JPH10226696A - Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法 - Google Patents
Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法Info
- Publication number
- JPH10226696A JPH10226696A JP3473897A JP3473897A JPH10226696A JP H10226696 A JPH10226696 A JP H10226696A JP 3473897 A JP3473897 A JP 3473897A JP 3473897 A JP3473897 A JP 3473897A JP H10226696 A JPH10226696 A JP H10226696A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- differentiation
- ester derivative
- solution
- inducing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 この発明はＡＭＰアルキルエステル誘導体
の製造方法およびＡＭＰアルキルエステル誘導体を有効
成分とする分化誘導剤を提供する。 【解決手段】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体の
製造方法およびこのＡＭＰアルキルエステル誘導体を有
効成分とする分化誘導剤。
の製造方法およびＡＭＰアルキルエステル誘導体を有効
成分とする分化誘導剤を提供する。 【解決手段】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体の
製造方法およびこのＡＭＰアルキルエステル誘導体を有
効成分とする分化誘導剤。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】この発明はＡＭＰアルキルエ
ステル誘導体の製造方法およびＡＭＰアルキルエステル
誘導体を有効成分とする分化誘導剤に関する。
ステル誘導体の製造方法およびＡＭＰアルキルエステル
誘導体を有効成分とする分化誘導剤に関する。
【０００２】
【従来の技術および発明が解決しようとする課題】ＡＭ
Ｐ(アデノシン一リン酸)がリン酸二つと結合してＡＴＰ
(アデノシン三リン酸)となり、細胞内情報伝達系の一端
を担う蛋白質リン酸化反応の基質となったり、ＡＭＰ自
体が３',５'−環状エステルである、ｃＡＭＰ(cyclic
ＡＭＰ)になり生体内のホルモン作用の仲介に働くこと
が知られていることから、そのＡＭＰアナログを合成し
ようとした。その際、酵母などに外からＡＭＰをあたえ
ても、細胞内に取り込まれないため、長鎖のアルキル基
を結合させることで外から与えても細胞内に取り込まれ
るようなＡＭＰの誘導体の合成を試みた。
Ｐ(アデノシン一リン酸)がリン酸二つと結合してＡＴＰ
(アデノシン三リン酸)となり、細胞内情報伝達系の一端
を担う蛋白質リン酸化反応の基質となったり、ＡＭＰ自
体が３',５'−環状エステルである、ｃＡＭＰ(cyclic
ＡＭＰ)になり生体内のホルモン作用の仲介に働くこと
が知られていることから、そのＡＭＰアナログを合成し
ようとした。その際、酵母などに外からＡＭＰをあたえ
ても、細胞内に取り込まれないため、長鎖のアルキル基
を結合させることで外から与えても細胞内に取り込まれ
るようなＡＭＰの誘導体の合成を試みた。
【０００３】ＡＭＰのリン酸基に疎水性の強い長鎖のア
ルキル基を結合させ、細胞膜透過性を向上させたＡＭＰ
誘導体(ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、ＡＭＰＣ１６)を合
成した。これらのＡＭＰ誘導体について、分化誘導活性
を調べたところ、優れた分化誘導活性を有することが判
明した。本発明はこのような知見に基づいて完成された
ものである。
ルキル基を結合させ、細胞膜透過性を向上させたＡＭＰ
誘導体(ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、ＡＭＰＣ１６)を合
成した。これらのＡＭＰ誘導体について、分化誘導活性
を調べたところ、優れた分化誘導活性を有することが判
明した。本発明はこのような知見に基づいて完成された
ものである。
【０００４】ＡＭＰの誘導体の合成については、ＴＭＰ
(チミジン一リン酸)のリン酸基にグルコースの六位炭素
の水酸基が結合したリン酸２−エステル化合物と長鎖の
ハロゲン化アルキルの求核置換反応を用いてリン酸３−
エステル化合物を合成する反応が知られているが、本発
明の製造方法は１段階で反応が終了するという非常に簡
便なものである。
(チミジン一リン酸)のリン酸基にグルコースの六位炭素
の水酸基が結合したリン酸２−エステル化合物と長鎖の
ハロゲン化アルキルの求核置換反応を用いてリン酸３−
エステル化合物を合成する反応が知られているが、本発
明の製造方法は１段階で反応が終了するという非常に簡
便なものである。
【０００５】当初ＡＭＰ誘導体を合成するためにＤＣＣ
(dicyclohexylcarbodiimido)を縮合剤として用いて、Ａ
ＭＰと直鎖高級アルコール(オクタノール、ドデカノー
ル、ヘキサデカノール)を反応させていた。この方法で
合成を行うとＡＭＰ誘導体も合成されてくるが、同時に
極性の良く似た副生成物も生じることが判明し、合成は
できるが精製に数段階のステップを必要とし手間が掛か
かる。そこでＤＣＣなどの縮合剤を用いずにＡＭＰのリ
ン酸基にアルキル基を結合できる方法を検索し、ハロゲ
ン化アルキルの反応を用いるようになった。この反応の
利点は、極性の良く似た副生成物が生じにくいことであ
る。
(dicyclohexylcarbodiimido)を縮合剤として用いて、Ａ
ＭＰと直鎖高級アルコール(オクタノール、ドデカノー
ル、ヘキサデカノール)を反応させていた。この方法で
合成を行うとＡＭＰ誘導体も合成されてくるが、同時に
極性の良く似た副生成物も生じることが判明し、合成は
できるが精製に数段階のステップを必要とし手間が掛か
かる。そこでＤＣＣなどの縮合剤を用いずにＡＭＰのリ
ン酸基にアルキル基を結合できる方法を検索し、ハロゲ
ン化アルキルの反応を用いるようになった。この反応の
利点は、極性の良く似た副生成物が生じにくいことであ
る。
【０００６】分化誘導活性については、１９８８年に、
腫瘍細胞が前骨髄球の段階で分化が停止した急性前骨髄
球性白血病に対して、オールトランスレチノイン酸が緩
解をもたらしたと報告され(Huangら、Blood，72, 567-5
72(1988))、またビタミンＤ3の生理活性代謝物である１
α,２５−ジヒドロキシコレカルシフェノールがヒト・
リンパ腫培養細胞系において分化誘導作用を有するとの
報告がある(Olssonら、Cancer Res.，43(12pt1),5862-5
867(1983))。さらに、マウス骨髄球性白血病の培養細胞
系を用いて、ゲラニル・ファルネソール(３,７,１１,１
５,１９−ペンタメチル−２,６,１０,１４,１８−エイ
コサペンタエン−１−オール)が分化誘導作用を有する
ことが報告された(石倉ら、Leukemia Res.，8(5),843-8
52(1984))。さらに、ブファリン(Bufalin)がヒト白血病
細胞の培養細胞系であるHL60、U937およびML1において
分化誘導作用を示したことが報告された(Zhangら、Bioc
hem.Biopys.Res.Commun.，178(2),686-693(1991)および
Cancer Res.52(17)，4634-4641(1992))。なおまた、上
記以外にも分化誘導作用を有する化合物として、シトシ
ン・アラビノシド(Ara-C)(Baccaraniら、Br.J.Haemato
l.，42,485-487(1979))、アクラシノマインＡ(Morin
ら、Cancer Res.，44,2807-2812(1991))、インターフェ
ロン−α(森屋ら、臨床血液32,170-172(1991))、五環式
トリテルペノイド化合物(特開平４−５００２０９号(19
92))、植物活性配糖体であるコレチニンＣ(特開平１−
１４９１３３(1992))、ブファジェノリド型分化誘導剤
(特開平５−２０１８６８号(1993))、２６,２７−ジメ
チル−△２２−１α,２５−ジヒドロキシコレカルシフ
ェロール(特開平６−１７９６２２号(1994))、ゲラニル
・ゲラニルアセトン(６,１０,１４,１８−テトラメチル
−５,９,１３,１７−ノナデカテトラエン−２−オン)
(特開平６−１９２０７３号(1994))、ビタミンＤ−２２
−フェニルスルホン誘導体(特開平７−４８３４３号(19
95))などが報告された。しかし、ＡＭＰ誘導体に細胞分
化誘導活性があるとの報告は未だなされていない。
腫瘍細胞が前骨髄球の段階で分化が停止した急性前骨髄
球性白血病に対して、オールトランスレチノイン酸が緩
解をもたらしたと報告され(Huangら、Blood，72, 567-5
72(1988))、またビタミンＤ3の生理活性代謝物である１
α,２５−ジヒドロキシコレカルシフェノールがヒト・
リンパ腫培養細胞系において分化誘導作用を有するとの
報告がある(Olssonら、Cancer Res.，43(12pt1),5862-5
867(1983))。さらに、マウス骨髄球性白血病の培養細胞
系を用いて、ゲラニル・ファルネソール(３,７,１１,１
５,１９−ペンタメチル−２,６,１０,１４,１８−エイ
コサペンタエン−１−オール)が分化誘導作用を有する
ことが報告された(石倉ら、Leukemia Res.，8(5),843-8
52(1984))。さらに、ブファリン(Bufalin)がヒト白血病
細胞の培養細胞系であるHL60、U937およびML1において
分化誘導作用を示したことが報告された(Zhangら、Bioc
hem.Biopys.Res.Commun.，178(2),686-693(1991)および
Cancer Res.52(17)，4634-4641(1992))。なおまた、上
記以外にも分化誘導作用を有する化合物として、シトシ
ン・アラビノシド(Ara-C)(Baccaraniら、Br.J.Haemato
l.，42,485-487(1979))、アクラシノマインＡ(Morin
ら、Cancer Res.，44,2807-2812(1991))、インターフェ
ロン−α(森屋ら、臨床血液32,170-172(1991))、五環式
トリテルペノイド化合物(特開平４−５００２０９号(19
92))、植物活性配糖体であるコレチニンＣ(特開平１−
１４９１３３(1992))、ブファジェノリド型分化誘導剤
(特開平５−２０１８６８号(1993))、２６,２７−ジメ
チル−△２２−１α,２５−ジヒドロキシコレカルシフ
ェロール(特開平６−１７９６２２号(1994))、ゲラニル
・ゲラニルアセトン(６,１０,１４,１８−テトラメチル
−５,９,１３,１７−ノナデカテトラエン−２−オン)
(特開平６−１９２０７３号(1994))、ビタミンＤ−２２
−フェニルスルホン誘導体(特開平７−４８３４３号(19
95))などが報告された。しかし、ＡＭＰ誘導体に細胞分
化誘導活性があるとの報告は未だなされていない。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明の第１の態様は、
式Ｉ：
式Ｉ：
【化３】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体の
製造方法であって、有機溶媒中１−ブロモアルカンとＡ
ＭＰを反応させることを特徴とする方法である。好まし
くは、この方法は(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+の存在下で行われる。
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体の
製造方法であって、有機溶媒中１−ブロモアルカンとＡ
ＭＰを反応させることを特徴とする方法である。好まし
くは、この方法は(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+の存在下で行われる。
【０００８】本発明の第２の態様は、式Ｉ：
【化４】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体を
有効成分とする分化誘導剤であり、好ましくは、Ｒが、
オクチル、ドデシルまたはヘキサデシルである。なお、
本発明のＡＭＰアルキルエステル誘導体には一般に生体
内において実質的に同様の生理活性または薬理活性を発
揮するもの、例えば、本発明の化合物の誘導体および医
薬的に許容される塩、付加塩、水和物などは本発明の技
術的範囲に含まれるものである。
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体を
有効成分とする分化誘導剤であり、好ましくは、Ｒが、
オクチル、ドデシルまたはヘキサデシルである。なお、
本発明のＡＭＰアルキルエステル誘導体には一般に生体
内において実質的に同様の生理活性または薬理活性を発
揮するもの、例えば、本発明の化合物の誘導体および医
薬的に許容される塩、付加塩、水和物などは本発明の技
術的範囲に含まれるものである。
【０００９】
【発明の実施の形態】炭素数４〜２０の直鎖または分枝
状アルキルは、具体的には、ブチル、ペンチル、ヘキシ
ル、ヘプチル、オクチル、デシル、ウンデシル、ドデシ
ル、テトラデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オク
タデシル、エイコシルなどの直鎖またはゲラニル、ファ
ルネシルなどの分枝状のアルキルをいう。好ましくはヘ
キシル、オクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、
ヘキサデシル、オクタデシルであり、より好ましくは、
オクチル、ドデシルまたはヘキサデシルであり、最も好
ましくは、それらの直鎖状のものである。
状アルキルは、具体的には、ブチル、ペンチル、ヘキシ
ル、ヘプチル、オクチル、デシル、ウンデシル、ドデシ
ル、テトラデシル、ヘキサデシル、ヘプタデシル、オク
タデシル、エイコシルなどの直鎖またはゲラニル、ファ
ルネシルなどの分枝状のアルキルをいう。好ましくはヘ
キシル、オクチル、デシル、ドデシル、テトラデシル、
ヘキサデシル、オクタデシルであり、より好ましくは、
オクチル、ドデシルまたはヘキサデシルであり、最も好
ましくは、それらの直鎖状のものである。
【００１０】本発明のＡＭＰアルキルエステル誘導体は
一般にＡＭＰ(アデノシン ５'−モノホスフェート)を
(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+溶液(ＴＢＡ；テトラブチルアンモニウム
ヒドロキシド水溶液)に溶解し、中和、脱水、乾固した
後、有機溶媒中種々のハロゲン化アルキルを反応させて
得られる。
一般にＡＭＰ(アデノシン ５'−モノホスフェート)を
(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+溶液(ＴＢＡ；テトラブチルアンモニウム
ヒドロキシド水溶液)に溶解し、中和、脱水、乾固した
後、有機溶媒中種々のハロゲン化アルキルを反応させて
得られる。
【００１１】有機溶媒の例としては、ジメチルホルムア
ルデヒド、ジメチルアセトアミド、などの極性溶媒また
はアセトニトリルなどの透電率の高い不活性溶媒を挙げ
ることができ、好ましくは、ジメチルアセトアミド、ア
セトニトリルであり、最も好ましくは、ジメチルアセト
アミドである。
ルデヒド、ジメチルアセトアミド、などの極性溶媒また
はアセトニトリルなどの透電率の高い不活性溶媒を挙げ
ることができ、好ましくは、ジメチルアセトアミド、ア
セトニトリルであり、最も好ましくは、ジメチルアセト
アミドである。
【００１２】上記の反応は、ＡＭＰをエチル、プロピ
ル、ブチルなどの低級アルキル第４級アンモニウムヒド
ロキシドの水溶液に溶解し、中和、脱水、乾固してＡＭ
Ｐとテトラ低級アルキルアンモニウム塩を形成させて行
う。
ル、ブチルなどの低級アルキル第４級アンモニウムヒド
ロキシドの水溶液に溶解し、中和、脱水、乾固してＡＭ
Ｐとテトラ低級アルキルアンモニウム塩を形成させて行
う。
【００１３】また、上記の反応は６０℃〜１００℃、好
ましくは、７０℃〜９０℃、最も好ましくは、約８０℃
にて行う。
ましくは、７０℃〜９０℃、最も好ましくは、約８０℃
にて行う。
【００１４】反応時間は２〜１８時間であり、反応時間
が長くなると目的生成物も増加するが副産物も増加して
くる。従って、好ましくは、２〜６時間である。より好
ましくは、約４時間である。
が長くなると目的生成物も増加するが副産物も増加して
くる。従って、好ましくは、２〜６時間である。より好
ましくは、約４時間である。
【００１５】ハロゲン化アルキルのハロゲンとしては、
ふっ素、塩素、臭素およびよう素が含まれる。好ましく
は臭素またはよう素であり、最も好ましくは、臭素であ
る。
ふっ素、塩素、臭素およびよう素が含まれる。好ましく
は臭素またはよう素であり、最も好ましくは、臭素であ
る。
【００１６】例えば、ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２および
ＡＭＰＣ１６はＡＭＰ(アデノシン５'−モノホスフェー
ト)をテトラブチルアンモニウムヒドロキシド水溶液に
溶解し、ジメチルアセトアミド中で１−ブロモオクタン
(Ｃ８)、１−ブロモドデカン(Ｃ１２)、１−ブロモヘキ
サデカン(Ｃ１６)などを反応させて得られる。これらの
化合物の単離精製操作を下記に示す。
ＡＭＰＣ１６はＡＭＰ(アデノシン５'−モノホスフェー
ト)をテトラブチルアンモニウムヒドロキシド水溶液に
溶解し、ジメチルアセトアミド中で１−ブロモオクタン
(Ｃ８)、１−ブロモドデカン(Ｃ１２)、１−ブロモヘキ
サデカン(Ｃ１６)などを反応させて得られる。これらの
化合物の単離精製操作を下記に示す。
【化５】
【００１７】単離精製したＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２及
びＡＭＰＣ１６について種々の機器分析を用い、その構
造決定を行った。始めに1Ｈ、13ＣＮＭＲにより、ＡＭ
Ｐのリン酸基に長鎖のアルキル基がエステル結合したも
のであることが決定された。次に元素分析を行ったとこ
ろ、それぞれのＡＭＰ誘導体について、一水和物の形を
とったときの理論値が非常に実測値と相同性があったた
め先の構造を強く支持するものであると考察された。こ
れらの機器分析により決定されたＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ
１２及びＡＭＰＣ１６についての構造を下記に示す。
びＡＭＰＣ１６について種々の機器分析を用い、その構
造決定を行った。始めに1Ｈ、13ＣＮＭＲにより、ＡＭ
Ｐのリン酸基に長鎖のアルキル基がエステル結合したも
のであることが決定された。次に元素分析を行ったとこ
ろ、それぞれのＡＭＰ誘導体について、一水和物の形を
とったときの理論値が非常に実測値と相同性があったた
め先の構造を強く支持するものであると考察された。こ
れらの機器分析により決定されたＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ
１２及びＡＭＰＣ１６についての構造を下記に示す。
【化６】
【００１８】
実施例１ ＡＭＰ誘導体(ＡＭＰＣ８)の合成 ＡＭＰ(アデノシン ５'−モノホスフェート；８００μm
ol：２７８mg)を(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+溶液(ＴＢＡ；テトラブチ
ルアンモニウム４０％水溶液；１.６mmol：９００μl)
に溶解し、中和した。減圧下に脱水し、デシケーター
中、Ｐ2Ｏ5存在下で乾固した。生じたＡＭＰテトラブチ
ルアンモニウム塩を１−ブロモオクタン(４.０mmol；８
００μｌ)とともに溶媒のジメチルアセトアミド（１０m
l）に溶解し、８０℃で４時間反応させた。反応終了
後、反応液にＣ6Ｈ14／（ＣＨ3）2ＣＯ（１：１、v/v）
の溶液を約６０ml加え、アンモニアでpＨを８に調節
し、−２０℃で一晩放置した。生じた沈澱を遠心分離で
集め、同溶液でさらに２回洗浄することによってジメチ
ルアセトアミドおよび１−ブロモオクタンを可及的に除
去した。沈澱をＣＨＣl3／ＭeＯＨ（９０：１０）の溶
液に溶解し、同溶液で十分に平衡化したシリカゲルカラ
ム（Ｗakogel（登録商標）Ｃ２００）によるクロマトグ
ラフィーに供した。カラムを同溶液１５０ml程度で洗浄
し、次いで、溶媒中のＭeＯＨ濃度をＣＨＣl3／ＭeＯＨ
（８５：１５、８０：２０、７５：２５、７０：３０、
６０：４０）と段階的に上げていき副生成物と目的物を
分離した。ＣＨＣl3／ＭeＯＨ（７０：３０）の画分を
集め、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥した
結果、白色の粉末が得られた。その粉末を５０％ＭeＯ
Ｈに溶解し、その溶液中に陰イオン交換樹脂（Ａmberli
te（登録商標）ＩＲ−１２０）を加えて脱塩した。この
溶液を減圧下に乾燥した結果、白色の粉末としてＡＭＰ
Ｃ８が得られた。ＡＭＰＣ８の収率は１６.５％であっ
た。
ol：２７８mg)を(Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+溶液(ＴＢＡ；テトラブチ
ルアンモニウム４０％水溶液；１.６mmol：９００μl)
に溶解し、中和した。減圧下に脱水し、デシケーター
中、Ｐ2Ｏ5存在下で乾固した。生じたＡＭＰテトラブチ
ルアンモニウム塩を１−ブロモオクタン(４.０mmol；８
００μｌ)とともに溶媒のジメチルアセトアミド（１０m
l）に溶解し、８０℃で４時間反応させた。反応終了
後、反応液にＣ6Ｈ14／（ＣＨ3）2ＣＯ（１：１、v/v）
の溶液を約６０ml加え、アンモニアでpＨを８に調節
し、−２０℃で一晩放置した。生じた沈澱を遠心分離で
集め、同溶液でさらに２回洗浄することによってジメチ
ルアセトアミドおよび１−ブロモオクタンを可及的に除
去した。沈澱をＣＨＣl3／ＭeＯＨ（９０：１０）の溶
液に溶解し、同溶液で十分に平衡化したシリカゲルカラ
ム（Ｗakogel（登録商標）Ｃ２００）によるクロマトグ
ラフィーに供した。カラムを同溶液１５０ml程度で洗浄
し、次いで、溶媒中のＭeＯＨ濃度をＣＨＣl3／ＭeＯＨ
（８５：１５、８０：２０、７５：２５、７０：３０、
６０：４０）と段階的に上げていき副生成物と目的物を
分離した。ＣＨＣl3／ＭeＯＨ（７０：３０）の画分を
集め、ロータリーエバポレーターを用いて減圧乾燥した
結果、白色の粉末が得られた。その粉末を５０％ＭeＯ
Ｈに溶解し、その溶液中に陰イオン交換樹脂（Ａmberli
te（登録商標）ＩＲ−１２０）を加えて脱塩した。この
溶液を減圧下に乾燥した結果、白色の粉末としてＡＭＰ
Ｃ８が得られた。ＡＭＰＣ８の収率は１６.５％であっ
た。
【００１９】 元素分析値（１水和物として） 計算値： Ｃ；４５.２８ Ｈ；６.７０ Ｎ；１４.６７ 測定値： Ｃ；４７.３１ Ｈ；７.６８ Ｎ；１４.０７1 Ｈ ＮＭＲ（DMSO−d6，ppm）：８.３９（s，adenine r
ing ２−Ｈ）；５.９１（d，Ｊ＝５.５，１'−ＣＨ）；
４.５７（t，Ｊ＝５.２，２’−ＣＨ）；４.２３（br，
Ｊ＝４.９，３'−ＣＨ）；４.０３（br，Ｊ＝３.７，
４'−ＣＨ）；３.８７（m，２Ｈ，５'−ＣＨ）；３.６
４（q，２Ｈ，Ｊ＝６.７，ＣＨ2−Ｏ−Ｐ）；１.２１−
１.２４（ＣＨ2）；０.８３（t，３Ｈ，Ｊ＝６.７，Ｃ
Ｈ3）13 Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示す。
ing ２−Ｈ）；５.９１（d，Ｊ＝５.５，１'−ＣＨ）；
４.５７（t，Ｊ＝５.２，２’−ＣＨ）；４.２３（br，
Ｊ＝４.９，３'−ＣＨ）；４.０３（br，Ｊ＝３.７，
４'−ＣＨ）；３.８７（m，２Ｈ，５'−ＣＨ）；３.６
４（q，２Ｈ，Ｊ＝６.７，ＣＨ2−Ｏ−Ｐ）；１.２１−
１.２４（ＣＨ2）；０.８３（t，３Ｈ，Ｊ＝６.７，Ｃ
Ｈ3）13 Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示す。
【００２０】実施例２ ＡＭＰＣ１２の合成 １−ブロモオクタン８００μｌを用いる代わりに、１−
ブロモドデカン１ｍｌ(４.０mmol)を用いて、実施例１
と同様にして行った。ＡＭＰＣ１２の収率は１７.５％
であった。
ブロモドデカン１ｍｌ(４.０mmol)を用いて、実施例１
と同様にして行った。ＡＭＰＣ１２の収率は１７.５％
であった。
【００２１】 元素分析値（１水和物として） 計算値： Ｃ；４９.５３ Ｈ；７.５０ Ｎ；１３.１３ 測定値： Ｃ；５０.３１ Ｈ；７.５１ Ｎ；１１.８９1 Ｈ ＮＭＲ（DMSO−d6，ppm）：８.３８（s，adenine r
ing ２−Ｈ）；５.９２（d，Ｊ＝５.２，１'−ＣＨ）；
４.５７（t，Ｊ＝５.２，２’−ＣＨ）；４.２３（br
t，Ｊ＝４.９，３'−ＣＨ）；４.０３（brq，Ｊ＝３.
７，４'−ＣＨ）；３.８７（m，２Ｈ，５'−ＣＨ）；
３.６５（q，２Ｈ，Ｊ＝６.７，ＣＨ2−Ｏ−Ｐ）；１.
２１−１.２４（ＣＨ2）；０.８５（t，３Ｈ，Ｊ＝６.
７，ＣＨ3）13 Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示す。
ing ２−Ｈ）；５.９２（d，Ｊ＝５.２，１'−ＣＨ）；
４.５７（t，Ｊ＝５.２，２’−ＣＨ）；４.２３（br
t，Ｊ＝４.９，３'−ＣＨ）；４.０３（brq，Ｊ＝３.
７，４'−ＣＨ）；３.８７（m，２Ｈ，５'−ＣＨ）；
３.６５（q，２Ｈ，Ｊ＝６.７，ＣＨ2−Ｏ−Ｐ）；１.
２１−１.２４（ＣＨ2）；０.８５（t，３Ｈ，Ｊ＝６.
７，ＣＨ3）13 Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示す。
【００２２】実施例３ ＡＭＰＣ１６の合成 １−ブロモオクタン８００μｌを用いる代わりに、１−
ブロモヘキサデカン１.２２ｍｌ(４.０mmol)を用いて、
実施例１と同様にして行った。ＡＭＰＣ１６の収率は２
０.７％であった。
ブロモヘキサデカン１.２２ｍｌ(４.０mmol)を用いて、
実施例１と同様にして行った。ＡＭＰＣ１６の収率は２
０.７％であった。
【００２３】 元素分析値（１水和物として） 計算値： Ｃ；５２.９７ Ｈ；８.１５ Ｎ；１１.８８ 測定値： Ｃ；５２.５１ Ｈ；８.５３ Ｎ；１２.２６1 Ｈ ＮＭＲの測定値を図１に示す。13Ｃ ＮＭＲのチャ
ートを図２に示す。13Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示
す。
ートを図２に示す。13Ｃ ＮＭＲの測定値を表１に示
す。
【００２４】
【表１】 ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２およびＡＭＰＣ１６の13Ｃ ＮＭＲ値 位置 ＡＭＰＣ８ ＡＭＰＣ１２ ＡＭＰＣ１６ ２ １５２.２３ １５２.２３ １５２.３１ ４ １５５.７２ １５５.７２ １５５.７８ ５ ＮＤa １１９.００ １１８.７７ ６ ＮＤa １４９.４０ １４９.４５ ８ １３９.０５ １３９.０４ １３９.１０ １' ８７.０１ ８７.０１ ８６.９９ ２' ７３.８１ ７３.７７ ７３.７４ ３' ７０.６６ ７０.６２ ７０.６３ ４' ８３.６７ ８３.５９ ８３.５３ ５' ６４.２０b ６４.３９b ６４.３３b １'' ６４.０５c ６４.１０c ６４.２５c ２''-(n-1)'' ２１−３１ ２１−３１ ２１−３１ ｎ'' １３.４９ １３.５１ １３.６２ ａ：検出せず ｂおよびｃ：帰属は相互交換の可能性あり
【００２５】薬理学的実験 アデノシン一リン酸(ＡＭＰ)のリン酸基に疎水性の強い
長鎖のアルキル基を結合させることで、細胞膜透過性を
向上させたＡＭＰ誘導体(ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、
ＡＭＰＣ１６)について、細胞障害性及び分化誘導活性
を調べた。材料 １.細胞 ヒト骨髄性白血病細胞(ＨＬ−６０) ２.薬剤 ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、ＡＭＰＣ１６ ３.主な試薬及び機器 １)ＲＰＭＩ１６４０培地(ギブコ製) ２)牛胎児血清(ＦＣＳ)(和光純薬製) ３)アラマブルー(岩城硝子製) ４)ニトロブルーテトラゾリウム(ＮＢＴ)(和光純薬製) 5)ホルボール１２−ミリスタート１３−アセタート(Ｔ
ＰＡ)(和光純薬製) ６)ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)(和光純薬製) ７)サイトフロー２３００(Fluorescence Measurement S
ystem)(ミリポア製)
長鎖のアルキル基を結合させることで、細胞膜透過性を
向上させたＡＭＰ誘導体(ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、
ＡＭＰＣ１６)について、細胞障害性及び分化誘導活性
を調べた。材料 １.細胞 ヒト骨髄性白血病細胞(ＨＬ−６０) ２.薬剤 ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１２、ＡＭＰＣ１６ ３.主な試薬及び機器 １)ＲＰＭＩ１６４０培地(ギブコ製) ２)牛胎児血清(ＦＣＳ)(和光純薬製) ３)アラマブルー(岩城硝子製) ４)ニトロブルーテトラゾリウム(ＮＢＴ)(和光純薬製) 5)ホルボール１２−ミリスタート１３−アセタート(Ｔ
ＰＡ)(和光純薬製) ６)ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)(和光純薬製) ７)サイトフロー２３００(Fluorescence Measurement S
ystem)(ミリポア製)
【００２６】測定方法 １.細胞毒性 １)ＨＬ−６０細胞を１０％ＦＣＳを含むＲＰＭＩ１６
４０培地で培養後、９６ウェルマイクロプレートに１×
１０４細胞／ｍｌの濃度で２００μｌずつ播種し、ＣＯ
２インキュベーター(５％ＣＯ２、３７℃)で３日間前培
養した。 ２)ＡＭＰ誘導体は、ＤＭＳＯにて２０ｍｇ／ｍｌの濃
度に溶解し、冷蔵保存していたものをメタノールで希釈
し、１ウェルあたり５μｌ添加した。メタノールのみを
同様に添加したウェルをコントロールとした。 ３)ＣＯ２インキュベーターで３日間培養した。 ４)アラマブルーを１ウェルあたり２０μｌ添加し、Ｃ
Ｏ２インキュベーター内に３時間放置した。 ５)サイトフロー２３００により、励起波長５３０ｎ
ｍ、蛍光波長５９０ｎｍにて蛍光を測定した。コントロ
ールウェルの蛍光強度を１００とした時の薬剤を添加し
たウェルの蛍光強度の比を細胞の生存率(％)とした。
４０培地で培養後、９６ウェルマイクロプレートに１×
１０４細胞／ｍｌの濃度で２００μｌずつ播種し、ＣＯ
２インキュベーター(５％ＣＯ２、３７℃)で３日間前培
養した。 ２)ＡＭＰ誘導体は、ＤＭＳＯにて２０ｍｇ／ｍｌの濃
度に溶解し、冷蔵保存していたものをメタノールで希釈
し、１ウェルあたり５μｌ添加した。メタノールのみを
同様に添加したウェルをコントロールとした。 ３)ＣＯ２インキュベーターで３日間培養した。 ４)アラマブルーを１ウェルあたり２０μｌ添加し、Ｃ
Ｏ２インキュベーター内に３時間放置した。 ５)サイトフロー２３００により、励起波長５３０ｎ
ｍ、蛍光波長５９０ｎｍにて蛍光を測定した。コントロ
ールウェルの蛍光強度を１００とした時の薬剤を添加し
たウェルの蛍光強度の比を細胞の生存率(％)とした。
【００２７】２.分化誘導活性 ＨＬ−６０細胞の分化誘導の主なマーカーとしては、形
態、貧食能、ＮＢＴ還元能、エステラーゼ活性などが知
られている。今回の実験では、これらのうち、形態とＮ
ＢＴ還元能を指標とした。ＮＢＴは、分化した細胞にお
いて、主としてスーパーオキシド産生オキシダーゼの作
用により、ＮＡＤＰＨ由来の水素を受容した難溶性青紫
色のホルマザンとなり、酵素活性の発現した細胞の部位
に沈着し、顕微鏡下で観察が可能となる。なお、今回の
実験では、ＨＬ−６０細胞の分化誘導剤(陽性コントロ
ール)としてＤＭＳＯを用いたが、ＤＭＳＯは、ＨＬ−
６０細胞を顆粒球様細胞へと分化誘導することが知られ
ている。 １)細胞毒性の測定と同じ条件で、ＨＬ−６０細胞を９
６ウェルマイクロプレートで３日間前培養した。 ２)ＡＭＰ誘導体をメタノールで希釈し、１ウェルあた
り５μｌ添加した。陽性コントロールとして、ＤＭＳＯ
を１８０ｍＭの濃度となるように、また、陰性コントロ
ールとしてメタノールを５μｌ添加した。 ３)ＣＯ２インキュベーターで４〜５日培養後、顕微鏡
で形態の変化を観察した。 ４)細胞を懸濁してエッペンドルフチューブに移し、
１，０００ｒｐｍ、２分間の遠心分離を行い、上清を除
去した。ＲＰＭＩ１６４０培地１ｍｌに再懸濁し、遠心
分離後、上清を除去した。この操作を２回繰り返し、細
胞を洗浄した。 ５)１ｍｇ／ｍｌＮＢＴ、０.１μｇ／ｍｌＴＰＡを含む
２０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地０.５ｍｌに細
胞を懸濁し、３７℃で３０分間反応させた。 ６)遠心分離で細胞を回収し、少量のＰＢＳに懸濁した
ものをスライドガラス上で十分乾燥させた。 ７)スライドガラスをメタノールに２〜３分浸して細胞
を固定し、顕微鏡下で青紫色に染まった細胞数を計測し
て、ＮＢＴ還元能とした。
態、貧食能、ＮＢＴ還元能、エステラーゼ活性などが知
られている。今回の実験では、これらのうち、形態とＮ
ＢＴ還元能を指標とした。ＮＢＴは、分化した細胞にお
いて、主としてスーパーオキシド産生オキシダーゼの作
用により、ＮＡＤＰＨ由来の水素を受容した難溶性青紫
色のホルマザンとなり、酵素活性の発現した細胞の部位
に沈着し、顕微鏡下で観察が可能となる。なお、今回の
実験では、ＨＬ−６０細胞の分化誘導剤(陽性コントロ
ール)としてＤＭＳＯを用いたが、ＤＭＳＯは、ＨＬ−
６０細胞を顆粒球様細胞へと分化誘導することが知られ
ている。 １)細胞毒性の測定と同じ条件で、ＨＬ−６０細胞を９
６ウェルマイクロプレートで３日間前培養した。 ２)ＡＭＰ誘導体をメタノールで希釈し、１ウェルあた
り５μｌ添加した。陽性コントロールとして、ＤＭＳＯ
を１８０ｍＭの濃度となるように、また、陰性コントロ
ールとしてメタノールを５μｌ添加した。 ３)ＣＯ２インキュベーターで４〜５日培養後、顕微鏡
で形態の変化を観察した。 ４)細胞を懸濁してエッペンドルフチューブに移し、
１，０００ｒｐｍ、２分間の遠心分離を行い、上清を除
去した。ＲＰＭＩ１６４０培地１ｍｌに再懸濁し、遠心
分離後、上清を除去した。この操作を２回繰り返し、細
胞を洗浄した。 ５)１ｍｇ／ｍｌＮＢＴ、０.１μｇ／ｍｌＴＰＡを含む
２０％ＦＣＳ添加ＲＰＭＩ１６４０培地０.５ｍｌに細
胞を懸濁し、３７℃で３０分間反応させた。 ６)遠心分離で細胞を回収し、少量のＰＢＳに懸濁した
ものをスライドガラス上で十分乾燥させた。 ７)スライドガラスをメタノールに２〜３分浸して細胞
を固定し、顕微鏡下で青紫色に染まった細胞数を計測し
て、ＮＢＴ還元能とした。
【００２８】結果 １.細胞毒性 結果を図３に示した。これらの化合物のＩＣ50(μｇ／
ｍｌ)は、それぞれ、ＡＭＰＣ８：３２０.６、ＡＭＰＣ
１２：１８４.３およびＡＭＰＣ１６：５８.２であっ
た。ＡＭＰ誘導体のＨＬ−６０細胞に対する毒性は低
く、ＡＭＰＣ８は２００μｇ／ｍｌ以下、ＡＭＰＣ１２
は１５０μｇ／ｍｌ以下、ＡＭＰＣ１６は２５μｇ／ｍ
ｌ以下の濃度で１００％の生存率を示した。アルキル基
の長鎖が長いほど毒性が増大する傾向が見られた。
ｍｌ)は、それぞれ、ＡＭＰＣ８：３２０.６、ＡＭＰＣ
１２：１８４.３およびＡＭＰＣ１６：５８.２であっ
た。ＡＭＰ誘導体のＨＬ−６０細胞に対する毒性は低
く、ＡＭＰＣ８は２００μｇ／ｍｌ以下、ＡＭＰＣ１２
は１５０μｇ／ｍｌ以下、ＡＭＰＣ１６は２５μｇ／ｍ
ｌ以下の濃度で１００％の生存率を示した。アルキル基
の長鎖が長いほど毒性が増大する傾向が見られた。
【００２９】２.分化誘導活性 結果を下記の表に示した。ＤＭＳＯを１８０ｍＭ添加し
た陽性コントロールでは、ＮＢＴ還元能陽性細胞数は８
４.５％あった。ＡＭＰＣ８を添加した時のＮＢＴ還元
能陽性細胞数は、薬物濃度５０〜１５０μｇ／ｍｌの範
囲において薬物濃度の上昇に伴って増加し、１５０μｇ
／ｍｌの濃度では９３.５％となり、この付近の濃度に
おいてＡＭＰＣ８が分化誘導活性を持つことが示され
た。ＡＭＰＣ１２では７５〜１５０μｇ／ｍｌの濃度に
おいて４２.５〜８１.１％の細胞が、ＡＭＰＣ１６では
３０〜５０μｇ／ｍｌの濃度において５７.４〜７１.７
％の細胞がＮＢＴ還元活性を有しており、ＡＭＰＣ１
２、ＡＭＰＣ１６もＨＬ−６０細胞に対する分化誘導活
性を持つことが示された。
た陽性コントロールでは、ＮＢＴ還元能陽性細胞数は８
４.５％あった。ＡＭＰＣ８を添加した時のＮＢＴ還元
能陽性細胞数は、薬物濃度５０〜１５０μｇ／ｍｌの範
囲において薬物濃度の上昇に伴って増加し、１５０μｇ
／ｍｌの濃度では９３.５％となり、この付近の濃度に
おいてＡＭＰＣ８が分化誘導活性を持つことが示され
た。ＡＭＰＣ１２では７５〜１５０μｇ／ｍｌの濃度に
おいて４２.５〜８１.１％の細胞が、ＡＭＰＣ１６では
３０〜５０μｇ／ｍｌの濃度において５７.４〜７１.７
％の細胞がＮＢＴ還元活性を有しており、ＡＭＰＣ１
２、ＡＭＰＣ１６もＨＬ−６０細胞に対する分化誘導活
性を持つことが示された。
【００３０】
【表２】 ＡＭＰ誘導体のＨＬ−６０細胞に対する顆粒球様細胞への分化誘導活性 添加物 濃度 ＮＢＴ還元能陽性細胞数＊ ＥＤ50 (μｇ／ｍｌ) (％) (μｇ／ｍｌ) なし − １０.９±２.６９ ＤＭＳＯ １.１４×１０４ ８４.５±３.８１ ＡＭＰＣ８ ５０ ２７.１±４.９３ ８４.７ ７５ ３４.５±２.７９ １００ ６７.９±１.４０ １２５ ８１.９±２.９９ １５０ ９３.５±０.５９ ＡＭＰＣ１２ ５０ １４.０±１.４５ ７８.１ ７５ ４２.５±６.１０ １００ ８１.１±２.８０ １２５ ７７.２±５.０３ １５０ ６１.０±９.１５ ＡＭＰＣ１６ ２５ ２７.８±３.６３ ２８.８ ３０ ５７.４±５.１７ ４０ ７１.７±４.３６ ５０ ６４.３±４.６４ ＊；平均±ＳＤ
【００３１】ＡＭＰ誘導体がＨＬ−６０細胞に対して分
化誘導活性を示す薬物濃度は、アルキル基の長鎖が短い
誘導体、即ち、ＨＬ−６０細胞に対する毒性が低いもの
ほど高く、活性を示す濃度の範囲も広くなる傾向にあっ
た。また、ＡＭＰ誘導体のＥＤ50値を比較したところ、
ＡＭＰＣ８：８４.７μｇ／ｍｌ、ＡＭＰＣ１２：７８.
１μｇ／ｍｌおよびＡＭＰＣ１６：２８.８μｇ／ｍｌ
であった。ＡＭＰ誘導体の添加によりＮＢＴ還元活性を
示した細胞の形態は、陽性コントロール同様、未処理の
細胞に比較して変化が認められた。
化誘導活性を示す薬物濃度は、アルキル基の長鎖が短い
誘導体、即ち、ＨＬ−６０細胞に対する毒性が低いもの
ほど高く、活性を示す濃度の範囲も広くなる傾向にあっ
た。また、ＡＭＰ誘導体のＥＤ50値を比較したところ、
ＡＭＰＣ８：８４.７μｇ／ｍｌ、ＡＭＰＣ１２：７８.
１μｇ／ｍｌおよびＡＭＰＣ１６：２８.８μｇ／ｍｌ
であった。ＡＭＰ誘導体の添加によりＮＢＴ還元活性を
示した細胞の形態は、陽性コントロール同様、未処理の
細胞に比較して変化が認められた。
【００３２】以上のように、ＡＭＰＣ８、ＡＭＰＣ１
２、ＡＭＰＣ１６は、ヒト骨髄性白血病細胞ＨＬ−６０
を顆粒球様細胞へと分化誘導する活性を有することが判
明した。更に、ＡＭＰ及びアデノシンについても同様の
方法で分化誘導活性の有無を検討した。その結果、ＡＭ
Ｐでは、５０μｇ／ｍｌの濃度で最大値となり２５.８
％の細胞が、アデノシンでは、２００μｇ／ｍｌの濃度
で最大値となり１６.７％の細胞がＮＢＴ還元活性を示
した。しかし、その値は、ＡＭＰ誘導体に比較してかな
り低いものであったことから、ＡＭＰのリン酸基に長鎖
のアルキル基を導入することで、ＨＬ−６０細胞に対す
る分化誘導活性が付与されるものと考えられる。
２、ＡＭＰＣ１６は、ヒト骨髄性白血病細胞ＨＬ−６０
を顆粒球様細胞へと分化誘導する活性を有することが判
明した。更に、ＡＭＰ及びアデノシンについても同様の
方法で分化誘導活性の有無を検討した。その結果、ＡＭ
Ｐでは、５０μｇ／ｍｌの濃度で最大値となり２５.８
％の細胞が、アデノシンでは、２００μｇ／ｍｌの濃度
で最大値となり１６.７％の細胞がＮＢＴ還元活性を示
した。しかし、その値は、ＡＭＰ誘導体に比較してかな
り低いものであったことから、ＡＭＰのリン酸基に長鎖
のアルキル基を導入することで、ＨＬ−６０細胞に対す
る分化誘導活性が付与されるものと考えられる。
【図１】 ＡＭＰＣ１６の1Ｈ ＮＭＲの帰属を示す図で
ある。
ある。
【図２】 ＡＭＰＣ１６の13Ｃ ＮＭＲのチャートであ
る。
る。
【図３】 ＨＬ−６０細胞の生存率に対するＡＭＰ誘導
体の効果を示す折れ線グラフである。
体の効果を示す折れ線グラフである。
Claims (4)
- 【請求項１】 式Ｉ： 【化１】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体の
製造方法であって、有機溶媒中１−ブロモアルカンとＡ
ＭＰを反応させることを特徴とする方法。 - 【請求項２】 (Ｃ4Ｈ9)4Ｎ+の存在下で行われる、請求
項１記載の方法。 - 【請求項３】 式Ｉ： 【化２】 ［式中、Ｒは炭素数４〜２０の直鎖または分枝状アルキ
ルである］で示されるＡＭＰアルキルエステル誘導体を
有効成分とする分化誘導剤。 - 【請求項４】 Ｒが、オクチル、ドデシルまたはヘキサ
デシルである、請求項３記載の分化誘導剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03473897A JP4118357B2 (ja) | 1997-02-19 | 1997-02-19 | Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03473897A JP4118357B2 (ja) | 1997-02-19 | 1997-02-19 | Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10226696A true JPH10226696A (ja) | 1998-08-25 |
| JP4118357B2 JP4118357B2 (ja) | 2008-07-16 |
Family
ID=12422670
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03473897A Expired - Lifetime JP4118357B2 (ja) | 1997-02-19 | 1997-02-19 | Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4118357B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001078749A1 (fr) * | 2000-04-17 | 2001-10-25 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | Nouveaux agonistes de calcium |
-
1997
- 1997-02-19 JP JP03473897A patent/JP4118357B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001078749A1 (fr) * | 2000-04-17 | 2001-10-25 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | Nouveaux agonistes de calcium |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4118357B2 (ja) | 2008-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2955190B1 (en) | Chemical compounds | |
| FR2539132A1 (fr) | Derives o-phosphonylmethyliques isomeres de diols vicinaux enantiomeres et racemiques et procede de leur preparation | |
| PT92034B (pt) | Processo para a preparacao de conjugados de sacaridos inibidores de tumores e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| EP0313874B1 (en) | Disulfur analogs of LL-E33288 antitumor agents | |
| EP0641352B1 (en) | 4-ethoxy 5-fluoro 2'deoxyuridine | |
| FI91966C (fi) | Menetelmä farmakologisesti arvokkaiden alkyylifosfonoseriinien valmistamiseksi | |
| JP4118357B2 (ja) | Ａｍｐアルキルエステル誘導体の製造方法 | |
| EP3907230A1 (en) | Novel benzimidazole derivatives, preparation method thereof and use thereof as anti-cancer agent comprising the same | |
| JP7224688B2 (ja) | 環状ジヌクレオチドプロドラッグ分子、その製造方法及び使用 | |
| CN114075255B (zh) | 一种糖基供体及其在制备糖苷中的用途 | |
| JP3609411B2 (ja) | 不斉リン酸ジエステル及びその塩の製造方法 | |
| US6812365B2 (en) | Disulfone reagents and methods of preparing and using same | |
| JP3073309B2 (ja) | シアル酸結合５−デアザフラビン系化合物 | |
| JP2665527B2 (ja) | ２’−デオキシ−２’−メチリデンピリミジンヌクレオチド化合物 | |
| JPH0692424B2 (ja) | リン酸エステルの製造法 | |
| FI65261C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av farmakologiskt anvaendbart dinatriumsalt av n-(fosfonoacetyl)-l-asparaginsyra | |
| EP0433678A1 (en) | Alkoxymethylidene epipodophyllotoxin glucosides | |
| US4939156A (en) | New tetramethyl-cis-diaza-bicyclo{4.2.0}octane-3,5-dione derivatives having differentiation-inducing activity and antiviral activity | |
| JP3035313B2 (ja) | ベナノマイシンａ４▲′′′▼‐ｏ‐硫酸エステルの塩類およびそれらの製造法 | |
| JP3096277B2 (ja) | ５，６−ｏ−イソプロピリデン−ｌ−アスコルビン酸の製造法 | |
| WO2011070152A2 (fr) | Nouveaux composés antiviraux, analogues de la 3-deazauridine aryles en position c3 | |
| JP2002275187A (ja) | ホスファチジルコリンの製造方法 | |
| JPH09268197A (ja) | ヌクレオチドダイマー化合物及びそれを含有する医薬組成物 | |
| CN109651451A (zh) | 阿扎胞苷衍生物的制备方法及其应用 | |
| FR2642428A1 (fr) | Derives glycosyl phospholipidiques de nucleosides et leur application en tant que medicaments |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070710 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20070712 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070803 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20080408 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080423 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110502 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120502 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120502 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130502 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130502 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140502 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |