JPH1142440A - クロレラの破砕方法およびクロレラ破砕物並びにその安定化方法、および安定化されたクロレラ破砕物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 クロレラ細胞の破砕を効率良く短時間に行
う方法およびクロレラ細胞破砕物を提供する。また、ク
ロレラ細胞破砕物を短時間に効率良くサイクロデキスト
リンに包接させ安定させる方法および安定化されたクロ
レラ細胞破砕物を提供する。 【解決手段】クロレラを含む懸濁液を湿式ジェットミ
ルで処理することによりクロレラ細胞破砕を非常に短時
間で確率の高いクロレラ細胞の破砕を可能とする。ま
た、それにより非常に効率良くクロレラ細胞破砕物を提
供することを可能にする。 クロレラ細胞破砕物を含有する溶液とサイクロデキス
トリンを湿式ジェットミルを用い処理しＣＤ包接を行う
ことによりクロレラ細胞破砕物を安定化することを可能
とする。また、それにより非常に安定化されたクロレラ
細胞破砕物を提供することを可能にする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は食品分野、医薬品分
野において有効に用いられているクロレラ細胞の細胞膜
を短時間で効率良く破砕する方法及び、破砕物、並びに
該破砕物の安定化法と安定化物に関する。

【０００２】

【従来の技術】クロレラの持つ成分の人体に対する効果
は種々有るが、細胞中に存在したままでは消化吸収の効
率が悪くその効果は半減される。クロレラの有効成分を
効率良く消化吸収させる方法として細胞壁をあらかじめ
破砕しておく様々な方法が提案されている。

【０００３】従来、クロレラの細胞壁を破砕する方法と
しては「ダイノーミル」（シンマルエンタープライゼス
製）に代表されるビーズミルあるいはその他のメディア
型のミルによる湿式破砕が主な方法として利用されてい
る。

【０００４】他方サイクロデキストリン（以下ＣＤと略
記する）は空洞を有しており、様々の物質を空洞内部に
取込み、包接複合体を形成することが知られている。従
来より、ＣＤのこのような性質を利用し、揮発性物質
の安定化、酸化分解性・光分解性物質の保護、物理
化学的性質（溶解度、色、味など）の変化、反応性の
変化、などに利用されているが、近年、ＣＤ空洞内（環
状構造の中空部分）に有効物質を包接させ、ＣＤと有効
物質との包接複合体を作ることによって、有効物質の可
溶化を図り、有効物質の水への溶解性や、安定性を改善
する方法も提案されている。

【０００５】また、ＣＤの上記包接作用を活用し様々な
薬理作用を持った物質を包接することにより水中に安定
に分散させ或いは有効成分を変質をさせずに粉末化させ
る方法としても利用されている。

【０００６】ＣＤと有効物質の包接複合体を形成する場
合、従来は、ＣＤ水溶液と有効物質とを混合し、攪拌機
等の回転型乳化装置を用いて処理する方法が採用されて
いる。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】しかし、上記したメデ
ィア型のミル、例えばビーズミルではクロレラ細胞を破
砕するため単位時間当たりの細胞破砕の効率が悪く破砕
処理に長時間を要するばかりでなく、充填されたビーズ
同士あるいはビーズとライニングとの衝突あるいは摩擦
による不純物の混入がさけられない。

【０００８】更には、装置の特性上密閉式の連続処理工
程とすることが困難であり、そのために衛生面において
対策も管理上困難となる、処理時間が長いため生産効率
が低く装置も大きく重量も有るため動力費が高くなりラ
ンニングコストが高くなる、製品の回収率が悪い、洗浄
等の作業において非常に労力を要する、といった様々の
問題点が指摘されている。

【０００９】また、上記のような回転型乳化装置を用い
て処理することにより、得られるミセルやコロイド状態
は、１〜１０μｍ程度の大粒のものであり、ＣＤとの包
接複合体を形成させるには効率が悪い。しかも、このよ
うに回転型乳化装置を用いて処理する方法では、有効物
質の種類よっては、特に親油性物等はＣＤと包接複合体
を形成しにくく、撹拌後、簡単に水層と成分層とに分離
してしまったり、包接が不十分なため酸化分解や光分解
により退色或いは成分変性することもあり、より安定な
乳化液、包接液が求められている。

【００１０】クロレラ細胞中の有効物質（クロロフィル
等）が細胞破砕されると、一般に酸化分解や光分解によ
る退色を起こし易くなる原因になるが、前述の如くＣＤ
で包接するとそれらの現象が抑えられ安定化させること
が可能ではあるが、回転型乳化装置を用いて行う限りに
おいては、包接効率が悪くＣＤによる包接効果が十分に
現れないため、より安定なクロレラ破砕物を得ることの
できる技術の開発が求められている。

【００１１】

【課題を解決するための手段】請求項１記載の本発明
は、湿式ジェットミルを用い処理することによりクロレ
ラの細胞壁の破砕を短時間で効率良く行うことを特徴と
するクロレラ細胞の破砕方法である。

【００１２】請求項５記載の本発明は、請求項１または
４に記載の方法により得られるクロレラ破砕物を提供す
るものである。

【００１３】請求項２記載の本発明は、請求項１記載の
方法を実施する際に同時にＣＤを共存させることにより
クロレラ細胞壁の破砕と同時にＣＤによるクロレラ細胞
中の有効物質の包接を効率良く行ない、クロレラ破砕物
を安定化する包接方法である。

【００１４】請求項６記載の本発明は、上記方法により
得られる安定化されたクロレラ破砕物を提供するもので
ある。

【００１５】

【発明の実施形態】以下本発明について詳細に説明す
る。

【００１６】ジェットミルには、乾式と湿式のものがあ
るが、本発明方法を実施する際には湿式ジェットミルを
用いることが必要である。乾式ジェットミルを用いたの
では、本発明の方法の目的を達成することはできない。

【００１７】簡単に言うと、乾式ジェットミルとは、気
相流中における粒子同士又は粒子と壁との衝突によって
粒子を微粒化するものであり、湿式ジェットミルとは、
液相流において、粒子同士又は粒子と壁との衝突によっ
て粒子を微粒化するものであるが、湿式ジェットミル
は、これに加えて液相中でのキャビテーション、乱流剪
断等の複合的物理要因も微粒化に寄与している。なお、
微粒化の程度としては、通常、０．０２〜０．５μｍ程
度である。

【００１８】本発明で用いられる湿式ジェットミルと
は、何らかの方法により高速流を発生させ、流体同士又
は流体と壁との衝突及び高速流における乱流剪断、キャ
ビテーション等を利用し、乳化・分散を行なう装置のこ
とである。このような湿式ジェットミルには、高圧ホモ
ジナイザーがあり、プランジャーポンプ，ロータリーポ
ンプなどによって処理流体をノズルから噴射させ、固定
板に高速でたたきつける方式と、噴射される液同士を正
面から衝突させる方式のものがある。高圧状態にあった
ものが、噴射直後に減圧解放されると、キャビテーショ
ン効果により流体内部からの瞬間的な衝撃破砕力も生じ
て微粒化更に増進される。

【００１９】このような湿式ジェットミルとしては、高
庄ホモジナイザーと称されるバルププレートによる高速
噴射を利用した装置（ＡＰＶゴーリン製、ラニー製、ソ
アビ製、日本精機製など）、フィルム状に形成した流路
中で高速衝突を起こす装置（マイクロフルイダイザー：
マイクロフルイディックス社製）、９０゜位相させて連
通せしめたそれぞれ一文字の流路中で高速衝突を起こす
装置（ナノマイザー：ナノマイザー製）、同一ノズル内
で粒体同士の衝突回数を複数回発生させる装置（ナノメ
イカー：エスジー・エンジニアリング製）、偏平流路素
子内で流体同士を衝突させる装置（アクア：アクアテッ
ク製）、及び対向するオリフィスから非球面構造の部屋
へ噴射させ、衝突させる装置（アルティマイザー：スギ
ノマシン製）などが挙げられる。

【００２０】これらの湿式ジェットミルは、それぞれ装
置の特性により、クロレラ細胞壁の破砕およびＣＤを用
いた有効物質含有の溶液の安定性に差を生じるものの、
従来のメディア型ミルをも用いたクロレラ細胞の破砕法
に比べると、より確率の高いクロレラ細胞の破砕が可能
となり、また包接溶液の製造においては撹拌機等の回転
型乳化装置を用いて製造したものに比べて、より安定性
の高い包接溶液の製造が可能となる。本発明の方法にお
いては、上述した湿式ジェットミルのいずれをも用いる
ことが可能である。

【００２１】しがしながら、より高い効率でエネルギー
を利用でき、しかもクロレラ細胞の破砕がほぼ完全に行
え且つ細胞壁自体の微粒化も行うことが可能、非常に安
定なクロレラ細胞内成分の有効物質をＣＤにより包接し
た包接溶液を効率良く製造するうえで特に好ましいもの
としては、（株）ジーナス製の「ジーナスＰＹ」として
市販されている湿式ジェットミルを挙げることができ
る。

【００２２】この「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェ
ットミルは、耐圧容器の中に密封状態で設置されたノズ
ルへ流体を高圧で圧送し、ノズル内で渦流状のジェット
流を発生させることによって、物質を乳化・分散・破砕
する装置である。ノズルは３つあり、３つのノズルは、
それぞれ、液相ジェット流同士が衝突するノズル、
衝突後、ジェット流を維持しながら高速螺旋流となるノ
ズル、やや速度を落とし、最終調整を行うノズルによ
って構成され、それらが接続された一連の流路内で被処
理流体内に含まれる物質の微粒化が行われる。

【００２３】該「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェッ
トミルを用いる場合、クロレラの種類やＣＤの種類等に
もよるが、温度や圧力の制御及びパス回数の制御によ
り、目的とする細胞の破砕、更には残留する細胞壁の微
粒化を行うことが可能であり、またクロレラ細胞中の有
効物質をＣＤ包接した安定性の高い溶液を製造すること
ができる。

【００２４】この「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェ
ットミルの詳細について、図面に基づいて、以下説明す
る。図１は、この「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェ
ットミルの微粒化装置及びその周辺設備を合む微粒化シ
ステムの全体概略構成図であり、図２は微粒化装置部分
の構成を示す説明図である。

【００２５】図１において、微粒化システム１は、クロ
レラを含む懸濁液或いはクロレラ細胞破砕液やＣＤ溶液
などの流体を貯留するための容器２，３とを備えてお
り、これらの容器２，３内の各流体は、弁４，５にて、
それぞれ流量調節され、配管６で合流させてから、高圧
ポンプ７の吸入口へ供給されるようになっている。高圧
ポンプ７は、混合液を１０〜１５０ＭＰａ程度に加圧し
て高速流を形成した後、微粒化装置８へ導入するように
なっている。

【００２６】この図において、微粒化装置８が、「ジー
ナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェットミルの特徴部分に相
当するもので、具体的には、微粒化すべき流体を通過さ
せることのできる貫通孔を形成したブロックを、貫通孔
が前記流体の流れ方向に沿うように３個実質的に密着配
設した微粒化装置であり、流体導入側ブロックに前記貫
通孔を、少なくとも２本、中間ブロックに１本、流体排
出側ブロックに少なくとも２本それぞれ形成し、前記導
入側ブロックと前記中間ブロックの対向面のいずれかの
ブロック表面に、前記隣接する各ブロックの貫通孔と連
通され、前記流体を対向流に変えるとともに旋回力を付
与する溝状通路を形成し、前記中間ブロックと前記排出
側ブロックの対向面におけるいずれかのブロック表面
に、隣接する各ブロックの貫通孔に連通され、前記中間
ブロックの貫通孔を通過した流体の流れを前記ブロック
表面に沿う方向に変えるとともに前記旋回力を減衰させ
る溝状通路が形成されている。

【００２７】導入側ブロックに形成された溝状通路が、
上記の「液相ジェット流同士が衝突するノズル」に相
当し、中間ブロックに形成された貫通孔が、上記の
「衝突後、ジェット流を維持しながら高速螺旋流となる
ノズル」に相当し、上記排出側ブロックに形成された溝
状通路が、上記の「やや速度を落とし、最終調整を行
うノズル」に相当する。この湿式ジェットミルは、上記
３つのノズルへ流体を高圧で圧送し、ノズル内で渦流状
のジェット流を発生させることによって、被処理流体内
に含まれる物質を乳化・分散・破砕する装置である。

【００２８】このような微粒化装置８を用いる微粒化方
法は、微粒化すべき流体の通路に沿って、貫通孔を有
し、実質的に密着して配設された３個のブロックに流体
を導入し、高速で衝突させることにより、微粒化を行う
にあたり、流体導入側ブロックの前記貫通孔から導入し
た前記流体を対向流に変えるとともに、旋回力を付与し
て衝突させ、中間ブロックの前記貫通孔にて前記流体の
旋回状態を維持しつつ、その流れを前記流路方向に変
え、排出側ブロックにて前記中間ブロックを通過した前
記流体の流れを前記流路と直交する方向に変えつつ、旋
回力を減衰させ、前記貫通孔から排出させる構成となっ
ている。

【００２９】具体的には、この微粒化装置８は、図２に
示すように、流体導入側ブロックとしての円盤状のディ
スク１０と、中間ブロックとしての円盤状のディスク１
１と、排出側ブロックとしての円盤状のディスク１２と
を、流路に沿って直列に、且つ、上記記載順に円筒状容
器９内に密着させて配置したものである。なお、図２で
は、説明を容易にするために、ディスク１０及び１１を
離した状態で示し、ディスク１２については、対向面に
形成した溝状通路の形状が分かるように展開している。
また、以下の説明では、各ディスクにおける上流側の面
を表面、下流側の面を裏面と呼ぶこととする。

【００３０】ここでディスク１０は、通常、直径１０ｍ
ｍ、厚さ３ｍｍ程度の耐摩耗性部材によって構成され
る、このディスク１０には、同心円上の２箇所に、導入
貫通孔１０ａ，１０ｂが形成されている。このディスク
１０の裏面１０ｃ中心部には、深さ０．０５ｍｍ程度の
有底筒状凹部からなる渦巻室１０ｄが形成されている。

【００３１】上記導入貫通孔１０ａの出口部１０ａ’と
渦巻室１０ｄ及び導入貫通孔１０ｂの出口部１０ｂ’
は、溝状導入通路１０ｅ，１０ｆによってＳ字状に連通
されている。詳しくは、溝状導入通路１０ｅは、渦巻室
１０ｄの緑部からその接線方向に延びて湾曲するように
形成されており、溝状導入通路１０ｆも同様に、渦巻室
１０ｄの上記縁部に対して直径方向に対向する位置を始
点として湾曲するように形成されている。このような構
成により、渦巻室１０ｄに向かって流れる対向流Ａ’，
Ｂ’が形成される。

【００３２】ディスク１１は、上記ディスク１０と同
径、同じ厚さ、同じ材質からなり、渦巻室１０ｄと対応
する位置に、溝状導入通路１０ｅの断面積より大きい断
面積を有する中間貫通孔１１ａが形成されている。

【００３３】ディスク１２は、上記ディスク１０と同
径、同じ厚さ、同じ材質からなり、同心円上の２箇所
に、排出貫通孔１２ａ，１２ｂが形成されており、その
中心部には、有底筒状凹部からなる貯留室１２ｄが形成
されている。これら排出貫通孔１２ａの入口部１２ａ’
と貯留室１２ｄと排出貫通孔１２ｂの入口部１２ｂ’
は、溝状排出通路１２ｅ，１２ｆによってＳ字状に連通
されている。この溝状排出通路１２ｅ，１２ｆは、渦巻
方向に対して正方向、すなわち逆Ｓ字状（流体下流側か
ら見て）に形成されており、それにより、渦巻流Ｃの流
れをディスク１２の外周に向けて変えるとともに、旋回
力を減衰させるようになっている。

【００３４】ディスク１１に形成されている中間貫通孔
１１ａの径を調節することにより、ディスク１０におけ
る溝状導入通路１０ｅ，１０ｆ内を流れる流速を所望の
値に設定することができる。

【００３５】このような構成を有する「ジーナスＰＹ」
と呼ばれる湿式ジェットミルを用いて、ＣＤ溶液と有効
物質とを処理する場合の動作について説明すると、高圧
ポンプ７によって加圧され、超高速流体とされた流体
（ＣＤ溶液と有効物質との混合液）が、微粒化装置８内
に導入されると、まず、円筒状容器９内で、流れＡと流
れＢとに分岐され、導入貫通孔１０ａと１０ｂとを通過
して、ディスク１１の対向面と衝突した後、溝状導入通
路１０ｅ，１０ｆ内に案内され、ディスク１０の中心に
向けて強制的に方向が変えられ、対向流となる。

【００３６】次に、流体は加速され、渦巻室１０ｄに対
しその接線方向から対向して渦巻室１０ｄ内に進入し、
それにより、流体Ａ’と流体Ｂ’は、渦巻室１０ｄ内で
合流して衝突し、微粒化され、渦巻流Ｃを発生する。

【００３７】次いで、渦巻室１０ｄ内にて微粒化された
流体（ＣＤ溶液と有効物質との混合液）は、渦巻状態を
維持したまま、中間貫通孔１１ａを通過して、ディスク
１２へ送り出される。このとき、貫通孔１１ａの断面積
は、溝状導入通路１０ｅ，１０ｆのそれよりも大きく形
成されているため、衝突エネルギーが貫通孔１１ａで解
放され、ディスク１０における流体衝突部分、すなわち
渦巻室１０ｄで発生する摩耗は低減される。

【００３８】渦巻状態で送り出された流体は、さらにデ
ィスク１２の貯留室１２ｄに衝突して、再度微粒化が行
われる。そして、溝状排出通路１２ｅ及び１２ｆに分割
され、その流れが流路と直交する方向に変えられるとと
もに、渦巻状態が減衰され、排出貫通孔１２ａ，１２ｂ
がら排出される。

【００３９】以上のようにして、本発明の方法により、
クロレラの細胞破砕およびＣＤによるクロレラ細胞中有
効物質の包接とを湿式ジェットミルで処理することによ
り、クロレラの細胞破砕がほぼ完全に行われ、また有効
物質はＣＤに効率良く包接され、目的とするクロレラの
細胞破砕物および有効物質がＣＤに包接されて安定化さ
れた溶液を製造することができる。

【００４０】特に、上記した「ジーナスＰＹ」と呼ばれ
る湿式ジェットミルを用いてクロレラの細胞破砕を行っ
た場合、クロレラの細胞に対する湿式ジェットミルの微
粒化効果が非常に高いので、従来のメディア型ミルを用
いた場合と比較して短時間できわめて効率良くクロレラ
細胞の破砕を可能とすることができる。

【００４１】同じく上記の湿式ジェットミル 「ジーナ
スＰＹ」を用いてクロレラ細胞或いはクロレラ細胞中の
有効物質，ＣＤ及び溶媒の混在する液体を処理した場
合、クロレラ細胞中の有効物質とＣＤとの接触確率が高
められ、ＣＤと有効物質との包接液の形成がより容易と
なり、極めて安定した溶液を製造することができる。

【００４２】この「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェ
ットミルを使用した場合、従来のメディア型ミルによる
クロレラ細胞の破砕を行った場合に比べて要する時間と
破砕の効率が格段に良くなり、また攪拌機等の回転型乳
化装置を用いた場合に比べて、安定性に格段の差を有す
る有効物質の包接溶液を製造することができる。

【００４３】このようなクロレラ細胞の破砕物を提供す
るのが請求項５記載の本発明であり、クロレラ細胞中の
有効物質のＣＤ包接溶液を提供するのが、請求項４記載
の本発明である。

【００４４】請求項２記載の本発明（以下、本発明の方
法と称することがある。）において対象となる有効物質
とは、クロレラ細胞中のクロレラエキスに含まれるクロ
ロフィル等あらゆる物質を示すものである。更には必要
に応じ別途添加された物質も含まれ特別な制限は無いも
のとする。具体的には例えば、タンパク質，鉄分，脂
質，カルシウム，ビタミンＡ，ビタミンＢ_１，ビタミン
Ｂ_２，ビタミンＢ_６，ビタミンＢ_１２，ビタミンＣ，ビ
タミンＥ等が上げられる。

【００４５】従来商品の形態においては、破砕後に残留
する細胞壁の沈殿生成が好ましくないため、必要に応じ
遠心沈降式或いはフィルターを通す事により残留細胞壁
の除去を行っていたが、「ジーナスＰＹ」でクロレラ細
胞の破砕を行うと、同時に残留細胞壁の微粒化も可能と
なり分級操作無しでも沈降物の発生しないクロレラ破砕
液の製造が可能となる。その場合の圧力条件としては好
ましくは１０ＭＰａ以上にて、より好ましくは５０ＭＰ
ａ以上にて、更に好ましくは１００ＭＰａ以上である。

【００４６】このようにして得られるＣＤ包接溶液は、
上記に示したような有効物質を安定的に保持したもので
あるため、これを食品、化粧品、医薬品、化学品等の中
に配合することにより、上記有効物質の配合効果をより
優れたものとすることができる。

【００４７】更に、クロレラ細胞破砕の際に存在する雑
菌の細胞破砕も同時に進行するので湿式ジェットミルで
処理を行ったものの方がクロレラ細胞液の腐敗臭発生ま
での時間について格段の差を有するクロレラ破砕溶液或
いはクロレラ有効物質のＣＤ包接溶液を製造することが
可能となる。

【００４８】なお、本発明の方法で用いるＣＤとして
は、α−，β−，γ−ＣＤ、これらの糖修飾体、及びこ
れらの化学修飾体よりなる群から選ばれた少なくとも１
種のものを挙げることができる。

【００４９】グルコース６分子、７分子、８分子からな
るＣＤを、それぞれα−ＣＤ、β−ＣＤ、γ−ＣＤと称
するが、本発明の方法では、これらα−，β−，γ−Ｃ
Ｄの他に、これらのＣＤの一つ以上の水酸基を工一テル
結合を介して少なくとも一つ以上の官能基で置換した糖
修飾体と化学修飾体よりなる群から選ばれた少なくとも
１種のものの中から、それらの１種を単独で若しくは２
種類以上を組み合わせて用いることができる。

【００５０】ここで糖修飾体としては、グルコシル基、
マルトシル基、マルトオリゴ糖残基などの糖残基で置換
されたものがある。また、化学修飾体としては、メチル
基などのアルキル基で置換されたもの、ヒドロキシエチ
ル基、ヒドロキシプロピル基などのヒドロキシアルキル
基で置換されたものを挙げることができる。これらの糖
修飾体や化学修飾体は、非修飾のＣＤと比較して、水に
対する溶解性が非常に高いので、本発明の方法に好まし
く用いられる。

【００５１】ＣＤは、グルコースがα−１，４結合で環
状構造を形成したものであって、この環状構造の中空部
分（空洞）に、適当な大きさの有機分子を包接し、包接
複合体を形成することができる。すなわちＣＤ分子全体
は親水性を示すが、分子の空洞の内傍は疎水的な性質を
有しており、様々な物質を空洞内部に取込み、包接複合
体を形成しうる包接作用を有している。

【００５２】本発明の方法はこのＣＤの包接作用を利用
し、ＣＤの空洞内部に有効物質を取込み、ＣＤと有効物
質との包接複合体を作るにあたり、湿式ジェットミルを
用いて処理することにより、安定性に優れた溶解物を短
時間に効率良く製造しようとするものである。

【００５３】本発明の方法では、上記したようなＣＤと
有効物質とを湿式ジェットミルで処理する。湿式ジェッ
トミルで処理するにあたり、まずＣＤを圧送流体に予め
溶解しておく。圧送流体は水であり、ＣＤの濃度は特に
規定されないが、水に対して、０．１〜３０重量％が好
ましい。

【００５４】次に、このようにして得られたＣＤの溶液
に、有効物質を添加して、湿式ジェットミルにより処理
する。

【００５５】ここで有効物質に対するＣＤの使用割合
は、通常、０．００１〜１０００倍、好ましくは０．０
１〜１０倍である。

【００５６】

【実施例】次に実施例をあげて本発明をより具体的に説
明するが、本発明はもとより下記実施例によって制御を
受けるものではない。なお、下記において「部」および
「％」とあるのは、特記しない限り「重量部」および
「重量％」を意味する。なお、比較例として示したビー
ズミルには、東洋精機製「ＰＡＩＮＴ ＳＨＡＫＥ
Ｒ」、高速攪拌型乳化機としては特殊機化工業製「ＴＫ
オートホモミクサー」を使用した。また、得られたクロ
レラ破砕物の粒径測定とその評価方法は下記とした。粒
径測定法は、島津製作所製「レーザー式粒度分布測定装
置 ＳＡＬＤ−２０００Ａ」を用い、５０％径（メジア
ン径），１０％および９０％径，並びにヒストグラム
（粒度分布ピーク数）により評価を行った。本発明にお
ける湿式ジェットミルとしては、最も有効であるとされ
るジーナス製「ジーナスＰＹ ＰＲ０２−１５」を使用
した。更に、ハイロックス製「マイクロハイスコープシ
ステムＫＨ−２２００ＭＤ_３」を用いて２５０倍の顕微
鏡写真を撮影し、視覚的に破砕状態を評価した。

【００５７】［クロレラ細胞破砕実験］ （２）予備操作：秤量しておいたの純水にクロレラ粉体
を所定量秤取り混合、攪拌し、クロレラ懸濁液を作成す
る。 （３）実験操作 （２）において作成したクロレラ懸濁液を、ジーナス
製「ジーナスＰＹＰＲ０２−１５」にて、１０ＭＰａ，
５０ＭＰａ，１００ＭＰａ，１５０ＭＰａにて１ｐａｓ
ｓ処理を行った。（湿式ジェットミルによる細胞破砕
例） （２）において作成したクロレラ懸濁液を、東洋精機
製「ＰＡＩＮＴ ＳＨＡＫＥＲ」にて、直径３ｍｍのガ
ラスビーズをクロレラ懸濁液に対し重量対比で３倍量を
用い、５分，１０分，２０分，３０分間処理を行った。
（ビーズミルによる細胞破砕例）

【表１】 図３に予備操作時の顕微鏡写真を示す。図４〜７に湿式
ジェットミルにより処理した破砕状態の顕微鏡写真を示
す。図８〜１１にビーズミルにより処理した破砕状態の
顕微鏡写真を示す。

【００５８】［サイクロデキストリンによる包接実験］ （１）クロレラ細胞破砕物溶液（クロレラ１５％）にＫ
−１００（塩水港精糖製α−ＣＤ：７５％，β−ＣＤ：
１５％，γ−ＣＤ：１０％）を５％加え溶解し、この溶
液をジーナス製 「ジーナスＰＹ ＰＲ０２−１５」を
用い１０ＭＰａ，５０ＭＰａ，１００ＭＰａ，１５０Ｍ
ＰａにてＣＤ包接処理を行った。 （２）クロレラ細胞破砕物溶液（クロレラ１５％）にＫ
−１００（塩水港精糖製α−ＣＤ：７５％，β−ＣＤ：
１５％，γ−ＣＤ：１０％）を５％加え溶解し特殊機化
工業製「ＴＫオートホモミクサー」を１０，０００ｒｐ
ｍにて１０分，２０分，３０分にてＣＤ包接処理を行っ
た。なお、評価方法はスプレードライヤーによる粉末化
した際の状態と包接溶液の臭いの変化または放置期間に
よる状態変化により判断した。

【表２】

【００５９】

【発明の効果】以上説明したように本発明によれば、ク
ロレラの細胞破砕は湿式ジェットミルを用いることによ
り非常に短時間で且つ破砕確率が高く、今までの方法で
は為し得なかった非常に効率の良い処理を行うことがで
きる。

【００６０】また、本発明によりクロレラ細胞破砕物を
容易に得ることが可能となる。更にクロレラ細胞破砕を
行った後、クロレラ細胞破砕物の利用目的に応じ必要で
ある残留細胞壁除去の操作が、湿式ジェットミルの処理
条件により残留の細胞壁組織自体も微粒化することが可
能となり除去操作を行うことなく目的とする状態のクロ
レラ細胞破砕物を得ることができる。

【００６１】本発明によりクロレラ細胞破砕により得ら
れるクロレラ細胞中の有効物質とＣＤが混在する液体を
湿式ジェットミルを用いて処理することにより、有効物
質とＣＤとの接触確率が高められ、ＣＤと有効物質とが
包接複合体を形成し易くなり、短時間に効率良くクロレ
ラ細胞中有効物質のＣＤ包接を行うことができる。

【００６２】また、本発明によりクロレラ細胞中有効物
質の包接が、従来の方法に変わり湿式ジェットミルを用
いて行うことによりＣＤによる包接状態が従来の方法で
は期待できなかった包接現象を起こし、非常に安定性の
高いクロレラ破砕物物を得ることができる。

【００６３】また、本発明の方法により得られた包接物
は、より安定性の高いものであり、これまで報告されて
いる、あらゆるＣＤの特性を今までより遙かに効率的に
発現することができる。従って、本発明は、食品分野、
化粧品分野、医薬品分野、化学品分野等、広汎な分野の
技術革新に寄与するものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】「ジーナスＰＹ」と呼ばれる湿式ジェットミル
の微粒化装置及びその周辺設備を含む微粒化システムの
全体概略構成図である。

【図２】図１の微粒化装置部分の構成を示す説明図であ
る。

【図３】クロレラ粉末を予備操作にて懸濁させた懸濁液
の図面代用の顕微鏡写真である。

【図４】クロレラ細胞を湿式ジェットミルにより１０Ｍ
Ｐａ−１ｐａｓｓにて処理したものの図面代用の顕微鏡
写真である。

【図５】クロレラ細胞を湿式ジェットミルにより５０Ｍ
Ｐａ−１ｐａｓｓにて処理したものの図面代用の顕微鏡
写真である。

【図６】クロレラ細胞を湿式ジェットミルにより１００
ＭＰａ−１ｐａｓｓにて処理したものの図面代用の顕微
鏡写真である。

【図７】クロレラ細胞を湿式ジェットミルにより１５０
ＭＰａ−１ｐａｓｓにて処理したものの図面代用の顕微
鏡写真である。

【図８】クロレラ細胞をビーズミルにより５分間処理し
たものの図面代用の顕微鏡写真である。

【図９】クロレラ細胞をビーズミルにより１０分間処理
したものの図面代用の顕微鏡写真である。

【図１０】クロレラ細胞をビーズミルにより２０分間処
理したものの図面代用の顕微鏡写真である。

【図１１】クロレラ細胞をビーズミルにより３０分間処
理したものの図面代用の顕微鏡写真である。

【符号の説明】

１微粒化システム ２，３容器 ４．５弁 ６配管 ７高圧ポンプ ８ 微粒化装置 ９ 円筒状容器 １０ 第１のディスク １０ａ，１０ｂ導入貫通孔 １０ｃ 密着対向面 １０ｄ 渦巻室 １０ｅ，１０ｆ 溝状導入通路 １１ 第２のディスク １１ａ 中間貫通孔 １２ 第３のディスク １２ａ，１２ｂ排出貫通孔 １２ｅ，１２ｆ溝状排出通路 １２ｄ 貯留室

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】クロレラを含む懸濁液を湿式ジェットミル
   で処理しクロレラ細胞を破砕処理することを特徴とする
   クロレラ細胞破砕方法
2. 【請求項２】サイクロデキストリンとクロレラもしくは
   その細胞破砕物とを湿式ジェットミルで処理しサイクロ
   デキストリンによりクロレラ細胞破砕物を包接をするこ
   とを特徴とするクロレラ破砕物の安定化方法。
3. 【請求項３】サイクロデキストリンがα−，β−，γ−
   サイクロデキストリン、これらの糖修飾体、及びこれら
   の化学修飾体よりなる群から選ばれた少なくとも１種で
   ある請求項２記載の方法。
4. 【請求項４】湿式ジェットミルとして、耐圧容器の中に
   密封状態で設置されたノズルへ流体を高圧で圧送し、ノ
   ズル内で渦流状のジェット流を発生させ、物質を乳化・
   分散・破砕する装置を用いる請求項１〜３のいずれかに
   記載の方法
5. 【請求項５】請求項１または４記載の方法によって得ら
   れるクロレラ破砕物
6. 【請求項６】請求項２〜４のいずれかに記載の方法によ
   り得られる安定化されたクロレラ破砕物。