JPH09506881A - 新規なピリダジノ［４′，５′：３，４］ピロロ［２，１−ａ］イソキノリン及び医薬製剤を調製するためのその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、下記式を有する新規な［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリン及び酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩及びこれらの化合物を含む医薬製剤に関する。 （式中、ＸはＯ、Ｓ又はＮＨＯであり、Ｒ₁、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は明細書でのように定義される。）

Description

【発明の詳細な説明】 新規なピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリン 及び医薬製剤を調製するためのその使用 ドイツ特許出願第35 00 941.1号及び同第35-25-048-8号から、強心作用的に活 性な９−アミノピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリンは既 知である。欧州特許出願第252-299(A)号から、これらの化合物は心臓及び神経保 護作用があり、更に中枢神経系の組織への血液循環及び酸素供給を促進すること が既知である。 本発明は、下記式Ｉを有する新規なピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1 −a］イソキノリン又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる 塩に関する。 これらの新規な化合物は、有益な治療上有効な性質を有する。心臓保護剤、脳保 護剤（特に、脳卒中を起こした患者又は脳卒中を起こす危険な状態にある患者を 治療するための）及び慢性炎症過程（例えば、気管支喘息及び関節炎）の治療剤 として用いられる。これらの化合物は、また、抗増殖作用のある薬剤並びに潰瘍 性大腸炎及びクローン病の治療剤として用いられる。 式Ｉにおいて、 ＸはＯ、Ｓ又はＮＨＯを表す； Ｒ₁は下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を任 意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜１０個又は２〜１０個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は不 飽和アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭素 原子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、炭 素原子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル１又は２個、フェ ノキシ、フェニル１又は２個（このフェニル環又はフェノキシはハロゲン、ＣＦ₃ 、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭素原子１〜２個を有するＮＨ−アルキ ル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ₂、炭素原子２〜３個 を有するＮ−アシル、−ＯＣＨ₂Ｏ、アルキルスルホニルアミノ、フェノキシ又 はベンジルオキシで一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニル、窒素 を含有し、更にヘテロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有していてもよ い５又は６員複素環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていてもよい） で置換されてもよい； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅は同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-4アルキルを表す； Ｒ₇及びＲ₈は同一か又は異なってもよく、ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ；又は Ｃ_1-4アルキルチオを表す；及び Ｒ₆及びＲ₉は同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す；又は 置換基Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉の隣接する２つの置換基は一緒に−Ｏ−(ＣＨ₂)_{1ま たは2} −Ｏ−を形成し、他の２つの置換基は上で定義した通りである。なお、上 で定義した式ＩのＸＲ₁がＳＣＨ₃を表す化合物を除く。これらの化合物は、類似 の化合物を製造するための出発物質として既知である（ドイツ特許出願第35 00 941号）。 特に、式Ｉにおいて下記の化合物について述べなければならない。 Ｘが上で定義した通りである； Ｒ₁が下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を任 意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜５個又は２〜５個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は不飽和 アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭素原子 １〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、炭素原 子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル、フェニル（このフェ ニル環はハロゲン、Ｃ_1-2アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭素原子１〜２個を有す るＮＨ−アルキル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ₂、炭 素原子２〜３個を有するＮ−アシル又は(Ｃ₁又はＣ₂)アルキルスルホニルアミノ で一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニル、窒素を含有し、更にヘ テロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有していてもよい５又は６員複素 環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていてもよい）で置換されてもよ い； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅が同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-4アルキルを表す； Ｒ₇及びＲ₈が同一か又は異なってもよく、水素；Ｃ_1-4アルコキシ；又はＣ_1-4ア ルキルチオを表す； Ｒ₆及びＲ₉が同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す。 特に、式（Ｉ）において下記の化合物について述べなければならない。 Ｒ₁がＣ_3-7シクロアルキル、チエニル又は１又は２個の無置換フェニル又は置換 基が請求の範囲１又は２でのように定義される置換フェニルで置換される直鎖又 は分枝鎖Ｃ_1-4アルキルであり、特に Ｒ₁が(Ｃ_1-4)アルキルシクロヘキシル、好ましくは−ＣＨ₂−Ｃ₆Ｈ₁₁である、又 は Ｒ₁が(Ｃ_1-4)アルキルフェニル（このフェニル基は無置換であるか又はＦ、Ｃｌ 、ＣＦ₃、メチル、エチル、メトキシ又はエトキシで一又は二置換される）であ る。 特に、式（Ｉ）のＲ₁が下記の基の１つである化合物について述べなければな らない。 特に、Ｒ₁が下記の基の１つである化合物について述べなければならない。 また、式（Ｉ）のＲ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表し、Ｒ₇及びＲ₈がＣ_{1 -4} アルコキシを表すか又はＲ₇及びＲ₈が一緒に−ＯＣＨ₂Ｏ−又は−ＯＣＨ₂ＣＨ₂ Ｏ−を表す化合物、特にＲ₇及びＲ₈がメトキシを表す化合物について述べなけ ればならない。 特に、式（Ｉ）のＸがＯ、Ｓ又はＮＨＯを示し、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及び Ｒ₉が水素であり、Ｒ₇及びＲ₈がＣ_1-4アルコキシを表すか又はＲ₇及びＲ₈が一緒 に−ＯＣＨ₂Ｏ−又は−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−を表し、Ｒ₁が −(ＣＨ₂)_1または2ＣＨ(Ｃ₆Ｈ₅)₂(Ｒ₁₃はＣＦ₃、Ｃ(ＣＨ₃)₃又は−ＯＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₅ であり、ｙは１又は２である。)を表す化合物又は酸もしくは複合体形成剤によ るその生理的に許容しうる塩、特にＲ₁が （Ｒ₁₃及びｙは上で定義した通りである。）を表す化合物及び／又はＲ₇及びＲ₈ がメトキシを表す化合物及び／又はＲ₁が下記の意味の１つを有する化合物、 特にＲ₁が下記の意味の１つを有する化合物、 好ましくはＲ₁が下記の意味の１つを有する化合物について述べなければならな い。 また、一般式Ｉの Ｒ₁が直鎖又は分枝鎖Ｃ_1-5アルキル；メトキシＣ_1-4アルキル；シクロプロピル ；シクロペンチル；シクロヘキシル；シクロプロピルメチル；シクロヘキシルメ チル；フェニルエチル（このフェニル環はメトキシ、ＣＦ₃又はハロゲンで任意 に一又は二置換されていてもよい。）;プロパルギル；（フラン−２−イル）メ チル；チエニルメチル；２−ヒドロキシエチル；（ピリジン−４−イル）エチル ；ベンジル；3,3−ジフェニルプロピル；（チエン−３−イル）エチル；４−フ ェニルブチルを表す； Ｒ₇及びＲ₈が相互に独立して水素；メチル；メトキシ；ヒドロキシ；又はメチル チオを表す；及び Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表す； 化合物が好ましい。 式Ｉの化合物は塩基であり、無機又は有機酸及び塩及び複合体形成剤により常 法で所望の生理的に許容しうる付加物（塩）に変換される。 塩形成に適切な酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ 化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、カプロン酸、吉草 酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、酒石酸、ク エン酸、リンゴ酸、安息香酸、パラオキシ安息香酸、フタル酸、ケイ皮酸、サリ チル酸、アスコルビン酸、メタンスルホン酸等が挙げられる。 好ましい式Ｉの化合物は、 Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表し、Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表す化合物 、及び／又は Ｒ₁が−(ＣＨ₂)_0-3−Ａ（Ａはシクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、Ｆ 、Ｃｌ、ＣＨ₃、ＣＦ₃、ＯＣＨ₃又はＯＣ₂Ｈ₅で一又は二置換されるフェニル、 である。）を表す化合物である。 これらの新規な化合物は、それ自体既知の方法で調製される。 式ＩのＸがＮＨＯを表す新規な化合物は、下記一般式ＩＩ （式中、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は上で定義した通りである。） を有する化合物を下記一般式ＩＩＩ Ｈ₂Ｎ−ＯＲ₁ （ＩＩＩ） （式中、Ｒ₁は上で定義した通りである。）を有する化合物と反応させることに より得られる。 一般式ＩＩの出発化合物を高沸点不活性溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド 、ジメチルアセトアミド、クロロベンゼン又はヘキサメチルリン酸トリアミドに 溶解し、反応が終わるまで一般式ＩＩＩのアミン成分と還流する。反応時間は約 １〜１５時間であり、使用される出発成分に左右される。 反応性ヒドロキシアミンの場合には、アルコール又はテトラヒドロフランも溶 媒として用いられ、ある種の環境下では反応をオートクレーブで行うことが有利 である。 使用されるヒドロキシルアミンが液体でありかつ十分に高沸点である場合には 、反応は過剰量のアミン中溶媒を追加せずに（例えば、ｏ−ベンジルヒドロキシ ルアミンの場合）任意の窒素雰囲気下で行われる。 ある場合には、反応中に溶媒として作用する反応成分を使用することも可能で ある。 一般式ＩのＸがＳ又はＯを表す生成物は、下記一般式ＩＶ （式中、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は上で定義した通りであり、Ｚ は酸素又はイオウを表す。）を有する化合物を下記一般式Ｖ Ｒ₁−Ｙ （Ｖ） （式中、Ｒ₁は上で定義した通りであり、Ｙはアニオン脱離基、例えば、Ｃｌ、 Ｂｒ、Ｉ、メタンスルホン酸基、トリフルオロメタンスルホン酸基、ｐ−トルエ ンスルホン酸基、ｐ−ニトロベンゼンスルホン酸基又はｐ−ブロモベンゼンスル ホン酸基を表す。）を有するアルキル化剤と反応させることにより得られる。し かしながら、アルキル化剤は、カルボカチオンを転移することができる他の試薬 、例えば、メーヤワイン塩、例えば、トリエチルオキソニウム−テトラフルオロ ホウ酸塩、−リン酸塩又は−ヘキサクロロアンチモン酸塩からなることもできる 。 一般式ＩＶの出発化合物を、一般式Ｖのアルキル化剤と不活性溶媒、ジメチル アセトアミド、ヘキサメチルリン酸トリアミド、クロロベンゼン又はアセトン中 で反応させる。反応は、通常、室温、しばしば還流温度で行われ、アルキル化剤 の反応性に左右される。反応時間は、約１〜２０時間であり、使用される出発物 質に左右される。 本発明のピリダジノピロロイソキノリン（Ｉ）は、塩基であり、無機又は有機 酸により常法で所望の生理的に許容しうる酸付加塩に変換することができる。 塩形成に適切な酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ 化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、カプロン酸、吉草 酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、酒石酸、ク エン酸、リンゴ酸、安息香酸、パラオキシ安息香酸、パラアミノ安息香酸、フタ ル酸、ケイ皮酸、サリチル酸、アスコルビン酸及びメタンスルホン酸が挙げられ る。実施例 １．5,6−ジヒドロ−2,3−ジメトキシ−９−（Ｏ−ベンジル）ヒドロキシルアミ ノピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリン塩酸塩 ３ｇのＳ−メチル化合物、５ｇのｏ−ベンジルヒドロキシルアミン塩酸塩及び ５０mlのトルエンを約５時間還流する。反応が終わった後（ＴＬＣでモニターし た）、混合液を冷却し、反応生成物を吸引ろ過する。 これをトルエンで２回洗浄し、ＣＨ₂Ｃｌ₂と希ＮａＯＨ間に分ける。有機相を 水で数回洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発させる。残留物を、場合によっては シリカゲルカラム（溶離液ＣＨ₂Ｃｌ₂/ＭｅＯＨ＝１００＋１０V.V.）で精製し た後、わずかなＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し、エタノールＨＣｌを加えることにより塩酸 塩に変換する。収量2.86ｇ（理論値71.5％）。 ２．5,6−ジヒドロ−2,3−ジメトキシ−９−（４−ブロモベンジル）メルカプト ピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリン 1.28ｇの5,6−ジヒドロ−2,3−ジメトキシピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ ［2,1−a］イソキノリン−９−（１０Ｈ）チオンを３０mlのジメチルアセトアミ ドに懸濁し、室温で3.50ｇの４−ブロモベンジルブロミドを攪拌しながら加える 。約２０分後、赤橙色の透明溶液を生じ、室温で攪拌が続くにつれて橙色の結晶 が沈殿する。混合液を室温で１６時間放置し、結晶を吸引ろ過し、塩化メチレン とメタノールの混合液（１００＋２０）に溶解する。この混合液をまず希ＮａＯ Ｈ、次に水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させる。残留物をＣＨ₂ Ｃｌ₂:ＭｅＯＨ（１００＋２０）から結晶化する。収量5.5ｇ（理論値89.3％） 。 ３．5,6−ジヒドロ−2,3,9−トリメトキシピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［ 2,1−a］イソキノリン ５０mlのジメチルアセトアミド中6.3ｇの5,6−ジヒドロ−2,3−ジメトキシピ リダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソキノリンの懸濁液を室温で５ml の新たに蒸留したヨウ化メチルと反応させる。約１時間後、透明溶液が生じる。 これを５０℃で更に３０時間攪拌し、冷却し、次に沈殿した黄色結晶を吸引ろ過 し、塩化メチレン／メタノール混合液（１００＋２０）に溶解する。これ をまず希ＮａＯＨ、次にＨ₂Ｏで洗浄する。有機相を無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、 蒸発濃縮する。残留物をＣＨ₂Ｃｌ₂-ＭｅＯＨ混合液（１００＋２０）に溶解し 、エーテルを加えることにより結晶化する。収量：4.7ｇ（理論値75.6％）m.p. ：＞２７０℃。 下記の表は、上記実施例と同じように調製することができる本発明の化合物を 示すものである。 本発明は、新規な９−置換ピリダジノ［4′,5′：3,4］ピロロ［2,1−a］イソ キノリン及びこれらの化合物を含む医薬製剤に関する。 本発明は、また、新規なこれらの化合物の使用に関する。 本化合物は、脳の変性及び壊死性疾患を治療するのに有益である。そのような 疾患に罹る危険な状態にある患者の予防的治療も可能である。本化合物の作用は 、組織を介する血液の循環の改善に基づくものではない。従って、本化合物は、 てんかん及びアルツハイマー病の新規な治療、特に脳卒中を起こした又は脳卒中 を起こす危険な状態にある患者の治療に適切である。 本発明は、更に、慢性炎症過程、潰瘍性大腸炎及びクローン病の治療剤及び抗 増殖活性を有する薬剤を調製するための上記化合物の使用に関する。本化合物の 作用は、非選択カチオンチャネル（ＵＣＣ）の阻害により説明するすることがで きる。 慢性気管支喘息の病理生理学は、炎症細胞の活性化によって仲介される炎症過 程に基づくものである。(BARNES，1987; SEIFERT & SCHULTZ，1991)。 炎症細胞（例えば、好中性顆粒球及び肥満細胞又は持続性細胞系ＨＬ−６０細 胞又は感作ＲＢＬ細胞、即ち、γグロブリンＥで充填したもの）のレセプター調 節的活性化は、刺激性作動体（例えば、エンドテリン、ＰＡF、ロイコトリエン 、走化性ペプチドｆＭＬＰ又は感作肥満細胞に対する抗原）の種類に無関係に非 選択カチオンチャネル（ＵＣＣ）の遮断薬によって阻害される(RINK，1990)。こ れらのチャネルを介して、レセプター仲介細胞活性化の持続に関与する細胞外カ ルシウムが細胞に入る(PUTNEY，1990)。このカルシウム供給が中断される場合に は、炎症細胞の活性化の遮断を生じる。 ジヒドロピリジン又はフェニルアルキルアミン型の慣用のカルシウム拮抗薬は 、ＵＣＣ或いは炎症過程を阻害しない(WELLSら，1986)。 細胞活性化の測定又はＵＣＣ遮断薬によるその阻害の測定として、ｆｕｒａ２ 充填細胞内の細胞質カルシウムイオン濃度の速度論は、GRYNKIEWICZら（1985） によって記載された方法を用いて蛍光測定的に定量される。この方法は、本発明 の範囲内のＵＣＣ遮断薬を検出するための信頼できるスクリーニング法であった 。 いわゆる機能上のサプシガルギン(THAPSIGARGIN)阻害は、非選択カチオンチャ ネルの遮断薬の特異性確認に適切であった。サプシガルギンは、THASTRUPら(Pro c．Natl．Acad．Sci．(USA)，87，2466-2470，1990)によって記載された発癌プ ロモーターであり、細胞内ＩＰ₃感受性Ｃａ²⁺貯蔵体のＣａ²⁺−ＡＴＰａｓｅを 選択的に及び不可逆的に阻害する。従って、Ｃａ²⁺貯蔵体は急速に除去される。 J．PUTNEY(Calcium，11，611-624，1990)に記載されているように、これらの貯 蔵体が除去されると細胞膜内の非選択カチオンチャネルを開放するための生理的 刺激が構成される。この結果、Ｎａ²⁺及びＣａ²⁺の細胞内への大量の流入がもた らされる。これらの特性のために、サプシガルギンは非選択カチオンチャネルの 作動薬及びＩＰ₃依存性開放の間接促進剤として適切である。 本発明の範囲内の非選択カチオンチャネルのサプシガルギン刺激は、ＨＬ６０ 細胞（ヒト白血病細胞）、海馬及び皮質ニューロン細胞及びＲＢＬ細胞（ラット 好塩基性リンパ腫細胞）で巧く行われ、このようにしてこれらのチャネルの具体 的な細胞系において存在が証明された。 細胞質Ｃａ²⁺濃度（［Ｃａ²⁺］₁）は、細胞増殖及び腫瘍増殖において重要な 役割を果たしている（L.R．ZACHARSKI，Journal of Medicine 19: 145-177，198 8の概要参照）。特に、イノシトールトリホスフェート(ＩＰ₃)逐次仲介によるレ セプター活性化で促進された細胞へのＣａ²⁺流入は、癌細胞増殖に極めて重要で あると考えられている(U．KIKKAWA & Y．NISHIZUKA，Ann．REV．CELL．BIOL．2: 149-178，1986）。この機序は、転移の形成及び“多剤耐性”においても役割を 果たしている。（L.R．ZACHARSKI，J．MED．19: 145-177，1980による上記文献 の概要参照）。 この仮説は、非選択カチオンチャネル（ＵＣＣ）の間接促進剤としてのサプシ ガルギンが細胞のＣａ²⁺過負荷をもたらすだけでなく極めて効果的な発癌プロモ ーターでもある。(V．THASTRUPら，Proceedings of the NATL．Acad．Sci: (USA )87: 2466-2470，1990)。ＵＣＣによるＣａ²⁺流入の遮断は、細胞内Ｃａイオン 濃度の標準化、もって、腫瘍増殖等の阻止をもたらす。 慣用のカルシウム拮抗薬は、これらのＵＣＣを阻害しない。驚くべきことに、 本発明の化合物がＵＣＣを介してカルシウムの細胞への流入を阻害することが見 出された。 S．H．MURCHら(Lancet 339：381-385，15．Febr．1992)に示されているように 、エンドテリンＩは潰瘍性大腸炎及びクローン病のような炎症性腸疾患に重要な 病理生理学的役割を果たすものである。免疫組織化学法を用いて、粘膜下の領域 のクローン病に罹患した患者及び大腸の上皮固有層の領域に潰瘍性大腸炎を起こ した患者が健常者に比べてエンドテリンＩの濃度増大がかなり顕著であることが 示された。エンドテリンの局所的な分泌は上記疾患の実際の原因として見なされ る小梗塞による汎発性逐次虚血による大量血管痙攣を引き起こすと推定される。 エンドテリンの血管痙攣原性有効性は、血管ミオサイトのＣａ²⁺過負荷によって 説明される。エンドテリンは主にＣａ²⁺のＩＰ₃仲介細胞内遊離の引き金になり 、次にジヒドロピリジン非感受性チャネルを介して大量の経膜Ｃａ²⁺流入が続く 。(M.S．Simonsonら，Clin．Invest．Med．14: 499-507，1991; T．Masakai，J ．Cardiovasc．Pharmacol．13:Suppl．5，S1-S4，1989; D．W．Hay，R．J．Phar macol．100: 383-392，1990)。これらのチャネルは、非選択カチオンチャネルで あり、大腸粘膜の細胞に存在するものとして簡潔に記載されている。(Chr．Siem er & H．Goegelein，Europ．J．Physiol．420: 319-328，1992)。 ｆｕｒａ２充填ヒト白血病細胞（ＨＬ６０細胞）のエンドテリン促進活性化は 、機能上のエンドテリン拮抗薬を検出するのに適切なスクリーニングモデルであ った。G．GRYNKIEWICZら（J．Biol．Chem．260:3440-3450，1985）に従って、Ｈ Ｌ６０細胞（浮遊液）の細胞質中の細胞内Ｃａ²⁺濃度を分光蛍光法でモニターし 、エンドテリンによる細胞活性化の測定として定量することができる。刺激作用 は0.1mMエンドテリンを加えることにより行い、本発明の物質によって用量依存 方法で阻害することができた。 本発明の物質の機能上のエンドテリン拮抗は、非選択カチオンチャネルの遮断 により仲介される。従って、ＲＢＬ−ｈｍ１細胞による機能上のサプシガルギン 拮抗の検出は機能上のエンドテリン拮抗薬に適切なスクリーニング法である。 実験の実施： スクリーニングのために、ｆｕｒａ２充填接着性ＲＢＬ−ｈｍ１細胞を、無Ｃ ａ²⁺インキュベーション培地中で0.1mMサプシガルギンで刺激する。４分後、細 胞外Ｃａ²⁺を1.5mM濃度に回復させ、ｆｕｒａ２蛍光を用いて、非選択カチオ ンチャネルを介して大量の経膜Ｃａ²⁺流入による細胞質Ｃａ²⁺濃度の過度の増大 が記録される。 この流入は、非選択カチオンチャネル遮断薬により用量依存方法で単独で阻害 されるべきである。慣用のカルシウム拮抗薬もＩＰ₃代謝回転を促進する作動体 の特異的遮断薬もサプシガルギンが間接的に引き金になった経膜Ｃａ²⁺流入を阻 害することができない。本発明の化合物は、ＵＣＣの阻害により区別される。 付着している個々のＲＢＬ−ｈｍ１細胞の細胞質の蛍光カルシウム測定は、ニ ューロン細胞についてKUDO & OGURA（1986）によって記載されている方法と同じ ように行われる。ZEISS製のAXIOVERT 35蛍光顕微鏡は、ＩＣＭＳ画像処理装置、 コントロールユニットを備えた残光カメラ及び画像増強器DVS 3000からなるHAMA MATSU製の画像装置と連結して用いられる。 細胞質Ｃａ²⁺濃度の速度論は、細胞活性化がサプシガルギン(0.1μM)によって 促進された後に濃度／時間曲線として連続的に記録される。２つの活性化細胞培 養液の曲線は、１０μM試験物質の存在及び不在下に比較される。これらの曲線 のもとでの面積（曲線下面積＝ＡＵＣ）を積分し、細胞活性化の測定として記録 される。試験したＵＣＣ遮断薬の阻害能は下記式を用いて求められる。 %H=１０μMの試験物質によって促進及び阻害される非選択カチオンチャネルを介 するカルシウム流入の阻害％ AUC_inh＝刺激剤＋１０μM阻害性試験物質の存在下に記録された曲線下面積 AUC_(control)=刺激剤の添加後にのみ記録される曲線下面積 上記説明に関する文献： BARNES P.J.，I.W．RODGER & N.C．THOMSON 喘息の発病、“喘息、基本機序及び臨床治療” ED．P.J．BARNES; ACADEMIC PRESS，LONDON，1988 GRYNKIEWICZ G.，M．POENIE & R.Y．TSIEN 蛍光特性の著しく改良されたＣａ²⁺指示薬の新規な生成 J．BIOL．CHEM．260: 3440-3450，1985 HIDE，M．& M.A．BEAVEN ラット肥満細胞（ＲＢＬ−２Ｈ３）系のカルシウム流出 J．BIOL．CHEM．266 15221-15229，1991 KUDO，Y．& A．OGURA 分離した海馬ニューロンにおける細胞内Ｃａ²⁺濃度のグルタミン酸塩誘導増大 BR．J．PHARMACOL．89: 191-198; 1986 PUTNEY，J.W.，jr. 再調査された容量性カルシウム流入 CELL CALCIUM 11: 611-624，1990 RINK，T.J. レセプター仲介カルシウム流入 FEBS LETT．268: 381-385，1990 SEIFERT，R．& G．SCHULTZ 食細胞のスーパーオキシド形成ＮＡＤＰＨオキシダーゼ：多重機序によって調節 された酵素系 REV．PHYSIOL．BIOCHEM．PHARMACOL.，Vol．117，SPRINGER VERL.，1991 WELLS，E.，C.G．JACKSON，S.T．HARPER，J．MANN & R.P．EAOY 霊長類気管支肥満細胞ＩＩの確認、霊長類気管支肥満細胞からのヒスタミン、Ｌ ＴＣ₄及びＰＧＦ_2a遊離阻害及びラット腹膜肥満細胞との比較 J．IMMUNOL．137: 3941-3945，1986。 測定結果： ＲＢＬ−ｈｍ１細胞におけるサプシガルギン刺激（0.1μMサプシガルギン）後 のＵＣＣ阻害％を示す。試験物質の濃度は１０^-5〜１０^-6モルである。 機能上の抗炎症有効性は、次の試験によって証明される。 ガラススライドに付着している個々のＲＢＬ−２Ｈ３細胞（肥満細胞に関連し た腫瘍細胞系）を用いる。 ＲＢＬ−２Ｈ３細胞の培養及び付着は、HIDE & BEAVEN(1991)に記載された方 法で行われる。接着性ＲＢＬ−２Ｈ３細胞を感作するために、これらの細胞を、 ジニトロフェノール−ウシ血清アルブミン複合体（ＤＮＰ−ＢＳＡ抗原）に対し て１：２０００に希釈した市販のＥ溶液を用いて室温で２時間インキュベートす る。次に細胞を洗浄する。0.1mlのＤＮＰ−ＢＳＡ溶液（１０μg/ml）を添加す ることにより、細胞質Ｃａ²⁺過負荷によって仲介される大量の免疫的細胞活性化 がある。付着している個々のＲＢＬ−２Ｈ３細胞の細胞質中のカルシウム蛍光測 定は、本明細書の上でも説明されているニューロン細胞の場合のKUDO & OGURA(1 986)によって記載されている方法と同様に行われる。 これらの実験に用いられる比較は、抗原誘導細胞活性化の約５０％阻害を引き 起こす(１０μM)クロモグリケートである。 本試験において、上記化合物は上で指定された数値に匹敵する％Ｈ値を示す。 驚くべきことに、本発明の物質の抗増殖作用を求めるためにテトラゾリウム分 析を用いる種々のヒト腫瘍細胞系のミクロ培養についての試験により、試験化合 物が比較物質ベラパミルより５〜１００倍効力のあることが示された。 試験物質の抗増殖有効性は、MOSMANN(J．IMMUNOL．METH．65: 55-63，1983)、 DENIZOTら(J．IMMUNOL．METH．89: 271-277，1986)及びJ．ELIASONら(INT．J．C ANCER 46: 113-117，1990)によって記載されているＭＴＴテストによって求めた 。（ＭＴＴ＝［３−（4,5−ジメチルチアゾール−２−イル）2,5−ジフェニルテ トラゾリウムブロミド］、CHEMICON Inc.製、エルセガンド、カリフォルニア州 、米国） この指示薬は、無傷ミトコンドリアを含む生細胞によってのみブルー ホルマザン生成物に代謝される。我々の試験では次のヒト腫瘍細胞系を用いた： Ａ５４９（肺の腺がん）、Ａ４３１（外陰の表皮がん）、ＰＣ３（前立腺の腺が ん）、ＳK BR３（乳房の腺がん）、ＨＴ２９（ＣＸl１）（結腸の腺がん）及び Ｋ５６２（慢性骨髄白血病細胞）。 試験をマイクロタイタープレートで行った。各ウェルは、１００μlの細胞浮 遊液（0.2×１０⁶細胞／ml）を含有した。使用したインキュベーション培養液は 、１０％熱不活化ウシ胎児血清及び５０μg/mlのゲンタマイシンを含むＲＰＭ１ １６４０とした。細胞浮遊液を、３７℃においてＣＯ₂(５％)／空気（９５％） 混合物の飽和点の湿度を有する空気中で０、２４、４８又は７２時間インキュベ ートし、可変濃度の抗増殖試験物質の存在及び不在下でインキュベートした。試 験物質をＤＭＳＯに溶解した（最終希釈度：0.1％）。次に、１０μlのＭＴＴ溶 液(３mg/ml)を加え、３時間後0.08ＮＨＣｌを含有する１００μlのイソプ ロパノール溶液を加えた。更に１時間後、５７０nmの光吸収（比較波長６３０nm ）をマイクロプレートリーダーで求めた。光吸収は、生細胞数に直接比例する。 試験物質の半最大阻止濃度は１μg/mlであった。 上記機能上のエンドテリン及びサプシガルギン拮抗薬の血液鎮痙有効性は単離 した血管標品で確認し、ラットから取り出した逆灌流自発搏動性LANDENDORFF心 臓について電磁血流測定(Hugo Sachs Elektronik製の装置、MARCH)によって冠状 灌流を連続的に定量した。この測定装置は、血管痙攣の程度、期間及びパターン を高い精度で記録するために用いられる。灌流は１００nMエンドテリン濃度で行 われ、冠状灌流の流れは１１ml／分から５ml／分に減少する。灌流の制限により 、本発明の物質によって逆になることができる。ｆｕｒａ２充填ＲＢＬ−ｈｍ１ 細胞についてサプシガルギン阻害に関する本発明の化合物の効力又はｆｕｒａ２ 充填ＨＬ６０細胞についてエンドテリン阻害の有効性は、Langendorff標品で検 出された試験物質の血液鎮痙有効性と明らかに相関する。このことにより、試験 物質の血液鎮痙エンドテリン拮抗を基礎にして、非選択カチオンチャネルを遮断 すると結論される。 本化合物は、経腸的でも非経口的でも投与される。経口使用に示される投与量 は１投与量あたり活性物質0.1〜５００mgの範囲にあり、静脈内使用の場合には １投与量あたり0.05〜１５０mgの範囲にある。所望の治療上の投与量は、投与の 適応症及び剤形に左右され、実験的に求められる。 適切な剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、坐薬、液剤、シロップ剤、 乳剤、エーロゾル剤又は分散性散剤が挙げられる。錠剤は、例えば、活性物質を 既知の賦形剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はラクトースのよ うな不活性希釈剤、コーンスターチ又はアルギン酸のような崩壊剤、デンプン又 はゼラチンのような結合剤、ステアリン酸マグネシウム又はタルクのような滑沢 剤及び／又はカルボキシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、フタル酸 酢酸セルロース又はポリ酢酸ビニルのような徐放性にするための物質と混合する ことにより製造される。錠剤は数層からなることもできる。 上衣錠は、錠剤と同様の方法で製造されたコアを錠剤の剤皮に慣用的に用いら れる物質、例えば、コリドン又はシェラック、アラビアゴム、タルク、二酸化チ タン又は砂糖の剤皮をかけることにより同じように製造される。徐放性にするた めに又は配合禁忌を避けるために、コアは数層からなることもできる。同様に、 剤皮も徐放性にするために数層からなることができ、錠剤に言及された賦形剤が 用いられる。 本発明の活性物質又は活性物質の組合わせを含有するシロップ剤は、更にサッ カリン、シクラメート、グリセロール又は砂糖のような甘味剤及び香味増強剤、 例えば、バニリン又はオレンジエキスのような香料を含有することもできる。ま た、カルボキシメチルセルロースナトリウムのような懸濁補助剤又は粘度付与剤 、脂肪酸アルコールとエチレンオキシドの縮合生成物のような湿潤剤又はパラオ キシ安息香酸塩のような保存剤を含有することもできる。 注射液は、常法で、例えば、パラオキシ安息香酸塩のような保存剤又はエチレ ンジアミン四酢酸のアルカリ金属塩のような安定剤を加えることにより製造され 、次に注射バイアル又はアンプルに移される。 １種以上の活性物質又は活性物質の組合わせを含有するカプセル剤は、例えば 、活性物質をラクトース又はソルビトールのような不活性担体と混合し、それを ゼラチンカプセルに封入することにより調製される。 適切な坐薬は、例えば、中性脂肪又はポリエチレングリコール又はその誘導体 のようなこのために供給された担体と混合することにより製造される。 式Ｉの化合物の調製方法は欧州特許出願第190 563号及び同第252 299号に記載 されており、これによって言及される。 医薬製剤の実施例 ａ）剤皮をかけた錠剤 １錠剤コアは下記の成分を含有する： 調製 ラクトース及びコーンスターチと混合した活性物質を１０％ゼラチン水溶液と １mmメッシュスクリーンを通して製粒し、４０℃で乾燥し、１回以上スクリーン に通す。このようにして得られた顆粒をステアリン酸マグネシウムと混合し、圧 縮する。このようにして製造されたコアに砂糖、二酸化チタン、タルク及びアラ ビアゴムの水性懸濁液からなる剤皮を常法で施す。仕上げた糖衣錠をみつろうで つや出しする。 ｂ）錠剤 調製 活性物質とステアリン酸マグネシウムを溶性デンプンの水溶液と製粒し、顆粒 を乾燥し、ラクトースとコーンスターチと密接に混合する。次に、この混合物を 重量２１０mgの錠剤に圧縮する。 ｃ）カプセル剤 調製 活性物質、ラクトース及びコーンスターチをまずミキサー、次に粉砕機で混合 する。混合物をミキサーに戻し、タルクと十分に混合し、硬ゼラチンカプセルに 機械的に充填する。 ｄ）錠剤 調製 活性物質を賦形剤のいくらかと混合し、溶性デンプンを水に溶解したものと製 粒する。顆粒を乾燥した後、残りの賦形剤を加え、混合物を圧縮して錠剤を形成 する。 ｅ）剤皮をかけた錠剤 調製 活性物質と賦形剤を圧縮して実施例ａに記載された錠剤コアを形成し、次に砂 糖、タルク及びアラビアゴムを用いて常法で剤皮を施す。 ｆ）坐薬 調製 活性物質とラクトースを共に混合し、混合物を熔融した坐剤塊に均一に懸濁す る。この懸濁液を冷却した型に注いで重量1.7ｇの坐薬を形成する。 ｇ）アンプル 調製 活性物質と塩化ナトリウムを２回蒸留水に溶解し、この溶液を無菌条件下でア ンプルに移す。 ｈ）アンプル ｉ）点眼剤 調製 活性物質と保存剤を脱イオン水に溶解し、この溶液をろ過し、１００mlバイア ルに移す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 ロース オットー ドイツ連邦共和国 デー55270 シュヴァ ーベンハイム エルスハイマー シュトラ ーセ 36 (72)発明者 アルンツ ディートリッヒ ドイツ連邦共和国 デー55437 アッペン ハイム ミュールシュトラーセ ７

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下記式（Ｉ）を有する化合物又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的 に許容しうる塩。 ［式中、ＸはＯ、Ｓ又はＮＨＯを表す； Ｒ₁は下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を 任意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜１０個又は２〜１０個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は 不飽和アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭 素原子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、 炭素原子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル１又は２個、フ ェノキシ、フェニル１又は２個（このフェニル環又はフェノキシはハロゲン、Ｃ Ｆ₃、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭素原子１〜２個を有するＮＨ−アル キル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ₂、炭素原子２〜３ 個を有するＮ−アシル、−ＯＣＨ₂Ｏ−、アルキルスルホニルアミノ、フェノキ シ又はベンジルオキシで一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニル、 窒素を含有し、更にヘテロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有していて もよい５又は６員複素環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていてもよ い）で置換されてもよい； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅は同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-4アルキルを表す ： Ｒ₇及びＲ₈は同一か又は異なってもよく、ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ；又 はＣ_1-4アルキルチオを表す；及び Ｒ₆及びＲ₉は同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキ シ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す；又は 置換基Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉の隣接する２つの置換基は一緒に−Ｏ−(ＣＨ₂)_{1 または2} −Ｏ−を形成し、他の２つの置換基は上で定義した通りである。なお、 上で定義した式ＩのＸＲ₁がＳＣＨ₃を表す化合物を除く。］ ２．ＸがＯ、Ｓ又はＮＨＯである； Ｒ₁が下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を 任意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜５個又は２〜５個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は不飽 和アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭素原 子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、炭素 原子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル、フェニル１又は２ 個（このフェニル環はハロゲン、ＣＦ₃、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭 素原子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジ アルキル、ＮＨ₂、炭素原子２〜３個を有するＮ−アシル、アルキルスルホニル アミノ又はベンジルオキシで一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニ ル、窒素を含有し、更にヘテロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有して いてもよい５又は６員複素環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていて もよい）で置換されてもよい； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅が同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-4アルキルを表す ； Ｒ₇及びＲ₈が同一か又は異なってもよく、ヒドロキシ；Ｃ_1-2アルコキシ；又 はＣ_1-4アルキルチオを表す；及び Ｒ₆及びＲ₉が同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキ シ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す；又は 置換基Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉の隣接する２つの置換基は一緒に−Ｏ−(ＣＨ₂)_{1 または2} −Ｏ−を形成し、他の２つの置換基は上で定義した通りである、 請求項１記載の式（Ｉ）の化合物又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理 的に許容しうる塩。 ３．Ｘが請求項１でのように定義される； Ｒ₁が下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を 任意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜５個又は２〜５個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は不飽 和アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭素原 子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、炭素 原子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル、フェニル（このフ ェニル環はハロゲン、Ｃ_1-2アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭素原子１〜２個を有 するＮＨ−アルキル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ₂、 炭素原子２〜３個を有するＮ−アシル又は(Ｃ₁又はＣ₂)アルキルスルホニルアミ ノで一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニル、窒素を含有し、更に ヘテロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有していてもよい５又は６員複 素環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていてもよい）で置換されても よい； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅が同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-2アルキルを表す ； Ｒ₇及びＲ₈が同一か又は異なってもよく、ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ；又 はＣ_1-4アルキルチオを表す；及び Ｒ₆及びＲ₉が同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキ シ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す、 請求項１又は２記載の式（Ｉ）の化合物又は酸もしくは複合体形成剤によるそ の生理的に許容しうる塩。 ４．Ｒ₁がＣ_3-7シクロアルキル、チエニル又は１又は２個の無置換フェニル又は 置換基が請求の範囲１、２又は３でのように定義される置換フェニルで置換され る直鎖又は分枝鎖Ｃ_1-4アルキルである請求項１、２又は３記載の化合物。 ５．Ｒ₁が(Ｃ_1-4)アルキルシクロヘキシル、好ましくは−ＣＨ₂−Ｃ₆Ｈ₁₁である 請求項４記載の化合物。 ６．Ｒ₁が(Ｃ_1-4)アルキルフェニル（このフェニル基は無置換であるか又はＦ、 Ｃｌ、ＣＦ₃、メチル、エチル、メトキシ又はエトキシで一又は二置換される） である請求項４記載の化合物。 ７．Ｒ₁が下記の基の１つである請求項１、２又は３記載の化合物。 ８．Ｒ₁が下記の基の１つである請求項７記載の化合物。 ９．Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表し、Ｒ₇及びＲ₈がＣ_1-4アルコキシを 表すか又はＲ₇及びＲ₈が一緒に−ＯＣＨ₂Ｏ−又は−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−を表す請 求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。 10．Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表す請求項９記載の化合物。 11．ＸがＯ、Ｓ又はＮＨＯを表し、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素であり、 Ｒ₇及びＲ₈がＣ_1-4アルコキシを表すか又はＲ₇及びＲ₈が一緒に−ＯＣＨ₂Ｏ−又 は−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−を表し、Ｒ₁が −(ＣＨ₂)_1または2ＣＨ(Ｃ₆Ｈ₅)₂(Ｒ₁₃はＣＦ₃、Ｃ(ＣＨ₃)₃又は−ＯＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₅ であり、ｙは１又は２である。）を表す請求項１又は２記載の化合物又は酸も しくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩。 12．Ｒ₁が （Ｒ₁₃及びｙは請求項11でのように定義される。）を表す請求項11記載の化合 物。 13．Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表す請求項11又は12記載の化合物。 14．Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表し、Ｒ₁が下記の意味の１つを有する請求項11記 載の化合物。 15．ＸがＯ、Ｓ又はＮＨＯを表し、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表 し、Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表し、Ｒ₁が下記の意味の１つを有する請求項１又 は２記載の化合物又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩 。 16．Ｒ₁が下記の意味の１つを有する請求項15記載の化合物。 好ましくは 17．ＸがＯ、Ｓ又はＮＨＯであり、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₉が水素を表し、 Ｒ₇及びＲ₈がメトキシを表し、Ｒ₁が下記の意味の１つを有する請求項１又は２ 記載の化合物又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩。 18．ＸがＳである請求項１〜17のいずれか１項に記載の化合物。 19．請求項１〜17のいずれか１項に記載の一般式ＩのＸがＮＨＯである化合物又 は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩の製造方法であって 、下記一般式ＩＩ （式中、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は上で定義した通りである。 ）を有する化合物を下記一般式ＩＩＩ Ｈ₂Ｎ−ＯＲ₁ ＩＩＩ （式中、Ｒ₁は上で定義した通りである。）を有する化合物と反応させ、この ようにして得られた最終生成物をそれ自体既知の方法でその生理的に許容しうる 塩に任意に変換することを特徴とする方法。 20．請求項１〜18のいずれか１項に記載の一般式ＩのＸがＳ又はＯである化合物 又は酸もしくは複合体形成剤によるその生理的に許容しうる塩の製造方法であっ て、下記一般式ＩＶ （式中、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉は上で定義した通りであり、 ＺはＯ又はＳである。）を有する化合物を下記一般式Ｖ Ｒ₁−Ｙ （Ｖ） （式中、Ｒ₁は上で定義した通りであり、Ｙはアニオン脱離基である。）を有 する化合物と反応させ、このようにして得られた最終生成物をそれ自体既知の方 法でその生理的に許容しうる塩に任意に変換することを特徴とする方法。 21．活性物質として下記式（Ｉ）を有する化合物又は酸もしくは複合体形成剤に よるその生理的に許容しうる塩１種以上を慣用の賦形剤又は担体と組合わせて含 む医薬製剤。 ［式中、ＸはＯ、Ｓ又はＮＨＯを表す； Ｒ₁は下記の意味の１つを有する： ａ）窒素原子を含有し、更にヘテロ原子として酸素、窒素又はイオウ原子を 任意に含有していてもよい５又は６員複素環； ｂ）Ｃ_3-7シクロアルキル； ｃ）炭素原子１〜１０個又は２〜１０個を有する直鎖又は分枝鎖、飽和又は 不飽和アルキル、この基はヒドロキシ、Ｃ_1-4アルコキシ、ハロゲン、ＮＨ₂、炭 素原子１〜２個を有するＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ(Ｃ_1-2)アルキルアミノ、 炭素原子２〜４個を有するＮＨ−アシル、Ｃ_3-7シクロアルキル１又は２個、フ ェノキシ、フェニル１又は２個（このフェニル環又はフェノキシはハロゲン、Ｃ Ｆ₃、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_1-2アルコキシ、炭素原子１〜２個を有するＮＨ−アル キル、炭素原子１〜２個を有するＮ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨ₂、炭素原子２〜３ 個を有するＮ−アシル、−ＯＣＨ₂Ｏ−、アルキルスルホニルアミノ、フェノキ シ又はベンジルオキシで一又は二置換されていてもよい）、フリル、チエニル、 窒素を含有し、更にヘテロ原子として酸素又はイオウ原子を任意に含有していて もよい５又は６員複素環（この環はＣ_1-4アルキルで任意に置換されていてもよ い）で置換されてもよい； Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅は同一か又は異なってもよく、水素又はＣ_1-4アルキルを表す ； Ｒ₇及びＲ₈は同一か又は異なってもよく、ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキシ；又 はＣ_1-4アルキルチオを表す；及び Ｒ₆及びＲ₉は同一か又は異なってもよく、水素；ヒドロキシ；Ｃ_1-4アルコキ シ；Ｃ_1-4アルキルチオを表す；又は 置換基Ｒ₆、Ｒ₇、Ｒ₈及びＲ₉の隣接する２つの置換基は一緒に−Ｏ−(ＣＨ₂)_{1 または2} −Ｏ−を形成し、他の２つの置換基は上で定義した通りである。］ 22．請求項１〜18のいずれか１項に記載の化合物を慣用のガレヌス賦形剤及び／ 又は担体と処理して慣用の医薬製剤を製造することを特徴とする請求項21記載の 医薬製剤の調製方法。 23．心臓保護剤、慢性炎症過程を治療する脳保護剤、抗増殖作用のある薬剤又は 潰瘍性大腸炎もしくはクローン病の治療剤を調製するための請求項21で定義され た式Ｉの化合物の使用。