JPH10273495A - ガリック酸エステル誘導体及びこれを有効成分とする医薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ポリヒドロキシ化合物の水酸基の水素の
１又は２以上がガロイル基で置換されたガリック酸エス
テル誘導体及びこれを有効成分とする医薬。 【効果】 この化合物は毒素原性大腸菌、サルモネラ
属、病原性ビブリオ菌（コレラ菌、腸炎ビブリオ）、赤
痢菌、カンピロバクター属菌などに代表される生体内毒
素型細菌による腸管感染症の治療に有効である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は新規な糖誘導体及び
これを含有する医薬に関し、更に詳細にはガリック酸エ
ステル誘導体及びこれを有効成分とする生体内毒素型細
菌による腸管感染症治療剤等の医薬に関する。

【０００２】

【従来の技術】１９９０年のＷＨＯの統計によれば、世
界中の全死亡者の１／３は感染症によって占められ、そ
の中でも急性呼吸器感染症、下痢症、結核の死亡者が最
も多く、この３疾患で年間死亡者数が１０００万人に達
していると言われている。近年の国際交通の増加と高速
化により、人々の各国間の往来は益々頻繁になってきて
いる。それに伴って問題になるのは、人の移動と共に広
がる重大感染疾患の拡散である。特に発生頻度の高い、
旅行者下痢症と呼ばれる腸管感染症には、毒素原性大腸
菌、サルモネラ属、病原性ビブリオ菌（コレラ菌、腸炎
ビブリオ）、赤痢菌、カンピロバクター属菌などの菌に
よる感染性疾患が挙げられる。

【０００３】上記細菌性疾患の１つであるコレラは、Vi
brio choleraeのＯ抗原の違いによって１８０種類にも
及ぶ血清型に分けられており、このうちのＯ１血清型に
よって起こる疾患であると考えられていた。Ｏ１以外の
血清型菌は、まとめてnon−Ｏ１と通称されており、典
型的なコレラの流行を起こした報告はなかった。ところ
が、１９９２年１０月インド南部のマドラスにおいて、
Vibrio cholerae non−Ｏ１によるコレラの大流行が発
生し、この流行は瞬く間にベンガル湾沿いにカルカッタ
へも波及した。同年１２月−翌年１月にかけて、隣国の
バングラデシュにおいても、同種のnon−Ｏ１コレラ菌
によるコレラの大流行が起こった。当時Vibrio cholera
eの血清型は１３８種類報告されていたが、これらの流
行株は同一の血清型に属するものの、１３８種類のどれ
にも属さないことが明らかとなり、Ｏ１３９と分類され
た。またベンガル湾沿いに流行が拡大したことから、Be
ngalという通称名が与えられた。

【０００４】Vibrio cholerae Ｏ１３９ Bengal（Ｏ１
３９ベンガル型コレラ菌）によるコレラ流行は、わずか
半年余りでインド全土に広がり、カルカッタの市立伝染
病院の入院患者からは、一時期Vibrio cholerae Ｏ１が
まったく分離できなくなった。遺伝子解析などの成績か
ら、Ｏ１３９型菌はＯ１エルトール菌から由来したもの
であることはわかったものの、Ｏ１３９血清型に特異的
な抗原の合成を担っている遺伝子がどこに由来している
のかはまだわかっていない（Mebio,13(7), 19-23(199
6)）。

【０００５】コレラは、コレラ菌の感染によって生じる
激しい水様性の下痢を主体とする非常に死亡率の高い疾
患である。この水様性下痢の発生機構は次のように考え
られている。

【０００６】（１）経口摂取されたコレラ菌が小腸粘膜
に付着・定着する。 （２）ＣＴ（コレラトキシン）を産生する。 （３）ＣＴが腸管上皮細胞のアデニレートサイクラーゼ
を活性化する。 （４）ｃＡＭＰを上昇させる。 （５）ｃＡＭＰ依存性のＣｌ−チャネル（ＣＦＴＲ）を
介してコレラの主症状である水様性下痢を引き起こす。

【０００７】上記（３）のステップは、より詳細には、
コレラトキシンがＧ蛋白質をＡＤＰリボリル化し、その
下流にある情報伝達を阻害することにより、アデニレー
トサイクラーゼを活性化するものといわれている（病態
生理，14(3),181-186(1995),飯田哲也，余明順，本田武
司）。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】このように、コレラ菌
に代表される腸管感染症原因菌が産生する毒素の活性を
阻害し、無毒化することができれば、これらの感染症の
根本的治療は可能になると考えられ、その出現が望まれ
ている。従って、本発明の目的は腸管感染症原因菌が産
生する毒素による生体内反応を阻害し、当該感染症を治
療するための医薬を提供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者は、大黄、桂
皮、黄連、麻黄又はこれらの抽出物がコレラトキシンの
活性を阻害・抑制することを見出した（ＷＯ９４／０３
１９３）。その後、より安全で有効性が高く、かつ医薬
としての使用性を容易ならしめるために、上記生薬中の
有効成分を精製分離することを試みた。その結果、大黄
抽出物中のＲＧタンニンに極めて強いＡＤＰ−リボシル
トランスフェラーゼ阻害作用及びコレラトキシンに代表
される腸管感染症が産生する毒素による下痢治療作用を
見出し、またＲＧタンニンと抗生物質とを併用すれば更
に当該治療効果が向上することを見出し、先に特許出願
した（特願平８−１８４８３５号）。しかしながら、Ｒ
Ｇタンニンは基本構造が複雑な上、単一な化合物ではな
いため、化学的に合成するのは困難であり、また医薬品
としての品質管理も困難であった。

【００１０】かかる実状に鑑み、本発明者らは鋭意研究
を重ねた結果、ポリヒドロキシ化合物の水酸基の水素の
１又は２以上がガロイル基で置換されたガリック酸エス
テル誘導体が、優れたＡＤＰ−リボシルトランスフェラ
ーゼ阻害作用及び生体内毒素型腸管感染症治療作用を有
し、医薬として有用であることを見出し、本発明を完成
するに至った。

【００１１】すなわち、本発明は、ポリヒドロキシ化合
物の水酸基の水素の１又は２以上がガロイル基で置換さ
れたガリック酸エステル誘導体を提供するものである。
また本発明は、前記ガリック酸エステル誘導体を有効成
分とする医薬を提供するものである。更に本発明は前記
ガリック酸エステル誘導体を有効成分とするＡＤＰ−リ
ボシルトランスフェラーゼ阻害剤を提供するものであ
る。

【００１２】

【発明の実施の形態】本発明のガリック酸エステル誘導
体は、次の一般式（１）

【００１３】

【化１】

【００１４】（式中、Ｒ¹ はポリヒドロキシ化合物残基
を示し、ｎは１からポリヒドロキシ化合物の全水酸基数
までの数を示す）で表わすことができる（以下、本発明
化合物（１）ということがある）。

【００１５】式（１）中、Ｒ¹ で示されるポリヒドロキ
シ化合物としては、水酸基を２個以上有する化合物であ
れば特に制限されず、多価アルコール類、多価フェノー
ル類、糖アルコール類、単糖類、オリゴ糖類等が挙げら
れる。

【００１６】このうち、Ｄ−型及びＬ−型の糖アルコー
ル、単糖及びオリゴ糖が好ましい。糖アルコールとして
は例えばエリトリトール、トレイトール、リビトール、
アラビニトール、キシリトール、リキシトール、アリト
ール、アルトリトール、グルシトール、マンニトール、
グリトール、イディトール、ガラクチトール、タリトー
ル、イノシトール等が挙げられる。単糖としては例えば
グリセルアルデヒド、トレオース、エリトロース、リボ
ース、アラビノース、キシロース、リキソース、アロー
ス、アルトロース、グルコース、マンノース、グロー
ス、イドース、ガラクトース、タロース、グリセロテト
ロース、エリトロペントロース、トレオペントロース、
フルクトース、プシコース、タガトース、ソルボース等
が挙げられる。オリゴ糖としては、スクロース、マルト
ース、ラクトース、トレハロース、セロビオース等の二
糖類、マルトトリオース、ラフィノース、ゲンチアノー
ス等の三糖類、スタキオース等の四糖類等が挙げられる
が、オリゴ糖の重合度は６を超えると各水酸基の反応性
が低下してしまうため、２〜６が好ましく、２〜４が特
に好ましい。

【００１７】更に、本発明化合物（１）において、ポリ
ヒドロキシ化合物の水酸基の水素原子が、ガロイル基で
置換される割合は、単糖類で４０〜１００％、オリゴ糖
で２５〜１００％が好ましく、特に単糖類で６０〜１０
０％、オリゴ糖で４０〜１００％が好ましい。

【００１８】本発明化合物（１）は、例えば次に示す方
法によって製造される。

【００１９】

【化２】

【００２０】〔式中、Ｒ² は水酸基の保護基を示し、Ｘ
はハロゲン原子を示し、Ｒ¹ 及びｎは前記と同じ〕

【００２１】すなわち、３個の水酸基が保護されたガリ
ック酸ハライド（２）にポリヒドロキシ化合物（３）を
反応させて保護エステル体（４）を得、次いで該エステ
ル体の保護基を脱離せしめることにより、本発明化合物
（１）が製造される。

【００２２】ガリック酸の水酸基の保護基（Ｒ² ）とし
ては、エステル結合が容易に分解しない条件で脱離でき
る基が好ましく、例えばベンジル基等が挙げられる。ま
た、Ｘで示されるハロゲン原子としては、塩素原子、臭
素原子等が挙げられるが、塩素原子が好ましい。

【００２３】水酸基が保護されたガリック酸ハライドの
うち、トリベンジルガロイルクロリドは、例えば次の如
くして得られる。すなわち、ガリック酸メチルエステル
をジメチルホルムアミド中、ヨウ化テトラブチルアンモ
ニウムを触媒としてベンジルブロミド及び水素化ナトリ
ウムと反応させてトリベンジルガリック酸メチルエステ
ルとし、更にこれを水酸化ナトリウムを塩基として含水
ジオキサン中で加熱攪拌してトリベンジルガリック酸を
得る。更にこれを塩化メチレン中、五塩化リンの存在下
攪拌するとトリベンジルガロイルクロリドが得られる。

【００２４】水酸基保護ガロイルハライド（２）とポリ
ヒドロキシ化合物との反応は、塩基の存在下に行うのが
好ましい。より具体的には、水酸基保護ガロイルハライ
ド（２）と、ポリヒドロキシ化合物とを、ピリジン中あ
るいはジオキサンあるいはジメチルホルムアミド中でジ
メチルアミノピリジンを用いて反応させるのが好まし
い。

【００２５】得られた化合物（４）から保護基を脱離せ
しめるには、加水素分解によるのが好ましく、より具体
的には、化合物（４）をメタノール−酢酸エチル混合液
中で接触水素移動還元を行うのが好ましい。

【００２６】かくして得られる本発明化合物（１）に
は、糖の水酸基の結合形態により種々の異性体が存在す
るが、これらの各異性体はいずれも本発明に含まれる。
また、水和物に代表される溶媒和物もまた本発明に含ま
れる。

【００２７】本発明化合物（１）は、ＡＤＰ−リボシル
トランスフェラーゼ阻害作用、及びコレラトキシンに代
表される生体内毒素による細菌性腸管感染症治療作用を
有し、医薬として有用である。

【００２８】本発明の医薬は、本発明化合物（１）を一
般的な医薬製剤の形態に調整して用いることができる。
更に、本発明化合物（１）と抗生物質を配合した配合剤
の形態に調製することもできる。

【００２９】そのような製剤は通常使用される充填剤、
増量剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤
などの希釈剤あるいは賦形剤を用いて調製される。この
医薬製剤としては各種の形態が治療目的に応じて選択で
き、その代表的なものとして錠剤、丸剤、散剤、液剤、
懸濁剤、乳剤、顆粒剤、カプセル剤、坐剤、注射剤（液
剤、懸濁剤等）、エアゾール剤、シロップ剤、外用剤な
どが挙げられる。また、樹脂などに配合して徐放性を高
めて使用することもできる。

【００３０】配合剤の形態に使用する抗生物質として
は、例えばナフロキサシン、エノキサシン、オフロキサ
シン、シプロキサシン、ロメフロキサシン、トスフロキ
サシン、スパフロキサシン、レボフロキサシン等のニュ
ーキノロン系抗生物質；例えばテトラサイクリン、テト
ラサイクリンハイドロクロライド、テトラサイクリンメ
タホスファイト、オキシテトラサイクリンハイドロクロ
ライド等のテトラサイクリン系抗生物質が例示できる。

【００３１】錠剤の形態に成形するに際しては、担体と
してこの分野で従来公知の物を広く使用でき、例えば乳
糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプ
ン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ
酸などの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シ
ロップ、ブドウ糖、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボ
キシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、
リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどの結合
剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン
末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウ
ム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、
ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリ
ド、デンプン、乳糖などの崩壊剤；白糖、ステアリン
酸、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第四
級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸
収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプ
ン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸
などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸
末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤などが例示で
きる。更に錠剤は必要に応じて通常の剤皮を施した錠
剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィル
ムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることが
できる。

【００３２】丸剤の形態に形成するに際しては、担体と
してこの分野で従来公知の物を広く使用でき、例えば、
ブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カ
オリン、タルクなどの賦形剤、アラビアゴム末、トラガ
ント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤、ラミナラ
ン、カンテンなどの崩壊剤などが例示できる。

【００３３】注射剤として調整される場合には、液剤、
乳剤又は懸濁剤として調整され、それらは通常、殺菌さ
れ、かつ血液と等張であるのが好ましい。これらの液
剤、乳剤及び懸濁剤の形態に成形するに際しては、希釈
剤としてこの分野において慣用されているものをすべて
使用でき、例えば、水、エチルアルコール、プロピレン
グリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポ
リオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチ
レンソルビタン脂肪酸エステル類などを挙げることがで
きる。なお、この場合等張性の溶液を調整するのに充分
な量の食塩、ブドウ糖あるいはグリセリンを該治療剤中
に含有せしめてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝
剤、無痛化剤などを、更に必要に応じて着色剤、保存
剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品を該治療剤
に含有せしめてもよい。

【００３４】本発明の医薬に含有されるべき本発明化合
物（１）の量は特に限定されず広範囲に選択されるが、
通常組成物中１〜７０重量％、好ましくは５〜５０重量
％である。

【００３５】本発明の医薬の投与方法は特定の治療目的
のために特に選択される場合の他は特に制限はなく、各
種製剤形態、患者の年齢、性別その他の条件、疾患の程
度などに応じた方法で投与される。例えば、錠剤、丸
剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤、シロップ剤及びカプ
セル剤の場合には経口投与される。また注射剤の場合に
は単独であるいはブドウ糖、アミノ酸などの通常の補液
と混合して静脈内投与され、更には必要に応じて単独で
筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。坐剤の
場合には直腸内投与される。

【００３６】本発明の医薬の投与量は、症状、年齢、体
重等によって異なるが通常本発明化合物（１）として１
日５〜２０００mgが好ましく、これを１〜数回に分けて
投与するのが好ましい。

【００３７】

【実施例】以下、実施例を挙げて、本発明を更に詳細に
説明するが、本発明は下記実施例によって何ら限定され
るものではない。

【００３８】製造例１ トリ−Ｏ−ベンジルメチルガレートの合成：ガリック酸
メチルエステル２０．０ｇをＮ，Ｎ−ジメチルホルムア
ミド４００mlに溶かし、ヨウ化テトラ−ｎ−ブチルアン
モニウム２．００ｇ及びベンジルブロミド６３．９mlを
加えて氷冷下３０分間攪拌した。これに水素化ナトリウ
ム２１．７ｇを加えて、反応液を室温にもどして５時間
攪拌した。反応液を酢酸で中和し減圧濃縮後、水及びク
ロロホルムを加えてクロロホルム抽出を行った。抽出液
を硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し残渣をワコー
ゲルＣ−３００（トルエン：アセトン＝４０：１，８０
φ−３３０mm）を用いるカラムクロマトグラフィーで精
製すると標記化合物が３４．５ｇ得られた。

【００３９】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.35-7.15(m,17H,aro
matic-H), 5.03-5.02(m,6H,benzyl-H),3.78(s,3H,-CH₃)

【００４０】製造例２ トリ−Ｏ−ベンジルガリックアシッドの合成：製造例１
で得られた化合物２９．３ｇを１，４−ジオキサン３０
０mlに溶かし、水酸化ナトリウム１２．９ｇを溶解させ
た水１００mlを滴下した。反応液を８０℃で３時間攪拌
した。反応液を減圧濃縮後、塩酸を加えて中和すると結
晶が析出した。この結晶を吸引濾過後、クロロホルムで
再結晶すると、標記化合物が２２．８ｇ得られた。

【００４１】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.45-7.26(m,17H,aro
matic-H), 5.15-5.14(m,6H,benzyl-H)

【００４２】製造例３ トリ−Ｏ−ベンジルガロイルクロリドの合成：製造例２
で得られた化合物２．５８ｇを塩化メチレン１００mlで
五塩化リン１．３３ｇを加えて室温で一晩攪拌した。反
応液を減圧濃縮後、乾燥させると標記化合物が得られ
た。

【００４３】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.43-7.24(m,17H,aro
matic-H), 5.17-5.14(m,6H,benzyl-H)

【００４４】製造例４ １，２，３，６−テトラ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベンジルガ
ロイル）−α−Ｄ−グルコピラノースの合成：Ｄ−グル
コース２５０mgにピリジン１００mlを加えた後、製造例
３で得られた化合物を４当量加えて室温で１８時間攪拌
した。反応液を減圧濃縮し残渣をワコーゲルＣ−３００
（トルエン：アセトン＝３０：１，３５φ−２９０mm）
を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると標記化
合物が３６２mg得られた。

【００４５】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.46-7.13(m,aromati
c-H), 6.73(d,1H,H-1 J_1,2=3.7Hz),5.86(t,1H,H-3,J_2,3
=9.8Hz,J_3,4=9.8Hz),5.51(dd,1H,H-2,J_1,2=3.7Hz,J_2,3=
9.8Hz), 5.16-4.96(m,benzyl-H),4.83(dd,1H,H-6a,J
_6a,6b=12.5Hz),4.53(dd,1H,H-6b,J_6a,6b=12.5Hz), 4.14
(m,1H,H-5),3.90(m,1H,H-4,J_3,4=9.8Hz)

【００４６】製造例５ １，２，３，６−テトラ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベンジルガ
ロイル）−β−Ｄ−グルコピラノースの合成：製造例４
と同様の方法により得られた生成物をカラムクロマトグ
ラフィーで精製したところ、標記化合物が１９９mg得ら
れた。

【００４７】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.46-7.15(m,aromati
c-H), 6.11(d,1H,H-1,J_1,2=8.6Hz),5.74(dd,1H,H-2,J
_1,2=8.6Hz,J_2,3=9.6Hz),5.54(t,1H,H-3,J_2,3=9.6Hz,J
_3,4=9.5Hz), 5.19-4.95(m,benzyl-H),4.78(dd,1H,H-6a,
J_5,6a=4.9Hz,J_6a,6b=12.4Hz),4.68(dd,1H,H-6b,J_5,6b=
2.3Hz,J_6a,6b==12.4Hz),4.06(m,1H,H-5,J_4,5=9.7Hz,J
_5,6a=4.9Hz,J_5,6b=2.3Hz),3.89(m,1H,H-4,J_3,4=9.5Hz,J
_4,5=9.7Hz)

【００４８】実施例１ １，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−α−Ｄ−グル
コピラノース（化合物（Ａ））の合成：製造例４で得ら
れた化合物３６２mgをメタノール２０ml、酢酸エチル２
０ml、ギ酸１０mlの混合液に溶かしアルゴン雰囲気中１
０％パラジウム−炭素１．０ｇを加えて室温で１７時間
攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮
すると標記化合物が１５１mg得られた。

【００４９】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.13-6.83(m,8H,ar
omatic-H),6.53(d,1H,H-1,J_1,2=3.5Hz), 5.81(t,1H,H-
3,J_2,3=9.9Hz,J_3,4=9.8Hz) 5.23(dd,1H,H-2,J_1,2=3.5Hz,J_2,3=9.9Hz),4.32-4.18(b
m,3H,H-5,H-6a,H-6b), 3.95(t,1H,H-4,J_3,4=9.8Hz)

【００５０】実施例２ １，２，３，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グル
コピラノース（化合物（Ｂ））の合成：製造例５で得ら
れた化合物１９９mgをメタノール３０ml、酢酸エチル２
０ml、ギ酸１０mlの混合液に溶かしアルゴン雰囲気中１
０％パラジウム−炭素６００mgを加えて室温で１８時間
攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮
すると標記化合物が７７mg得られた。

【００５１】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.04-6.85(m,8H,ar
omatic-H), 6.17(d,1H,H-1,J_1,2=8.6Hz),5.57(t,1H,H-
3,J_2,3=9.6Hz,J_3,4=9.3Hz),5.33(dd,1H,H-2,J_1,2=8.6H
z,J_2,3=9.6Hz), 4.50(bd,1H,H-6a),4.43(bm,1H,H-6b),
4.12(bd,1H,H-5), 3.88(t,1H,H-4,J_3,4=9.3Hz)

【００５２】製造例６ ４−Ｏ−｛２，３，４，６−テトラ−Ｏ−（トリ−Ｏ−
ベンジルガロイル）−α−Ｄ−グルコピラノシル｝−
１，２，６−トリ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベンジルガロイ
ル）−β−Ｄ−グルコピラノースの合成：マルトース一
水和物２１０mgに１，４−ジオキサン１００ml、４−ジ
メチルアミノピリジン７１２mgを加えた後、製造例３で
得られた化合物を１０当量加えて室温で１８時間攪拌し
た。反応液を減圧濃縮し残渣をワコーゲルＣ−３００
（トルエン：アセトン＝３０：１，３５φ−２９０mm）
を用いるカラムクロマトグラフィーで精製すると標記化
合物が５５９mg得られた。

【００５３】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.40-7.09(m,aromati
c-H), 6.18(t,1H,H-3',J_2',3'=10.2Hz,J_3',4'=9.9Hz),
6.02(d,1H,H-1,J_1,2=8.8Hz), 6.01(d,1H,H-1',J_1',2'=
3.7Hz),5.72(t,1H,H-4',J_3',4'=9.9Hz,J_4',5'=9.8Hz),
5.28(dd,1H,H-2',J_1',2'=3.7Hz,J_2',3'=10.2Hz),5.23
(t,1H,H-2,J_1,2=8.8Hz), 5.13-4.78(m,benzyl-H,H-6'a) 4.74(dd,1H,H-6a,J_6a,6b=12.2Hz), 4.67(m,1H,H-5',J
_4',5'=9.8Hz),4.50(dd,1H,H-6b,J_6a,6b=12.2Hz), 4.35
(dd,1H,H-6'b),4.12(m,2H,H-3,H-5), 3.99(t,1H,H-4)

【００５４】実施例３ ４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ガロイル−α
−Ｄ−グルコピラノシル）−１，２，６−トリ−Ｏ−ガ
ロイル−β−Ｄ−グルコピラノース（化合物（Ｃ））の
合成：製造例６で得られた化合物１．１２ｇをメタノー
ル５０ml、酢酸エチル７５ml、ギ酸２５mlの混合液に溶
かしアルゴン雰囲気中１０％パラジウム−炭素４．００
ｇを加えて室温で３時間攪拌した。反応液をフィルター
濾過後、濾液を減圧濃縮すると標記化合物が４６０mg得
られた。

【００５５】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.03-6.77(m,14H,a
romatic-H), 6.07(d,1H,H-1',J_1',2'=3.4Hz),5.96(d,1
H,H-1,J_1,2=8.7Hz),5.82(t,1H,H-3',J_2',3'=10.4Hz,J
_3',4'=9.9Hz),5.43(t,1H,H-4',J_3',4'=9.9Hz),5.13(dd,
1H,H-2',J_1',2'=3.4Hz,J_2',3'=10.4Hz),5.08(t,1H,H-2,
J_1,2=8.7Hz),4.50(bs,2H,H-6a or H-6b or H-6'a or H-
6'b),4.23-4.00(m,6H,H-3,H-4, H-5,H-5' and H-6a or
H-6b or H-6'a or H-6'b)

【００５６】製造例７ ４−Ｏ−｛４−Ｏ−〔２，３，４，６−テトラ−Ｏ−
（トリ−Ｏ−ベンジルガロイル）−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル〕−２，６−ジ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベンジル ガ
ロイル）−α−Ｄ−グルコピラノシル｝−１，２，６−
トリ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベンジル ガロイル）−β−Ｄ
−グルコピラノースの合成：マルトトリオース３００mg
にＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５０ml、４−ジメチ
ルアミノピリジン９４４mgを加えた後、製造例３で得ら
れた化合物を１２当量加えて室温で４８時間攪拌した。
反応液を減圧濃縮し残渣をワコーゲルＣ−３００（トル
エン：アセトン＝５０：１、３５φ−２９０mm）を用い
るカラムクロマトグラフィーで精製すると標記化合物が
５５０mg得られた。

【００５７】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.39,7.02(m,aromati
c-H), 6.27(t,1H,H-3'',J_2'',3''=10.2Hz),6.04(d,1H,H
-1'',J_1'',2''=3.7Hz), 5.96(d,1H,H-1,J_1,2=8.7Hz),5.
77-5.73(m,2H,H-1',H-4''),5.35(dd,1H,H-2'',J_1'',2''
=3.7Hz J_2'',3''=10.2Hz),5.11(t,1H,H-2,J_1,2=8.7Hz),
5.06-4.60(m,benzyl-H,ring-H),4.50(bdd,1H,ring-H),
4.41-4.34(m,2H,ring-H),4.01-3.94(m,3H,ring-H), 3.8
5(t,1H,ring-H)

【００５８】実施例４ ４−Ｏ−〔４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ガ
ロイル−α−Ｄ−グルコピラノシル）−２，６−ジ−Ｏ
−ガロイル−α−Ｄ−グルコピラノシル〕−１，２，６
−トリ−Ｏ−ガロイル−β−Ｄ−グルコピラノース（化
合物（Ｄ））の合成：製造例７で得られた化合物５５０
mgをメタノール２０ml、酢酸エチル３０ml、ギ酸１０ml
の混合液に溶かしアルゴン雰囲気中１０％パラジウム−
炭素１．５０ｇを加えて室温で４時間攪拌した。反応液
をフィルター濾過後、濾液を減圧濃縮すると標記化合物
が１７６mg得られた。

【００５９】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.02-6.78(m,18H,a
romatic-H), 6.09(d,1H,H-1'',J_1'',2''=3.6Hz),5.91
(d,1H,H-1,J_1,2=8.8Hz),5.80(t,1H,H-3'',J_2'',3''=10.
2Hz J_3'',4''=9.9Hz),5.69(d,1H,H-1',J_1',2'=3.1Hz),
5.41(t,1H,H-4'',J_3'',4''=9.9Hz), 5.25(bs,ring-H),
5.11(dd,1H,H-2'',J_1'',2''=3.6,J_2'',3''=10.2Hz),5.0
0(t,1H,H-2,J_1,2=8.8Hz), 4.73(dd,1H,H-2',J_1',2'=3.1
Hz),4.53(bt,2H,ring-H), 4.40(bm,1H,ring-H),4.24(b
m,1H,ring-H), 4.11-3.96(bm,ring-H), 3.82(bd,1H,rin
g-H)

【００６０】製造例８ １，２，３，４，５，６−ヘキサ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベ
ンジル ガロイル）−Ｄ−グルシトールの合成：グルシ
トール１００mgに１，４−ジオキサン７０ml、４−ジメ
チルアミノピリジン５３７mgを加えた後、製造例３で得
られた化合物を７当量加えて室温で１９時間攪拌した。
反応液を減圧濃縮し残渣をワコーゲルＣ−３００（トル
エン：アセトン＝４０：１，３５φ−２９０mm）を用い
るカラムクロマトグラフィーで精製すると標記化合物が
１．１３ｇ得られた。

【００６１】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.45-7.10(m,aromati
c-H), 6.39(dd,1H,H-3 or H-4,J_3,4=4.9Hz),6.25(dd,1
H,H-3 or H-4,J_3,4=4.9Hz), 6.12(dd,1H,H-2 or H-5),
6.06(bm,1H,H-2 or H-5),5.05-4.74(m,benzyl-H,H-1a O
R H-1b or H-6a or H-6b),4.46(dd,1H,H-1a or H-1b or
H-6a or H-6b)

【００６２】実施例５ １，２，３，４，５，６−ヘキサ−Ｏ−ガロイル−Ｄ−
グルシトール（化合物（Ｅ））の合成：製造例８で得ら
れた化合物１．１３ｇをメタノール３０ml、酢酸エチル
６０ml、ギ酸２０mlの混合液に溶かしアルゴン雰囲気中
１０％パラジウム−炭素２．００ｇを加えて室温で１６
時間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧
濃縮すると標記化合物が４１５mg得られた。

【００６３】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.10-6.92(m,12H,a
romatic-H), 6.03(bt,1H,H-3 or H-4),5.95(bdd,1H,H-3
or H-4), 5.64(bs,1H,H-2 or H-5),5.51(bm,1H,H-2 or
H-5), 4.75(bd,1H,H-1a or H-1b or H-6a or H-6b),4.
45(bs,2H,H-1a or H-1b or H-6a or H-6b),4.25(bm,1H,
H-1a or H-1b or H-6a or H-6b)

【００６４】製造例９ １，２，３，４，５，６−ヘキサ−Ｏ−（トリ−Ｏ−ベ
ンジル ガロイル）−Ｄ−マンニトールの合成：マンニ
トール１００mgに１，４−ジオキサン７０ml、４−ジメ
チルアミノピリジン５３７mgを加えた後、製造例３で得
られた化合物を７当量加えて室温で１８時間攪拌した。
反応液を減圧濃縮し残渣をワコーゲルＣ−３００（トル
エン：アセトン＝４０：１，３５φ−２９０mm）を用い
るカラムクロマトグラフィーで精製すると標記化合物が
１．３０ｇ得られた。

【００６５】¹H-NMR(CDCl₃／TMS):7.42-7.03(m,aromati
c-H), 6.45(d,2H,H-3,H-4),5.78(bm,2H,H-2,H-5),5.37
(dd,2H,H-1a,H-6a,J _1a,1b=12.7Hz,J_6a,6b=12.7Hz),5.0
1-4.54(m,36H,benzyl-H),4.19(dd,2H,H-1b,H-6b,J_1a,1b
=12.7Hz,J_6a,6b=12.7Hz)

【００６６】実施例６ １，２，３，４，５，６−ヘキサ−Ｏ−ガロイル−Ｄ−
マンニトール（化合物（Ｆ））の合成：製造例９で得ら
れた化合物１．３０ｇをメタノール３０ml、酢酸エチル
５０ml、ギ酸３０mlの混合液に溶かしアルゴン雰囲気中
１０％パラジウム−炭素３．００ｇを加えて室温で５時
間攪拌した。反応液をフィルター濾過後、濾液を減圧濃
縮すると標記化合物が４４５mg得られた。

【００６７】¹H-NMR(DMSO-d₆／TMS):7.03-6.86(m,12H,a
romatic-H), 5.82(d,2H,H-3,H-4),5.45(bm,2H,H-2,H-
5), 4.37(d,2H,H-1a,H-6a),4.29(dd,2H,H-1b,H-6b)

【００６８】試験例 アグマチンアッセイ法：コレラトキシン（ＣＴ）は細胞
内のＧ蛋白質の一つであるＧｓαをＡＤＰ−リボシル化
するが、更にアグマチンを受容体基質としてＮＡＤから
ＡＤＰ−リボースを転移することが知られている。そこ
で、化合物（Ａ）〜（Ｆ）についてアグマチンのＡＤＰ
−リボシル化を抑制するかどうかを検討した。

【００６９】アグマチンアッセイ法は野田等の報告した
方法（Noda, M. et al., Biochemistry, 28, 7936(198
9))を用いて行った。５０mMのリン酸カリウム緩衝液（p
H７．５）、５mM ＭｇＣｌ₂、１００μＭ ＧＴＰ、１
００μＭ〔アデニン−¹⁴Ｃ〕ＮＡＤ（６０００cpm）、
２０mM ＤＴＴ、２０mMアグマチン及びオボアルブミン
（０．１mg／ml）の反応液に１μｇのＣＴ及び被検試料
を混合し（合計量３００μｌ）、３０℃で３時間作用さ
せた。この反応液から５０μｌ採取し、０．５cm×２cm
のカラムに集めたダウエックスＡＧ１−Ｘ２（Bio Rad
社製）に通して未反応の〔アデニン−¹⁴Ｃ〕ＮＡＤを除
き、形成される〔アデニン−¹⁴Ｃ〕ＡＤＰリボシル化ア
グマチンを測定した。この〔アデニン−¹⁴Ｃ〕ＡＤＰリ
ボシル化アグマチンの形成を指標に、被検試料によるＣ
ＴのＡＤＰ−リボシル化転移酵素活性の抑制率を求め
た。結果を表１に示す。

【００７０】

【表１】

【００７１】この結果、本発明化合物（Ａ）〜（Ｆ）は
コレラトキシンに作用し、ＡＤＰ−リボシル化転移酵素
活性を阻害することにより、抗コレラトキシン活性を有
することが確認された。全ての化合物（Ａ）〜（Ｆ）は
ガロイル基を分子内に持った天然物タンニン酸と比較し
て、より強い抗コレラトキシン活性が認められ、特に化
合物（Ｃ）と化合物（Ｄ）は１０μｇ／mlの濃度まで縮
合型タンニンの一つであるＲＧタンニンと同等の阻害効
果を示した。

【００７２】

【発明の効果】ガリック酸誘導体はＡＤＰ−リボシルト
ランスフェラーゼを阻害し、生体内毒素によって生じる
下痢症状の抑制効果が強いので、毒素原性大腸菌、サル
モネラ属、病原性ビブリオ菌（コレラ菌、腸炎ビブリ
オ）、赤痢菌、カンピロバクター属菌などに代表される
生体内毒素型細菌による腸管感染症の治療に有効であ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｃ 69/84 Ｃ０７Ｃ 69/84 69/88 69/88 (72)発明者 足立 正一 群馬県高崎市石原町3493番地９号 (72)発明者 野田 公俊 千葉県四街道市美しが丘３丁目６番14号

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ポリヒドロキシ化合物の水酸基の水素の
   １又は２以上がガロイル基で置換されたガリック酸エス
   テル誘導体。
2. 【請求項２】 ポリヒドロキシ化合物が単糖又はオリゴ
   糖である請求項１記載のガリック酸エステル誘導体。
3. 【請求項３】 単糖がＤ−グルコース、Ｄ−グルシトー
   ル及びＤ−マンニトールから選ばれるものである請求項
   ２記載のガリック酸エステル誘導体。
4. 【請求項４】 オリゴ糖がマルトース及びマルトトリオ
   ースから選ばれるものである請求項２記載のガリック酸
   エステル誘導体。
5. 【請求項５】 請求項１〜４のいずれか１項記載のガリ
   ック酸エステル誘導体を有効成分とする医薬。
6. 【請求項６】 請求項１〜４記載のガリック酸エステル
   誘導体を有効成分とするＡＤＰ−リボシルトランスフェ
   ラーゼ阻害剤。
7. 【請求項７】 請求項１〜４のいずれか１項記載のガリ
   ック酸エステル誘導体を有効成分とする生体内毒素型細
   菌性腸管感染症治療剤。
8. 【請求項８】 請求項１〜４のいずれか１項記載のガリ
   ック酸エステル誘導体及び抗生物質を含有する生体内毒
   素型細菌性腸管感染症治療剤。
9. 【請求項９】 抗生物質がニューキノロン系の抗生物質
   である請求項８記載の生体内毒素型細菌性腸管感染症治
   療剤。
10. 【請求項１０】 抗生物質がテトラサイクリン系の抗生
    物質である請求項８記載の生体内毒素型細菌性腸管感染
    症治療剤。