JPH10108648A - 抗う蝕抗歯周病滞留性食品添加物並びに口腔組成物 - Google Patents
抗う蝕抗歯周病滞留性食品添加物並びに口腔組成物Info
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- JPH10108648A JPH10108648A JP8279869A JP27986996A JPH10108648A JP H10108648 A JPH10108648 A JP H10108648A JP 8279869 A JP8279869 A JP 8279869A JP 27986996 A JP27986996 A JP 27986996A JP H10108648 A JPH10108648 A JP H10108648A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】動物及び人体に対する安全性が確認されている
抗う蝕かつ抗歯周病作用のある鶏卵成分、植物葉抽出エ
キス及びＭＴＡなどの天然物由来食品添加物等を混合し
て使用することで単独で使用した時では望めない安全で
強力な効果を有する口腔及び食品組成剤型を創出する。 【構成】う蝕及び歯周病の起因菌であるＳ．ｍｕｔａｎ
ｓの成長を阻害する物質、あるいはそのＧＴａｓｅ活性
を阻害する物質であるＳ．ｍｕｔａｎｓに対する抗体、
ＭＴＡ、植物葉ポリフェノールを２種類以上混合配合
し、口腔内滞留時間を延長する増粘賦形剤をコートする
ことから成る口腔組成物、あるいは食品添加物の組成
物。
抗う蝕かつ抗歯周病作用のある鶏卵成分、植物葉抽出エ
キス及びＭＴＡなどの天然物由来食品添加物等を混合し
て使用することで単独で使用した時では望めない安全で
強力な効果を有する口腔及び食品組成剤型を創出する。 【構成】う蝕及び歯周病の起因菌であるＳ．ｍｕｔａｎ
ｓの成長を阻害する物質、あるいはそのＧＴａｓｅ活性
を阻害する物質であるＳ．ｍｕｔａｎｓに対する抗体、
ＭＴＡ、植物葉ポリフェノールを２種類以上混合配合
し、口腔内滞留時間を延長する増粘賦形剤をコートする
ことから成る口腔組成物、あるいは食品添加物の組成
物。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、数種類の抗う触抗歯周
性物質を混合して使用することにより単独での使用では
望めなかった高い効果を有し、増粘、安定、ゲル化、賦
型剤を組み合わすことで口腔内における徐放性使用に耐
え得る口腔衛生用あるいは食品添加用組成物を提案する
ものである。
性物質を混合して使用することにより単独での使用では
望めなかった高い効果を有し、増粘、安定、ゲル化、賦
型剤を組み合わすことで口腔内における徐放性使用に耐
え得る口腔衛生用あるいは食品添加用組成物を提案する
ものである。
【０００２】
【従来の技術】う蝕発症のメカニズムは、多くの場合口
腔微生物のひとつＳ．ｍｕｔａｎｓの菌体外酵素である
グルコシルトランスフェラーゼ（以下ＧＴａｓｅと呼
ぶ）が、ショ糖から粘着性で水に不溶性のブドウ糖重合
体であるグルカン（以下不溶性グルカンと呼ぶ）及び水
溶性のグルカン（以下水溶性グルカンと呼ぶ）を形成
し、ミュータンス菌を始めとする他の口腔内細菌（乳酸
菌やグラム陰性菌）をグルカンの中に引き込んで歯面に
歯垢を形成し、これらの細菌が種々の糖を分解し乳酸、
コハク酸、クエン酸、リンゴ酸等の有機酸を生成し、こ
れら有機酸が歯垢中に持続的に滞留する結果エナメル質
を侵し、う蝕を誘発するといわれる。したがって、う蝕
を防止ためＳ．ｍｕｔａｎｓの増殖を抑えるかＧＴａｓ
ｅを特異的に阻害する物質は有効なう蝕抑制法となる。
一方、う蝕予防の有効成分として従来からフッ化物、リ
ン酸化合物、抗酵素剤、抗生物質、殺菌剤および中和剤
そのほかにデキストラナーゼのごとき酵素類などが知ら
れ、これらが口腔用組成物成分として配合されてきた
が、抗生物質や殺菌剤は無差別に口腔内及び腸内の細菌
を殺してしまうため、正常な細菌叢（以下フローラと呼
ぶ）が変化して正常なフローラの持つ病原性菌を排除す
る力が弱まり、生体にとって望ましくない状況をもたら
すことが心配される。我々は腸内細菌生産物質であるア
デノシン乃至その誘導体が特異的にＳ．ｍｕｔａｎｓお
よび歯周症原因菌であるバクテロイデス・ジンジバリス
に対して強く抑制作用を示し、腸内細菌等に対しては経
口的に実質的に無毒性であることを示している（特許昭
６１ー１７１４２３号公報）。その他に、例えばＳ．ｍ
ｕｔａｎｓに対する免疫活性を有する抗体を用いたう蝕
予防法（特開昭６０−３８３２７号公報、特開昭６１−
１１２０２８号公報、特開平１−１９０６５３号公報、
特開平１−２２６８２８号公報）が知られており、これ
らはいずれも実用的であるがその効果は充分満足できる
ものでなく、更なる改良が求められている。また、安全
性の高い植物抽出物を用いたう蝕予防剤として、ニクズ
ク等の抽出物（特開昭５９−１３４７２９号公報、特開
昭６０−５４３１２号公報）や柿の葉、ケンポナシの果
実の抽出物（特開平２−７８６０９号公報）を用いた口
腔内組成物、あるいはハコベ（特開平３−１７６４１８
号公報）やマイカイ／ハマナス（特開平６−２７９３０
３号公報）のほか、水生植物由来のフラノン、ι−カラ
ギーナン、ファーセレナン（特開平５−１３９９７９号
公報）などが検討され、その代表的なう蝕防止剤である
ｐ．ｐ．は広く菓子類や機能性食品に応用されている
（特開昭６４−９０１２４号公報、特開平３−８６８１
４号公報）。これらのう蝕防止剤は、練歯磨、粉歯磨、
液状歯磨等の歯磨類、マウスウォッシュ、歯肉マッサー
ジクリーム、うがい用錠剤、トローチ、チューインガム
および食品類など口腔内に適応される種々の媒体に調整
され、使用されることを目的としている。特に食品に添
加できる安全性の高い天然物抽出物は近年機能性食品の
分野に於いて広く使用され効果を挙げ、さらに、有効成
分の安定性や口腔内での滞留性の問題点を改善した製品
加工工程が推奨され、かつ使用性のあるより効果的な口
腔組成物あるいは食品組成物の作製が望まれている。
腔微生物のひとつＳ．ｍｕｔａｎｓの菌体外酵素である
グルコシルトランスフェラーゼ（以下ＧＴａｓｅと呼
ぶ）が、ショ糖から粘着性で水に不溶性のブドウ糖重合
体であるグルカン（以下不溶性グルカンと呼ぶ）及び水
溶性のグルカン（以下水溶性グルカンと呼ぶ）を形成
し、ミュータンス菌を始めとする他の口腔内細菌（乳酸
菌やグラム陰性菌）をグルカンの中に引き込んで歯面に
歯垢を形成し、これらの細菌が種々の糖を分解し乳酸、
コハク酸、クエン酸、リンゴ酸等の有機酸を生成し、こ
れら有機酸が歯垢中に持続的に滞留する結果エナメル質
を侵し、う蝕を誘発するといわれる。したがって、う蝕
を防止ためＳ．ｍｕｔａｎｓの増殖を抑えるかＧＴａｓ
ｅを特異的に阻害する物質は有効なう蝕抑制法となる。
一方、う蝕予防の有効成分として従来からフッ化物、リ
ン酸化合物、抗酵素剤、抗生物質、殺菌剤および中和剤
そのほかにデキストラナーゼのごとき酵素類などが知ら
れ、これらが口腔用組成物成分として配合されてきた
が、抗生物質や殺菌剤は無差別に口腔内及び腸内の細菌
を殺してしまうため、正常な細菌叢（以下フローラと呼
ぶ）が変化して正常なフローラの持つ病原性菌を排除す
る力が弱まり、生体にとって望ましくない状況をもたら
すことが心配される。我々は腸内細菌生産物質であるア
デノシン乃至その誘導体が特異的にＳ．ｍｕｔａｎｓお
よび歯周症原因菌であるバクテロイデス・ジンジバリス
に対して強く抑制作用を示し、腸内細菌等に対しては経
口的に実質的に無毒性であることを示している（特許昭
６１ー１７１４２３号公報）。その他に、例えばＳ．ｍ
ｕｔａｎｓに対する免疫活性を有する抗体を用いたう蝕
予防法（特開昭６０−３８３２７号公報、特開昭６１−
１１２０２８号公報、特開平１−１９０６５３号公報、
特開平１−２２６８２８号公報）が知られており、これ
らはいずれも実用的であるがその効果は充分満足できる
ものでなく、更なる改良が求められている。また、安全
性の高い植物抽出物を用いたう蝕予防剤として、ニクズ
ク等の抽出物（特開昭５９−１３４７２９号公報、特開
昭６０−５４３１２号公報）や柿の葉、ケンポナシの果
実の抽出物（特開平２−７８６０９号公報）を用いた口
腔内組成物、あるいはハコベ（特開平３−１７６４１８
号公報）やマイカイ／ハマナス（特開平６−２７９３０
３号公報）のほか、水生植物由来のフラノン、ι−カラ
ギーナン、ファーセレナン（特開平５−１３９９７９号
公報）などが検討され、その代表的なう蝕防止剤である
ｐ．ｐ．は広く菓子類や機能性食品に応用されている
（特開昭６４−９０１２４号公報、特開平３−８６８１
４号公報）。これらのう蝕防止剤は、練歯磨、粉歯磨、
液状歯磨等の歯磨類、マウスウォッシュ、歯肉マッサー
ジクリーム、うがい用錠剤、トローチ、チューインガム
および食品類など口腔内に適応される種々の媒体に調整
され、使用されることを目的としている。特に食品に添
加できる安全性の高い天然物抽出物は近年機能性食品の
分野に於いて広く使用され効果を挙げ、さらに、有効成
分の安定性や口腔内での滞留性の問題点を改善した製品
加工工程が推奨され、かつ使用性のあるより効果的な口
腔組成物あるいは食品組成物の作製が望まれている。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、動物及び人
体に対する安全性が確認されているｐ．ｐ．及びＭＴＡ
などの天然物由来食品添加物あるいは、例えば、Ｓ．ｍ
ｕｔａｎｓに対する特異的抗体を混合して使用すること
で単独で使用した時では望めない安全で強力な効果を有
する口腔及び食品組成剤型を創出することを目的とす
る。
体に対する安全性が確認されているｐ．ｐ．及びＭＴＡ
などの天然物由来食品添加物あるいは、例えば、Ｓ．ｍ
ｕｔａｎｓに対する特異的抗体を混合して使用すること
で単独で使用した時では望めない安全で強力な効果を有
する口腔及び食品組成剤型を創出することを目的とす
る。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明は、抗う蝕抗歯周
症効果を有する３種類の組成物を２種類あるいは３種類
同時に含有させた組成物を色々と組み合わせ配合し検討
した結果、各々の作用機作を補完することができ、単独
での抗う蝕抗歯周症効果をはるかに上回り、更に、抗う
蝕抗歯周症有効成分を増粘、安定、ゲル化、賦型剤、特
に、水解デンプン、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギ
ン酸ナトリウム、キトサン、カルボキシメチルセルロー
ス乃至ヒドロキシエチルセルロースによりコートするこ
とで、安定で口腔内滞留時間の長い使用性の高い剤型を
工夫した結果生まれたものである。本発明の口腔組成物
乃至食品組成物には基本的には上記有効成を含むもので
あり、単独で、投与、塗布等して用いられる他、「練歯
磨、粉歯磨、液状歯磨等の歯磨類、マウスウォッシュ、
歯肉マッサージクリーム、うがい用錠剤、トローチ、チ
ューインガム」等の他の食品類に添加して用いられる場
合もある。尚、動物に於いても上記と同様であり、単独
で、投与、塗布して用いられる他、ペットフード、その
他飼料等に添加して用いられる他、咀嚼玩具等、動物の
習慣によって口腔に於いて用いられる物に当該組成物を
含浸、塗布して用いるものであってもよいが、これらに
限定される物ではない。従って、当該組成物は同時に健
康増進作用を有する腸内細菌エキス、あるいは、腸内細
菌培養発酵乾燥粉末、良吸収性カルシウム粉末、複合ビ
タミン類などとも配合することができる。又、本願発明
に於ける動物とは、犬、猫、うさぎ、リス等ペットとし
て飼育されている動物が例示されるが、本願発明の適用
を要する動物であれば特に限定されるものではない。
症効果を有する３種類の組成物を２種類あるいは３種類
同時に含有させた組成物を色々と組み合わせ配合し検討
した結果、各々の作用機作を補完することができ、単独
での抗う蝕抗歯周症効果をはるかに上回り、更に、抗う
蝕抗歯周症有効成分を増粘、安定、ゲル化、賦型剤、特
に、水解デンプン、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギ
ン酸ナトリウム、キトサン、カルボキシメチルセルロー
ス乃至ヒドロキシエチルセルロースによりコートするこ
とで、安定で口腔内滞留時間の長い使用性の高い剤型を
工夫した結果生まれたものである。本発明の口腔組成物
乃至食品組成物には基本的には上記有効成を含むもので
あり、単独で、投与、塗布等して用いられる他、「練歯
磨、粉歯磨、液状歯磨等の歯磨類、マウスウォッシュ、
歯肉マッサージクリーム、うがい用錠剤、トローチ、チ
ューインガム」等の他の食品類に添加して用いられる場
合もある。尚、動物に於いても上記と同様であり、単独
で、投与、塗布して用いられる他、ペットフード、その
他飼料等に添加して用いられる他、咀嚼玩具等、動物の
習慣によって口腔に於いて用いられる物に当該組成物を
含浸、塗布して用いるものであってもよいが、これらに
限定される物ではない。従って、当該組成物は同時に健
康増進作用を有する腸内細菌エキス、あるいは、腸内細
菌培養発酵乾燥粉末、良吸収性カルシウム粉末、複合ビ
タミン類などとも配合することができる。又、本願発明
に於ける動物とは、犬、猫、うさぎ、リス等ペットとし
て飼育されている動物が例示されるが、本願発明の適用
を要する動物であれば特に限定されるものではない。
【０００５】
【発明の効果】すなわち、本発明によれば、う蝕乃至歯
周症予防有効成分の作用点は必ずしも特定されていない
が、例えば、Ｓ．ｍｕｔａｎｓの増殖阻害ＧＴａｓ
ｅの作用阻害などがあげられる。しかし、作用点及び作
用機作の異なる作用成分を適当な割合で配合すると、単
独の成分よりもＳ．ｍｕｔａｎｓの増殖阻害効果の顕著
増大等その効果が大きくなる。すなわち相乗効果がもた
らされるだけでなく、口腔内清掃有効成分によるう蝕乃
至歯周症予防においての高い滞留性および安全性が確保
でき、従来の口腔組成物では達し得なかった高い効果を
得ることができる。また、同時に健康増進作用を有する
腸内細菌エキス、あるいは、腸内細菌培養発酵乾燥粉
末、良吸収性カルシウム粉末、複合ビタミン類なども同
時に配合することにより、持続的消化管への溶解放出が
達成され、これら有効成分の腸管からの生体吸収性を長
期にわたり持続すなわち各成分の血中有効レベルを長期
維持することも可能となり、従ってコスト面での経済効
果及びその成分の持つ栄養的付加効果も当然食品へ同時
に備えさせることができる。次に実施例をあげ、本発明
を具体的に説明するが、本発明はこれらによって何等限
定される物ではない。
周症予防有効成分の作用点は必ずしも特定されていない
が、例えば、Ｓ．ｍｕｔａｎｓの増殖阻害ＧＴａｓ
ｅの作用阻害などがあげられる。しかし、作用点及び作
用機作の異なる作用成分を適当な割合で配合すると、単
独の成分よりもＳ．ｍｕｔａｎｓの増殖阻害効果の顕著
増大等その効果が大きくなる。すなわち相乗効果がもた
らされるだけでなく、口腔内清掃有効成分によるう蝕乃
至歯周症予防においての高い滞留性および安全性が確保
でき、従来の口腔組成物では達し得なかった高い効果を
得ることができる。また、同時に健康増進作用を有する
腸内細菌エキス、あるいは、腸内細菌培養発酵乾燥粉
末、良吸収性カルシウム粉末、複合ビタミン類なども同
時に配合することにより、持続的消化管への溶解放出が
達成され、これら有効成分の腸管からの生体吸収性を長
期にわたり持続すなわち各成分の血中有効レベルを長期
維持することも可能となり、従ってコスト面での経済効
果及びその成分の持つ栄養的付加効果も当然食品へ同時
に備えさせることができる。次に実施例をあげ、本発明
を具体的に説明するが、本発明はこれらによって何等限
定される物ではない。
【０００６】
実験例１（虫歯菌Ｓ．ｍｕｔａｎｓの増殖抑制効果） （方法）ＢＨＩ培養液にＭＴＡ（アドバンス社製）、
Ｓ．ｍｕｔａｎｓに対する特異的ニワトリ卵抗体（以下
ＩｇＹと呼ぶ）（ＳｕｎＧＹ ＳＭＢ、太陽化学社
製）、ｐ．ｐ．（サンフェノン１００Ｓ、太陽化学社
製）をそれぞれ１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌとな
るように単独添加した検体、ＭＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．
のうち２種類がそれぞれ１００μｇ／ｍｌとなるように
同時添加した検体、さらに３種類がすべて１００μｇ／
ｍｌとなるように添加した検体と無添加ＢＨＩ培養液を
各１ｍｌ用意し、ＢＨＩ培養液で前培養したＳ．ｍｕｔ
ａｎｓ Ｋ１Ｒを０.１ｍｌ添加して３時間後及び６時
間後における増殖抑制効果を培養液の濁度を基準に６６
０ｎｍにおける吸光度を測定比較した。 （結果）図１に示すように、単独あるいは混合添加され
た３種類の添加物の中でｐ．ｐ．が１００μｇ／ｍｌ添
加された場合においてわずかに、そしてＭＴＡが１００
μｇ／ｍｌ添加された場合において強くＳ．ｍｕｔａｎ
ｓの増殖抑制が認められ、その効果はＭＴＡとｐ．ｐ．
の混合添加によりより大きな抑制傾向を示した。 実験例２（Ｓ．ｍｕｔａｎｓが生成する不溶性グルカン
及び水溶性グルカンに対する抑制効果） （方法）Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒを５％サッカロース
を含むＢＨＩ培地で培養すると不溶性グルカン及び水溶
性グルカンが生成する。これをＦｒｅｅｄｍａｎらの方
法（Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．２３：９０７−９０
９，１９７９）を一部改変して分離しそれぞれに対する
ＭＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．の単独あるいは混合添加抑制
効果を検討した。５％サッカロース／ＢＨＩ培養液にＭ
ＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．をそれぞれ１０μｇ／ｍｌ、１
００μｇ／ｍｌとなるように単独添加した検体、ＭＴ
Ａ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．のうち２種類がそれぞれ１００μ
ｇ／ｍｌとなるように同時添加した検体、さらに３種類
がすべて１００μｇ／ｍｌとなるように添加した検体と
無添加ＢＨＩ培養液を各１ｍｌ用意し、ＢＨＩ培養液で
前培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒを０.１ｍｌ添加
して２４時間培養した。３５００ｒｐｍ、１５分間の遠
心により得られた上清と沈澱物を２回洗浄した洗浄上清
を合わせ、最終濃度５０％エタノールになるように調整
し一昼夜放置した。これを遠心して得られた沈澱をさら
に同濃度のエタノールで２回洗浄して得られた沈澱物を
菌体外水溶性グルカン（以下水溶性グルカンと呼ぶ）と
した。また、培養後の遠心で得られた沈澱物は２回の洗
浄の後、１規定の水酸化ナトリウムで３７℃、１時間処
理した後遠心で得られた沈澱を１規定の塩酸で中和し、
最終濃度５０％エタノールになるように調整し一昼夜放
置した。これを遠心して得られた沈澱をさらに同濃度の
エタノールで２回洗浄して得られた沈澱物を菌体結合性
アルカリ可溶性グルカン（以下不溶性グルカンと呼ぶ）
とした。これら２種類のグルカンをフェノール・硫酸法
にて発色させ４９０ｎｍにおける吸光度を測定比較し
た。培養開始時のＳ．ｍｕｔａｎｓを含まないでＭＴ
Ａ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．を含む検体についても同様の処置
をし、陰性対照としてフェノール・硫酸法にて発色させ
４９０ｎｍにおける吸光度を測定しそれぞれの値から引
き算した。吸光度が大きいほどグルカンの生成量が多い
ことを示す。 （結果）図２に示すように、水溶性グルカンの生成に対
する各種添加物の阻害効果は、１０μｇ／ｍｌの場合添
加物の種類による差はほとんど認められないが、１００
μｇ／ｍｌの場合ＭＴＡ＞ｐ．ｐ．＞ＩｇＹの順に認め
られ、２種類以上の混合添加群では単独添加群よりもそ
の阻害効果は増強された。また、図３に示すように、不
溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害効果も単
独添加の場合わずかながら認められるが、２種類の混合
添加群でさらに大きな抑制効果が認められ、３種類の混
合添加群では明らかな阻害増強効果が認められた。 実験例３（試験管内における徐放性を示す試験） （方法）実施例１に示す組成物を口腔内組成物として
０.１〜５０ｍｇ／ｍｌ（ＭＴＡとして０.０１〜５ｍｇ
／ｍｌ）、ＭＴＡを０.１〜０.５ｍｇ／ｍｌそれぞれと
無添加５％サッカロース／ＢＨＩ培養液を各３ｍｌ用意
し、ＢＨＩ培養液で前培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１
Ｒを０.１ｍｌ添加して傾斜角３０度、３７℃で一夜培
養した。培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒは試験管壁
に付着するグルカンを形成するので、培養後、培養液を
傾斜して３ｍｌの蒸留水で３回洗浄した後、同量の蒸留
水中で超音波破砕装置を用いて懸濁させ５５０ｎｍにお
ける濁度を分光光度計で測定した。 （結果）図４に示すように、検体を加えない対照では濁
度１.６０８で、ＭＴＡ単独添加の場合、０.１ｍｇ／ｍ
ｌ添加群で濁度０.４１２、０.５ｍｇ／ｍｌ添加群で濁
度０.２４６であった。口腔内組成物の場合、０.１ｍｇ
／ｍｌ（ＭＴＡとして０.０１ｍｇ／ｍｌ）添加群で濁
度１.６１５１とＭＴＡそのもののグルカン生成阻害効
果は認められなかった。１.０ｍｇ／ｍｌ（ＭＴＡとし
て０.１ｍｇ／ｍｌ）添加群は濁度０.０５２、５.０ｍ
ｇ／ｍｌ（ＭＴＡとして０.５ｍｇ／ｍｌ）添加群は濁
度０.０２７であった。以上のことから同じ量のＭＴＡ
を含有していても、口腔内組成物のほうがＭＴＡ単独物
よりも効果的に付着性グルカンの生成を阻害することが
判明した。 実験例４（ラットを用いた動物実験） （方法）雄、３週齢ＳＤラットを１週間ペニシリン入り
飲料水（４０００単位／ｍｌ）と普通飼料（Ｆ２）を与
え、口腔内細菌が存在しないことを培養検査により確認
後、Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒ（１０6ＣＦＵ）を５日
間連続接種し、う蝕誘発飼料（ダイエット２０００）と
自動給水により飼育した。Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒの
定着を培養検査により確認後、う蝕誘発飼料に検体を以
下の分量加え、各群２匹ずつで飼育を継続した。 ０群：う蝕誘発飼料のみ １群：０.１５％ＭＴＡ添加う蝕誘発飼料 ２群：１.５％口腔内組成物添加う蝕誘発飼料（ＭＴＡ
としては０.１５％） 結果の判定：検体投与開始２５日目にエーテル麻酔下で
放血致死後、頭部を切断して常法にそって骨格標本を作
製した。ムレキシド染色後、実体顕微鏡下で上顎および
下顎のう蝕の程度を下記の基準で判定し得点合計により
比較した。 ０点：う蝕のないもの １点：判然としないもの及びエナメル質のう蝕 ２点：ゾウゲ質あるいは歯髄に達するう蝕 ３点：残根及び喪失歯 （結果）図５に示すように、う蝕誘発飼料のみ与えた群
（０群）のラットの上顎及び下顎の得点合計は２２点及
び２４点であった。０.１５％ＭＴＡ添加う蝕誘発飼料
を与えた群（１群）のラットの上顎及び下顎の得点合が
２１点及び２４点であったのに比較して、１.５％口腔
組成物添加う蝕誘発飼料（ＭＴＡとしては０.１５％）
を与えた群（２群）のラットの上顎及び下顎の得点合が
１２点及び２１点であった。口腔組成物投与のほうがＭ
ＴＡ単独投与よりも効果的にう蝕形成を抑制した。 実験例５（イヌを用いた動物実験） （方法）雄雌、４〜７歳ジャーマン・シェパード６匹の
犬歯、前臼歯及び後臼歯に付着した歯石をスクラッピン
グ法にて剥離し、歯垢染色液にて染め出し除去の確認を
行った。実施例１の検体を１日２回食餌に混合して２ヶ
月間連続して与え、検体を与えなかった５〜７歳雌ジャ
ーマン・シェパード３匹ともども歯垢染色液にて染め出
し左右上顎及び下顎の犬歯、前臼歯及び後臼歯に付着し
た歯石を下記の基準で判定し得点合計により比較した。 ０点：歯垢の沈着のないもの １点：歯面の１／２未満に歯垢の沈着のあるもの ２点：歯面の１／２以上に歯垢の沈着のあるもの （結果）図５に示すように、検体を与えなかった３匹の
平均スコアは５.６７点、検体を与えた６匹の平均スコ
アは３.６７点であった。口腔組成物投与群のほうが無
処置群よりも効果的に歯垢の沈着を抑制した。
Ｓ．ｍｕｔａｎｓに対する特異的ニワトリ卵抗体（以下
ＩｇＹと呼ぶ）（ＳｕｎＧＹ ＳＭＢ、太陽化学社
製）、ｐ．ｐ．（サンフェノン１００Ｓ、太陽化学社
製）をそれぞれ１０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌとな
るように単独添加した検体、ＭＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．
のうち２種類がそれぞれ１００μｇ／ｍｌとなるように
同時添加した検体、さらに３種類がすべて１００μｇ／
ｍｌとなるように添加した検体と無添加ＢＨＩ培養液を
各１ｍｌ用意し、ＢＨＩ培養液で前培養したＳ．ｍｕｔ
ａｎｓ Ｋ１Ｒを０.１ｍｌ添加して３時間後及び６時
間後における増殖抑制効果を培養液の濁度を基準に６６
０ｎｍにおける吸光度を測定比較した。 （結果）図１に示すように、単独あるいは混合添加され
た３種類の添加物の中でｐ．ｐ．が１００μｇ／ｍｌ添
加された場合においてわずかに、そしてＭＴＡが１００
μｇ／ｍｌ添加された場合において強くＳ．ｍｕｔａｎ
ｓの増殖抑制が認められ、その効果はＭＴＡとｐ．ｐ．
の混合添加によりより大きな抑制傾向を示した。 実験例２（Ｓ．ｍｕｔａｎｓが生成する不溶性グルカン
及び水溶性グルカンに対する抑制効果） （方法）Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒを５％サッカロース
を含むＢＨＩ培地で培養すると不溶性グルカン及び水溶
性グルカンが生成する。これをＦｒｅｅｄｍａｎらの方
法（Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．２３：９０７−９０
９，１９７９）を一部改変して分離しそれぞれに対する
ＭＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．の単独あるいは混合添加抑制
効果を検討した。５％サッカロース／ＢＨＩ培養液にＭ
ＴＡ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．をそれぞれ１０μｇ／ｍｌ、１
００μｇ／ｍｌとなるように単独添加した検体、ＭＴ
Ａ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．のうち２種類がそれぞれ１００μ
ｇ／ｍｌとなるように同時添加した検体、さらに３種類
がすべて１００μｇ／ｍｌとなるように添加した検体と
無添加ＢＨＩ培養液を各１ｍｌ用意し、ＢＨＩ培養液で
前培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒを０.１ｍｌ添加
して２４時間培養した。３５００ｒｐｍ、１５分間の遠
心により得られた上清と沈澱物を２回洗浄した洗浄上清
を合わせ、最終濃度５０％エタノールになるように調整
し一昼夜放置した。これを遠心して得られた沈澱をさら
に同濃度のエタノールで２回洗浄して得られた沈澱物を
菌体外水溶性グルカン（以下水溶性グルカンと呼ぶ）と
した。また、培養後の遠心で得られた沈澱物は２回の洗
浄の後、１規定の水酸化ナトリウムで３７℃、１時間処
理した後遠心で得られた沈澱を１規定の塩酸で中和し、
最終濃度５０％エタノールになるように調整し一昼夜放
置した。これを遠心して得られた沈澱をさらに同濃度の
エタノールで２回洗浄して得られた沈澱物を菌体結合性
アルカリ可溶性グルカン（以下不溶性グルカンと呼ぶ）
とした。これら２種類のグルカンをフェノール・硫酸法
にて発色させ４９０ｎｍにおける吸光度を測定比較し
た。培養開始時のＳ．ｍｕｔａｎｓを含まないでＭＴ
Ａ、ＩｇＹ、ｐ．ｐ．を含む検体についても同様の処置
をし、陰性対照としてフェノール・硫酸法にて発色させ
４９０ｎｍにおける吸光度を測定しそれぞれの値から引
き算した。吸光度が大きいほどグルカンの生成量が多い
ことを示す。 （結果）図２に示すように、水溶性グルカンの生成に対
する各種添加物の阻害効果は、１０μｇ／ｍｌの場合添
加物の種類による差はほとんど認められないが、１００
μｇ／ｍｌの場合ＭＴＡ＞ｐ．ｐ．＞ＩｇＹの順に認め
られ、２種類以上の混合添加群では単独添加群よりもそ
の阻害効果は増強された。また、図３に示すように、不
溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害効果も単
独添加の場合わずかながら認められるが、２種類の混合
添加群でさらに大きな抑制効果が認められ、３種類の混
合添加群では明らかな阻害増強効果が認められた。 実験例３（試験管内における徐放性を示す試験） （方法）実施例１に示す組成物を口腔内組成物として
０.１〜５０ｍｇ／ｍｌ（ＭＴＡとして０.０１〜５ｍｇ
／ｍｌ）、ＭＴＡを０.１〜０.５ｍｇ／ｍｌそれぞれと
無添加５％サッカロース／ＢＨＩ培養液を各３ｍｌ用意
し、ＢＨＩ培養液で前培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１
Ｒを０.１ｍｌ添加して傾斜角３０度、３７℃で一夜培
養した。培養したＳ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒは試験管壁
に付着するグルカンを形成するので、培養後、培養液を
傾斜して３ｍｌの蒸留水で３回洗浄した後、同量の蒸留
水中で超音波破砕装置を用いて懸濁させ５５０ｎｍにお
ける濁度を分光光度計で測定した。 （結果）図４に示すように、検体を加えない対照では濁
度１.６０８で、ＭＴＡ単独添加の場合、０.１ｍｇ／ｍ
ｌ添加群で濁度０.４１２、０.５ｍｇ／ｍｌ添加群で濁
度０.２４６であった。口腔内組成物の場合、０.１ｍｇ
／ｍｌ（ＭＴＡとして０.０１ｍｇ／ｍｌ）添加群で濁
度１.６１５１とＭＴＡそのもののグルカン生成阻害効
果は認められなかった。１.０ｍｇ／ｍｌ（ＭＴＡとし
て０.１ｍｇ／ｍｌ）添加群は濁度０.０５２、５.０ｍ
ｇ／ｍｌ（ＭＴＡとして０.５ｍｇ／ｍｌ）添加群は濁
度０.０２７であった。以上のことから同じ量のＭＴＡ
を含有していても、口腔内組成物のほうがＭＴＡ単独物
よりも効果的に付着性グルカンの生成を阻害することが
判明した。 実験例４（ラットを用いた動物実験） （方法）雄、３週齢ＳＤラットを１週間ペニシリン入り
飲料水（４０００単位／ｍｌ）と普通飼料（Ｆ２）を与
え、口腔内細菌が存在しないことを培養検査により確認
後、Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒ（１０6ＣＦＵ）を５日
間連続接種し、う蝕誘発飼料（ダイエット２０００）と
自動給水により飼育した。Ｓ．ｍｕｔａｎｓ Ｋ１Ｒの
定着を培養検査により確認後、う蝕誘発飼料に検体を以
下の分量加え、各群２匹ずつで飼育を継続した。 ０群：う蝕誘発飼料のみ １群：０.１５％ＭＴＡ添加う蝕誘発飼料 ２群：１.５％口腔内組成物添加う蝕誘発飼料（ＭＴＡ
としては０.１５％） 結果の判定：検体投与開始２５日目にエーテル麻酔下で
放血致死後、頭部を切断して常法にそって骨格標本を作
製した。ムレキシド染色後、実体顕微鏡下で上顎および
下顎のう蝕の程度を下記の基準で判定し得点合計により
比較した。 ０点：う蝕のないもの １点：判然としないもの及びエナメル質のう蝕 ２点：ゾウゲ質あるいは歯髄に達するう蝕 ３点：残根及び喪失歯 （結果）図５に示すように、う蝕誘発飼料のみ与えた群
（０群）のラットの上顎及び下顎の得点合計は２２点及
び２４点であった。０.１５％ＭＴＡ添加う蝕誘発飼料
を与えた群（１群）のラットの上顎及び下顎の得点合が
２１点及び２４点であったのに比較して、１.５％口腔
組成物添加う蝕誘発飼料（ＭＴＡとしては０.１５％）
を与えた群（２群）のラットの上顎及び下顎の得点合が
１２点及び２１点であった。口腔組成物投与のほうがＭ
ＴＡ単独投与よりも効果的にう蝕形成を抑制した。 実験例５（イヌを用いた動物実験） （方法）雄雌、４〜７歳ジャーマン・シェパード６匹の
犬歯、前臼歯及び後臼歯に付着した歯石をスクラッピン
グ法にて剥離し、歯垢染色液にて染め出し除去の確認を
行った。実施例１の検体を１日２回食餌に混合して２ヶ
月間連続して与え、検体を与えなかった５〜７歳雌ジャ
ーマン・シェパード３匹ともども歯垢染色液にて染め出
し左右上顎及び下顎の犬歯、前臼歯及び後臼歯に付着し
た歯石を下記の基準で判定し得点合計により比較した。 ０点：歯垢の沈着のないもの １点：歯面の１／２未満に歯垢の沈着のあるもの ２点：歯面の１／２以上に歯垢の沈着のあるもの （結果）図５に示すように、検体を与えなかった３匹の
平均スコアは５.６７点、検体を与えた６匹の平均スコ
アは３.６７点であった。口腔組成物投与群のほうが無
処置群よりも効果的に歯垢の沈着を抑制した。
【０００７】実施例１ 凍結乾燥組成物 通常の方法により、以下に示す処方によって凍結乾燥組
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 水溶性でんぷん・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.２ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.００５〜０.１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％ 実施例２ 凍結乾燥組成物 通常の方法により、以下に示す処方によって凍結乾燥組
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 カルボキシメチルセルロース・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.１〜２.０ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.０５〜１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％ 実施例３ 凍結乾燥組成物 通常の方法により、以下に示す処方によって凍結乾燥組
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 ヒドロキシエチルセルロース・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.２ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.０５〜１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 水溶性でんぷん・・・・・・・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.２ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.００５〜０.１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％ 実施例２ 凍結乾燥組成物 通常の方法により、以下に示す処方によって凍結乾燥組
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 カルボキシメチルセルロース・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.１〜２.０ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.０５〜１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％ 実施例３ 凍結乾燥組成物 通常の方法により、以下に示す処方によって凍結乾燥組
成物を得る。なお、数値は重量部を示す。 ヒドロキシエチルセルロース・・・・・・・・・・・・・１〜５０ ポリアクリル酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.２ アルギン酸ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・０.０５〜１ ＭＴＡ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜５ 腸内細菌菌体エキス・・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜３０ 腸内細菌培養液乾燥末・・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜１０ 複合ビタミンミックス・・・・・・・・・・・・・・・・２０〜３０ グルコンカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・３〜１０ マイクロカルシウム・・・・・・・・・・・・・・・・・５〜１０ 緑葉抽出ポリフェノール・・・・・・・・・・・・・・・０.０１〜０.１ 虫歯菌卵黄抗体・・・・・・・・・・・・・・・・・・・０.３〜０.０５ コーンスターチ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・残部 ─────────────────────────────────── １００重量％
【図１】実験例１の試験管内におけるＳ．ｍｕｔａｎｓ
の増殖をＭＴＡが阻害する効果を図示する。
の増殖をＭＴＡが阻害する効果を図示する。
【図２】実験例２の試験管内におけるＳ．ｍｕｔａｎｓ
による水溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害
効果を図示する。
による水溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害
効果を図示する。
【図３】実験例２の試験管内におけるＳ．ｍｕｔａｎｓ
による不溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害
効果を図示する。
による不溶性グルカンの生成に対する各種添加物の阻害
効果を図示する。
【図４】実験例３の試験管内におけるＳ．ｍｕｔａｎｓ
による不溶性グルカン生成をＭＴＡおよびＭＴＡを含む
口腔内組成物が阻害する効果を図示する。
による不溶性グルカン生成をＭＴＡおよびＭＴＡを含む
口腔内組成物が阻害する効果を図示する。
【図５】実験例４の動物実験におけるラットのう蝕形成
をＭＴＡおよびＭＴＡを含む口腔内組成物が抑制する効
果を図示する。
をＭＴＡおよびＭＴＡを含む口腔内組成物が抑制する効
果を図示する。
【図６】実験例５の動物実験におけるイヌの歯垢形成を
ＭＴＡを含む口腔内組成物が抑制する効果を図示する。
ＭＴＡを含む口腔内組成物が抑制する効果を図示する。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ２３Ｌ 1/304 Ａ２３Ｌ 1/304 Ａ６１Ｋ 7/16 Ａ６１Ｋ 7/16 31/35 31/35
Claims (7)
- 【請求項１】ストレプトコッカス・ミュータンス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｔａｎｓ 以下Ｓ．ｍｕ
ｔａｎｓを呼ぶ）に対する抗体と植物葉ポリフェノール
（以下ｐ．ｐ．と呼ぶ）及び５’−デオキシ−５’−メ
チルチオアデノシン（ビタミンＬ２、以下ＭＴＡと呼
ぶ）のうち２種又は３種と口腔内滞留性増粘賦型剤を同
時に含有するヒト及び動物用抗う蝕、抗歯周病作用及び
養毛作用を有する口腔組成物ならびに食品添加物組成
物。 - 【請求項２】Ｓ．ｍｕｔａｎｓに対する抗体が、ニワト
リ卵抗体、ウズラ卵抗体、アヒル卵抗体、ヒツジ抗体、
ウマ抗体の中からひとつあるいは複数からなるもので、
０．０１〜２．００％（ｗ／ｗ）を含有する請求項１に
記載の組成物。 - 【請求項３】ｐ．ｐ．を、０．０１〜２．００％（ｗ／
ｗ）含有する請求項１に記載の組成物。 - 【請求項４】ＭＴＡを０．０１〜５．００％（ｗ／ｗ）
含有する請求項１に記載の組成物。 - 【請求項５】ビタミン類、腸内細菌エキス類、カルシウ
ム粉末などのひとつあるいは複数が適量添加された請求
項１に記載の組成物。 - 【請求項６】特に、増粘賦型剤が、水解デンプン、ポリ
アクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、カルボ
キシメチルセルロース及びヒドロキシエチルセルロース
等を含むことを特徴とする請求項１に記載の組成物。 - 【請求項７】固形ブロック、顆粒型、あるいはシロップ
液状のいずれかの形状を有する請求項１に記載の組成
物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8279869A JPH10108648A (ja) | 1996-10-02 | 1996-10-02 | 抗う蝕抗歯周病滞留性食品添加物並びに口腔組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8279869A JPH10108648A (ja) | 1996-10-02 | 1996-10-02 | 抗う蝕抗歯周病滞留性食品添加物並びに口腔組成物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH10108648A true JPH10108648A (ja) | 1998-04-28 |
Family
ID=17617086
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8279869A Pending JPH10108648A (ja) | 1996-10-02 | 1996-10-02 | 抗う蝕抗歯周病滞留性食品添加物並びに口腔組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH10108648A (ja) |
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-
1996
- 1996-10-02 JP JP8279869A patent/JPH10108648A/ja active Pending
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