JPH107693A - 新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法 - Google Patents
新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法Info
- Publication number
- JPH107693A JPH107693A JP7012297A JP7012297A JPH107693A JP H107693 A JPH107693 A JP H107693A JP 7012297 A JP7012297 A JP 7012297A JP 7012297 A JP7012297 A JP 7012297A JP H107693 A JPH107693 A JP H107693A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- glucopyranoside
- nitrophenyl
- embedded image
- derivative
- lipase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 血液中に共存するエステラーゼ、コリンエス
テラーゼの作用を受けずリパーゼに対する特異性が高
く、さらに溶解性にも優れている化合物を提供するこ
と、またリパーゼの高感度測定を可能にするリパーゼ活
性測定試薬、レートアッセイ法を適用することができ
る、簡便にリパーゼ活性の測定を行うことができるリパ
ーゼ活性測定方法を提供すること。 【解決手段】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ1 は炭素数１２以上３０以下のヒドロキシ脂
肪酸エステル基を示し、Ｒ2 は置換フェノキシ基を示
し、波線はαまたはβ結合を示す）で表される糖誘導
体、糖誘導体（Ｉ）を含むリパーゼ活性測定用試薬およ
び該測定用試薬を使用するリパーゼ活性測定方法。
テラーゼの作用を受けずリパーゼに対する特異性が高
く、さらに溶解性にも優れている化合物を提供するこ
と、またリパーゼの高感度測定を可能にするリパーゼ活
性測定試薬、レートアッセイ法を適用することができ
る、簡便にリパーゼ活性の測定を行うことができるリパ
ーゼ活性測定方法を提供すること。 【解決手段】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ1 は炭素数１２以上３０以下のヒドロキシ脂
肪酸エステル基を示し、Ｒ2 は置換フェノキシ基を示
し、波線はαまたはβ結合を示す）で表される糖誘導
体、糖誘導体（Ｉ）を含むリパーゼ活性測定用試薬およ
び該測定用試薬を使用するリパーゼ活性測定方法。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、新規な糖誘導体、
その製造法、臨床検査分野などで有効に使用されうる、
該糖誘導体を基質として含有するリパーゼの活性測定用
試薬、ならびに該試薬を用いたリパーゼの活性測定方法
に関する。
その製造法、臨床検査分野などで有効に使用されうる、
該糖誘導体を基質として含有するリパーゼの活性測定用
試薬、ならびに該試薬を用いたリパーゼの活性測定方法
に関する。
【０００２】
【従来の技術・発明が解決しようとする課題】膵臓の疾
患を診断するために、酵素を用いる方法が知られてい
る。例えば、十二指腸液や血液の中に存在するアミラー
ゼの活性を測定することにより診断するものであるが、
アミラーゼは食餌やホルモンの影響を受け易いために、
膵アミラーゼ活性の低下があったとしても、必ずしも膵
臓に器質的疾患が存在するとはいえない。また、血液中
のアミラーゼ活性の測定に関しても、アミラーゼは膵や
唾液腺イソアミラーゼとしても存在することから、血液
中のアミラーゼ活性の上昇により、必ずしも膵臓に器質
的疾患が存在するとはいえない。
患を診断するために、酵素を用いる方法が知られてい
る。例えば、十二指腸液や血液の中に存在するアミラー
ゼの活性を測定することにより診断するものであるが、
アミラーゼは食餌やホルモンの影響を受け易いために、
膵アミラーゼ活性の低下があったとしても、必ずしも膵
臓に器質的疾患が存在するとはいえない。また、血液中
のアミラーゼ活性の測定に関しても、アミラーゼは膵や
唾液腺イソアミラーゼとしても存在することから、血液
中のアミラーゼ活性の上昇により、必ずしも膵臓に器質
的疾患が存在するとはいえない。
【０００３】一方、膵リパーゼは膵臓の腺房細胞から分
泌され、膵管を通り十二指腸に排泄されて、脂肪消化作
用を示す。膵炎や膵癌などの膵疾患が起こると、膵腺房
細胞の破壊や膵管の閉塞などによって、膵リパーゼが血
液中に移行し、血清中のリパーゼ活性値を上昇させるこ
とが、臨床的に知られている。したがって、膵疾患の診
断には、血液中のアミラーゼ活性の測定よりも、膵に特
異性の高いリパーゼの活性を測定するほうが、より有用
な指標になると考えられている。
泌され、膵管を通り十二指腸に排泄されて、脂肪消化作
用を示す。膵炎や膵癌などの膵疾患が起こると、膵腺房
細胞の破壊や膵管の閉塞などによって、膵リパーゼが血
液中に移行し、血清中のリパーゼ活性値を上昇させるこ
とが、臨床的に知られている。したがって、膵疾患の診
断には、血液中のアミラーゼ活性の測定よりも、膵に特
異性の高いリパーゼの活性を測定するほうが、より有用
な指標になると考えられている。
【０００４】このようなことから従来より種々のリパー
ゼの活性測定法が知られている。オリーブ油を基質とす
る測定方法として、試料とオリーブ油とを接触させ遊離
する脂肪酸をアルカリ滴定する測定方法、オリーブ油エ
マルジョンの温度変化を指標とする測定方法などがあ
る。しかしこれらの方法は、操作が煩雑で、オリーブ油
の品質やオリーブ油エマルジョンの調整方法の相違によ
り測定値が変動したり、測定値の再現性が悪くなるなど
の問題点がある（Ａｎａｌｉｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ、第６巻、４５１頁（１９６３）参照）。
ゼの活性測定法が知られている。オリーブ油を基質とす
る測定方法として、試料とオリーブ油とを接触させ遊離
する脂肪酸をアルカリ滴定する測定方法、オリーブ油エ
マルジョンの温度変化を指標とする測定方法などがあ
る。しかしこれらの方法は、操作が煩雑で、オリーブ油
の品質やオリーブ油エマルジョンの調整方法の相違によ
り測定値が変動したり、測定値の再現性が悪くなるなど
の問題点がある（Ａｎａｌｉｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｓｔｒｙ、第６巻、４５１頁（１９６３）参照）。
【０００５】合成高級脂肪酸エステルであるα−ナフチ
ルパルミテートを基質とした測定方法は、基質が溶解し
にくいために酵素活性測定に充分な量の基質を添加でき
なかったり、基質液の調整方法の相違により測定値が変
動したり、再現性が悪いなどの問題点がある（Ｃｌｉｎ
ｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ、第４４巻、１３３
〜１３８頁（１９７３）、臨床化学、第７巻（４）、３
５０〜３５６頁（１９７９）参照）。
ルパルミテートを基質とした測定方法は、基質が溶解し
にくいために酵素活性測定に充分な量の基質を添加でき
なかったり、基質液の調整方法の相違により測定値が変
動したり、再現性が悪いなどの問題点がある（Ｃｌｉｎ
ｉｃａ Ｃｈｉｍｉｃａ Ａｃｔａ、第４４巻、１３３
〜１３８頁（１９７３）、臨床化学、第７巻（４）、３
５０〜３５６頁（１９７９）参照）。
【０００６】合成チオエステルである３−ブチロイルオ
キシ−１，２−ビスブチロイルチオプロパン（ＢＡＬ
Ｂ）を基質とした活性測定法（特開昭５０−１５９７９
３号公報参照）は、再現性や精度が比較的よく、これま
でよく利用されてきた方法である。しかし、該基質は短
鎖の脂肪酸エステル残基を有するため、リパーゼだけで
なくエステラーゼにもよく加水分解され、基質特異性に
問題がある。さらに測定原理がエンドポイント法のため
操作の煩雑さもさることながら、反応停止液を必要と
し、酵素活性の測定を連続的に行うレートアッセイ法を
適用することができないといった問題点も有している。
キシ−１，２−ビスブチロイルチオプロパン（ＢＡＬ
Ｂ）を基質とした活性測定法（特開昭５０−１５９７９
３号公報参照）は、再現性や精度が比較的よく、これま
でよく利用されてきた方法である。しかし、該基質は短
鎖の脂肪酸エステル残基を有するため、リパーゼだけで
なくエステラーゼにもよく加水分解され、基質特異性に
問題がある。さらに測定原理がエンドポイント法のため
操作の煩雑さもさることながら、反応停止液を必要と
し、酵素活性の測定を連続的に行うレートアッセイ法を
適用することができないといった問題点も有している。
【０００７】上記の基質にある問題点を解消するため、
糖エステル誘導体を基質として含有するリパーゼの活性
測定用試薬が提案されている（特公平６−７６４３１号
公報参照）。しかしながら、特公平６−７６４３１号公
報に開示されているようなマルトシドのエステル体は、
溶解性には優れるものの、リパーゼがほとんど作用しな
いという問題点がある。グルコシドのエステル体にはリ
パーゼが作用するものの、溶解性が不充分なため、リパ
ーゼ活性測定に充分な量の基質を添加することができ
ず、充分な分析感度を示さないという問題点がある。
糖エステル誘導体を基質として含有するリパーゼの活性
測定用試薬が提案されている（特公平６−７６４３１号
公報参照）。しかしながら、特公平６−７６４３１号公
報に開示されているようなマルトシドのエステル体は、
溶解性には優れるものの、リパーゼがほとんど作用しな
いという問題点がある。グルコシドのエステル体にはリ
パーゼが作用するものの、溶解性が不充分なため、リパ
ーゼ活性測定に充分な量の基質を添加することができ
ず、充分な分析感度を示さないという問題点がある。
【０００８】本発明は、上記した従来の基質の有する問
題点を解消しようとするもので、その目的とするところ
は、溶解性に優れ、かつ基質として有用な糖誘導体を提
供すること、簡便な操作でレートアッセイ法による測定
が可能なリパーゼ活性測定用の試薬を提供すること、お
よび簡便なリパーゼ活性測定方法を提供することであ
る。
題点を解消しようとするもので、その目的とするところ
は、溶解性に優れ、かつ基質として有用な糖誘導体を提
供すること、簡便な操作でレートアッセイ法による測定
が可能なリパーゼ活性測定用の試薬を提供すること、お
よび簡便なリパーゼ活性測定方法を提供することであ
る。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記に示し
た従来方法の問題点を克服するために鋭意研究を行った
結果、本発明を完成した。即ち本発明は、以下に示すも
のに関する。 （１）一般式（Ｉ）
た従来方法の問題点を克服するために鋭意研究を行った
結果、本発明を完成した。即ち本発明は、以下に示すも
のに関する。 （１）一般式（Ｉ）
【００１０】
【化２】
【００１１】（式中、Ｒ1 は炭素数１２以上３０以下の
ヒドロキシ脂肪酸エステル残基を示し、Ｒ2 は置換フェ
ノキシ基を示し、波線はαまたはβ結合を示す）で表さ
れる糖誘導体。 （２）フェニルグリコシド誘導体のグルコース部分の６
位の水酸基のみをエステル化させることからなる上記
（１）に記載の糖誘導体の製造法。 （３）上記（１）に記載した糖誘導体を基質として含有
するリパーゼ活性測定用試薬。 （４）上記（３）に記載したリパーゼ活性測定用試薬を
用いるリパーゼ活性測定方法。
ヒドロキシ脂肪酸エステル残基を示し、Ｒ2 は置換フェ
ノキシ基を示し、波線はαまたはβ結合を示す）で表さ
れる糖誘導体。 （２）フェニルグリコシド誘導体のグルコース部分の６
位の水酸基のみをエステル化させることからなる上記
（１）に記載の糖誘導体の製造法。 （３）上記（１）に記載した糖誘導体を基質として含有
するリパーゼ活性測定用試薬。 （４）上記（３）に記載したリパーゼ活性測定用試薬を
用いるリパーゼ活性測定方法。
【００１２】本発明の一般式（Ｉ）で表される糖誘導体
は、グルコシドエステル誘導体、即ちグルコースの６位
のヒドロキシル基が修飾されたαまたはβフェニルグル
コシドである。該誘導体（Ｉ）の糖部分は、グルコース
である。糖誘導体（Ｉ）のＲ1 は、炭素数１２以上３０
以下のヒドロキシ脂肪酸エステル残基であり、好ましく
は、１〜２個のヒドロキシル基が置換した炭素数１２〜
１８の飽和または不飽和脂肪酸エステル残基である。具
体的には、１２−ヒドロキシステアロイル、９，１０−
ジヒドロキシステアロイル、リシノレオイル（リシノレ
イルともいう）、１６−ヒドロキシパルミトイル、２−
ヒドロキシパルミトイル、３−ヒドロキシミリストイ
ル、２−ヒドロキシミリストイル、１２−ヒドロキシド
デカノイル、３−ヒドロキシドデカノイル、２−ヒドロ
キシドデカノイルなどが挙げられる。
は、グルコシドエステル誘導体、即ちグルコースの６位
のヒドロキシル基が修飾されたαまたはβフェニルグル
コシドである。該誘導体（Ｉ）の糖部分は、グルコース
である。糖誘導体（Ｉ）のＲ1 は、炭素数１２以上３０
以下のヒドロキシ脂肪酸エステル残基であり、好ましく
は、１〜２個のヒドロキシル基が置換した炭素数１２〜
１８の飽和または不飽和脂肪酸エステル残基である。具
体的には、１２−ヒドロキシステアロイル、９，１０−
ジヒドロキシステアロイル、リシノレオイル（リシノレ
イルともいう）、１６−ヒドロキシパルミトイル、２−
ヒドロキシパルミトイル、３−ヒドロキシミリストイ
ル、２−ヒドロキシミリストイル、１２−ヒドロキシド
デカノイル、３−ヒドロキシドデカノイル、２−ヒドロ
キシドデカノイルなどが挙げられる。
【００１３】糖誘導体（Ｉ）のＲ2 は、置換されたフェ
ノキシ基であり、遊離してフェノール性化合物となった
時、それ自体で高感度に発色するか、それ自体で発色し
ないものは呈色試薬などを添加した時に高感度に発色
し、かつ基質分子全体の溶解能を落とさないものが好ま
しい。グルコース部分と置換フェノキシ基との結合は、
グルコース部分の１位にα型で結合していてもβ型で結
合していてもよい。Ｒ2 の具体例として以下の基が挙げ
られるが、これらに限定されるものではない。
ノキシ基であり、遊離してフェノール性化合物となった
時、それ自体で高感度に発色するか、それ自体で発色し
ないものは呈色試薬などを添加した時に高感度に発色
し、かつ基質分子全体の溶解能を落とさないものが好ま
しい。グルコース部分と置換フェノキシ基との結合は、
グルコース部分の１位にα型で結合していてもβ型で結
合していてもよい。Ｒ2 の具体例として以下の基が挙げ
られるが、これらに限定されるものではない。
【００１４】ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールス
ルホンフタレイニルオキシ
ルホンフタレイニルオキシ
【００１５】
【化３】
【００１６】ソジオ−４−（４′−ニトロ−２′−スル
ホフェニルアゾ）−１−ナフチルオキシ
ホフェニルアゾ）−１−ナフチルオキシ
【００１７】
【化４】
【００１８】フェノールインド−３′−クロロフェニル
オキシ
オキシ
【００１９】
【化５】
【００２０】レゾルフィニルオキシ
【００２１】
【化６】
【００２２】レザズリニルオキシ
【００２３】
【化７】
【００２４】２−フルオロ−４−（２′−ニトロビニ
ル）フェニルオキシ
ル）フェニルオキシ
【００２５】
【化８】
【００２６】３−フルオロ−４−ニトロフェニルオキシ
【００２７】
【化９】
【００２８】２−フルオロ−４−ニトロフェニルオキシ
【００２９】
【化１０】
【００３０】４−ニトロフェニルオキシ
【００３１】
【化１１】
【００３２】３，４−ジニトロフェニルオキシ
【００３３】
【化１２】
【００３４】４−アミノフェニルオキシ
【００３５】
【化１３】
【００３６】２−アミノフェニルオキシ
【００３７】
【化１４】
【００３８】４−アセチルアミノフェニルオキシ
【００３９】
【化１５】
【００４０】２−アセチルアミノフェニルオキシ
【００４１】
【化１６】
【００４２】４−カルボキシフェニルオキシ
【００４３】
【化１７】
【００４４】２−クロロ−４−ニトロフェニルオキシ
【００４５】
【化１８】
【００４６】本発明の新規な誘導体（Ｉ）の具体例とし
ては以下のものが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。
ては以下のものが挙げられるが、これらに限定されるも
のではない。
【００４７】ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールス
ルホンフタレイニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステ
アロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ルホンフタレイニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステ
アロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００４８】
【化１９】
【００４９】２−フルオロ−４−（２′−ニトロビニ
ル）フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシス
テアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ル）フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシス
テアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００５０】
【化２０】
【００５１】４−カルボキシフェニル ６−Ｏ−リシノ
レオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
レオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００５２】
【化２１】
【００５３】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド
【００５４】
【化２２】
【００５５】３，４−ジニトロフェニル ６−Ｏ−１
６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
【００５６】
【化２３】
【００５７】４−ニトロフェニル ６−Ｏ−リシノレオ
イル−α−Ｄ−グルコピラノシド
イル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００５８】
【化２４】
【００５９】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００６０】
【化２５】
【００６１】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００６２】
【化２６】
【００６３】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
【００６４】
【化２７】
【００６５】３，４−ジニトロフェニル ６−Ｏ−
９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド
９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド
【００６６】
【化２８】
【００６７】３，４−ジニトロフェニル ６−Ｏ−リシ
ノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００６８】
【化２９】
【００６９】２−フルオロ−４−（２’−ニトロビニ
ル）フェニル ６−Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グル
コピラノシド
ル）フェニル ６−Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グル
コピラノシド
【００７０】
【化３０】
【００７１】４−カルボキシフェニル ６−Ｏ−９’，
１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド
１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド
【００７２】
【化３１】
【００７３】４−カルボキシフェニル ６−Ｏ−１６’
−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００７４】
【化３２】
【００７５】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ
−グルコピラノシド
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ
−グルコピラノシド
【００７６】
【化３３】
【００７７】２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシド
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシド
【００７８】
【化３４】
【００７９】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ
−グルコピラノシド
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ
−グルコピラノシド
【００８０】
【化３５】
【００８１】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシド
Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシド
【００８２】
【化３６】
【００８３】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００８４】
【化３７】
【００８５】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００８６】
【化３８】
【００８７】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
【００８８】
【化３９】
【００８９】４−アミノフェニル ６−Ｏ−９’，１
０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド
０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド
【００９０】
【化４０】
【００９１】２−アミノフェニル ６−Ｏ−９’，１
０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド
０’−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド
【００９２】
【化４１】
【００９３】４−アミノフェニル ６−Ｏ−リシノレオ
イル−α−Ｄ−グルコピラノシド
イル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００９４】
【化４２】
【００９５】２−アミノフェニル ６−Ｏ−リシノレオ
イル−β−Ｄ−グルコピラノシド
イル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【００９６】
【化４３】
【００９７】４−アミノフェニル ６−Ｏ−１２’−ヒ
ドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
ドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【００９８】
【化４４】
【００９９】２−アミノフェニル ６−Ｏ−１２’−ヒ
ドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１００】
【化４５】
【０１０１】ソジオ−３，３’−ジクロロフェノールス
ルホンフタレイニル ６−Ｏ−１６’−ヒドロキシパル
ミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ルホンフタレイニル ６−Ｏ−１６’−ヒドロキシパル
ミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１０２】
【化４６】
【０１０３】２−フルオロ−４−（２’−ニトロビニ
ル）フェニル ６−Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイ
ル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ル）フェニル ６−Ｏ−１６’−ヒドロキシパルミトイ
ル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１０４】
【化４７】
【０１０５】４−ニトロフェニル ６−Ｏ−９’，１
０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド
０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド
【０１０６】
【化４８】
【０１０７】レゾルフェニル ６−Ｏ−９’，１０’−
ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１０８】
【化４９】
【０１０９】レゾルフェニル ６−Ｏ−リシノレオイル
−β−Ｄ−グルコピラノシド
−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１１０】
【化５０】
【０１１１】レザズリニル ６−Ｏ−９’，１０’−ジ
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１１２】
【化５１】
【０１１３】レザズリニル ６−Ｏ−リシノレオイル−
β−Ｄ−グルコピラノシド
β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１１４】
【化５２】
【０１１５】３，４−ジニトロフェニル ６−Ｏ−１
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
【０１１６】
【化５３】
【０１１７】ソジオ−４−（４’−ニトロ−２’−スル
ホフェニルアゾ−１−ナフチル ６−Ｏ−１２’−ヒド
ロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ホフェニルアゾ−１−ナフチル ６−Ｏ−１２’−ヒド
ロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１１８】
【化５４】
【０１１９】フェノールインド−３’−クロロフェニル
６−Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−
β−Ｄ−グルコピラノシド
６−Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−
β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１２０】
【化５５】
【０１２１】４−アセチルアミノフェニル ６−Ｏ−１
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
【０１２２】
【化５６】
【０１２３】２−アセチルアミノフェニル ６−Ｏ−１
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
２’−ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド
【０１２４】
【化５７】
【０１２５】２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ
−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−
グルコピラノシド
−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−
グルコピラノシド
【０１２６】
【化５８】
【０１２７】２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ
−１６′−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコピ
ラノシド
−１６′−ヒドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコピ
ラノシド
【０１２８】
【化５９】
【０１２９】４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１６′−ヒ
ドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１３０】
【化６０】
【０１３１】３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド
【０１３２】
【化６１】
【０１３３】４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１２′−ヒ
ドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
ドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１３４】
【化６２】
【０１３５】フェノールインド−３’−クロロフェニル
６−Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−
α−Ｄ−グルコピラノシド
６−Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−
α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１３６】
【化６３】
【０１３７】本発明の糖誘導体（Ｉ）は、例えば、グル
コースをパーアセチル化したパーアセチルグルコピラノ
ースに、αあるいはβ型に、フェノール類（アグリコ
ン）を既知の方法でＯ−グリコシド結合させフェニルグ
リコシド誘導体を得、さらに該誘導体のグルコース部分
の６位水酸基のみを、脂肪酸の反応性誘導体を用いる既
知の方法でエステル化させることにより製造される。こ
こで、フェノール類（アグリコン）をα結合によりグル
コースと結合させる方法は、ペンタアセチルグルコース
を用いる方法により実施することができる（Ｔ．Ｄ．Ａ
ｕｄｉｃｈｙａらにより著された文献、Ｉｎｄｉａｎ
Ｊ．Ｃｈｅｍ．、第９巻、第３１５〜３１７頁（１９７
１）参照）。フェノール類とペンタアセチルグルコース
とを反応させ、その後精製することによりα体をとりだ
し、それを、氷冷下メタノール中で硫酸などを用いて脱
アセチル化して、一般式（ＩＩ）
コースをパーアセチル化したパーアセチルグルコピラノ
ースに、αあるいはβ型に、フェノール類（アグリコ
ン）を既知の方法でＯ−グリコシド結合させフェニルグ
リコシド誘導体を得、さらに該誘導体のグルコース部分
の６位水酸基のみを、脂肪酸の反応性誘導体を用いる既
知の方法でエステル化させることにより製造される。こ
こで、フェノール類（アグリコン）をα結合によりグル
コースと結合させる方法は、ペンタアセチルグルコース
を用いる方法により実施することができる（Ｔ．Ｄ．Ａ
ｕｄｉｃｈｙａらにより著された文献、Ｉｎｄｉａｎ
Ｊ．Ｃｈｅｍ．、第９巻、第３１５〜３１７頁（１９７
１）参照）。フェノール類とペンタアセチルグルコース
とを反応させ、その後精製することによりα体をとりだ
し、それを、氷冷下メタノール中で硫酸などを用いて脱
アセチル化して、一般式（ＩＩ）
【０１３８】
【化６４】
【０１３９】（式中、Ｒ2 は前記と同義）で表されるα
−グルコシドを得ることができる。
−グルコシドを得ることができる。
【０１４０】フェノール類（アグリコン）をβ結合によ
りグルコース部分と結合させる方法は、テトラアセチル
グルコシルハライドを用いる方法により実施することが
できる（Ｓ．Ｔｏｋｕｔａｋｅらにより著された文献、
Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．、第３８巻、第１
３〜１８頁（１９９０）参照）。フェノール類のアルカ
リ金属塩とテトラアセチルグリコシルハライドとを反応
させた糖誘導体を、常温下メタノール中でナトリウムメ
チラートなどを用いて脱アセチル化し、一般式（ＩＩ
Ｉ）
りグルコース部分と結合させる方法は、テトラアセチル
グルコシルハライドを用いる方法により実施することが
できる（Ｓ．Ｔｏｋｕｔａｋｅらにより著された文献、
Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａ．Ｂｕｌｌ．、第３８巻、第１
３〜１８頁（１９９０）参照）。フェノール類のアルカ
リ金属塩とテトラアセチルグリコシルハライドとを反応
させた糖誘導体を、常温下メタノール中でナトリウムメ
チラートなどを用いて脱アセチル化し、一般式（ＩＩ
Ｉ）
【０１４１】
【化６５】
【０１４２】（式中、Ｒ2 は前記と同義）で表されるβ
−グルコシドを得ることができる。
−グルコシドを得ることができる。
【０１４３】グルコース部分の６位の水酸基に、ヒドロ
キシ脂肪酸エステル残基を選択的に導入するには、グル
コシド体に飽和脂肪酸の活性エステル体を作用させる方
法に準じて（Ｓ．Ｒｉｖａら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．、第１１０巻、第５８４〜５８９頁（１９８８）
参照）、ピリジン、トリエチルアミンなどの有機溶媒
中、α−グルコシド（ＩＩ）あるいはβ−グルコシド
（ＩＩＩ）にヒドロキシ脂肪酸の活性エステル体を作用
させ、本発明の糖誘導体（Ｉ）を合成することができ
る。
キシ脂肪酸エステル残基を選択的に導入するには、グル
コシド体に飽和脂肪酸の活性エステル体を作用させる方
法に準じて（Ｓ．Ｒｉｖａら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓ
ｏｃ．、第１１０巻、第５８４〜５８９頁（１９８８）
参照）、ピリジン、トリエチルアミンなどの有機溶媒
中、α−グルコシド（ＩＩ）あるいはβ−グルコシド
（ＩＩＩ）にヒドロキシ脂肪酸の活性エステル体を作用
させ、本発明の糖誘導体（Ｉ）を合成することができ
る。
【０１４４】本発明のリパーゼ測定用試薬は、基質とし
て一般式（Ｉ）で表される糖誘導体を含む。試薬中の糖
誘導体（Ｉ）の濃度は特に限定されないが、通常０．０
１〜３重量％含まれている。本発明の試薬は、糖誘導体
（Ｉ）を、α−グルコシダーゼまたはβ−グルコシダー
ゼの共存下で、リパーゼ含有試料に作用させ、遊離する
フェノール系化合物を、分光光度計などで直接定量する
方法や、グルコシダーゼにより遊離してくるｐ−アミノ
フェノールまたはカルボキシフェノールに４−アミノア
ンチピリンと、過酸化水素およびパーオキシダーゼを添
加し、生成したキノン色素を連続的に発色させたり、ま
た、グルコシダーゼにより遊離してくるｐ−アミノフェ
ノールまたはカルボキシフェノールにアニリン誘導体お
よび、ラッカーゼまたはフェノールオキシダーゼ等を添
加し、生成したキノン色素を連続的に発色させたりして
分光光度計などで定量することによって、リパーゼ活性
を測定するものである。したがって、本発明の試薬に
は、基質である糖誘導体（Ｉ）に加えて、通常、α−グ
ルコシダーゼまたはβ−グルコシダーゼ（共役酵素
系）、および必要に応じてその他の添加剤が含有されて
いる。
て一般式（Ｉ）で表される糖誘導体を含む。試薬中の糖
誘導体（Ｉ）の濃度は特に限定されないが、通常０．０
１〜３重量％含まれている。本発明の試薬は、糖誘導体
（Ｉ）を、α−グルコシダーゼまたはβ−グルコシダー
ゼの共存下で、リパーゼ含有試料に作用させ、遊離する
フェノール系化合物を、分光光度計などで直接定量する
方法や、グルコシダーゼにより遊離してくるｐ−アミノ
フェノールまたはカルボキシフェノールに４−アミノア
ンチピリンと、過酸化水素およびパーオキシダーゼを添
加し、生成したキノン色素を連続的に発色させたり、ま
た、グルコシダーゼにより遊離してくるｐ−アミノフェ
ノールまたはカルボキシフェノールにアニリン誘導体お
よび、ラッカーゼまたはフェノールオキシダーゼ等を添
加し、生成したキノン色素を連続的に発色させたりして
分光光度計などで定量することによって、リパーゼ活性
を測定するものである。したがって、本発明の試薬に
は、基質である糖誘導体（Ｉ）に加えて、通常、α−グ
ルコシダーゼまたはβ−グルコシダーゼ（共役酵素
系）、および必要に応じてその他の添加剤が含有されて
いる。
【０１４５】当該測定に用いられるα−グルコシダーゼ
およびβ−グルコシダーゼの起源は特に限定されない。
例えば、酵母起源のα−グルコシダーゼ、アーモンドか
ら得られるβ−グルコシダーゼが好適に利用されうる。
なお、アグリコンがα型に結合した基質を用いる場合に
は、共役酵素系としてはα−グルコシダーゼが使用さ
れ、β型に結合した基質を用いる場合には、β−グルコ
シダーゼが使用される。
およびβ−グルコシダーゼの起源は特に限定されない。
例えば、酵母起源のα−グルコシダーゼ、アーモンドか
ら得られるβ−グルコシダーゼが好適に利用されうる。
なお、アグリコンがα型に結合した基質を用いる場合に
は、共役酵素系としてはα−グルコシダーゼが使用さ
れ、β型に結合した基質を用いる場合には、β−グルコ
シダーゼが使用される。
【０１４６】本発明の試薬には、カルシウム塩、ナトリ
ウム塩、マグネシウム塩、コール酸塩、コリパーゼなど
のリパーゼおよび共役酵素の活性化剤および安定化剤を
配合することが好ましい。他の添加剤として、緩衝剤、
界面活性剤、防腐剤などが挙げられる。
ウム塩、マグネシウム塩、コール酸塩、コリパーゼなど
のリパーゼおよび共役酵素の活性化剤および安定化剤を
配合することが好ましい。他の添加剤として、緩衝剤、
界面活性剤、防腐剤などが挙げられる。
【０１４７】本発明の試薬を使用するリパーゼ活性測定
における基質分解の反応式を例を挙げて説明する。
〔 〕内は省略名である。
における基質分解の反応式を例を挙げて説明する。
〔 〕内は省略名である。
【０１４８】（１） ソジオ−３，３′−ジクロロフェ
ノールスルホンフタレイニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロ
キシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド〔６−１
２′−ヒドロキシステアロイル ソジオ−３，３′−ジ
クロロフェノールスルホンフタレイニル−β−グルコシ
ド〕
ノールスルホンフタレイニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロ
キシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド〔６−１
２′−ヒドロキシステアロイル ソジオ−３，３′−ジ
クロロフェノールスルホンフタレイニル−β−グルコシ
ド〕
【０１４９】
【化６６】
【０１５０】を基質とする場合：
【０１５１】６−１２′−ヒドロキシステアロイル
ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールスルホンフタレ
イニル−β−グルコシドにリパーゼを作用させることに
より、ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールスルホン
フタレイニル−β−グルコシド
ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールスルホンフタレ
イニル−β−グルコシドにリパーゼを作用させることに
より、ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールスルホン
フタレイニル−β−グルコシド
【０１５２】
【化６７】
【０１５３】と１２−ヒドロキシステアリン酸に分解さ
れる。
れる。
【０１５４】ソジオ−３，３′−ジクロロフェノール
スルホンフタレイニル−β−グルコシドにβグルコシダ
ーゼを作用させることにより、３，３′−ジクロロフェ
ノールスルホンフタレイン
スルホンフタレイニル−β−グルコシドにβグルコシダ
ーゼを作用させることにより、３，３′−ジクロロフェ
ノールスルホンフタレイン
【０１５５】
【化６８】
【０１５６】とグルコースに分解される。
【０１５７】（２） ３，４−ジニトロフェニル ６−
Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド〔６−１６′−ヒドロキシパルミトイル
３，４−ジニトロフェニル−β−グルコシド〕
Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド〔６−１６′−ヒドロキシパルミトイル
３，４−ジニトロフェニル−β−グルコシド〕
【０１５８】
【化６９】
【０１５９】を基質とする場合： ６−１６′−ヒドロキシパルミトイル ３，４−ジニ
トロフェニル−β−グルコシドにリパーゼを作用させる
ことにより、３，４−ジニトロフェニル−β−グルコシ
ド
トロフェニル−β−グルコシドにリパーゼを作用させる
ことにより、３，４−ジニトロフェニル−β−グルコシ
ド
【０１６０】
【化７０】
【０１６１】と１６−ヒドロキシパルミチン酸に分解さ
れる。
れる。
【０１６２】３，４−ジニトロフェニル−β−グルコ
シドにβグルコシダーゼを作用させることにより、３，
４−ジニトロフェノールとグルコースに分解される。
シドにβグルコシダーゼを作用させることにより、３，
４−ジニトロフェノールとグルコースに分解される。
【０１６３】（３） ４−ニトロフェニル ６−Ｏ−リ
シノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド〔６−リシノ
レオイル ４−ニトロフェニル−α−グルコシド〕
シノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシド〔６−リシノ
レオイル ４−ニトロフェニル−α−グルコシド〕
【０１６４】
【化７１】
【０１６５】を基質とする場合：
【０１６６】６−リシノレオイル ４−ニトロフェニ
ル−α−グルコシドにリパーゼを作用させることによ
り、４−ニトロフェニル−α−グルコシドとリシノール
酸に分解される。
ル−α−グルコシドにリパーゼを作用させることによ
り、４−ニトロフェニル−α−グルコシドとリシノール
酸に分解される。
【０１６７】４−ニトロフェニル−α−グルコシドに
α−グルコシダーゼを作用させると、４−ニトロフェノ
ールとグルコースに分解される。
α−グルコシダーゼを作用させると、４−ニトロフェノ
ールとグルコースに分解される。
【０１６８】上記反応で遊離したフェノール系化合物を
上記に示した方法によって、リパーゼ活性を測定するこ
とができる。また必要に応じて適当な手段によってフェ
ノール系化合物を連続的に発色させて測定してもよい。
本発明のリパーゼ活性測定試薬は、基質である糖誘導体
（Ｉ）と共役酵素とを混合した一液化型の試薬として
も、基質と共役酵素を使用する直前までは各々別に保存
する、いわゆる二液化型の試薬としても利用される。
上記に示した方法によって、リパーゼ活性を測定するこ
とができる。また必要に応じて適当な手段によってフェ
ノール系化合物を連続的に発色させて測定してもよい。
本発明のリパーゼ活性測定試薬は、基質である糖誘導体
（Ｉ）と共役酵素とを混合した一液化型の試薬として
も、基質と共役酵素を使用する直前までは各々別に保存
する、いわゆる二液化型の試薬としても利用される。
【０１６９】
【発明の効果】本発明の糖誘導体（Ｉ）は、血液中に共
存するエステラーゼ、コリンエステラーゼの作用を受け
ずリパーゼに対する特異性が高く、さらに溶解性にも優
れている。従って糖誘導体（Ｉ）を基質として含有する
本発明のリパーゼ活性測定試薬は、リパーゼの高感度測
定を可能にする。さらに本発明の試薬を使用する測定法
では、レートアッセイ法を適用することができるので、
簡便にリパーゼ活性の測定を行うことができる。
存するエステラーゼ、コリンエステラーゼの作用を受け
ずリパーゼに対する特異性が高く、さらに溶解性にも優
れている。従って糖誘導体（Ｉ）を基質として含有する
本発明のリパーゼ活性測定試薬は、リパーゼの高感度測
定を可能にする。さらに本発明の試薬を使用する測定法
では、レートアッセイ法を適用することができるので、
簡便にリパーゼ活性の測定を行うことができる。
【０１７０】
【実施例】以下、実施例および比較例により本発明をさ
らに詳細に説明する。
らに詳細に説明する。
【０１７１】実施例１ ３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−９′，１
０′−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシドの合成
０′−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシドの合成
【０１７２】
【化７２】
【０１７３】３−フルオロ−４−ニトロフェニル−α−
Ｄ−グルコピラノシドを１ｇ、２−クロロ−４−ニトロ
フェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレートを１．
４９ｇ、および４Ａモレキュラーシーブスで脱水を行っ
たピリジン２５ｍｌを温度計を付した１００ｍｌ四つ口
フラスコに投入して均一な溶液とし、５５〜６０℃で４
８時間撹拌した。反応液を２００ｍｌナス型フラスコに
移し、ロータリーエバポレータで減圧下濃縮を行った。
濃縮物を酢酸エチル２００ｍｌに溶解し、３００ｍｌ分
液ロートに移した。酢酸エチル層を、１．２Ｎ塩酸水５
０ｍｌで２回分液洗浄し、濃縮残中の残存ピリジンを除
去し、５％炭酸カリ水５０ｍｌで２回分液洗浄して、遊
離した３−フルオロ−４−ニトロフェノールおよび２−
クロロ−４−ニトロフェノールを除去し、さらに、酢酸
エチル層を蒸留水５０ｍｌで３回洗浄した。また、この
分液操作で未反応の３−フルオロ−４−ニトロフェニル
−α−Ｄ−グルコピラノシドも除去された。酢酸エチル
層を濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１
０％メタノール−酢酸エチル）により、ＴＬＣ（薄層ク
ロマトグラフィー）でシングルスポット（Ｒｆ ０．２
２）になるまで徹底的に精製すると、３−フルオロ−４
−ニトロフェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキ
システアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの白色結晶
が１．２６ｇ得られた。 収率：６５％ 融点：１０３〜１０５℃ 図１に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
またＴＬＣの条件は、次の通りである。 薄層板：メルク社製、シリカゲル６０Ｆ254 ｓを予め塗
布したＨＰＴＬＣ板 検出：展開後、乾燥し、５％硫酸−メタノールを薄層板
に噴霧し、電熱器などにより、スポットを炭化させる。 展開相：酢酸エチル、メタノール、水（体積比率＝５
０：１：１）
Ｄ−グルコピラノシドを１ｇ、２−クロロ−４−ニトロ
フェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレートを１．
４９ｇ、および４Ａモレキュラーシーブスで脱水を行っ
たピリジン２５ｍｌを温度計を付した１００ｍｌ四つ口
フラスコに投入して均一な溶液とし、５５〜６０℃で４
８時間撹拌した。反応液を２００ｍｌナス型フラスコに
移し、ロータリーエバポレータで減圧下濃縮を行った。
濃縮物を酢酸エチル２００ｍｌに溶解し、３００ｍｌ分
液ロートに移した。酢酸エチル層を、１．２Ｎ塩酸水５
０ｍｌで２回分液洗浄し、濃縮残中の残存ピリジンを除
去し、５％炭酸カリ水５０ｍｌで２回分液洗浄して、遊
離した３−フルオロ−４−ニトロフェノールおよび２−
クロロ−４−ニトロフェノールを除去し、さらに、酢酸
エチル層を蒸留水５０ｍｌで３回洗浄した。また、この
分液操作で未反応の３−フルオロ−４−ニトロフェニル
−α−Ｄ−グルコピラノシドも除去された。酢酸エチル
層を濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１
０％メタノール−酢酸エチル）により、ＴＬＣ（薄層ク
ロマトグラフィー）でシングルスポット（Ｒｆ ０．２
２）になるまで徹底的に精製すると、３−フルオロ−４
−ニトロフェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキ
システアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの白色結晶
が１．２６ｇ得られた。 収率：６５％ 融点：１０３〜１０５℃ 図１に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
またＴＬＣの条件は、次の通りである。 薄層板：メルク社製、シリカゲル６０Ｆ254 ｓを予め塗
布したＨＰＴＬＣ板 検出：展開後、乾燥し、５％硫酸−メタノールを薄層板
に噴霧し、電熱器などにより、スポットを炭化させる。 展開相：酢酸エチル、メタノール、水（体積比率＝５
０：１：１）
【０１７４】実施例２ ２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１２′−
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１７５】
【化７３】
【０１７６】２−フルオロ−４−ニトロフェニル−β−
Ｄ−グルコピラノシドを１ｇ、２−クロロ−４−ニトロ
フェニル １２−ヒドロキシステアレートを１．４２
ｇ、および４Ａモレキュラーシーブスで脱水を行ったピ
リジン３５ｍｌを、温度計を付した１００ｍｌ四つ口フ
ラスコに投入して均一な溶液とし、５５〜６０℃で６０
時間撹拌した。反応液を２００ｍｌナス型フラスコに移
し、ロータリーエバポレータで減圧下濃縮を行った。濃
縮物を酢酸エチル２００ｍｌに溶解し、３００ｍｌ分液
ロートに移した。酢酸エチル層を、１．２Ｎ塩酸水５０
ｍｌで分液洗浄し、濃縮残中の残存ピリジンを除去し、
５％炭酸カリ水５０ｍｌで分液洗浄して、遊離した２−
フルオロ−４−ニトロフェノールおよび２−クロロ−４
−ニトロフェノールを除去し、さらに、酢酸エチル層を
蒸留水５０ｍｌで２回洗浄した。また、この分液操作で
未反応の２−フルオロ−４−ニトロフェニル−β−Ｄ−
グルコピラノシドも除去された。酢酸エチル層を濃縮
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％メタノ
ール−酢酸エチル）により、ＴＬＣ（薄層クロマトグラ
フィー）でシングルスポット（Ｒｆ ０．３４）になる
まで徹底的に精製すると、２−フルオロ−４−ニトロフ
ェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β
−Ｄ−グルコピラノシドの白色結晶が１．３６ｇ得られ
た。 収率：７２％ 融点：９５〜９８℃ 図２に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
またＴＬＣの条件は、次の通りである。 薄層板：メルク社製、シリカゲル６０Ｆ254 ｓを予め塗
布したＨＰＴＬＣ板 検出：展開後、乾燥し、５％硫酸−メタノールを薄層板
に噴霧し、電熱器などにより炭化させる。 展開相：酢酸エチル、メタノール、水（体積比率＝１０
０：１：１）
Ｄ−グルコピラノシドを１ｇ、２−クロロ−４−ニトロ
フェニル １２−ヒドロキシステアレートを１．４２
ｇ、および４Ａモレキュラーシーブスで脱水を行ったピ
リジン３５ｍｌを、温度計を付した１００ｍｌ四つ口フ
ラスコに投入して均一な溶液とし、５５〜６０℃で６０
時間撹拌した。反応液を２００ｍｌナス型フラスコに移
し、ロータリーエバポレータで減圧下濃縮を行った。濃
縮物を酢酸エチル２００ｍｌに溶解し、３００ｍｌ分液
ロートに移した。酢酸エチル層を、１．２Ｎ塩酸水５０
ｍｌで分液洗浄し、濃縮残中の残存ピリジンを除去し、
５％炭酸カリ水５０ｍｌで分液洗浄して、遊離した２−
フルオロ−４−ニトロフェノールおよび２−クロロ−４
−ニトロフェノールを除去し、さらに、酢酸エチル層を
蒸留水５０ｍｌで２回洗浄した。また、この分液操作で
未反応の２−フルオロ−４−ニトロフェニル−β−Ｄ−
グルコピラノシドも除去された。酢酸エチル層を濃縮
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（５％メタノ
ール−酢酸エチル）により、ＴＬＣ（薄層クロマトグラ
フィー）でシングルスポット（Ｒｆ ０．３４）になる
まで徹底的に精製すると、２−フルオロ−４−ニトロフ
ェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β
−Ｄ−グルコピラノシドの白色結晶が１．３６ｇ得られ
た。 収率：７２％ 融点：９５〜９８℃ 図２に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
またＴＬＣの条件は、次の通りである。 薄層板：メルク社製、シリカゲル６０Ｆ254 ｓを予め塗
布したＨＰＴＬＣ板 検出：展開後、乾燥し、５％硫酸−メタノールを薄層板
に噴霧し、電熱器などにより炭化させる。 展開相：酢酸エチル、メタノール、水（体積比率＝１０
０：１：１）
【０１７７】実施例３ ４−ニトロフェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロ
キシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
キシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１７８】
【化７４】
【０１７９】ピリジン中、４−ニトロフェニル−α−Ｄ
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
９，１０−ジヒドロキシステアレートを作用させ、実
施例１と同様の方法で合成した。 融点：１１６〜１２０℃ 図３に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
９，１０−ジヒドロキシステアレートを作用させ、実
施例１と同様の方法で合成した。 融点：１１６〜１２０℃ 図３に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１８０】実施例４ ３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−９′，１
０′−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド
０′−ジヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド
【０１８１】
【化７５】
【０１８２】ピリジン中、３−フルオロ−４−ニトロフ
ェニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−
ニトロフェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレート
を作用させ、実施例１と同様の方法で合成した。 融点：９４〜９５℃ 図４に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
ェニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−
ニトロフェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレート
を作用させ、実施例１と同様の方法で合成した。 融点：９４〜９５℃ 図４に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１８３】実施例５ ２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１６′−ヒ
ドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
ドロキシパルミトイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１８４】
【化７６】
【０１８５】ピリジン中、２−クロロ−４−ニトロフェ
ニル−α−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニ
トロフェニル １６−ヒドロキシパルミテートを作用さ
せ、実施例２と同様の方法で合成した。 融点：９９〜１０１℃ 図５に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
ニル−α−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニ
トロフェニル １６−ヒドロキシパルミテートを作用さ
せ、実施例２と同様の方法で合成した。 融点：９９〜１０１℃ 図５に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１８６】実施例６ ４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１６′−ヒドロキシパル
ミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ミトイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０１８７】
【化７７】
【０１８８】ピリジン中、４−ニトロフェニル−β−Ｄ
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
１６−ヒドロキシパルミテートを作用させ、実施例２
と同様の方法で合成した。 融点：８３〜８６℃ 図６に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
１６−ヒドロキシパルミテートを作用させ、実施例２
と同様の方法で合成した。 融点：８３〜８６℃ 図６に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１８９】実施例７ ３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１２′−
ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１９０】
【化７８】
【０１９１】ピリジン中、３−フルオロ−４−ニトロフ
ェニル−α−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−
ニトロフェニル １２−ヒドロキシステアレートを作用
させ、実施例２と同様の方法で合成した。 融点：９１〜９３℃ 図７に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
ェニル−α−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−
ニトロフェニル １２−ヒドロキシステアレートを作用
させ、実施例２と同様の方法で合成した。 融点：９１〜９３℃ 図７に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１９２】実施例８ ４−ニトロフェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステ
アロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
アロイル−α−Ｄ−グルコピラノシド
【０１９３】
【化７９】
【０１９４】ピリジン中、４−ニトロフェニル−α−Ｄ
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
１２−ヒドロキシステアレートを作用させ、実施例２
と同様の方法で合成した。 融点：１０８〜１０９℃ 図８に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
１２−ヒドロキシステアレートを作用させ、実施例２
と同様の方法で合成した。 融点：１０８〜１０９℃ 図８に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１９５】実施例９ ４−ニトロフェニル ６−Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ
−グルコピラノシド
−グルコピラノシド
【０１９６】
【化８０】
【０１９７】ピリジン中、４−ニトロフェニル−α−Ｄ
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
リシノレエートを作用させ、実施例２と同様の方法で
合成した。 融点：高粘性オイル状 図９に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
リシノレエートを作用させ、実施例２と同様の方法で
合成した。 融点：高粘性オイル状 図９に赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）を示す。
【０１９８】実施例１０ フェノールインド−３’−クロロフェニル ６−Ｏ−
９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グ
ルコピラノシド
９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グ
ルコピラノシド
【０１９９】
【化８１】
【０２００】実施例１に準じて、ピリジン中、フェノー
ルインド−３’−クロロフェニル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル ９，１０−
ジヒドロキシステアレートを作用させることにより合成
できる。
ルインド−３’−クロロフェニル−α−Ｄ−グルコピラ
ノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル ９，１０−
ジヒドロキシステアレートを作用させることにより合成
できる。
【０２０１】実施例１１ ３，４−ジニトロフェニル ６−Ｏ−９’，１０’−ジ
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ヒドロキシステアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０２０２】
【化８２】
【０２０３】実施例１に準じて、ピリジン中、３，４−
ジニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−ク
ロロ−４−ニトロフェニル ９，１０−ジヒドロキシス
テアレートを作用させることにより合成できる。
ジニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−ク
ロロ−４−ニトロフェニル ９，１０−ジヒドロキシス
テアレートを作用させることにより合成できる。
【０２０４】実施例１２ ソジオ−３，３′−ジクロロフェノールスルホンフタレ
イニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β
−Ｄ−グルコピラノシド
イニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−β
−Ｄ−グルコピラノシド
【０２０５】
【化８３】
【０２０６】実施例２に準じて、ピリジン中、ソジオ−
３，３′−ジクロロフェノールスルホンフタレイニル−
β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフ
ェニル １２−ヒドロキシステアレートを作用させるこ
とにより合成できる。
３，３′−ジクロロフェノールスルホンフタレイニル−
β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフ
ェニル １２−ヒドロキシステアレートを作用させるこ
とにより合成できる。
【０２０７】実施例１３ ２−フルオロ−４−（２’−ニトロビニル）フェニル
６−Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
６−Ｏ−リシノレオイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０２０８】
【化８４】
【０２０９】実施例２に準じて、ピリジン中、２−フル
オロ−４−（２’−ニトロビニル）フェニル−β−Ｄ−
グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
リシノレエートを作用させることにより合成できる。
オロ−４−（２’−ニトロビニル）フェニル−β−Ｄ−
グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニトロフェニル
リシノレエートを作用させることにより合成できる。
【０２１０】実施例１４ レザズリニル ６−Ｏ−９’，１０’−ジヒドロキシス
テアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
テアロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０２１１】
【化８５】
【０２１２】実施例１に準じて、ピリジン中、レザズリ
ニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニ
トロフェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレートを
作用させることにより合成できる。
ニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−４−ニ
トロフェニル ９，１０−ジヒドロキシステアレートを
作用させることにより合成できる。
【０２１３】実施例１５ ソジオ−４−（４’−ニトロ−２’−スルホフェニルア
ゾ）−１−ナフチル ６−Ｏ−１２’−ヒドロキシステ
アロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
ゾ）−１−ナフチル ６−Ｏ−１２’−ヒドロキシステ
アロイル−β−Ｄ−グルコピラノシド
【０２１４】
【化８６】
【０２１５】実施例２に準じて、ピリジン中、ソジオ−
４−（４’−ニトロ−２’−スルホフェニルアゾ）−１
−ナフチル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−
４−ニトロフェニル １２−ヒドロキシステアレートを
作用させることにより合成できる。
４−（４’−ニトロ−２’−スルホフェニルアゾ）−１
−ナフチル−β−Ｄ−グルコピラノシドに２−クロロ−
４−ニトロフェニル １２−ヒドロキシステアレートを
作用させることにより合成できる。
【０２１６】実施例１６ 下記組成の試薬を調製し、リパーゼ活性を測定した。 ・トリスバッファー（ｐＨ８．０） ５０ｍＭ ・ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル ０．２％ ・デオキシコール酸ナトリウム ２ｍＭ ・α−グルコシダーゼ １６０Ｕ／ｍｌ ・塩化カルシウム １ｍＭ ・塩化ナトリウム ４０ｍＭ ・塩化マグネシウム ２ｍＭ ・３−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ− ３ｍＭ ９’，１０’−ジヒドロキシステアロイル−α −グルコシド 上記試薬液３．０ｍｌを３７℃に予備加温する。（１）
試薬液に膵リパーゼ試薬（フナコシ製）１００μｌを加
えて混合するものと、（２）試薬液に血清試薬（ファル
マシア製）１００μｌを加えて混合するもの、それぞれ
について３７℃で４００ｎｍにおける吸光度変化を連続
的に測定し、１分間あたりの吸光度変化量（リパーゼ活
性の指標となる）を求めた。ブランクとして、試料の代
わりに水を１００μｌを用いた。結果を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０４２ 血清 ０．０２７ また上記組成試薬液３．０ｍｌを３７℃に予備加温し、
（１）試薬液にカルボキシエステラーゼ（ベーリンガー
・マンハイム社）試料１００μｌを加えて混合するもの
と、（２）試薬液にコリンエステラーゼ（コスモ・バイ
オ社）試料１００μｌを加えて混合するもの、それぞれ
について３７℃で４００ｎｍにおける吸光度変化を連続
的に測定し、１分間あたりの吸光度変化量を求めた。ブ
ランクとして、試料の代わりに水１００μｌを用いた。
以下に示すようにエステラーゼもコリンエステラーゼも
ほとんど作用しなかった。 ブランク変化 ０．００２ カルボキシエステラーゼ ０．００３ コリンエステラーゼ ０．００４
試薬液に膵リパーゼ試薬（フナコシ製）１００μｌを加
えて混合するものと、（２）試薬液に血清試薬（ファル
マシア製）１００μｌを加えて混合するもの、それぞれ
について３７℃で４００ｎｍにおける吸光度変化を連続
的に測定し、１分間あたりの吸光度変化量（リパーゼ活
性の指標となる）を求めた。ブランクとして、試料の代
わりに水を１００μｌを用いた。結果を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０４２ 血清 ０．０２７ また上記組成試薬液３．０ｍｌを３７℃に予備加温し、
（１）試薬液にカルボキシエステラーゼ（ベーリンガー
・マンハイム社）試料１００μｌを加えて混合するもの
と、（２）試薬液にコリンエステラーゼ（コスモ・バイ
オ社）試料１００μｌを加えて混合するもの、それぞれ
について３７℃で４００ｎｍにおける吸光度変化を連続
的に測定し、１分間あたりの吸光度変化量を求めた。ブ
ランクとして、試料の代わりに水１００μｌを用いた。
以下に示すようにエステラーゼもコリンエステラーゼも
ほとんど作用しなかった。 ブランク変化 ０．００２ カルボキシエステラーゼ ０．００３ コリンエステラーゼ ０．００４
【０２１７】実施例１７ 下記組成の試薬を調製し、リパーゼ活性を測定した。 ・トリスバッファー（ｐＨ８．０） ５０ｍＭ ・ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル ０．２％ ・デオキシコール酸ナトリウム ２ｍＭ ・β−グルコシダーゼ １５０Ｕ／ｍｌ ・塩化カルシウム １ｍＭ ・塩化ナトリウム ４０ｍＭ ・塩化マグネシウム ２ｍＭ ・２−フルオロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ− ２ｍＭ １２’−ヒドロキシステアロイル−β−グルコシド 上記試薬を用いて実施例１６と同様の操作を行った。結
果を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０３０ 血清 ０．０１９
果を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０３０ 血清 ０．０１９
【０２１８】比較例１ 特公平６−７６４３１号公報記載の方法により、２−ク
ロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイル−β
−グルコシドを合成した。以下にその方法を簡単に示
す。２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−グルコシド
１ｇ、ステアリン酸ビニル２．７７ｇおよびリパーゼＢ
〔シュードモナス フラジ（Pseudomonasfragi)２２−
３９Ｂ由来〕９０ｍｇをアセトン１３０ｍｌに懸濁さ
せ、２４〜２６℃で攪拌下４８時間反応を行った。酵素
を濾過により除き、反応液を濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製すると、
２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイ
ル−β−グルコシドの白色結晶が１．１３ｇ得られた。
収率６３％。融点７４〜７６℃。実施例１６および実施
例１７に用いた試薬液への溶解性を調べたが、該化合物
は１ｍＭ程度しか溶解しなかった。 ・トリスバッファー（ｐＨ８．０） ５０ｍＭ ・ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル ０．２％ ・デオキシコール酸ナトリウム ２ｍＭ ・塩化カルシウム １ｍＭ ・塩化ナトリウム ４０ｍＭ ・塩化マグネシウム ２ｍＭ ・β−グルコシダーゼ １２０Ｕ／ｍｌ ・２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ− １ｍＭ ステアロイル−β−グルコシド 上記試薬を用い実施例１６と同様の操作を行った。結果
を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０１４ 血清 ０．００９
ロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイル−β
−グルコシドを合成した。以下にその方法を簡単に示
す。２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−グルコシド
１ｇ、ステアリン酸ビニル２．７７ｇおよびリパーゼＢ
〔シュードモナス フラジ（Pseudomonasfragi)２２−
３９Ｂ由来〕９０ｍｇをアセトン１３０ｍｌに懸濁さ
せ、２４〜２６℃で攪拌下４８時間反応を行った。酵素
を濾過により除き、反応液を濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（酢酸エチル）により精製すると、
２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイ
ル−β−グルコシドの白色結晶が１．１３ｇ得られた。
収率６３％。融点７４〜７６℃。実施例１６および実施
例１７に用いた試薬液への溶解性を調べたが、該化合物
は１ｍＭ程度しか溶解しなかった。 ・トリスバッファー（ｐＨ８．０） ５０ｍＭ ・ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル ０．２％ ・デオキシコール酸ナトリウム ２ｍＭ ・塩化カルシウム １ｍＭ ・塩化ナトリウム ４０ｍＭ ・塩化マグネシウム ２ｍＭ ・β−グルコシダーゼ １２０Ｕ／ｍｌ ・２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ− １ｍＭ ステアロイル−β−グルコシド 上記試薬を用い実施例１６と同様の操作を行った。結果
を以下に示す。 ブランク変化 ０．００２ 膵リパーゼ ０．０１４ 血清 ０．００９
【０２１９】比較例２ 特公平６−７６４３１号公報記載の方法により、２−ク
ロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイル−β
−マルトシドを合成した。以下にその方法を簡単に示
す。２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−マルトシド
１ｇ、ステアリン酸ビニル１．８７ｇおよびリパーゼＢ
〔シュードモナス フラジ（Pseudomonasfragi)２２−
３９Ｂ由来〕６０ｍｇをアセトン１００ｍｌに懸濁さ
せ、２４〜２６℃で攪拌下４８時間反応を行った。酵素
を濾過により除き、反応液を濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（１０％メタノール−酢酸エチル）
により精製すると２−クロロ−４−ニトロフェニル ６
−Ｏ−ステアロイル−β−マルトシドの白色結晶が０．
７２ｇ得られた。収率４７％。融点１０６〜１０７℃。
ロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ−ステアロイル−β
−マルトシドを合成した。以下にその方法を簡単に示
す。２−クロロ−４−ニトロフェニル−β−マルトシド
１ｇ、ステアリン酸ビニル１．８７ｇおよびリパーゼＢ
〔シュードモナス フラジ（Pseudomonasfragi)２２−
３９Ｂ由来〕６０ｍｇをアセトン１００ｍｌに懸濁さ
せ、２４〜２６℃で攪拌下４８時間反応を行った。酵素
を濾過により除き、反応液を濃縮し、シリカゲルカラム
クロマトグラフィー（１０％メタノール−酢酸エチル）
により精製すると２−クロロ−４−ニトロフェニル ６
−Ｏ−ステアロイル−β−マルトシドの白色結晶が０．
７２ｇ得られた。収率４７％。融点１０６〜１０７℃。
【０２２０】 ・トリスバッファー（ｐＨ８．０） ５０ｍＭ ・ポリオキシエチレンオクチルフェニルエーテル ０．２％ ・デオキシコール酸ナトリウム ２ｍＭ ・塩化カルシウム １ｍＭ ・塩化ナトリウム ４０ｍＭ ・塩化マグネシウム ２ｍＭ ・α−グルコシダーゼ １６０Ｕ／ｍｌ ・グルコアミラーゼ １５Ｕ／ｍｌ ・β−グルコシダーゼ １８０Ｕ／ｍｌ ・２−クロロ−４−ニトロフェニル ６−Ｏ− ３ｍＭ ステアロイル−β−マルトシド 上記試薬を用いて、実施例１６と同様の操作を行った。
以下に示すようにリパーゼはほとんど作用しなかった。 ブランク変化 ０．００１ 膵リパーゼ ０．００３ 血清 ０．００２
以下に示すようにリパーゼはほとんど作用しなかった。 ブランク変化 ０．００１ 膵リパーゼ ０．００３ 血清 ０．００２
【図１】実施例１で合成した３−フルオロ−４−ニトロ
フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステア
ロイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペク
トル（ＩＲチャート）である。
フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステア
ロイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペク
トル（ＩＲチャート）である。
【図２】実施例２で合成した２−フルオロ−４−ニトロ
フェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−
β−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（Ｉ
Ｒチャート）である。
フェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−
β−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（Ｉ
Ｒチャート）である。
【図３】実施例３で合成した４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャ
ート）である。
Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステアロイル−α−Ｄ
−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャ
ート）である。
【図４】実施例４で合成した３−フルオロ−４−ニトロ
フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステア
ロイル−β−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペク
トル（ＩＲチャート）である。
フェニル ６−Ｏ−９′，１０′−ジヒドロキシステア
ロイル−β−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペク
トル（ＩＲチャート）である。
【図５】実施例５で合成した２−クロロ−４−ニトロフ
ェニル ６−Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−α
−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲ
チャート）である。
ェニル ６−Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−α
−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲ
チャート）である。
【図６】実施例６で合成した４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）で
ある。
Ｏ−１６′−ヒドロキシパルミトイル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）で
ある。
【図７】実施例７で合成した３−フルオロ−４−ニトロ
フェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−
α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（Ｉ
Ｒチャート）である。
フェニル ６−Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−
α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外線吸収スペクトル（Ｉ
Ｒチャート）である。
【図８】実施例８で合成した４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）で
ある。
Ｏ−１２′−ヒドロキシステアロイル−α−Ｄ−グルコ
ピラノシドの赤外線吸収スペクトル（ＩＲチャート）で
ある。
【図９】実施例９で合成した４−ニトロフェニル ６−
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外
線吸収スペクトル（ＩＲチャート）である。
Ｏ−リシノレオイル−α−Ｄ−グルコピラノシドの赤外
線吸収スペクトル（ＩＲチャート）である。
Claims (4)
- 【請求項１】 一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｒ1 は炭素数１２以上３０以下のヒドロキシ脂
肪酸エステル残基を示し、Ｒ2 は置換フェノキシ基を示
し、波線はαまたはβ結合を示す）で表される糖誘導
体。 - 【請求項２】 フェニルグリコシド誘導体のグルコース
部分の６位の水酸基のみをエステル化させることからな
る請求項１に記載の糖誘導体の製造法。 - 【請求項３】 請求項１に記載の糖誘導体を基質として
含有するリパーゼ活性測定用試薬。 - 【請求項４】 請求項３に記載のリパーゼ活性測定用試
薬を用いるリパーゼ活性測定方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7012297A JPH107693A (ja) | 1996-03-25 | 1997-03-24 | 新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6852396 | 1996-03-25 | ||
| JP8-68523 | 1996-03-25 | ||
| JP7012297A JPH107693A (ja) | 1996-03-25 | 1997-03-24 | 新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH107693A true JPH107693A (ja) | 1998-01-13 |
Family
ID=26409737
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7012297A Pending JPH107693A (ja) | 1996-03-25 | 1997-03-24 | 新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH107693A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4890291A (en) * | 1987-03-20 | 1989-12-26 | Fanuc Ltd. | Laser oscillator control circuit |
| JP2014530278A (ja) * | 2011-10-03 | 2014-11-17 | ユニヴェルシテ ドゥ ボルドー | 糖脂質型化合物からのポリウレタンおよびポリエステルの製造 |
| JP2017169529A (ja) * | 2016-03-25 | 2017-09-28 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | ライソゾーム病３疾患責任酵素の迅速マススクリーニング検査法 |
-
1997
- 1997-03-24 JP JP7012297A patent/JPH107693A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4890291A (en) * | 1987-03-20 | 1989-12-26 | Fanuc Ltd. | Laser oscillator control circuit |
| JP2014530278A (ja) * | 2011-10-03 | 2014-11-17 | ユニヴェルシテ ドゥ ボルドー | 糖脂質型化合物からのポリウレタンおよびポリエステルの製造 |
| US9695269B2 (en) | 2011-10-03 | 2017-07-04 | Université De Bordeaux | Preparation of polyurethanes and polyesters from glycolipid type compounds |
| JP2017169529A (ja) * | 2016-03-25 | 2017-09-28 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | ライソゾーム病３疾患責任酵素の迅速マススクリーニング検査法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4716222A (en) | Substrates for hydrolases | |
| JPH0466864B2 (ja) | ||
| JPH027589B2 (ja) | ||
| CS268664B2 (en) | Process for the preparation of phenolsulphonephthaleinyl-beta -d-galactosides | |
| JPH0784447B2 (ja) | ジヒドロレソルフイン化合物、その製造方法および該化合物を含有するヒドロラーゼ測定試薬 | |
| EP0180961B1 (en) | Glucosamine derivatives and reagent for assaying n-acetyl-beta-d-glucosaminidase using the same as substrate | |
| JPH107693A (ja) | 新規糖誘導体、その製造法、リパーゼ活性測定用試薬およびリパーゼ活性測定方法 | |
| JP2807949B2 (ja) | α−アミラーゼ活性測定用試薬および測定方法 | |
| JP3994461B2 (ja) | ヒドロキシアルキルピリジン誘導体 | |
| JPH0655753B2 (ja) | 新規オリゴグルコシド誘導体、α‐アミラーゼの測定方法および測定試薬 | |
| JP2770891B2 (ja) | マルトオリゴシド誘導体、これを有効成分とするα‐アミラーゼ活性測定用試薬及びこれを用いたα‐アミラーゼ活性の測定方法 | |
| US6162614A (en) | Sugar ester derivatives, reagents for measurement of hydrolase activity and methods for measurement of hydrolase activity | |
| JPS6323199B2 (ja) | ||
| JPH0662569B2 (ja) | 色原体アクリジノン酵素基質及びその製造方法 | |
| JPH0631294B2 (ja) | 新規グルコサミン誘導体、これを用いる酵素活性測定試薬及び酵素活性測定方法 | |
| JPH07112440B2 (ja) | α−アミラ−ゼアイソザイムの分別測定法 | |
| WO1990010084A1 (en) | Substrate for enzymatic activity determination and method and reagent for determining enzymatic activity using said substrate | |
| JP3266967B2 (ja) | 新規なオリゴサッカライド誘導体及びその製法、並びにこれを基質として用いるα−アミラーゼ活性測定法 | |
| JPH08168396A (ja) | α−アミラーゼアイソザイムの分別測定法 | |
| JPH01243999A (ja) | コレステリンエステラーゼ基質、およびコレステリンエステラーゼを光学的に測定するための方法および試薬 | |
| JP3070709B2 (ja) | マルトオリゴ糖誘導体の製造法 | |
| JPH0653076B2 (ja) | グリコシル化合物加水分解酵素活性測定試薬 | |
| JPH0687796B2 (ja) | α−アミラーゼ活性測定方法 | |
| JPH07126281A (ja) | 非還元末端修飾オリゴサッカライド誘導体の製造法 | |
| JP4171088B2 (ja) | 新規オリゴ糖誘導体、それを含有するα−アミラーゼ活性測定試薬および測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Effective date: 20040107 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070806 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Effective date: 20070816 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Effective date: 20080108 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 |