JPH023773B2

JPH023773B2 -

Info

Publication number: JPH023773B2
Application number: JP59252247A
Authority: JP
Inventors: Yasuhiro Katsuragi; Naoki Matsuda; Yoshiko Saiga; Yasunobu Kobayashi; Shoichi Nakamura; Toshio Sato
Original assignee: NIPPON HAI HOTSUKUSU KK
Current assignee: NIPPON HAI HOTSUKUSU KK
Priority date: 1984-11-28
Filing date: 1984-11-28
Publication date: 1990-01-24
Also published as: EP0188079A2; EP0188079B1; EP0188079A3; DE3585831D1; JPS61130229A; US4686206A

Description

【発明の詳細な説明】

発明の分野本発明は食細胞機能賦活剤組成物、さらに詳し
くは、特定のトコフエリルグリコシドを有効成分
とする、食細胞の機能を賦活し、ヒトやその他の
哺乳動物における細菌やウイルスなどによる感染
症や悪性腫瘍を治療するのに有用な医療および獣
医薬組成物に関する。発明の背景好中球などの食細胞は生体内において、外界か
らの異物を貪食、消化し、無毒化することにより
生体防禦に重要な役割を果している。近年、細菌
やウイルスなどによる感染症や悪性腫瘍におい
て、宿主の食細胞やリンパ球などの機能が低下し
ており、これらの機能が低下すると、感染症がお
こりやすく、また、重篤化することが判明してい
る。このような事情から、食細胞やリンパ球の機
能賦活について種々研究がなされ、すでに、リン
パ球機能賦活に有用な薬剤が開発され、悪性腫瘍
や感染症の治療に用いられている。しかしなが
ら、食細胞機能を賦活する薬剤としては、レバミ
ゾールなど数種のものが知られているにすぎな
い。一方、本発明者らはトコフエロールおよびその
誘導体の薬理作用について研究を重ねる間に、意
外にも、ある種トコフエリルグリコシドが抗アレ
ルギー剤として有用であることを見出し、すでに
特許出願した（特願昭59−151895号）。その後、
さらに研究を続けた結果、これらのトコフエリル
グリコシドのある種のものが好中球などの食細胞
の運動能や貪食作用を高め、食細胞機能賦活剤と
して有用であることを見出し、本発明を完成する
にいたつた。発明の概要本発明は、式：〔式中、R₁はグルコースまたはマンノースの
残基、R₂およびR₃は同一または異なつて、各々、
水素またはメチルを意味する〕で示される化合物を有効成分としてなることを特
徴とする食細胞機能賦活剤組成物を提供するもの
である。式〔〕の化合物は医薬や食品に用いら
れる成分であるトコフエロールと糖から構成され
ており、その毒性はきわめて低く、本発明の食細
胞機能賦活剤組成物は感染症や悪性腫瘍のため、
経口的、非経口的または外用により、ヒトまたは
他の哺乳動物に投与するのに有用である。発明の詳説式〔〕中、３，４−ジヒドロベンゾピラン環
の２位の−C₁₆H₃₃はトコフエロールの２位側鎖
の４，８，12−トリメチルトリデシル基を示す。
また、６位のヒドロキシ基に導入される糖には異
性体が存在するが、異性体混合物、単離された異
性体を含め、それらも式〔〕の範囲に包含され
る。前記の特願昭59−151895号においては、６位
のヒドロキシ基に導入される糖として、本発明に
おけるグルコースおよびマンノースの他、ガラク
トース、セロビオース、マルトース、ラクトース
が包含されているが、グルコースおよびマンノー
スの場合が特異的にすぐれた食細胞賦活作用を示
す。本発明において、好ましくは、式〔〕中の
R₂およびR₃は共にメチル、すなわち、α−トコ
フエリルグリコシドである。式〔〕の代表的な
化合物としては、dl−α−トコフエリルグルコシ
ドおよびdl−α−トコフエリルマンノシドが挙げ
られる。式〔〕の化合物は特願昭59−151895号に開示
の方法に従つて製造できる。すなわち、トコフエロールと所望の過アセチル
化糖を適当な溶媒中、高温、例えば、80〜100℃
で、例えば、３〜７時間加熱反応させる。この反
応により、６位にアセチル化糖残基が導入された
式〔〕の化合物の製造中間体であるアセチル化
誘導体が得られる。溶媒として、二酢酸エチレン
グルコールまたはニトロベンゼンを用い、Ｐ−ト
ルエンスルホン酸を触媒として添加すると、反応
が好適に進行する。出発物質として用いるトコフエロールはα−、
β−、γ−またはδ−トコフエロールいずれでも
よく、また、過アセチル化糖は公知であるか、所
望の糖を公知のアセチル化法によつてアセチル化
して製造できる。かくして得られたアセチル化誘導体を、常法、
例えば、無水メタノール中、ナトリウムメトキシ
ドの存在下に加熱還流させ、ついで、アンバーラ
イトIR−120（H⁺型）のようなイオン交換樹脂で
処理することにより脱アセチル化すると、式
〔〕の化合物が得られる。これらの化合物はア
ルコール、クロロホルム、ベンゼンなどの有機溶
媒に可溶性、水に難溶性の安定な結晶として得ら
れ、再結晶等の常法により、さらに精製すること
ができる。得られた式〔〕の化合物は非常に安全性が高
く、例えば、dl−α−トコフエリルグルコシドお
よびdl−α−トコフエリルマンノシド共に、ラツ
トにおけるLD₅₀値は経口投与で5000mg／Kg以上、
腹腔内投与で500mg／Kg以上である。かくして、本発明の食細胞機能賦活剤組成物は
通常の製剤技術に従つて、有効かつ非毒性量の式
〔〕の化合物を医薬または獣医薬上許容される
担体、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢
剤、溶剤、等張化剤、乳化剤、懸濁剤、安定化剤
と合して経口または非経口投与用あるいは外用剤
の剤形、例えば、錠剤、散剤、顆粒、シロツプ、
注射剤、点眼剤、軟膏、クリーム、乳液、アルコ
ール水溶液などとすることができる。本発明の食細胞機能賦活剤組成物は感染症や悪
性腫瘍の治療のためにヒトやその他の哺乳動物に
経口、非経口、外用経路で投与することができ
る。例えば、ヒトの場合、チエデイアクー東症候
群、レイジーロイコサイト症候群、慢性肉芽腫症
や、若年性歯周疾患などの食細胞機能異常による
感染症の治療にきわめて有用である。投与量は治
療すべき症状、投与経路などによつて適宜選択で
きるが、通常、１回の投与につき、式〔〕の化
合物１〜100mg／Kgの範囲が好ましく、１日の投
与量は式〔〕の化合物100〜1000mg／Kgの範囲
が好ましい。実施例つぎに参考例および実施例を挙げて本発明をさ
らに詳しく説明する。参考例１６−Ｏ−（β−２，３，４，６−テトラアセチ
ルマンノピラノシル）−dl−α−トコフエロー
ル dl−α−トコフエロール10ｇ（23.25ミリモル）
およびβ−Ｄ−マンノピラノ−スペンタアセテー
ト3.3ｇ（8.46ミリモル）をニトロベンゼン５ml
に溶解し、Ｐ−トルエンスルホン酸75mg（0.44ミ
リモル）を加え、反応系を窒素で置換し、油浴
中、20mmHgの減圧下、90℃で反応させる。反応
の進行を薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：ベ
ンゼン−酢酸エチル（10：１））で追跡する。５
時間後、反応混合液にベンゼン100mlを加え、水
100mlで３回、飽和食塩水100mlで３回洗浄する。
無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ベンゼン層を減圧
下に蒸発させて黒褐色油状物質13ｇを得る。この物質13ｇをシリカゲル550ｇのカラム上で
クロマトグラフイーに付し、ベンゼン−酢酸エチ
ル（９：１）で溶出して黄色油状の標記化合物
2.4ｇ（収率38％）を得る。薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：ベンゼン
−酢酸エチル（10：１））におけるR_f＝0.3（単一
スポツト）。 IRν^KBr _nax：1756（Ｃ＝Ｏ）cm^-1。 MS：ｍ／Z760（M⁺）。参考例２ dl−α−トコフエリルマンノシド参考例１の生成物2.4ｇ（3.12ミリモル）を乾
燥メタノール８mlに溶解し、0.1Nナトリウムメ
トキシド２mlを加え、水浴中で加熱還流する。５
分後、反応混合液を冷却し、アンバーライトIR
−120（H⁺型）で中和する。活性炭で脱色後、反
応混合液を過し、液を減圧下で蒸発させて標
記化合物の白色結晶1.23ｇ（収率68％）を得る。
得られた結晶をさらにアセトンより再結晶させて
精製した標記化合物0.95ｇ（収率19％）を得る。融点：128〜130℃。薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：クロロホ
ルム−メタノール）（５：１））におけるR_f＝0.3。 IRν^KBr _nax：3390，1160（OH；糖）cm^-1。 MS：ｍ／Z592（M⁺）。参考例３６−Ｏ−（β−２，３，４，６−テトラアセチ
ルマンノピラノシル）−ｄ−δ−トコフエロー
ルｄ−δ−トコフエロール10ｇ（25ミリモル）お
よびβ−Ｄ−マンノピラノースペンタアセテート
3.3ｇ（8.86ミリモル）をニトロベンゼン５mlに
溶解し、Ｐ−トルエンスルホン酸80mg（0.5ミリ
モル）を加える。反応系を窒素で置換し、20mm
Hgの減圧下、油浴中、80℃で反応させる。４時
間後、反応混合液にベンゼン100mlを加え、水100
mlで３回、飽和食塩水で３回洗浄する。無水硫酸
ナトリウムで乾燥し、ベンゼン層を減圧下で蒸発
させて、黒色油状物質20ｇを得る。この物質20ｇをシリカゲル550ｇのカラム上で
クロマトグラフイーに付し、ベンゼン−酢酸エチ
ルで溶出して、黄色油状の標記化合物3.8ｇ（収
率61％）を得る。薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：ベンゼン
−酢酸エチル（10：１））におけるR_f＝0.3（単一
スポツト）。 IRν^KBr _nax：1760（Ｃ＝Ｏ）cm^-1。 MS：ｍ／Z732（M⁺）。参考例４ｄ−δ−トコフエリルマンノシド参考例３の生成物3.8ｇ（5.2ミリモル）を乾燥
メタノール８mlに溶解し、0.1Nナトリウムメト
キシド２mlを加え、水溶中で加熱還流する。５分
後、反応混合液をアンバーライトIR−120（H⁺
型）で中和し、活性炭で脱色する。反応混合液を
過し、液を減圧下で蒸発させて標記化合物の
白色結晶2.1ｇ（収率72％）を得る。得られた結
晶をアセトンより再結晶させて精製した標記化合
物1.36ｇ（収率30％）を得る。融点187〜189℃ 薄層クロマトグラフイー（展開溶媒：クロロホ
ルム−メタノール（５：１））におけるR_f＝0.3
（単一スポツト）。 IRν^KBr _nax：3390，1160（OH；糖）cm^-1。 MS：ｍ／Z564（M⁺）。参考例５前記の参考例と同様にして、各々、対応するト
コフエロールおよび過アセチル化糖を用い、対応
するアセチル化誘導体を介して、つぎの式〔〕
の化合物を得る。 dl−α−トコフエリルグルコシド（融点140〜
141℃）ｄ−δ−トコフエリルグルコシド（融点46〜49
℃）実施例１成分重量部 dl−α−トコフエリルグルコシド 30 リン酸カルシウム 490 結晶セルロース 350 カルボキシメチルセルロース 120 ステアリン酸マグネシウム 10 これらの成分をよく混合し、直接打錠により経
口投与用錠剤を得る。実施例２成分重量部 dl−α−トコフエリルグルコシド 380 乳糖 480 ポリビニルピロリドン 45 ヒドロキシプロピルセルロース 95 これらの成分を用い、常法に従つて湿式造粒に
より経口投与用顆粒を得る。実施例３成分重量部 dl−α−トコフエリルマンノシド５注射用蒸留水 950 これらの成分を混合溶解し、無菌過して注射
剤を得る。実施例４成分重量部ｄ−δ−トコフエリルグルコシド 20 ミツロウ 100 パラフインワツクス 60 ラノリン 30 イソプロピルミリステート 60 スクワラン 80 流動パラフイン 250 ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート 18 プロピレングリコール 50 ホウ砂７水 325 これらの成分を用い、常法によつて軟膏を得
る。実施例５成分重量部ｄ−δ−トコフエリルマンノシド 50 ステアリン酸 20 セタノール５ラノリン 20 イソプロピルミリステート 20 スクワラン 30 流動パラフイン 80 ポリオキシエチレンセチルエーテル 17 トリエタノールアミン 10 グリセリン 40 香料および防腐剤適量水 1000部に調整これらの成分を用い、常法に従つて乳液を得
る。発明の効果トコフエリルグリコシドの食細胞機能賦活作用
を試験した。以下にその結果を示す。 (1) 好中球の運動能に対する作用ヒト末梢血から好中球を分離し、ボイデン・チ
ヤンバーを用い、各種のトコフエリルグリコシド
の好中球のランダム運動能および走化性に対する
作用を測定した。 2.5×10⁶個／mlの好中球懸濁液に１％ジメチル
スルホキシドに溶解したトコフエロールまたはト
コフエリルグリコシドを1μｇ／mlの割合で加え、
37℃で15分間インキユベーシヨン後、チヤンバー
上部に加え、下部に、ランダム運動能の測定にお
いてはPBSを、走化性の測定においては２×10^-8
ＭのＮ−ホルミル−メチオニル−ロイシル−フエ
ニルアラニンを加え、37℃で１〜３時間インキユ
ベーシヨンした。ついで、フイルターを固定し、
ヘマトキシリン染色後、フイルターの底部まで遊
走した好中球数を顕微鏡下で計数した。対照とし
て、トコフエロールまたはトコフエリルグリコシ
ドを加えずに同様に試験を行なつた。対照の計数
値を100％とした場合の、トコフエロールまたは
トコフエリルグリコシド添加時の相対的割合を第
１表に示す。

【表】第１表に示すごとく、式〔〕の、トコフエロ
ールの３，４−ジヒドロベンゾピラン環の６位に
グリコースまたはマンノースを導入したトコフエ
リルグルコシドのみが好中球の走化性を特異的に
向上させ、ランダム運動能に対してはほとんど作
用しない。 (2) 好中球の貪食能に対する作用ヒト末梢血から好中球を分離し、2.5×10⁶個／
mlの好中球懸濁液を調製した。この懸濁液900μ
にトコフエロールまたは各種のトコフエリルグ
リコシド1μｇ／mlを加え、37℃で15分間インキ
ユベーシヨンした。フルオレセインイソチオシア
ネート標識オプソニン処理した黄色ブドウ状球菌
（IFO13276）懸濁液（１×10⁹個／ml）100μを
加え、37℃で15分間インキユベーシヨンした。つ
いで、螢光顕微鏡下で、100個の好中球に取り込
まれた菌体数を計数した。対照として、トコフエ
ロールまたはトコフエリルグリコシドを加えずに
同様に試験を行なつた。対照の計数値を100％と
した場合のトコフエロールまたはトコフエリルグ
リコシド添加時の相対的割合を第２表に示す。

【表】第２表に示すごとく、式〔〕のトコフエリル
グリコシドは好中球の貪食能も著しく賦活する。 (3) 緑膿菌感染に対するin vivo試験 ICRマウス（体重20〜25ｇ、１群雌雄５匹づ
つ、計10匹）にdl−α−トコフエリルグルコシド
またはdl−α−トコフエリルマンノシドの注射用
蒸留水溶液（実施例３参照）を１日１回（１ml／
Kg）、３日間連続して静脈内投与し、最終投与後、
緑膿菌（Ｐ−１株、医科研）2.5×10⁷個を腹腔内
に接種し、24時間後の生存率を測定した。対照と
して、トコフエリルグリコシドの代りに同量の蒸
留水溶液を投与して同様に生存率を測定した。そ
の結果、対照群の生存率は０％であつたが、dl−
α−トコフエリルグルコシドまたはdl−α−トコ
フエリルマンノシド投与群の生存率はいずれも20
％であつた。以上の結果から明らかなごとく、式〔〕のト
コフエリルグリコシドはすぐれた食細胞賦活作用
を有する。

Claims

【特許請求の範囲】１式：〔式中、R₁はグルコースまたはマンノースの
残基、R₂およびR₃は同一または異なつて、各々、
水素またはメチルを意味する〕で示される化合物を有効成分としてなることを特
徴とする食細胞機能賦活剤組成物。