JPH10504835A

JPH10504835A - 胆汁酸塩および活性化合物の生物学的利用能を向上させる緩衝液を含む薬剤組成物

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Publication number: JPH10504835A
Application number: JP8508551A
Authority: JP
Inventors: ニュー，ロジャー，ランダル，チャールズ
Original assignee: コーテックスリミテッド
Priority date: 1994-08-31
Filing date: 1995-08-25
Publication date: 1998-05-12
Also published as: CA2198721A1; AU705123B2; FI970825A0; IL115097A0; NZ291863A; NO970894L; KR970705406A; ZA957247B; US5853748A; WO1996006635A1; EP0769960A1; GB9417524D0; MX9701455A; NO970894D0; FI970825A; AU3351095A

Abstract

(57)【要約】胆汁酸塩および胃を７．５〜９のｐＨに緩衝化するのに使用される炭酸塩または重炭酸塩等の緩衝液を含む組成物は、通常胆汁酸塩に関連する毒性のある副作用を最小限にしつつ、活性分子の生物学的利用能を向上することができる。

Description

【発明の詳細な説明】胆汁酸塩および活性化合物の生物学的利用能を向上させる緩衝液を含む薬剤組成物本発明は、薬剤組成物、特に通常胃腸管から吸収されにくいタンパク質、ペプチド及び他の活性分子の経口投与可能な組成物に関するものである。医療の実践により、広範な様々な病気または症状の治療または予防を目的とした多くの生物学的活性物質の投与が、長年、処方されまたは報告されてきた。以下に限られるものではないが、最も良く知られている処方される生物学的に活性のあるタンパク質性物質の一つにインスリンがあり、これは糖尿病の制御に使用される。他の生物学的に活性のあるタンパク質性物質としては、成長因子、インターロイキン及びカルシトニンが挙げられ、非タンパク質性の生物学的に活性のある物質としては、オリゴヌクレオチド及び多糖が挙げられる。最も容易な薬剤の摂取方法は経口摂取であろう。シロップ、エリキシル、錠剤、カプセル、顆粒、粉末または他の簡便な配合物によるものである、このような投与経路は、通常、扱いやすくかつ簡単で、さらに、患者の側から見ても不便さ及び不愉快さが最も少ない投与経路であることが多い。したがって、ほとんどの上記物質が経口投与される際には非常に少量しか吸収されないということは残念なことである。第一に、タンパク質性の薬剤及び他の生物学的活性物質の好ましい投与経路は、物質を胃を通過させることを伴うものであるが、これはタンパク質を含む多くの物質には不適当な環境である。胃の酸性の、加水分解性かつタンパク質分解性の環境は次の物質合成代謝を目的として効率的にタンパク質性の物質をアミノ酸やオリゴペプチドに消化させるよう作用するので、広範な様々な生物学的に活性を有するタンパク質性の物質のほとんどが、単に経口投与されるだけでは、胃を通過すると残らないため、小腸において体内に吸収されないということは驚くに当たらない。胃の酸性の環境から保護される腸溶性被覆された配合物を形成することが可能であるが、そのようにしても、ペプチドやタンパク質等の比較的大きな分子は小腸にほとんど吸収されない。その結果、多くの糖尿病患者が証明できることであるが、多くのタンパク質性薬剤は、非経口により、多くの場合、皮下に、筋肉内にまたは静脈内注射により摂取されなければならず、これらはすべて不便で、不愉快であり、さらに患者に服薬を遵守させにくものである。上記は、タンパク性の物質の投与による制御が必要である病気は非常に広範であるので、単独の問題ではない。例えば、糖尿病は、世界の多くの国々で大多数の患者の命を奪っており、さらに、タンパク性の化合物または他の高分子の投与による処置を必要とする他の症状は数多く存在する。骨粗鬆症は、タンパク質、この場合にはカルシトニンを用いて処置できる症状の他の一例であり、タンパク質成長ホルモンは小人症を処置するのに用いられる。したがって、明らかに、経口投与でき活性物質の許容できる生物学的利用能を提供するタンパク質及び他の高分子の薬剤配合物に対する必要性がある。製薬上活性を有する化合物をある種の胆汁酸塩と共に投与すると、これらの生物学的利用能が向上することが知られている。このことはカケミ(Kakemi)ら（ケムファームブル(Chem．Pharm．Bull.)、１８（２）、ページ２７５〜２８０（１９７０年））により討論されており、上記著者らは、様々な物質の生物学的利用能がタウロコール酸塩またはグリココール酸塩と組み合わせて投与されることにより上昇することを示した。さらに、コジマ(Kojima)ら（ケムファームブル(Chem．Pharm．Bull.)、２５（６）、ページ１２４３〜１２４８（１９７７年））による実験から、コール酸ナトリウムは様々な物質の吸収を向上できるが細胞膜成分の放出もまた促進されることを示した。加えて、ソマトスタチンの生物学的利用能がケノデオキシコール酸またはウルソデオキシコール酸等のコラン酸誘導体と共に投与されると向上できることを示唆するＧＢ−Ａ−２２４４９１８号など、従来、胆汁酸塩を吸収促進剤として使用する他の引用文献が幾つか存在する。胆汁酸塩は、上皮細胞の細胞膜に作用するため、生物学的活性物質の吸収を促進すると考えられる。細胞膜は、恐らく胆汁酸塩の洗浄作用により細胞膜から脂質が除去され、これにより細胞膜がより流動的になるため、より透過性が高くになる。一つの理論としては、細胞膜の透過性が向上することにより活性物質が上皮細胞を通過できるようになることがある。または、上皮細胞の細胞骨格構造が膜の透過性の向上により生じるナトリウムまたはカルシウムの細胞質レベルの変化の結果修飾されると考えられる。これにより、活性物質が通過できる細胞間に間隙ができるように密着した連結部の一体性が変化する。機構がどうあれ、細胞膜の透過性が向上することにより吸収が促進することは明らかであると考えられる。しかしながら、薬剤配合物中に胆汁酸塩を含ませることは、生物学的利用能を向上させる効果を発揮するのに必要な量を使用すると許容できないくらい毒性が高くなるため、通常、問題であった。胆汁酸塩と接触した上皮細胞の透過性が向上すると細胞の内への及びからのイオンの流れが上昇することが上記理由であると示唆された。細胞を生存させ続けるために、ナトリウム、カリウム及びカルシウムイオン等のイオンの細胞内濃度は比較的狭い範囲内に維持しなければならず、これは胆汁酸塩の存在により引き起こされるイオンの流れの上昇により細胞内のイオン濃度が細胞が生存できる範囲を逸脱してしまう可能性がある。したがって、胆汁酸塩は許容できないくらい低い治療指数(therapeutic index)を有すると通常考えられることが、胆汁酸塩を吸収促進剤として使用するのに伴われる問題である。本明細書を通じて、「治療指数」ということばは、下記割合を意味して使用される：毒性投与量(toxic dose)：吸収促進投与量(absorption enhancing dose) したがって、毒性を減少させ、胆汁酸塩の治療指数を許容できない毒性による副作用を伴うことなく薬剤組成物中で使用できるくらいまで有効に上げることは非常に有用である。本発明の第一の概念によると、生物学的活性物質、胆汁酸または胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質からなる薬剤および／または獣医用組成物を提供するものである。ＷＯ−Ａ−９０１２５８３号は、活性物質、胆汁酸塩及び他の胆汁成分からなる薬剤組成物を開示する。しかしながら、このような組成物に用いられると考えられる上記公報で示唆される他の成分は他の胆汁酸塩及び胆汁脂質(biliary lip id)、特にリン脂質である。重炭酸塩（本発明に使用される好ましいｐＨ調節剤）は胆汁の一成分であるが、ＷＯ−Ａ−９０１２５８３号では重炭酸塩には何ら注意が払われておらず、重炭酸塩が胆汁酸塩及び製薬上活性のある物質を含む組成物の有用な成分であるとは考えられていなかった。したがって、胆汁酸塩の有効治療指数を上昇させる重炭酸塩または他のｐＨ調節剤の効果は上記従来の文献には開示されていなかったと考えられる。本発明において、胆汁酸塩及び胆汁酸ということばは、塩または共役酸が存在するかどうかは周囲の環境のｐＨによるので交互に使用することを理解すべきである。したがって、本発明による固体配合物は胆汁酸塩または胆汁酸のいずれを含んでいてもよい。しかしながら、投与される組成物は、酸を使用する際には溶液中では塩の形態に変換するようなｐＨであることが多い。胆汁酸塩を本発明の組成物中で使用する際には、ナトリウムやカリウム等の可溶性の対イオンが存在することが好ましい。また、例えば、アンモニウムイオンを使用することも可能であるが、上記に比べると好ましくない。胆汁酸塩は、天然に存在する界面活性剤である。これらは、すべての哺乳動物及び高度な植物中で発見されるコール酸を基礎とする共通の「骨格」構造を有する化合物の一群である。胆汁酸塩は、モノ−、ジ−またはトリ−水酸化されてもよい；胆汁酸塩は、通常、３α−ヒドロキシル基を有し、他のヒドロキシル基は、最も一般的にはＣ₆、Ｃ₇またはＣ₁₂で見つかっているが、分子の平面の上（β ）または下（α）のいずれかに位置する。胆汁酸塩として記載される化合物の分類内には、一次側鎖(primary side chai n)の一部としてカルボキシル基を有する両親媒性多価ステロールが含まれる。哺乳動物におけるこれらの最も一般的な例は、コレステロール代謝から生じるものであり、腸を通して、胆汁中で、さらには、誘導体の形態で見つかっている。本明細書中では、ことばは、同様の生物学的効果を有する天然に存在する胆汁酸塩の合成による類似体に、またはフシジン酸及びその誘導体等の微生物由来の分子にも適用する。胆汁酸塩は、非共役または共役のいずれでもよい。「非共役」ということばは、一次側鎖が末端に位置し非置換である単一のカルボキシル基を有する胆汁酸塩を意味する。非共役胆汁酸塩の例としては、コール酸塩、ウルソデオキシコール酸塩、ケノデオキシコール酸塩及びデオキシコール酸塩が挙げられる。共役胆汁酸塩は一次側鎖が置換されるカルボキシル基を有するものである。置換体は窒素原子を介して胆汁酸塩のカルボシキル基に結合するアミノ酸誘導体であることが多いと考えられる。共役胆汁酸塩の例としては、タウロコール酸塩、グリココール酸塩、タウロデオキシコール酸塩及びグリコデオキシコール酸塩が挙げられる。一回の投与の配合物中に含まれる胆汁酸の量は、選択される胆汁酸および胆汁酸が腸に含まれる水性液体中に溶解する速度や範囲によって変化する。ケノデオキシコール酸、及びほとんどの他の胆汁酸では、１０ｍｇ〜１ｇ、好ましくは２０ｍｇ〜２００ｍｇ、最も好ましくは３０ｍｇ〜１００ｍｇの範囲内であると考えられる。デオキシコール酸では、活性が若干より高いことを考慮すると、最大値が通常５００ｍｇを超えないであろう。多くの動物（特に、ヒト及び他の哺乳動物）の胃は、自然には中性より低いｐＨで緩衝化される(buffer)。本発明の組成物は、胃のｐＨをｐＨを７．５から９までのｐＨに調節するために使用される物質からなる。この物質は、その化学的な性質によってまたは存在する量によってまたは通常、双方によってｐＨを調節するのに、「使用」される。胃が調節される最適なｐＨは、７．８〜８．３の範囲である。上記した範囲に胃のｐＨを調節するために使用される物質が本発明において良好に使用されるが、ｐＨ調節剤もまた上記範囲内のｐＨに胃を緩衝化できることが好ましい。これは、より長期間継続する効果を与えることができ、このことは多くの場合望ましい。また、緩衝液は、内因性の胃のｐＨの患者間の多様性、さらには個々の患者で時間外で(over time)見られる胃のｐＨの可能性(viability) により適応できる；特に、緩衝液は患者の胃のｐＨが本発明の配合物の投与中に安全な限度外に急速に変化しないように安全なバリアーとして作用できる。別々にあるいは組み合わせて、本発明で使用するのに適したｐＨを調節するための最も好ましい物質の内の２種は、炭酸及び重炭酸イオンである。下記ディスカッションによると、重炭酸塩は原理を詳細に説明することにより引用されるが、同様の原理が同様にして腸のｐＨに同様の効果を及ぼすことが可能な他の物質に適用される。考えられる範囲内にｐＨを調節するのに必要な物質の量は、腸のｐＨが５〜７に変化し、その水分含量が、低いｐＨを維持するように作用する、その固有の緩衝能が変化しうるのと同様、変化しうるので、直接決定することは難しい。したがって、ｐＨを制御する物質の適当な量を決定するためには「最悪の場合」のシナリオを考慮する必要がある。ｐＨを６．０に調節するＭＥＳ（モルホリノエタン硫酸(morpholino ethane sulphoni cacid)の５０ｍＭ溶液に強力なｐＨ調節剤を添加する際に得られるｐＨを観察することによって、兆候が得られる。本発明で使用される濃度は、ｐＨを７．５〜９の範囲内に調節できるような濃度である；好ましい濃度は、７．８〜８．３に調節できるような濃度である。（下記に説明する理由により、ｐＨ調節剤の重量は、通常、１０ｍｌ液体における望ましい濃度を生じるものである。）得られるｐＨの値を、蒸留水またはＭＥＳに分散された、様々な濃度における好ましい重炭酸塩に関して以下に示す。したがって、ほとんどの場合における本発明に使用される重炭酸塩の最小量は約０．０４５Ｍであり、これにより胃中のｐＨが約７．５になる。これは、１０ｍｌの分散液の容積に対して約４０ｍｇの重炭酸ナトリウムにあたる。重炭酸塩の飽和水溶液（＜２Ｍ）は８．０１のｐＨを有する。これから、投与される好ましい重炭酸塩の濃度にかかわらず、ｐＨは９．０を超えて上昇しないと考えられる。場合によっては、効果は好ましい重炭酸塩ほど強くはないが、胆汁酸自身の塩の濃縮溶液が適当なレベルにまでｐＨを上昇させるのに十分な能力を有することもある。したがって、必ずしも望ましいとは限らないが、ｐＨ調節剤が胆汁酸塩自体、または異なる胆汁酸塩であることも可能である。組成物の緩衝能が大きくなるほど、上述したｐＨが胃中で優勢である期間が長く、即ち、より長期間本発明の利点が継続する。別々にあるいは組み合わせて、本発明で使用するのに適した最も好ましい緩衝剤の内の２種は、炭酸及び重炭酸イオンである。既に述べたように、本発明の組成物の特長は、組成物中に存在する胆汁酸塩の治療指数を有効に上げることができることである。この好ましい効果は、共役及び非共役胆汁酸塩の双方で存在するが、共役胆汁酸塩に関する炭酸及び重炭酸イオンの作用は非共役胆汁酸塩に関する作用とは若干異なる。共役胆汁酸塩では、十分な重炭酸塩または炭酸塩の存在は、細胞の生存率には影響を及ぼさずに所定量の胆汁酸塩に細胞を接触させる間に細胞膜の透過性を向上させる効果を有する。このことは、透過性を目的まで向上させるのに必要な胆汁酸塩の量は減少するため、細胞の透過性は胆汁酸塩の悪影響を増加させずに上昇できることを意味する。炭酸塩または重炭酸塩の存在下における非共役胆汁酸塩では、細胞の透過性は細胞を胆汁酸塩に接触させる間は上昇させないが、胆汁酸塩との接触後の細胞への毒性効果が抑制される。繰り返すが、これは、細胞の生存率に影響を及ぼさないで投与できる胆汁酸塩の量が重炭酸または炭酸イオンの存在下では増加することを意味する。通常、ｐＨ調節剤の量は、１単位服用量(unit dose)の組成物を組成物が患者への投与時に分布する胃の長手方向に存在する量の液体中に分散する際には、より正確な見積もりは上述したＭＥＳ緩衝液試験で参考することにより成されるが、ｐＨ調節剤の濃度は少なくとも約０．０１Ｍである。しかしながら、一般的には、および炭酸塩及び重炭酸塩では好ましくは、重炭酸塩または炭酸塩の濃度は０．０５Ｍより大きく、より高い濃度、例えば、１Ｍまでの濃度を使用してもよいが、濃度が少なくとも約０．１Ｍであることが最も好ましい。本発明の組成物が分布すると考えられる小腸の具体的な長さは３０ｃｍであり、胃の上記長手方向中に存在する液体の量は約１０ｍｌであると考えられる。しかしながら、適当な長さとして３０ｃｍを選択することは任意であり、本発明は小腸における上記距離にわたって分布する組成物に制限されるものではないことを強調すべきである。組成物がより短いまたはより長い期間にわたって分布する、例えば、一定に放出する組成物がかなりよりゆっくり分散するため小腸のより長い範囲にわたって分布する、ことが望ましい理由があるかもしれない。このような組成物は特定の治療のための必要条件に合致するための最も好ましいタイプの組成物を容易に決めることができる当業者には公知である。組成物を小腸のより長いまたはより短い範囲にわたって分散させようとする際には、１単位服用量の組成物が特定の濃度になるように分散される水の量はこれに比例してより多くなったりまたはより少なくなったりする。必要な重炭酸塩の最小量を決定するために水中に分散される単位服用量(unit dose)は、いずれかの時に患者に投与される服用量である。液状の配合物に関しては、これは医師あるいは薬剤師によって算出される所定の量であると考えられる。錠剤またはカプセル等の、固体の配合物に関しては、単位服用量は、通常、一個の錠剤またはカプセルである。しかしながら、例えば、大量の投与量の活性物質が必要である際には、患者に１個を超える錠剤またはカプセルを摂取させることが必要である場合もあり、このような場合には、所定量の重炭酸塩を２個以上の錠剤またはカプセルに分けてもよい。胆汁酸の溶解性を向上させるので、好ましい炭酸または重炭酸イオンのさらなる好ましい効果があると考えられる。通常、胆汁酸塩は約６．８以下のｐＨで共役酸に変換され始め、この酸の形態は水溶液中では不溶性である。緩衝剤は本発明の組成物を約７．５またはそれ以上のｐＨに緩衝化する効果を有するので、不溶性の胆汁酸ではなく、可溶化された胆汁酸塩が存在する。可溶化される胆汁酸塩は溶液中では上皮細胞に作用することができるが、これは固体の酸形態では不可能である。緩衝剤の濃度がより高くなると、十分なｐＨがより迅速に得られ、これにより胆汁酸または胆汁酸塩がより速く溶解する；このことによって、より高い局所濃度の胆汁酸塩が溶液中にあるため、生理活性物質の透過性をより有効に促進できる。また、炭酸及び重炭酸イオンの特に好ましい効果に関する理由は重炭酸塩レセプターが腸細胞表面上で発現するという事実とある程度関連すると考えられる。しかしながら、本当に存在するとすると、このような関連の性質は現時点では明らかではないが、どちらにしても、上記理論の正確さなどにより本発明の有効性が制限されるものではないことを強調すべきである。重炭酸塩を用いて得られた結果の方が通常より優れている。上述したように、重炭酸または炭酸イオンの機能の一つとして胆汁酸塩を可溶形態にすることがあると考えられる。しかしながら、カルシウムイオンの存在は、そのｐＨでは塩が優勢な形態になり、それ未満のｐＨでは不溶性の胆汁酸が溶液から沈殿し始めるｐＨを上昇させる。このｐＨは特定の胆汁酸塩によって変化するが、胆汁酸の沈殿を防止することが望ましい。上記理由により、組成物中にジ−またはトリ−カルボン酸の塩（例えば、クエン酸塩）、エチレンジアミン４酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコールビス−（β−アミノエチルエーテル）− Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−４酢酸（ＥＧＴＡ）またはフィチン酸塩及び他のポリリン酸化合物(polyphosphorus compound)などのカルシウムイオンのキレート剤を含むことがしばしば好ましい。クエン酸塩をカルシウムイオンキレート剤として使用する際には、水に可溶な形態であることが非常に好ましい。したがって、場合によってはクエン酸アンモニウムもまた使用されるが、最も好ましい塩はクエン酸ナトリウム及びクエン酸カリウムである。「生物学的活性物質」ということばには、特に、製薬上活性のあるタンパク質性物質が含まれる。このタンパク質性物質は純粋なタンパク質であってもよく、または、糖タンパク質がタンパク質及び糖残基からなるような、タンパク質からなるものであってもよい。該物質は、病気またはその症状の処置または予防のいずれかによって、ヒトまたは獣医用薬剤において使用されてもよく、または化粧品においてまたは診断に使用されてもよい。本発明による経口または直腸投与用配合物として形成できるタンパク質性生物学的物質の例としては、ヒト若しくは動物由来または半合成により若しくは全体を合成により調製されたのいずれかでもよいが、インスリン、カルシトニン及び成長ホルモン等の、タンパク質若しくはペプチドホルモンまたはホルモン放出因子、またはヒトのインターフェロンアルファ等のインターフェロン及びＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４及びＩＬ−５等のインターロイキンなどの他の生理活性ペプチドが挙げられる。上記または他のタンパク質の類似体および活性を有する断片もまた使用できる。本発明は、インスリンは一般的に本発明で使用されるｐＨ値ではあまり溶解しないので、インスリンで作用するばかりでなく良好に作用することは特に顕著である。インスリンはインスリンとインスリンを重炭酸塩または他の高ｐＨ溶液中で安定化させる胆汁酸塩との予想できない相互作用の結果として分散できると考えられる。生物学的活性物質はまた、ウィルスが感染した細胞または癌細胞における核酸の複製を阻害するのに及び他の形態の好ましくない細胞の増殖を直すのに使用されるアンチセンスのオリゴヌクレオチド等のオリゴヌクレオチド及びその類似体であってもよい。ヘパリン等の多糖もまた本発明において好ましく使用され、１つまたはそれ以上のタンパク質、核酸または多糖の組み合わせを使用してもよい。生物学的活性物質の分子量は、約２０，０００Ｄａ以下であることが好ましい。これは、細胞の透過性が本発明の組成物を使用する結果として向上したとはいっても、上記より大きい活性分子の有効な生物学的利用能を得ることは容易ではないからである。しかしながら、通常、活性分子の大きさが小さくなればなるほど、デリバーし易くなるため、生物学的活性物質が約１０，０００Ｄａ未満、最も好ましくは約５，０００Ｄａ未満の分子量を有することが好ましい。生物学的活性物質の存在量は、当然、その固有の能力によって変化する。摂取される際に目的とする活性を発揮するのに十分な量で存在することが必要である。薬剤に関しては、投与量は医師または臨床医の指示に基づく。存在できる他の賦形剤としては、組成物の均一性を得るための、及び調製の扱いを補助するための、充填剤として使用される、ラクトース、錠剤の崩壊を補助する膨潤剤である、Ａｃ−ｄｉ−ｓｏｌ^TM(クロス−カルメロースソディウム(cr oss-carmellose sodium)、および一般的に顆粒化工程中に結合剤として使用される、ポリビニルピロリドンが挙げられる。本配合物は、一般的には、固体である、または、予想されなかったことであるが、液状である。腸溶性被膜により活性物質が胃内で消化されるのを容易に防止でき、さらに、活性成分及び胆汁酸塩をそのままの形態でかつ同時に小腸に到達させることがかなりより容易にできるので、固体の形態が好ましい；後者は、液状の配合物で行うのははかなりより困難である。組成物を、長期間の寿命を目的として、実質的に乾燥した、固体として配合する場合には、錠剤、丸剤、粉末、顆粒または微顆粒の形態を有していてもよく、また、当業者に良く知られる適当な充填剤または結合剤を含ませてもよい。粉末、顆粒または微顆粒は、カプセルに詰められてもよい。上述したように、胆汁酸または胆汁酸塩のいずれかを固体の配合物中に使用してもよい。液体は上述したような欠点を有する。しかしながら、なんらかの理由で本発明の組成物を液体として配合することが特に望ましい場合には、腸溶性被覆されたカプセルが内容物の最良の投与手段であると考えられるが、シロップまたはエリキシルであってもよい。本組成物は、迅速に若しくは一様に放出されるように配合されてもまたは上記２種類の放出形態を組み合わせて使用してもよい。本組成物はまた、即座に、遅延してまたは脈動して(pulsed)放出する配合物中に添加されてもよい。組成物中に含まれる緩衝剤の量は、組成物が配合される方法及び胃中で分散するのにかかる時間によって変化するため、一様に放出される配合物中に含まれる緩衝剤の量は、通常、迅速に放出する配合物で必要な量よりかなり多くなると考えられる。通常、本発明の組成物は、単に、薬剤配合物を調製する分野における当業者に既知の技術を用いて構成成分を混合することによって調製される。本発明はまた、患者に活性物質、胆汁酸塩および胃を７．５から９までのｐＨに調節するために使用される物質を一緒に投与する(coadminister)ことからなる、活性物質の生物学的利用能の向上方法に関するものである。したがって、本発明の第二の概念によると、作用剤と共に一緒に投与される生物学的活性物質の生物学的利用能を向上することを目的とした作用剤の調製における胆汁酸塩及び胃を７．５から９までのｐＨに調節するために使用される物質の使用を提供するものである。好ましい態様は、必要であれば変更を加えて(mutatis mutandis)、本発明の第一の概念で詳細したのと同様である。本発明を下記実施例及び図面を参照しながらさらに説明する：図１は、緩衝塩類または重炭酸塩溶液のいずれかにおけるインビトロでの胆汁酸塩との接触後のＣａｃｏ−２細胞の生存率の比較を示すものであり、結果は胆汁酸塩の最大許容濃度（ｍｇ／ｍｌ）として表わされる；図２は、ＨＢＳＳまたは重炭酸塩溶液のいずれかにおける共役胆汁酸塩との接触中及び後のインビトロにおけるＣａｃｏ−２細胞のニュートラルレッドによる透過率の比較を示すものであり、結果は胆汁酸塩の最大許容濃度（ｍｇ／ｍｌ）として表わされる；図３は、ＨＢＳＳまたは重炭酸塩溶液のいずれかにおける非共役胆汁酸塩との接触中及び後のインビトロにおけるＣａｃｏ−２細胞のニュートラルレッドによる透過率の比較を示すものであり、結果は胆汁酸塩の最大許容濃度（ｍｇ／ｍｌ）として表わされる；図４は、様々な緩衝液における染色細胞のケノデオキシコール酸塩とのインキュベーション後の染色剤の放出率（％）を示すプロットである；図５は、様々な緩衝液におけるケノデオキシコール酸塩とのインキュベーション後のミトコンドリア活性の減少率（％）を示すプロットである；図６は、実施例３に関するものであり、ブタにおける空腸内投与後のサケのカルシトニン（ＳＣＴ）の吸収に関するｐＨ及び胆汁酸塩濃度の効果を示すものである；図７は、実施例４に関するものであり、重炭酸塩と組み合わせた際の固体の経口投与用インスリン配合物(solid dose oral insulin formulation)の効能の促進を示すものである；実施例に使用される溶液の調製ニュートラルレッドのストック溶液をＤＭＥＭ（ダルベッコの改変イーグル培地(Dulbecco's Modified Eagle Medium)（ｐＨ４．５）において０．５ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した後、これを使用する前にＴＣＭ（組織培養液(Tissue Cultur e Medium)またはハンクス平衡塩溶液(Hanks Balanced Salt Solution)（ＨＢＳＳ）で１：１０に希釈した。下記成分を含むハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ）を調製した：蒸留水における０．１Ｍ重炭酸ナトリウム溶液を調製した（緩衝溶液）。また、蒸留水における同様の０．１Ｍの酢酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム及び炭酸ナトリウムの溶液を調製した。これらもまた、実施例においてバッファーと称する。ＨＢＳＳまたは上記０．１Ｍバッファー溶液のいずれか一つにおいて様々な濃度の胆汁酸塩を含む試験溶液を調製した。下記胆汁酸塩を試験した：非共役胆汁酸塩：コール酸ナトリウム、ウルソデオキシコール酸ナトリウム、ケノデオキシコール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム；共役胆汁酸塩：タウロコール酸ナトリウム、グリココール酸ナトリウム、タウロデオキシコール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム；ＭＴＴストック溶液を蒸留水において５ｍｇ／ｍｌの濃度で調製した後、使用する前にＴＣＭで１：１０に希釈した。実施例１及び２に記載される試験は良く知られた試験であり、ブリティッシュスタンダーズ(British Standards)（ＢＳ５７５０）に一致する。Ｃａｃｏ− ２細胞は、腸細胞に関するインビトロモデルに最適に使用できることが当業者によって良く認められている。実施例１細胞毒性及び細胞膜の透過率の測定に関するインビトロ培養実験細胞の調製９６ウェルのマイクロプレートの各ウェル中に１×１０⁵細胞／ｍｌを含むＣａｃｏ−２細胞懸濁液２００μｌを分注する(aliquot)ことによって、テストプレートを組み立てた。最も外側のウェルを２００μｌの生理食塩水単独で満たして、蒸発による効果を中和した。細胞を、必要であればフィードしながら(feedi ng)、８日間、５％ＣＯ₂を含む空気中で、３７℃で高グルコースダルベッコの改変イーグル培地(Dulbecco's modified eagles medium)（ＤＭＥＭ）組織培養液( tissue culture medium)（ＴＣＭ）中でインキュベートした。次に、この細胞を初期の損傷または回復研究のいずれかの実施に使用した。Ａ．初期の損傷時における毒性の評価ニュートラルレッドの染色剤(stain)は、生存細胞によって活発に吸収される。より透過性の膜を有する細胞は浴用培養液(bathing medium)中に染色剤を失うため、細胞膜の透過性は細胞中に残存する染色剤を定量することにより試験材料と接触させた後直接評価できる。したがって、本方法では、細胞をまず染色した後、試験材料と共にインキュベートし、試験材料とのインキュベーションによりどの程度接触中に細胞から染色剤が漏れたかの範囲を決定するための測定を行う。２時間という接触時間を用いて実験を下記プロトコルに従って行った。ＴＣＭを各ウェル中の細胞の単層から除去し、２００μｌの染色剤で置換した。プレートを５％ＣＯ₂で３７℃で２時間インキュベートした後、染色及び正常な形態を調べた。染色剤を各ウェルから除去し、１５０μｌの適当なバッファーで置換した。バッファーをカラム２のウェルから除去し、代わりに最高濃度の試験溶液１５０μｌを入れた。１５０μｌの試験溶液をカラム３の各ウェルに添加し、繰り返し吸引することにより緩やかに混合し、１５０μｌをカラム４のウェルに移した。この工程をプレートの下方に向かって繰り返し、各列に沿って試験材料が２倍希釈になるようにした。各プレートの１列はコントロールとしてＨＢＳＳを入れて割り当て、必要であれば、バッファーコントロール用の１列を割り当てた。細胞を５％ＣＯ₂で３７℃で２時間インキュベートした。次に、染色剤をウェルから吸引し、プレートを、５０％エタノールにおける１％氷酢酸から構成される脱着溶液（１００μｌ／ウェル）中で２０分間振盪しながらインキュベートした。細胞中に残存する染色剤の量を定量するために、５５０ｎｍにおける吸光度をプレートリーダー(plate reader)で測定し、読みをバッファーコントロールと比較し、細胞からの染色剤を漏れを評価した。このように、試験は胆汁酸塩との接触時の細胞膜の透過率の測定として使用した。Ｂ．毒性損傷からの回復ニュートラルレッドの染色剤は、生存細胞によって活発に吸収されるが、非生存細胞は染色されない。細胞膜の透過性が向上した細胞は染色剤の含量が減少する。本変異型の方法では、細胞をまず試験材料と共にインキュベートした後、染色剤とインキュベートし、試験材料とのインキュベーションにより細胞がどの程度接触後にニュートラルレッドを吸収／保持できなかったかの範囲を決定するための測定を行う。２時間という接触期間、および３時間という染色剤を吸収する間の最適な成長材料における回復期間を使用した。ＴＣＭを各ウェルから除去し、１５０μｌの適当なバッファーで置換した。バッファーをカラム２のウェルから除去し、代わりに最高濃度の試験溶液１５０μｌを入れた。１５０μｌの試験溶液をカラム３の各ウェルに添加し、繰り返し吸引することにより緩やかに混合し、１５０μｌをカラム４のウェルに移した。この工程をプレートの下方に向かって繰り返し、各列に沿って試験材料が２倍希釈になるようにした。各プレートの１列はコントロールとしてＨＢＳＳを入れて割り当て、必要であれば、バッファーコントロール用の１列を割り当てた。細胞を５％ＣＯ₂ で３７℃で２時間インキュベートした。次に、上清の液体を各ウェル中の細胞の単層から除去し、２００μｌの染色剤を代わりに入れた。プレートを５％ＣＯ₂で３７℃で３時間インキュベートした。次に、染色剤をウェルから吸引した後、プレートを、５０％エタノールにおける１％氷酢酸から構成される脱着溶液（１００μｌ／ウェル）中で２０分間振盪しながらインキュベートした。５５０ｎｍにおける吸光度をプレートリーダー(plate reader)で測定し、読みをバッファーコントロールと比較し、染色剤の活発な吸収後の細胞からのニュートラルレッドの漏れを評価した。このように、上記試験は胆汁酸塩との接触後の回復期間中の細胞膜の透過率の測定として使用した。胆汁酸塩で処理された細胞に関する重炭酸塩及びＨＢＳＳの効果の比較を、表１及び２および図２及び３に記載する。ＨＢＳＳおよび重炭酸塩、酢酸塩及びホウ酸塩緩衝液の効果を図４及び５で比較する。ＨＢＳＳでは、成分の割合を、蒸留水で一緒に溶解した際に７．０〜７．２のｐＨになるように調節したことに留意すべきである。小腸では、ｐＨは上記値より低い。これに対して、０．１Ｍ重炭酸塩では、前記表から示されるように、このｐＨはｐＨ８．０に近く、ここで記載される各実験の最後が上記ｐＨ付近であることを確認した。実施例２ミトコンドリア活性を目的としたＭＴＴ染色を用いた細胞毒性の測定に関するインビトロの培養実験細胞の調製９６ウェルのマイクロプレートの各ウェル中に１×１０⁵細胞／ｍｌを含むＣａｃｏ−２細胞懸濁液２００μｌを分注する(aliquot)ことによって、テストプレートを組み立てた。各プレートの最も外側のウェルはブランクとして残し、２００μｌの生理食塩水で満たして、蒸発による効果を中和した。細胞を、必要であればフィードしながら(feeding)、８日間、５％ＣＯ₂を含む空気中で、３７℃ で高グルコースＤＭＥＭ組織培養液（ＴＣＭ）中でインキュベートした。ミトコンドリア活性に関する試験ＭＴＴは生存細胞中でミトコンドリアデヒドロゲナーゼにより変換して不溶性の紫色の結晶を形成するテトラゾリム塩である。死細胞は上記変換の影響を受けない。結晶配合物は、比色分析により定量でき、ミトコンドリア活性、即ち細胞の生存率を評価するのに使用できる。ＭＴＴストック溶液、試験溶液及び緩衝液の調製は上記と同様である。本方法では、細胞をまず試験材料と共にインキュベートした後、ＭＴＴとインキュベートし、試験材料とのインキュベーションにより細胞のミトコンドリア活性がどの程度変化したかの範囲を決定するための測定を行う。２時間という接触期間、および３時間という染色を行う間の回復期間を使用した。ＴＣＭを各ウェルから除去し、代わりに適当なバッファー１５０μｌを入れた。バッファーをカラム２のウェルから除去し、代わりに最高濃度の試験溶液１５０μｌを入れた。１５０μｌの試験溶液をカラム３の各ウェルに添加し、繰り返し吸引することにより緩やかに混合し、１５０μｌをカラム４のウェルに移した。この工程をプレートの下方に向かって繰り返し、各列に沿って試験材料が２倍希釈になるようにした。各プレートの１列はコントロールとしてハンクス平衡塩溶液（ＨＢＳＳ −実施例１参照）を入れて割り当て、必要であれば、バッファーコントロール用の１列を割り当てた。細胞を５％ＣＯ₂で３７℃で２時間インキュベートした。細胞を５％ＣＯ₂で３７℃で２時間インキュベートした。次に、上清の液体を各ウェル中の細胞の単層から除去し、２００μｌのＭＴＴを代わりに入れた。プレートを５％ＣＯ₂で３７℃で３時間インキュベートし、ウェルを試験し、目視により染色レベルを測定した。次に、染色剤をウェルから吸引し、プレートを、無水イソプロパノールにおける０．１ＭＨＣｌから構成される脱着溶液（１００μｌ／ウェル）中で２０分間振盪しながらインキュベートした。吸光度を５５０及び６５０ｎｍでの相違としてプレートリーダー(plate reade r)で測定し、読みをバッファーコントロールと比較し、ミトコンドリア活性の変化を測定した。コントロールに関するよりも低い染色の減少は、ミトコンドリア活性の減少を示し、インキュベーション培養液における材料の毒性作用をかなり示す。結果実施例１及び２の結果を表１及び２、さらに図１〜５に示す。これらの表及び図は、特定の実施例として重炭酸塩を用いて、高ｐＨバッファーの存在下で共役及び非共役胆汁酸によって発揮される効果を示す。表１及び２に、実施例１及び２に記載される実験の結果を示す。表の第１列目には試験培養液中に存在する胆汁酸塩を列挙し、試験培養液自身は第２列目に記載する。試験培養液はＨＢＳＳまたは０．１Ｍ重炭酸ナトリウム溶液のいずれかであった。胆汁酸塩との接触中及び接触後のニュートラルレッドアッセイに関する結果は、（胆汁酸塩を含まない培養液中でインキュベートされる細胞と比較して）細胞の透過性が影響を受けずに残る胆汁酸塩の最大濃度をｍｇ／ｍｌで表わす。ＭＴＴの列における結果は、細胞の生存率がインキュベーション後影響を受けずに残った胆汁酸塩の最大濃度をｍｇ／ｍｌで表わす。表１には非共役胆汁酸塩に関する結果が示され、これから、各々の場合において、ニュートラルレッド（接触中）の列では値に有意の差はないが、ニュートラルレッド（接触後）及びＭＴＴの列では値が重炭酸塩と共に投与された胆汁酸塩の方がＨＢＳＳと共に投与されたものより高いことが示される。これより、胆汁酸塩溶液とのインキュベーション中の細胞の透過性は重炭酸イオンの存在下では大きく変化しないが、毒性効果がインキュベーション後に細胞中で明らかになるためにはかなりより多くの胆汁酸塩が必要であることが示される。有効に、このことは、細胞に毒性効果が現れる前に重炭酸塩を存在させると細胞にかなりより多量の胆汁酸塩を接触できることを意味する。胆汁酸塩の量を増加させることが可能であるため、インキュベーション後の細胞の透過性もまた、細胞の生存率には影響を及ぼさずに向上させることができる。表２に共役胆汁酸塩に関する結果を示し、これから、各々の場合において、ニュートラルレッド（接触後）及びＭＴＴの列における値は同等であるが、ニュートラルレッド（接触中）の列における値は胆汁酸塩を重炭酸塩の存在下で投与すると増加することが示される。これより、重炭酸塩が存在しない際に比べて重炭酸塩の存在下で胆汁酸塩と共にインキュベートする際の方がより少ない量の胆汁酸塩が細胞の透過性を向上させるために必要であることが示される。また、上記結果から、インキュベーション後の細胞の透過性及び生存率は胆汁酸塩の存在には影響を受けないことも示される。したがって、重炭酸イオンの存在下では、胆汁酸塩濃度を上げずに、即ち、細胞の生存率に悪影響を与えずに、共役胆汁酸塩とのインキュベーション中の細胞の透過性を向上することが可能である。図１〜３は、表１及び２に示される結果の代表的なグラフである。図１は、ＭＴＴ生存率試験によって測定される胆汁酸塩溶液と共にインキュベートされる細胞の生存率に関する重炭酸塩の効果を示すものである。共役胆汁酸塩に関しては、重炭酸塩の存在は胆汁酸塩とのインキュベーション後の細胞の生存率に影響を及ぼさないが、非共役胆汁酸塩に関しては、生存率には影響を及ぼさずに細胞を処理できる胆汁酸塩の濃度は常に重炭酸塩の存在下で増加することが分かる。図２は、共役胆汁酸塩とのインキュベーション中及び後のニュートラルレッドアッセイにより測定される細胞の透過性に関する結果を示すものである。接触中は、細胞の透過性を上げるのに必要な胆汁酸塩の量は０．１Ｍ重炭酸塩の存在下の方がＨＢＳＳの存在下よりかなり低いことが分かる。しかしながら、接触後では、細胞の透過性は正常に戻る。このことは、所定量の胆汁酸塩では、細胞の透過性が接触中に有意に向上できることを意味する。しかしながら、接触後では、細胞の生存率はコントロール（重炭酸塩を含まない胆汁酸塩及びＨＢＳＳと共にインキュベートされる細胞）との間に差はないままである。図３は図２と同様であるが、この場合には、非共役胆汁酸塩に関する結果を示す。上記場合には、重炭酸塩は胆汁酸塩との接触中には細胞の透過性に何ら明らかなマイナスの効果を有さないが、接触後には、細胞の透過性の増加を引き起こさずに投与できる胆汁酸塩の最大濃度が増加する、すなわち、細胞の透過性は重炭酸塩の存在下で有意に減少することが分かる。図４は、一実施例としてケノデオキシコール酸塩を用いた、様々なｐＨ値における染色された細胞の胆汁酸塩との接触後のニュートラルレッド回復アッセイにおける染色剤の放出率（％）を示すプロットである。このプロットから、７．５を超えるｐＨでインキュベートされた細胞からはかなりより少ない染色剤が放出されることが非常に明白に示され、このことは、細胞の短期間及び長期間の回復に関する予想が高いｐＨ条件下でかなり改善されることを示すものである。同様にして、図５は、様々なバッファーにおけるケノデオキシコール酸とのインキュベーション後のミトコンドリア活性の減少率（％）を示すプロットであるが、これから、毒性の顕著な減少が高いｐＨ条件下で得られることが示される。ｐＨ７．０の培養液を、３％（ｖ／ｖ）の１Ｍヘペス(HEPES)（ヒドロキシエチルプロピリデンエタンスルホン酸(hydroxyethyl propylidene ethane sulphon ic acid)溶液を含むＨＢＳＳを用いて調製し、ｐＨ７．０に調節した。ｐＨ７．５の培養液を、５０ｍＭトリズマ（商標）（TRIZMA^TM）を含むＨＢＳＳを用いて調製し、ｐＨ７．５に調節した。ｐＨ８．０の培養液を、５０ｍＭトリズマ（商標）（TRIZMA^TM）を含むＨＢＳＳを用いて調製し、ｐＨ８．０に調節した。ｐＨ８．５の培養液を、５０ｍＭトリシン(Tricine)を含むＨＢＳＳを用いて調製し、ｐＨ８．５に調節した。また、これらの結果は、上記現象はｐＨ８．０の０．１Ｍ重炭酸塩では観察されるが、ｐＨ７．０のＨＢＳＳ単独では観察されないことを示す。使用される重炭酸塩の濃度が現に腸の環境において目的とする効果を有することの確認を、下記実施例において報告されるインビボ実験で得る。実施例３インビボの効能に関する研究−サケのカルシトニンブタ（大きく白色の×大きく白色の／ランドレース(landrace)、オス、６５ｋｇ）を本研究に用い、麻酔下で、正中伏在動脈を介して背側大動脈中に２本のカテーテルを埋め込むことによって開始する１０日前に外科的に作製した。約１．６〜２ｍｍの内径のカニューレを空腸に埋め込んだ。動物に適宜水を与え、一晩絶食させ、朝と晩の日に２回餌を与えた。処置を行う日には、最後の血液サンプルを採取する後まで朝の食事を抜いた。一服用量(dosing)のサケのカルシトニン（ｓＣＴ）を空腸中に内在するカニューレを介して本能により投与させた後、加温滅菌水でフラッシュした。８ｍｌの血液サンプルを投与前後の様々な時間に抜き、２つの部分に分けた。一方は室温で凝固させ、血清を除去し、使用するまで−２０℃に貯蔵した。他方は４，０００ｋｉｕのアプロチニンが添加されたヘパリン化チューブに移し、遠心後血漿をデカンテーションし、−２０℃で貯蔵した。血清中のカルシウムレベルを、カルシウム感受性キレート剤であるアルセナゾＩＩＩ(arsenazo III)と錯体を形成させた後、比色分析により測定した。９匹の動物を本研究に用い、すべてのブタにすべての３処置が行われるように、配合物を、ランダムスリーウェイクロスオーバーを基礎として(on a random t hree-way crossover basis)、各々少なくとも１日あけて、別々の３日に投与した。処置は、それぞれ、ｐＨ７．５のリン酸緩衝液２ｍｌ中に溶解した６２５ｉｕのｓＣＴ単独（−○−）、上記６２５ｉｕのｓＣＴに２５ｍｇのケノデオキシコール酸ナトリウムを加えたもの（−△−）、上記６２５ｉｕのｓＣＴに５０ｍｇのケノデオキシコール酸ナトリウムを加えたもの（−■−）、またはｐＨをさらに塩酸で６．５に下げた上記６２５ｉｕのｓＣＴに５０ｍｇのケノデオキシコール酸ナトリウムを加えたもの（−×−）から構成された。結果を図６に示し、カルシトニンによる経時的な血漿中のカルシウム濃度の変化として表される。これから、カルシトニンの吸収を促進する胆汁酸塩の効力は存在する胆汁酸塩の濃度、および投与されるｐＨに依存することが分かる。実施例４インビボの効能に関する研究−インスリン実施例３に記載されたのと同様にして作製されたブタを使用した。採取した血液サンプルを標準的な酵素を基礎とした方法を用いてグルコースに関して分析した。動物に、重炭酸ナトリウムを加えてまたは加えずに、２００ｉｕインスリン溶液２ｍｌ（ｐＨ５で溶液中にペプチドを添加）を、または固体の投与形態として配合されたインスリンを、投与した。それぞれの投与物には、３００ｍｇのどちらかの配合物が含まれており、この配合物は投与する直前にリン酸緩衝液２ｍｌ中に素早く懸濁した。２つの配合物の組成を重量／重量を基礎として下記に列挙する。結果を図７に示し、インスリンによる経時的な血漿中のグルコース濃度の変化として表す。これより、胆汁酸であるケノデオキシコール酸の胃に沿ったペプチドの吸収を促進する効果が固体の投与配合物における重炭酸ナトリウムの存在によって顕著に改善されることが分かる。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】１９９６年１０月１６日【補正内容】請求の範囲１．下記よりなる薬剤および／または獣医用組成物：（ｉ）生物学的に活性のあるタンパク質性物質、オリゴヌクレオチド若しくはその類似体または多糖；（ｉｉ）胆汁酸または胆汁酸塩；および（ｉｉｉ）胃のｐＨを７．５から９までの値に調節するために使用される物質。２．該物質が胃のｐＨを７．８から８．３までのｐＨ値に調節するために使用される、請求の範囲第１項に記載の組成物。３．可溶性の対イオンが存在する、請求の範囲第１項または第２項に記載の組成物。４．該胆汁酸または胆汁酸塩が非共役である、請求の範囲第１項、第２項または第３項に記載の組成物。５．該胆汁酸または胆汁酸塩がケノデオキシコール酸若しくはウルソデオキシコール酸またはその塩である、請求の範囲第４項に記載の組成物。６．該胆汁酸または胆汁酸塩が共役である、請求の範囲第１項、第２項または第３項に記載の組成物。７．ｐＨ調節剤が胃のｐＨを記載された範囲内に緩衝化するために使用される、請求の範囲第１〜６項のいずれかに記載の組成物。８．該緩衝剤が炭酸および／または重炭酸イオンからなる、請求の範囲第７項に記載の組成物。９．該組成物を分散させようとする胃の長手方向中に存在する量の液体中に該組成物を分散する際に、重炭酸塩または炭酸塩の濃度が少なくとも約０．１Ｍであるような量の炭酸塩または重炭酸塩からなる、請求の範囲第８項に記載の組成物。１０．１単位服用量を１０ｍｌの水に分散する際に少なくとも０．０４５Ｍの濃度を得るのに十分な重炭酸または炭酸イオンを含む請求の範囲第８項または第９項に記載の組成物。１１．ｐＨ調節剤自体が胆汁酸または胆汁酸塩からなる、請求の範囲第１〜１０項のいずれかに記載の組成物。１２．ジ−またはトリ−カルボン酸の塩、例えば、クエン酸塩、またはエチレンジアミン４酢酸（ＥＤＴＡ）またはエチレングリコールビス−（β−アミノエチルエーテル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ′ ，Ｎ′−４酢酸（ＥＧＴＡ）またはフィチン酸塩等のポリリン酸塩などのカルシウムイオンのキレート剤を含む、請求の範囲第１〜１１項のいずれかに記載の組成物。１３．該生物学的活性物質がインスリン、カルシトニン、成長ホルモン、インターフェロン、インターロイキン等のタンパク質またはこれらの活性断片である、請求の範囲第１〜１２項のいずれかに記載の組成物。１４．該生物学的活性物質の分子量が約２０，０００Ｄａ未満である、請求の範囲第１〜１３項のいずれかに記載の組成物。１５．該生物学的活性物質の分子量が約１０，０００Ｄａ未満である、請求の範囲第１４項に記載の組成物。１６．乾燥固体として配合される請求の範囲第１〜１５項のいずれかに記載の組成物。１７．錠剤、丸剤、粉末、顆粒または微顆粒の形態を有する、請求の範囲第１６項に記載の組成物。１８．作用剤と共に一緒に投与される生物学的活性物質の生物学的利用能を向上することを目的とした作用剤の調製における胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質の使用。１９．患者に活性物質、胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質を一緒に投与することからなる、活性物質の生物学的利用能の向上方法。２０．患者に活性物質、胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨに調節するために使用される物質を一緒に投与することからなる、（胃内の生理活性物質の透過促進剤としての作用能に関する）胆汁酸塩の有効治療指数の向上方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 35/413 Ａ６１Ｋ 35/413 38/00 37/26 ＡＢＪ 38/21 37/30 ＡＤＴ 38/23 ＡＤＴ 37/36 ＡＤＦ 38/27 ＡＤＦ 37/66 38/28 ＡＢＪ 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．生物学的活性物質、胆汁酸または胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質からなる薬剤および／または獣医用組成物。２．該物質が胃のｐＨを７．８から８．３までのｐＨ値に調節するために使用される、請求の範囲第１項に記載の組成物。３．可溶性の対イオンが存在する、請求の範囲第１項または第２項に記載の組成物。４．該胆汁酸または胆汁酸塩が非共役である、請求の範囲第１項、第２項または第３項に記載の組成物。５．該胆汁酸または胆汁酸塩がケノデオキシコール酸若しくはウルソデオキシコール酸またはその塩である、請求の範囲第４項に記載の組成物。６．該胆汁酸または胆汁酸塩が共役である、請求の範囲第１項、第２項または第３項に記載の組成物。７．ｐＨ調節剤が胃のｐＨを記載された範囲内に緩衝化するために使用される、請求の範囲第１〜６項のいずれかに記載の組成物。８．該緩衝剤が炭酸および／または重炭酸イオンからなる、請求の範囲第７項に記載の組成物。９．炭酸塩または重炭酸塩の濃度が少なくとも約０．１Ｍである、請求の範囲第８項に記載の組成物。１０．１単位服用量を１０ｍｌの水に分散する際に少なくとも０．０４５Ｍの濃度を得るのに十分な重炭酸または炭酸イオンを含む請求の範囲第８項または第９項に記載の組成物。１１．ｐＨ調節剤自体が胆汁酸または胆汁酸塩からなる、請求の範囲第１〜１０項のいずれかに記載の組成物。１２．ジ−またはトリ−カルボン酸の塩、例えば、クエン酸塩、エチレンジアミン４酢酸（ＥＤＴＡ）、エチレングリコールビス−（β−アミノエチルエーテル） −Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−４酢酸（ＥＧＴＡ）またはフィチン酸塩等のポリリン酸塩などのカルシウムイオンのキレート剤を含む、請求の範囲第１〜１１項のいずれかに記載の組成物。１３．該生物学的活性物質がインスリン、カルシトニン、成長ホルモン、インターフェロン、インターロイキン等のタンパク質またはこれらの活性断片である、請求の範囲第１〜１２項のいずれかに記載の組成物。１４．該生物学的活性物質がオリゴヌクレオチド（若しくはその類似体）または多糖である、請求の範囲第１〜１２項のいずれかに記載の組成物。１５．該生物学的活性物質の分子量が約２０，０００Ｄａ未満である、請求の範囲第１〜１４項のいずれかに記載の組成物。１６．該生物学的活性物質の分子量が約１０，０００Ｄａ未満である、請求の範囲第１５項に記載の組成物。１７．乾燥固体として配合される請求の範囲第１〜１６項のいずれかに記載の組成物。１８．錠剤、丸剤、粉末、顆粒または微顆粒の形態を有する、請求の範囲第１７項に記載の組成物。１９．作用剤と共に一緒に投与される生物学的活性物質の生物学的利用能を向上することを目的とした作用剤の調製における胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質の使用。２０．患者に活性物質、胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨ値に調節するために使用される物質を一緒に投与することからなる、活性物質の生物学的利用能の向上方法。２１．患者に活性物質、胆汁酸塩および胃のｐＨを７．５から９までのｐＨに調節するために使用される物質を一緒に投与することからなる、（胃内の生理活性物質の透過促進剤としての作用能に関する）胆汁酸塩の有効治療指数の向上方法。