JPH08217674A - ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 フラバン３−オール骨格を有するアグリコン
の配糖体を有効成分として含有するヒスチジン脱炭酸酵
素阻害剤。 【効果】 優れたヒスチジン脱炭酸酵素阻害活性を示
し、作用が緩和で、持続性に優れており、化学的に安定
である。従ってヒスタミンが関与する各種炎症疾患の治
療薬、予防薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ヒスチジン脱炭酸酵素
阻害剤に関し、特に、抗炎症剤、抗アレルギー剤、抗潰
瘍剤としてのヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】胃潰瘍、十二指腸潰瘍などの潰瘍、及び
ぜん息性気管支炎、アトピー性皮膚炎などのアレルギー
性疾患は生体内の過剰なヒスタミン生成により起こる炎
症疾患である。このヒスタミンは、ヒスチジン脱炭酸酵
素によるヒスチジンの脱炭酸反応により生成する。従っ
て、上記の疾患の治療薬としては、ヒスタミン生合成を
阻害するもの、即ち、ヒスチジン脱炭酸酵素活性阻害剤
が望ましい。

【０００３】ヒスチジン脱炭酸酵素阻害活性を示す抗炎
症剤としては、現在まで、ヒスチジン誘導体、シアニダ
ノール（cyanidanol）、トリトクアリン（tritoqualin
e）、ＺＹ−１５０２９、ブロクレシン（brocresine）
など（治療学、18巻、91〜92頁、1987年）、サリチルア
ニリド誘導体（特公昭52-47453号公報）、サリチル酸誘
導体（特公昭52-17018号公報）などが知られている。し
かしながら、これらの抗炎症剤は作用は劇的であるが、
作用の持続性が短いという欠点を有している。また、作
用が劇的であるだけにその用法が困難である。

【０００４】また、上記した抗炎症剤の他に、（−）−
エピガロカテキン、（−）−エピガロカテキンガレー
ト、（−）−エピカテキンガレート等、又はその含有物
が緩和な抗アレルギー作用を有すると報告されている
（Fragrance Journal, No.11, 50〜53頁、1990年）。し
かし、これらの物質は化学的に非常に不安定なため、現
実には実際の抗炎症剤、抗アレルギー剤として使用され
ていない。また、これらの物質は、作用の持続性が非常
に短いという欠点も有する。それは、例えば、経口投与
されると、胃内でその全部が速やかに血液中に吸収さ
れ、その結果、血液中の投与薬の濃度が一度に高まる
が、短時間の内に代謝排出されるからである。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、作用
が緩和で、作用の持続性に優れ、かつ化学的に安定なヒ
スチジン脱炭酸酵素阻害剤を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を達成するために鋭意研究を重ねた結果、フラバン３
−オール骨格を有するアグリコンは、遊離の状態におい
ては化学的に非常に不安定であるが、その配糖体は非常
に安定であり、かつ緩和で、持続性に優れたヒスチジン
脱炭酸酵素阻害活性を示すとの知見に基づいて、本発明
を完成した。

【０００７】即ち、本発明は、フラバン３−オール骨格
を有するアグリコンの配糖体を有効成分として含有する
ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤を提供する。以下、本発明
を詳細に説明する。本発明のフラバン３−オール骨格を
有するアグリコンの配糖体とは、糖と、下記式(1) ：

【０００８】

【化１】

【０００９】で表されるフラバン３−オール骨格を有す
る化合物とから水がとれてできた、グリコシド結合をも
つ物質をいう（食品と開発、27巻、９号、39〜43頁、19
94年）。本発明に用いることができるアグリコン成分、
即ち上記式(1) で表されるフラバン３−オール骨格を有
する化合物としては、具体的には、下記式

【００１０】

【化２】

【００１１】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｒ）｛（−）−エピカ
テキンという｝及びその誘導体、例えば、３−Ｏ−（４
−ヒドロキシベンゾイル）体、３’−メチルエーテル
体、３’，４’−ジ−メチルエーテル体など；下記式

【００１２】

【化３】

【００１３】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｓ）｛（＋）−カテキ
ンという｝及びその誘導体、例えば、３’，５−ビス−
Ｏ−（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）体、
４’−Ｏ−（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）
体など；下記式

【００１４】

【化４】

【００１５】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシフラバン（２Ｓ，３Ｒ）｛（−）−カテキ
ンという｝及びその誘導体、例えば、３−Ｏ−｛５−
（３，４−ジヒドロキシフェニル）−２Ｒ−ヒドロキシ
ペンタノイル｝体、５，７−ジメチル−３’，４’−メ
チレンエーテル体など；下記式

【００１６】

【化５】

【００１７】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシフラバン（２Ｓ，３Ｓ）｛（＋）−エピカ
テキンという｝及びその誘導体、例えば、３−Ｏ−
（３，４，５−トリヒドロキシベンゾイル）体など；下
記式

【００１８】

【化６】

【００１９】で表される３，３’，４’，５，５’，７
−ヘキサヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｒ）｛（−）−
エピガロカテキンという｝及びその誘導体、例えば、
４’−メチルエーテル体、３−Ｏ−（４−ヒドロキシシ
ンナモイル）体、７−Ｏ−（３，４，５−トリヒドロキ
シベンゾイル）体など；下記式

【００２０】

【化７】

【００２１】で表される３，３’，４’，５，５’，７
−ヘキサヒドロキシフラバン（２Ｓ，３Ｒ）｛（−）−
ガロカテキンという｝などが例示される。また、下記式

【００２２】

【化８】

【００２３】で表されるシンコナインＩａ(cinchonain
Ia) 及びその誘導体；ダフノドリンＢ(daphnodorin B)
及びその誘導体；下記式

【００２４】

【化９】

【００２５】で表されるドリオプテリン(dryopterin)；
下記式

【００２６】

【化１０】

【００２７】で表されるガンビリインＡ１(gambiriin A
1)及びその誘導体；イソフィロフラバニン(isophyllofl
avine)；下記式

【００２８】

【化１１】

【００２９】で表されるコプシラチン(kopsirachin) ；
下記式

【００３０】

【化１２】

【００３１】で表されるラリキシノール(larixinol) ；
下記式

【００３２】

【化１３】

【００３３】で表されるマヒュアニンＡ(mahuanin A)及
びその誘導体；下記式

【００３４】

【化１４】

【００３５】で表されるオーロングテアニン(oolongthe
anin) ；下記式

【００３６】

【化１５】

【００３７】で表されるフィロクマリン(phyllocoumari
n)及びその誘導体；下記式

【００３８】

【化１６】

【００３９】で表されるフィロフラバニン(phylloflava
nine) ；下記式

【００４０】

【化１７】

【００４１】で表されるステノフィラニン(stenophylla
nin)及びその誘導体；下記式

【００４２】

【化１８】

【００４３】で表されるテーフラガリン(theaflagalli
n) 及びその誘導体；下記式

【００４４】

【化１９】

【００４５】で表されるテーフラビン(theaflavin)及び
その誘導体；下記式

【００４６】

【化２０】

【００４７】で表されるテーシネンシンＣ(theasinensi
n C)及びその誘導体なども、フラバン３−オール骨格を
有する化合物として例示される。更に、下記式

【００４８】

【化２１】

【００４９】で表される３，４−ジヒドロ−５−メトキ
シ−１２−メチル−２，８−ジフェニル−８，１４−メ
タノ−２Ｈ，１４Ｈ−ベンゾピラノ［７，８−ｄ］
［１，３］ベンソジオキソシン−１１，１３−ジオー
ル；下記式

【００５０】

【化２２】

【００５１】で表される１−［２’−（３”，４”−ジ
ヒドロキシフェニル）−３’，４’−ジヒドロ−３’，
７’−ジヒドロキシ−２’Ｈ−１’−ベンゾピラン−
４’−イル］−５，６ａ，７，１２ａ−テトラヒドロ
［２］ベンゾピラノ［４，３−ｂ］［１］ベンゾピラン
−２，３，７，１０−テトロール（２’Ｒ，３’Ｓ，
４’Ｓ，６ａＳ，７Ｒ，１２ａＲ）；下記式

【００５２】

【化２３】

【００５３】で表される７−［２’−（３”，４”−ジ
ヒドロキシフェニル）−３’，４’−ジヒドロ−３’，
７’−ジヒドロキシ−２’Ｈ−１’−ベンゾピラン−
６’−イル］−５，６ａ，７，１２ａ−テトラヒドロ
［２］ベンゾピラノ［４，３−ｂ］［１］ベンゾピラン
−３，４，１０−トリオール（２’Ｒ，３’Ｓ，６ａ
Ｓ，７Ｓ，１２ａＲ）；下記式

【００５４】

【化２４】

【００５５】で表される６−［１”−（３，４−ジヒド
ロキシフェニル）−２”−ヒドロキシ−３”−（３，
４，５−トリヒドロキシフェニル）プロピル］−３’，
４’，７，８−テトラヒドロキシフラバン（１”Ｓ，２
Ｒ，２”Ｒ，３Ｓ）；下記式

【００５６】

【化２５】

【００５７】で表される７，８−（２，２−ジメチルピ
ラノ）−３，４’，５−トリヒドロキシフラバンの５−
メチルエーテル体；下記式

【００５８】

【化２６】

【００５９】で表される３，４，４’，５，７−ペンタ
ヒドロキシ−６，８−ジメチルフラバン（２Ｒ，３Ｓ，
４Ｓ）の４’，５−ジ−メチルエーテル体；下記式

【００６０】

【化２７】

【００６１】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシフラバン（４→８）−３，３’，４’，
５，７−ペンタヒドロキシフラバン（２→７，４→８）
−３，３’，４’，５，７−ペンタヒドロキシフラバン
（２Ｒ，２’Ｒ，２”Ｒ，３Ｒ，３’Ｒ，３”Ｓ，４
Ｒ，４’Ｒ）；下記式

【００６２】

【化２８】

【００６３】で表される３，３’，４’，５，７−ペン
タヒドロキシ−６−プレニルフラバン（２Ｒ，３Ｓ）；
３，３’，４’，５，７−ペンタヒドロキシ−８−プレ
ニルフラバン（２Ｒ，３Ｓ）；下記式

【００６４】

【化２９】

【００６５】で表される、３，３’，４’，５，７−ペ
ンタヒドロキシ−４−（２，４，６−トリヒドロキシフ
ェニル）フラバン（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）並びにその立体
異性体類及び誘導体；下記式

【００６６】

【化３０】

【００６７】で表される３，４，９，１０−テトラヒド
ロ−２−（４’−ヒドロキシフェニル）−５−メトキシ
−８，８−ジメチル−２Ｈ，８Ｈ−ベンゾ［１，２−
ｂ：３，４−ｂ’］ジピラン−３−オール；３，３’，
４’，７−テトラヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｓ）及
びその立体異性体類；下記式

【００６８】

【化３１】

【００６９】で表される３，３’，４’，７−テトラヒ
ドロキシ−４−（２”，３”，４”−トリヒドロキシフ
ェニル）フラバン（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）の３”−メチル
エーテル体及びその立体異性体類；下記式

【００７０】

【化３２】

【００７１】で表される３，５，７−トリヒドロキシフ
ラバン（２Ｒ，３Ｒ）及びその立体異性体類；下記式

【００７２】

【化３３】

【００７３】で表される３，４’，７−トリヒドロキシ
フラバン−（４→２）−３，３’，４’，５−テトラヒ
ドロキシスチルベン（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）及びその立体
異性体類；下記式

【００７４】

【化３４】

【００７５】で表される３，４’，７−トリヒドロキシ
−３’−プレニルフラバン（２Ｒ，３Ｓ）及びその立体
異性体類；３，３’，４’，７−テトラヒドロキシフラ
バン（２Ｒ，３Ｓ）及びそれらの誘導体なども、フラバ
ン３−オール骨格を有する化合物として例示される。そ
の他、“The Flavonoids : advances in research sinc
e 1980 (J.B.Harborne ed.), Chapman and Hall 社 (Lo
ndon) 出版, 1988年”、“The Flavonoids :advances i
n research since 1986 (J.B.Harborne ed.), Chapman
and Hall 社(London) 出版, 1994年”、“Plant Flavon
oids in Biology and Medicine (V.Cody et al., ed
s.), Alan R. Liss 社 (New York) 出版, 1986年”及び
“Plant Flavonoids in Biology and Medicine II(V.Co
dy et al., eds.), Alan R. Liss社 (New York) 出版,
1986年”に記載のフラバン３−オール骨格を有する化合
物もここに例示される。

【００７６】前記のアグリコン成分は、一般に、植物、
特に葉、樹皮、種子等や、微生物などから抽出、分離す
ることができる。また、それらからプロアントシアニジ
ン、アントシアニジン、タンニンなどのアグリコン類を
含有する物質を抽出、分離したのち、それらに通常の化
学反応又は酵素反応を施して製造することもできる。

【００７７】上記した「誘導体」として、没食子酸(gal
lic acid) のCOOH基が、例えば、上記式(1) で表される
フラバン３−オール骨格の３位のOH基とエステル結合し
たガレート誘導体を例示することができる（食品と開
発、２７巻、２２〜２３頁、１９９４年）。その代表的
な例として、（＋）−カテキンガレート、（＋）−ガロ
カテキンガレート、（−）−エピカテキンガレート、
（−）−エピガロカテキンガレート等が挙げられる。上
記（−）−エピガロカテキンガレートについて、下記に
示す。

【００７８】

【化３５】

【００７９】これらのガレート誘導体は主に各種植物体
（例えば茶の葉など）、各種植物種子などから好適に分
離することができる。また、その他、上記の「誘導体」
としては、上記アグリコンの炭素原子に結合した水素原
子がメチル、エチル、ブチル等で置換されたアルキル誘
導体、上記アグリコンのヒドロキシ基とアルコールとの
反応により得られるメチルエーテル、エチルエーテル、
ブチルエーテル等のアルキルエーテル誘導体、上記アグ
リコンのヒドロキシ基と脂肪酸との反応により得られる
エステル誘導体などを例示することができる。そして、
そのような誘導体化は、本発明による配糖体とする前、
又は配糖体とした後に、公知の化学合成法によりアルキ
ル化したり、アグリコン部分のヒドロキシ基を、対応す
る酸、又はアルコールを用いて公知の化学合成法（丸山
和博編、有機化学講座２、有機反応Ｉ、II、III 、丸善
出版(1984 ）参照）によりエーテル化又はエステル化す
ることにより容易に行うことができる。また、ハロゲン
化物などの誘導体も例示することができる。ハロゲン化
も、同様にアグリコン部分のヒドロキシ基及び／又は炭
素原子に結合する水素原子を公知の方法でハロゲン置換
することにより容易に行うことができる。

【００８０】本発明による配糖体の糖としては、例え
ば、Ｄ−グルコース、Ｌ−ラムノース、Ｄ−ガラクトー
ス、Ｄ−マンノース、Ｄ−アロース等のヘキソース、例
えば、Ｄ−キシロース、Ｌ−アラビノース、Ｄ−アピオ
ース等のペントースなどの単糖類；これらの単糖類から
選ばれる少なくとも１種がα結合又はβ結合した、直鎖
状又は分岐状の２〜８糖のホモオリゴ糖又はヘテロオリ
ゴ糖などが挙げられる。

【００８１】本発明におけるフラバン３−オール骨格を
有するアグリコンの配糖体は、Ｏ−配糖体及びＣ−配糖
体のいずれであってもよく、また、α−配糖体及びβ−
配糖体のいずれであってもよく、これらの少なくとも１
種を使用する。また、本発明においては、Ｏ−α−配糖
体、Ｏ−β−配糖体及びＣ−配糖体（α体及び／又はβ
体）からなる群から選ばれる少なくとも２種を組み合わ
せて用いるのが特に好ましい。

【００８２】本発明によるＯ−配糖体は、糖のアノマー
炭素原子のヒドロキシ基と、フラバン３−オール骨格を
有するアグリコン成分のいずれかの位置のヒドロキシ基
とから水がとれてＯ−グリコシド結合したものであり
（後述するＯ−α−配糖体の製造においては、通常、糖
は、上記式(1) 中のＢ環に結合したヒドロキシ基と優先
的に結合する。）、アグリコン成分に複数の糖がＯ−グ
リコシド結合していてもよい。また、本発明によるＣ−
配糖体は、糖のアノマー炭素原子のヒドロキシ基と、フ
ラバン３−オール骨格を有するアグリコン成分のいずれ
かの位置の炭素原子に結合した水素原子とから水がとれ
てＣ−グリコシド結合したものであり、アグリコン成分
に複数の糖がＣ−グリコシド結合していてもよい。

【００８３】Ｏ−α−配糖体としては、具体的には、例
えば、（−）−カテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシド、（−）−カテキンガレート−４’−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシド、（−）−カテキンガレート−
４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド、
（＋）−カテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ド、（＋）−カテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシド、（＋）−カテキンガレート−４’，
４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド、（−）−エ
ピカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、
（−）−エピカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシド、（−）−エピカテキンガレート−
４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド、
（＋）−エピカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、（＋）−エピカテキンガレート−４’−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−エピカテキンガレー
ト−４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド、
（−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド、（−）−エピガロカテキンガレート−４’
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−エピガロカ
テキンガレート−４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコ
ピラノシド、（−）−ガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシド、（−）−ガロカテキンガレート−
４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−ガロカ
テキンガレート−４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコ
ピラノシド、（＋）−カテキン−７−Ｏ−α−Ｌ−アラ
ビノピラノシド、（＋）−カテキン−７−Ｏ−α−Ｌ−
アラビノピラノシド、（＋）−カテキン−３−Ｏ−α−
Ｌ−ラムノノピラノシド、３’，４’，５，７−テトラ
ヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｓ）−３−Ｏ−α−Ｄ−
キシロピラノシドなどを挙げることができる。

【００８４】なお、上記の（−）−エピガロカテキンガ
レート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド及び
（−）−エピガロカテキンガレート−４’，４”−Ｏ−
α−Ｄ−ジ−グルコピラノシドについては、それぞれ式
(2) 及び(3) として下記に示す。

【００８５】

【化３６】

【００８６】

【化３７】

【００８７】Ｏ−β−配糖体としては、具体的には、例
えば、（−）−エピカテキン−３−Ｏ−β−Ｄ−アロピ
ラノシド、（−）−エピカテキン−３−Ｏ−（２−Ｏ−
トランス−シナモイル−β−Ｄ−アロピラノシド）、
（−）−エピカテキン−３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド、（−）−エピカテキン ５−Ｏ−β−Ｄ−アロピ
ラノシド、（−）−エピカテキン−３’メチルエーテル
−７−Ｏ−β−Ｄ−アロピラノシド、（−）−エピカテ
キン−３’，５’，７−トリ−メチルエーテル−５−Ｏ
−β−Ｄ−アロピラノシド、（＋）−カテキン−３−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−３’
−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−
４’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキ
ン−５−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテ
キン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カ
テキン ３’，４’−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、（＋）−カテキン−３’，５−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド、（＋）−カテキン ３’，７−ジ−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン
４’，５−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）
−カテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−キシロピラノシド、
（＋）−カテキン−５−Ｏ−｛６−Ｏ−クマロイル(cou
maroyl) −２−Ｏ−フェルロイル(feruoloyl) −β−Ｄ
−グルコピラノシド｝、（−）−カテキン−７−Ｏ−β
−Ｄ−グルコピラノシド、３’，４’，５，７−テトラ
ヒドロキシフラバン（２Ｒ，３Ｒ）−５−Ｏ−β−Ｄ−
グルコピラノシド、３’，４’，５，７−テトラヒドロ
キシフラバン（２Ｒ，３Ｒ）−３−Ｏ−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、３’，４’，５，７−テトラヒドロキシフ
ラバン（２Ｒ，３Ｓ）−７−Ｏ−β−Ｄ−アピオフラノ
シド、３’，３’，４’，５，５’，７−ヘキサヒドロ
キシフラバン（２Ｒ，３Ｓ）−３’，５’，７−トリ−
メチルエステル−５−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシドな
どを挙げることができる。Ｃ−配糖体としては、例え
ば、下記式

【００８８】

【化３８】

【００８９】で表される（−）−エピカテキン−６−Ｃ
−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−６−
Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−カテキン−８
−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−
８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシドなどが用いられる。
Ｏ−α−配糖体類の中で、特にＯ−α−グルコース配糖
体類は、Kitao らの方法(Biosci. Biotech. Biochem.,
57巻, p.2010〜2015 (1993) 、及び特願平５−１７８４
７９号公報参照）により製造される。即ち、例えば、ロ
イコノストック・メセンテロイデス（Leuconostoc mese
nteroides ）、シュウドモナス・サッカロフィラ（Pseu
domonas saccharophila ）、クロストリジウム・パスツ
リナム（Clostridium pasteurianum）などの各種微生物
起源のシュークロースホスホリラーゼの糖転移反応活性
を利用して、前記アグリコン成分を受容体として、ま
た、グルコース−１−リン酸又はシュクロースをグルコ
ース供与体として、グルコース又は２〜８糖のマルトオ
リゴ糖を転移させることにより製造することができる。

【００９０】具体的には、例えば、アグリコン成分とグ
ルコース−１−リン酸又はシュークロースとの混合液
に、ロイコノストック・メセンテロイデスなどからのシ
ュークロースホスホリラーゼを作用させ、糖転移反応を
行なわせることにより得られる。上記の糖転移反応は、
通常、pH 5.0〜8.5 の範囲、温度20〜50℃の範囲で、１
〜30時間行う。また、基質の濃度は、通常、アグリコン
成分及びグルコール−１−リン酸糖全体として５〜100
％（ｗ／ｖ）の範囲である。酵素濃度は基質総重量１ｇ
当り１単位以上あればよい。

【００９１】またＯ−α−グルコース配糖体は、アグリ
コンに、澱粉又はシクロデキストリンの存在下で、バチ
ルス属細菌由来のシクロデキストリン・グルカノトラン
スフェラーゼを作用させて製造することもできる（特開
平４−２７３８９０号公報）。前記反応生成物からの本
発明のＯ−α−グルコース配糖体の分離精製は、通常の
カラムクロマトグラフィーにより行うことができる。例
えば、セファデックス(Sephadex)ＬＨ−２０などのデキ
ストラン誘導体を担体とする方法や、カプセルパック(C
apcellpak)Ｃ₁₈ＳＧ１２０カラム（ 250×20mmi.d.）
（資生堂株式会社製）を用いるＨＰＬＣ法により好適に
分離精製される。

【００９２】また、前記のシュークロースホスホリラー
ゼや、シクロデキストリン・グルカノトランスフェラー
ゼなどを用いてＯ−α−配糖体を製造するに当り、上記
のようなＯ−α−配糖体を糖の受容体として、更に複数
の糖を結合させることも可能である。そして、そのよう
に製造されたＯ−α−配糖体も、本発明において好適に
用いることができる。

【００９３】Ｏ−β−配糖体及びＣ−配糖体は各種の植
物体及びそれらの樹皮などから、常法に従って、各種有
機溶媒類（例えば、メタノール、エタノール、アセトン
など）、又はそれらの有機溶媒類と水との混合溶媒（例
えば、メタノールと水との混合溶媒など）を用いて抽出
し、セファデクス(Sephadex)LH-20 などを充填したカラ
ム、MCI-gel CHP-20P カラムなどを用いるカラムクロマ
トグラフィーにより極めて容易に分離精製できる（Phyt
ochemistry, 28, 1237-1240 (1989) ）。

【００９４】このような分離精製操作によれば、本発明
のフラバン３−オール骨格を有するアグリコンの配糖体
を、単独で、又は２種以上の混合物として分離すること
ができる。また、Ｏ−β−配糖体は、神谷らの方法（茶
業研究報告, No.76, 別冊 102〜103 頁, 1992年）に従
って化学合成により製造することができる。

【００９５】本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤にお
いて、好適に用いられるフラバン３−オール骨格を有す
るアグリコンの配糖体は、原料の入手性、製造の容易性
等の観点から、糖成分がグルコースであるものであり、
更に好適に用いられるものは、糖成分がグルコースであ
り、アグリコン成分が（−）−カテキン、（＋）−カテ
キン、（−）−エピカテキン、（＋）−エピカテキン、
（−）−エピガロカテキン、（−）−ガロカテキン又は
それらの没食子酸誘導体（ガレート誘導体）であるもの
である。その中でも特に好適に用いられるのは、前記の
酵素法又は植物の樹皮からの抽出分離により大量生産が
容易であることから、（−）−カテキン−４’−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−カテキンガレート−
４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−カテキ
ンガレート−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、（＋）−カテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド、（＋）−カテキンガレート−４’−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキンガレート−
４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、
（−）−エピカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、（−）−エピカテキンガレート−４’−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−エピカテキンガレー
ト−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、
（＋）−エピカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド、（＋）−エピカテキンガレート−４’−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−エピカテキンガレー
ト−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、
（−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド、（−）−エピガロカテキンガレート−４’
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−エピガロカ
テキンガレート−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド、（−）−ガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシド、（−）−ガロカテキンガレート−
４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−ガロカ
テキンガレート−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシド、（−）−カテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グル
コピラノシド、（＋）−カテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グ
ルコピラノシド、（−）−エピカテキン−７−Ｏ−β−
Ｄ−グルコピラノシド、カテキン−４’−Ｏ−β−Ｄ−
グルコピラノシド、（−）エピカテキン−３’−Ｏ−メ
チル−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、（−）−エ
ピカテキン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド、
（＋）−カテキン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド、（−）−カテキン−８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノ
シド、（＋）−カテキン−８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラ
ノシドなどをあげることができる。これらの中でも、
（−）−エピカテキン、（−）−エピガロカテキン系の
配糖体が、ヒスチジン脱炭酸酵素活性阻害の強さの観点
(Biochim. Biophys. Acta., 1133, p.172-178 (1992)）
から、本発明においては特に好適に用いることができ
る。そしてこれらは、前記のKitao らの方法により製造
することができる。

【００９６】上記のフラバン３−オール骨格を有するア
グリコンの配糖体を有効成分として含有するヒスチジン
脱炭酸酵素阻害剤は、上記のようなカラムクロマトグラ
フィによる分離精製により得られたフラバン３−オール
骨格を有するアグリコンの配糖体を含有する分画液をそ
のまま、該分画液を濃縮することにより得られる濃縮液
をそのまま、あるいは凍結乾燥などの処理操作により白
色固体粉末としたものを製剤化することにより製造する
ことができる。本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤
は、上記のようなフラバン３−オール骨格を有するアグ
リコンの配糖体を１種単独で、又は２種以上の組み合わ
せで含有する。

【００９７】作用 フラバン３−オール骨格を有するアグリコンの配糖体
は、優れたヒスチジン脱炭酸酵素阻害活性を示し、しか
も作用が緩和で作用の持続性が長く、かつ化学的に安定
である。これは、フラバン３−オール骨格を有するアグ
リコンの配糖体は、例えば、経口投与されると、胃腸内
のグルコシダーゼ系やリアーゼ系の酵素、即ち、小腸内
においてはαグルコシダーゼ、大腸又は直腸内において
は腸内細菌が産生するβグルコシダーゼ及び各種リアー
ゼ系酵素によりフラバン３−オール骨格を有するアグリ
コン成分と、糖とに徐々に、長時間わたって分解され
て、分解され次第、それらの遊離アグリコンが血液内に
徐々に吸収されることによる。その結果として長時間に
わたって血液中にアグリコンが存在することになる。次
いで、遊離アグリコンは、ＥＣＬ細胞（enterochromaff
in-likecell)、肥満細胞(mastcell)などのヒスチジン脱
炭素酵素活性を阻害し、ヒスタミン生成量を減少させ
る。その結果、各種刺激を受けてもＥＣＬ細胞、肥満細
胞からのヒスタミン放出量が長時間にわたって低減され
る。そして、ヒスタミンを媒介物とする生体反応、例え
ば、胃酸分泌、アレルギー反応などが長時間にわたって
制御されることになる。

【００９８】従って、本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻
害剤は、ヒスタミンが関与する各種炎症疾患の予防、治
療のための抗炎症剤として極めて有用である。特に、慢
性的疾患、例えば、胃潰瘍、十二支腸潰瘍などの潰瘍疾
患についての抗潰瘍剤、及び、アトピー性皮膚炎、鼻閉
塞感を伴うアレルギー性鼻炎などアレルギー性炎症疾患
の治療や、また、即時型アレルギーに分類される炎症疾
患、例えば、気管支ぜん息、じん麻疹、アレルギー性鼻
炎などの予防のための抗アレルギー剤として好適に用い
られる。また、本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤
は、活性酸素フリーラジカルに起因すると推定される疾
患、例えば、炎症、発癌、放射能障害、アレルギー、白
内障、動膊硬化、心筋虚血、老化、けいれん、脳卒中、
糖尿病などの予防薬、治療薬としても有用である。

【００９９】投与方法 本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤は、経口、非経口
又は吸引により投与されるが、経口投与が一般的に好ま
しい。またクリームなどに製剤化して、皮膚炎症部に塗
る外用薬としても用いることができる。

【０１００】製剤化 上記のフラバン３−オール骨格を有するアグリコンの配
糖体に、薬理的に許容しうる固体又は液体の製剤担体を
配合することにより薬剤組成物とすることができる。こ
の組成物は注射剤、錠剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、
顆粒剤、水剤、シロップ剤、懸だく剤、又は乳剤の形態
を採ることができる。製剤担体としては、かかる形態に
通常用いられるものであればよく、例えば、トウモロコ
シ澱粉、各種デキストリン、ブドウ糖、乳糖、ショ糖、
メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースカル
シウム、結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、
アルギン酸ナトリウム、ウィテプソールＷ３、ウィテプ
ソールＥ８５、ポリビニルアルコースもしくは軽質無水
ケイ酸などの賦形剤、結合剤もしくは崩壊剤；タルク、
ステアリン酸、ワックス類、ヒドロキシプロピルセルロ
ースもしくは硼酸などの潤沢剤；セラック、酢酸フタル
酸セルロースもしくはポリビニルアセタルジエチルアミ
ノアセテートなどの被覆剤；グリセリン、プロピレング
リコールもしくはマンニトールなどの溶解補助剤；ポリ
オキシエチレンステアレート、ポリオキシエチレンセチ
ルアルコールエテール、アラビアゴムもしくはポリビニ
ルピロリドンなどの乳化剤もしくは懸だく剤；もしくは
ソルビトール、ツィーン８０、スパン６０もしくは油脂
類などの安定化剤；又は各種の溶剤が挙げられる。

【０１０１】投与量 本発明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤のヒトへの投与量
は、治療すべき症状、年齢、体重、投与経路に異なる
が、成人一日あたり、0.01〜100 mg／kg（体重）、好ま
しくは0.05〜50mg／kg（体重）、より好ましくは 0.1〜
25mg／kg（体重）である。0.01mg／kg（体重）未満の投
与量では薬理効果がうすい。また、100 mg／kg（体重）
を超える投与量は、神経系、肝臓、胃などの生理機能に
直接影響を及ぼす可能性があるので好ましくない。

【０１０２】

【実施例】

（製造例１）配糖体No. Ｏ−α−１：（−）−エピガロカテキン−4'
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの製造 Kitao らの方法により酵素的に調製した。以下、具体的
に説明する。

【０１０３】（−）−エピガロカテキン（栗田工業社販
売）600mgを３mlのメタノールに溶解した。得られたメ
タノール溶液と、100mMＨＥＰＥＳ緩衝液（pH7.5）にシ
ュークロースを400mg／mlの濃度で溶解した溶液300mlと
を混合し、これにシュークロースホスホリラーゼ（キッ
コーマン社製）13500単位を添加して42℃で15時間反応
させることにより配糖体生成反応を行った。次に、100
℃で５分間加熱処理して酵素反応を停止させた。

【０１０４】得られた酵素反応混合液をセファデックス
ＬＨ−20カラム（内径５cm、長さ60cm）に通し、該カラ
ムを水で洗浄した後、40〜70％エタノール溶液を用いて
濃度勾配法にて溶離を行い、（−）−エピガロカテキン
配糖体分画液を得た。次に、該（−）−エピガロカテキ
ン配糖体分画液をCAPCELL PAK Ｃ₁₈ SG120カラム（内径
２cm、長さ25cm、資生堂社製）に通し、次いで20％メタ
ノール溶液を用いて溶離を行い、目的物である（−）−
エピガロカテキン−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド
分画液を得た。該分画液を減圧濃縮し、次いで凍結乾燥
することにより（−）−エピガロカテキン−4'−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシドの粉末180mg（純度99％、収率4
0％）を得た。尚、目的物質であることは、ＩＲスペク
トル、Ｃ¹³−ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認した。

【０１０５】（製造例２）配糖体No. Ｏ−α−２：（−）−エピガロカテキンガレ
ート−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、及び 配糖体No. Ｏ−α−３：（−）−エピガロカテキンガレ
ート−4',4" −ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの製
造 Kitao らの方法により酵素的に調製した。以下、具体的
に説明する。

【０１０６】（−）−エピガロカテキンガレート（栗田
工業社販売）600mgを用いた以外は製造例１と同様の方
法で酵素反応を行った。得られた酵素反応混合液を、CA
PCELL PAK Ｃ₁₈ SG120カラム（内径２cm、長さ25cm、資
生堂社製）に通し、次いで20％メタノール溶液を用いて
溶離を行い、（−）−エピガロカテキンガレート−4'−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド分画液と、（−）−エピ
ガロカテキンガレート−4',4" −ジ−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシド分画液を得た。分画液をそれぞれ減圧濃縮
し、次いで凍結乾燥することにより（−）−エピガロカ
テキンガレート−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの
粉末70mg（純度99％、収率20％）、及び（−）−エピガ
ロカテキンガレート−4',4" −ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシドの粉末140mg（純度99％、収率33％）を得
た。尚、目的物質であることは、ＩＲスペクトル、Ｃ¹³
−ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認した。

【０１０７】（製造例３）配糖体No. Ｏ−α−４：ドリオプテリン−4'−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−α−５：ドリオプテリン−3',4'−ジ−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、及び 配糖体No. Ｏ−α−６：ドリオプテリン−7,4'−ジ−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシドの製造 Karlらの方法(Z. Naturforsch., 36, p.607 (1981)によ
りドリオプテリンを分離精製した。

【０１０８】ドリオプテリンの分離精製 かしのきシダであるDryopteris filixmas 30kgをアセト
ン−水混合液（１：１(v/v) ）50Ｌに混合して室温で５
日間抽出を行った。抽出残渣を更にアセトン−水混合液
50Ｌに混合して再度抽出を行った。得られた抽出液全て
を混合して、ロータリエバポレータにて減圧下、40℃で
濃縮して濃縮液10Ｌを得た。該濃縮液に同量の水を加え
た後、同量の四塩化炭素、クロロホルム、ジエチルエー
テル、酢酸エチルを用いて順番に抽出を行った。酢酸エ
チル抽出物を前記同様にエバポレータを用いて濃縮し、
得られた濃縮物を凍結乾燥して粉末乾燥物40ｇを得た。

【０１０９】該粉末乾燥物20ｇに水300mlを加え、セフ
ァデックスＬＨ−20カラムに通し、該カラムを水で洗浄
した後、エタノールを用いて溶離を行って、バニリン−
HCl呈色反応画分を分取した。この分画液について、更
に、アセトン、及びクロロホルム−メタノール混合液
（２：８(v/v) ）でそれぞれクロマトグラフィ操作を行
い、ドリオプテリン含有分画液を得た。前記粉末乾燥物
の残り20ｇについても同様な操作を行いドリオプテリン
含有分画液を得た。このドリオプテリン含有画分を全部
合わせて濃縮し、固体粉末状のドリオプテリン630mg
（純度98％）を得た。

【０１１０】ドリオプテリンの定性分析には、下記の薄
層クロマトグラフィを使用した。なお、Ｒｆ値は文献値
を参照した。 ａ）薄層板：ケーゼルゲル（Kieselgel ）Ｆ₂₅₄ 、展開
液：クロロホルム−酢酸−水 55：45：10(v/v) 。 ｂ）薄層板：ケーゼルゲル（Kieselgel ）Ｆ₂₅₄ 、展開
液：トルエン−アセトン−酢酸 ５：５：１(v/v) ｃ）薄層板：セルロース、展開液：ブタノール−酢酸−
水 ４：１：２(v/v) ｄ）薄層板：ケーゼルゲル（Kieselgel ）Ｆ₂₅₄ 、展開
液：トルエン−アセトン２：１(v/v) 尚、ドリオプテリンであることは、ＩＲスペクトル、Ｃ
¹³−ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認した。

【０１１１】配糖体の製造 上記ドリオプテリンを用いて、製造例１のKitao らの酵
素的方法と同様の方法で各種Ｏ−α−配糖体を調製し
た。ドリオプテリン−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ドの収率は約40％、ドリオプテリン−3',4'−ジ−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシドの収率は約15％、及びドリオ
プテリン−7,4'−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの
収率は約15％であった。

【０１１２】（製造例４）配糖体No. Ｏ−α−７：フィロクマリン−4'−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−α−８：フィロクマリン−3',4'−ジ−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド、及び 配糖体No. Ｏ−α−９：フィロクマリン−5,4'−ジ−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシドの製造 Foo らの方法(Phytochem., 28, 2477-2481 (1989) ）に
よりフィロクマリンを分離精製した。

【０１１３】フィロクマリンの分離精製 Phyllocladus trichomanoides (celey pine)の芽、葉及
び小枝を凍結乾燥したもの10kgを粉末化した。得られた
粉末物をアセトン−水混合液（１：１(v/v) ）20Ｌに混
合して室温で１日間抽出を行った。抽出残渣を更にアセ
トン−水混合液（１：１(v/v) ）20Ｌに混合して再度抽
出を行った。得られた抽出液全てを混合して、ロータリ
ーエバポレータで５分の１に濃縮した。得られた濃縮液
に同量の水を加えた後、酢酸エチル５Ｌで５回抽出を行
った。得られた抽出物を前記同様にロータリーエバポレ
ータで濃縮し、得られた濃縮物を凍結乾燥して粉末乾燥
物2.2kgを得た。

【０１１４】該粉末乾燥物50ｇに水を加え、セファデッ
クスＬＨ−20カラムに通し、該カラムを水で洗浄した
後、エタノールを用いて溶離を行って、バニリン−HCl
呈色反応画分を分取した。この分画液を５分の１に濃縮
した後、更に、溶離剤としてエタノール−水混合液（1
5：85(v/v) ）を用いて同様のクロマトグラフィ操作を
行い、フラボノイド分画液ａを得た。得られた分画液
を、更にCAPCELL PAK Ｃ₁₈ SG120カラム（内径２cm、長
さ25cm）（資生堂社製）に通し、メタノール−水の濃度
勾配液（３：３から１：１(v/v) ）を用いて溶離を行っ
て、フラボノイド分画液ｂを得た。このような操作を全
ての粉末乾燥物について行って、得られたフラボノイド
分画液ｂを合わせた。得られたフラボノイド分画液ｂ
を、セファデックスＬＨ−20カラムに通し、エタノール
−水の濃度勾配液（３：17から３：７(v/v) ）を用いて
溶離を行って、最初に溶離した画分を採取し、濃縮後、
凍結乾燥してフィロクマリンの粉末512mgを得た。

【０１１５】なお、純度は98％であった。また、目的の
フィロクマリンであることは、ＩＲスペクトル、Ｃ¹³−
ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認した。また、前記の
分離精製において、溶離液について、Schleicher・Schu
ell セルロース薄層板を使用する薄層クロマトグラフィ
（展開液：酢酸−水、６：94(v/v) ）行って、フィロク
マリン含有の分画液であることを確認した。フィロクマ
リンのＲｆ値は文献値を参照した。

【０１１６】配糖体の製造 上記フィロクマリンを用いて製造例１のKitao らの酵素
的方法と同様の方法で各種Ｏ−α−配糖体を調製した。
フィロクマリン−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの
収率は約40％、フィロクマリン−3',4'−ジ−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシドの収率は約10％、及びフィロクマ
リン−5,4'−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドの収率
は約15％であった。

【０１１７】（製造例５）配糖体No. Ｏ−β−１：（−）−エピガロカテキン−７
−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−β−２：（＋）−カテキン−７−Ｏ−β
−Ｄ−グルコピラノシド、及び 配糖体No. Ｏ−β−３：（＋）−カテキン−4'−Ｏ−β
−Ｄ−グルコピラノシドの製造 Foo らの方法(Phytochem., 28, 1237-1240 (1989) ）に
より調製した。

【０１１８】ダグラスモミの内側樹皮50kgについて、３
回に分けて、それぞれメタノール100Ｌを用いて室温で
抽出を行った後、各抽出液を混合し、フラシューエバポ
レータにて減圧濃縮して濃縮液10Ｌを得た。該濃縮液
に、水10Ｌを加えた後、ヘキサン50Ｌで洗浄し、次いで
酢酸エチル50Ｌで洗浄した。洗浄後、凍結乾燥すること
により、粉末2.5kg（粗抽出物）を得た。

【０１１９】得られた粗抽出物の100ｇを水600mlに溶解
し、得られた水溶液をセファデックスＬＨ−20カラム
（内径５cm、長さ60cm）に通し、メタノール−水混合溶
液（１：１(v/v) ）を用いて溶離を行い、炭水化物分画
液、フラボノイド分画液、及びプロシアニジンのオリゴ
マー分画液を得た。得られたフラボノイド分画液をMCI-
gel CHP-20P カラム（75〜150μ）（内径２cm、長さ25c
m）に通し、メタノール−水混合溶液（３：７(v/v) ）
を用いて溶離を行い、（−）−エピガロカテキン−７−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド分画液、（＋）−カテキ
ン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド分画液、及び
（＋）−カテキン−4'−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド
分画液を得た。

【０１２０】更に、得られた各分画液を精製すべく、そ
れぞれ溶離剤としてエタノール−水混合溶液（１：１(v
/v) ）を用いて、セファデックスＬＨ−20カラム及びMC
I-gelCHP-20Pカラムによるクロマトグラフィ操作を行
い、最後に、溶離剤としてエタノール−水混合溶液
（３：17(v/v) ）を用いて、セファデックスＬＨ−20カ
ラムによるクロマトグラフィ操作を行った。

【０１２１】上記粗抽出物全てについて、上記と同様の
操作を行って目的の配糖体をそれぞれ含有する精製分画
液を得た。得られた分画液を凍結乾燥することにより、
（−）−エピガロカテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピ
ラノシド300mg（純度99％）、（＋）−カテキン−７−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド750mg（純度99％）、及
び（＋）−カテキン−4'−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ド1500mg（純度99％）を得た。

【０１２２】尚、上記の方法において、目的の配糖体を
それぞれ含有する分画液であることは、溶離液につい
て、Schleicher・Schuell セルロース薄層クロマトグラ
フィ（展開液ａ：ブタノール−酢酸−水の３：１：１(v
/v) 混合液、展開液ｂ：酢酸−水の３：47(v/v) 混合
液）を行うことにより確認した。また溶離液をβグルコ
シダーゼ（キッコーマン社製造、盛進製薬販売）処理し
て得たアグリコン部についても同様の薄層クロマトグラ
フィを行った。また、目的の配糖体であることは、ＩＲ
スペクトル、Ｃ¹³−ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認
した。

【０１２３】（製造例６）配糖体No. Ｏ−β−４：（＋）−カテキン−3',7−ジ−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−β−５：（＋）−カテキン−3',5−ジ−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−β−６：（＋）−カテキン−3',4'−ジ
−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｏ−β−７：（＋）−カテキン−4',5−ジ−
Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、 配糖体No. Ｃ−１：（＋）−カテキン−８−Ｃ−β−Ｄ
−グルコピラノシドの製造、及び 配糖体No. Ｃ−２：（＋）−カテキン−６−Ｃ−β−Ｄ
−グルコピラノシドの製造 kashiwada らの方法（Chem. Pharm. Bull., 34 (8), 32
08-3222 (1986)) により調製した。

【０１２４】長吉黄32kgをミキサーで粉末にし、80％ア
セトン水溶液100Ｌを用いて室温で５回抽出操作を行っ
た。得られた抽出液を製造例５と同様の方法で濃縮し、
濃縮液５Ｌを得た。この濃縮液を５等分して、水で２倍
に希釈した。各希釈液を遠心分離にて清澄化した。得ら
れた液をセファデックスＬＨ−20カラム（内径５cm、長
さ60cm）に通し、メタノールと水の１：０から０：１(v
/v) の濃度勾配溶液を用いて溶離を行って、画分Ｉ、I
I、III 、IV及びＶを得た。残りの濃縮液についても同
様の操作を行った。

【０１２５】得られた画分IIを濃縮し、凍結乾燥して粉
末1.5kgを得た。この粉末を５等分し、各々を水500mlに
溶解した。その各々について、MCI-gel CHP-20P カラム
によるクロマトグラフィ操作を行った。溶離剤として
は、メタノールと水の１：０か０：１(v/v) の濃度勾配
溶液を用いた。このようにして分画II−１、II−２、II
−３、II−４及びII−５を得た。

【０１２６】画分II−３について、セファデックスLH-2
0 カラムを用いて再クロマトグラフィ操作を行った。溶
離剤としては、メタノールと水の混合液（３：２(v/v)
）を用いた。そして、２画分II−3a、II−3bを得た。
画分II−3aについて、MCI-gelCHP-20P カラムによるク
ロマトグラフィ操作を施し、精製された（＋）−カテキ
ン−８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド含有分画液を得
た。II−3bについてBondapak Ｃ₁₈／Porasil B カラム
（35〜75μ、Water associates Inc. ）を用いる再クロ
マトグラフィを施した。溶離剤として、水−メタノール
混合液（９：１(v/v) ）を用いた。このようにして、４
画分、即ち、（＋）−カテキン−3',7−ジ−Ｏ−β−Ｄ
−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−3',5−ジ−Ｏ
−β−Ｄ−グルコピラノシド、（＋）−カテキン−3',
4'−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド、及び（＋）−
カテキン−4',5−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシドを
それぞれ含有する分画液を得た。

【０１２７】前記画分II−４について、せファデックス
LH-20 カラムによる再クロマトグラフィを行った。溶離
剤としては、水とメタノールとの濃度勾配液（１：０か
４：１(v/v) ）を用いた。３画分II−4a、II−4b及びII
−4cを得た。画分II−4a、II−4bについて、前記同様の
Bondapak Ｃ₁₈／Porasil B カラムを用いる再クロマト
グラフィを施した。画分II−4aから精製された（＋）−
カテキン−８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド含有分画
液、及び画分II−4bから精製された（＋）−カテキン−
６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド含有分画液を得た。

【０１２８】前記画分IIの全粉末について前記と同様の
操作を行って配糖体を分離精製した。前記の精製分画液
について、全操作の分を合わせ、凍結乾燥して各配糖体
の粉末を得た。その結果、（＋）−カテキン−3',7−ジ
−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシドについては260mg、
（＋）−カテキン−3',5−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラ
ノシドについては180mg、（＋）−カテキン−3',4'−ジ
−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシドについては160mg、
（＋）−カテキン−4',5−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラ
ノシドについては80mg、（＋）−カテキン−８−Ｃ−β
−Ｄ−グルコピラノシドについては2100mg、及び（＋）
−カテキン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシドについ
ては480mgを得た。なお、各配糖体の純度は99％であっ
た。また、目的の配糖体であることは、ＩＲスペクト
ル、Ｃ¹³−ＮＭＲ、及びＨ−ＮＭＲにより確認した。

【０１２９】（実施例１）本発明による配糖体の安定性試験 純水を３ｍｌづつ３区分用意し、第一区分に（−）−エ
ピガロカテキンガレートを、第２区分に上記製造例１で
調製した配糖体No. Ｏ−α−２（（−）−エピガロカテ
キンガレート−4'−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド）
を、第３区分に上記製造例１で調製した配糖体No. Ｏ−
α−３（（−）−エピガロカテキンガレート−4',4"−
ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド）をそれぞれ1000 p
pmの濃度になるように溶解した。それぞれの区分に蛍光
燈（27ワット）を５cm直下に固定して、可視光線強度 1
9500ルックス、紫外線（ 310〜400nm ）強度0.20mW／cm
²の条件で照射し、経時的にサンプルの一部を採取し、
420nmにおける吸光度を測定した。吸光度の増加を、上
記化合物の不安定度の目安とした。その結果を図１に示
す。

【０１３０】図１から、アグリコン成分のみからなる
（−）−エピガロカテキンガレートを溶解した区分（図
１中のＥＧＣｇ）は、時間と共に吸光度が増加してお
り、色の安定性が非常に悪いが、これに対して、その配
糖体すなわち（−）−エピガロカテキンガレート−4'−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシドを溶解した区分（図１中
のＧ−１）及び（−）−エピガロカテキンガレート−
4',4"−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド（図１中の
Ｇ−２）は、吸光度の増加が殆ど観察されないので、色
沢が安定であることがわかる。従って、本発明によるフ
ラバン３−オール骨格を有するアグリコンの配糖体は化
学的に非常に安定であることが確認された。

【０１３１】（実施例２）本発明による配糖体のヒスチジン脱炭酸酵素活性阻害試
験（試験No.210〜217 ） 各試験において、表１に示した配糖体を添加した場合の
ヒスチジン脱炭酸酵素活性をそれぞれ測定した。ヒスチ
ジン脱炭酸酵素として、マウス肥満腫瘍細胞Ｐ−８１５
(Biochim. Biophys. Acta., 1133,172-178(1992)参照)
から、Ohmoriらの方法(J.Biochem., 107, 834-839 (199
0)参照) により部分精製したものを用いた。

【０１３２】各試験において、100mMリン酸緩衝液（pH
6.8）に、ヒスチジンを５μｇ／mlの濃度、ピリドキサ
ールリン酸を５μｇ／mlの濃度、及び部分精製ヒスチジ
ン脱炭酸酵素溶液を20μｌ／mlの濃度、表１に示した配
糖体を 5.6μｇ／mlの濃度となるように混合した反応液
0.1mlを試験管に採り、37℃で10時間反応させた。反応
終了後、生成したヒスタミンをジメチルアミノアゾベン
ゼンイソチオシアネート誘導体としてＨＰＬＣ法（カラ
ム：Cosmosil SIL、流出液：クロロホルム／ジメチルホ
ルムアミド（ＤＭＦ）／水／酢酸＝210/80/4/1 (vol./v
ol.)、検出：435nm)により該誘導体量を測定して、生成
ヒスタミン量を求めた。配糖体の代わりにメタノールを
用いた場合（対照、試験No.217）のヒスチジン脱炭酸酵
素阻害率を０％として、各配糖体を添加した場合のヒス
チジン脱炭酸酵素の阻害率を生成ヒスタミン量から求め
た。その結果を表１に示す。

【０１３３】表１ ─────────────────────────────────── 試験 配糖体 配糖体名 酵素活性阻害率 No. No. （％） ─────────────────────────────────── 201 O-α-1 （−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α− 62.4 Ｄ−グルコピラノシド 202 O-α-2 （−）−エピガロカテキンガレート−４’ 24.9 −Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド 203 O-α-3 （−）−エピガロカテキンガレート−４’、 20.5 ４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド 204 O-α-4 ドリオプテリン−４’−Ｏ−α− 54.3 Ｄ−グルコピラノシド 205 O-α-5 ドリオプテリン−３’，４’−ジ−Ｏ−α− 24.1 Ｄ−グルコピラノシド 206 O-α-7 フィロクマリン−４’−Ｏ−α− 57.7 Ｄ−グルコピラノシド 207 O-α-8 フィロクマリン−３’，４’−ジ−Ｏ−α− 23.8 Ｄ−グルコピラノシド 208 O-β-1 （−）−エピガロカテキン−７−Ｏ−β− 57.3 Ｄ−グルコピラノシド 209 O-β-2 （＋）−カテキン−７−Ｏ−β− 33.8 Ｄ−グルコピラノシド 210 O-β-3 （＋）−カテキン−４’−Ｏ−β− 33.8 Ｄ−グルコピラノシド 211 O-β-4 （＋）−カテキン−３’，７−ジ−Ｏ−β− 31.8 Ｄ−グルコピラノシド 212 O-β-5 （＋）−カテキン−３’，５−ジ−Ｏ−β− 43.7 Ｄ−グルコピラノシド 213 O-β-6 （＋）−カテキン−３’，４’−ジ−Ｏ−β− 31.8 Ｄ−グルコピラノシド 214 O-β-7 （＋）−カテキン−４’，５−ジ−Ｏ−β− 33.3 Ｄ−グルコピラノシド 215 C-1 （＋）−カテキン−８−Ｃ−β− 56.8 Ｄ−グルコピラノシド 216 C-2 （＋）−カテキン−６−Ｃ−β− 63.5 Ｄ−グルコピラノシド 217 対照 メタノール ０ ───────────────────────────────────

【０１３４】表１に示す結果から、本発明のフラバン３
−オール骨格を有するアグリコンの配糖体は、マウス肥
満腫瘍細胞Ｐ−８１５由来のヒスチジン脱炭酸酵素を阻
害することが確認された。

【０１３５】（実施例３）本発明による配糖体のマウス肥満腫瘍細胞Ｐ−８１５に
おけるホルボールエステル及びデキサメタゾン誘導ヒス
タミン生合成阻害試験（試験No.301〜315 ） 各試験において、下記のようにしてヒスタミン生合成阻
害試験を行った。試験は、Kawai の方法(Biochim. Biop
hys. Acta., 1133, 172-178 (1992)参照）に従って行な
った。

【０１３６】マウス肥満腫瘍細胞Ｐ−８１５（５×10⁶
個）を10mlの５％ＦＢＳ（牛胎児血清、fetal bovine s
erum）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地に懸濁し、12−
Ｏ−テトラデカノイルホルボール-13-アセテート（１×
10^-8Ｍ）及びデキサメタゾン（１×10^-7Ｍ）を添加した
後、表２に示す配糖体を 0.1mg／mlの濃度で添加し、37
℃で12時間培養した。培養終了後、細胞内のヒスタミン
含量を実施例２と同様の方法で求めた。培養終了後のヒ
スタミン含量の測定値から培養開始時のヒスタミン含量
の測定値を差引いた値をヒスタミン生合成量とした。そ
の結果を表２に示した。

【０１３７】なお、配糖体としては、予め、５％ＦＢＳ
を含有するＲＰＭＩ１６４０培地中で、Ｏ−α−配糖体
についてはαグルコシダーゼ（2000単位／ｍｌ）、また
β−配糖体についてはβグルコシダーゼ（3000単位／ｍ
ｌ）を用いて37℃で５時間処理した後、その処理液にそ
れと同量のメタノールを添加し、次いで遠心処理を行な
って蛋白質を分離除去することにより得られる除蛋白液
の一部を用いた。また、対照（試験No.215）として本発
明の配糖体を添加しない前記培地で前記と同様にαグル
コシダーゼ処理し、メタノール添加した後、除蛋白した
液を用いた。

【０１３８】表２ ─────────────────────────────────── 試験 配糖体 配糖体名 ヒスタミン No. No. 生合成量 （nmol/10⁷cells) ─────────────────────────────────── 301 O-α-1 （−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α− 4.6±1.54 Ｄ−グルコピラノシド 302 O-α-2 （−）−エピガロカテキンガレート−４’ 10.6±0.57 −Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド 303 O-α-3 （−）−エピガロカテキンガレート−４’， 10.4±3.26 ４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド 304 O-α-4 ドリオプテリン−４’−Ｏ−α− 11.2±1.56 Ｄ−グルコピラノシド 305 O-α-6 ドリオプテリン−７，４’−ジ−Ｏ−α− 9.4±3.86 Ｄ−グルコピラノシド 306 O-α-7 フィロクマリン−４’−Ｏ−α− 9.5±2.25 Ｄ−グルコピラノシド 307 O-α-9 フィロクマリン−５，４’−ジ−Ｏ−α− 10.8±3.76 Ｄ−グルコピラノシド 308 O-β-1 （−）−エピガロカテキン−７−Ｏ−β− 10.7±3.63 Ｄ−グルコピラノシド 309 O-β-2 （＋）−カテキン−７−Ｏ−β− 7.2±3.22 Ｄ−グルコピラノシド 310 O-β-3 （＋）−カテキン−４’−Ｏ−β− 7.5±3.26 Ｄ−グルコピラノシド 311 O-β-4 （＋）−カテキン−３’，７−ジ−Ｏ−β− 8.2±3.35 Ｄ−グルコピラノシド 312 O-β-5 （＋）−カテキン−３’，５−ジ−Ｏ−β− 6.3±3.89 Ｄ−グルコピラノシド 313 O-β-6 （＋）−カテキン−3',4' −ジ−Ｏ−β− 10.2±3.28 Ｄ−グルコピラノシド 314 O-β-7 （＋）−カテキン−４’，５−ジ−Ｏ−β− 10.7±3.7 Ｄ−グルコピラノシド 315 対照 31.0±1.85 ───────────────────────────────────

【０１３９】表２に示す結果から、本発明のフラバン３
−オール骨格を有するアグリコンの各種配糖体は、Ｐ−
８１５細胞のヒスタミン生合成を、対照と比較して１／
３ないし１／６に阻害していることが確認された。

【０１４０】（実施例４）カラゲニン足浮腫抑制試験（試験No.410〜416 ） 各試験において、下記のようにしてカラゲニン足浮腫抑
制試験を行った。 使用動物：５週令の雄性ｄｄＹ系マウス（体重18〜22
ｇ）。

【０１４１】実験方法：実験は、スリマル（Srimal）ら
のカラゲニン足浮腫抑制試験法(J.Pharmacy and Pharma
cology, 25, 447 (1973) ）に従って行った。１群につ
き５匹のマウスを用いた。表３に示す配糖体を生理食塩
水に20mg／mlの割合で溶かした溶液を、50mg／kg（体
重）の割合で各マウスの腹腔内に投与した。投与30分後
に、各マウスに１％カラゲニン生理食塩液0.05mlを右側
後肢足蹠皮下に注射し、４時間後に頚椎脱臼にて屠殺
し、両側後肢を足関節部で切断して重量を測定した。浮
腫率は正常左後肢足重量に対する炎症後肢足重量から算
出し、下記の式により浮腫抑制率（％）、すなわち、抗
炎症活性（％）を求めた。なお、対照としては生理食塩
液を用いた。 浮腫抑制率（％）＝（１−検体投与浮腫率／対照浮腫
率）×１００ その結果を表３に示した。

【０１４２】表３ ─────────────────────────────────── 試験 配糖体 配糖体名 浮腫抑制率 No. No. （抗炎症活性） （％） ─────────────────────────────────── 401 O-α-1 （−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α− 42.1 Ｄ−グルコピラノシド 402 O-α-2 （−）−エピガロカテキンガレート−４’ 40.8 −Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド 403 O-α-3 （−）−エピガロカテキンガレート−４’， 35.8 ４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド 404 O-α-4 ドリオプテリン−４’−Ｏ−α− 36.7 Ｄ−グルコピラノシド 405 O-α-6 ドリオプテリン−７，４’−ジ−Ｏ−α− 42.4 Ｄ−グルコピラノシド 406 O-α-7 フィロクマリン−４’−Ｏ−α− 39.7 Ｄ−グルコピラノシド 407 O-α-9 フィロクマリン−５，４’−ジ−Ｏ−α− 40.1 Ｄ−グルコピラノシド 408 O-β-1 （−）−エピガロカテキン−７−Ｏ−β− 30.7 Ｄ−グルコピラノシド 409 O-β-2 （＋）−カテキン−７−Ｏ−β− 38.2 Ｄ−グルコピラノシド 410 O-β-3 （＋）−カテキン−４’−Ｏ−β− 40.5 Ｄ−グルコピラノシド 411 O-β-4 （＋）−カテキン−３’，７−ジ−Ｏ−β− 21.2 Ｄ−グルコピラノシド 412 O-β-5 （＋）−カテキン−３’，５−ジ−Ｏ−β− 42.3 Ｄ−グルコピラノシド 413 O-β-6 （＋）−カテキン−３’，４’−ジ−Ｏ−β− 38.2 Ｄ−グルコピラノシド 414 O-β-7 （＋）−カテキン−４’，５−ジ−Ｏ−β− 40.7 Ｄ−グルコピラノシド 415 C-1 （＋）−カテキン−８−Ｃ−β− 43.2 Ｄ−グルコピラノシド 416 C-2 （＋）−カテキン−６−Ｃ−β− 36.5 Ｄ−グルコピラノシド ───────────────────────────────────

【０１４３】表３に示す結果から、本発明のフラバン３
−オール骨格を有するアグリコンの配糖体は優れた抗炎
症活性及び抗アレルギー活性を有することが確認され
た。

【０１４４】（実施例５）本発明による配糖体をラットに経口投与したときの血液
中のアグリコン測定 (1) 本発明による配糖体を１種単独で使用した場合（試
験No.501〜503 ） 使用動物：５週令のＦ３４４系雄ラット（体重 100〜12
0 ｇ）。 表４に示す本発明による配糖体を、ラットに５０μｍｏ
ｌ／ラットの投与量で経口投与した。なお、配糖体は食
塩水に溶かした状態で投与した。投与30分後、、60分
後、120 分後及び180 分後に、ラットの血液 0.2mlづつ
を尾血管から抜取った。その血液を 0.2mlのメタノール
に加えた後、5000ｇ、10分間遠心分離にかけ、血清を得
た。その血清中に含まれる本発明による配糖体の遊離ア
グリコンをＨＰＬＣ法で分析した。ＨＰＬＣ法は、マイ
クロボンダパック^TM（μＢｏｎｄａｐａｋ^TM）（１５０
×３．９ｍｍｉ．ｄ．）（ミリポア社製）カラムを用い
るKitao らの方法に従った(Biosci. Biotech. Bioche
m., 57, 2010-2015 (1993)参照）。その結果を表４に示
す。なお、対照としてアグリコン成分のみからなる
（−）−エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）を投与
した場合の結果も表４に示す。

【０１４５】表４ ─────────────────────────────────── 試験 配糖体 血液中のアグリコン量（ｍｇ／ｍｌ） No. No. 投与前 30分後 60分後 120分後 180分後 ─────────────────────────────────── 501 Ｏ−α−２ ０ 0.12 0.31 0.28 0.27 502 Ｏ−α−３ ０ 0.08 0.24 0.26 0.30 503 ＥＧＣｇ ０ 0.65 0.22 0.08 0.05 ─────────────────────────────────── ＥＧＣｇ：（−）−エピガロカテキンガレート Ｏ−α−２：（−）−エピガロカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ ラノシド Ｏ−α−３：（−）−エピガロカテキンガレート−４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ −グルコピラノシド

【０１４６】表４に示す結果から、フラバン３−オール
骨格を有する遊離アグリコンを投与するより、それを配
糖体にして投与する方が、血液中に長い時間にわたり、
該アグリコンが検出されることが示された。このことに
より、本発明の配糖体を投与すると、ヒスチジン脱炭酸
酵素阻害剤が長時間わたり血液中に存在する、即ち本発
明のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤は持続的に活性を示す
ということが確認された。

【０１４７】(2) 本発明による配糖体を１種単独で使用
した場合と２種以上を混合して使用した場合（試験No.5
04〜518 ） 実験は、上記(1) と同様の方法で行なった。各試験にお
いて、配糖体は表５に示すように、１種単独で、２種又
は３種を組み合わせて投与した。その結果を表５に示
す。

【０１４８】表５ ─────────────────────────────────── 試験 配糖体No. 血液中のアグリコン量（ｍｇ／ｍｌ） No. ０ 30分後 60分後 120分後 240分後 480分後 ─────────────────────────────────── 504 O-α-2 ０ 0.13 0.36 0.25 0.22 ０ 505 O-α-3 ０ 0.08 0.25 0.27 0.29 ０ 506 O-β-1 ０ ０ ０ 0.05 0.16 0.25 507 O-β-2 ０ ０ ０ ０ 0.08 0.36 508 O-β-4 ０ ０ ０ ０ 0.11 0.24 509 C-1 ０ ０ ０ ０ 0.10 0.22 510 C-2 ０ ０ ０ ０ 0.15 0.30 511 O-α-2＋O-β-1 ０ 0.12 0.33 0.35 0.39 0.28 512 O-α-2＋O-β-1＋C-1 ０ 0.13 0.30 0.32 0.46 0.48 513 O-α-3＋O-β-1 ０ 0.05 0.28 0.33 0.43 0.35 514 O-α-2＋O-β-2 ０ 0.15 0.35 0.34 0.40 0.33 515 O-α-1＋O-β-4 ０ 0.10 0.28 0.35 0.38 0.35 516 O-α-1＋O-β-4＋C-2 ０ 0.11 0.35 0.36 0.40 0.45 517 O-α-4＋O-β-4＋C-2 ０ 0.14 0.35 0.38 0.40 0.44 518 O-α-7＋O-β-4＋C-1 ０ 0.14 0.33 0.35 0.38 0.39 ─────────────────────────────────── O-α-1：（−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド O-α-2：（−）−エピガロカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ シド O-α-3：（−）−エピガロカテキンガレート−４’，４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グ ルコピラノシド O-α-4：ドリオプテリン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド O-α-7：フィロクマリン−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド O-β-1：（−）−エピガロカテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド O-β-2：（＋）−カテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド O-β-4：（＋）−カテキン−３’，７−ジ−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド Ｃ−１：（＋）−カテキン−８−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド Ｃ−２：（＋）−カテキン−６−Ｃ−β−Ｄ−グルコピラノシド

【０１４９】（実施例６）毒性試験 使用動物：５周令の雄性Ｃ₃Ｈ系マウス（体重16〜20
ｇ）。 実験方法：本発明による配糖体の代表例として、表６に
示したものについて急性毒性試験を行なった。実験は医
薬品毒性試験研究報告ガイドラインに準じて、単回投与
法で行なった。表６に示した各配糖体を、それぞれ生理
食塩水に20mg／mlの割合で溶解した。次いで、各配糖体
溶液を、体重20ｇあたり0.15ml（ 150mg／kg（体
重））、 0.1ml（ 100mg／kg（体重））及び0.05ml（50
mg／kg（体重））の投与量でそれぞれ５匹のマウスに腹
腔内投与し、７日間観察した。その結果、表６に示す最
大投与量で死亡したマウスはいなかった。

【０１５０】表６ ─────────────────────────────────── 配糖体 配糖体名 最大投与量 No. （mg／kg（体重）） ─────────────────────────────────── O-α-1 （−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α− Ｄ−グルコピラノシド ５０．０ O-α-2 （−）−エピガロカテキンガレート−４’ −Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド １００．０ O-α-3 （−）−エピガロカテキンガレート−４’， ４”−Ｏ−α−Ｄ−ジ−グルコピラノシド １５０．０ ───────────────────────────────────

【０１５１】（製剤例１）注射剤 滅菌した（−）−エピガロカテキン−４’−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシド９００ｇを注射用蒸留水に溶解し、
更に全量を３Ｌとし、１アンプルに３．０ｍｌの割合で
無菌的に封入し、注射剤とした。

【０１５２】（製剤例２）経口用錠剤 （−）−エピガロカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド ２５０ｇ マンニット ２００ｇ バレイショデンプン ４７ｇ ステアリン酸マグネシウム ３ｇ ととを混合し、これにを１０％デンプン糊として
加え粒状化し、これをＮｏ．６０メッシュ（Ｂ．Ｓ．）
のふるいを通し、乾燥させた後、更にＮｏ．１６メッシ
ュ（Ｂ．Ｓ．）のふるいで選別し、この粒子をと混合
した後、打錠機で直径１０ｍｍ、１錠当りの重量が５０
０ｍｇの錠剤とし、経口用錠剤とした。

【０１５３】（製剤例３）座剤 Ｏ．Ｄ．Ｏ．（中鎖脂肪酸トリグリセライド、日清製油
社製）８００ｇに、滅菌した（−）−エピガロカテキン
ガレート−４’，４”−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シド ２００ｇを加え、よく混合した後、ゼラチンソフ
トカプセル皮膜に充填し、１カプセルの有効成分が４０
０ｍｇ含有する座剤カプセルとした。

【０１５４】（製剤例４）経口用錠剤 （−）−エピガロカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド ２５０ｇ （−）−エピカテキン−７−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド ２５０ｇ マンニット ２００ｇ バレイショデンプン ４７ｇ ステアリン酸マグネシウム ３ｇ 、、とを混合し、製剤例２と同様に、を加え
錠剤を製造し、経口用錠剤とした。

【０１５５】（製剤例５）経口用錠剤 （−）−エピカテキンガレート−４’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシド ２５０ｇ （−）−カテキン−４’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシド ２５０ｇ ６−グルコピラノシル−（−）−エピカテキン ２５０ｇ マンニット ２００ｇ バレイショデンプン ４７ｇ ステアリン酸マグネシウム ３ｇ 、、、とを混合し、製剤例２と同様に、を
加えて錠剤を製造し、経口用錠剤とした。

【０１５６】

【発明の効果】本発明のフラバン３−オール骨格を有す
るアグリコンの配糖体を含有してなるヒスチジン脱炭酸
酵素阻害剤は、優れたヒスチジン脱炭酸酵素阻害活性を
示すことから、ヒスタミンが関与する各種炎症疾患、例
えば、胃潰瘍、十二支腸潰瘍などの潰瘍疾患、及び、ア
トピー性皮膚炎、鼻閉塞感を伴うアレルギー性鼻炎など
アレルギー性炎症疾患、気管支ぜん息、じん麻疹、アレ
ルギー性鼻炎などの即時型アレルギー性炎症疾患などの
治療薬、予防薬として用いられる。そして、本発明のヒ
スチジン脱炭酸酵素阻害剤は、作用が緩和で、持続性に
優れる。即ち、一旦投与されると、胃腸内で徐々に分解
され、分解産物である本発明のフラバン３−オール骨格
を有するアグリコンは血液中に徐々に吸収されるので、
結果として血液中に長く存在し得ることになる。また、
フラバン３−オール骨格を有するアグリコンの配糖体
は、化学的に安定であるので、安定化のための特別な工
夫、例えばカプセル化などを必要としない。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１における吸光度の経時変化を示す図で
ある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＣＬ Ａ６１Ｋ 31/70 ＡＣＬ ＡＤＵ ＡＤＵ // Ｃ０７Ｄ 315/00 Ｃ０７Ｄ 315/00 Ｃ０７Ｈ 15/26 Ｃ０７Ｈ 15/26 17/06 17/06 (72)発明者 市川 厚 大阪府高槻市別所本町10番１号608

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 フラバン３−オール骨格を有するアグリ
   コンの配糖体を有効成分として含有するヒスチジン脱炭
   酸酵素阻害剤。
2. 【請求項２】 フラバン３−オール骨格を有するアグリ
   コンの配糖体が、Ｏ−α−配糖体、Ｏ−β−配糖体及び
   Ｃ−配糖体からなる群から選ばれる少なくとも１種を含
   有する、請求項１記載のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤。
3. 【請求項３】 フラバン３−オール骨格を有するアグリ
   コンの配糖体が、グルコース配糖体を含有する、請求項
   １又は２記載のヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤。
4. 【請求項４】 フラバン３−オール骨格を有するアグリ
   コンの配糖体が、糖成分がグルコースであり、アグリコ
   ン成分が（−）−カテキン、（＋）−カテキン、（−）
   −エピカテキン、（＋）−エピカテキン、（−）−エピ
   ガロカテキン、（−）−ガロカテキン又はそれらのガレ
   ート体である配糖体を含有する、請求項１又は２記載の
   ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤。
5. 【請求項５】 ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤が抗炎症剤
   である、請求項１〜４のいずれか一つに記載のヒスチジ
   ン脱炭酸酵素阻害剤。
6. 【請求項６】 ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤が抗アレル
   ギー剤である、請求項１〜４のいずれか一つに記載のヒ
   スチジン脱炭酸酵素阻害剤。
7. 【請求項７】 ヒスチジン脱炭酸酵素阻害剤が抗潰瘍剤
   である、請求項１〜４のいずれか一つに記載のヒスチジ
   ン脱炭酸酵素阻害剤。