JPS58118761A - 抗血栓性材料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗血栓性材料Ｑこ関し、詳しくは材料表面にア
ルブミンを固定化して血小板の粘着を抑制すると共Ｑこ
、このアルブミンに抗凝血物質及び／又は線溶系賦活化
酵素を固定化して血液凝固活性を低減させ、かくして相
乗的Ｇこ抗血栓性を高めた抗血栓性材料に関する。

人工臓器やカテーテル等の使用時（こ生ずる内因外血液
凝固は、血液と異物表面との接触Ｑこよる凝固系＠■因
子の活性化により初期反応か開始され、凝固系因子のカ
スケード的活性化の結果、Ｘａやトロンビン筈が生成さ
れ、最終的にはフィブリン即が形成されることにより生
じる。

これらの活性化された凝固系因子は、血液中の口書物竹
であるアンチトロンビン■によりその作用か徐々Ｑこ阻
害されるか、ヘパリンの共存Ｇこよりその阻害効果が著
しく高められる。従って、臨床的（こ向流凝固の惹起が
懸念される場合には、ヘパリンを投与することが常套手
段となっている。このため、人工心肺や人工腎ＦＡ等の
人工臓器を利用する場合に（は多機のヘパリンを投与す
ることとなるが、このような場合、出血傾向が顕著とな
る等の多くの副作用を伴ない、これらの副作用は人工臓
器の長期使用により更に著しくなる。

そこで、近時（こおいては、ヘパリンを適宜の水不溶性
高分子相体に固定化し、これに血液を接吋させることに
より、ヘパリンを血液中に混入しない状態に保持しつつ
、こわに血液中のトロンビン等を捕捉せしめて血液の凝
固を防止する方法が提案されている。し力）し、押体に
ヘパリンを単独で固定化し１こたけでは満足すべき抗凝
血性が発現されない。

このため、本発明者らは、先にヘパリンの固定化に際し
、これとアンチトロンビン■とを共存状態を保ちつつ同
時に相体に固定化するときは、ヘパリン或いはアンチト
ロンビン■をそれぞれ単独で固定化し１こものに比べて
遥かＧこ優れた抗Ｒ血作用を発揮する事実を見出した（
特開昭５４−２４．４７８号公Ｖｔ　）。このようＱこ
ヘパリンとアンチトロンビン■を共存状態を保ちつつ固
定化した材料は、血液凝固因子のＸａやトロンビンに作
用して、これを不活性化し、すぐれた抗凝血作用を発揮
することができるものの、固定化され１こヘパリンとア
ンチトロンビン■はこれらの血液凝固因子と量論的に作
用するため、この材料の抗凝血作用は有限であり、従っ
て、対応量の活性化凝固因子との結合後には血液凝固阻
害効果を存しない点に尚問題が残されている。

一方、抗凝血物質を固定化する担体Ｏこついては、従来
、ポリエチレン、ポリプロピレン、エチレン−ビニルア
ルコール共重合体、ポリテトラフルオロエチレン、天然
ゴム、合成コム等の疎水性高分子や、ポリビニルアルコ
ール、ポリアクリルアミドゲル等の新水性高分子がよ（
知られているが、疎水性高分子は一般（こ抗血栓性材料
Ｇこ要求される血液適合性Ｇこ劣り、親水性基分子は機
械的強度に劣る傾向があると共に、一般Ｑこ抗凝血物質
の固定化に複雑な操作を要する。しかし、特に血液チュ
ーブや人工臓器Ｑこは大きい機械的強度が要求されると
ころから、従来、疎水性高分子が担体として用いられる
ことが多いが、一方、このような疎水性高分子には抗凝
血物質を固定化するための官能基か一般Ｇこ少ないので
、十会す抗凝血効果を得るＧこ足るだけの量の抗ａ血物
質を固定化することが困難である。

そこで、本発明者らは、従来の抗血栓性材料Ｑこおける
ト記した種々の問題を解決すべく鋭意研究した結果、材
料にアルブミンを固定化すれば、このアルブミンの有す
る多数の官能基を利用して多缶の抗尽血物質を容易Ｇこ
固定化することができると共に、固定化されたアルブミ
ンが材料への血小板の粘〒・を抑えることと相俟って、
すぐれた抗血栓性材料を得ることができることを見出し
て、本発明に至つ１こものである。

従って、本発明による抗血栓性材料は、材料表面に固定
化されたアルブミン上に抗凝血物質及び／又は線屑系賦
活化酵素が固定化さｎていることを特徴とする。

本発明においては前記し１こような疎水性重合体及び部
水性重合体のいずれでも材料として用いることができ、
このほか、生体に対して実質的な有害Ｏこ作用しない物
質であり、アルブミンが固定化されればどのような材料
でも用いることができる。

従って、本発明において用いることのできる重合体とし
て、例えばポリエチレン、ポリプロピレン、ポリイソブ
チレン、ポリメチルペンテン、ポリスチレン、天然ゴム
、クロロプレンコム、ポリ塩化ビニル、ポリフッ化ビニ
ル、ポリテトラフルオロエチレン、ポリ塩化ビニリデン
、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、エチレン−
ビニルアルコール共重合体、ポリアクリロニトリル、ポ
リグリコール醪、ポリビニルピロリドン、ポリビニルホ
ルマール、ポリビニルブチラール、アセタール樹脂、ア
クリル樹脂、ポリアクリルアミド、ポリカーボネート、
ポリスルポン、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチ
レンナフタレ−１・、ポリアミド、ポリイミド、セルロ
ース、ニトロセルロース、セロハン、コラーゲン、ゼラ
チン、多糖類等を挙げることができる。

材料へのアルブミンの固定化の方法は何ら制限されず、
従来より知られているタンパク質固定化方法を任意【こ
用いることができる。アルブミンは抗ｉｔｙ血物質及び
／又は線屑系賦活化酵素を固定化する１こめの二次的な
担体を形成し、それ自体は何ら抗凝血活性を有するもの
ではないから、固定化方法及び条件は任意であり、これ
らを選択することにより、所望の今のアルブミンを固定
化することができる。好ましくは共有結合法により固定
化する。

本（′明（ｄこのようＱこして材料Ｑこ固定化されたア
ルブミンの有する多数のカルボキシル基やアミノ基を利
用して、１む野面物質及び／又は線溶系賦活化、；、、
下を固定化する。用いる抗討血物質及び線溶系ｔｈｌ：
　／工化′孝禦は特に制限されないが、好ましくは１；
ｉ；　ｉ野面物質としてヘパリンとアンチトロンビン■
が共存状態で固定化され、また、線溶系賦活化酵素とし
て１ｄウロキナーゼやストレプトキナーゼが固定化され
る。特に好ましくは、ヘパＩＩン、アンチトロンビン■
及びウロキナーゼの三者が共Ｏこ共存状態で固定化され
る。このような系によれば、ヘパリン−アンチトロンビ
ンｌ［ｌによる凝固１１　１ｉ＊能と線ｎγ系賦活化酵
ゼモによる線浴能とは作用機序が異るものであるにも拘
らず、両系をそれぞわ別途（こ固定化したちの（こ比較
して、昔しい血栓形成抑制効果の延長が認められる。

本発明において材料に抗凝血物質及び線溶系闘。

活化Ｆ４素を結合させる方法は特に制限されず、共有結
合法、イオン結合法等の適宜の方法が用いられる。例え
ばカルボジイミド試薬或いはウッドワード試す５と共（
こ上記物質を材料に反応させれは容易に共有結合Ｏこて
固定化されるか、これらの方法に眼定されるものではな
い。ま１こ、上記＃Ａｐを材料（こイオン結合させる（
こけ、」二記物質の水浴とをＧこ材料を沖２ｇ！；すれ
はよい。

本公明に（Ｅ用するアンチトロンビン用１ｄ主に生由来
のものを用いるか、その他、犬、家チ、などに由来する
ものでもよい。また、線溶系賦活化酵素は主（こ人由来
のウロキナーゼを用いるか、ストレプトキナーゼを用い
ても良い。

材１’ｌ　Ｇこ両足すべきヘパリン、アンチトロンビン
■及び線溶系賦活化酵累の幻モ二ついて特Ｇこ制限はな
いか、通常、利利面積ｌ　ｃｒ！当りヘパリン０．１〜
１００μダ、アンチトロンビンＩｌ［０，１〜１００μ
ダ及び舷）浴系ル１１：活化酵ヲξ０．１〜２００μｆ
を固定化すれば良好な抗凝固作用を示す人工医療材料が
得られる。ヘパリン−アンチトロンビン■及び線溶系旺
；Ｗ、化ｌ暮繋の固定割合についても特に制限はない。

ヘパリン−アンチトロンビン■及び線溶系賦活化酵素の
固定化（はこれらを個別Ｇこ行ってもよいが、同時に行
った方が模作がｆＪｔ’ｉ　里でイ１利である。

本発明Ｑこよる抗血栓性材料は、使用目的に↓６じて、
材料を予ぬ所亜形状Ｑこ成形しておけは、粒子状、シー
ト状、管状等いずわ、の形態でも調製でき、これに血液
を接触させれば、トロンビン等が容易に捕捉され、ま１
こ、僅かに彫昨１され１こ血液靜固塊もウロキナーゼ智
の線溶系１丸：゛活化作用（こより再溶解することがで
き、血液のＵ固が阻止され、正常な血誇のｆｉｉ　ｆｊ
＋状能が得られる。トロンビンを捕捉した材！−１は、
これをγことえはＩＮ酢酸溶液で洗うこと（こより、ト
ロンビン捕捉枳・忰を再賦活できる。

不発明の抗血栓性材料は以」―のようＱこ、アルブミン
を固定化した材オ゛・１土（こ抗凝血物質及び／又は線
ｎキ系賦ｒ化酵素がｊ、ｊ、ｉ定住されている。即ち、
アルブミンの有する多数の冨能基を利用するので、抗凝
血物質及コ）／又は線溶系以；活化酵鼻を隠和な条件に
より簡単に多情−（こ固定化することができ、高い抗血
栓性を有する材料を司ることができる。

特に、材料自体が僅かの官能基しか有さない場合でも、
アルブミンを二次的な担体として利用するので、材料の
種類にかかわらす抗血栓性の高い材料を得ることができ
る。更に、アルブミンを固定化するに際しては、＠、素
の安定性等を考慮する必要がな（、固定化条件を厳しく
してもよいので、アルブミンを多情に固定化することが
できる。また、例えば再生セルロースやエチレン−ビニ
ルアルコール共重合体は官能基として多数の水酸基を有
するが、水酸基は臭化シアン等Ｏこよる活性化処理を行
なっても、十分な量の抗凝血物質や線溶系賦活化ｌｖ素
を固定化することが困難である。しかし、本発明Ｑこよ
れは、これらの材料の場合にもアルブミンの官能基Ｑこ
より多量の固定化が可能である。アルフミン固定化材料
は多数のカルボキシル基やアミノ基を有するため、抗凝
血物質や線溶系賦活化酵素の固定化に際して極めて隠和
な条件下にこれらを高活性に維持しつつ、多量に固定化
することができる点も大きい利点である。

更に、本発明の抗血栓性材料においては、材料に固定化
したアルブミンが材料への血小板の粘着を抑制する効果
を有し、従って、抗血栓性材料表面での血栓の形成を有
効に阻止するので、アルブミンに固定化された抗凝血物
質の効果と相俟って、相乗的に高い抗血栓性を発揮する
。＠Ｑこ、抗謔面物質と線溶系賦活化酵素を共存状態で
固定化すれば、血栓形成が著しく抑制されることは前記
したとおりである。

以下に実施例Ｇこより本発明を説明するが、本発明はこ
れら実施例により何ら限定されるものではない。

実施例１ （ポリアミド担体へのウロキナーゼの固定化）（１）固
定化 （η）ポリアミドへのアルブミンの固定化芳香族ポリア
ミドチューブ（内径１　ｍｍ、外径２簡）を長さ約５鴎
に切断し、水で洗浄し１こ後、ＩＮ塩Ｉｖ／メタノール
溶液中に３０’Ｃの温度で３０　分間浸漬、攪拌し、部
分加水分解して活性化し１こ。水で洗浄後、エチルジメ
チルアミンプロピルカルポジイミド塩酸塩（ＥＤＧ！　
）　　１０　　ミリモルを含有する酢酸緩衝液（５０ｍ
Ｍ、　ｐＴ（４，８）２５ｍｅ中に１５分間浸漬、攪拌
した後、アルブミンを２重滑％濃度で含有する上記と同
じｆｒ￥酔緩衝液２５　ｍ、ｌを添加した。室温で県拌
しながら、０、ＩＮ塩酸又は水酸化ナトリウム水溶液を
逐次添加してｐＨを４．８Ｑこ調整した後、−夜放筐し
てアルブミンをポリアミドに固定化した。この後、水、
２Ｍ塩化すｌ−ＩＪウム水溶液、１０　ｍＭトリス−塩
酸緩衝液（ｐＴ−Ｉ　９．４　）で順次洗浄した。

（＋））ポリアミドへのウロキナーゼの固定化上記と同
様にして活性化したポリアミドを１０ミリモルのＥＩＸ
Ｅを含有する酢酸緩衝液（ｐＨ４，８）　２Ｓｒｒｔｌ
中に浸漬、１５分間攪拌した後、ウロキナーゼ５００単
位を含む上記と同様のリン酸カリウム緩衝液２５７１ｅ
を添加し、（ａ）と同様にＰＨを調整し１こ後、−夜攪
拌して、ウロキナーゼを直接ポリアミド上Ｑこ固定化し
γこ。この後、水と２Ｍ塩化ナトリウム水溶液により洗
浄した。

（Ｃ）　　アルブミン固定化ポリアミドへのウロキナー
ゼの固定化 （ａ）で得たアルブミン固定化ポリアミド上に（ｂ）と
全く同様にしてウロキナーゼを固定化した。

（２）固定化タンパク竹骨の測定 以」二のようＧこして得た各試料を３Ｎ塩酸水溶液に浸
ｆ・コし、５０°Ｃの温度に２時間加温して加水分解し
１こ。上澄液中のタンパク質をＬｏｗｒｙらの方法に従
って定量した。結果を第１表に示すよう（こ、ポリアミ
ドに直１〈ウロキナーゼを固定化する場合ニ比べ、アル
ブミン固定化ポリアミドにウロキナーゼを固定化するこ
とにより、ウロキナーゼの固定化情ヲ著しく多（するこ
とができる。

第１表 （３）酵素活性の測定 次に、上で得た固定化ウロキナーゼの活性を合成基質法
により測定した。合成基質としてＱｌｕｔａ−ｒｙｌ−
Ｑｌｙｃｙｌ−Ａｒｇｉｎｙｌ−ｍｅｔｈｙ−ｃｏｕｍ
ａｒｙｌ−ａｍｉｄｅを用い、これを５０ｍＭのトリス
−塩酸緩衝液（０，Ｉ　Ｍ　Ｎａｒｄ、１０　ｍＭ　Ｃ
ａＣ（！２、ｐｎ　ｓ、ｏ　）に溶解した（終濃度０．
１ｍＭ　）。この溶液２ｍ１Ｖに固定化ウロキナーゼを
浸漬し、３７°Ｃの温度で３０分間反応させた後、１７
重沿％酢醪水洛液３．Ｑ　ｍｌを加えて反応を停止させ
、螢光分光光度計（励起波長３８０　ｎｍ、反射波長４
６０１ｍ　）　Ｃで遊離し１：　Ａｒｒ＋ｉｎｏ−ｍｅ
ｔｈｙｌ−Ｃ！ｏｕｍａｒｉｎ　（ＡＭＣ）の濃度を測
定し゛た。結果を第２表に示すように、ポリアミド（こ
直接に固定化されたウロキナーゼに比べ、アルブミン固
定化ポリアミドに固定化され第２表 たウロキナーゼが、第１表のウロキナーゼ固定化十に対
応して著しく高い活性を示す。

ま１こ、固定化ウロキナーゼを天然基質プラスミノーゲ
ンＧこ作用させ、活性化されたプラスミン活性を合成基
質法によってｍｌ定しても、アルブミン固定化ポリアミ
ドに固定化されたウロキナーゼが高い活性を示し１こ。

即ち、合成基質ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌ−ｏｘｙｃａ−ｒ
ｂｏｎｙｌ−ｇｌｕｔａｒｙｌ−１ｙｓｙｌ−１ｙｓｙ
ｌ−ＭＣＡ　０．２　ｍＭを含有する前記と同じトリス
−塩酸緩衝液０．５尻ｌ（こ固定化ウロキナーゼを含浸
した後、プラスミノーゲン溶ｐｌ　Ｑ、５　ｍｌを加え
、３７°Ｃで１時間反応させた。１７重ｆ％“咋パ做水
ｆｆｇ液２．０　ｍｌを添加して反応を停止させた後、
前記と同村にして遊理ＡＭＣ濃度を測定し１こ。結果を
第３表に示す。

第３表 実施例２ （ポリイミド担体へのウロキナーゼの固定化ン（１）固
定化 （ａ）　　ポリイミドへのアルブミンの固定化１、２．
３．４−ブタンテトラカルボン酸とジアミンとの共縮合
によって得られたイミド化率はぼ１００％のポリイミド
フィルムの小片を水で洗浄後、Ｎａ　２Ｉ（ＰＯ４−Ｎ
ａＯＨ緩衝Ｗ　（Ｎａ２［［’０＋　０．１５Ｍ５０　
ｍｌ、　　ＮａＯＨ０，ＩＭ　１５ｍ、　　ｐｎ　１１
．０　　）に浸消し、４０°Ｃで９０分間攪拌して部分
加水分解し、活性化した。このポリイミド押体に実施例
１（ａ）と同じ方法によりアルブミンを固定化した。

（ｂ）　　ポリイミドへのウロキナーゼの固定化ポリイ
ミドを上記と同様に活性化した後、実施例’１．　（ｂ
）と同様にして直接ウロキナーゼを固定化した。

（Ｃ）　　アルブミン固定化ポリイミドへのウロキナー
ゼの固定化 （ａ）で得たアルブミン固定化ポリイミドに実施例１（
ｂ）と同様Ｇこしてウロキナーゼを固定化した。

（２）酵素活性の測定 以上のようＧこして得た固定化ウロキナーゼの活性を実
施例１と同じ（合成基質を用いて測定した。

結果を第４表に示すよう【こ、本発明の固定化ウロキナ
ーゼは著しく高、い活性を示す。

第４表 実施例３ （エチレン−ビニルアルコール共重合体押体へのペパリ
ン、アンチトロンビン■及びウロキナーゼの共存固定化
） （１）固定化 ビニルアルコール含Ｗ率７ｏモル％のエチレン−ビニル
アルコール共重合体（以下、眼に共重合体という。）の
多孔質フィルムを約１　ｍｔｎ幅Ｏこ細断し、乾燥重量
で約１ｇを水１００ｍ１に懸濁し、攪拌下に５〜ＩＯＮ
水酸化ナトリウム溶液を加えてｐＴ（を１１〜１２に保
った。これに臭化シアン溶液（４〜２４ｐ／８０〜４８
０ｄンを添加しながら、５〜１ＯＮ水酸化ナトリウム溶
液を加えてｐＨを１１〜１２に保ち、ｐ■■の低下が認
められなくなるまで続けた。

この間、氷を加えることにまり液温を２０°Ｃ前後に保
った。反応は８〜１２分間で終了した。反応終了後、速
やかにガラスフィルターで濾過し、冷水１１で過剰臭化
シアンを洗浄除去して活性化共重合体を得た。

次に、この活性化共重合体１４　　（表面積約８０ｃＪ
　）を０．１Ｍ炭酸水素す）　ＩＪウム溶液５ゴに懸濁
させ、これに、ヘパリン５０■、アンチトロンビン［１
０η及びウロキナーゼ１０■を０．１Ｍ炭酸水素す）　
ＩＪウム溶液ＩＱｍＪに溶解した溶液を加え、４°Ｃで
一夜攪拌した。活性化共重合体の余剰活性基をブロック
するため、１Ｍエタノールアミン溶液（Ｔ））Ｔ　８．
０　）　１０筑ｌを加え、４°Ｃで１時間攪拌した後、
２Ｍ塩化ナトリウム溶液及び０．１５Ｍ塩化ナトリウム
溶液で順次洗浄し、ヘパリンーアンチトロンビン■およ
びウロキナーゼ固定化材料（以下、Ｉ−ＺＩＰ−Ａ’Ｉ
’ｌ［［−ＴＪＫと略称する。ンを得た。この材料には
、担体１　ｃｒ！当りヘパリン０．５μｆ、アンチトロ
ンビン＠１．３μｙおよびウロキナーゼ１．０μｇが固
定化されていた。　　　゛ 同様の方法Ｑこより、活性化共重合体１　ｃＪ当りヘパ
リン２，０μｙを固定化させたヘパリン固定化材（以下
、Ｉ−Ｔ：ｆｆ、Ｐと略称する。）、活性化共重合体１
ｒｒ！当りアンチトロンビン■２，５μｇを固定化させ
たアンチトロンビン■固定化材料（以下、Ｉ−ＡＴｆｉ
＋と略称する。風情性化共重合体１　ｃ！当りウロキナ
ーゼ２．０μｇを固定化させたウロキナーゼ固定化材料
（以下、Ｉ−［と略称する。］及び活性化共重合体１ｃ
Ｊ当りヘパリン１．０μｆとアンチトロンビン■２．５
μｙを同時（こ固定化させたヘパリン−アンチトロンビ
ン■固定化材料（以下、Ｉ−■…Ｐ−ＡＴ１１［と略称
する。）を得１こ。

別に、活性化共重合体に３．１μｇｌｃｒ＆の割合でア
ルブミンを固定化しく以下、Ｉ−１？と略称する。）。

このアルブミン固定化担体を実施例１と同様に処理して
ヘパリン及びアンチトロンビン■を固Ｔ、　化（以下、
Ｉ−Ａｌ−ＨＩＰ−ＡＴ　Ｉ［［と略称する。ンした。

この材料には担体１　ｃＪ当りヘパリン２．８μｆ及び
アンチトロンビン■６．０μｇが固定化されていた。

同１ｍ　にアルブミン固定化枳＃（こその１　ｃＪ当り
ヘパリン２．４μｆ１アンチトロンビン■４．１μｍ及
びウロキナーゼ２，７μｆを固定化し１こ（以下、Ｉ−
ＡＮ−：ＦＩＥＰ−ＡＴ　ＩＩＩ　−Ｔ玉と略称する。

］。

尚、上記の固定化操作において、アンチトロンビン■は
ヘパリンの保護作用下に固定しなければ抗凝固作用を起
こさないので、’［−ＡＴｌｌ［の調製に際してはアン
チトロンビン■（こ対して８倍量のアセチル化ヘパリン
を反応系中Ｑこ共存せしめることにヨリアンチトロンビ
ン…■の活性を保護シつつ、これのみを活性化共重合体
に固定化し１こ。

更に、活性化共重合体を、ヘパリン及びアンチトロンビ
ン■を添加せずに上記と同様に処理し、これをコントロ
ールとした。

（２）抗凝血効果の測定 牛のクエン酸加血漿（血液と３．８重量％クエン酸すｌ
−ＩＪウム溶液の容量比９：１混合物を３００Ｏｒｐｍ
で１５分間遠沈処理して得られた上澄液用、２ｒｒｔｌ
をガラス極小試験管Ｇことり、３７°Ｃに加温した。こ
れに一定量の固定化材料を加え、直ちに１／４０　Ｍ塩
化カルシウム溶液０．２　ｍｌ及び生理的等張食塩水０
．５　ｒｕｌを添加し、３７°Ｃ恒温槽中で静かに振と
うし、血漿が凝固するまでの時間を測定１．た。結果を
第第５表 ５表に示す。

以上の結果から明らかなように、担体（こ直接抗凝血物
質や線溶系賦活化酵素を固定化するよりも、相体をこア
ルブミンを固定化し、このアルブミン上に固定化すれば
多量に固定化することができ、更に、ヘパリン、アンチ
トロンビン■及びウロキナーゼを共存状態で固定化する
ことにより、抗血栓性が相乗的に高められる。

実施例４ （血小板の材料への粘着挙動ン 実施例１．２及び３で得たアルブミン固定化材料に実施
例１に記載した方法によりヘパリン及びアンチトロンビ
ン■を固定化した。各材料におけ第６表 ろヘパリン及びアンチトロンビン■の固定化合を９可６
　表Ｑこ示す。

杭、炉血剤１としてクエンｌ”ｊ＞４ナトリ白ムを用い
て成す−１−肢静ｌＩｌ？ヨリ採取Ｌ　１−ＡｆＴｌ　
液（最終、！’、ｌｊｐ　０．３８　％　）を８０ｆｌ
で６分間能心分灯し、得られ１こ多血小板血漿を数滴上
記各試料片」−に静か（こ滴下し、室温で３０分間放置
後、試料片を生理食塩水中で二、三回上下させて、粘着
していない血小板を除いた。

次に、１％グルタルアルデヒド溶液（０，１Ｍ、　ｐＨ
７，４のリン酸緩術液（こ溶解）Ｇこ浸冶し、４０°Ｃ
の温度で２時間反応させて、血小板をに１定化した。ア
第７表 ルコール系で脱水乾燥し、その表面状態を走査型電子顕
微鎖で卸、察１−１コ。各試料片０．０１６ｙｙ−当り
の血小板の粘着数を第７表Ｑこ示す。

このｒ：ρ１から、担体にアルブミンを固定化すること
により、抗廂栓骨材料への血小板の粘着が著しく抑えら
れることか明らかである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）材料表面に固定化されたアルブミン上に抗凝血物
   質及び／又は線溶系賦活化：・丁孝素が固定化されてい
   ることを特徴とする抗血栓性材料。 （２１ａ＠而面質としてアンチトロンビン■とヘパリン
   とが固定化されていることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項記載の抗血栓性材料。 （３）線溶系賦活化酵素がウロキナーゼ又はストレプト
   キナーゼであることを特徴とする特許請求の範囲第１項
   記載の抗血栓性材料。