JPH11352129A - 検出装置及び検出方法 - Google Patents
検出装置及び検出方法Info
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- JPH11352129A JPH11352129A JP15616998A JP15616998A JPH11352129A JP H11352129 A JPH11352129 A JP H11352129A JP 15616998 A JP15616998 A JP 15616998A JP 15616998 A JP15616998 A JP 15616998A JP H11352129 A JPH11352129 A JP H11352129A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 標識操作によって、貴重な抗体を無駄にする
ことがなく、検出物質を、安価でしかも高感度に、免疫
学的に検出する検出装置及び検出方法を提供することを
目的とする。 【解決手段】 試料液体が添加される展開層１のうち、
試料液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫
学的にエピトープを有するキャッチャー２を固定し、二
特異性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可
能に構成されるマーカー３とを、展開層に可溶化状態で
移動可能となるように乾燥状態で保持させてなり、二特
異性抗体は、試料液体中の検出物質とマーカーとに特異
性を有する第１の二特異性抗体４と、試料液体中の検出
物質とキャッチャーとに特異性を有する第２の二特異性
抗体５とを含む。
ことがなく、検出物質を、安価でしかも高感度に、免疫
学的に検出する検出装置及び検出方法を提供することを
目的とする。 【解決手段】 試料液体が添加される展開層１のうち、
試料液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫
学的にエピトープを有するキャッチャー２を固定し、二
特異性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可
能に構成されるマーカー３とを、展開層に可溶化状態で
移動可能となるように乾燥状態で保持させてなり、二特
異性抗体は、試料液体中の検出物質とマーカーとに特異
性を有する第１の二特異性抗体４と、試料液体中の検出
物質とキャッチャーとに特異性を有する第２の二特異性
抗体５とを含む。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、試料液体（尿や血
液など）内における検出物質（生体成分）の存否を検出
する検出装置及び検出方法に関するものである。
液など）内における検出物質（生体成分）の存否を検出
する検出装置及び検出方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】生体成分からなる検出物質の検出手法と
して、抗原又は抗体を用いた免疫学的検出方法がある。
この方法は、高感度であり、特異性、簡便性に優れ、広
く臨床検査領域で使用されている。そして、最近では、
特殊な技術や訓練を経なくとも、この方法による検査を
簡便に達成できる技術が種々提案されている。
して、抗原又は抗体を用いた免疫学的検出方法がある。
この方法は、高感度であり、特異性、簡便性に優れ、広
く臨床検査領域で使用されている。そして、最近では、
特殊な技術や訓練を経なくとも、この方法による検査を
簡便に達成できる技術が種々提案されている。
【０００３】このうち、特に操作性、判定性が優れ、短
時間で結果を得られる免疫クロマトグラフィー法と呼ば
れる一群の測定方法が提案され（特開平９−１７８７４
８号公報）、既に一般大衆向けに商品化されている。
時間で結果を得られる免疫クロマトグラフィー法と呼ば
れる一群の測定方法が提案され（特開平９−１７８７４
８号公報）、既に一般大衆向けに商品化されている。
【０００４】この免疫クロマトグラフィー法は、予めニ
トロセルロース等の展開層に、着色ラテックス、金コロ
イド等を標識した試薬（着色標識体）と、展開層上の検
出区域に固定化した無標識の試薬とを用い、試料液体中
の検出物質の存在下で、免疫反応複合物を生成させ、こ
の反応により、捕捉された着色標識体を目視確認するも
のである。この方法によれば、単に試料液体を添加位置
に添加し、一定時間後に、検出区域における着色標識体
の着色量を目視確認しさえすればよい。
トロセルロース等の展開層に、着色ラテックス、金コロ
イド等を標識した試薬（着色標識体）と、展開層上の検
出区域に固定化した無標識の試薬とを用い、試料液体中
の検出物質の存在下で、免疫反応複合物を生成させ、こ
の反応により、捕捉された着色標識体を目視確認するも
のである。この方法によれば、単に試料液体を添加位置
に添加し、一定時間後に、検出区域における着色標識体
の着色量を目視確認しさえすればよい。
【０００５】しかしながら、この方法では、検出物質と
親和性のある、いわゆる抗原又は抗体に、標識物とし
て、酵素、蛍光物質、発光物質、着色ラテックス、金コ
ロイド等を、その目的に応じて、物理的又は化学的に結
合させた標識抗原又は標識抗体を用意する必要がある。
しかしながら、この標識化こそ重大な問題点を有してい
るのである。例えば、抗原や抗体などの蛋白質に、酵素
を結合させるために、過ヨウ素酸酸化法（Enzyme Immun
oassay, Igaku-Shoin, Tokyo, 1982）等の化学的処理を
施した場合、抗原又は抗体、あるいは酵素の不可逆的失
活が生じたり、活性の減少あるいは非特異的反応を引き
起こす重合化が生じたりする。このような事情により、
実際に使用できる標識体の収率は、非常に低いものにな
らざるを得ない。
親和性のある、いわゆる抗原又は抗体に、標識物とし
て、酵素、蛍光物質、発光物質、着色ラテックス、金コ
ロイド等を、その目的に応じて、物理的又は化学的に結
合させた標識抗原又は標識抗体を用意する必要がある。
しかしながら、この標識化こそ重大な問題点を有してい
るのである。例えば、抗原や抗体などの蛋白質に、酵素
を結合させるために、過ヨウ素酸酸化法（Enzyme Immun
oassay, Igaku-Shoin, Tokyo, 1982）等の化学的処理を
施した場合、抗原又は抗体、あるいは酵素の不可逆的失
活が生じたり、活性の減少あるいは非特異的反応を引き
起こす重合化が生じたりする。このような事情により、
実際に使用できる標識体の収率は、非常に低いものにな
らざるを得ない。
【０００６】同様に、物理的（疎水結合等）な方法で、
着色ラテックスに抗原あるいは抗体などの蛋白質を結合
させる処理を行う場合も、着色ラテックスへの結合がラ
ンダムに起こり、抗原あるいは抗体の活性部位が潰れて
しまい、十分な反応性を得るために、必要量以上の抗原
又は抗体を使用する必要がある。また、吸着が１００％
進行しないため、無駄になる抗原又は抗体の量も馬鹿に
ならない。
着色ラテックスに抗原あるいは抗体などの蛋白質を結合
させる処理を行う場合も、着色ラテックスへの結合がラ
ンダムに起こり、抗原あるいは抗体の活性部位が潰れて
しまい、十分な反応性を得るために、必要量以上の抗原
又は抗体を使用する必要がある。また、吸着が１００％
進行しないため、無駄になる抗原又は抗体の量も馬鹿に
ならない。
【０００７】このような欠点を解決する手段として、二
価性試薬を架橋剤として使用する方法（Enzyme Immunoa
ssay, Igaku-Shoin, Tokyo, 1982）が開発されたが、操
作が煩雑で、これを行うには、高度の技術が必要であ
る。さらに、反応自体が非常にセンシティブであるた
め、条件のわずかな変化が、標識体の性質に大きく影響
し、標識体の調製法として、再現性が悪いといわれてい
る。
価性試薬を架橋剤として使用する方法（Enzyme Immunoa
ssay, Igaku-Shoin, Tokyo, 1982）が開発されたが、操
作が煩雑で、これを行うには、高度の技術が必要であ
る。さらに、反応自体が非常にセンシティブであるた
め、条件のわずかな変化が、標識体の性質に大きく影響
し、標識体の調製法として、再現性が悪いといわれてい
る。
【０００８】また、このような特異性の高い標識方法を
用いたとしても、標識物あるいは抗原又は抗体等の活性
を損なうことは免れないし、標識操作自体が化学反応で
あるため、１００％標識化されることはない。
用いたとしても、標識物あるいは抗原又は抗体等の活性
を損なうことは免れないし、標識操作自体が化学反応で
あるため、１００％標識化されることはない。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明者は、
標識操作による抗体のロス、及び、活性低下を最小限に
し、かつ、測定感度も従来技術と同等以上になる手法を
鋭意研究し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明
は、以上の事情に鑑み、標識操作によって、貴重な抗体
を無駄にすることがなく、検出物質を、安価でしかも高
感度に、免疫学的に検出する検出装置及び検出方法を提
供することを目的とする。
標識操作による抗体のロス、及び、活性低下を最小限に
し、かつ、測定感度も従来技術と同等以上になる手法を
鋭意研究し、本発明を完成するに至った。即ち、本発明
は、以上の事情に鑑み、標識操作によって、貴重な抗体
を無駄にすることがなく、検出物質を、安価でしかも高
感度に、免疫学的に検出する検出装置及び検出方法を提
供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明の検出装置では、
試料液体が添加される展開層を備え、展開層のうち、試
料液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫学
的にエピトープを有するキャッチャーが固定され、二特
異性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可能
に構成されるマーカーとを、展開層に可溶化状態で移動
可能となるように乾燥状態で保持させ、二特異性抗体
は、試料液体中の検出物質とマーカーとに特異性を有す
る第１の二特異性抗体と、試料液体中の検出物質とキャ
ッチャーとに特異性を有する第２の二特異性抗体とを含
む。
試料液体が添加される展開層を備え、展開層のうち、試
料液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫学
的にエピトープを有するキャッチャーが固定され、二特
異性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可能
に構成されるマーカーとを、展開層に可溶化状態で移動
可能となるように乾燥状態で保持させ、二特異性抗体
は、試料液体中の検出物質とマーカーとに特異性を有す
る第１の二特異性抗体と、試料液体中の検出物質とキャ
ッチャーとに特異性を有する第２の二特異性抗体とを含
む。
【００１１】この構成により、標識操作によって、貴重
な抗体を無駄にすることがなく、検出物質を、安価でし
かも高感度に、免疫学的に検出する検出装置を実現でき
る。
な抗体を無駄にすることがなく、検出物質を、安価でし
かも高感度に、免疫学的に検出する検出装置を実現でき
る。
【００１２】
【発明の実施の形態】請求項１記載の検出装置では、試
料液体が添加される展開層を備え、展開層のうち、試料
液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫学的
にエピトープを有するキャッチャーが固定され、二特異
性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可能に
構成されるマーカーとを、展開層に可溶化状態で移動可
能となるように乾燥状態で保持させ、二特異性抗体は、
試料液体中の検出物質とマーカーとに特異性を有する第
１の二特異性抗体と、試料液体中の検出物質とキャッチ
ャーとに特異性を有する第２の二特異性抗体とを含む。
料液体が添加される展開層を備え、展開層のうち、試料
液体が添加される位置から離れた検出区域に、免疫学的
にエピトープを有するキャッチャーが固定され、二特異
性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出可能に
構成されるマーカーとを、展開層に可溶化状態で移動可
能となるように乾燥状態で保持させ、二特異性抗体は、
試料液体中の検出物質とマーカーとに特異性を有する第
１の二特異性抗体と、試料液体中の検出物質とキャッチ
ャーとに特異性を有する第２の二特異性抗体とを含む。
【００１３】この構成により、標識抗体を使用せず、検
出を行える。したがって、標識操作による抗体のロスが
ないし、特殊な器材を必要としないため、コストダウン
しやすい。また、抗体の活性が低下するおそれもない。
また、二特異性抗体を使用しているので、抗原抗体反応
により、反応性や感度を向上できる。
出を行える。したがって、標識操作による抗体のロスが
ないし、特殊な器材を必要としないため、コストダウン
しやすい。また、抗体の活性が低下するおそれもない。
また、二特異性抗体を使用しているので、抗原抗体反応
により、反応性や感度を向上できる。
【００１４】請求項２記載の検出方法では、上記検出装
置の展開層に、試料液体を添加し、二特異性抗体とマー
カーとを可溶化（微粒子が分散した状態を含む）させ、
展開層中を移動させるとともに、第１の二特異性抗体と
第２の二特異性抗体とを、検出物質を挟むように結合さ
せ、第１の二特異性抗体をマーカーに結合させ、さら
に、第２の二特異性抗体をキャッチャーに結合させるこ
とにより、検出区域において、試料液体中の検出物質の
量に対応した検出結果を生成する。
置の展開層に、試料液体を添加し、二特異性抗体とマー
カーとを可溶化（微粒子が分散した状態を含む）させ、
展開層中を移動させるとともに、第１の二特異性抗体と
第２の二特異性抗体とを、検出物質を挟むように結合さ
せ、第１の二特異性抗体をマーカーに結合させ、さら
に、第２の二特異性抗体をキャッチャーに結合させるこ
とにより、検出区域において、試料液体中の検出物質の
量に対応した検出結果を生成する。
【００１５】この構成により、試料液体を添加し、一定
時間待ち、検出区域における検出結果を参照するだけ
で、検査が終了する。
時間待ち、検出区域における検出結果を参照するだけ
で、検査が終了する。
【００１６】次に図面を参照しながら、本発明の実施の
形態について説明する。図１は、本発明の一実施の形態
における検出装置の原理模式図である。
形態について説明する。図１は、本発明の一実施の形態
における検出装置の原理模式図である。
【００１７】図１において、１は、乾燥状態で保管され
る展開層である。展開層１は、反応支持体としての機能
を有し、多孔質材または単孔質材で構成する。図１にお
いて、左端部が試料液体を添加する添加位置であり、添
加位置に試料液体が添加されると、試料液体は、毛細管
現象により、図１の左から右へ移動する。
る展開層である。展開層１は、反応支持体としての機能
を有し、多孔質材または単孔質材で構成する。図１にお
いて、左端部が試料液体を添加する添加位置であり、添
加位置に試料液体が添加されると、試料液体は、毛細管
現象により、図１の左から右へ移動する。
【００１８】また、展開層１には、次の成分が乾燥状態
で保持されている。まず、２は、添加位置の反対側の端
部（検出区域）に固定されるキャッチャーである。キャ
ッチャー２は、免疫学的にエピトープ（抗原決定基）を
有し、後述するように、検出物質に二特異性抗体を介し
て結合するマーカーを、試料液体の流動に抗して、検出
区域に止める役割を果たす。
で保持されている。まず、２は、添加位置の反対側の端
部（検出区域）に固定されるキャッチャーである。キャ
ッチャー２は、免疫学的にエピトープ（抗原決定基）を
有し、後述するように、検出物質に二特異性抗体を介し
て結合するマーカーを、試料液体の流動に抗して、検出
区域に止める役割を果たす。
【００１９】３は、添加位置と検出区域の中間に配置さ
れるマーカーである。マーカー３は、免疫学的にエピト
ープを有し、かつ、電気的、化学的、視覚的など何らか
の手段により検出可能に構成される。ここで、マーカー
３としては、不溶性着色粒子だけでなく、可溶化したも
のも使用できる。
れるマーカーである。マーカー３は、免疫学的にエピト
ープを有し、かつ、電気的、化学的、視覚的など何らか
の手段により検出可能に構成される。ここで、マーカー
３としては、不溶性着色粒子だけでなく、可溶化したも
のも使用できる。
【００２０】さらに、このマーカー３としては、それ自
体でエピトープを有するマーカーの他に、本来エピトー
プを有しないマーカーと、エピトープを有する物質と
を、化学的または物理的な修飾操作などで、一体化させ
たものであってもよい。なお、本例では、マーカー３と
して、目視可能な有色マーカーを用いている。
体でエピトープを有するマーカーの他に、本来エピトー
プを有しないマーカーと、エピトープを有する物質と
を、化学的または物理的な修飾操作などで、一体化させ
たものであってもよい。なお、本例では、マーカー３と
して、目視可能な有色マーカーを用いている。
【００２１】４、５は、添加位置付近に保持される二特
異性抗体である。このうち、第１の二特異性抗体４は、
試料液体中の検出物質６とマーカー３とに特異性を有す
る。また、第２の二特異性抗体５は、試料液体中の検出
物質６とキャッチャー２とに特異性を有する。
異性抗体である。このうち、第１の二特異性抗体４は、
試料液体中の検出物質６とマーカー３とに特異性を有す
る。また、第２の二特異性抗体５は、試料液体中の検出
物質６とキャッチャー２とに特異性を有する。
【００２２】ここで、二特異性抗体とは、２種類の異な
るエピトープに対して、同時に結合できる能力を備えた
抗体のことである。この場合の抗体とは、均一な蛋白質
分子としての抗体のことであり、抗体の混合物であるポ
リクローナル抗体を指すのではない。
るエピトープに対して、同時に結合できる能力を備えた
抗体のことである。この場合の抗体とは、均一な蛋白質
分子としての抗体のことであり、抗体の混合物であるポ
リクローナル抗体を指すのではない。
【００２３】さて、この二特異性抗体は、通常の動物種
からは得られない人為的産物であり、この二特異性抗体
を合成するには、次の３つの方法が採用されている。そ
の第１は、細胞工学的方法（Behrsing,O ら; J.Immuno
l.Methods, 156(1), 69-77, 1992、Takahashi,M.ら；Cl
in. Chem.34(9), 1693-96, 1988、Suresh, M.R. ら；Me
thods Enzymol. 121(Immunochem. Tech. Pt. D. 210-2
8, 1986)）である。即ち、モノクローナル抗体ａを生産
するハイブリドーマＡと、モノクローナル抗体ｂを生産
するハイブリドーマＢを融合させ、新しい融合細胞（ク
アドローマ）を作成し、モノクローナル抗体ａとモノク
ローナル抗体ｂのハイブリッド分子を生産する。
からは得られない人為的産物であり、この二特異性抗体
を合成するには、次の３つの方法が採用されている。そ
の第１は、細胞工学的方法（Behrsing,O ら; J.Immuno
l.Methods, 156(1), 69-77, 1992、Takahashi,M.ら；Cl
in. Chem.34(9), 1693-96, 1988、Suresh, M.R. ら；Me
thods Enzymol. 121(Immunochem. Tech. Pt. D. 210-2
8, 1986)）である。即ち、モノクローナル抗体ａを生産
するハイブリドーマＡと、モノクローナル抗体ｂを生産
するハイブリドーマＢを融合させ、新しい融合細胞（ク
アドローマ）を作成し、モノクローナル抗体ａとモノク
ローナル抗体ｂのハイブリッド分子を生産する。
【００２４】第２は、蛋白質化学的方法（Brebbab, M.
ら; Science, 229, 81-3, 1985、Parham, P.; Hum. Imm
unol., 12, 213-21, 1985、Glennie, M. J. ら；J. Imm
unol. 139(7), 2367-75, 1987）である。即ち、モノク
ローナル抗体ａとモノクローナル抗体ｂのジスルフィド
結合を還元して、半分子を作り、抗体ａと抗体ｂ由来の
半分子を再会合させ、両抗体ａ、ｂのハイブリッド分子
を作成する。
ら; Science, 229, 81-3, 1985、Parham, P.; Hum. Imm
unol., 12, 213-21, 1985、Glennie, M. J. ら；J. Imm
unol. 139(7), 2367-75, 1987）である。即ち、モノク
ローナル抗体ａとモノクローナル抗体ｂのジスルフィド
結合を還元して、半分子を作り、抗体ａと抗体ｂ由来の
半分子を再会合させ、両抗体ａ、ｂのハイブリッド分子
を作成する。
【００２５】第３は、遺伝子工学的方法(Songsivilai,
S. ら；Biochem. Biophys. Res. Commun., 164(1), 271
-6, 1989)である。即ち、モノクローナル抗体ａとモノ
クローナル抗体ｂの抗原結合部位を１本のポリペプチド
分子として発現するように作成した遺伝子を基に生産す
る。このうち、第１、第２の方法によれば、目的の二特
異性抗体を比較的容易に生産できる。
S. ら；Biochem. Biophys. Res. Commun., 164(1), 271
-6, 1989)である。即ち、モノクローナル抗体ａとモノ
クローナル抗体ｂの抗原結合部位を１本のポリペプチド
分子として発現するように作成した遺伝子を基に生産す
る。このうち、第１、第２の方法によれば、目的の二特
異性抗体を比較的容易に生産できる。
【００２６】次に、図１から図４を参照しながら、本形
態の検出装置による検出過程について、説明する。な
お、図面において、各物質は、展開層１の表面上に描画
されているが、これは、図面表現の便宜のためであっ
て、実際には、各物質は、展開層１の内部に存在する。
態の検出装置による検出過程について、説明する。な
お、図面において、各物質は、展開層１の表面上に描画
されているが、これは、図面表現の便宜のためであっ
て、実際には、各物質は、展開層１の内部に存在する。
【００２７】さてまず、図１の左端部にある、添加位置
に試料液体を添加する。この添加により、乾燥固化した
二特異性抗体４、５が溶解し、展開層１内を移動可能と
なる。
に試料液体を添加する。この添加により、乾燥固化した
二特異性抗体４、５が溶解し、展開層１内を移動可能と
なる。
【００２８】ここで、図２に示すように、試料液体に検
出物質６が存在する場合には、検出物質６を、第１、第
２の二特異性抗体４、５で挟む状態で、検出物質６が第
１、第２の二特異性抗体４、５に結合する。
出物質６が存在する場合には、検出物質６を、第１、第
２の二特異性抗体４、５で挟む状態で、検出物質６が第
１、第２の二特異性抗体４、５に結合する。
【００２９】そして、試料液体が展開層１内を、毛細管
現象により、右側へ移動するにつれ、図３に示すよう
に、上述のように挟んだ状態になっている第１の二特異
性抗体４も、展開層１内を右側へ移動し、第１の二特異
性抗体４とマーカー３が抗原抗体反応を起こし、第１の
二特異性抗体４とマーカー３が結合する。
現象により、右側へ移動するにつれ、図３に示すよう
に、上述のように挟んだ状態になっている第１の二特異
性抗体４も、展開層１内を右側へ移動し、第１の二特異
性抗体４とマーカー３が抗原抗体反応を起こし、第１の
二特異性抗体４とマーカー３が結合する。
【００３０】さらに、図４に示すように、この結合した
ものが、検出区域まで至ると、第２の二特異性抗体５が
キャッチャー２に出会い、抗原抗体反応を起こして、第
２の二特異性抗体５がキャッチャー２に結合する。
ものが、検出区域まで至ると、第２の二特異性抗体５が
キャッチャー２に出会い、抗原抗体反応を起こして、第
２の二特異性抗体５がキャッチャー２に結合する。
【００３１】その結果、第２の二特異性抗体５が、検出
物質６、第１の二特異性抗体４を介して結合する、マー
カー３も、検出区域に固定され、試料液体が流動して
も、検出区域に止まることになる。
物質６、第１の二特異性抗体４を介して結合する、マー
カー３も、検出区域に固定され、試料液体が流動して
も、検出区域に止まることになる。
【００３２】なお、検出物質６が存在しなければ、マー
カー３と結合する第１の二特異性抗体４は、キャッチャ
ー２に連結されることはなく、マーカー３は、検出区域
よりも先（右側）へ移動し、検出区域にマーカー３が残
存することはない。
カー３と結合する第１の二特異性抗体４は、キャッチャ
ー２に連結されることはなく、マーカー３は、検出区域
よりも先（右側）へ移動し、検出区域にマーカー３が残
存することはない。
【００３３】したがって、試料液体が滴下されて、図４
の状態になるまでの、一定時間だけ待ち、検出区域を目
視すれば、検出物質６の量に対応しただけのマーカー３
が検出区域に存在することとなるため、容易に、検査結
果を得ることができる。
の状態になるまでの、一定時間だけ待ち、検出区域を目
視すれば、検出物質６の量に対応しただけのマーカー３
が検出区域に存在することとなるため、容易に、検査結
果を得ることができる。
【００３４】即ち、検出区域にマーカー３による着色を
観察できれば陽性、できなければ陰性と判定できる。
観察できれば陽性、できなければ陰性と判定できる。
【００３５】
【発明の効果】本発明は、以上のように構成したので、
検出物質との免疫複合体を形成した後に、標識化反応を
生じさせることができる。また、標識抗体を用いずに検
出を行えるので、貴重な抗体を無駄にしない。さらに、
標識化による立体障害あるいは運動性の減弱化が起こら
ず、抗原抗体反応がスムーズに進行し、検出時間を短縮
し、しかも、高感度化することができる。さらに、免疫
学的方法による標識化を採用しているので、マーカーに
ついても、従来より使用されている酵素、金コロイド、
着色ラテックス等の他に、水溶性染料等を用いることが
でき、従来、失活等の問題で標識化が難しかった物質も
使用できるようになった。
検出物質との免疫複合体を形成した後に、標識化反応を
生じさせることができる。また、標識抗体を用いずに検
出を行えるので、貴重な抗体を無駄にしない。さらに、
標識化による立体障害あるいは運動性の減弱化が起こら
ず、抗原抗体反応がスムーズに進行し、検出時間を短縮
し、しかも、高感度化することができる。さらに、免疫
学的方法による標識化を採用しているので、マーカーに
ついても、従来より使用されている酵素、金コロイド、
着色ラテックス等の他に、水溶性染料等を用いることが
でき、従来、失活等の問題で標識化が難しかった物質も
使用できるようになった。
【図１】本発明の一実施の形態における検出装置の原理
模式図
模式図
【図２】本発明の一実施の形態における検出過程の説明
図
図
【図３】本発明の一実施の形態における検出過程の説明
図
図
【図４】本発明の一実施の形態における検出過程の説明
図
図
１ 展開層 ２ キャッチャー ３ マーカー ４ 第１の二特異性抗体 ５ 第２の二特異性抗体 ６ 検出物質
Claims (2)
- 【請求項１】試料液体が添加される展開層を備え、前記
展開層のうち、試料液体が添加される位置から離れた検
出区域に、免疫学的にエピトープを有するキャッチャー
が固定され、 二特異性抗体と、免疫学的にエピトープを有しかつ検出
可能に構成されるマーカーとを、前記展開層に可溶化状
態で移動可能となるように乾燥状態で保持させ、 前記二特異性抗体は、試料液体中の検出物質と前記マー
カーとに特異性を有する第１の二特異性抗体と、試料液
体中の検出物質と前記キャッチャーとに特異性を有する
第２の二特異性抗体とを含むことを特徴とする検出装
置。 - 【請求項２】請求項１記載の検出装置の展開層に、試料
液体を添加し、前記二特異性抗体と前記マーカーとを可
溶化させ、前記展開層中を移動させるとともに、前記第
１の二特異性抗体と前記第２の二特異性抗体とを、検出
物質を挟むように結合させ、前記第１の二特異性抗体を
前記マーカーに結合させ、さらに、前記第２の二特異性
抗体を前記キャッチャーに結合させることにより、前記
検出区域において、試料液体中の検出物質の量に対応し
た検出結果を生成することを特徴とする検出方法。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15616998A JPH11352129A (ja) | 1998-06-04 | 1998-06-04 | 検出装置及び検出方法 |
| US09/325,214 US6753189B1 (en) | 1998-06-04 | 1999-06-03 | Detection apparatus and method for the same |
| EP99304372A EP0962771B1 (en) | 1998-06-04 | 1999-06-04 | Detection apparatus and method for the same |
| DE69906870T DE69906870T2 (de) | 1998-06-04 | 1999-06-04 | Nachweisvorrichtung und Nachweismethode |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15616998A JPH11352129A (ja) | 1998-06-04 | 1998-06-04 | 検出装置及び検出方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11352129A true JPH11352129A (ja) | 1999-12-24 |
Family
ID=15621867
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15616998A Pending JPH11352129A (ja) | 1998-06-04 | 1998-06-04 | 検出装置及び検出方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11352129A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015502547A (ja) * | 2011-12-19 | 2015-01-22 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多特異性結合体の遊離結合パートナーの検出方法 |
| JP2015507193A (ja) * | 2012-02-01 | 2015-03-05 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多重特異性結合物の結合パートナーを検出するための方法 |
-
1998
- 1998-06-04 JP JP15616998A patent/JPH11352129A/ja active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015502547A (ja) * | 2011-12-19 | 2015-01-22 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多特異性結合体の遊離結合パートナーの検出方法 |
| JP2015507193A (ja) * | 2012-02-01 | 2015-03-05 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多重特異性結合物の結合パートナーを検出するための方法 |
| CN106443016A (zh) * | 2012-02-01 | 2017-02-22 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于检测多特异性结合物的结合搭档的方法 |
| JP2017223710A (ja) * | 2012-02-01 | 2017-12-21 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 多重特異性結合物の結合パートナーを検出するための方法 |
| US9945869B2 (en) | 2012-02-01 | 2018-04-17 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method for the detection of a binding partner of a multispecific binder |
| CN106443016B (zh) * | 2012-02-01 | 2019-08-13 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于检测多特异性结合物的结合搭档的方法 |
| US10761097B2 (en) | 2012-02-01 | 2020-09-01 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method for the detection of a binding partner of a multispecific binder |
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