CN111228296A

CN111228296A - 一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液

Info

Publication number: CN111228296A
Application number: CN202010189006.3A
Authority: CN
Inventors: 冯晓毅; 宋永民; 宫衍革; 姜秀敏; 甄文博; 刘栋; 郭学平
Original assignee: Bloomage Biotech Co Ltd; Shandong Bloomage Hyinc Biopharm Co Ltd
Current assignee: Bloomage Biotech Co Ltd
Priority date: 2020-03-18
Filing date: 2020-03-18
Publication date: 2020-06-05

Abstract

本发明公开了一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，包括交联透明质酸透析液和依克多因；所述交联透明质酸透析液通过将透明质酸或其盐与交联剂在碱性水环境下进行交联反应，得到的反应液用酸调整pH值后用磷酸盐缓冲液透析纯化至渗透压为280～350 mOsmol/kg。本发明的创口冲洗液渗透压为280～350 mOsmol/kg，在清洁创口的同时，活性因子依克多因能够提高皮肤细胞免疫力，加速受损细胞自我修复，交联透明质酸附着于创口床可继续起到自溶性清创的功效，聚在创口表面可形成一层透明质酸保护膜，起到止血、防止组织粘连、阻菌护创及促进愈合的作用。

Description

一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液

技术领域

本发明涉及一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，属于医用创口冲洗液技术领域。

背景技术

伤口床准备理论是近年来伤口处理的新进展，伤口床为创面，是指某种原因导致皮肤组织的破坏、容易发生感染和严重的败血症等并发症的创面。伤口床准备是为促进伤口内源性愈合、提高治疗效果的一种伤口优化管理方案，包括不同阶段的清创、渗液管理和控制感染，强调采用整体、系统性的治疗方法来评估和消除愈合过程的影响因素，使伤口能够在正常环境下愈合。

目前在临床创口处置中，所采用的冲洗液一般为生理盐水、林格氏液等常用冲洗液，这些清洗液仅仅起到机械性清理创面的污垢、淤血，或兼具一定消炎抗菌的作用，而这些作用不能满足对伤口床渗液管理、快速止血、创面防护的治疗要求，效果较为单一。现今也有一些关于伤口清洗液的相关专利报道，但这些产品也存在不同的缺陷，无法满足伤口床的要求。

专利CN 1200951C中提到了一种多重交联HA的生产方法，该方法利用两种或多种选自羟基、羧基和氨基的官能团与透明质酸交联，采用戊二醛、碳化二亚胺、丁二醇二缩水甘油基醚等为交联剂，所得产品可以用于外科手术和医药领域，用于输送伤口愈合促进剂和麻醉剂等，但是该多重交联HA因为交联度较大，仅能以凝胶或薄膜的形式存在，无法用于液态的冲洗液中，无法满足创口冲洗液对于清创的基本需求。

发明CN 105030667 A中公开了一种手术冲洗液及其制备方法，由透明质酸钠和溶剂组成，溶剂为生理盐水、注射用水、林格氏液冲洗液、葡萄糖冲洗液、甘露醇冲洗液、洗必泰冲洗液、庆大霉素生理盐水冲洗液、活力碘冲洗液或生理平衡液，所述手术冲洗液中透明质酸钠浓度为0.1～10g/L。该专利将透明质酸钠加入各种溶剂中，冲洗后残留在伤口床的透明质酸钠很快被稀释或降解吸收，无法有效起到保护创口、快速止血、防粘连及渗液管理的功效，短暂的阻菌作用不足以满足开放性创口的需求。

发明CN 105030815A中公开了一种手术冲洗液，采用羧化壳聚糖和海藻酸钠为活性成分，以多聚磷酸盐为离子介导剂和渗透压调节剂。壳聚糖作为动物源性材料，具有一定致敏风险，其在满足清创需求的同时，无法满足保护创口、快速止血、渗液管理以及防粘连的功效。

发明CN110237054A中公开了一种具有良好生物相容性，兼具抗炎、促进修复、可完全降解作用的疤痕修复材料及其制备方法，该疤痕修复材料的主要功效成分依克多因、尿囊素等被包裹于壳聚糖微胶囊中，加入交联透明质酸钠三维结构中二次成型得到。该产品是专为疤痕修复所研发，外观为致密薄膜，不能用于伤口冲洗。且产品中的微胶囊分布于交联立体结构中，释放速度慢，不能满足伤口冲洗所需的修复成分快速起效的要求，且产品无法满足作为创口冲洗液清创的基本需求。

发明CN 110151594A中公开了一种含有依克多因的复合口腔用透明质酸钠组合物，该组合物是专为口腔问题所研发，并不适于伤口清创。该组合物中的透明质酸钠直接加入溶剂中，接触皮肤后很快会被稀释或降解吸收，无法有效起到保护创口、快速止血、防粘连及渗液管理的功效，短暂的阻菌作用不足以满足开放性创口的需求。

透明质酸(Hyaluronic Acid，简称HA，又称玻璃酸)作为广泛存在于人和动物体内的一种天然物质，由葡萄糖醛酸和乙酰氨基己糖组成双糖单位聚合而成，无种属差异性，在医学领域，被广泛应用于外科手术防粘连及止血中，同时，由于良好的生物相容性，透明质酸作为一种药物传递系统的媒介和载体被人们所熟知。

目前的伤口冲洗液中并没有交联透明质酸与依克多因复配的技术公开，目前用于冲洗液的透明质酸也只是在不交联的情况下单纯的加入各种溶剂中，在对伤口进行冲洗，特别是对黄色或红色期开放性创口或者腔洞型创口进行冲洗时，透明质酸很快会被降解，无法有效起到自溶性清创、防粘连、渗液管理甚至快速止血的功效。

发明内容

为了解决目前伤口冲洗液功效单一、无法很好满足伤口床准备需求、无法兼具清创、护创、防粘连及渗液管理等功效的问题，本发明提供了一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，该冲洗液含有交联透明质酸与依克多因，同时具有清创、护创、快速止血、渗液管理、防粘促愈等多重功效，简化了伤口床准备工序，具有很大的市场潜力。

本发明具体技术方案如下：

一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，其包括交联透明质酸透析液和依克多因；所述交联透明质酸透析液通过以下方式得到：将透明质酸或其盐与交联剂在碱性水环境下进行交联反应，反应得到的反应液用酸调整pH后用磷酸盐缓冲液透析纯化至渗透压为280～350 mOsmol/kg，得交联透明质酸透析液；所述交联剂与透明质酸或其盐的质量比为1:60～1:120。

本发明冲洗液呈液体状态，为等渗溶液。本发明选择轻度交联的透明质酸和依克多因为有效成分，分子结构更加稳定、水溶性相对减弱、粘弹性和力学强度增强，对酸、碱、热、自由基和透明质酸酶的降解作用有更强的抵抗力，且同时具有透明质酸生物相容性好、可生物降解、安全、无免疫原性的优势。依克多因为一种小分子的环状氨基酸衍生物，多为极端环境微生物在渗透压胁迫下合成的一类渗透压补偿溶质，其报道的主要作用有保湿、保护生物分子及细胞、抗炎、美白、修复等，将依克多因加入本发明冲洗液中，可以发挥抗炎修复的功效，且冲洗液具有一定的粘性，交联透明质酸的三维网络结构也可以对依克多因有缓释及稳定作用，增加依克多因在创口上的存留量和存留时间，稳定及保护依克多因的结构从而保证其活性，同时，交联透明质酸结构具有强大的吸收及锁住渗液能力，能够有效管理渗液，对于出血伤口有助于血小板聚集快速止血。本发明冲洗液对创口进行处理时，可以在发挥机械性清创的同时起到快速成膜保护创口、防粘促愈和渗液管理甚至快速止血的作用，交联透明质酸和依克多因在创口表面可以形成一层凝胶膜，较长时间黏附于创口部位维持湿性环境、吸收渗液，起到自溶清创及渗液管理的作用。活性因子依克多因嵌入交联透明质酸立体结构中能够长效稳定的发挥功效，提高皮肤细胞免疫力，加速受损细胞自我修复。此外，交联透明质酸和依克多因在创口形成的生物膜可以很好地起到阻菌护创、预防组织粘连、促进愈合的作用。

进一步的，所述透明质酸或其盐的分子量为1000kD～3000kD。在此范围内，经过交联的透明质酸的粘度、保湿、护创、防粘连等作用更有优势。

进一步的，所述透明质酸盐包括透明质酸钠、透明质酸锌等常用透明质酸盐。

进一步的，所述交联剂可以为任何现有技术中报道的能够用于透明质酸交联的交联剂，例如碳化二亚胺、1,4-丁二醇二缩水甘油醚等，出于安全性和成本的考虑，交联剂优选为1,4- 丁二醇二缩水甘油醚。

进一步的，交联所需的碱性条件由氢氧化钠或其水溶液提供。氢氧化钠水溶液浓度可以根据需求进行调整。

进一步的，交联反应时，透明质酸或其盐在反应体系中的含量为0.1～1.5wt％。该反应体系指的是：透明质酸或其盐、交联剂、水、pH调节剂形成的反应体系。

进一步的，交联反应时，反应pH为8-12，该pH可以通过氢氧化钠固体或氢氧化钠水溶液进行调整。交联反应后，先用酸调整pH至5-7，然后再用磷酸盐缓冲液进行透析，透析的目的一是除去交联剂，二是达到所需的渗透压。优选的，调整pH所需的酸为盐酸。

进一步的，交联反应时，反应温度为25～40℃，反应时间为2～8h。

进一步的，将透析后得到的交联透明质酸透析液与依克多因混合均匀，即可得到交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液。优选的，依克多因的质量为交联透明质酸透析液质量的 0.1～5％。

进一步的，交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液的pH为5-8。此pH是由磷酸盐缓冲液带来的，本发明所用的透析所用的磷酸盐缓冲液的成分为：磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)、磷酸氢二钠和氯化钠，pH为5-8。

进一步的，本发明交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液中含有交联透明质酸、依克多因、磷酸盐、氯化钠功效成分，除了这些功效成分外，还可以加入碘离子或银离子，增加冲洗液的杀菌消炎效果。

本发明上述交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液制备简单，先将透明质酸或其盐与交联剂在碱性水环境下进行交联反应，反应后用酸调整pH，然后用磷酸盐缓冲液进行透析纯化，至渗透压为280～350mOsmol/kg，得交联透明质酸透析液；向交联透明质酸透析液中加入依克多因，混合均匀，即得交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液。

本发明冲洗液渗透压为280～350mOsmol/kg，可用作手术冲洗液、慢性愈合伤冲洗液、急性创口冲洗液及美容整形微创伤口的冲洗液，特别适用于伤口床的处理，对于伤口床的准备能够起到系统性的多元作用，可以在发挥机械性清创和自溶清创的同时起到保护创口、防粘促愈和渗液管理甚至快速止血的作用，不同于临床中常用的伤口灌洗或压力性冲洗的单一机械性清创作用的冲洗液。与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1、本发明采用具有良好生物相容性、可被生物降解的透明质酸为主要材料，交联透明质酸附着于创口床可继续起到自溶性清创的功效，交联透明质酸在创口表面能形成保护膜，防粘连的优势显著。同时，交联透明质酸结构具有强大的吸收及锁住渗液能力，能够有效管理渗液，对于出血伤口有助于血小板聚集快速止血。

2、本发明采用具有促进细胞愈合的小分子依克多因为主要功效成分，活性因子依克多因能够提高皮肤细胞免疫力，加速受损细胞自我修复，与轻度交联透明质酸结合能同时满足清创、阻菌护创、渗液管理、防粘促愈等多重功效，更重要的是，依克多因附着或镶嵌于交联透明质酸三维结构中，可稳定并延长其活性。同时可添加银离子、碘离子等具有杀菌消炎功效的成分，增加冲洗液的作用，有益于创口的处置和保护，具有临床必要性；

3本发明冲洗液制备的成本低、工艺周期短、污染小、耗能低，采用半透膜纯化去除交联剂，提高了产品的安全性。

附图说明

图1是手术后第7d对照组中粘连程度等级为IV级的大鼠的腹腔照片。

具体实施方式

以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构、功能或步骤将不进行详细描述。除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。

如无特别说明，下述浓度均为质量百分浓度。

下述实施例中，所用磷酸盐氯化钠溶液中各成分组成和含量为：磷酸二氢钠(NaH₂PO₄·H₂O)0.05mg/ml，磷酸氢二钠(Na₂HPO₄)0.22mg/ml，氯化钠9mg/ml，pH7.4。

实施例1

考察交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液的止血及促愈合效果。

1、配制五组创口冲洗液

(1)通过以下工艺配方(表1)配制五组创口冲洗液，分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组：

表1创口冲洗液配方

实验组	透明质酸钠	1,4-丁二醇二缩水甘油醚	依克多因	渗透压280～350mOsmol/kg
					Ⅰ组	√	√	√	√
Ⅱ组	——	√	√	√
					Ⅲ组	√	——	√	√
Ⅳ组	√	√	——	√
					Ⅴ组	√	√	√	——

(2)实验组Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组均采用0.9％NaOH溶液配制1.5％浓度的透明质酸钠溶液，透明质酸钠分子量为1000kD，实验组Ⅱ组0.9％NaOH溶液中不添加透明质酸钠；

(3)实验组Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅳ组、Ⅴ组分别向步骤(2)的溶液中加入交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚，交联剂加量与透明质酸钠质量比为1:120，实验组Ⅲ组中不加入交联剂。将Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的溶液pH均调整至12，然后在25℃下反应2h；

(4)将步骤(3)的反应液采用HCl调节pH值至5～7，用半透膜透析纯化反应溶液，其中，Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组透析液为磷酸盐氯化钠溶液，透析至交联透明质酸盐溶液渗透压为280～350mOsmol/kg，Ⅴ组采用纯化水作为透析液，透析过程中每隔1h采用液相色谱法检测样品中BDDE含量，透析至BDDE含量≤1μg/g；

(5)向实验组Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组透析纯化后的溶液中加入质量分数5％的依克多因，充分溶解并混合均匀，获得五组创口冲洗液。

2、实验方法

2.1促进愈合及快速止血实验考察

以上述制得的五组创口冲洗液为实验组，以0.9％生理盐水为对照组，将它们用于家兔体表创面出血模型的止血冲洗实验中，考察各样品止血以及促进伤口愈合功效。

动物种属：健康新西兰白兔(普通级)，180-210d，体重2.0-3.0kg，雌雄各半；

动物来源：家兔由济南西岭角养殖繁育中心提供；

动物数量和分组：新西兰兔42只，随机分为6组，每组7只；

适应时间：适应5天以上；

动物管理：动物试验在动物实验室进行，动物管理按GB/16886.2动物的福利要求规范进行。家兔饲养于普通级环境，室温19～26℃，湿度40％～70％，日温差≦4℃，换气次数8～ 10次/h，昼夜明暗交替时间12h/12h，动物用金属兔笼单笼饲养，自由饮水，每日上下午各给予一次颗粒兔饲料。

以脱毛剂对家兔背部脱毛，24h后以1％戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉注射麻醉。无菌条件下使用7号注射器针头在脱毛区皮肤“#”型划伤(以轻微渗血而无明显出血为度)。划伤后的家兔用冲洗液进行创口冲洗，每组家兔分别使用不同的冲洗液，每次冲洗持续30秒，每次冲洗后观察伤口的流血情况，如果还有渗血则继续进行冲洗，直至不再渗血为止。用滤纸条轻轻蘸吸观察渗血情况，滤纸条上不再沾有血液为不再渗血。5次冲洗后仍未止血的，进行按压止血，出血时间以5min计。记录各组家兔的止血所需时间，止血后使用纱布绷带缠绕固定， 12小时后去掉纱布，记录创面情况，然后用冲洗液清洗创口，每日1次，每次持续冲洗30 秒，连续7天，每天观察记录动物整体情况及受损区的红肿、结痂、脱痂等情况。

2.2防粘连实验考察

选择Ⅰ组、Ⅲ组创口冲洗液为实验组，以0.9％生理盐水为对照组，将它们用于大鼠模型的防粘连冲洗实验中，考察各样品防粘连功效。

动物种属：SD大鼠(SPF级)，200-220g，雌雄各半；

动物来源：大鼠由山东鲁抗医药股份有限公司提供；

动物数量和分组：大鼠18只，随机分为3组，每组6只；

检疫与驯化：检疫5天，按照《大鼠的检疫》SOP-AM035(2)执行；

动物管理：动物试验在动物实验室进行，动物管理按GB/16886.2动物的福利要求规范进行。大鼠饲养于普通级环境，室温19～26℃，湿度40％～70％，日温差≦4℃，换气次数8～ 10次/h，昼夜明暗交替时间12h/12h，动物用不锈钢鼠笼饲养，6只/笼，自由饮水，每日上下午各给予一次饲料。

动物造模前禁食(不禁水)12h，3％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(30mg/kg)。大鼠麻醉后将其仰卧固定于手术板上，腹部电剃脱毛，消毒皮肤。取下腹部正中长约2cm切口，提出盲肠。用解剖刀刮盲肠浆膜面10遍至整个盲肠浆膜面点状出血再滴1滴无水乙醇于创面，分别采用三组冲洗液冲洗创面，回纳盲肠，然后用血管钳钳夹与盲肠相对应的壁层腹膜，用4号丝线结扎后关腹。

各组动物手术后第7天，根据Phillips五类分级法观察肠粘连程度，按表2对肠粘连程度进行分级。

表2.大鼠肠粘连程度分级

分级	标准
		0级	完全无粘连
Ⅰ级	1～2处局部轻度粘连，用手指可分离
		Ⅱ级	有2处以上1级粘连
Ⅲ级	有广泛的粘连，部分分离困难
		Ⅳ级	盲肠与腔壁紧密粘连，分离困难

3、实验结果及分析

3.1促进愈合及快速止血实验考察结果

使用不同冲洗液的家兔体表创面止血情况如下表3所示。

表3家兔体表创面创口冲洗止血时间

通过7d的观察，各组动物已经脱痂痊愈，在愈合过程中，部分实验动物发生了创面红肿的炎性反应，使用不同冲洗液的家兔体表创面愈合情况如下表4所示。

表4家兔体表创口冲洗试验

从表3和表4可以看出，Ⅰ组的冲洗液与其他组比较，止血速度最快，红肿动物数最少、体表创面伤口恢复最快，可显著缩短家兔体表创面止血时间，显著提高创面愈合速度。对照组出现炎性反应的动物最多，实验动物伤口愈合程度最差；Ⅳ组样品中未添加依克多因，炎性反应动物数量较多，伤口愈合程度较差；Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅴ组中均有动物出现炎症反应，愈合程度不及Ⅰ组愈合结果。由此可以看出，本发明由交联透明质酸钠、依克多因和磷酸盐氯化钠缓冲液构成的等渗创口冲洗液具有清创、止血、促愈多重功效，明显优于生理盐水。

3.2防粘连实验考察结果

术后第7d各组大鼠的粘连程度等级如下表5所示。

表5.大鼠术后7d腹膜粘连程度等级分级结果

从上表可以看出，术后第7d对照组粘连等级为IV级的大鼠共4只，Ⅲ级大鼠共2只；试验Ⅰ组粘连等级为Ⅱ级的大鼠共5只，Ⅲ级大鼠仅1只；试验Ⅲ组粘连等级为Ⅲ级的大鼠共5只，Ⅱ级大鼠仅1只。从结果看，对照组冲洗液防粘连效果最差，实验Ⅰ组冲洗液防粘连效果显著，实验Ⅲ组冲洗液因透明质酸未交联，因此无法在创面维持较长时间，因此防粘连效果较差。

术后第7d对照组中粘连程度等级为IV级的大鼠的腹腔照片如图1所示，从图中可以看出，发生粘连大鼠的腹部U型切口断面下可见腹膜区由一层均匀不透明的灰色组织所覆盖，粘连组织中小血管扩张充血并伴有数量增多，肠管与肠管间及腹壁间发生广泛粘连，盲肠与腔壁紧密粘连，分离困难，部分肠管狭窄及梗阻。

实施例2

本实施例考察不同交联程度交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液止血效果，制备三组交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，分别为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组，制备方法如下：

(1)采用0.9％NaOH溶液配制透明质酸钠溶液，透明质酸钠分子量1200kD，浓度1％；

(2)向上述溶液中分别加入交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚，在pH为8下40℃反应8h，其中Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组，交联剂的用量与为透明质酸或其盐用量的质量比分别为1:140、1:100、 1:40。交联剂浓度分别为0.07‰、0.1‰、0.25‰；

(3)交联反应后，采用0.1％HCl调节pH值至6，半透膜透析纯化交联透明质酸钠溶液，透析液为磷酸盐氯化钠溶液，透析至交联透明质酸钠溶液渗透压为280～350mOsmol/kg；

(4)透析纯化后的交联透明质酸透析液中加入依克多因，依克多因在透析液中的质量分数为3％，充分溶解并混合均匀，最终获得交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液。

实验方法：按照实施例1中记录的方法，选择15只新西兰兔进行试验，共分为3组，每组5只；按照实施例1的方法对家兔进行处理，然后将本实施例上述三组交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液用于家兔体表创面出血模型中，反复冲洗创面5次，每次持续30秒，观察止血时间。

实验结果：第Ⅰ组、第Ⅱ组冲洗液流动性较好，具有良好的清创冲洗效果，止血时间第Ⅰ组冲洗液反复冲洗创面5次，仍未止血，采取按压止血方式，止血效果较差；第Ⅱ组冲洗液止血时间为0～30s，第一次冲洗后即可止血，清创止血效果好；第Ⅲ组冲洗液交联度大，流动性差，创口冲洗液应具备的首要清创功效无法满足。

实施例3

(1)按照下表6的配方表选择各原料及含量：

表6创口冲洗液配方

(2)采用0.9％NaOH溶液配制透明质酸盐溶液，各透明质酸盐含量如表6所示；

(3)向各透明质酸盐溶液中加入交联剂1,4-丁二醇二缩水甘油醚，交联剂加入量如表6 所示，在pH 8下进行碱性反应，40℃下反应8h；

(2)将反应液采用0.1％HCl调节pH值至5，半透膜透析纯化所得交联透明质酸盐溶液，透析液为磷酸盐氯化钠溶液，透析至交联透明质酸盐溶液渗透压为280～350mOsmol/kg；

(3)透析纯化后的交联透明质酸盐溶液中依克多因，依克多因含量如上表6所示，充分溶解并混合均匀，最终获得三组不同的交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液。所得三组冲洗液均呈现无色透明液体状态，渗透压均为280～320mOsmol/kg。

实验结果：这三组的冲洗液流动性均较好，均具有良好的清创冲洗效果。第1组冲洗液的止血时间为125s，第2组冲洗液的止血时间为70s，第3组冲洗液的止血时间为95s。

Claims

1.一种交联透明质酸依克多因等渗创口冲洗液，其特征是：包括交联透明质酸透析液和依克多因；所述交联透明质酸透析液通过以下方式得到：将透明质酸或其盐与交联剂在碱性水环境下进行交联反应，得到的反应液用酸调整pH后用磷酸盐缓冲液透析纯化至渗透压为280～350 mOsmol/kg，得交联透明质酸透析液；所述交联剂与透明质酸或其盐的质量比为1:60~1:120。

2.根据权利要求1所述的等渗创口冲洗液，其特征是：所述透明质酸或其盐的分子量为1000 kD~3000 kD。

3.根据权利要求1或2所述的等渗创口冲洗液，其特征是：所述透明质酸盐包括透明质酸钠或透明质酸锌。

4.根据权利要求1所述的等渗创口冲洗液，其特征是：所述交联剂为1,4-丁二醇二缩水甘油醚，所述碱性条件由氢氧化钠或其水溶液提供。

5.根据权利要求1所述的等渗创口冲洗液，其特征是：交联反应时，透明质酸或其盐在反应体系中的含量为0.1～1.5wt%。

6.根据权利要求1、4或5所述的等渗创口冲洗液，其特征是：交联反应时，反应pH为8-12，反应后，用酸调整pH至5-7，所述酸优选为盐酸。

7.根据权利要求1、4或5所述的等渗创口冲洗液，其特征是：交联反应时，反应温度为25～40℃，反应时间为2～8 h。

8.根据权利要求1、2、4或5所述的等渗创口冲洗液，其特征是：依克多因的质量为交联透明质酸透析液质量的0.1~5%。

9.根据权利要求1、2、4或5所述的等渗创口冲洗液，其特征是：所述磷酸盐缓冲液的组成为磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和氯化钠，pH为5-8。

10.根据权利要求1、2、4或5所述的等渗创口冲洗液，其特征是：含包括碘离子或银离子。