JPH11246545A - テルフェニル誘導体及び用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】ヒアルロン酸分解が生理的に正常時より亢進し
ている乾皮症，乾せん，あれ肌，乾燥肌等に対し予防・
治療効果を持つヒアルロン酸分解阻害剤及び治療剤、あ
れ肌又は乾燥肌防止剤、並びにしわ防止や張り、柔軟性
の改善等に効果のある化粧料を提供する。 【解決手段】クロカワ抽出物又は化１で示されるテルフ
ェニル誘導体を、含有又は有効成分とすることを特徴と
する化粧料、ヒアルロン酸分解阻害剤、及びあれ肌又は
乾燥肌防止剤、並びにヒアルロン酸異常分解疾患治療
剤。 【化１】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
る）

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、化粧料、ヒアルロ
ン酸分解が生理的に正常時より亢進している乾皮症，乾
せん，あれ肌，乾燥肌等に対し予防・治療効果が期待で
きるヒアルロン酸分解阻害剤及び治療剤、並びにあれ肌
又は乾燥肌防止剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】ヒアルロン酸は、細胞間隙への水分の保
持、組織内にジェリー状のマトリクスを形成することに
基づく細胞の保持、臓器組織の潤滑性と柔軟性の保持、
機械的障害等の外力への抵抗、及び細菌感染の防止等多
くの機能を有している（ＢＩＯＩＮＤＵＳＴＲＹ、８
巻、３４６頁、１９９１年）。

【０００３】さらに、近年ヒアルロン酸はその分子量に
よってさまざまな生理作用を持つことがわかってきた。
例えば、生体内で合成されていると考えられている高分
子ヒアルロン酸（分子量１００万以上）はプロテオグリ
カン遊離抑制作用，ブラジキニン関節疼痛抑制作用，損
傷軟骨修復作用，関節炎抑制作用を持つことから炎症抑
制効果を持ち（ＢＩＯ ＩＮＤＵＳＴＲＹ、１１巻、６
３２頁、１９９１年）、その分解（低分子化）産物であ
る低分子化ヒアルロン酸は、血管新生促進作用（Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ，２２８巻，１３２４頁，１９８５年）、白血
球走化性促進作用（特公平６─８３２３号公報）を持つ
ことから炎症促進作用を持つと考えられている。そして
老化による皮膚のヒアルロン酸の減少は皮膚の水分環境
や柔軟性、張りやしわの形成に大きく関与していると考
えられている（Int J Dermatol(1994),33,119-122)(Int
J Dermatol(1996)35,539-544)。

【０００４】以上のことからヒアルロン酸の低分子化は
肝炎，歯肉炎（炎症、４巻、４３７頁、１９８４年），
関節リウマチ，変形性関節症（結合組織、２５巻、２４
３頁、１９９４年），悪性腫瘍（Ｊ.Cellar Physiolog
y,160巻,275頁,1994 年）の症状悪化に密接に関連する
と考えられ、さらに老化によるヒアルロン酸の減少は皮
膚の張り減少、しわ形成にも関連し、従ってヒアルロン
酸の低分子化を予防・防止するヒアルロン酸の分解阻害
剤及び化粧料が望まれている。

【０００５】実際、結合組織中のヒアルロン酸を低分子
化するヒアルロニダーゼが想定され、その阻害剤が薬理
効果があることが期待された（炎症、４巻、４３７頁、
１９８４年）。しかし、ヒト結合組織を形成する線維芽
細胞からヒアルロニダーゼが単離された報告はいまだな
く、そのためヒト線維芽細胞の酵素が牛精巣由来のヒア
ルロニダーゼと同様な性質を持っていると仮定し、牛精
巣由来のヒアルロニダーゼを用いた種々の阻害剤が報告
されている（特公平６─２９２７１号公報、特公平６─
４５８４号公報、特開平５─１７８８７６号公報、特開
平６─８０５５３号公報、特開平６─８０５７６号公
報、特開平６─９４１５号公報、特開平６─９４１６号
公報、特開平３─６８５１５号公報）のが現状である。

【０００６】しかし、近年、関節に存在するヒト滑膜細
胞（結合組織、２５巻、２４３頁、１９９４年），ヒト
子宮けい管細胞（FEBS Letters,347巻, ９５頁、 1994
年），ヒト皮膚線維芽細胞（B.B.A.,172巻, ７０頁、 1
990 年），ヒト肺線維芽細胞（J.Clin.Invest.９０巻、
１４９２頁、１９９２年）において、ヒアルロン酸を４
糖、６糖にまで分解する牛精巣由来のヒアルロニダーゼ
とは明らかに異なるエンド型のヒアルロン酸分解機構の
存在が報告されている。これらのことから精巣由来のヒ
アルロニダーゼの阻害剤ではヒトのヒアルロン酸分解を
効果的に阻害することは困難である。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的と
するところは、ヒアルロン酸分解が生理的に正常時より
亢進している乾皮症，乾せん，あれ肌，乾燥肌等に対し
予防・治療効果が期待でき、しかもヒトの線維芽細胞に
直接作用し、優れた効果を発揮するヒアルロン酸分解阻
害剤及び治療剤、並びにあれ肌又は乾燥肌防止剤を提供
するにある。また、しわ防止や張り、柔軟性の改善等に
効果のある化粧料を提供するにある。

【０００８】

【課題を解決するための手段】上記の目的は、クロカワ
抽出物を含有又は有効成分とすることを特徴とする化粧
料、ヒアルロン酸分解阻害剤、及びあれ肌又は乾燥肌防
止剤、並びにヒアルロン酸異常分解疾患治療剤によって
達成される。また、下記一般式（Ａ）で示されるテルフ
ェニル誘導体を含有又は有効成分とすることを特徴とす
る化粧料、ヒアルロン酸分解阻害剤、及びあれ肌又は乾
燥肌防止剤によって達成される。即ち、本発明はクロカ
ワ抽出物又は下記一般式（Ａ）で示されるテルフェニル
誘導体を含有又は有効成分とする化粧料、ヒアルロン酸
分解阻害剤、及びあれ肌又は乾燥肌防止剤、並びにヒア
ルロン酸異常分解疾患治療剤にある。

【０００９】

【化６】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
る）

【００１０】

【発明の実施の形態】以下、本発明の実施の形態につい
て詳説する。

【００１１】本発明に係るクロカワ抽出エキスを製造す
る方法としては、イボタケ科由来きのこであるクロカワ
（Boletopsis Leucomelas ）子実体を適当な抽出溶媒に
一定期間浸漬すればよく、必要により減圧下還流抽出や
加圧抽出等の通常の抽出手段を利用できる。例えば、ク
ロカワ子実体凍結乾燥粉砕物に対し重量比で５〜３０倍
の抽出溶媒を加え、通常１５〜５０℃で２４時間〜１週
間浸漬して抽出エキスを得る方法等が挙げられる。ま
た、抽出エキスをろ過又は遠心分離等により不溶物を除
去したり、通常の濃縮手段、例えば減圧濃縮等して濃縮
抽出エキスとして得ることもできる。また通常の粉末化
方法により乾燥エキス末として用いることもできる。

【００１２】クロカワの乾燥エキス末を製造する方法と
しては、前記抽出エキスを通常の乾燥手段、例えば減圧
乾燥、噴霧乾燥又は凍結乾燥等により乾燥エキス末とし
て得る方法等が挙げられる。

【００１３】クロカワ抽出エキスを製造する際に用いる
抽出溶媒としては、例えば、水や、メタノール、エタノ
ール、１，３ブチレングリコール等の水溶性有機溶媒、
又はこれらの混合溶媒が挙げられる。更に酢酸エチル等
の極性有機溶媒によって再抽出してもよい。または、ク
ロロフォルム等の非極性溶媒処理によって疎水性物質を
除いたあと上述した方法で濃縮、粉末化することもでき
る。

【００１４】本発明に係るテルフェニル誘導体は、例え
ば、上記のクロカワ抽出エキス又はその乾燥エキス末か
ら得ることができる。

【００１５】本発明に係るテルフェニル誘導体を単離す
る方法としては、前記クロカワ抽出エキス又は乾燥エキ
ス末を酢酸エチル等の有機溶媒で再抽出し、シリカゲル
カラム等の分離手段で精製してテルフェニル誘導体画分
として得る、又は更にシリカゲルカラム等の分離手段を
繰り返したり、ＨＰＬＣを用いて単離する方法等が挙げ
られる。

【００１６】本発明のヒアルロン酸分解阻害剤は、ヒア
ルロン酸分解が生理的に正常時より亢進している疾患に
対して、優れた治療剤として用いることができ、また乾
燥肌又はあれ肌防止剤としても用いられる。また、老化
による皮膚の張り低下やしわの形成を予防する効果が期
待できる。更には、通常の化粧品等の有効成分としての
他、培養細胞系に添加して研究・試験用試薬等として用
いることもできる。化粧料として用いる場合は、特に
（頭皮を含む）皮膚に適用する皮膚化粧料が望ましい。
尚、本発明において化粧料とは歯磨き、入浴剤をも包含
するものである。歯磨きに用いた場合、歯肉炎の予防効
果が期待できる。

【００１７】本発明において疾患とは、ヒアルロン酸分
解が生理的に正常時より亢進している症状を示し、ヒア
ルロン酸分解の結果として患部で水分保持能力が低下し
ている乾皮症，乾燥肌，あれ肌，その他光加齢や老化に
ともなう張り、柔軟性の低下やしわの形成した症状を含
む。

【００１８】本発明におけるヒアルロン酸異常分解疾患
治療剤とは、ヒアルロン酸の分解が亢進した疾患に適用
する薬剤を言い、改善効果を奏するものも含む。

【００１９】ヒスタミンは線維芽細胞のヒアルロン酸分
解を促進することが知られていることから（特開平８─
２２５４４７号公報）、前記ヒアルロン酸の分解亢進が
伴う疾患の内、特にマスト細胞の浸潤によりヒスタミン
量が増大していると考えられる光加齢に対しても効果が
期待できる。

【００２０】本発明における防止剤とは、ヒアルロン酸
の分解が生理的に正常時より亢進している症状者に適用
するもの、及び予防として正常人が適用するものをい
い、ヒアルロン酸の分解が生理的に正常時より亢進して
いる症状者が適用するのが特に好ましい。

【００２１】本発明の化粧料の形態としては、適当な賦
形剤，担体，希釈剤を用いて、ゲル，クリーム，スプレ
ー剤，貼付剤，ローション，パック類，乳液，パウダ
ー，入浴剤（顆粒剤、液剤、粉末等）等、化粧品に一般
に用いられている種々の剤形に調製することができる。

【００２２】本発明のヒアルロン酸分解阻害剤、ヒアル
ロン酸異常分解疾患治療剤及び防止剤の形態としては、
適当な賦形剤，担体，希釈剤を用いて、錠剤，液剤，カ
プセル剤，顆粒剤，散剤，軟膏剤，貼付剤，注射剤，坐
剤，入浴剤等の剤形とすることができ、またゲル，クリ
ーム，スプレー剤，貼付剤，ローション，パック類，乳
液，パウダー等の剤形を挙げることができる。

【００２３】上記化粧料、ヒアルロン酸分解阻害剤、ヒ
アルロン酸異常分解疾患治療剤及び防止剤の調製は、常
法によって行われ、例えば、固形製剤については用途に
よって通常の医薬部外品添加物，食品添加物，化粧品添
加物等適宜選択でき、例えば、乳糖，でんぷん，結晶セ
ルロース，タルク等を用いて製剤化することができる。
カプセル剤はそのようにして調製された細粒剤，散剤等
を適当なカプセルに充填して得ることができる。液剤は
白糖，カルボキシメチルセルロース等を含む水溶液に本
発明の薬剤を溶解、又は懸濁することにより調製するこ
とができる。

【００２４】また本発明の化粧料、ヒアルロン酸分解阻
害剤、ヒアルロン酸異常分解疾患治療剤及び防止剤に使
用される賦形剤又は補助剤としては、本発明の効果を損
なわない範囲において、通常化粧品，医薬品，医薬部外
品，食品等に使用されるものが使用可能であり、用途、
剤形に応じて適宜選択され、特に限定されるものではな
い。例えばワセリン，スクワラン等の炭化水素類、ステ
アリルアルコール等の高級アルコール類、ミリスチン酸
イソプロピル等の高級脂肪酸低級アルキルエステル類、
ラノリン酸等の動物性油脂類、グリセリン，プロピレン
グリコール等の多価アルコール類、グリセリン脂肪酸エ
ステル，モノステアリン酸ポリエチレングリコール，ポ
リエチレンアルキルエーテルリン酸等の界面活性剤、パ
ラオキシ安息香酸メチル，パラオキシ安息香酸ブチル等
の防腐剤、蝋、樹脂、各種香料、各種色素、クエン酸ナ
トリウム、炭酸ナトリウム、乳酸等の各種有機酸や無機
酸及びそれらの塩、水、及びエタノール等が挙げられ
る。

【００２５】本発明のヒアルロン酸分解阻害剤を培養細
胞系において研究・試験用試薬として用いる場合、配合
量としては、培養細胞により高分子ヒアルロン酸を産生
させるときは、クロカワ抽出エキス乾燥重量又はテルフ
ェニル誘導体として培養液中に０．１μＭ以上含有され
るのが好ましく、更に好ましくは１μＭ〜１ｍＭが望ま
しい。

【００２６】また、本発明の化粧料、ヒアルロン酸分解
阻害剤、ヒアルロン酸異常分解疾患治療剤、及びあれ肌
又は乾燥肌防止剤におけるクロカワ抽出エキス、テルフ
ェニル誘導体の配合量としては、対象とする疾患の種
類、程度、患者の年齢、体重、及び性別等種々の要因に
より異なり一概には規定できないが、適用する組成物の
総量を１００ｇ基準として、０．０００１ｇ〜１. ５ｇ
が好ましく、特に０．００１ｇ〜１ｇが好ましい。０．
０００１ｇ未満では本発明の効果が得られない場合があ
り、１．５ｇを超えて配合しても配合量に見合った効果
が得られない場合がある。尚、該抽出エキスにおいては
上記数値は乾燥エキス末としての換算値を適用する。

【００２７】本発明のヒアルロン酸分解阻害剤、ヒアル
ロン酸異常分解疾患治療剤及びあれ肌又は乾燥肌防止剤
の投与方法としては、経口又は非経口投与が可能であ
る。

【００２８】通常１日当たり投与量としては、経口投与
では、テルフェニル誘導体の量として１μｇ〜１ｇが好
ましく、特に５μｇ〜０．１ｇが好ましい。非経口投与
では、５０μｇ〜０．１ｇが好ましい。しかしながら、
投与量は、目的、対象とする疾患の種類、程度、患者の
年齢、体重、及び性別等により適宜変更されうるもので
あり、一概には規定できない。

【００２９】

【実施例】以下、実施例、比較例により本発明を更に詳
しく説明する。尚、実施例に先立ちヒアルロン酸分解阻
害剤の効果を調べるための評価系について説明する。以
下、ポリオキシエチレンをＰＯＥと略記する。

【００３０】（１）ＭＥＭ培地の調製法 Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｅｄｉｕｍ
(大日本製薬社製、１０−１０１) １０．６ｇにそれぞ
れ終濃度として１％（Ｖ／Ｖ）Ｎｏｎ Ｅｓｓｅｎｔｉ
ａｌ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ（大日本製薬社製、１６−
８１０) 、１ｍＭピルビン酸ナトリウム（大日本製薬社
製、１６−８２０）、１．２％（Ｗ／Ｖ）炭酸水素ナト
リウム、蒸留水を加えて１ｌとした後、炭酸ガスを吹き
込んでｐＨを約７にした（以下、ＭＥＭ培地と略記す
る）。

【００３１】（２）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）の非働化 ＦＢＳ（Ｉｒｖｉｎｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製) を
５６℃で３０分間加熱処理した。

【００３２】（３）細胞添加用高分子トリチウムヒアル
ロン酸の調製方法 正常ヒト線維芽細胞株〔デトロイト５５１株（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ １１０）〕の細胞数を１０％（Ｖ／Ｖ）の非
働化ＦＢＳを含むＭＥＭ培地にて２×１０⁵ 個／ｍｌに
調整し、２２５ｃｍ² のフラスコに５０ｍｌ入れ、３日
間培養しコンフルエント状態にした。その後、ヒアルロ
ン酸の前駆体であるトリチウムグルコサミン（American
Radiolabeled Chemicals Inc.社製）を培養系に添加し
（１０μＣｉ／ｍｌ）、さらに３日間培養したのち、培
養液からトリチウムラベルされたヒアルロン酸をUnderh
ill らの方法（J.Cell Biology，８２巻，４７５頁，１
９７９年）によって精製し、さらにゲルろ過カラムによ
り分子量１００万以上の高分子トリチウムヒアルロン酸
（比放射活性０．１μＣｉ／μｇ）を調製した。これを
細胞培養系への添加用高分子トリチウムヒアルロン酸と
した。

【００３３】（４）高分子トリチウムヒアルロン酸の添
加培養 正常ヒト線維芽細胞株〔デトロイト５５１株（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ １１０）〕の細胞数を１０％（Ｖ／Ｖ）の非
働化ＦＢＳを含むＭＥＭ培地にて１．５×１０ ⁵ 個／ｍ
ｌに調整し、１２穴プレート（ファルコン社製）に０．
８ｍｌずつ播種し、９５％（Ｖ／Ｖ）空気−５％（Ｖ／
Ｖ）炭酸ガスの雰囲気下、３７℃で３日間静置培養し、
さらに、ＭＥＭ培地のみに培地交換し、１日間培養し
た。その後、高分子トリチウムヒアルロン酸を含む（１
４０００ＤＰＭ／ｍｌ）ＭＥＭ培地を調製し、培地交換
をし、３日間培養を行った。尚、培地交換時にヒスタミ
ン（１０μＭとなるように）と各種評価を行う薬剤（試
料）を添加した。

【００３４】（５）細胞による高分子トリチウムヒアル
ロン酸の分解評価 培養終了後、培養液を回収し、１００℃で５分間加熱処
理を行った後、培地１ｍｌをセファロースＣＬ─２Ｂカ
ラム（内径１ｃｍ，長さ６０ｃｍ）にアプライし、以下
の条件でゲルろ過を行った。 流速：０．６ｍｌ／ｍｉｎ 分画：４ｍｌ／画分 分画総数：２５ 更に分子量１０万以下のヒアルロン酸が溶出する画分１
０〜２５の１６本を集め、［ ³Ｈ］放射活性を測定し，
分解したヒアルロン酸の量を求めた。さらに、ヒアルロ
ン酸分解率および分解阻害率は以下の数１および数２に
よって求めた。

【００３５】

【数１】ヒアルロン酸分解率（％）＝Ｂ／Ａ×１００ Ａ＝ヒスタミン添加によるヒアルロン酸分解量 Ｂ＝ヒスタミン＋薬剤添加によるヒアルロン酸分解量

【００３６】

【数２】ヒアルロン酸分解阻害率（％）＝（１−Ｂ／
Ａ）×１００ Ａ＝ヒスタミン添加によるヒアルロン酸分解量 Ｂ＝ヒスタミン＋薬剤添加によるヒアルロン酸分解量

【００３７】実施例１（クロカワ抽出エキスの調製） クロカワの子実体４ｋｇ９０％エタノールで抽出後、減
圧乾燥し、アセトンで抽出後、減圧下アセトンを留去し
た。クロロフォルムで疎水性画分を除いたあと、さらに
酢酸エチルにて可溶化し、酢酸エチル可溶性画分（２４
ｇ）を得た。

【００３８】実施例２ 上記実施例１の酢酸エチル画分２４ｇをシリカゲル（ｓ
ｉｌｉｃａ ｇｅｌ６０Ｎ ７７５ｇ）カラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／アセトン（１０／
０，８／２）、クロロフォルム／メタノール（９／１，
８／２, ０／１０）で展開し、１０画分を得、第９画分
を減圧濃縮し４．８ｇを得た。

【００３９】実施例３ 上記実施例２（４．８ｇ）をシリカゲルカラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／メタノール（８／
２，０／１０）で展開し、１４画分を得、第６画分を減
圧濃縮し７１０．５ｍｇのテルフェニル誘導体含有画分
を得た。

【００４０】実施例４ 上記テルフェニル誘導体含有画分７１０．５ｍｇをＭＰ
ＬＣ（ＯＤＳカラム）に供与し、７０％メタノールで分
画し、５画分を得、第３画分（１７．２ｍｇ）を減圧濃
縮し、さらにＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム）に供与し、９０
％メタノールで５分画し、第３分画より５ｍｇのテルフ
ェニル誘導体を得、以下に示すＮＭＲシグナル（日本電
子社製、ＪＥＯＬ−ＬＡＭＢＤＡ）とマススペクトル
（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＤＸ３０３ＨＦ）によりジ
アセテートテルフェニル誘導体化７であることを確認し
た。

【００４１】

【化７】 （但し、式中Ａｃはアセチル基である）

【００４２】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；1.97,
2.42, 6.86(d,8.6), 7.07(s), 7.12(s), 7.18(d,8.6)

【００４３】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；20.1，2
0.3, 170.3, 170.6, 99.3, 107.3, 114.9, 115.9, 119.
2, 122.0, 125.1, 129.5, 132.8, 137.2, 138.8, 143.
6, 144.2, 147.9, 152.3, 157.8

【００４４】ＦＡＢ−ＭＳ（Ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ ４２
５

【００４５】実施例５ 上記実施例１の酢酸エチル画分２４ｇをシリカゲル（ｓ
ｉｌｉｃａ ｇｅｌ６０Ｎ ７７５ｇ）カラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／アセトン（１０／
０，８／２）、クロロフォルム／メタノール（９／１，
８／２, ０／１０）で展開し、１３画分を得、第４画分
を減圧濃縮し１．３ｇを得た。その内１０１．１ｍｇを
ＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム）に供与し、７０％メタノール
で溶出し、９画分を得、第２画分を減圧濃縮し１７．８
ｍｇのテルフェニル誘導体を得た。以下に示すＮＭＲシ
グナル（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＬＡＭＢＤＡ）とマ
ススペクトル（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＤＸ３０３Ｈ
Ｆ）によりテトラアセテートテルフェニル誘導体化８で
あることを確認した。

【００４６】

【化８】 （但し、式中Ａｃはアセチル基である）

【００４７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ） δ；2.06,
2.21, 2.32, 2.43, 6.57(s), 6.65(s), 7.16(d,8.9),
7.29(d,8.9)¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；1.99, 2.12, 2.29,
2.47, 7.02(s), 7.16(s), 7.18(d,8.3), 7.29(d,8.3)

【００４８】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ；20.3, 2
0.5, 20.6, 21.3, 167.8, 169.3, 170.3, 171.1, 98.0,
106.1, 112.7, 120.5, 121.7, 125.7, 129.2, 130.3,
130.9,133.8, 135.8, 141.7, 145.6, 145.9, 150.9, 15
1.8¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；20.0, 20.0, 20.3, 2
0.9, 169.4, 169.8, 170.0, 171.0, 99.4, 107.4, 114.
1, 121.1, 122.7, 127.2, 130.9, 131.9, 132.2,135.1,
137.1, 144.4, 147.3, 149.0, 152.2, 152.8

【００４９】 ＦＡＢ−ＭＳ（Ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ ５０９

【００５０】実施例６ 上記実施例２（４．８ｇ）をシリカゲルカラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／メタノール（８／
２，０／１０）で展開し、１４画分を得、第１４画分を
減圧濃縮し４５４．５ｍｇのテルフェニル誘導体含有画
分を得た。その画分の１５１．１ｍｇをＨＰＬＣ（ｆｌ
ｕｏｆｉｘカラム）に供与し、４５％メタノールで分画
し、１１画分を得、第６画分より１０．４ｍｇテルフェ
ニル誘導体を得、以下に示すＮＭＲシグナル（日本電子
社製、ＪＥＯＬ−ＬＡＭＢＤＡ）とマススペクトル（日
本電子社製、ＪＥＯＬ−ＤＸ３０３ＨＦ）によりテルフ
ェニル誘導体化９であることを確認した。

【００５１】

【化９】

【００５２】¹Ｈ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ）δ；6.67(d,
8.3), 7.14(s), 7.27(s), 7.33(d,8.3)¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；6.74(d,6.5) 7.04(s),
7.25(d,6.5), 7.30(s)

【００５３】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ）δ；98.9,
105.2, 112.6, 113.3, 114.1, 115.2,127.7, 132.0, 14
3.7, 144.7, 145.8, 153.7, 158.2,¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；99.4, 106.5, 115.3,
115.6, 116.8, 126.0, 133.6, 146.6, 148.5, 152.1, 1
56.7

【００５４】 ＦＡＢ−ＭＳ（Ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ ３４１

【００５５】実施例７ 上記実施例１の酢酸エチル画分２４ｇをシリカゲル（ｓ
ｉｌｉｃａ ｇｅｌ６０Ｎ ７７５ｇ）カラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／アセトン（１０／
０，８／２）、クロロフォルム／メタノール（９／１，
８／２, ０／１０）で展開し、１３画分を得、第７画分
を減圧濃縮し２８４．９ｍｇを得た。それを分取用ＴＬ
Ｃに供与しクロロフォルム／メタノール（８／２）で展
開分取し、６画分を得、第２画分を減圧濃縮し１２０．
５ｍｇを得て、それをＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム）に供与
し、７０％メタノールで分画し、６画分を得、第３画分
より４０．２ｍｇのテルフェニル誘導体を得た。以下に
示すＮＭＲシグナル（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＬＡＭ
ＢＤＡ）とマススペクトル（日本電子社製、ＪＥＯＬ−
ＤＸ３０３ＨＦ）によりトリアセテートテルフェニル誘
導体化１０であることを確認した。

【００５６】

【化１０】 （但し、式中Ａｃはアセチル基である）

【００５７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；1.99,
2.11, 2.44, 6.86(d,8.6), 7.03(s),7.10(d,8.6), 7.14
(s)

【００５８】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；20.0, 2
0.1, 20.3, 169.7, 170.2, 170.4, 99.4, 107.4, 114.
1, 116.1, 120.3, 124.0, 128.0, 131.8, 132.1, 134.
9, 137.0,144.1, 147.1, 148.5, 152.6, 158.3

【００５９】 ＦＡＢ−ＭＳ（Ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ ４６７

【００６０】実施例８ 上記実施例１の酢酸エチル画分２４ｇをシリカゲル（ｓ
ｉｌｉｃａ ｇｅｌ６０Ｎ ７７５ｇ）カラムに供与
し、展開溶媒としてクロロフォルム／アセトン（１０／
０，８／２）、クロロフォルム／メタノール（９／１，
８／２, ０／１０）で展開し、１３画分を得、第１０画
分を減圧濃縮し２．６ｇを得た。これをシリカゲルカラ
ムに供与しクロロフォルム／メタノール（８／２，０／
１０）で溶出し、９画分を得、第５画分を減圧濃縮し７
８５．８ｍｇを得た。その画分の１９９．１ｍｇをそれ
をＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム）に供与し、５０％メタノー
ルで分画し、９画分を得、第５画分より４７．９ｍｇの
テルフェニル誘導体を得た。以下に示すＮＭＲシグナル
（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＬＡＭＢＤＡ）とマススペ
クトル（日本電子社製、ＪＥＯＬ−ＤＸ３０３ＨＦ）に
よりテトラアセテートテルフェニル誘導体化１１である
ことを確認した。

【００６１】

【化１１】 （但し、式中Ｒ₅ 、Ｒ₆ はいずれかがアセチル基で、他
方は水酸基である）

【００６２】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ） δ；2.04,
6.85(d,8.3), 6.91(s), 7.16(d,8.3),7.49(s)¹ Ｈ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ）δ；2.13, 6.87(d,8.3),
7.03(s), 7.14(d,8.3),7.51(s)

【００６３】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ）δ；20.2, 17
1.2, 99.0, 108.7, 115.0, 116.0, 116.3, 123.3, 125.
4, 126.2, 132.7, 137.8, 139.4, 142.9, 143.8, 146.
3, 151.8, 157.8¹³ Ｃ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ）δ；20.2, 168.7, 98.3,
107.5, 113.7, 114.2,114.7, 114.5, 114.7, 122.2, 1
23.8, 124.6, 131.3, 132.1, 141.7, 145.6, 149.5, 15
6.5

【００６４】 ＦＡＢ−ＭＳ（Ｐｏｓ．）：ｍ／ｚ ３８３

【００６５】実施例１〜６、比較例３ 実施例１〜６をそれぞれ５０ｍｇをＤＭＳＯ１ｍｌに溶
解し、それぞれのＤＭＳＯ溶液を調整した。また、比較
例３として従来知られている牛精巣由来ヒアルロニダー
ゼの阻害剤であるグリチルリチン（炎症、４巻、ＮＯ
４、４３７（１９８４））０．１８ｇを水１０ｇに溶解
し、水溶液（２００μＭ）を調整した。

【００６６】試験例 実施例１〜６、比較例１（水溶液）、比較例２（ＤＭＳ
Ｏのみ）並びに上記比較例３を用いて、前述した（５）
の方法により、高分子トリチウムヒアルロン酸の分解を
調べ、ヒアルロン酸分解率およびヒアルロン酸分解阻害
率を前記数１、数２より算出した。結果を表１に示す。

【００６７】

【表１】

【００６８】その結果、ヒスタミン添加によって無添加
時よりヒアルロン酸の分解は促進された状態において、
実施例１〜６のテルフェニル誘導体を含むクロカワ抽出
エキス、テルフェニル誘導体画分、テルフェニル誘導
体、いずれの薬剤においてもヒアルロン酸分解の阻害効
果が認められた。また比較例３に示した牛精巣由来ヒア
ルロニダーゼの阻害剤であるグリチルリチンの添加は、
ヒトの細胞培養系である本評価系において全く効果がな
いことがわかった。

【００６９】この結果からテルフェニル誘導体は、ヒト
のヒアルロン酸分解阻害剤として有効であることは明ら
かである。また本発明のヒアルロン酸分解阻害剤はヒア
ルロン酸分解が異常に亢進している疾患に有効であると
考えられる。

【００７０】実施例９〜１１（錠剤） 以下実施例中の表中の値は、特段の断りなければ全て重
量％である。

【００７１】

【表２】

【００７２】上記表２の各成分を均一に混合し、常法に
従って、１錠１７０ｍｇとなるように打錠し、錠剤を調
製した。

【００７３】実施例１２〜１４（カプセル剤）

【００７４】

【表３】

【００７５】上記表３中の各成分を均一に混合し、常法
に従って、混合物の１５０ｍｇを３号硬カプセルに充填
した。

【００７６】実施例１５〜１７（液剤）

【００７７】

【表４】

【００７８】精製水に上記表４中のの各成分を溶解し、
攪拌均一化してシロップ剤とした。

【００７９】実施例１８〜２１（クリーム）

【００８０】

【表５】

【００８１】上記表５中において、成分（Ａ）を８０℃
で均一に混合溶解した後、それに成分（Ｂ）を混合溶解
した（混合液Ｉ）。これとは別に、成分（Ｄ）を８０℃
で均一に混合溶解した後、それに成分（Ｃ）を混合溶解
した（混合液ＩＩ）。つぎに、混合液Ｉに、徐々に混合
液ＩＩを加えて、充分攪拌しながら３０℃まで冷却し、
クリームを得た。

【００８２】実施例２２〜２５（ローション）

【００８３】

【表６】

【００８４】上記表６中の各成分を常法により混合溶解
して、ローションを調製した。

【００８５】実施例２６〜２７（入浴剤）

【００８６】

【表７】

【００８７】上記表７中の各成分を混合し、常法により
入浴剤を調製した。なお、この入浴剤は使用時に約３０
００倍に希釈されて使用される。

【００８８】実施例２８〜３０（薬用練歯磨）

【００８９】

【表８】

【００９０】常法に従い、水、グリセリン，カラギナ
ン，サッカリン，パラオキシ安息香酸ブチル，クロルヘ
キシジンジグリコネート，香料及びテルフェニル誘導体
を計量し、混合して粘結剤を膨潤させたのち、第２リン
酸カルシウム，ラウリル硫酸ナトリウムを加え、更によ
く混合し脱泡したのち、チューブに充填して練歯磨を得
た。

【００９１】実施例３１〜３３（洗口剤）

【００９２】

【表９】

【００９３】常法に従い、上記表９の組成からなる洗口
剤を調製した。

【００９４】

【発明の効果】以上の様に、本発明により、ヒト結合組
織に存在する細胞に作用し、ヒアルロン酸分解を阻害す
るヒアルロン酸分解阻害剤、ヒアルロン酸分解が生理的
に正常時より亢進している乾皮症，乾せん，あれ肌，乾
燥肌等の疾患に対し優れた効果を発揮するヒアルロン酸
異常分解疾患治療剤及びあれ肌又は乾燥肌防止剤、あれ
肌又は乾燥肌防止剤及びしわ防止や張り、柔軟性の改善
等に効果のある化粧料を提供できることは明らかであ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＤＡ Ａ６１Ｋ 31/34 ＡＤＡ 35/84 ＡＥＤ 35/84 ＡＥＤＡ (72)発明者 河岸 洋和 静岡県静岡市大谷836番地 静岡大学宿舎 213号 (72)発明者 村上 弘晃 静岡県清水市梅ヶ谷222−４

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 クロカワ抽出エキスを含有することを特
   徴とする化粧料。
2. 【請求項２】 クロカワ抽出エキスを有効成分とするヒ
   アルロン酸分解阻害剤。
3. 【請求項３】 クロカワ抽出エキスを有効成分とするあ
   れ肌又は乾燥肌防止剤。
4. 【請求項４】 下記一般式（Ａ）で示されるテルフェニ
   ル誘導体を含有することを特徴とする化粧料。 【化１】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
   る）
5. 【請求項５】 下記一般式（Ａ）で示されるテルフェニ
   ル誘導体を有効成分とするヒアルロン酸分解阻害剤。 【化２】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
   る）
6. 【請求項６】 下記一般式（Ａ）で示されるテルフェニ
   ル誘導体を含有することを特徴とするあれ肌又は乾燥肌
   防止剤。 【化３】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
   る）
7. 【請求項７】 下記一般式（Ａ）で示されるテルフェニ
   ル誘導体を含有することを特徴とするヒアルロン酸異常
   分解疾患治療剤。 【化４】 （但し、式中Ｒ₁ 〜Ｒ₄ は水酸基又はアセチル基であ
   る）
8. 【請求項８】 ヒアルロン酸異常分解疾患が、乾せん，
   乾皮症である請求項７記載のヒアルロン酸異常分解疾患
   治療剤。
9. 【請求項９】 下記一般式（Ｂ）で示されるテルフェニ
   ル誘導体。 【化５】