JPH11139933A - 表皮から単離されたポリペプチドとその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 角質細胞接合を減少させ、落屑を促進させる
ポリペプチドを提供し、またこれを含む組成物及び落屑
を促進させる美容方法を提供する。 【解決手段】 １５〜３２キロダルトンの見かけ分子量
を有し、カテプシンＬ型のシステインプロテアーゼ族に
属する、単離された天然または合成ポリペプチドを使用
する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明の主題は、ある単離ポ
リペプチドと該単離ポリペプチドのタンパク分解由来の
ポリペプチド混合物とこれらを含む組成物並びに角質細
胞間接合（intercorneocyte cohesion）を減少させ、以
って落屑を促進する美容処理方法にある。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】皮膚は
体とその周囲との間の物理的障壁を構成している。皮膚
は表皮と真皮の二つの組織からなる。真皮は表皮に対す
るしっかりした支持部となっている。真皮はまたフィー
ダー成分でもある。真皮は、主として線維芽細胞と細胞
外マトリックスとからなり、細胞外マトリックス自体は
主にコラーゲンとエラスチンと基底物質と称される物質
とから構成され、これら成分は主に線維芽細胞によって
合成される。白血球、肥満細胞又は組織マクロファージ
（tissue macrophage）もまたその内部に見出される。
さらに、真皮には血管と神経線維も存在している。

【０００３】表皮は平均１００μｍ厚の落屑性多層状上
皮であり、通常、表皮胚芽層を構成するケラチノサイト
の基底層と、胚芽細胞上に配された数層の多面細胞から
なるいわゆる有棘細胞層と、はっきりした細胞質封入
体、ケラトヒアリン顆粒を含む平坦細胞からなるいわゆ
る顆粒層と、最後に、角質細胞（コルネオサイト：corn
eocytes）と呼ばれる分化の最終段階のケラチノサイト
からなる角質層（horny layer又はstratum corneum）と
称される最上層とに分けられる。これら角質細胞はケラ
チノサイト由来の無核で乾燥化した細胞である。角質細
胞は、角質又は角質化膜（エンベロープ）と称される１
５ｎｍ厚の強い抵抗性を示す構造体で包囲され、サイト
ケラチンを含む線維マトリックスから主としてなる。こ
れらの角質細胞が重なって、表皮の障壁機能を果たして
いる角質層を構成している。角質層は、水分喪失を調節
することによって皮膚に対する生理的水分の補給を確実
に行なわしめる選択的透過性を有している。さらに、角
質層は、化学的なものであれ物理的なものであれ、環境
からの攻撃に対する防御壁を構成している。角質層は次
の２つの部位からなる： −角質細胞が由来する顆粒細胞上部の柱状角質細胞積層
体に、その細胞組織が相当する角化緻密層。各角質細胞
は、上にある角質細胞と下にある角質細胞で最大に覆わ
れている。 −緻密層より接合性が弱く角質細胞の落屑部位である、
角質層の最終層からなる剥離層。

【０００４】角質層において、角質細胞間空間は、層状
体（ラメラ体）から派生した脂質シートで満たされてい
る。表皮の分化は、継続的で方向付けられた成熟過程を
表しており、基底層のケラチノサイトから、完全に角化
して死亡した細胞である角質細胞が形成される。この分
化は、一定厚を維持して表皮のホメオスタシスを確実に
保つ完全に調和した現象の結果である。これは、分化過
程に入る細胞の数と落屑細胞の数の調節を経て行われ
る。正常な落屑過程では、最も外側の角質細胞のみが表
皮表面から剥離する。基底層から顆粒層への接合は、サ
イトケラチンの中間フィラメントとデスモソーム（接着
斑）とにより形成される経細胞ネットワークによりなさ
れている。このネットワークは半デスモソーム（半接着
斑）により基底膜に固定されている。角質層における接
合は、角質デスモソーム（corneodesmosomes）又は角質
ソーム（corneosomes）と称されるデスモソーム由来の
細胞間構造によりなされ、これにより角質細胞の角質膜
が堅固に接続されている。表皮（非パルモプランター：
non-palmoplantar）には、角質デスモソームが角質層下
部の角質細胞全面に存在しているが、辺縁（periphera
l）角質デスモソームだけが上部に存在している。

【０００５】角質デスモソームが角質細胞間接合並びに
落屑過程において基本的に重要であることが近年の研究
から明らかになった。特に、細胞解離とデスモグレイン
Ｉのようなある種の角質デスモソーム成分のタンパク分
解との間に密接な相関関係がある。落屑の研究により、
表皮のいわゆる「死」層までの細密な生化学的調節が存
在することを証明することができる。連続的かつ相補的
に作用するのは、より深い生存層において産生される酵
素であり、皮膚表面での角質細胞の最終的な放出に至
る。落屑に寄与していると思われる主な酵素が近年報告
されている。これは、グリコシダーゼとプロテアーゼと
いう二つの酵素群に属する。プロテアーゼは単独では作
用することはできず、タンパク分解のグリコシダーゼ剥
離部位の予備的な作用が必要であるようである。プロテ
アーゼは、おそらく落屑に最も関与しているタイプの酵
素である。それらは４群： −活性部位にアスパラギン酸を有するアスパラギン酸プ
ロテアーゼ、 −活性部位にセリンを有するセリンプロテアーゼ、 −活性部位にシステインを有するシステインプロテアー
ゼ、 −活性部位に非常にしばしば亜鉛原子、場合によっては
カルシウム原子を有する金属プロテアーゼに細分され
る。

【０００６】これらのプロテアーゼのなかで、リソソー
ム由来のシステインプロテアーゼ（カテプシンＢ、Ｈ及
びＬ）が疑いなくヒト体内で最も活性のあるプロテアー
ゼである。このシステインプロテアーゼは個々のタンパ
ク質の毎日の再生（７０ｋｇの個体当たり２００〜３０
０ｇ）に関与するものである。この点に関し、国際特許
第９５／０７６８６号には、３４〜３５キロダルトンの
見かけ分子量のシステインプロテアーゼが記載されてい
る。

【０００７】皮膚の多数の病理学的症状は厚い角質層の
生成と異常な落屑、すなわち角質増殖によって特徴付け
られる。後者は、あらゆる解剖学的皮膚領域に多様な臨
床情況で起こり得る。その生理病理学的実体及び原因は
多様である。例えば： −乾燥症（すなわち皮膚の乾燥）、 −魚鱗癬、 −乾癬、 −ある種の良性又は悪性腫瘍障害 −反応性角化症、 を挙げることができる。

【０００８】他の病理学的症状は、通常は角質化されて
いないが、角質化され、すなわち、異常な上皮で被覆さ
れて、その表面に角質層を形成する、粘膜、マルピーギ
又は他のレベルでの分化転換又は化生により特徴付けら
れる。多くの場合、生殖器粘膜及び上部アエロ消化管が
関与しているが、これら化生は種々の解剖学的領域に存
在し得る。例としては： −脱出症中における子宮頸部の白血球角化症（leukoker
atosis）、 −頬の白血球角化症、 −マルピーギ粘膜の角質化良性腫瘍障害、を挙げること
ができる。

【０００９】本発明を如何なる理論に結びつけるもので
はないが、これらの病理学的症状は、特にプロテアーゼ
を含む、落屑に関与していると思われる酵素の質的又は
量的不足に関連していると考えることができる。

【００１０】角質細胞間接合に関与する新しいポリペプ
チド、特にプロテアーゼの精製と知識は、主として皮膚
表面又は粘膜表面における、ポリペプチド、特にプロテ
アーゼの過剰又は不足による影響に抗するための新規生
成物の生産を可能にする一つの経路である。

【００１１】

【課題を解決するための手段及び発明の実施の形態】よ
って、本発明の目的の一つは、角質細胞間接合に関与す
るポリペプチドを単離形態で提供することにある。

【００１２】長期に渡って鋭意研究を行った結果、本出
願人は、角質細胞間接合に関与するポリペプチドをヒト
の表皮から生化学的技術により同定し、単離し、精製し
た。

【００１３】よって、本発明の主題は、１５〜３２キロ
ダルトンの見かけ分子量と６〜９の見かけ等電点を有す
る、カテプシンＬ型のシステインプロテアーゼ群に属す
る、単離ポリペプチドにある。

【００１４】見かけ分子量とは、ポリアクリルアミド／
硫酸ドデシルナトリウムゲル上の既知の分子量の標準タ
ンパク質のものとその電気泳動移動度を比較することに
よって、又は排除クロマトグラフィーにおいて既知の分
子量の標準タンパク質のものと溶出容量を比較すること
によって、ポリペプチドについて得られる分子量を意味
するものと理解される［ジェイ・シー・ジャンソン（J-
C. Janson）及びエル・ライデン（L. Ryden），「タン
パク質の精製（Protein Purification）」（ＶＣＨ出版
社、ニューヨーク、１９８９年）に記載されている方法
に従う］。

【００１５】見かけ等電点とは、ジェイ・シー・ジャン
ソン及びエル・ライデン，「タンパク質の精製」（ＶＣ
Ｈ出版社、ニューヨーク、１９８９年）に記載されてい
るように、クロマトフォーカシング実験において既知の
等電点の標準タンパク質に対して得られたものと比較し
てポリペプチドに対して得られた等電点を意味するもの
と理解される。

【００１６】本発明のポリペプチドは天然由来でも合成
由来であってもよい。ここでは、合成物とは、化学的
に、又は産生に必要な成分を生物体に導入した後に該生
物体中で産生させることによって得られる全てのポリペ
プチドを意味するものと理解される。

【００１７】本発明のポリペプチドは、任意の可能な起
源、すなわち動物、特に哺乳類、さらにはヒト由来、又
は植物由来、又は微生物（とりわけ、ウイルス、ファー
ジ又は細菌）由来、又は真菌由来のものであってよく、
由来する生物体中に自然に存在しているかいないかにつ
いて予め判断する必要はない。

【００１８】好ましくは、本発明のポリペプチドは天然
由来のもので、哺乳類の組織、特に哺乳類の皮膚から単
離される。

【００１９】好ましくは、本発明のポリペプチドはヒト
の皮膚、さらに好ましくはヒトの表皮から単離される。

【００２０】上述したように、角質細胞間の接合は、と
りわけ、角質細胞間結合（junction）に関連した構造に
特異的なポリペプチドが角質層中に存在するために生じ
ることは明らかである。

【００２１】したがって、本発明のポリペプチドは角質
層に存在し、角質細胞間結合に関連した構造、特に角質
デスモソームを破壊することにより角質細胞間接合を減
少させる役割を担っている。

【００２２】さらに、ポリペプチド、特にプロテアーゼ
を含む酵素は、それらの活性と融和性のある一次アミノ
酸配列に対応する、いわゆる成熟形態で提供されうるこ
とは知られている。しかし、これら成熟ポリペプチド
は、より大きいポリペプチド、多くの場合、それらの一
次アミノ酸配列に成熟ポリペプチドの一次配列を含む先
駆物質から成熟現象によりしばしば派生することは知ら
れている。同じことが本発明のポリペプチドについても
言えるであろう。

【００２３】したがって、本発明の主題は、一部が本発
明のポリペプチドからなる任意のポリペプチドにもあ
る。

【００２４】さらに、ポリペプチドは、翻訳後に修飾を
受けてもよく、例えばジスルフィド結合の形成、特定の
タンパク分解による切断、炭水化物の添加（グリコシル
化）、リン酸化で、特にセリン及び／又はスレオニン及
び／又はチロシンのレベルでのもの、及び／又は脂質と
の組合せによるものを受けてもよいことも知られてい
る。

【００２５】よって、本発明は、より詳細には、翻訳後
の修飾を受けた又は受けていない、本発明のポリペプチ
ドに関する。

【００２６】本発明のポリペプチドは、一又は複数の翻
訳後の修飾を受けていてよい。

【００２７】好ましくは、本発明のポリペプチドはグリ
コシル化及び／又はリン酸化される。

【００２８】本発明のポリペプチドは、１５〜３２キロ
ダルトン、好ましくは２５〜３０キロダルトンの見かけ
の分子量を有する。

【００２９】一般に酵素、特にプロテアーゼは、決った
ｐＨを有する媒体で最大の活性を示すことがよく知られ
ている。

【００３０】したがって、本発明のポリペプチドは、そ
の活性がｐＨ２〜９、好ましくは３．５〜６．５で最大
になることを特徴とする。例えば、カゼインにおけるポ
リペプチドの最大活性は、ｐＨ４．６〜５．６において
である。

【００３１】ポリペプチドの一次アミノ酸配列がプロテ
アーゼにより特異的に認識される部位を決定し、ひとた
びこれらの部位が認識されると、プロテアーゼが該ポリ
ペプチドに付着あるいは付着しないで、タンパク分解に
よるその切断を誘発する。

【００３２】したがって、本発明は、本発明のポリペプ
チドの少なくとも１つのタンパク分解断片にも関する。

【００３３】以下、特にそれ以外の説明を記載しない場
合は、ポリペプチドとは、タンパク分解により得られよ
うが、合成により得られようが、本発明の天然又は合成
ポリペプチドもしくはその断片の少なくとも一つを意味
するものと理解される。

【００３４】角質細胞間接合は、角質細胞間結合に関連
した構造に特異的なポリペプチドが角質層に存在するた
めに生じることは明らかである。ある種の角質増殖病
は、過度の角質細胞間接合に関係していることが知見さ
れている。

【００３５】本出願人は、本発明のポリペプチドが、角
質細胞間結合、従って角質細胞間接合に関連した構造を
破壊する現象に関与していることを示すことができた。
よって、本発明のポリペプチドは、角質細胞間接合の減
少、ひいては落屑の促進のための化粧品又は製薬用組成
物に使用することができる。

【００３６】よって、本発明の他の主題は、生理学的に
許容可能な媒体中に、少なくとも一つの上述したポリペ
プチドを含有せしめてなる化粧品又は製薬用組成物を提
供することにある。

【００３７】好ましくは、本発明の組成物は皮膚又は粘
膜に適用される。

【００３８】また本発明は、落屑に関する疾患、例えば
角質増殖、例えば、乾燥症（すなわち皮膚の乾燥）、魚
鱗癬、乾癬、ある種の良性又は悪性腫瘍障害による角質
増殖、及び反応性角化症を治療するための、少なくとも
一つの本発明のポリペプチドを含有する製薬用組成物に
関する。

【００３９】さらに本発明は、通常は角質化されていな
いが、角質化される粘膜、マルピーギ又は他のレベルで
の分化転換又は化生により特徴付けられる病理学的症
状、例えば脱出症中における子宮頸部の白血球角化症、
頬の白血球角化症、マルピーギ粘膜の角質化良性又は悪
性腫瘍障害を治療するための、少なくとも一つの本発明
のポリペプチドを含有する製薬用組成物に関する。

【００４０】本発明の組成物に含まれるポリペプチドの
量は、所望する効果にもちろん依存し、広範囲に変わり
うる。

【００４１】量の目安を述べると、組成物は、その全重
量に対して０．００００１％〜５０％、好ましくは０．
００１％〜１０％、さらに好ましくは０．１％〜１％で
表される量で本発明のポリペプチドを含有する。

【００４２】従来技術において、ある種の化合物がプロ
テアーゼ活性化物質として開示されている。乾燥症に対
するグリセロールの有益な効果が例えば知られており、
その効果は、角質デスモソームを破壊し、故に落屑を生
じさせるプロテアーゼの作用を促進すると思われるその
水和作用による、酵素系への活性化効果として説明され
ている（国際特許出願第９５／０７６８７号）。

【００４３】また、尿素及びその誘導体も、非常に乾燥
して、魚鱗癬でさえある皮膚の表面状態を改善すること
が昔から知られている［スワンベック（Swanbeck），
「皮膚病学と性病学（Acta Dermatologica and Venereo
logica）」、１９６８年、第４８巻、１２３−１２７
頁］。ウィデランダーズ（Wiederanders）ら［「生物医
学、生化学（Biomedical Biochemistry Acta）」、１９
８６年、第４５巻、（１１−１２）、１４７７−１４８
３頁］は、魚から抽出されたカテプシンが尿素の存在下
でより活性化することを明らかにした。しかして、著者
らは、その活性が尿素の存在下で、それぞれ２．５倍及
び６倍になるカテプシンＬ及びＤを特異的に分析するこ
とに成功している。

【００４４】また、プロテアーゼ活性剤として還元剤も
開示されている。例えば、硫化物、チオール類、例えば
ジチオトレイトール又はトリチオヘキシトール、システ
イン、Ｎ−アセチルシステイン、システインに富むタン
パク質又はタンパク質加水分化物、メルカプトエタノー
ル、チオグリセロール、チオアルカン酸及びメルカプト
カルボン酸及びそれらの類似物、例えばメルカプトコハ
ク酸、チオ乳酸、チオグリコール酸及びそれらの塩、補
酵素Ａ又は還元グルタチオン（ＧＳＨ）を挙げることが
できる。これらの還元剤は、活性形態又はそれらの先駆
物質、例えばシステインの先駆物質であるオキソチアゾ
リジン−カルボキシラートのような形態で組成物中に存
在し得る。

【００４５】エチレンジアミンテトラアセテート（ＥＤ
ＴＡ）は、特にカテプシン型のプロテアーゼの重金属に
よる不活性化を防止することが知られている。このよう
に、ＥＤＴＡはプロテアーゼ活性剤と考えられている。

【００４６】また、プロテアーゼ活性剤とトランスグル
タミナーゼを同化させることも可能である。これらの酵
素はトランスペプチダーゼ種に属する。それらはカルシ
ウム依存性であり、グルタミン残基の（γ炭素上の）カ
ルボキシル基とポリアミン又はリシン残基のアミノ基と
を反応させることによる、ε（γ−グルタミル）リシン
のイソペプチド架橋の形成を触媒する。トランスグルタ
ミナーゼは、分子量が７０ｋＤの先駆物質を有する５０
−５６ｋＤのサイトゾル（又は表皮性）トランスグルタ
ミナーゼＥと、メンブレントランスグルタミナーゼＫす
なわち分子量が９２ｋＤのタイプＩの二つの主な形態で
表皮中に存在している。トランスグルタミナーゼＥ及び
Ｋは、非常に多くのタンパク質を互いに架橋することに
よる角質膜の形成に共に関与しており、そのタンパク質
の主なものは、インボルクリン（involucrine）、ロリ
クリン（loricrine）、エラフィン（elafine）、シスタ
チン、パンコルヌリン（pancornulines）［すなわちＳ
ＰＲ：スモール・プロリン・リッチ（Small Proline Ri
ch）］、サイトケラチン、デスモプラキン（desmoplaki
ns）Ｉ及びＩＩ、デスモグレイン及び角質デスモシン
（corneodesmosine）である。シスタチンは、システイ
ンプロテアーゼ阻害活性を有するタンパク質である［タ
カハシら，ＦＥＢＳレター（１９９０年、第２巻、２６
１−２６４頁）］。したがって、トランスグルタミナー
ゼ活性剤の供給又はトランスグルタミナーゼの直接供給
により、トランスグルタミナーゼ活性が増大すると、角
質膜の構成タンパク質の量が増加し、そのタンパク質が
トランスグルタミナーゼの影響下で該膜の形成に捕捉さ
れる。この場合、角化層は、シスタチンを特に含んでい
るその内在性タンパク質が奪われる。ついで、表皮、特
には角化層からシスタチンが消失すると、その活性が増
加したシステインプロテアーゼの放出の効果が現れ、角
質細胞間接合が減少し、よって落屑が促進される。した
がって、本発明の主題は、少なくとも一つの本発明のポ
リペプチドと、少なくとも一つのプロテアーゼ活性剤を
さらに含有する化粧品又は製薬用組成物にある。

【００４７】プロテアーゼ活性剤としては、グリセロー
ル、尿素、ＥＤＴＡ、トランスグルタミナーゼ及び還元
剤を挙げることができる。

【００４８】もちろん、本発明の組成物に含有されるプ
ロテアーゼ活性剤の量は、所望する効果に依存し、大き
く変わりうる。

【００４９】目安を述べると、組成物は、その全重量に
対して０．００００１％〜１５％、好ましくは０．００
１％〜１０％で表される量でプロテアーゼ活性剤を含有
する。

【００５０】組成物中において、プロテアーゼ活性剤は
単独でも混合物の形態であってもよい。

【００５１】その性質が何であれ、本発明の組成物は、
摂取され、注射され、又は皮膚（体の任意の皮膚領域）
もしくは粘膜（頬、頬骨、歯肉、生殖、結膜等）へ塗布
することができる。

【００５２】投与方法に応じて、本発明の組成物は、通
常使用される任意のガレノス形態（galenical forms）
で提供され得る。

【００５３】皮膚への局所適用用には、組成物は、特
に、水性又は油性の溶液、又は漿液型又はローションの
分散液、水性相に脂肪相を分散（Ｏ／Ｗ）して、又はそ
の逆（Ｗ／Ｏ）によって得られる、液状又は半液状のコ
ンシステンシーのミルク型のエマルション、又は軟性の
コンシステンシーの水性又は無水のクリーム又はゲル型
のエマルション又は懸濁液、又はイオン性及び／又は非
イオン性の小胞分散液の形態、もしくは加圧された噴霧
剤をさらに含有するエアゾール組成物の形態とすること
ができる。これらの組成物は通常の方法で調製される。

【００５４】注射用には、組成物は、水性又は油性のロ
ーションの形態又は漿液の形態で提供することができ
る。眼用には点滴薬の形態、摂取用には、カプセル、顆
粒、シロップ又は錠剤の形態で提供することができる。

【００５５】本発明の組成物の種々の成分の量は、考慮
される分野で、従来より使用されている量である。

【００５６】これらの組成物は、特に、顔、手、足、大
きな解剖学上のヒダ又はボディのクレンジング、保護、
トリートメント又は手入れ用のクリーム（例えば、デイ
クリーム、ナイトクリーム、メークアップ除去用クリー
ム、ファンデーションクリーム、抗日光用クリーム）、
液状ファンデーション、メークアップ除去用ミルク、ボ
ディ保護又は手入れ用ミルク、抗日光用ミルク、日焼け
後用ミルク（after-sun milk）、スキンケア用ローショ
ン、ゲル又はムース、例えばクレンジングローション、
抗日光用ローション、日焼け後用ローション、人工的な
日焼け用ローション、入浴用組成物（bath compositio
n）、殺菌剤を含有する脱臭用組成物、アフターシェー
ビングゲル又はローション、脱毛クリーム、昆虫忌避用
組成物、鎮痛用（antipain）組成物又はある種の皮膚
病、例えば湿疹、しゅさ、乾癬、苔蘚、激しい痒み及び
魚鱗癬の治療用の組成物を構成することができる。

【００５７】さらに、本発明の組成物は、クレンジング
ソープ又はケーキを構成する固体状の調製物からなるも
のであってもよい。

【００５８】また、組成物は、加圧された噴霧剤をさら
に含有するエアゾール組成物の形態に包装されてもよ
い。

【００５９】またさらに、本発明の組成物は、頭皮の手
入れ用組成物、特にシャンプー、ヘアセット用ローショ
ン、トリートメントローション、スタイリングクリーム
又はゲル、染毛シャンプーの形態であってもよい染色
（特に酸化染色用）組成物、髪の再構成用ローション、
パーマネントウエーブ用組成物（特に、パーマネントウ
エーブ施術の第１工程用の組成物）、抜毛防止用のゲル
又はローション、駆虫用シャンプー、抗フケ用組成物等
にすることもできる。

【００６０】また、本発明の組成物は、頬歯（dentibuc
cal）用、例えば、練り歯磨きに使用することもでき
る。この場合、組成物は、頬用の組成物に一般的なアジ
ュバントと添加剤、特に、界面活性剤、増粘剤、保湿
剤、研磨剤、例えばシリカ、種々の活性成分、例えばフ
ッ化物、特にフッ化ナトリウム、及び任意の甘味料、例
えばサッカリンナトリウムを含有してもよい。

【００６１】本発明の組成物がエマルションである場
合、脂肪相の割合は、組成物の全重量に対して５〜８０
重量％、好ましくは５〜５０重量％である。エマルショ
ンの形態の組成物に使用される油、ロウ、乳化剤及び共
乳化剤は、化粧品の分野で従来より使用されているもの
から選択される。乳化剤及び共乳化剤は、組成物中に、
組成物の全重量に対して０．３〜３０重量％、好ましく
は０．５〜２０重量％の範囲の割合で存在する。エマル
ションは、脂質小胞体をさらに含有していてもよい。

【００６２】組成物が油性ゲル又は溶液である場合、脂
肪相は組成物の全重量に対して９０％より多くしてもよ
い。

【００６３】また、公知の方法に従って、化粧品用組成
物は、化粧品の分野で一般的なアジュバント、例えば、
親水性又は親油性のゲル化剤、親水性又は親油性の添加
剤、防腐剤、酸化防止剤、溶媒、香料、フィラー、遮蔽
剤、臭気吸収剤及び着色物質を含有してもよい。これら
種々のアジュバントの量は、化粧品の分野において従来
より使用されている量、例えば、組成物の全重量に対し
て０．０１〜１０％である。これらのアジュバントは、
その性質により、脂肪相、水性相及び／又は脂質小球体
に取り込まれ得る。

【００６４】本発明で使用可能な油又はロウとしては、
鉱物性油（ペトロラタム）、植物性油（シェアバターの
液状留分、ヒマワリ油）、動物性油（ペルヒドロスクワ
レン）、合成油（プルセリン油：Purcellin oil）、シ
リコーン油又はロウ（シクロメチコーン）及びフッ化油
（ペルフルオロポリエーテル）、ミツロウ、カルナウバ
又はパラフィンロウを挙げることができる。脂肪アルコ
ールと脂肪酸（ステアリン酸）をこれらの油に添加して
もよい。

【００６５】本発明で使用可能な乳化剤としては、例え
ば、ステアリン酸グリセリル、ポリソルベイト（polyso
rbate）６０及びガッテフォセ（Gattefosse）社からテ
フォース（Tefose）６３（登録商標）の名称で販売され
ているＰＥＧ−６／ＰＥＧ−３２／ステアリン酸グリコ
ールの混合物を挙げることができる。

【００６６】本発明で使用可能な溶媒としては、低級ア
ルコール、特に、エタノール及びイソプロパノール及び
プロピレングリコールを挙げることができる。

【００６７】本発明で使用可能な親水性のゲル化剤とし
ては、カルボキシビニルポリマー類（カーボマー：carb
omer）、アクリルコポリマー類、例えば、アクリレート
／アルキルアクリレートのコポリマー類、ポリアクリル
アミド類、多糖類、例えば、ヒドロキシプロピルセルロ
ース、天然ガム類及びクレー類を挙げることができ、ま
た、親油性のゲル化剤としては、変性クレー類、例え
ば、ベントーン類、脂肪酸の金属塩、例えば、ステアリ
ン酸アルミニウム、疎水性シリカ、エチルセルロース、
ポリエチレンを挙げることができる。

【００６８】組成物は、他の親水性の活性剤、例えば、
タンパク質又はタンパク質の加水分解物、アミノ酸、多
価アルコール、尿素、アラントイン、糖類及び糖類誘導
体、水溶性ビタミン類、植物エキス及びヒドロキシ酸を
含有してもよい。

【００６９】親油性の活性剤としては、レチノール（ビ
タミンＡ）及びその誘導体、トコフェロール（ビタミン
Ｅ）及びその誘導体、必須脂肪酸、セラミド類、精油、
サリチル酸及びその誘導体を使用することができる。

【００７０】本発明の組成物においては、特に皮膚病の
治療及び／又は防止を意図した他の活性剤と、少なくと
も１つのアヤメ科の少なくとも１つの抽出物とを組み合
わせてもよい。このような活性剤としては、例えば： −分化及び／又は増殖及び／又は色素沈着を減少させる
薬剤、例えば、レチノイン酸及びその異性体、レチノー
ル及びそのエステル類、ビタミンＤ及びその誘導体、エ
ストロゲン類、例えば、エストラジオール、コウジ酸又
はヒドロキノン； −抗菌剤、例えば、リン酸クリンダマイシン、エリスロ
マイシン又はテトラサイクリン類の抗生物質； −駆虫剤、特に、メトロニダゾール、クロタミトン又は
ピレスロイド類； −抗真菌剤、特に、イミダゾール類に属する化合物、例
えば、エコナゾール、ケトコナゾール又はミコナゾー
ル、又はそれらの塩類、ポリエン化合物、例えば、アン
ホテリシンＢ、アリルアミン類の化合物、例えばテルビ
ナフィン、又はオクトピロックス（octopirox）； −抗ウィルス剤、例えばアシクロビル； −ステロイド系の抗炎症剤、例えば、ヒドロコルチゾ
ン、吉草酸ベタメタゾン、又はプロピオン酸クロベタゾ
ール、又は非ステロイド系の抗炎症剤、例えば、イブプ
ロフェン及びその塩類、ジクロフェナク及びその塩類、
アセチルサリチル酸、アセトアミノフェン、又はグルシ
ルリジン酸； −麻酔剤、例えば、塩酸リドカイン及びその誘導体； −止痒剤、例えば、テナルジン、トリメプラジン又はシ
プロヘプタジン； −角質溶解剤、例えば、α−及びβ−ヒドロキシカルボ
ン酸、又はβ−ケトカルボン酸、及びそれらの塩類、ア
ミド類又はエステル類、特に、ヒドロキシ酸、例えば、
グリコール酸、乳酸、サリチル酸、クエン酸、及び一般
には果実の酸類及び５−ｎ−オクタノイルサリチル酸； −保湿剤、例えばグリセロール及びその誘導体； −抗フリーラジカル剤、例えば、α−トコフェロール又
はそのエステル類、スーパーオキシド−ジスムターゼ、
ある種の金属キレート剤又はアスコルビン酸及びそのエ
ステル類； −抗脂漏剤、例えば、プロゲステロン； −抗フケ剤、例えば、オクトピロックス又はジンクピリ
チオン； −抗ざ瘡剤、例えば、レチノイン酸又は過酸化ベンゾイ
ル； −植物又は細菌由来のエキスを挙げることができる。

【００７１】したがって、特定の実施態様において、本
発明の組成物は、抗菌剤、駆虫剤、抗真菌剤、抗ウィル
ス剤、抗炎症剤、止痒剤、麻酔剤、角質溶解剤、抗フリ
ーラジカル剤、抗脂漏剤、抗フケ剤及び抗ざ瘡剤、及び
／又は皮膚の分化及び／又は増殖及び／又は色素沈着を
低減させる薬剤から選択される少なくとも１つの薬剤を
さらに含有する。

【００７２】本発明の他の目的は、過剰な角質細胞間接
合に抗し、よって落屑を増大させる美容処理方法を提供
するものであり、該方法は、少なくとも１つの本発明の
ポリペプチドを含有する化粧品用組成物を皮膚に適用す
ることからなる。

【００７３】また本発明の主題は、前記単離されたポリ
ペプチド又は前記単離されたタンパク分解断片又は前記
合成ペプチドに特異的に結合可能な任意の構造又は機能
分子を、必要に応じて表皮から、調製又は精製するため
に、本発明のポリペプチドを使用することにある。この
分子は、「プロテアーゼ」、「グリコシダーゼ」又は
「ホスファターゼ」型で、角質層の種々の酵素及び角質
デスモソームに特異的な他の構造タンパク質に相当し得
るものである。

【００７４】さらに本発明の主題は、特にそのタンパク
質及びその断片の精製を目的とした特異的モノクローナ
ル抗体及び抗血清を調製するために、本発明のポリペプ
チドを使用することにある。拡大すると、本発明の主題
は、その産生に使用する生物学的系にかかわらず、組換
え抗体又は抗体断片を産生するために、前記ポリペプチ
ドを使用することにある。

【００７５】

【実施例】ポリペプチドの単離と特性化：角化層タンパ
ク質を、いわゆる「擦過（スクレイピング）」法により
集めた。この方法は有機溶媒による抽出段階を必要とせ
ず、よって酵素活性の破壊をより少なくしうる。また、
かなりの量の物質を得ることが可能である。擦過は脚の
前部表面について行った。サンプル収集の領域を、ｐＨ
７で５０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー、５ｍＭの
ＥＤＴＡ、１５０ｍＭのＮａＣｌ及び０．１％のトリト
ン（Triton）Ｘ１００からなる２００ｍｌのバッファー
を、ポンプによって１００ｍｌ／ｍｉｎの一定流量で分
配付与して洗浄した。ついでその領域の表面を、顕微鏡
用のスライドガラスの縁部でこすった。細胞を含有する
液体を脚の下に配された容器に集めた。このようにして
捕集されたバッファーを、再利用して多数回行った（１
５）。ついでサンプルを実験の種類に応じて一緒に又は
別にグループ化した。このようにして得られた溶液を、
まずワットマン第４号濾紙、ついでミリポア０．４５μ
ｍフィルター、最後に０．２２μｍミリポアフィルター
で濾過した。この浄化された溶液を、Ｋ．ＢＬ（商標）
装置及びサートコン（Sartocon）（商標）膜［サートリ
ウス（SARTORIUS）社］により、濾過出口流量が２ｍｌ
／ｍｉｎ、１バールの逆圧を有し、４℃で１０ｋＤのカ
ットオフがなされるタンジェンシャル限外濾過で１２ｍ
ｌまで濃縮した。健康な皮膚を持つ個体に対して、この
方法で抽出されたタンパク質の濃度は、１５回の繰返し
で最終的に１２ｍｌ当たり０．１５ｍｇ／ｍｌのオーダ
ーにした。

【００７６】タンパク質の分離：スーパーデックス（Su
perdex）Ｇ２００ＨＲ１０／３０（商標）カラム［ファ
ーマシア・バイオテック社（Pharmacia Biotech）］を
６００ｋＤ〜１０ｋＤの範囲の分解能でタンパク質の分
離のために使用した。この技術は、分子量の関数として
の分離に基づくが、タンパク質の最初の推定分子量を求
めることができる。得られたクロマトグラフィープロフ
ィールには、タンパク質のピークが、低分子量（２０〜
４０ｋＤ）側に優位に位置していることが示されてい
る。ついで、より大きな分解能を有するカラムを使用し
た。サンプル（２５０μｍ）を、最適分離帯が７０〜３
ｋＤの分子量にあるスーパーデックス・Ｇ７５ＨＲ１０
／３０（商標）排除カラム（ファルマシア・バイオテッ
ク社）に注入した。注入後１５分間の待ち時間後（これ
はカラムのデッドボリュームよりわずかに少ないものに
相当し、化合物が全く保持されない場合の安全マージン
を残す、０．２４ｍｌのデッドボリューム）、カラム流
出物を９６ウェルプレートに４℃で１５０μｌ／ウェル
の量で収集した。ポンプの排出量は０．５ｍｌ／ｍｉｎ
で、検出波長は２８０ｎｍであった［シリーズ１０ポン
プ：パーキン・エルマー社（Perkin Elmer）、ＳＰ８４
５０ディテクター：スペクトラ・フィジックス社（Spec
tra Physics）、ＬＣＩ−１００インテグレータ：パー
キン・エルマー社、モデル２０１フラクションコレクタ
ー：ギルソン社（Gilson）］。種々の注入に対して得ら
れたクロマトグラフィープロフィールは再現性がある
が、得られたフラクションを「ウェルからウェル」で混
合して、フラクション当たり約８００μｌの作業容量に
した。種々のフラクションを、冷蔵庫又は粉砕氷で冷却
状態に保ち、酵素活性を保持させた。種々のフラクショ
ンに相当する分子量を、８−１８％のアクリルアミド勾
配を持つポリアクリルアミドゲル電気泳動により決定し
た。サンプルを変性ラエミリ（Laemmli）バッファー
（０．０６２５Ｍのトリス、ｐＨ６．８、２％のＳＤＳ
を含有するがＤＴＴを含有しない）で１／４に希釈し、
ローディングを２０μｌにした。ファーマシア・バイオ
テックのプロトコルに従って染色された硝酸銀［キッ
ト：銀染色プルソン（plusone）］により、タンパク質
バンドを明視化した。

【００７７】プロテアーゼ活性の分析：スーパーデック
ス・Ｇ７５ＨＲ１０／３０排除カラムを通過させて得ら
れたフラクションに含有されるプロテアーゼ活性をエン
ツェック（Enzcheck）（商標）キット［分子プローブ
（Molecular Probes）］で蛍光定量法により分析した。
このキットは、層分離や沈殿をさせることなく、迅速か
つ簡単にプロテアーゼ活性を測定できる方法であり、異
なったフラクションのプロテアーゼ活性を素早くスクリ
ーニングするのに適している。このプロトコルでは、基
質として、酵素消化後に蛍光発光するBODIPYfl-カゼイ
ン（商標）が使用される。このように発光した蛍光は、
サンプルに含有されるプロテアーゼ活性に対して正比例
関係にある。蛍光を、４８５ｎｍの励起波長（２．５ｎ
ｍのスリット）、５３５ｎｍの発光波長（８ｎｍのスリ
ット）及びウェル毎に１秒の積分時間で、ＬＳ５０Ｂ分
光蛍光計（パーキン・エルマー社）により測定した。５
ｍＭの最終濃度において、システインの存在下又は不在
下で分析を行い、可能なシステインプロテアーゼ活性を
検出した。結果を図１に示す。

【００７８】プロテアーゼプロフィールには、バッファ
ーがシステインを含有する場合には存在するが、バッフ
ァーがシステインを含有しない場合には存在しないピー
ク（Ｇ４）の存在が示されている。よってこのピーク
は、システイン依存プロテアーゼの存在をフラクション
３４ないし４７において現している。このプロテアーゼ
は２８ｋＤオーダーの分子量を有する。

【００７９】プロテアーゼ活性の最適ｐＨ：Ｇ４ピーク
のプロテアーゼ活性の最適ｐＨを特徴付けるために、
「生化学研究のためのデータ（Data for Biochemical R
esearch）」［ドゥソン（Dawson）ら、第３版、オック
スフォードサイエンス出版、１９９０年］に記載されて
いるような２つのバッファーを４．０〜８．２５の範囲
のｐＨをカバーするように調製した： ０．１Ｍのアセテートバッファー、ｐＨ４．０〜５．７５ ０．１Ｍのホスファートバッファー、ｐＨ５．７５〜８．２５ 全てのバッファーには、５ｍＭのＥＤＴＡ及び０．１％
のトリトンＸ１００を含んでいる。活性を０．２５ｐＨ
単位毎に測定した。プロテアーゼ活性を測定する前述の
方法を、各フラクションにおける２つのバッファーの各
々においても使用した。結果を図２に示す。基質である
BODIPYfl-カゼイン（商標）に作用する、角化層から抽
出されたプロテアーゼの最適ｐＨは、４．０〜６．２５
の酸性側ｐＨ値に位置している。

【００８０】最も高い活性は、アセテートバッファーの
ｐＨ５．０〜５．５の間で得られた。よって、ｐＨ５．
０のアセテートバッファーを残りの実験に使用した。

【００８１】阻害剤の使用によるプロテアーゼピークの
特性化：上で単離されたシステイン依存プロテアーゼを
より良好に特徴付けるために、公知のプロテアーゼ阻害
剤による阻害テストを行った。考慮される阻害剤の存在
又は不在（対照体）下であって、最終濃度が５ｍＭのシ
ステインの存在下で、先の測定と同様の方法で測定を行
った。

【００８２】インヒビターＥ６４：Ｅ６４は、システイ
ンプロテアーゼ、特にカテプシンＢ、Ｈ、Ｌの阻害剤で
ある［タンパク分解酵素：実用的アプローチ、アール・
ジェイ・ベイトン（R.J. Benton）及びジェイ・エス・
ボンド（J.S. Bond）、ＩＲＬプレス、オックスフォー
ド、１９８９年］。

【００８３】テストを１．４μのＭＥ６４インヒビター
濃度で行った。結果を図３に示す。１．４μＭでのＥ６
４はＧ４ピークのシステイン依存プロテアーゼの活性を
約７１％阻害した。この阻害剤の特異性を考慮すると、
Ｇ４はカテプシンＢ、Ｈ又はＬである。

【００８４】ロイペプチン：使用した用量において、ロ
イペプチンは、カテプシンＢ又はＬに対して特異的であ
るが、カテプシンＨには影響を及ぼさない［シュワルツ
（Schwartz）ら、１９８０年］。１μＭのロイペプチン
濃度でテストを行った。結果を図４に示す。１μＭでの
ロイペプチンは、システインの存在下で、Ｇ４のプロテ
アーゼ活性を約４１％減少させた。Ｇ４はカテプシンＨ
ではない。

【００８５】キモスタチン：キモスタチンはカテプシン
Ｌに対して特異的であり、使用した濃度ではカテプシン
Ｂに対して不活性である［イヌブシ（Inubushi）ら、
「J. of Biochemistry」、第１１６巻、２８２−２８４
頁、１９９４年］。テストを２．５μＭのキモスタチン
濃度で行った。結果を図５に示す。２．５μＭで使用す
ると、キモスタチンはＧ４ピークのシステイン依存プロ
テアーゼの５０％以上を阻害した。Ｇ４はカテプシンＬ
型プロテアーゼである。

【００８６】インヒビターＣＡ０７４：インヒビターＣ
Ａ０７４はカテプシンＢに特異的であるが、カテプシン
Ｌには作用しない（イヌブシら、１９９４年）。１μＭ
のインヒビターＣＡ０７４濃度でテストを行った。結果
を図６に示す。インヒビターＣＡ０７４は、Ｇ４ピーク
のシステイン依存プロテアーゼの活性に特に影響を及ぼ
さなかった。Ｇ４はカテプシンＢ型のプロテアーゼでは
ない。

【００８７】ペプスタチン：ペプスタチンはアスパラギ
ン酸プロテアーゼに特異的な阻害剤である［タンパク分
解酵素：実用的アプローチ、アール・ジェイ・ベイトン
及びジェイ・エス・ボンド、ＩＲＬプレス、オックスフ
ォード、１９８９年］。

【００８８】１μＭのペプスタチン濃度でテストを行っ
た。結果を図７に示す。ペプスタチンはＧ４に作用しな
い。Ｇ４はアスパラギン酸プロテアーゼではない。

【００８９】Ｇ４の特性化を確認するためのＬカテプシ
ンに特異的な基質の使用｛Ｚ（フェニルアラニン−アル
ギニン・２Ｒ１１０）［アスファルグ−マヒレイド（As
sfalg-Machleidt）ら、１９９２年］｝：異なる阻害剤
テストにより得られたＧ４の同定結果を、ローダミン１
１０でラベルされたＬカテプシンの好ましいペプチド基
質を使用することによりチェックした。この基質は、カ
テプシンＢよりも、カテプシンＬの作用に対して８５０
倍以上も敏感である。システイン除去なしの対照体、シ
ステイン存在下におけるプロテアーゼ活性の評価結果を
図８に示す。結果から、特異的なペプチド基質の強い加
水分解が、カゼインのものと完全に重なり、Ｇ４のカテ
プシンＬ性が確認されることが分かる。

【００９０】Ｇ４の見かけの等電点の評価：「タンパク
質の精製」（ジェイ・シー・ジャンソン及びエル・ライ
デン、ＶＨＣ出版社、ニューヨーク、１９８９年）に記
載されているクロマトフォーカシング法により次の条件
下でこの評価を行った。 カラム：モノ（Mono）ＰＴＭ・ＨＲ５／２０・ファーマ
シア。 サンプル：ｐＨ９．３で、０．０７５Ｍのトリス／アセ
テートバッファー中で平衡化されたヒト角化層抽出物。 溶出バッファー：ｐＨ６．０で、１０ｍｌのポリバッフ
ァー９６／アセテート、 ｐＨ６．０（「タンパク質の精製」：ジェイ・シー・ジ
ャンソン及びエル・ライデン、ＶＨＣ出版社、ニューヨ
ーク、１９８９年）。 流量：１ｍｌ／ｍｉｎ。 フラクション：注入から０．５ｍｌ、全体で４８ｍｌ。 検出：ｐＨ５．０で０．１Ｍのアセテートバッファー、
０．１％のトリトンＸ１００、５ｍＭのＥＤＴＡ、５ｍ
Ｍのシステイン中の１０ｍＭのＺ（フェニルアラニン−
アスパラギン）２Ｒ１１０上でのカテプシンＬ活性。１
０μｌのフラクションと２００μｌの基質を３７℃で２
時間３０分インキュベート。光電子増倍管を７００Ｖ、
励起：４８５／１０ｎｍ、発光：５２０／１０ｎｍにセ
ットした、モレキュラー・ダイナミックス（Molecular
Dynamics）のバイオルミンＴＭ（BioluminTM）で読解。
結果を図９に示す。これらの結果は、６〜９の間の見か
け等電点を示している。

【００９１】落屑過程におけるＧ４の推定される役割の
証明：角質デスモシンは、落屑中に退化する角質デスモ
ソーム中の必須タンパク質である［セレ・ジー（Serre
G.）ら、Ｊ．Ｉ．Ｄ．、１９９１年、第９７（６）巻、
１０６１−１０７２頁］。ムネロット・シー（Munerot
C.）により開発された方法［ＤＥＡレポート、１９９６
年、マルン・ラ・ヴァレ（Marne la Vallee）大学］に
従い、角化層から抽出された角質デスモシンでテストを
行った。Ｇ４ピークのプロテアーゼの存在下又は不在下
で、全角化層におけるインキュベート後の角質デスモシ
ンでなされた免疫移動（immunotransfer）は、顕著なそ
の分解を示している。角化層に存在するＧ４ピークのプ
ロテアーゼは、角質デスモシンを分解する。

【００９２】実施されたテストの全ての結果により、角
質層から抽出されたポリペプチドは、２８ｋＤの見かけ
の分子量と６〜９の等電点とを有するカテプシンＬ型の
システイン依存プロテアーゼであると結論することが可
能になった。

【図面の簡単な説明】

【図１】 システインの存在下又は不在下における、角
質層由来のタンパク質サンプルに含まれるプロテアーゼ
の活性を示す図である。

【図２】 ｐＨの関数としてのＧ４ピークのプロテアー
ゼの活性を示す図である。

【図３】 インヒビターＥ６４［タンパク分解酵素：
「実用的アプローチ」、アール・ジェイ・ベイトン及び
ジェイ・エス・ボンド、ＩＲＬプレス、オックスフォー
ド、１９８９年」］の存在下におけるＧ４ピークのプロ
テアーゼの活性を示す図である。

【図４】 ロイペプチンの存在下におけるＧ４ピークの
プロテアーゼの活性を示す図である。

【図５】 キモスタチンの存在下におけるＧ４ピークの
プロテアーゼの活性を示す図である。

【図６】 インヒビターＣＡ０７４［イヌブシらの「J.
of Biochemistry」、第１１６巻、２８２−２８４頁、
１９９４年］の存在下におけるＧ４ピークのプロテアー
ゼの活性を示す図である。

【図７】 ペプスタチンの存在下におけるＧ４ピークの
プロテアーゼの活性を示す図である。

【図８】 カテプシンＬの好ましいペプチド基質の存在
下におけるＧ４ピークのプロテアーゼの活性を示す図で
ある。

【図９】 見かけの等電点を決定するためのクロマトフ
ォーカシング実験で得られた図である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 マリ−アリクス ベルナール−ブールブロ ン フランス国 93130 ノアジー ル セク, リュドゥ ラ ガール， ５

Claims (24)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 カテプシンＬ型のシステインプロテアー
   ゼ群に属し、１５〜３２キロダルトンの見かけ分子量を
   有する、単離された天然又は合成のポリペプチド。
2. 【請求項２】 ６〜９の等電点を有することを特徴とす
   る請求項１に記載のポリペプチド。
3. 【請求項３】 哺乳類から単離されたものであることを
   特徴とする請求項１又は２に記載のポリペプチド。
4. 【請求項４】 哺乳類の皮膚から単離されたものである
   ことを特徴とする請求項１ないし３のいずれか１項に記
   載のポリペプチド。
5. 【請求項５】 ヒトの皮膚から単離されたものであるこ
   とを特徴とする請求項１ないし４のいずれか１項に記載
   のポリペプチド
6. 【請求項６】 ヒトの表皮から単離されたものであるこ
   とを特徴とする請求項１ないし５のいずれか１項に記載
   のポリペプチド。
7. 【請求項７】 角質細胞間接合を減少させる役割を担う
   ものであることを特徴とする請求項１ないし６のいずれ
   か１項に記載のポリペプチド。
8. 【請求項８】 ２５〜３０キロダルトンの見かけ分子量
   を有することを特徴とする請求項１ないし７のいずれか
   １項に記載のポリペプチド。
9. 【請求項９】 活性が、ｐＨ２〜９、好ましくは３．５
   〜６．５で最大であることを特徴とする請求項１ないし
   ８のいずれか１項に記載のポリペプチド。
10. 【請求項１０】 請求項１ないし９のいずれか１項に記
    載のポリペプチドを部分的に含むポリペプチド。
11. 【請求項１１】 タンパク分解又は合成により得られた
    断片である請求項１ないし１０のいずれか１項に記載の
    ポリペプチド。
12. 【請求項１２】 生理学的に許容可能な媒体中に、請求
    項１ないし１１のいずれか１項に記載のポリペプチドを
    含有せしめてなる化粧品用又は製薬用の組成物。
13. 【請求項１３】 ポリペプチドが、組成物の全重量に対
    して０．００００１％〜５０％、好ましくは０．００１
    ％〜１０％の量であることを特徴とする請求項１２に記
    載の組成物。
14. 【請求項１４】 少なくとも一つのプロテアーゼ活性剤
    をさらに含有することを特徴とする請求項１２又は１３
    に記載の組成物。
15. 【請求項１５】 プロテアーゼ活性剤が、グリセロー
    ル、尿素及びその誘導体、トランスグルタミナーゼ、Ｅ
    ＤＴＡ及び還元剤から選択されることを特徴とする請求
    項１４に記載の組成物。
16. 【請求項１６】 プロテアーゼ活性剤が、組成物の全重
    量に対して０．００００１％〜１５％、好ましくは０．
    ００１％〜１０％の量であることを特徴とする請求項１
    ４又は１５に記載の組成物。
17. 【請求項１７】 処置される皮膚に、請求項１０ないし
    １６のいずれか１項に記載の化粧品用の組成物を適用す
    ることを特徴とする、過剰な角質細胞間接合に抗し、又
    は落屑を促進させるための美容処理方法。
18. 【請求項１８】 落屑疾患の治療用の製薬組成物である
    ことを特徴とする請求項１０ないし１６のいずれか１項
    に記載の組成物。
19. 【請求項１９】 角質増殖の治療用であることを特徴と
    する請求項１８に記載の組成物。
20. 【請求項２０】 乾燥症、魚鱗癬、乾癬、良性又は悪性
    腫瘍障害又は反応性角化症の治療用であることを特徴と
    する請求項１８又は１９に記載の組成物。
21. 【請求項２１】 脱出症中における子宮頸部の白血球角
    化症、頬の白血球角化症、又はマルピーギ粘膜の角質化
    良性腫瘍障害の治療用であることを特徴とする請求項１
    ８又は１９に記載の組成物。
22. 【請求項２２】 前記単離ポリペプチド又は前記単離タ
    ンパク分解断片又は前記合成ペプチドに特異的に結合可
    能な分子の調製又は精製のための、請求項１ないし１１
    のいずれか１項に記載のポリペプチドの使用。
23. 【請求項２３】 角質デスモソームに特異的な構造タン
    パク質の調製又は精製のための、請求項２２に記載の使
    用。
24. 【請求項２４】 特異的モノクローナル抗体又は抗血清
    の調製又は精製のための、請求項１ないし１１のいずれ
    か１項に記載のポリペプチドの使用。