JPH10502341A - 微小結晶製剤用の安定剤被膜としてのブチレンオキサイド−エチレンオキサイドブロック共重合体界面活性剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、治療又は診断薬を含み、その表面に吸収された表面改質剤として非イオン性の高分子界面活性剤を有す微粒子からなる合成物、エチレンオキサイドとブチレンオキサイドのブロック共重合体である界面活性剤、及びその微粒子の製造方法を提供する。その微粒子は減少したマクロファージ摂取と改良された毒物学上の特性とを有し、粉砕時間の短縮が可能かつ／又はその微粒子の無菌濾過が達成可能な粒子径の減少を促進する。

Description

【発明の詳細な説明】 微小結晶製剤用の安定剤被膜としてのブチレンオキサイド−エチレンオキサイド ブロック共重合体界面活性剤 発明の分野 本発明は、界面活性剤を含む治療用及び診断用合成物、及びその調製方法に関 する。 本発明の背景 アメリカ特許第５，１４５，６８４号はその表面に吸収された表面改質剤を有 する薬物粒子とウエット粉砕によるその調製方法を開示する。これらの粒子は重 要な製剤上の利用性を示してきた。記載された適当な表面改質剤は様々な高分子 を含む。開示された所望の表面改質剤は、エチレンオキサイドとプロピレンオキ サイドのブロック共重合体であるPluronic F68とF108及びエチレンジアミンへの プロピレンオキサイドとエチレンオキサイドの規則的な付加から生成される４官 能ブロック共重合体のTetronic 908を含む。 アメリカ特許第５，３１８，７６７号はその表面に吸収された表面改質剤を有 するＸ線造影剤粒子を含むＸ線造影用合成物とウエット粉砕によるその調製方法 を開示する。上記記載の表面改質剤はそこでも有効であるとして開示される。こ れらのＸ線造影用合成物はＸ線医療診断用の画像形成において非常に有効である ことが示された。 P．Sampotdar他は、１９９２年１２月１０日に出願されたアメリカ特許出願第 ０７／９８８，５６４号において、Olin-10 G、即ち、改善されたオートクレー ブ安定性を持つｐ−イソノニルフェノキシ ポリ（グリシドール）を有する治療用及び診断用合成物を開示する。 しかしながら、幾つかの上記高分子界面活性剤は、例えば”よごれ細胞”分析 において毒物学上の優秀とされる特性に比べ劣ることが示された。加えて、これ ら従来技術の界面活性剤被膜はある場合に、望みのマクロファージ摂取阻害を発 揮しなかった。 さらに、表面改質剤によって安定化された微粒子中の治療及び診断薬の消毒は 難しい。０．２２μｍメッシュのフィルターを用いる濾過は殆どのバクテリアと ウイルスを除くのに十分であるが、微粒子は自身の大きさのために、実質的な薬 剤ロスの原因とならずに濾過されて無菌となりえない。 その上、上記特許記載のウエット粉砕法は、例えば、工程のスケールアップの 観点からは望ましくない数日間または数週間にも及ぶ粉砕を必要とすることがあ る。 その結果、よごれ細胞効果を減らし、マクロファージ摂取を阻害し、粉砕時間 の短縮を可能かつ／又は実質的な粒子のロス無しに微粒子の無菌濾過を達成可能 とする粒子径の減少を促進する微粒子用の界面活性剤被膜の提供が強く望まれて いる。 本発明の概要 我々はよごれ細胞効果を減らし、マクロファージ摂取を阻害し、そして粒子径 の減少を予想外に促進する微粒子用の界面活性剤被膜を見出した。 さらに限定すると、本発明に従い、治療又は診断薬を含み、その表面に吸収さ れた表面改質剤としてエチレンオキサイドとブチレンオキサイドのブロック共重 合体である非イオン性高分子界面活性剤を有す微粒子からなる合成物を提供する 。 劣化したよごれ細胞効果を示す微粒子合成物のための界面活性剤の提供が本発 明の有用な特徴である。 マクロファージ摂取を阻害する微粒子合成物の提供が本発明の別の有用な特徴 である。 本発明のまた別の有用な特徴は、微粒子合成物の粒子径の狭い範囲内での提供 である。 本発明のさらに別の有用な特徴は、粉砕時間を減らしかつ実質的な粒子ロスの 無い微粒子の無菌濾過の達成を潜在的に可能とする粒子径の減少を促進する界面 活性剤被膜が微粒子用に提供されることである。 これら及びその他の有用性は、下記所望の実施例参照により直ちに明らかとな る。 所望の実施例の記載 本発明を以下主に、その表面に吸収された表面改質剤としてのエチレンオキサ イド又はブチレンオキサイドの非イオン性のブロック共重合体を有する治療又は 診断薬を含む微粒子に関連して以下に説明する。加えて、本発明は、例えば、写 真用及び化粧用の薬剤を含む微粒子を有し、かつ他のエチレンオキサイドとペン チレンオキサイド、ヘキシレンオキサイド、シクロエキシレンオキサイドやスチ レンオキサイド等、他の疎水物とのブロックを含む非イオン性の高分子性表面改 質剤を有する合成物に有効である。 ここで有効な界面活性剤は非イオン性ブロック共重合体である。所望の界面活 性剤は、分子の親水性部分として少なくとも一のポリエチレンオキサイド（ＰＥ Ｏ）ブロックと界面活性剤の疎水部分として少なくとも一のポリブチレンオキサ イド（ＰＢＯ）ブロックを有す。特に好ましい界面活性剤は、例えば、以下の構 造式： （−ＰＥＯ−）（−ＰＢＯ−）； （−ＰＥＯ−）（−ＰＢＯ−）（−ＰＥＯ−）； 及び（−ＰＥＯ−）（−ＰＢＯ−）（−ＰＥＯ−）（−ＰＢＯ−） 等により表されるのエチレンオキサイドとブチレンオキサイドのジブロック、ト リブロック、そしてより高級なブロック共重合体である。望みの界面活性剤は、 ミシガン州ミッドランドのDow Chemicalから市販されて入手可能で、この後Ｂ２ ０−３８００及びＢ２０−５０００と称する分子量３８００と５０００の（−Ｐ ＥＯ−）（−ＰＢＯ−）（−ＰＥＯ−）構造のトリブロック共重合体を含む。こ れらの界面活性剤は約８０重量％のＰＥＯを含む。 所望の実施例では、界面活性剤は以下の構造のトリブロック共重合体であり、 ： ここで、Ｒは水素若しくはアルキル、アリール、カルボキシアルキル又はカルボ キシアリール等の活性水素基、ｘは１５〜７００、ｙは５〜２００、そしてｚは １５〜７００である。特に好ましい実施例においては、界面活性剤は１，０００ 〜５０，０００の、望ましくは２，０００〜４０，０００の、さらに望ましくは ３，０００〜３０，０００の分子量を有す。所望の実施例において、高分子は少 なくとも５０重量％、さらに好ましくは少なくとも６０重量％のエチレンオキサ イドユニットからなる。この理由は親水性ユニットである主重量部の存在は高分 子に水溶性を付与することにある。 出願人は理論的なメカニズムに縛られることを望まないが、高分子鎖中のブチ レンオキサイド疎水物質の存在は、治療及び診断薬粒子の表面を被覆する界面活 性剤の能力を高める界面活性剤と疎水性の治療又は診断薬との親油性相互作用を 増加すると考えられる。 この表面改質剤は市販されて入手可能であり、かつ／又、従来技術で知られる 技法によって調製されうる。 本発明の実施において有効な微粒子は、アメリカ特許第５，１４５，６８４号 及びアメリカ特許第５，３１８，７６７号記載の方法 に従い調製可能である。 本発明に従う微粒子合成物の調製方法は、治療及び診断薬、液状媒体、粉砕媒 体、それから任意だが表面改質剤を粉砕容器に導入し、ウエット粉砕で約１００ ０ｎｍ以下薬剤の粒子径を小さくし、例えば吸引、濾過又は蒸発により粉砕容器 と粉砕媒体から粒子と液状媒体を分離する段階を含む。表面改質剤がウエット粉 砕中に存在しない場合、その後で粒子と混合可能である。ほとんどの場合は水の 液状媒体は、薬学上摂取可能なキャリヤーとして働きうる。この方法は好ましく は無菌状態下で実施される。 本発明の実施に有効な粒子調製の一般的な手順は次の通りである。選択の治療 又は診断薬が市販され、かつ／又は従来技術で知られる技法により調製されて、 通常の粗い目の形状で入手される。本質的ではないが、選択の粗治療又は診断物 質の粒子径はふるい分析評価による約１００μｍ以下が望まれる。その薬剤の粗 粒子の径が１μｍ以上の場合、治療又は診断薬の粗粒子は、エアージェット粉砕 又は破砕等の従来粉砕方法を使用し１００μｍ以下まで大きさを小さくすること が望ましい。 選択の粗治療又は診断薬は、その後その中ではプレミクスを形成して本質的に 不溶の液状媒体に加えられる。液状媒体中の治療又は診断薬の濃度は、薬０．１ 〜６０％（Ｗ／Ｗ）、そして好ましくは５〜３０％（Ｗ／Ｗ）まで変化しうる。 本質的ではないが、表面改質剤はそのプレミクス中に存在するのが好ましい。表 面改質剤の濃度は薬物質と表面改質剤全体の重量を基礎として、約０．１から９ ０重量％まで、好ましくは１から７５重量％まで、さらに好ましくは２〜５０重 量％そして最も好ましくは５〜４５重量％まで変化しうる。プレミクス懸濁液の みかけ粘度は、約１０００センチポアズ以下が好ましい。 そのプレミクスは分散物中の平均粒子径を１０００ｎｍ以下にするためにウエ ット粉砕に直接用いうる。ボールミルが磨滅に使用さ れるとき、プレミクスを直接用いるのが望ましい。代わりに、治療又は診断薬、 任意だが表面改質剤は、肉眼で可視の大きな団塊の無い均一分散が観測されるま で、例えばローラーミル又はカウレス型ミキサー等の適当な攪拌機を使用して液 体媒体中に分散可能である。循環媒体ミルを磨滅に使うときは、プレミクスはこ のような前粉砕による分散段階を受けることが望ましい。 ウエット粉砕は、例えばボールミル、磨滅ミル、振動ミル、プラネタリイミル 及びサンドミルやビードミル等の媒体ミルを含む適当な分散ミル中で行なえる。 媒体ミルは、意図する結果、即ち、粒子径の望みの減少の提供に必要な時間が相 対的に短いため好まれる。媒体粉砕用のプレミクスのみかけ粘度は約１００から 約１０００センチポアズが好ましい。ボール粉砕用のプレミクスのみかけ粘度は 約１近くから約１００センチポアズが好ましい。この範囲は、効果的な粒子破砕 と媒体浸食間の最適バランスを提供する傾向がある。 粒子径の減少段階用の粉砕媒体は平均粒径約３ｍｍ、より好ましくは約１ｍｍ 以下を有する望ましくは球状又は粒子状の強固な媒体から選択可能である。その ような媒体は望ましく、より短い製造時間内の本発明粒子の提供と、粉砕設備の より少ない磨耗を可能とする。粉砕媒体用物質の選択は、重要とは考えられてい ない。しかしながら、例えばガラス（２．６ｇ／ｃｍ³）、ジルコニウムシリケ ート（３．７ｇ／ｃｍ³）、ジルコニウムオキサイド（５．４ｇ／ｃｍ³）など、 一般により高密度の媒体はより効率的な粉砕として好まれる。マグネシアで安定 化した９５％ＺｒＯ等のジルコニウムオキサイド、ジルコニウムシリケート、及 びガラスの粉砕媒体は治療用又は診断用合成物の調製用に受容可能な汚染水準を 有す粒子を供給する。しかしながら、ステンレスチール、チタニア、アルミナ、 及びイットリウムで安定化した９５％ＺｒＯ等の他の媒体は有効であると考えら れる。加えて、典型的に１から２ｇ／ｃｍ³の密度を有する高分子媒体もある種 の粉砕条件下で有効であると予想さ れる。欧州特許第６００，５２８号記載のように粉砕媒体は高分子樹脂も可能で ある。 磨滅時間は幅広く可変で、先ず第一に粒子をウエット粉砕するミル選択に依存 する。ボールミルの場合、５日近く又はそれ以上の工程時間が必要となる。一方 、高い剪断回数の媒体ミル使用により（約一分の滞留時間が数時間に匹敵して） 一日以内の工程時間で所望の結果が得られる。 粒子は治療又は診断薬を目に見えて劣化させることのない温度で径を小さくさ れる。工程温度は一般に約３０〜４０°Ｃが好まれる。望ましい場合、工程設備 は従来冷却設備で冷却しうる。本方法は周囲温度条件下、粉砕工程にとって安全 で効率よい工程気圧で簡便に実施される。例えば、周囲の工程気圧はボールミル 、磨滅ミル及び振動ミルに典型的である。約２０ｐｓｉ（１．４ｋｇ／ｃｍ²） 近い工程気圧は媒体ミルに典型的である。 表面改質剤はプレミクス中に存在しない場合、プレミクスについて記載した際 の量で磨滅の後に分散体へ添加される。その後、例えば激しい振動により分散体 は混合しうる。任意だが、分散体は、例えば超音波電源を使用する超音波処理段 階を受ける。例えば、分散体は約１から１２０秒間２０〜８０ｋＨｚの周波数を 有す超音波エネルギーを受ける。 治療又は診断薬と表面改質剤の相対量は幅広く可変で、表面改質剤の最適量は 、例えば、治療又は診断薬と表面改質剤の選択、それがミセルを形成する場合は 表面改質剤の臨界ミセル濃度、安定剤の親水性と親油性のバランス（ＨＬＢ）、 安定剤の融点、水溶解性、安定剤水溶液の表面張力等に依存しうる。表面改質剤 は、１メートル四方の治療又は診断薬表面領域に対して約０．１〜１０ｍｇの量 での存在が好ましい。表面改質剤は乾燥粒子の総重量を基礎として、０．１〜９ ０重量％、好ましくは１〜７５重量％、より好ましくは２〜５０重量％、最も好 ましくは５〜４５重量％の量で存在しうる 表面改質剤は臨界ミセル濃度を超える量での存在が好ましい。 本発明の合成物中で有効な治療又は診断薬は、開示内容が引用されてここで具 体化されるアメリカ特許第５，１４５，６８４号及びアメリカ特許第５，３１８ ，７６７号に開示されたものを含む。所望の診断薬はＸ線造影剤であるエチル３ ，５−ジアセトアミド−２，４，６−トリヨードベンゾエート、（化合物Ａ）； ６−エトキシ−６−オキソヘキシル−３，５−ビス（アセトアミド）−２，４， ６−トリヨードベンゾエート、（化合物Ｂ）；エチル−２−（３，５−ビス（ア セトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）ブチレート；エチル ジアトリゾキシアセテート；エチル２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２， ４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）プロピオネート；Ｎ−エチル２−（３， ５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセト アミド；イソプロピル２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリ ヨードベンゾイルオキシ）アセトアミド；ジエチル２−（３，５−ビス（アセト アミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）マロネート；及びエチル ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキ シ）フェニルアセテートを含む。 本発明に従う微粒子合成物の調製方法は、治療及び診断薬、液状媒体、粉砕媒 体、それから任意だが表面改質剤を粉砕容器に導入し、ウエット粉砕で約１００ ０ｎｍ以下の薬剤の粒子径を小さくし、例えば吸引、濾過又は蒸発により粉砕容 器と粉砕媒体から粒子と液状媒体を分離する段階を含む。表面改質剤がウエット 粉砕中に存在しない場合、その後で粒子と混合可能である。ほとんどの場合は水 の液状媒体は、薬学上の摂取可能なキャリヤーとして働きうる。この方法は好ま しくは無菌状態下で実施される。その後、微粒子合成物は消毒工程を通ることが 望ましい。 他の場合を記すと、無菌濾過は微粒子に対して活性物質の有効量 のロス無しに十分な消毒効果を挙げない。本発明の合成物は無菌濾過されうるが 、他の消毒方法も採用しうる。例えば、温度約１２１°Ｃ時間約２０分の蒸気又 は湿性の熱消毒が可能である。海面付近の標高では、この条件は大気圧より１５ ポンドパースクエアインチ（ｐｓｉ）高い圧力で蒸気を用いた場合に達成される 。 乾燥加熱消毒も行なわれ、その時乾燥加熱消毒の温度は１から２時間の間一般 に１６０°Ｃである。 所望の実施例においては、表面改質された微粒子形状の治療又は診断薬は、蒸 気加熱オートクレービング中の安定性を向上する曇点改良剤と組み合わされえ、 即ち曇点改良剤は熱消毒の間に粒子集合体を分散することができる。好ましい曇 点改良剤は、ＰＥＧ ４００のようなポリエチレングリコール、プロピレングリ コール、エタノール、ヒドロキシプロピルシクロデキストリン及びグリセロール のような非イオン性の曇点改良剤や；アメリカ特許第５２９８２６２号に記載さ れているような、スルホスクシン酸ナトリウムのジオクチルエステル（ＤＯＳＳ ）のようなスクシン酸ナトリウムのジアルキルエステルを含むイオン性の曇点改 良剤や；そしてジアシルホスファチジルグリセロール及びジミリストイルホスフ ァチジルグリセロールのような荷電リン脂質を含む。曇点改良剤は、Ｘ線造影用 合成物全体の重量を基礎として０．００５から５０重量％、好ましくは０．０１ から３０重量％、そしてより好ましくは０．０５から２０重量％の量で存在しう る。 本発明の治療及び診断用合成物は上記の粒子とそれ用の薬学上摂取可能なキャ リヤーとを含む。適当な薬学上摂取可能なキャリヤー当業者には良く知られてい る。これらは非経口注入、固形又は液状での経口投与及び直腸投与用等の無毒の 性理学的に摂取可能なキャリヤー、アジュバント又は媒剤を含む。本発明に従う 哺乳類の処置方法は、効果的な量の上記の治療用合成物を処置を求める哺乳類に 投与する段階からなる。処置用治療材の選択投与量水準は、特定の 合成物と投与方法に対して求める治療反応を得るのに有効である。そのため、選 択投与量水準は、特定の薬物、求める治療効果、投薬ルート、望みの処置期間、 その他の要因に依存する。 所望の実施例においては、診断用化合物はヨード化Ｘ線造影剤等のヨード化さ れたＸ線造影用剤である。即ち、本発明の診断用合成物は、Ｘ線造影剤とそれ用 の性理学的に摂取可能なキャリヤーとを含むＸ線造影用合成物である。例えば、 粒子は、Ｘ線造影剤用のキャリヤーとして働く水性の液体の中に分散されること が可能である。他の適当なキャリヤーとしては、アルコール等の水性溶媒と非水 性の溶媒との混合溶媒のような液体キャリヤーや；ジェルや；空気などの気体や ；そして粉体を含む。 Ｘ線造影用合成物は、約１から９９．９重量％、好ましくは２から４５重量％ 、そしてさらに好ましくは１０から２５重量％の上記の粒子からなり、その合成 物に対する残りはキャリヤーと、添加物等である。合成物が凍結乾燥された状態 にあるときは、粒子に対し約１００重量％に達する合成物が考えられる。 Ｘ線造影用合成物は、Ｘ線造影剤の特性を制御及び／又は高める一以上の通常 の添加剤含むことが可能である。例えば、デキストラン又は人血清アルブミンの ような濃厚剤、緩衝剤、粘度調整剤、浮遊剤、コロイド化剤、凝固防止剤、混合 化薬剤、そして他の薬剤等を添加することが可能である。ある特定の添加物のリ ストの一部には、ゴム、デキストリンのような砂糖、人血清アルブミン、ゼラチ ン、アルギン酸ナトリウム、寒天、デキストリン、ペクチン及びナトリウムカル ボキシメチルセルロースを含んでいる。このような添加物、界面活性剤、防腐剤 等は、本発明の組成に組み込むことが可能である。 本発明に従う医療的処方における利用のための診断用画像形成方法は、Ｘ線を 必要とする被験者の体への、上記したＸ線造影用合成物の効果的な造影作用を生 み出す量の投与から成る。人間の患者に 加えて、被験者としては、ウサギ、犬、猫、サル、羊、豚、馬、ウシ属の動物等 の哺乳動物種を含みうる。その後、投与された造影剤を含んでいる体の少なくと も一部が、造影剤の存在に対応して現れるＸ線映像パターンを作るためにＸ線に さらされる。映像パターンはその後に可視化される。例えば、いくつかのＸ線の 可視化技術、好ましくは、コンピューター化された断層撮影法のような高いコン トラストの技術が、従来の方法に適用されうる。或いは、映像パターンは、Ｘ線 感光性の蛍光スクリーン−ハロゲン化銀写真フィルムの組合せの上で直接観測す ることができる。 本発明の合成物は、処方のタイプ及び試験される組織の解剖学的な方位に応じ て、様々なルートにより投与されうる。適当な投与のルートとしては、カテーテ ルによる脈管内（動脈の若しくは静脈の）投与、静脈内注入、直腸投与、皮下投 与、筋肉内投与、病変体内投与、髄腔内投与、槽内投与、経口投与、吸入法によ る投与、例えば、関節造影法等の体内腔への直接投与等を含む。好ましい応用に 加えて、つまり血液プール、肝臓、脾臓やリンパ節の映像のために、本発明のＸ 線造影用合成物は血管造影用媒質、尿路造影用媒質、脊髄造影用媒質、胃腸の造 影用媒質、胆嚢及び胆管造影用媒質、関節造影用媒質、子宮卵管造影用媒質、口 内の造影用媒質及び気管支造影用媒質としてもまた有効であると期待される。 投与される造影剤の一回の使用量は、十分な造影効果が得られるよう当業者に 知られている技術に従って選択されうる。典型的な一回の使用量は、多くの画像 形成の適用を受ける被験者の体重１キログラム当りヨウ素が５０から３５０ｍｇ の範囲をとりうる。幾つかの適用、例えばリンパ管造影の用途には、より少ない 一回の使用量、例えば、０．５から２０ｍｇヨウ素／ｋｇで効果的にすることが できる。 Ｘ線造影用合成物は、Ｘ線造影剤の特性を制御かつ／又は高める一以上の従来 の添加剤を含むことが可能である。例えば、デキスト ラン又は人血清アルブミンのような濃厚剤、緩衝剤、粘度調整剤、浮遊剤、コロ イド化剤、凝固防止剤、混合化薬剤、そして他の薬剤等を添加することが可能で ある。ある特定の添加物のリストの一部には、ゴム、デキストリンのような砂糖 、人血清アルブミン、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、寒天、デキストリン、 ペクチン及びナトリウムカルボキシメチルセルロースを含んでいる。このような 添加物、界面活性剤、防腐剤等は、本発明の組成に組み込むことが可能である。 本発明は更に、安定な微粒子を形成するための十分な時間と条件で該治療又は 診断薬をエチレンオキサイド及びブチレンオキサイドの非イオン性ブロック共重 合体と接触することよりなる、その表面に吸収されたエチレンオキサイドとブチ レンオキサイドの非イオン性ブロック共重合体を有す微粒子の製造方法に関する 。接触は治療又は診断薬の分散体と上記等のブロック共重合体の溶液との混合よ りなしうる。 以下に記載する例は本発明を更に例示するものである。 例１〜４及び比較例Ａ〜Ｄ 以下の製剤は１５％の診断薬と４％の界面活性剤から調製される（ｗ／ｖ）． ６００ｍｇのＢ２０−３８００若しくはＢ２０−５０００の１０ｍｌの脱イオン 化水への溶解により６％の母液が調製される。１５ｍｌの琥珀色の色付きビンに 、７．５ｍｌの１．１ｍｍ径のＺｒＳｉビーズ、５６２ｍｇの化合物Ａ又は化合 物Ｂ、２．５ｍｌの６％界面活性剤母液、及び０．９９４ｍｌの脱イオン化水が 加えられた。この試料ビンはシールされ、１６０ｒｐｍで回転するローラーミル 上に５日間置かれた。５日目、分別された試料の一部が、フォトンコリレーショ ンスペクトロスコピー（ＰＣＳ）の粒径測定用に脱イオン化水で５０倍に希釈さ れた。 このデータは、エチレンオキサイドーブチレンオキサイド界面活性剤が、エチ ル３，５−ジアセトアミド−２，４，６−トリヨードベンゾエート及び６−エト キシ−６−オキソヘキシル−３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリ ヨードベンゾエートの２つのＸ線造影剤コアと共に粉砕された場合、同一粉砕条 件下でのＦ１０８及びＴ９０８に比べ予想以上に平均粒径を低下させることを表 す。 加えて、ねずみ一に対し０．０５ｍｌ（ｎ＝３）及びねずみ一に対し０．５ｍ ｌ（ｎ＝３）の２％Ｂ２０−５０００溶液を尾の静脈へ注入することにねずみは 十分に耐えた。 Ｂ２０−３８００は以下の手順に従い汚れ細胞分析がテストされた。この技法 は全血中のリンパ球上の界面活性剤のインビトロ効果評価用に開発された。丸底 の９６容器マイクロタイタープレートの容器それぞれに２２５μｌの人全血と２ ５μｌの所望濃度の界面活性剤溶液をピペットで投入した。そのプレートは界面 活性剤／血液混合物を定温放置するため血液保管庫に室温で２時間置かれる。定 温放置の後、界面活性剤／血液混合物の小滴がスライドガラス上に置かれ、楔状 に調整された血液標本がそのスライド上に作られた。その標本は空気乾燥され、 標本を固める為にエタノールに触れ、そ の後Sigma Chemicalから入手したWright-Giemsa 着色剤で色付けされる。汚れ細 胞としてスライド上に現れる損傷を受け又は破壊された細胞膜を有すリンパ球は 、目に見える白血球総数の百分率として数えられる。１５以上の平均汚れ細胞数 は、統計的に有効な陽性の汚れ細胞効果と認識される。Ｂ２０−３８００は１０ 、１及び０．００１％（ｖ／ｖ）の濃度で上記の汚れ細胞分析評価がされた。対 照Ａは消毒水（界面活性剤無し）を含み、参照Ｂは１％のＴ９０８を含む。テス ト結果は以下の通りであった。 データは、Ｂ２０−３８００はＴ９０８対照に比べ、１０倍の高濃度でも、有 効な低い平均汚れ細胞数と高い平均無損傷リンパ球数を示すことを表す。 Ｂ２０−３８００は劇的とされる程の効果は示さないが、ポリスチレン粒子を 被覆したＢ２０−５０００はマクロファージによるその粒子の摂取作用を有効に 阻害した。ポリスチレン粒子を被覆した界面活性剤のマクロファージ摂取の阻害 能力は、E．Liversidge 他によって”Direct Suppuression of Phagocytosis by Amphiphatic Polymer Surfactants”,Pharm．Res.;Vol．9，No．9，pp．1177-8 3中に記載された手順に従ってテストされた。Ｂ２０−５０００界面活性剤を被 覆したポリスチレン粒子の場合、細胞毎に数えられた粒子数は約３，０００；Ｂ ２０−３８００界面活性剤被覆の粒子の場 合約２８，０００、そして未被覆のポリスチレン粒子対照の場合約４７，０００ であった。換言すると、Ｂ２０−５０００はマクロファージ摂取において対照に 比べ約９５％の減少を示し、Ｂ２０−３８００は約４０％の減少を示した。 例５〜６ 上記例１〜４中に記載されたのと同様の手順でダナゾールはＢ２０−５０００ 及びＢ２０−３８００と一緒に粉砕された。ＰＣＳによって測定された平均粒径 はそれぞれ１９６ｎｍ及び１８９ｎｍであった。 本発明は、それの好ましい実施例を明らかにするために特定の参照例を用いて 詳細に説明してきたが、本発明の意図と目的の内において、多様性と改良がもた らされうる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，Ｍ Ｃ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ， ＴＤ，ＴＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，Ｋ Ｅ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ， ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，Ｔ Ｔ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． その表面に吸収された表面改質剤としての非イオン性の高分子界面活性剤 を有する治療又は診断薬を含む微粒子からなり、該界面活性剤はエチレンオキサ イドとブチレンオキサイドのブロック共重合体である合成物。 ２． 該高分子は３，０００〜５，０００の分子量を有す請求項１記載の合成物 。 ３． 該界面活性剤は構造 を有するトリブロック共重合体であり、 ここでＲは水素又は活性水素基、ｘ及びｙは１５〜７００；ｚは５〜２００であ る、 請求項１記載の合成物。 ４． 該高分子は少なくとも５０重量％のエチレンオキサイドからなる請求項１ 記載の合成物。 ５． 該診断薬はエチル３、５−ジアセトアミド−２，４，６−トリヨードベン ゾエートである請求項１記載の合成物。 ６． 該診断薬は６−エトキシ−６−オキソヘキシル−３，５−ビス（アセトア ミド）−２，４，６−トリヨードベンゾエートである請求項１記載の合成物。 ７． 該治療薬はダナゾールである請求項１記載の合成物。 ８． その表面に吸収されたエチレンオキサイドとブチレンオキサイドの非イオ ン性ブロック共重合体を有する診断又は治療薬を含む微粒子を、該診断又は治療 薬をエチレンオキサイド及びブチレンオキサイドのブロック共重合体と安定化微 粒子を形成するのに十分な時間と条件下で接触させて製造する方法。