で長時間加水分解して、０８２前後の酢酸
セルロースを調製した。得られた酢酸セルロースは、エ
タノール／水（１／１ 、容ｉ比）中に４８時間、エタ
ノール／水（３／１ ）に２４時間、エタノール中に３
時間浸漬し、エーテルで洗い、真空乾燥して活性化した
。
活性化した原料酢酸セルロース（Ｄ８２．１５）０．６
２．ｌｉ＋を、クロルベンゼン６０ｍＪに加え、６０℃
で３０分間加熱して膨潤させた。これに、３−〇−ベン
ゾイルー（１，２，５−０−オルトベンゾイル）−β−
Ｄ−アラビノフラノース０．８５．９を加えて、加熱し
、１３ゴのクロルベンゼンが留出シた時に、１０ｍ９の
２，６−シメチルピリジニウム・ノｅ−クロレートを加
え、１２０分間、還流下に加熱した。反応終了後、反応
生成物をメタノールに沈殿させ、得られた沈殿物乞メタ
ノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した。この生成
物に対し、上記反応を繰り返した。
２．ｌｉ＋を、クロルベンゼン６０ｍＪに加え、６０℃
で３０分間加熱して膨潤させた。これに、３−〇−ベン
ゾイルー（１，２，５−０−オルトベンゾイル）−β−
Ｄ−アラビノフラノース０．８５．９を加えて、加熱し
、１３ゴのクロルベンゼンが留出シた時に、１０ｍ９の
２，６−シメチルピリジニウム・ノｅ−クロレートを加
え、１２０分間、還流下に加熱した。反応終了後、反応
生成物をメタノールに沈殿させ、得られた沈殿物乞メタ
ノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した。この生成
物に対し、上記反応を繰り返した。
反応生成物は、実施例１と同様に、１Ｍナトリウムメト
キシドのメタノール溶液で脱エステル化し、中オロ、透
析、濃縮、凍結乾燥により、水溶性多糖を得た。不溶部
分は全くなく、１００％水可溶であった。
キシドのメタノール溶液で脱エステル化し、中オロ、透
析、濃縮、凍結乾燥により、水溶性多糖を得た。不溶部
分は全くなく、１００％水可溶であった。
本多糖を、実施例１および２と同様に、完全メチル化、
加水分解、還元、アセチル化して得られた、部分メチル
化アルノトールアセテートを表１に示す。
加水分解、還元、アセチル化して得られた、部分メチル
化アルノトールアセテートを表１に示す。
分校と形成するオリゴアラビナンの鎖長りは（３）式よ
シ求められ、２．５８であった。
シ求められ、２．５８であった。
また、分岐度ｎは
より求められ、３１．５％であった。分枝位置は、Ｃ−
６位への分枝を示す（２，４−Ｇ）の割合が多いことが
らＣ−６位への分枝が大部分であることがわかった。
６位への分枝を示す（２，４−Ｇ）の割合が多いことが
らＣ−６位への分枝が大部分であることがわかった。
実施例４
活性化前処理した酢酸カードラン０．６７ｇ１、クロル
ベンゼン４０ゴに加え、加熱シ、クロルベンゼン５ｄを
留出せしめた。これに、３，４．６− ）リーＯ−アセ
チル−（１，２−０−エチルオルトアセチル）−β−Ｄ
−マンノピラノース１．１ｇ１ＩＯえて加熱した。クロ
ルベンゼンｌＱｍＪが留出した時に、触媒２．６−シメ
チルピリゾニウム・バークロレートを１０■加え、１２
０分間、還流下に加熱反応を行った。反応後、生成物を
メタノールに沈殿させ、生成した沈殿物をメタノール、
エーテルで順次洗い、真空乾燥した（収量０．６７．９
）。
ベンゼン４０ゴに加え、加熱シ、クロルベンゼン５ｄを
留出せしめた。これに、３，４．６− ）リーＯ−アセ
チル−（１，２−０−エチルオルトアセチル）−β−Ｄ
−マンノピラノース１．１ｇ１ＩＯえて加熱した。クロ
ルベンゼンｌＱｍＪが留出した時に、触媒２．６−シメ
チルピリゾニウム・バークロレートを１０■加え、１２
０分間、還流下に加熱反応を行った。反応後、生成物を
メタノールに沈殿させ、生成した沈殿物をメタノール、
エーテルで順次洗い、真空乾燥した（収量０．６７．９
）。
得られた乾燥物０．５ｇをクロルベンゼン３０ｍに加え
加熱し、クロルベンゼン５ｒＩｌｌが留出した時に、３
．４．６− ）ソー０−アセチル−（１，２−０−エチ
ルオルトアセチル）−β−Ｄ−マンノピラノース０．７
９ ｇおよび触媒２，６−ノメチルピリジニウム・バー
クロレート１０ｒｎ９を加えて加熱し、反応をくり返し
た。反応後、生成物をメタノールに沈殿させ、メタノー
ル、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。
加熱し、クロルベンゼン５ｒＩｌｌが留出した時に、３
．４．６− ）ソー０−アセチル−（１，２−０−エチ
ルオルトアセチル）−β−Ｄ−マンノピラノース０．７
９ ｇおよび触媒２，６−ノメチルピリジニウム・バー
クロレート１０ｒｎ９を加えて加熱し、反応をくり返し
た。反応後、生成物をメタノールに沈殿させ、メタノー
ル、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。
上記に得られた生成物０．３９に、０．５ Ｎ ＮａＯ
Ｈ１５ＩｒＬ１１に加え、室温で２日間放置した後、残
存するＮａＯＨをＱ、 ｌ Ｎ ＨＣｌで滴定した。分
岐度を下記の式より求めた。
Ｈ１５ＩｒＬ１１に加え、室温で２日間放置した後、残
存するＮａＯＨをＱ、 ｌ Ｎ ＨＣｌで滴定した。分
岐度を下記の式より求めた。
ここに、ａは原料酢酸カードランの置換度、Ａｃは生成
分枝多糖の１ｇ当りのアセチル基のモル数である。得ら
れた分岐度は１１．９であった。
分枝多糖の１ｇ当りのアセチル基のモル数である。得ら
れた分岐度は１１．９であった。
上記の中和滴定を終った溶液を、３〜４日間透析に付し
、不溶部分を除き、可溶性部分は濃縮し、凍結乾燥した
。可溶性部分は理論量の８７チであった。
、不溶部分を除き、可溶性部分は濃縮し、凍結乾燥した
。可溶性部分は理論量の８７チであった。
上記の水可溶性多糖と、箱守法により完全メチル化し、
さらに加水分解、還元、アセチル化によシ得られる部分
メチル化アルゾトール・アセチ−トラ、ガスクロマトグ
ラフィー・マススペクトル分析にかけて構造決定し、表
１の結果を得た。
さらに加水分解、還元、アセチル化によシ得られる部分
メチル化アルゾトール・アセチ−トラ、ガスクロマトグ
ラフィー・マススペクトル分析にかけて構造決定し、表
１の結果を得た。
カードラン中のＣ−６位とＣ−４位への分枝は２．４−
Ｇと２．６−Ｇの比よシ、５８ ：４２であった。
Ｇと２．６−Ｇの比よシ、５８ ：４２であった。
Ｄ−アラビノース、Ｄ−アラビノ７ラナン、あるいＨＤ
−マンノースを分枝とする多糖のメチル化分析結果は表
１に示すとおりである。
−マンノースを分枝とする多糖のメチル化分析結果は表
１に示すとおりである。
実施例５
実施例１と同様に活性化した酢酸カードラン（Ｄ８２．
０５）１．０Ｉ！をクロルベンゼン３０ｄにとかし、こ
れに３，５−ジー０−ベンゾイル−（１，２−０−エチ
ルオルトベンゾイル）−β−Ｌ−アラル ピノフラノースＱＩＱ１．９８１１＠クロルベンゼン１
０ｍｅに溶かして加え、全体を７０℃で６０分加熱した
。さらに温度をあげて、５ｒｎｌの溶媒と留出させた時
に、触媒の２，６−ノメチルピリジニウム・ノ臂−クロ
レート４０ｍ９を加え、１２０分間加熱還流下に反応さ
せた。反応後、生成物をメタノニルに沈殿させ、メタノ
ール、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。収
量ｏ、９７ｇ。
０５）１．０Ｉ！をクロルベンゼン３０ｄにとかし、こ
れに３，５−ジー０−ベンゾイル−（１，２−０−エチ
ルオルトベンゾイル）−β−Ｌ−アラル ピノフラノースＱＩＱ１．９８１１＠クロルベンゼン１
０ｍｅに溶かして加え、全体を７０℃で６０分加熱した
。さらに温度をあげて、５ｒｎｌの溶媒と留出させた時
に、触媒の２，６−ノメチルピリジニウム・ノ臂−クロ
レート４０ｍ９を加え、１２０分間加熱還流下に反応さ
せた。反応後、生成物をメタノニルに沈殿させ、メタノ
ール、ジエチルエーテルで順次洗い、真空乾燥した。収
量ｏ、９７ｇ。
上記生成物に対し、グリコジル化反応をもう一度くり返
した。収量１．０！！。
した。収量１．０！！。
上記に得られた生成物（約０．７６．９）を１Ｍナトリ
ウムメトキシドのメタノール溶液３５ｍに懸濁し、１７
〜２４時間放置して脱エステル化した。
ウムメトキシドのメタノール溶液３５ｍに懸濁し、１７
〜２４時間放置して脱エステル化した。
反応終了後、水３５ｉＪを加え、メタノールを減圧下に
留去し、ＩＮ塩酸で中和した後、透析に３〜４日間付し
た。不溶部分を除去し、水溶液を濃縮、凍結乾燥して、
水溶性多糖を得た。水可溶性部分と水不溶性部分の比率
は２０対８０であった。
留去し、ＩＮ塩酸で中和した後、透析に３〜４日間付し
た。不溶部分を除去し、水溶液を濃縮、凍結乾燥して、
水溶性多糖を得た。水可溶性部分と水不溶性部分の比率
は２０対８０であった。
本水溶性多糖の糖組成は、アラピノーズ基／グルコース
基（モル比）＝１／１２．５で、主鎖のｌＯＯグルコー
ス単位に対し、８個のアラビノフラノース分枝の付いた
構造を示した。
基（モル比）＝１／１２．５で、主鎖のｌＯＯグルコー
ス単位に対し、８個のアラビノフラノース分枝の付いた
構造を示した。
次に、箱守法（Ｓ、Ｈａｋｏｍｏｒｉ、Ｊ、Ｂｉｏｃｈ
ｅｍ、＋５５＋２０５（１９６４）参照。）によシ完全
メチル化し、さらに加水分解、還元、アセチル化により
得られる部分メチル化アルジトール・アセテートｔ１ガ
スクロマトグラフィー・マススペクトル分析にかけて構
造決定し、表１に示す結果を得た。分岐度ｎ（主鎖１０
０グルコース単位毎の分枝数）は前掲の（１）および（
２）式により求められる。
ｅｍ、＋５５＋２０５（１９６４）参照。）によシ完全
メチル化し、さらに加水分解、還元、アセチル化により
得られる部分メチル化アルジトール・アセテートｔ１ガ
スクロマトグラフィー・マススペクトル分析にかけて構
造決定し、表１に示す結果を得た。分岐度ｎ（主鎖１０
０グルコース単位毎の分枝数）は前掲の（１）および（
２）式により求められる。
（０式よりｎ＝ｇ、１％、（２）式よりｎ＝８．３％が
ｍる。
ｍる。
また、分枝位置については、（２，４−Ｇ） （グルコ
ース残基のＣ−６位への分校を示す）と（２，６−Ｇ）
（Ｃ−４位への分枝と示す）の比よシ、Ｃ−６：Ｃ−４
＝ ３ｇ：’ｙ２ となり、Ｃ−夕位への分枝がや
や多い。
ース残基のＣ−６位への分校を示す）と（２，６−Ｇ）
（Ｃ−４位への分枝と示す）の比よシ、Ｃ−６：Ｃ−４
＝ ３ｇ：’ｙ２ となり、Ｃ−夕位への分枝がや
や多い。
実施例６
実施例１と同様に活性化した酢酸カードシン（Ｄ８２．
０５ ） １．０．９をクロル４ンゼン５０ｄに溶かし
、これに３−０−ベンゾイル−（１，２，５−０−オル
トベンゾイル）−β−Ｌ−アラピノフラ／−ス（ｌｖ）
１．４１ｇヲ加え、７０℃で６０分間加熱した。さらに
温度をあげ、溶媒５ ｍｌが留出した時に、触媒２，６
−ノメチルピリジニウム・ノぐ−クロレート４０ｒｎ９
を加え、１２０分間加熱還流させた。
０５ ） １．０．９をクロル４ンゼン５０ｄに溶かし
、これに３−０−ベンゾイル−（１，２，５−０−オル
トベンゾイル）−β−Ｌ−アラピノフラ／−ス（ｌｖ）
１．４１ｇヲ加え、７０℃で６０分間加熱した。さらに
温度をあげ、溶媒５ ｍｌが留出した時に、触媒２，６
−ノメチルピリジニウム・ノぐ−クロレート４０ｒｎ９
を加え、１２０分間加熱還流させた。
反応終了後、生成物をメタノールにて沈殿させ、沈Ｅ’
１ａｙｋメタノール、ノエチルエーテルで順次洗い、真
空乾燥した（収量１．１４ ｊｉ ）。
１ａｙｋメタノール、ノエチルエーテルで順次洗い、真
空乾燥した（収量１．１４ ｊｉ ）。
この生成物に対し、加熱膨潤処理および３−〇−ベンゾ
イルー（１，２，５−０−オルトベンゾイル）一β−ｌ
−アラビノフラノースによるアラビノシル化を繰り返し
た。収Ｒ１，２２ｇ。この生成物を、実施例１と同様に
、１Ｍナトリウムメトキシドのメタノール溶液で脱エス
テル化し、中和、透析、濃縮凍結乾燥により、水溶性分
枝多糖を得た。水溶性部分と不溶性部分の比は７０ ：
３０でありた。
イルー（１，２，５−０−オルトベンゾイル）一β−ｌ
−アラビノフラノースによるアラビノシル化を繰り返し
た。収Ｒ１，２２ｇ。この生成物を、実施例１と同様に
、１Ｍナトリウムメトキシドのメタノール溶液で脱エス
テル化し、中和、透析、濃縮凍結乾燥により、水溶性分
枝多糖を得た。水溶性部分と不溶性部分の比は７０ ：
３０でありた。
本分枝多糖を、実施例１に記載したように、メチル化、
加水分解、還元、アセチル化により、部分メチル化アル
ジトール・アセテートに導き、ガスクロマトグラフィー
によりその構造とモル比を決定した。その結果ｔ−表１
に示す。この場合、側鎖のアラビノース分枝の末端を形
成する２、３．５− トム リーＯ−メチルーＩ−アラビニトールアセテートの他に
、 −−”−” ２．３
−ジー〇−メチルー！ −アシビ二トールアセテートが得られ、分枝が、オリゴ
アラビナンから成ることがわかった。
加水分解、還元、アセチル化により、部分メチル化アル
ジトール・アセテートに導き、ガスクロマトグラフィー
によりその構造とモル比を決定した。その結果ｔ−表１
に示す。この場合、側鎖のアラビノース分枝の末端を形
成する２、３．５− トム リーＯ−メチルーＩ−アラビニトールアセテートの他に
、 −−”−” ２．３
−ジー〇−メチルー！ −アシビ二トールアセテートが得られ、分枝が、オリゴ
アラビナンから成ることがわかった。
分枝長りは（３）式より求まシ、１．９３ となる。
一方、分枝度りは（１）式より３２．０グー奥≠嗜づと
な、？、１００グルコース単位当シ、長さ平均１．’／
量体のα−（１→５）−２１−アラビノフラナンの枝が
％ 約３ ｏ個性いていることを示す。この枝の
付いている位瞳は、グルコース残基のＣ−６位およびＣ
−４位で、この場合、はぼど２：４ｇである。
な、？、１００グルコース単位当シ、長さ平均１．’／
量体のα−（１→５）−２１−アラビノフラナンの枝が
％ 約３ ｏ個性いていることを示す。この枝の
付いている位瞳は、グルコース残基のＣ−６位およびＣ
−４位で、この場合、はぼど２：４ｇである。
実施例７
溶媒置換により活性化した酢酸カードラン（Ｄ３ １
．８９ ）０．６９９をり０ルベンゼン３０１１１ｊに
加え、７０℃で６０分間加熱して膨潤させ、これに３゜
４．６−１−リーＯ−アセチル−（１，２−０−エヂル
オルトアヒヂル）−β−Ｄ−ガラクトピラノース（Ｐ４
（ロ）式） ５．５Ｑをクロルベンゼン１８ＩＩＪに
溶かして加え、加熱した。クロルベンゼン５＋ｎρが留
出した時に、触媒２．６−シメチルビリジニウム・バー
クロレートを２０ＩＩり加え、１２０分間遠流加熱した
。反応後、生成物をメタノールに沈澱さｕ１生成物をメ
タノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した。数分０
．６６（１゜この生成物に対し、加熱膨潤処理および３
．４ ．６−トリー〇−アセデル−（１，２−０−エ
チルＡルトアセチル）−β−１〕−ガラクトピラノース
との反応をさらに２回繰り返したく収１ｉ１０．６９ｇ
）。得られた生成物０．３ｇに、０．５ｆ’Ｊ Ｎ ａ
Ｑ １１ １５１１Ｎを加え、室温で２日間放置した
後、０゜ＩＮ ＨＣ＋を用いて中和し、溶液を３〜／１
０問透析に付し、不溶部分を除き、可溶性部分は濃縮し
、凍結乾燥した。可溶性部分は理論量の９２％であった
。
．８９ ）０．６９９をり０ルベンゼン３０１１１ｊに
加え、７０℃で６０分間加熱して膨潤させ、これに３゜
４．６−１−リーＯ−アセチル−（１，２−０−エヂル
オルトアヒヂル）−β−Ｄ−ガラクトピラノース（Ｐ４
（ロ）式） ５．５Ｑをクロルベンゼン１８ＩＩＪに
溶かして加え、加熱した。クロルベンゼン５＋ｎρが留
出した時に、触媒２．６−シメチルビリジニウム・バー
クロレートを２０ＩＩり加え、１２０分間遠流加熱した
。反応後、生成物をメタノールに沈澱さｕ１生成物をメ
タノール、エーテルで順次洗い、真空乾燥した。数分０
．６６（１゜この生成物に対し、加熱膨潤処理および３
．４ ．６−トリー〇−アセデル−（１，２−０−エ
チルＡルトアセチル）−β−１〕−ガラクトピラノース
との反応をさらに２回繰り返したく収１ｉ１０．６９ｇ
）。得られた生成物０．３ｇに、０．５ｆ’Ｊ Ｎ ａ
Ｑ １１ １５１１Ｎを加え、室温で２日間放置した
後、０゜ＩＮ ＨＣ＋を用いて中和し、溶液を３〜／１
０問透析に付し、不溶部分を除き、可溶性部分は濃縮し
、凍結乾燥した。可溶性部分は理論量の９２％であった
。
↓Ｃ↓Ｐ
前記実施例で得られたグルカン誘導体の推定される構造
式は下記の通シである。
式は下記の通シである。
Ａｆ Ａｆ↓α
↓α Ａｆ ＡｆＡｆ
Ａｆ ζ 覆 ↑（ 実施例４ Ｍｐ Ｍｐ ↓β ↓β ７３Ｇｐｌ−（＋３Ｇｐｌ祐ｒ３Ｇｐ１戸３Ｇｐ１巾→
Ｇｐ：グルコピラノース Ａｆ：アラビノフラノース Ｍｐ：マンノピラノース 実施例ｉ 抗腫瘍活性拭取 抗腫ブ→活比試訣は次のようにして行った。
↓α Ａｆ ＡｆＡｆ
Ａｆ ζ 覆 ↑（ 実施例４ Ｍｐ Ｍｐ ↓β ↓β ７３Ｇｐｌ−（＋３Ｇｐｌ祐ｒ３Ｇｐ１戸３Ｇｐ１巾→
Ｇｐ：グルコピラノース Ａｆ：アラビノフラノース Ｍｐ：マンノピラノース 実施例ｉ 抗腫瘍活性拭取 抗腫ブ→活比試訣は次のようにして行った。
ザルコーマ１８０の１０ 個の細胞を、ＩＣＲ−ＪＣＬ
系マウスの腋下皮下に移殖し、移殖２４時間後から１０
日間、ｔｏｒｎ９／ｋｌ？マウスの割合で、多糖の生理
食塩水溶液を腹腔内に注入し、合計５週間飼育する。５
週間後、腫瘍を刷出し、その合計重量ｔＢｇとする。一
方、多糖溶液を注入しないグループの腫瘍合計重量をＡ
、９とする。腫瘍阻止率は下式よシ算出される。
系マウスの腋下皮下に移殖し、移殖２４時間後から１０
日間、ｔｏｒｎ９／ｋｌ？マウスの割合で、多糖の生理
食塩水溶液を腹腔内に注入し、合計５週間飼育する。５
週間後、腫瘍を刷出し、その合計重量ｔＢｇとする。一
方、多糖溶液を注入しないグループの腫瘍合計重量をＡ
、９とする。腫瘍阻止率は下式よシ算出される。
前記実施例で得られたグルカン誘導体についての試験結
果は次のとおりである。
果は次のとおりである。
発明の効果
以上から明らかな如く、本発明の新規グルカン誘導体は
制癌剤としての使用が期待でき、故に本発明は医薬産業
上極めて有用である。
制癌剤としての使用が期待でき、故に本発明は医薬産業
上極めて有用である。
手続補正出
昭和６１年６月９０
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、マンノピラノース、ガラクトピラノース、アラビノ
フラノースおよびそれらのオリゴマーより成る群より選
択された化合物の少なくとも一種を分枝としてその側鎖
に有するグルカン。 ２、グルカンがβ−１，３−グルカンまたはセルロース
である特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ３、側鎖の位置がグルカンを構成する糖の６−位である
特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ４、側鎖の分枝度がグルカンを構成する糖１００個当り
５〜６０である特許請求の範囲第１項記載の化合物。 ５、抗腫瘍活性を有するものである特許請求の範囲第１
項記載の化合物。 ６、水溶性を有するものである特許請求の範囲第１項記
載の化合物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9926185 | 1985-05-10 | ||
| JP60-99261 | 1985-05-10 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6254701A true JPS6254701A (ja) | 1987-03-10 |
Family
ID=14242767
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10432386A Pending JPS6254701A (ja) | 1985-05-10 | 1986-05-07 | グルカン誘導体 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6254701A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6029155B2 (ja) * | 2012-11-14 | 2016-11-24 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | β−１，３−グルカン誘導体、及びβ−１，３−グルカン誘導体の製造方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58144322A (ja) * | 1982-12-04 | 1983-08-27 | Terumo Corp | 抗腫瘍性ニ−ム樹皮抽出精製物およびその製造法 |
| JPS59124901A (ja) * | 1982-12-29 | 1984-07-19 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 多糖誘導体 |
| JPS59184129A (ja) * | 1983-04-02 | 1984-10-19 | Terumo Corp | 多糖体ｔ２５ｇ１およびその製造法 |
| JPS61101501A (ja) * | 1984-10-24 | 1986-05-20 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | 制癌作用を有する多糖及びその製法 |
-
1986
- 1986-05-07 JP JP10432386A patent/JPS6254701A/ja active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58144322A (ja) * | 1982-12-04 | 1983-08-27 | Terumo Corp | 抗腫瘍性ニ−ム樹皮抽出精製物およびその製造法 |
| JPS59124901A (ja) * | 1982-12-29 | 1984-07-19 | Dai Ichi Seiyaku Co Ltd | 多糖誘導体 |
| JPS59184129A (ja) * | 1983-04-02 | 1984-10-19 | Terumo Corp | 多糖体ｔ２５ｇ１およびその製造法 |
| JPS61101501A (ja) * | 1984-10-24 | 1986-05-20 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | 制癌作用を有する多糖及びその製法 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6029155B2 (ja) * | 2012-11-14 | 2016-11-24 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | β−１，３−グルカン誘導体、及びβ−１，３−グルカン誘導体の製造方法 |
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