JPH09503201A

JPH09503201A - Ｔｎｆ−アルファ分泌の阻害剤

Info

Publication number: JPH09503201A
Application number: JP7507668A
Authority: JP
Inventors: ブラック，ロイ・エイ; フィッツナー，ジェフリー・エヌ; スリース，ポール・アール
Original assignee: Immunex Corp
Current assignee: Immunex Corp
Priority date: 1993-08-23
Filing date: 1994-08-19
Publication date: 1997-03-31
Also published as: EP0715619A4; FI960803A; AU7569494A; NO960723D0; AU687436B2; CA2170158A1; WO1995006031A1; AU5030298A; FI960803A0; NO960723L; NZ271893A; EP0715619A1

Abstract

(57)【要約】生物学的に活性なＴＮＦ−αを提供するＴＮＦ−α前駆体の切断に応答するＴＮＦ−α転化酵素（ＴＡＣＥ）を阻害するのに有用である、化合物および方法に付いて記載している。本発明で用いた化合物は、ヒドロキサメート、チオール、ホスホリルおよびカルボキシルと言ったようなＴＡＣＥを阻害する能力を持つ活性基を持つペプチド誘導体である。

Description

【発明の詳細な説明】ＴＮＦ−アルファ分泌の阻害剤本出願は１９９３年８月２３日に出願され、係属中である第０８／１１０，６０１号の一部継続出願である。技術分野本発明はメタロプロテアーゼの阻害剤である化合物、特にＴＮＦ−α変換酵素を阻害する化合物に関する。背景技術腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α、またカケクチンとしても知られている）は多数の細胞型に種々の効果を誘導できる哺乳類蛋白質である。ＴＮＦ−αは腫瘍細胞の溶解を起こすその能力により最初は特徴付けられ、単核食細胞、Ｔ−細胞、Ｂ−細胞、マスト細胞およびＮＫ細胞のような活性化細胞により産生されている。単核食細胞において、ＴＮＦ−αは最初は約２６ｋＤの膜結合蛋白質として合成される。２６ｋＤ膜結合ＴＮＦ−αの１７ｋＤ断片が”分泌”され、二つの別の分泌されたＴＮＦ−α分子と合わさって循環する５１ｋＤホモトライマーを形成する。ＴＮＦ−αはグラム陰性菌に対する宿主応答の主な媒介物質である。グラム陰性菌の細胞壁に由来するリポポリサッカリド（ＬＰＳ、内毒素とも称されている）はＴＮＦ−α合成の強力な刺激剤である。ＴＮＦの過剰産生または非制御産生に起因する有害な効果が非常に重大であるため、ＴＮＦの血清レベルを調節または制御するためにかなりの努力がかたむけられてきた。血清ＴＮＦレベルを効果的に制御するための努力の重要な点はＴＮＦ生合成の機構を理解することである。ＴＮＦ−αが分泌される機構は最近明らかにされた。Kriegler er al．Cell,5 3 ,45-53(1988)はＴＮＦ−α”分泌”は蛋白質分解酵素またはプロテアーゼによる２６ｋＤ膜結合分子の切断によるものであると推測した。Scuderi et al.,J.I mmunology ,143,168-173はヒト白血球細胞からのＴＮＦ−αの放出は一つまたはそれ以上のセリンプロテアーゼ（例えば、白血球エラスターゼまたはトリプシン）に依存していることを示唆している。セリンプロテアーゼ阻害剤、ｐ−トルエンスルホニル−Ｌ−アルギニンメチルエステル、はヒト白血球ＴＮＦ放出を濃度依存様式で抑制することが発見されている。Scuderi et．al.はアルギニンメチルエステルが酵素の活性中心のアルギニン結合部位に競合し、それにより加水分解を阻止していると示唆している。阻害剤のリジン及びフェニルアラニンの類似体は、アルギニンメチルエステルを模倣できないことが報告された。本発明者らは、ＴＮＦ−α分子の１７ｋＤ蛋白質への切断を起こすプロテアーゼが実際に、ＴＮＦ−α産生細胞の形質膜に存在すると信じられているメタロプロテアーゼであることを発見した。この酵素の物理化学的特性は報告されていない。ほとんどの（しかし全てではない）プロテアーゼは特異的アミノ酸配列を認識する。いくつかのプロテアーゼは切断される結合のＮ−末端に位置する残基を主として認識し、いくつかは切断される結合のＣ−末端に位置する残基を認識し、およびいくつかは切断される結合の両側を認識する。メタロプロテアーゼ酵素はペプチド結合の加水分解を触媒するために結合された金属（一般的にはＺｎ²⁺）を利用する。メタロプロテアーゼは関節破壊（マトリックスメタロプロテアーゼ）、血圧調節（アンギオテンシン変換酵素）およびペプチド−ホルモンレベルの調節（中性エンドペプチダーゼ−２４．１１）に関与している。多数の阻害剤が以前に記載されたメタロプロテアーゼに対して開発されている。マトリックス−メタロプロテアーゼ（特にコラゲナーゼ）に対する阻害剤の一般的なファミリーはＷＯ９２／０９５６３に報告されている。この文献はトリプトファンまたは２−ナフチルアラニンのようなアミノ酸誘導体にアミドを通して連結された、逆ヒドロキサム酸またはヒドロキシ尿素一般構造を持つ化合物を示している。コラゲナーゼの阻害剤はまたＷＯ８８／０６８９０にも報告されており、これらの化合物はスルフヒドリル部分並びにフェニルアラニンおよびトリプトファン類似体を含んでいる。コラゲナーゼの阻害剤はＷＯ９２／０９５５６および米国特許出願第５，１１４，９５３号にも報告されており、ヒトロキサム酸部分および融合または共役ビシクロアリール置換基を持っている。ＥＰＡ４８９，５７７の一般式で包括される多数の潜在的ゲラチナーセ阻害剤は随意にヒドロキサム酸基を持つアミノ酸誘導体である。アンギオテンシン包含酵素（ＡＣＥ）阻害剤として有用なヒドロキサム酸誘導体がＥＰＯ４９８，６６５に報告されている。新規メタロプロテアーゼであるＴＮＦ−α包括酵素（以後”ＴＡＣＥ”と称される）は、血清および他の細胞外空間へのＴＮＦ−αの放出を阻害する。ＴＡＣＥ阻害剤はそれ故ＴＮＦ−αの過剰産生または非制御的産生により特徴付けられる病態の処置において臨床的有用正を持っている。ある種の病理学的状態に対して特別に有用なＴＡＣＥ阻害剤は選択的にＴＡＣＥを阻害するが、ＴＮＦ−β（リンホトキシンとしても知られている）血清レベルには影響を与えないであろう。ＴＮＦ−αの過剰産生または非制御的産生はある種の病態および疾患に関係している、例えば：Ｉ．全身性炎症応答症候群；敗血症症候群グラム陽性敗血症グラム陰性敗血症培養陰性敗血症菌敗血症好中球減少性熱尿路性敗血症髄膜炎菌血症外傷／出血熱傷イオン化放射線暴露急性膵炎成人呼吸困難症候群 II．再潅流損傷ポンプ開始後症候群虚血−再潅流損傷 III．心血管疾患心一時停止症候群心筋梗塞うっ血性心不全 IV．感染性疾患ＨＩＶ感染／ＨＩＶ神経障害髄膜炎肝炎敗血症性関節炎腹膜炎肺炎咽頭蓋炎大腸菌０１５７：Ｈ７溶血尿毒症症候群／血栓溶解性血小板減少性紫斑病マラリアデング出血熱リーシュマニア症らい病毒ショック症候群連鎖球菌性筋炎ガス壊疸マイコバクテリウムツベルクローシスマイコバクテリウムアビウムイントラセルラレニューモシスチスカリニ肺炎骨盤内炎症性疾患睾丸炎／副睾丸炎レジオネラライム病インフルエンザＡエプスタイン−バーウイルスウイルス付随食血細胞性症候群ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎Ｖ．産科／婦人科早産流産不妊 VI．炎症性疾患／自己免疫病慢性リュウマチ／血清陰性関節症変形性関節症炎症性腸疾患全身性エリストーデス虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎特発性肺線維症脈管炎／ヴェグナー肉芽腫サルコイド−シス睾丸炎／精管切除反転法 VII．アレルギー／アトピー疾患喘息アレルギー性鼻炎湿疹アレルギー性接触性皮膚炎アレルギー性結膜炎過敏性肺炎 VIII．悪性腫瘍ＡＬＬＡＭＬＣＭＬＣＬＬホジキン病、非ホジキンリンパ腫ＭＭカポジ肉腫結腸直腸癌上咽頭癌悪性組織球増殖症パラネオプラスチック症候群／悪性高カルシウム血症 IX．移植移植臓器拒絶対移植片宿主反応疾患Ｘ．悪液質ＸＩ．先天性嚢胞性線維症家族性食血細胞性リンパ組織球増多症鎌状赤血球貧血ＸII．皮膚病乾癬脱毛症ＸIII.神経性多発性硬化症片頭痛ＸIV．腎性ネフローゼ症候群血液透析尿毒症ＸＶ．毒性ＯＫＴ３療法抗ＣＤ３療法サイトカイン療法化学療法放射線療法慢性サリチル酸無毒化ＸVI．代謝／特発性ウィルソン病ヘマクロマトシスアルファ−１−抗トリプシン欠損糖尿病甲状腺炎骨粗しょう症視床下部−脳下垂体−副腎軸評価原発性胆汁性肝硬変症ＴＡＣＥの阻害剤は細胞に結合しているＴＮＦ−αの切断を妨げ、それにより血清および組織におけるＴＮＦ−αレベルを減少させる。そのような阻害剤は著しく臨床的に有用であり、上記のＴＮＦ−α関連障害の処置において強力な治療法であろう。発明の概要本発明は式Ｉ：式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボキシルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は各々互いに独立して水素、アルキレン（シクロアルキル）、ＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁からＣ₈ のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、天然に存在するα−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；基−Ｒ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶は置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり、およびＲ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵ )またはハロゲンであり（式中、Ｒ⁴およびＲ⁵は各々互いに独立して水素または置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルである）；ｎは０、１または２であり；ｎが１である場合、Ａは保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；ｎが２である場合、Ａは同一のまたは異なる保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；およびＢは非置換または置換のＣ₂からＣ₈のアルキレンである；の化合物またはその医薬として受容可能な塩に関する。式Ｉの化合物はメタロプロテアーゼ阻害剤として有用であり、特にＴＮＦ−α 変換酵素（ＴＡＣＥ）の阻害剤として有用である。本発明はまたＴＮＦ−αの過剰産生または非制御的産生により特徴付けられる疾患をもつ哺乳類の処置法にも関している。本方法は生物学的に活性な有効量の式II：式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボキシルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は各々互いに独立して水素、アルキレン（シクロアルキル）、ＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、保護または非保護の天然に存在するα−アミノ酸の側鎖であり；基−Ｒ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶はＣ₁からＣ₈ のアルキルであり、およびＲ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)またはハロゲンであり（式中、Ｒ⁴およびＲ⁵は各々互いに独立して水素または置換または非置換のＣ₁ からＣ₈のアルキルである）；ｎは０、１または２であり；Ｙは水素、非置換または置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、アルキレン（シクロアルキル）、基−Ｒ⁸−ＣＯＯＲ⁹または基−Ｒ¹⁰Ｎ(Ｒ¹¹)(Ｒ¹²)（式中Ｒ⁸はＣ₁からＣ₈のアルキレンであり、Ｒ⁹は水素またはＣ₁からＣ₈のアルキルであり、Ｒ¹⁰ は非置換または置換のＣ₁からＣ₈のアルキレンであり、Ｒ¹¹およびＲ¹²は各々互いに独立して水素またはＣ₁からＣ₈のアルキルである）であり；ｎが１である場合、Ａは保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；およびｎが２である場合、Ａは同一のまたは異なる保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルである；の化合物およびその医薬として受容可能な塩；ＬＰＳ−誘導敗血症症候群のマウスモデルにおいて２５ｍｇ／ｋｇで投与された場合、血清ＴＮＦ−αレベルを少なくとも８０％減少させることができる；および医薬として受容可能な担体を含む組成物を哺乳類に投与する工程を含んでいる。ＴＡＣＥメタロプロテアーゼの有用な阻害剤の発見は、式IIの化合物およびＴＮＦ−結合活性を持つ蛋白質からなる、上に掲げた障害の処置のための医薬組成物を含む本発明のさらなる態様の発見につながった。発明の詳細な説明本発明は式Ｉ：式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボキシルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は各々互いに独立して水素、アルキレン（シクロアルキル）、ＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、保護または非保護の天然に存在するα−アミノ酸の側鎖であり；基−Ｒ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶は置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり、およびＲ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵ )またはハロゲンであり（式中、Ｒ⁴およびＲ⁵は各々互いに独立して水素または置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルである）；ｎは０、１または２であり；ｎが１である場合、Ａは保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；ｎが２である場合、Ａは同一のまたは異なる保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；およびＢは非置換または置換のＣ₂からＣ₈のアルキレンである；の化合物またはその医薬として受容可能な塩に関する。式Ｉの化合物はＴＮＦ−α分泌の阻害剤として有用であり、特にＴＮＦ−α変換酵素（ＴＡＣＥ）の阻害剤として有用である。本発明はまたＴＮＦ−αの過剰産生または非制御的産生により特徴付けられる疾患をもつ哺乳類の処置法にも関している。本方法は生物学的に活性な有効量の式II：式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボキシルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は各々互いに独立して水素、アルキレン（シクロアルキル）、ＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、天然に存在するα−アミノ酸の保護または非保護の側鎖であり；基−Ｒ⁶Ｒ⁷（式中、Ｒ⁶はＣ₁からＣ₈のアルキルであり、およびＲ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)またはハロゲンであり（式中、Ｒ⁴およびＲ⁵は各々互いに独立して水素または置換または非置換のＣ₁ からＣ₈のアルキルである）；ｎは０、１または２であり；Ｙは水素、非置換または置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、アルキレン（シクロアルキル）、基−Ｒ⁸−ＣＯＯＲ⁹または基−Ｒ¹⁰Ｎ(Ｒ¹¹)(Ｒ¹²)（式中Ｒ⁸はＣ₁からＣ₈のアルキレンであり、Ｒ⁹は水素またはＣ₁からＣ₈のアルキルであり、Ｒ¹⁰ は非置換または置換のＣ₁からＣ₈のアルキレンであり、Ｒ¹¹およびＲ¹²は各々互いに独立して水素またはＣ₁からＣ₈のアルキルである）であり；ｎが１である場合、Ａは保護または非保護のα−アミノ酸ラジカルであり；およびｎが２である場合、Ａは同一のまたは異なる保護または非保護のα−アミノ酸基である；の化合物およびその医薬として受容可能な塩；ＬＰＳ−誘導敗血症症候群のマウスモデルにおいて２５ｍｇ／ｋｇで投与された場合血清ＴＮＦ−αレベルを少なくとも８０％減少させることができる；および医薬として受容可能な担体を含む組成物を哺乳類に投与する工程を含んでいる。本発明は活性成分として式Ｉに従った化合物を含む医薬組成物を含んでいる。さらに、式IIに従った化合物およびＴＮＦを結合する蛋白質を含む医薬組成物が記載されている。ＴＮＦを結合する蛋白質の例はＴＮＦ抗体またはＥＰＡ０４１８０１４（本出願の譲受人に譲渡されている）に記載されている可溶性ＴＮＦレセプターである。ＥＰＡ０４１８０１４の開示はここに引例として含まれている。以下の定義がここでは使用された。”アルキル”とは直鎖または分岐鎖、一価、飽和または不飽和の１から８の炭素原子を持つ炭化水素基を意味している。アルキル基には直鎖群メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニルおよびオクテニル、ならびにそれらの分岐鎖異性体が含まれる。 ”置換アルキル”とは一つまたはそれ以上のヒドロキシ、アミノ、ハロゲン、またはチオールで置換されたアルキル基を意味している。 ”アルキレン”とは前に定義した二価のアルキル基を意味している。 ”置換アルキレン”とは一つまたはそれ以上のヒドロキシ、アミノ、ハロゲン、またはチオール基で置換されたアルキレン基を意味している。 ”アリール”とは芳香族またはヘテロ芳香族基を意味しており、例えば、随意に一つまたはそれ以上のＣ₁からＣ₈のアルキル、ヒドロキシ、アミノ、ハロゲン、チオールまたはアルキル基で置換されたフェニル、ナフチル、キノリル、チエニル、フリルなどを含んでいる。 ”アルキレン（シクロアルキル）”とは構造−Ｒ¹³−Ｒ¹⁴（式中、Ｒ¹³は前に定義したようなアルキレンであり、Ｒ¹⁴は例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどの一価の環式アルカン基である）の基を示している。 ”アルキレンアリール”とは基−Ｒ¹⁵−Ｒ¹⁶（式中、Ｒ¹⁵は前に定義したような置換または非置換アルキレン基であり、Ｒ¹⁶は前に定義したような置換または非置換アリール基である）を意味している。 ”α−アミノ酸”とは２２の通常のアミノ酸を意味しており、例えば、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、ヒドロキシプロリン、イソロイシん、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシンおよびバリン。 ”保護されたアミノ酸”および”α−アミノ酸の保護された側鎖”とはアミノ酸の側鎖が恒久的にまたは一時的に、続いての合成工程の間に起こり得る望ましくない枝分かれ、構造的修飾または転位から側鎖を保護または防御する化学基と結合されていることを意味している。保護基自体同様、これらの目的のためにそのような保護基を使用することも本分野ではよく知られている。常用の保護基の例はＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）およびＮ−９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）である。式IIのある種の化合物の定義に使用された”生物学的に活性”とは、（ａ）ＴＮＦ−αの分泌を阻害する（ｂ）ＴＡＣＥによる膜結合ＴＮＦ−αの切断を阻害する（ｃ）ＬＰＳ−誘導敗血症症候群の標準マウスモデルにおいて２５ｍｇ／ｋｇで投与された場合血清ＴＮＦ−αレベルを少なくとも８０％減少させることができる化合物を示している。式ＩおよびIIの化合物において、Ｘに対して好適なラジカルはヒドロキサム酸、チオールおよびホスホリルである。より好適なＸのラジカルはヒドロキサム酸およびチオールであり、最も好適なラジカルはヒドロキサム酸である。ｍに対して好適な値は１である。好適なＲ¹またはＲ²基は水素、Ｃ₁からＣ₈のアルキルおよびＣ₁からＣ₈のアルキレンアリールである。Ｒ¹またはＲ²がアルキルである場合、Ｃ₁からＣ₆のアルキルが好適であり、最も好適であるのはＣ₁からＣ₄のアルキルである。Ｒ¹またはＲ²がアルキレンアリールである場合、Ｃ₁からＣ₆のアルキレンが好適であり、最も好適であるのはＣ₁からＣ₄のアルキレンであり；および好適なアリール基はフェニルおよび置換フェニルである。Ｒ¹またはＲ²に対し最も好適なアルキレンアリールはＣ₁からＣ₄のアルキレンフェニルである。Ｒ¹に対し最も好適な基は水素であり、およびＲ²に対し最も好適な基はイソブチルである。好適なＲ³基は置換および非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルおよびＣ₁からＣ₈のアルキレンアリールである。Ｒ³がアルキルである場合、Ｃ₁からＣ₆のアルキルが好適であり、より好適であるのはＣ₁からＣ₄のアルキルであり、ｔ−ブチルが最も好適である。Ｒ³がＣ₁からＣ₈のアルキレンアリールである場合、Ｃ₁からＣ₆ のアルキレンが好適であり、より好適であるのはＣ₁からＣ₄のアルキレンであり；および好適なアリール基は各々随意にヒドロキシ、アミノ、ハロゲン、チオールまたはアルキル基で置換されたフェニル、ナフチルおよびチエニルである。従って、Ｒ³に対して好適な基はＣ₁からＣ₄のアルキレンフェニル、Ｃ₁からＣ₄ のアルキレンナフチルおよびＣ₁からＣ₄のアルキレンチエニルである。より好適であるのはＣ₁からＣ₄のアルキレンナフチルであり、メチレンナフチルが最も好適である。Ｒ³が天然に存在するα−アミノ酸の保護または非保護側鎖である場合、Ｒ³は好適にはアルギニン、リジン、トリプトファンまたはチロシン側鎖である。しかしながら、Ｒ³に対して最も好適な基はｔ−ブチル、メチレン（シクロヘキシル）およびメチレン−（２’−ナフチル）である。基Ａは好適には非保護の天然のアミノ酸残基である。より好適な天然の残基はアラニル基または非保護セリル基である。Ａに対して最も好適な基はアラニル残基である。さらに好適な化合物はｎが０または１の化合物であり、ｎが１であるのが最も好適である。Ｂに対して好適な基はＣ₂からＣ₆のアルキレンである。より好適であるのはＣ₂ からＣ₄のアルキレンであり、ジメチレンが最も好適である。式IIに従った化合物に対しては、Ｙは好適には水素、非置換または置換のＣ₁ からＣ₈のアルキルまたは基−Ｒ¹⁰Ｎ(Ｒ¹¹)(Ｒ¹²)である。最も好適であるのは基−Ｒ¹⁰Ｎ(Ｒ¹¹)(Ｒ¹²)であり、好適にはＲ¹⁰が非置換または置換のＣ₁からＣ₆ のアルキレン、Ｒ¹¹およびＲ¹²が各々独立して水素またはＣ₁からＣ₆のアルキルである。より好適なＲ¹⁰基は非置換または置換のＣ₁からＣ₄のアルキレンであり、ジメチレンが最も好適である。Ｒ¹¹およびＲ¹²に対してより好適な基は水素またはＣ₁からＣ₄のアルキルであり、最も好適であるのは水素である。本発明の化合物は以下に概説した方法に従って合成でき、付随する反応スキームおよび方法は以下の実施例に詳述されている。一般合成スキーム１に関して、阻害化合物はカルボン酸またはエステル化合物（Ｉｏ）［式中、ＲはＨまたはＣ₁からＣ₈のアルキルであり、およびＰはＣＢＺ、ＢＯＣ、ＦＭＯＣまたは他の適当な保護基である（Greene T.,Wuts P.,"Protective Gr oups in Organic Synthesis"第２版;Wiley:New York,1991;７章）］を対応するヒドロキサム酸またはヒドロキサム酸エステル（Ｉｐ）に変換することにより製造されるであろう。化合物（Ｉｐ）において、Ｒ’はＨ、ＴＭＳ、ｔ−Ｂｕ、Ｂｚｌまたはその他の基であり、これらの化合物またはカルボン酸の活性化形（Bo danszky,M.,Bodanszky,A.,"The Practice of Peptide Synthesis";Springer-Ver lag:Berlin,1984;II章）を、変換を有効にする条件下でヒドロキシルアミン試薬で処理することにより製造される。続いて保護基ＰおよびＲ’を除去すると化合物（Ｉｑ）が生じる。上で使用された略号は以下の基に対応している：Ｂｚｌ＝ベンジル；ＢＯＣ＝ｔ−ブトキシカルボニル、ｔＢｕ＝ｔ−ブチル；ＣＢＺ＝ベンジルオキシカルボニル；ＦＭＯＣ＝９−フルオレニルメトキシカルボニル；ＴＭＳ＝トリメチルシリル。上記のヒドロキシルアミン試薬は、ヒドロキシルアミンまたは市販品として入手可能なＯ−トリメチルシリルヒドロキシルアミン、Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキシルアミンまたはＯ−ベンジルヒドロキシルアミンのようなＯ−保護ヒドロキシルアミンであろう。前駆体化合物（Ｉｏ）の製造はジカルボン酸化合物（Ｉｅ）とアミン（Ｉｎ）との縮合により実施されるであろうが、ここでＲ”は化合物（Ｉｎ）の活性エステル、無水物またはアミン末端と縮合を起こしてペプチド結合を形成するその他の基のような活性化基（Bodanszky,M.ら、上記文献）である。化合物（Ｉｅ）の製造は典型的には以下のように実施される：２−オキソカルボン酸化合物のナトリウム塩（Ｉａ）をベンジルブロミドでエステル化してベンジルエステル（Ｉｂ）を製造する。化合物（Ｉａ）のいくつかの例は種々の塩またはカルボン酸として市販品として入手可能である。他のものは合成的に製造できる（例えば、Nimitz,J.et al.,J.Org.Chem.46:211,1981;およびWeinstrock,L. et al.,Synth.Commum. 11:943,1981を参照されたい）。ベンジル−エステル化合物（Ｉｂ）をウィッティヒ試薬（典型的にはメチル−またはｔｅｒｔ−ブチルトリフェニルホスホラニリデンアセテート）と反応させ、アルケン（Ｉｃ）をＥ −およびＺ−異性体の混合物として形成させる。アルケン化合物（Ｉｃ）の還元は、適当な触媒（典型的にはパラジウム活性炭）存在下にて水素で実施され、二重結合の水素化とベンジルエステルの除去によりモノ−エステル化合物（Ｉｄ）を鏡像異性体の混合物として得る。化合物（Ｉｅ）はモノ−エステル化合物（Ｉｄ）を種々のカルボン酸活性化法を用いて処理することにより得られる。アミン化合物（Ｉｎ）の製造は、化合物（Ｉｌ）と化合物（Ｉｋ）（式中、Ｐ ’はＰ以外のアミン保護基であり、Ｒ”は活性エステル、無水物または（Ｉｋ）のアミン末端と縮合を起こしてペプチド結合を形成し、化合物（Ｉｍ）を生じさせるさせるその他の基のような活性化基である）を縮合することにより達成される。Ｐ’の除去は適当な条件下で行われ（Bodanszky,M.,Bodanszky,A.,"The Practic e of Peptide Synthesis";Springer-Verlag:Berlin,1984;III章）、化合物（Ｉｎ）が対応するアミンかまたはアミン塩として生成される。化合物（II）は市販品として入手可能なＮ−保護カルボン酸から製造されるか、または常法により合成できる。（Ｉｋ）の製造は化合物（Ｉｉ）と一保護ジアミン（Ｉｈ）（式中、ＰはＣＢＺ、ＢＯＣ、ＦＭＯＣまたは他の適当な保護基であり；およびＰ’はＰ以外のアミン保護基であり、およびＲ”は活性エステル、無水物または化合物（Ｉｈ）の非保護アミン末端と縮合を起こしてアミド結合を形成し、化合物（Ｉｊ）を生じさせるその他の基のような活性化基である）を結合させることにより実施される。適当な条件下でＰ’を除去して、化合物（Ｉｋ）が対応するアミンかまたはアミン塩として生成される。前駆体化合物（Ｉｈ）はアミン−ニトリル（Ｉｆ）から二工程で製造される。化合物（Ｉｆ）のいくつかの例は市販品として入手可能であり、その他のものは古典的方法により容易に合成できる。アミン−ニトリル（Ｉｆ）は適当な保護基試薬で保護され、保護アミン−ニトリル（Ｉｇ）が製造される。化合物（Ｉｇ）において、Ｐは典型的にはＣＢＺ、ＢＯＣまたはＦＭＯＣ基であるが、他の適当な基でもよい。保護アミン−ニトリル（Ｉｇ）はボラン−硫化メチル複合体または水素化ホウ素ナトリウム／塩化コバルト（II）のような試薬による還元によりアミン塩として単離可能な一保護ジアミン（Ｉｈ）を与える。化合物（Ｉｉ）は常法により対応するＰ’−保護ジペプチドまたはＰ’−保護アミノ酸のカルボキシル形から製造されるかまたは市販品として購入できる。式IIの化合物は経口、非経口（吸入、経皮、鼻孔内、点眼、粘膜、直腸を通して）または局所的に投与できる。そのような投与は通常の補助剤および担体物質を含む服用単位製剤として行うことができる。ここで使用する術語”非経口”には皮下注射、静脈内、筋肉内、槽内注射または注入技術が含まれる。単一剤形を製造するために担体物質と混合される活性成分の量は処置される患者および特定の投与様式に依存して変化するであろう。そのような担体物質はよく知られており、例えば、欧州特許出願第0 519 748号（ここに引例として含まれている）に記載されている。しかしながら、特定の患者の特別な用量レベルは用いられる特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄速度、薬剤の組み合わせおよび治療を受けている特定の疾患の重症度を含む種々の因子に依存するであろう。以下の実施例は本発明の例示である。薄層クロマトグラフィーはシリカゲル６０Ｆ₂₅₄プレートを使用して実施された。実施例１から９の反応スキームは実施例１４の後ろに付けてある。ここで使用する”化合物Ａ”とはSpatola et al. ,Peptides:Chemistry and Biology,Proceedings of the 12th American Peptide Symposium,Smith,J.A.,Rivier,J.E.編,ESCOM,Leiden,Netherlandsにより記載されている化合物Ｎ−（Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４ −メチルペンタノイル）Ｌ−３−（２’ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミドを示している。化合物Ａは以下の方法で製造され、その反応スキームは反応スキームＡとして付記されている。化合物Ａの製造反応スキームＡおよびスキーム２を参照し、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中、２．０（６．３ミリモル）ｇのＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２’ −ナフチル）アラニンおよび０．８０ｇ（６．９ミリモル）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドおよび１．８ｇ（９．５ミリモル）の１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩の混合物を室温で９０分間撹拌した。この溶液に１．２ｇ（９．５ミリモル）のＬ−アラニンアミド塩酸塩続いて５ｍｌの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した１．４ｍｌ（９．５ミリモル）のトリエチルアミンを加えた。室温で１４時間撹拌した後、溶媒を真空下で除去した。残渣を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解し、１ＭＨＣｌ（３ｘ５０ｍｌ）、水（２ｘ５０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム（２ｘ５０ｍｌ）および最後に食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液をを濾過し、真空下で濃縮すると２．１ｇ（８６％の収率）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３ −（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（Ａ₁）を白色固形物として得た。ＴＬＣ：Ｒ_f ０．１６（クロロホルム−イソプロパノール１９：１）；ＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳ０）δ1.15(m,3H),1.24(s,9H),3.05(m,2H),4.23(m,2H),7.02(s, 1H),7.07(s,2H),7.35(s,1H),7.47(m,2H),7.71(s,1H),7.82(m,3H),7.98(d,1H)。１．８ｇ（４．７ミリモル）の（Ａ₁）のジクロロメタン（１５ｍｌ）懸濁液を氷浴で冷却した。トリフルオロ酢酸（１５ｍｌ）を加え、均一溶液は５℃で５分間撹拌した後室温まで放置して暖めた。１時間後、ジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸を真空下で除去した。残渣を５．６ｍｌ（３３ミリモル）のトリエチルアミンを含む無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８ｍｌ）に溶解した。この溶液に１．２ｇ（４．２ミリモル）の（Ｉｄ）を一度に添加した。１４時間撹拌した後、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを真空下で除去すると残渣を得た。残渣を酢酸エチル（２５０ｍｌ）に溶解し、１ＭＨＣｌ（２ｘ７５ｍｌ）、水（７５ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２ｘ７５ｍｌ）および最後に食塩水（７５ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過し、真空下で濃縮すると１．５ｇ（８９％の収率）のＮ−［Ｄ，Ｌ−２−（メトキシカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル］−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（Ａ₂）を白色固形物として得た。ＴＬＣ：Ｒ_f ０．５７（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；ＭＳ：ｍ／ｅ４５５（Ｍ⁺）アルゴン雰囲気下、０．６２ｇ（１１ミリモル）のＫＯＨを２．８ｍｌの熱メタノールに加えた混合物と０．６１ｇ（８．８ミリモル）のヒドロキシルアミン塩酸塩を２．８ｍｌのメタノールに加えた混合物を合わせた。氷浴で冷却後、反応液は、１．０ｇ（２．２ミリモル）の（Ａ₂）および１ｍｌの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを含むフラスコへ濾過して加えた。１８時間撹拌した後、溶媒を真空下で除去した。固形物を熱酢酸エチル（２５０ｍｌ）に溶解し、１６ｍｌの１０％硫酸水素カリウム溶液で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥する前に、有機層をその沸点まで加熱した。濾過し、続いて濾液を真空下で濃縮すると固形物が得られ、エーテル（５０ｍｌ）中で摩砕して濾過により集めると、０．７７ｇ（７７％の収率）のＮ−［Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル］−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル− Ｌ−アラニンアミド（Ａ）を白色固形物として得た。（Ａ）のジアステレオマーはＣ₁₈カラムを用い、０．１％のトリフルオロ酢酸を含む水に同様に０．１％のトリフルオロ酢酸を含むアセトニトリルの濃度勾配をかけて（３０分で０−６０％）（”方法Ａ”）溶出させる逆相ＨＰＬＣにより分離および精製され、精製された速く溶出するジアステレオマーおよび精製された遅く溶出するジアステレオマー、各々２１分および２３分の保持時間を持っている、が得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f ０．１３（クロロホルム−メタノール９：１）；¹ ＨＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳ０）δ0.63(d,3H),0.72(d,3H),0.90(m,1H),1.21(d,3H ),1.26(m,2H),1.86(m,2H),2.63(m,1H),2.99(m,1H),3.24(m,1H),4.18(q,1H),4.55 (m,1H),7.05(s,1H),7.28(s,1H),7.48(m,3H),7.72(s,1H),7.83(m,3H),7.91(d,1H) ,8.27(d,1H);¹³ＣＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ／ＣＤ₃ＣＮ）δ 17.7，21.8，23.1，26.0，3 6.3，37.4，41.5，42.2，50.1，55.5，126.7，127.1，128.2，128.5，128.8，12 9.0，133.2，134.2，135.6，170.4，173.0，177.4，177.5。ＭＳ：ｍ／ｅ４５６（Ｍ⁺）実施例１Ｎ−［Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４− メチルペンタノイル］−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−アミノメチルアミド（化合物１）の合成反応スキーム２を参照し、１９．６ｍｌ（０．１６４モル）のベンジルブロミドを含む無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）に２５ｇ（０．１６４モル）の４−メチル−２−オキソペンタン酸ナトリウム塩を加えたスラリー液を室温で４日間激しく撹拌した。溶媒は真空下で除去された。残渣を２５０ｍｌのヘキサンに溶解し、水（３ｘ５０ｍｌ）および食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると３３．２ｇ（９２％の収率）の４−メチル−２−オキソペンタン酸ベンジル（１ａ）を粘稠な無色油状物として得た。ＴＬＣ：Ｒ_f０．７０（酢酸エチル−ヘキサン１：４）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 0.94(d，6H)，2.18(m,1H)，2.71(d，2H) ，5.26(s，2H)，7.37(m，5H);13ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 22.5，24.2，48.1 ，67.9，128.7，128.8，128.9，134.7，161.3，194.0。２６．４ｇ（０．１２０モル）のベンジルエステル（１ａ）および４０．１ｇ（０．１２０モル）のメチル（トリフェニルホスホラニリデン）アセテートのジクロロメタン（４１０ｍｌ）溶液を室温で１８時間撹拌した。真空下ジクロロメタンを除去すると固形物が得られ、数倍の量のヘキサンと摩砕した（４ｘ１００ｍｌ）。ヘキサンを濾過して集め、併せて真空下で濃縮すると油状物が得られ、それを減圧下で蒸留すると（ｂｐ．１３８−１５７℃／０．８ｍｍＨｇ）２７．８ｇ（８４％の収率）の精製されたＥ，Ｚ−２−イソブチル−３−（メトキシカルボニル）プロピオン酸ベンジル（１ｂ）を黄色油状物として得た。ＴＬＣ：Ｒ_f ０．５３および０．６７；ＥおよびＺ異性体（酢酸エチル−ヘキサン１：４）；ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 0.91(m，6H，CH(CH3)2)，1.85(m,1H，CH(CH3)2)，2 .23(Z)および2.79(E)(d，2H，C=CCH2)，3.62(Z)および3.74(E)(s，3H，CO2CH3) ，5.23(E)および5.27(Z)(s，2H，CO2CH2C6H5)，5.82(Z)および6.82(E)(s，1H,CH =C)，7.35(m，5H，C6H5)。７５ｍｌのメタノールに溶解した２７．２ｇ（０．０９８モル）の（１ｂ）に４．０ｇの１０％パラジウム炭素を加えた懸濁液を４気圧の水素下で２４時間激しく撹拌した。濾過により触媒を除き、濾液を真空下で濃縮すると油状物が得られ、それを減圧下で蒸留すると（ｂｐ．１１５−１２１℃／０．５ｍｍＨｇ）１２．７ｇ（６８％）のＤ，Ｌ−２−イソブチル−３−（メトキシカルボニル）プロピオン酸（１ｃ）が無色油状物として得られた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 0.94(m，6H)，1.36(m,1H)，1.63(m，2H)，2.58(m，2H)，2.95(m，1H)，3.70(s ， 3H),10.8(bs,1H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 22.1，22.3，25.6，35.8，39.2 ，40.8，51.7，172.2，181.3。１２．３ｇ（０．０６５モル）の（１ｃ）および７．５ｇ（０．０６５モル）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドを溶解した無水テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）溶液を氷浴で約５℃に冷却した。１３．５ｇ（０．０６５モル）の１，３− ジシクロヘキシルカルボジイミドを溶解した無水テトラヒドロフラン（５０ｍｌ）溶液を加えた。混合物は約５℃で１時間撹拌した後、冷蔵庫内に一夜放置した。濾過して副精製物のジシクロヘキシル尿素を除いた後、濾液を真空下で濃縮すると固形物が得られ、酢酸エチル−ヘキサンから再結晶すると１４．５ｇ（７８％の収率）のＤ，Ｌ−２−イソブチル−３−（メトキシカルボニル）プロピオン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジルエステル（１ｄ）が白色固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．４６（クロロホルム−イソプロパノール１９：１）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 0.97(m,6H)，1.61(m,2H)，1.80(m,IH)，2.72(m,2H )，2.84(s,4H)，3.74(s,3H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 21.9，22.5，25.5． 36.2，37.2，41.0，52.0，168.8，170.6，171.0。２４．９ｇ（０．１０モル）のスクシンイミジルカルボン酸ベンジルおよび１０．２ｇ（０．１１モル）のアミノアセトニトリル塩酸塩を溶解した無水Ｎ，Ｎ −ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液に１５．４ｍｌ（０．１１モル）のトリエチルアミンを室温で３０分以上かけて加えた。混合物は室温で１２時間撹拌した。真空下でＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを除去し、得られた残渣を３５０ｍｌの酢酸エチルに溶解した。この溶液は水（３５０ｍｌ）、２ＭＨＣｌ（３ｘ５０ｍｌ）および食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると１７．３ｇ（収率９１％）のＮ−ＣＢＺ−アミノアセトニトリル（１ｅ）が琥珀色の固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．６５（酢酸エチル−ヘキサン１：１）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ4.05(d,2H)，5.13(s,2H)，5.46(bt,1H)，7.35(bs,5H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 29.5，67.9，116.2，128.3，128.5，128.7，135.5，155.7。乾燥アルゴン雰囲気下、２４．３ｇ（０．１２８モル）のＮ−ＣＢＺ−アミノアセトニトリル（１ｅ）を無水テトラヒドロフラン（３２ｍｌ）に溶解させた。溶液を撹拌し、シリンジを通して６４ｍｌのボラン−硫化メチル複合体（２Ｍテトラヒドロフラン溶液）を添加した。混合物を加熱還流し、一夜撹拌した。混合物を氷浴で冷却し、激しく撹拌しながらゆっくりと５ｍｌの水を加えた。撹拌を約５分間続けた後、７５ｍｌの６ＭＨＣｌを徐々に加えた。混合物をさらに１時間撹拌した後、真空下、過剰のテトラヒドロフランおよびジメチルスルフィドを除去した。水性残渣はエーテルで抽出した（２ｘ５０ｍｌ）。エーテル抽出物は廃棄した。水性残渣のｐＨを濃ＮＨ₄ＯＨを加えることにより１１に調整した。得られた水性溶液を酢酸エチルで抽出し（３ｘ１００ｍｌ）、酢酸エチル抽出液を併せて食塩水で洗浄した（５０ｍｌ）。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮した。得られた油状物は３０ｍｌの無水メタノールに溶解し、冷メタノール−ＨＣｌで処理し、真空下で濃縮すると固形物が得られた。固形物はエーテルと摩砕し、濾過して集めると１５．１ｇ（収率５１％）のＮ −ＣＢＺ−エチレンジアミン塩酸塩（１ｆ）が白色粉末として得られた。¹ＨＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）δ 3.15(m,2H)，3.46(m,2H)，5.14(s,2H)，7.46(bs,5H);¹³ＣＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）δ 41.1，42.6，70.4，131.0，131.3，131.7，132.0，139.4，1 61.7。１０．０ｇ（０．０４３モル）の（１ｆ）および１０．３ｇ（０．０３６モル）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）溶液を氷浴で冷却した。この溶液に７．６ｍｌ（０．０５４モル）のトリエチルアミンの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液を３０分以上かけて添加した。反応液は約５℃で１時間、その後室温で１時間撹拌した。真空下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを除去し、生じた残渣は３００ｍｌの酢酸エチルに溶解した。この溶液は１ＭＨＣｌ（３ｘ１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３ｘ１００ｍｌ）および最後に食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると１２．４ｇ（収率９４％）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｇ）が白色固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．６７（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 1.27(d,3H),1. 40 (s,9H)，3.32(m,4H)，4.15(m,1H)，5.06(s,2H)，5.51(d,1H)，5.90(m,1H)，7.19 (m,1H)，7.31(bs,5H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 18.5，28.2，39.6，40.5， 50.1，66.5，79.8，127.9，128.3，136.3，155.4，156.9，173.7。１２．０ｇ（０．０３３モル）の（１ｇ）のジクロロメタン（２５ｍｌ）溶液を氷浴で冷却し、２５ｍｌのトリフルオロ酢酸を加えた。反応液を約５℃で２０分間撹拌した後、室温で撹拌する。９０分後、ジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸を真空下で除去した。得られた残渣を２００ｍｌの酢酸エチルに溶解し、２Ｍ水酸化ナトリウム（２００ｍｌ）および食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると７．８６ｇ（収率９０％）のＬ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｈ）が白色固形物として得られた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 1.2 8(d,3H)，2.09(m,2H)，3.33(m,4H)，3.47(q,1H)，5.07(s,2H)，5.59(bt,1H)，7. 33(bs,5H)，7.69(bt,1H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 21.3，39.5，40.9，50. 4，66.6，128.0，128.1，128.4，136.4，156.9，176.7。乾燥アルゴン雰囲気下、８．９ｇ（０．０２８モル）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３− （２’−ナフチル）アラニンおよび３．２ｍｌ（０．０２８モル）の４−メチルモルホリンの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液を−１５℃に冷却し、３．６７ｍｌ（０．０２８モル）クロロギ酸イソブチルで処理した。混合物は−１５℃で３０分間撹拌した後、７．５ｇ（０．０２８モル）の（１ｈ）および３．２ｍｌ（０．０２８モル）の４−メチルモルホリンの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液を１０分以上かけてゆっくりと加えた。反応液は−１５℃で２時間、続いて室温で１８時間撹拌した。真空下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを除去し、生じた固形物は１リットルの熱酢酸エチルに溶解した。熱溶液は１ＭＨＣｌ（３ｘ１５０ｍｌ）、水（１５０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３ｘ１５０ｍｌ）および最後に食塩水（１５０ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、熱溶液を濾過して真空下で濃縮した。得られた黄色の固形物は４００ｍｌの冷１：３酢酸エチル：ヘキサンと摩砕し、濾過して集めると１４．５ｇ（収率９１％）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｉ）が白色固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．５９（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 1.26(d,3H )，1.35(s,9H)，3 16(m,6H)，4.42(m,1H),4.50(m,1H)，5.07(s,2H)，5.25(d,1H) ，5.69(m,1H)，6.82(m,1H)，6.90(d.1H)，7.29(s,1H)，7.31(bs,5H)，7.45(m,2H )，7.61(s,1H)，7.76(m,3H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 18.0，28.2，38.2， 39.7，40.6，49 0，55.9，66.6，80.6，125.8，126.2，127.2，127.5，127.6，1 27.9，128 0，128.4，132.4，133.3，133.8，134.2，155.4，156.7，171.4，172 .4。２．５ｇ（０．００４４モル）の（１ｉ）をジクロロメタン（１０ｍｌ）に懸濁して氷浴で冷却し、１０ｍｌのトリフルオロ酢酸を加えた。均質な溶液は約５ ℃で２０分間撹拌し、放置して室温まで暖めた。９０分後、ジクロロメタンおよびトリフルオロ酢酸を真空下で除去した。得られた残渣は１００ｍｌの酢酸エチルに溶解し２ＭＮａＯＨ（３ｘ５０ｍｌ）、水（５０ｍｌ）および食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。非均質な溶液は１００ｍｌの無水エタノールを含むフラスコに移し、均質になるまで加熱した。熱溶液は少量の無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮すると固形物を得た。固形物は冷１：３酢酸エチル：ヘキサンと摩砕し、濾過して集めると１．４６ｇ（収率７１％）のＬ−３−（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｊ）が白色固形物として得られた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 1.33(d,3H)，1.60(bs,2H)，2.83(m,1H)，3.34(m,5H)，3.82(m,1H)，4 .44(m,1H)，5.07(s,2H)，5.33(t,1H)，6.92(t,1H)，7.31(bs,5H)，7.36(s,1H)， 7.48(m,2H)，7.65(s,1H)，7.72(d,1H)，7.81(m,3H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃） δ 17.6，40.6，40.7，40.9，48.6，56.1，66.9，125.4，125.8，127.2，127.4 ，127.5，127.8，127.9，128.4，132.4，133.4，135.1，136.5，156.1,172.7，1 74.7。１．４ｇ（０．００３モル）の（１ｊ）および０．４２ｍｌ（０．００３モル）のトリエチルアミンの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍｌ）溶液に０．８７ｇ（０．００３モル）の（１ｄ）を加えた。混合物は室温で１８時間撹拌した。真空下、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを除去した。得られた固形物を２００ｍｌの熱酢酸エチルに溶解し、１ＭＨＣｌ（３ｘ５０ｍｌ）、水（５０ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３ｘ５０ｍｌ）および最後に食塩水（５０ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、熱酢酸エチル溶液を濾過して真空下で濃縮すると１．７ｇ（収率８９％）のＤ，Ｌ−２−（メトキシカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル− Ｌ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｋ）が灰色がかった白色固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．３２（クロロホルム−イソプロパノール１９：１）。アルゴン雰囲気下、２．６６ｇ（０．０４７モル）のＫＯＨを１２ｍｌの熱メタノールに加えた混合物と、２．６３ｇ（０．０３７モル）のヒドロキシルアミン塩酸塩を１２ｍｌの熱メタノールに加えた混合物を混ぜ合わせた。氷浴で冷却後、６．０ｇ（０．００９５モル）の（１ｋ）および１２ｍｌの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを含んだフラスコ内へ反応液を濾過した。アルゴン下で１８時間撹拌後、溶媒を真空下で除去した。得られた固形物は１００ｍｌの酢酸エチルと摩砕し、濾過して集めると５．２ｇ（収率８６％）のＤ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル−Ｌ−３−（２’−ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチルアミド（１ｍ）が灰色がかった白色固形物として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．２３および０．３６（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；¹³ＣＮＭＲ（ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ 18.0，21.7，23.2，25.1，35.7，36.6，37.3，38.7， 40.7，40.8，48.5，54.0，65.3，125.3，125.9，127.3，127.4，127.7，127.9， 128.3，131.8，132.9，135.7，136.0，137.1，156.1，167.1，170.7，172.7，17 4.7。ＭＳ：ｍ／ｅ６３４（Ｍ⁺）。２．０ｇ（０．００３１モル）の（１ｍ）を溶解した氷酢酸（７５ｍｌ）に１．０ｇの１０％パラジウム炭素を加えた懸濁液を４気圧の水素下で２４時間かき混ぜた。濾過により触媒を除き、濾液を真空下で除去して得られる残渣を５０ｍｌのエーテルと摩砕して真空下で乾燥させると２．０ｇの粗Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル−Ｌ−３−（２’− ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン，２−（アミノ）エチルアミド（１）が得られた。（１）のジアステレオマーはＣ₁₈カラムを用い、０．１％のトリフルオロ酢酸を含む水に同様に０．１％のトリフルオロ酢酸を含むアセトニトリルの濃度勾配をかけて（３０分で０−６０％）溶出させる逆相ＨＰＬＣにより分離された（以後”方法Ａ”）。精製されたジアステレオマー（１ｎ）および（１ｏ）は各々２０分および２２分の保持時間を持っていた。ジアステレオマー（１ｎ）は下記のＮＭＲデータを示した。¹³ＣＮＭＲ（Ｄ₂Ｏ）δ 24.6，28.9，29.1，30.3，33 .2，43.4，44.8，47.0，48.6，49.1，57.6，62.8，134.2，134.6，135.3，135.6 ，135.8，135.9，136.4，140.2，141.2，142.1，178.3，180.8，183.1，185.4；ＭＳ：ｍ／ｅ５００（Ｍ⁺）。以下は変法であり、望ましくない立体異性体（Ｓ）と比較して望まれる立体異性体（Ｒ）がより大きな割合で生成されるので化合物１（ｃ）の製造により好適な方法である。反応工程および各々の化合物のための参照番号は反応スキーム１０に記載されている。 Newman,M.S.:Kutner A.,J.Am.Chem.Soc.,1951,73,4199の方法に従い、１．２９ｇ（０．０５６モル）のナトリウムを１５ｍｌの無水メタノールに溶解させることにより調製したナトリウムメトキシドの溶液を、２５ｇ（０．２４２モル）のＬ−バリノールと５００ｍｌの炭酸ジエチルのスラリー液に加えた。反応混合物は続いて２時間加熱し、７５−１２３℃の温度範囲の蒸留物２００ｍｌを集めた。蒸留物は廃棄し、反応混合物は放置して室温まで冷却して一夜放置した。ロータリーエバポレーターを用いて真空下反応混合物から過剰の炭酸ジエチルを除去すると残渣が得られた。残渣を５００ｍｌの酢酸エチルに溶解し、水（３ｘ２００ｍｌ）および食塩水（２００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると白色固形物が得られた。固形物を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶すると２３．２ｇ（収率７４％）の（Ｓ）−４−イソプロピル−２−オキサゾリジノン１２（ａ）が白色針状晶として得られた。ＴＬＣ：Ｒ_f０．５０（酢酸エチル−ヘキサン３：１）；¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ 0.90(d,J = 6.7Hz,3H)，0.97(d,J=6.7Hz,3H)，1.72(m,1H)，3.63(m,1H)， 4.10(dd,J=8.7,6.4Hz,1H)，4.45(m,1H)，7.32(bs,1H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃ ）δ 17.5，17.8，32.6，58.3，68.5，160.7。 Vogel,A．In Vogel's Practical Organic Chemistry，4th Ed.;Wiley & Sons: New York,1978;p498 および1208の方法に従い、５０ｇ（０．４３モル）の４− メチル吉草酸に３８ｍｌ（０．５２モル）のチオニルクロリドを撹拌しながら３０分以上かけて滴加することにより、４−メチルペンタノイルクロリド１２（ｂ）を生成させた。添加の間混合物を加熱し、激しいＨＣｌガスの発生を導いた。チオニルクロリドの添加が完了したら、反応混合物は１時間還流させた。反応混合物を蒸留し、１３５から１４８℃の間の蒸留物集めた。この物質は再蒸留し、４７．３ｇ（収率８１％）の４−メチルバレロイルクロリド１２（ｂ）が無色液体として１４３から１４８℃の間で集められた。¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ 0 .92(d,J=6.2 Hz,6H)，1.62(m,3H)，2.90(t,J=7.4 Hz,2H);¹³ＣＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ22.0，27.2，33.6，45.3，173.9。 Evans,D.A.,Bartoroli,J.,Shih,T.L．J.Am.Chem.Soc. 1981,103,2127の方法に従い、３２．３ｇ（０．２５モル）の無水テトラヒドロフラン（５００ｍｌ）溶液を−７８℃に冷却し、１００ｍｌの２．５Ｍ（２．５モル）ｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液を加えた。添加が完了したら混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、続いて０℃まで暖めて２０分間撹拌した。反応混合物は再び−７８℃に冷却し，３４．６ｍｌ（０．２５モル）の１２（ｂ）を１０分以上かけて添加した。撹拌を−７８℃で１時間続けた後、反応混合物は撹拌しながら室温まで暖めて一夜放置した。ロータリエバポレーターにより真空下でテトラヒドロフランを除去するとオレンジ色の残渣が得られた。残渣を７５０ｍｌの酢酸エチルに溶解し水（２ｘ２５０ｍｌ）および食塩水（３ｘ１００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、溶液を濾過して真空下で濃縮すると６０ｇのオレンジ色の油形物が得られた。油は、シリカゲル６０（５００ｇ）のフラッシュクロマトグラフィーによって、２回に分けて精製した。生成物は、１：４酢酸エステル：ヘキサンで溶出され、薄黄色の油状の１２（ｃ）、４８．６ｇ（８６％）が得られた。ＴＣＬ：Ｒｆ０．４２（１：４酢酸エチル−ヘキサン）Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ａ．；Ｅｎｎｉｓ，Ｍ．Ｄ．；Ｍａｔｈｒｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８２，１０４，１７３７の方法に従って、１６．３ｍｌ（０．１１６モル）のジイソプロピルアミンと２００ｍｌの無水テトラヒドロフランとの混合物を乾燥アルゴン大気中で−５℃に冷却し、４６．５ｍｌ（０．１１６モル）のｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ）を加えた。混合物を−５℃で２５分間攪拌し、次いで、−７８℃に冷却した。６７ｍｌ無水テトラヒドロフランに溶解した２４．０ｇ（０．１０６モル）の１２（ｃ）の溶液を加え、反応混合物を−７８℃で３０分間攪拌した。反応物を−５℃に暖め、２７．４ｍｌ（０．３１７モル）の臭化アリルを加えた。混合物は−５℃で４時間攪拌し、次いで１０ｍｌの水を加え、回転蒸発によってテトラヒドロフランを除去すると、油が得られた。油は、酢酸エチル（５００ｍｌ）に溶解し、水（１２５ｍｌ）および食塩水（３ｘ１２５ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウム上で乾燥させた後、溶液を濾過し、真空下で回転蒸発によって濃縮すると、油が生成した。油は、１００ｇのシリカゲル６０中を１．２５リットルの１：４酢酸エチル−ヘキサンで濾過することによって精製した。２５０ｍｌずつ５つの画分を収集した。それぞれの画分は、ＴＬＣによって照合した。精製された生成物を含む画分を一緒にして、溶媒を回転蒸発によって除去すると、無色の油状の１２（ｄ）、２６．８ｇ（収率９５％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５２（１：４酢酸エチル−ヘキサン）．一般的には、Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ａ．；Ｅｎｎｉｓ，Ｍ．Ｄ．；Ｍａｔｈｒｅ，Ｄ．Ｊ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９８２，１０４，１７３７の方法に従って、６３ｍｌの無水テトラヒドロフラン中に溶解した２０．２ｇ（０．１８７モル）の無水ベンジルアルコール溶液を乾燥アルゴン大気下で−５℃に冷却し、５６．１ｍｌ（０．１４０モル）のｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ）を１０分間以上かけて加えた。反応混合物は−５℃で２０分間攪拌し、次いで、（あらかじめ−５℃に冷却しておいた）３８０ｍｌの無水テトラヒドロフランに溶解した２５．０ｇ（０．０９３４モル）の１２（ｄ）溶液を加えた。反応物は−５℃で２時間攪拌し、次いで、水（５０ｍｌ）を加えた。反応物を室温に暖めた。テトラヒドロフランを回転蒸発によって除去すると、残渣が得られた。残渣は酢酸エチル（２５０ｍｌ）に溶解し、水（１２５ｍｌ）および食塩水（１２５ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウム上で乾燥させた後、溶液を濾過し、回転蒸発によって濃縮すると油が得られた。油はシリカゲル（２４０ｇ）を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。生成物は９７：３ヘキサン−酢酸エチルで溶出すると、薄黄色の油状の１２（ｅ）、３８．９ｇ（８５％）が得られた。キラル化合物１２（ａ）は、再使用のため用いられる酢酸エチルで溶出された（４０％）。１２（ｅ）のＴＬＣ：Ｒｆ０．８０（１：４酢酸エチル−ヘキサン）．一般的には、Ｃａｒｌｓｅｎ，Ｐ．Ｈ．Ｊ．；Ｋａｔｓｕｋｉ，Ｔ．；Ｍａｒｔｉｎ，Ｖ．Ｓ．；Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ，Ｋ．Ｂ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８１，４６，３９３６の方法に従って、３３０ｍｌのアセトニトリル、３３０ｍｌの四塩化炭素および４９７ｍｌの水中に懸濁した３８．０ｇ（０．１５４モル）の１２（ｅ）および１４５ｇ（０．６７９モル）の過ヨウ素酸ナトリウムの懸濁液を０℃で攪拌し、その間に、０．８３ｇ（２．４モル％）の三塩化ルチニウム水酸化物を加えた。混合物を０℃で１５分間攪拌し、次いで室温で４時間攪拌した。反応物を濾過して固体を除き、５００ｍｌのジクロロメタンおよび２５０ｍｌの水を用いて集めた固体をリンスした。濾過液を分液漏斗に移し、層を分離した。無水硫酸マグネシウム上で乾燥させた後、下層（ジクロロメタン層）を濾過し、真空下で回転蒸発によって濃縮すると、黒っぽい油が生成した。油は２つの連続したフラッシュクロマトグラフィーカラム（それぞれのカラムは５００ｇのシリカゲル６０であり、１９００ｍｌの１：４酢酸エチル：ヘキサンおよび１０００ｍｌの酢酸エチルで溶出した）で精製し、粘性のある油状の１２（ｆ）、２６．６ｇ（収率６５％）が得られた。１２（ｆ）のＴＬＣ：Ｒｆ０．１０（１：４酢酸エチル−ヘキサン）．ジアゾメタン−エーテル溶液（ＡｌｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．，ＴｅｃｈｎｉｃａｌＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＢｕｌｌｅｔｉｎＮｏ．ＡＬ −１８０）を、５０ｍｌのジエチルエーテルに溶解した２２ｇ（０．０８３モル）の１２（ｆ）の溶液にゆっくりと加えた。添加は反応混合物に渦巻状の黄色が残るようになるまで行った。反応混合物は、無色になるまで１：９酢酸−ジエチルエーテルで逆滴定した。無水硫酸マグネシウム上で乾燥後、無色になった溶液を濾過し、真空下回転蒸発によって濃縮すると、粘性のある油が生成した。油は１００ｍｌのメタノールに溶解し、木炭触媒上に１．０ｇの１０％パラジウムを含むパール瓶（Ｐａｒｒｂｏｔｔｌｅ）に移し、４気圧の水素下で６時間室温で振とうした。混合物はセライトで濾過し、濾過液を真空下回転蒸発によって濃縮すると、油状になった。油は真空蒸留し、無色の油状の１２（ｆ）、１３．９ｇ（収率８９％）を得た；沸点１１０−１２３℃／０．２ｍｍＨｇ。１２（ｆ）のＴＬＣ：Ｒｆ０．１５（３：７酢酸エチル−ヘキサン）メチルエステル中間体のＴＬＣ：Ｒｆ０．７３（３：７酢酸エチル−ヘキサン）、１（ｃ）のＴＬＣ：Ｒｆ０．２３（３：７酢酸エチル−ヘキサン）、実施例２Ｎ−｛Ｄ、Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル− ３−メチルブタノイル｝−Ｌ−３−（２'-ナフチル）− Ｌ−アラニンアミド（化合物２および３）の合成スキーム３に示すように、化合物（２ｄ）は、４−メチル−２−オキソペンタン酸ナトリウム塩から化合物（１ｄ）を製造するために用いる反応順序で、３− メチル−２−オキソブタン酸のナトリウム塩から合成した。化合物（２ａ）：収率７３％；沸点１００−１２１℃／０．３ｍｍＨｇ；化合物（２ｂ）：収率５８％；沸点１２５−１４７℃／０．６ｍｍＨｇ；ＴＬＣ：Ｒｆ０．５４（酢酸エチル−ヘキサン１：４）；化合物（２ｃ）：収率７６％；沸点１１５−１１９℃／０．７ｍｍＨｇ；ＴＬＣ：Ｒｆ０．０９（酢酸エチル−ヘキサン１：４）；化合物（２ｄ）：収率５５％；ＴＬＣ：Ｒｆ０．６０（クロロホルム−イソプロパノール１９：１）；ジアステレオマー（２）および（３）は、化合物（１ｊ）および（１ｄ）より化合物（１）を製造するために用いられる反応順序に従って、Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンアミド塩酸塩（８ｂ）および化合物（２ｄ）より作ることができる。化合物（２）および（３）は、上述のような逆層ＨＰＬＣによって分離した。化合物（２）；ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）２１分。化合物（３）；ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）２３．１分。実施例３Ｎ−｛３−（ヒドロキシアミノカルボニル）プロパノイル｝− Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（化合物４）の合成スキーム４に示すように、無水テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）に溶解した１．７４ｇ（１０ミリモル）のｔｅｒｔ−ブチルコハク酸水素（Ｂｕｃｈｉ，Ｇ．；Ｒｏｂｅｒｔｓ，Ｃ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３３，４６０，１９６８）および１．１５ｇ（１０ミリモル）のＮ−ヒドロキシスクシンイミドの溶液に、２．０６ｇ（１０ミリモル）の１，３−ジクロロヘキシルカルボジイミドを加えた。室温で一晩攪拌した後、反応物を濾過し、副産物であるジクロロヘキシル尿素を除去した。濾過液を真空下で濃縮し、残留物を得た。酢酸エチル−ヘキサン（１：１）を用いてシリカゲルクロマトグラフィーを行うと、白色固体のｔｅｒｔ −ブチルスクシンイミジルスクシネート（４ａ）、２．３ｇ（収率８４％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５０（酢酸エチル−ヘキサン１：１）；５．０ｍｌのトリフルオロ酢酸に溶解した０．７０ｇ（１．８ミリモル）の（Ａ１）溶液を室温で９０分間攪拌した。トリフルオロ酢酸を真空下で除去しすると、残渣が得られ、これをエーテル（２０ｍｌ）で粉砕し、真空下で乾燥させると、０．７２ｇのピンク色の固体が得られた。固体の一部分（０．３５ｇ）を２．０ｍｌの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解した。これに、０．２４ｇ（０．８７ミリモル）の（４ａ）および０．１８ｍｌ（１．３ミリモル）のトリエチルアミンを加えた。室温で２時間撹拌した後、溶媒を真空下で除去すると残留物が得られた。クロロホルム−イソプロパノール９：１を用いてシリカゲルクロマトグラフィーを行うと、白色固体のＮ−［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）プロパノイル］−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（４ｂ）、０．３２ｇ（収率８４％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒｆ０．３３（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；１０ｍｌのトリフルオロ酢酸に溶解した０．２９ｇ（０．６４ミリモル）の（４ｂ）溶液を室温で３０分間攪拌した。トリフルオロ酢酸を真空下で除去すると残渣が得られ、これをエーテル（２０ｍｌ）で粉砕し、真空下で乾燥すると白色固体のＮ−［３−カルボキシプロパノイル］−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（４ｃ）、０．２４ｇ（収率９５％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．０４（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；乾燥アルゴン大気下で、０．２２ｇ（０．５６ミリモル）の（４ｃ）および０．０６２ｍｌ（０．５６ミリモル）の４−メチルモルホリン無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍｌ）の溶液を−１５℃に冷却し、０．０７３ｍｌ（０．５６ミリモル）のイソブチルクロロホルメートで処理した。混合物を−１５℃で１５分間攪拌し、次いで、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）に溶解した０．１０ｇ（０．８１ミリモル）の（Ｏ−ベンジル）ヒドロキシルアミン溶液を加えた。混合物を−１５℃で１時間、次いで、室温で１時間、攪拌した。溶媒を真空下で除去した。その結果得られた固体を酢酸エチルで粉砕し、濾過によって集め、白色固体のＮ−［３−（ベンジルオキシアミノカルボニル）プロパノイル］−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニンアミド（４ｄ）、０．２０ｇ（収率７３％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．４６（クロロホルム−イソプロパノール８：２）；４ｍｌの氷酢酸に溶解した０．１０ｇ（０．０２ミリモル）の（４ｄ）溶液中に懸濁した活性化炭素上の０．２０ｇの５％パラジウム懸濁液を４気圧の水素下で１８時間攪拌した。濾過によって触媒を除去し、濾過物を真空下で濃縮すると、残渣が生成し、これを１０ｍｌのエーテルで粉砕し、真空下で乾燥させ、固体を得た。Ｂａｋｅｒオクタデシル逆層ゲルクロマトグラフィーを水−アセトニトリル−酢酸（５７：４０：３）で溶出すると、白色固体のＮ−［３−（ヒドロキシアミノカルボニル）−プロパノ−イル］−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル− Ｌ−アラニンアミド（４）、０．０６５ｇ（収率７９％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒｆ０．０５（クロロホルム−イソプロパノール８：２）；実施例４Ｎα−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４− メチルペンタノイル｝−Ｌ−アルギニル−Ｌ−アラミン、２−アミノエチルアミド（化合物５）の合成スキーム５に示すように、化合物（５ａ）は、化合物（１ｉ）の製造に用いられる方法に従って、化合物（１ｈ）およびＮα−ＢＯＣ−Ｎｇ−（ジ−ＣＢＺ） −Ｌ−アルギニンから７９％の収率で合成された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５９（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（５ｂ）は、化合物（１ｊ）の製造に用いる方法に従って、化合物（５ａ）から８７％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．１１（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（５ｃ）は、化合物（１ｋ）の製造に用いる方法に従って、化合物（５ｂ）および（１ｄ）より、８８％の収率でジアステレオマー混合物として、製造された。ヒドロキサム酸塩（５ｄ）は、ジアステレオマーの混合物として、化合物（５ｃ）より７８％の収率で製造された。ヒドロキサム酸塩（５ｄ）は、水素化分解によって脱保護され、化合物（５）がジアスレレオマー混合物として５９％の収率で得られた。ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）１０．１および1０．３分；実施例５Ｎα−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝Ｌ−リジニル−Ｌ−アラニンアミド（化合物６）の合成スキーム６に従って、無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホフムアミド（５０ｍｌ）中に溶解した５．０ｇ（０．０１０モル）のＮα−ＢＯＣ−Ｎε−ＣＢＺ−Ｌ−リシンｐ−ニトロフェニルエステルおよび１．５ｇ（０．０１２モル）のＬ−アラニンアミド塩酸塩および１．６７ｍｌ（０．０１２モル）のトリエチルアミンの溶液は、室温で１６時間攪拌して、溶媒を真空下で除去した。得られた残留物を酢酸エチル（２００ｍｌ）に溶解し、３Ｍ−ＮａＯＨ（３×１００ｍｌ）、水（３ ×１００ｍｌ）、１Ｍ−ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）、最後に食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた後、溶液を濾過し、真空下で濃縮しすると、白色の固体のＮα−ＢＯＣ−Ｎε−ＣＢＺ−Ｌ−リシル−Ｌ−アラニンアミド（６ａ）、４．３ｇ（収率９６％）が得られた。ＴＬＣ：Ｒｆ０．３２（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（６ｂ）は、化合物（Ａ２）の製造法として前述した方法を用いて、化合物（６ａ）および（１ｄ）から６９％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．２１および０．２９（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（６ｃ）は、（Ａ３）の製造法として前述された方法を用いて、化合物（６ｂ）から収率４８％で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．１６（クロロホルム− イソプロパノール８：２）．ＭＳ：ｍｌｅ５２２（Ｍ＋）．ジアステレオマー（６Ａ）および（６Ｂ）は、化合物（１ｍ）から化合物（１）を製造するために用いる方法に従って、化合物（６ｃ）から製造された。ＨＰＬＣ精製（方法Ａ）を行うと、異性体（６Ａ）が先に溶出し、異性体（６Ｂ）は後で溶出した。化合物（６Ａ）：ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）：９．２分；化合物（６Ｂ）：ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）：９．９分；実施例６Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝Ｌ−チロシル−Ｌ−アラニンアミド（化合物７）の合成スキーム７に従って、化合物（７ａ）は、化合物（６ａ）の製造に用いる方法に従って、Ｎ−ＢＯＣ−（Ｏ−ベンジル）−Ｌ−チロシンｐ−ニトロフェニルエステルおよびＬ−アラニンアミド塩酸塩から９９％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５１（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（７ｂ）は、化合物（６ｂ）の合成に用いる方法に従って、化合物（７ａ）からジアステレオマーの混合物として、６４％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５３および０．５７（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（７ｃ）は、化合物（６ｃ）の製造に用いる方法に従って、化合物（７ｂ）から、４８％の収率で製造された。ジアステレオマーの片方の化合物（７ｃ）はＨＰＬＣ（方法Ａ）によって分離された。ジアステレオマー（７ｃ）は、４気圧の水素下、メタノール中炭素上の１０％パラジウム存在下で、脱保護され、化合物（７）が９２％の収率で得られた。実施例７Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−(ヒドロキシアミノカルボニル)メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−(２'-ナフチル)アラニンアミド（化合物８および９）の合成スキーム３に従って、１０ｍｌの無水テトラヒドロフラン中に溶解した３．２ｇ（０．０１０モル）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンおよび１．３ｇ（０．０１１モル）のＮ−ヒドロキシスクチンイミドの溶液は、約５℃ に冷却した。５ｍｌの無水テトラヒドロフラン中に溶解した２．３ｇ（０．０１１モル）の１，３−ジシクロヘキシルカルボジイミド溶液を加え、さらに、混合物を約５℃で３０分間、次いで、室温で３０分間、攪拌した。ジシクロヘキシル尿素副生成物を濾過によって除去し、さらに、濾過液を１．５ｍｌ（０．０２２モル）の濃縮ＮＨ４ＯＨを含むフラスコに移した。混合物を室温で１時間撹拌した後、溶媒を真空下で除いて残留物を得た。残留物は、酢酸エチル（３５０ｍｌ）に溶解し、水（１００ｍｌ）、１Ｍ−ＨＣｌ（１００ｍｌ）、水（１００ｍｌ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍｌ）、さらに最後に食塩水（１００ｍｌ）で洗浄した。無水硫酸マグネシウム上で乾燥させた後、溶液を濾過し、真空下で濃縮すると、固体が出来た。固体は酢酸エチルから再結晶し、白色固体のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンアミド（８ａ）、２．２ｇ（収率７０％）を得た。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５０（クロロホルム−イソプロパノール９：１）６０ｍｌの無水１，４−ジオキサン中に溶解した１．９５ｇ（０．００６２モル）のＮ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンの溶液中に、塩酸蒸気を、１５分間通した。エーテル（４００ｍｌ）を加え、固体を沈殿させた。固体は、濾過によって集め、真空下で乾燥させ、１．３６ｇ（収率８８％）のＬ−３− （２'-ナフチル）アラニンアミド塩酸塩（８ｂ）を得た。ジアステレオマー（８）および（９）は、化合物（１ｊ）および（１ｄ）から化合物（１）の製造に用いる反応順序に従って、Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンアミド塩酸塩（８ｂ）および（１ｄ）から作成することができる。化合物（８）：ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）２２．６分。化合物（９）：ＨＰＬＣ保持時間（方法Ａ）２４．３分、ＭＳ：ｍｌｅ３８５（Ｍ＋）．実施例８Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−（２'-ナフチル）−アラニル−Ｌ−セリンアミド（化合物１０）の合成スキーム８に従って、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ− （Ｏ−ベンジル）セリンアミド（１０ａ）は、（７ａ）の製造に用いた方法に従って、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンおよびＬ−（Ｏ−ベンジル）セリンアミドから８０％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５１（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−（Ｏ−ベンジル）セリンアミド（１０ｂ）は、化合物（１ｊ）の製造に用いる方法にしたがって、化合物（１０ａ）より９５％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．０８（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（１０ｃ）は、化合物（１ｋ）の製造に用いる方法に従って、化合物（１０ｂ）および（１ｄ）からジアステレオマー混合物として９７％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．６９および０．７３（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（１０ｄ）は、化合物（１ｍ）の製造に用いた方法に従って、化合物（１０ｃ）から収率７４％で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．１２（クロロホルム− イソプロパノール９：１）化合物（１０）は、化合物（１ｎ）製造に用いられた方法に従って、化合物（１０ｄ）から８４％の収率で製造された。ＨＰＬＣ保持時間：２５．２および２７．１分（方法Ａ）．ＭＳ：ｍｌｅ４７２（Ｍ＋）．実施例９Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−（２'-ナフチル）−アラニル−Ｌ−アラニンメチルアミド（化合物１１）の合成スキーム９に従って、化合物（１１ａ）は、化合物（１ｉ）の製造法として前述した方法を用いて、Ｎ−ＢＯＣ−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニンおよびＬ −アラニンメチルアミド塩酸塩から、８９％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５８（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（１１ｂ）は、化合物（Ａ２）の製造法として前述した方法を用いて、化合物（１１ａ）および（１ｄ）から、８６％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．５７および０．６２（クロロホルム−イソプロパノール９：１）；化合物（１１）は、化合物（Ａ３）の製造法に前述した方法を用いて、化合物（１１ｂ）から２３％の収率で製造された。ＴＬＣ：Ｒｆ０．１８（クロロホルム−イソプロパノール９：１．実施例１０Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−アミノ−２−ジメチルブタノイル−Ｌ−アラニン、２−アミノエチルアミド（化合物１３）の合成反応スキーム１０に従って、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン１３（ｂ）は、Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシン（ＡｌｄｒｉｃｈＣｈｅｍｉｃａｌ）を、フッ化ジメチル（ＤＭＦ）中でジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートおよびジイソプロピルエチルアミンで処理することによって製造した。次いで、（１３ｂ）は、無水テトラヒドロフラン中でＮＨＳおよびジクロロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）で処理して、Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−ｔｅｒｔ−ロイシンＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを製造し、次いで、これを反応スキーム２および実施例１より得られた（１ｈ）とカップリングさせると、（１３ｃ）が生成した。化合物（１３）は、化合物（１）を合成するための、実施例１記載の方法および反応スキーム２に示した方法と同様の方法に従って、（１３ｃ）より製造された。実施例１１Ｔ細胞によるＴＮＦ−α遊離の阻害以下の実施例は、化合物１によって、Ｔ細胞のＴＮＦ−αの分泌が、ＴＮＦ− βおよびＩＦＮ−γの分泌と比較して、生体外（ｉｎｖｉｔｒｏ）で選択的に阻害されることを示している。ヒト末梢血液Ｔ細胞は、２−アミノエチルイソチオウロニウムブロミドハイドロブロミドで処理したヒツジ赤血球を用いてロゼッティングすることによって、末梢血液単核細胞から精製された。ヒツジ赤血球を低浸透圧で溶解した後、単球を１時間３７℃でプラスチック粘着することによってその大部分を除去した。末梢血液Ｔ細胞は、培養用の穴上に、ＰＢＳ中１０μｇ／ｍｌおよび１０ｎｇ／ｍｌのホルボールエステル（ＰＭＡ）で固定化された抗ＣＤ３抗体（ＯＫＴ３）で刺激された。培地は、１０％ウシ胎児血清、５０Ｕ／ｍｌペニシリンおよび５０ μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ１６４０よりなる。刺激は阻害剤化合物１（２００μＭ）の存在下または非存在下で行われ、培地中のＴＮＦ−α はＥＬＩＳＡによってアッセイされた。結果を表１に示す。３時間後、化合物１非添加の細胞培地中には１００ｐｇ／ｍｌのＴＮＦ−αが認められたが、２００μＭの化合物１を添加した細胞培地中にはＴＮＦ−αは検出されなかった。２４および４８時間後、化合物１はＴＮＦ−αの遊離をそれぞれ７２％および６３％阻害するが、ＴＮＦ−βまたはインターフェロン−γの遊離を阻害する効果は無かった。化合物１は、明らかにＴＮＦ−αの分泌を選択的に阻害するが、ＴＮＦ−βおよびインターフェロン−γの分泌にはどちらにも影響しなかった。実施例１２ＰＭＡおよびイオノマイシンで刺激されたヒトＴ細胞上に細胞表面ＴＮＦ−αの増加を誘導する化合物１本実施例は、ＰＭＡおよびイオノマイシンによって刺激されたヒトＴ細胞に於ける細胞表面ＴＮＦ−αへの化合物１の効果について記載している。異反応性（ａｌｌｏｒｅａｃｔｉｂｅ）のヒトＴ細胞クローン（ＰＬ−１）は、刺激しないと細胞表面にＴＮＦ−αを発現しない。しかしながら、ＰＭＡおよびイオノマイシンで刺激した後は、細胞表面ＴＮＦ−α、ならびにＣＤ４０および４１ＢＢ用リガンドが、細胞表面上に速やかに誘導される。細胞表面ＴＮＦ− αの検出は、ＴＮＦレセプター（ｐ８０）の細胞外ドメインと結合したヒトＩｇＧ１分子のＦｃ部分（ＩｇＧＦｃ）からなるＦｃ融合タンパク質で染色することによって成し遂げられた。４１ＢＢおよびＣＤ４０の細胞表面リガンドの検出は、ＩｇＧＦｃならびにそれぞれ４１ＢＢおよびＣＤ４０の細胞外ドメインからなるＦｃ融合タンパク質類似体で染色することによって成し遂げられた。ＰＬ−１細胞はＰＭＡ刺激に応答して細胞表面ＩＬ−４を発現しないので、ＩｇＧＦｃおよびＩＬ−４レセプターの細胞外部分からなる融合分子（ＩＬ−４Ｒ：Ｆｃ）は、負の対照として染色時に用いられた。ＴＮＦＲ：ＦｃおよびＩＬ−４Ｒ：Ｆｃ融合タンパク質は、欧州特許第０４６４５３３号に記載されており、ここに参照として取り入れる。ＴＮＦＲ：ＦｃおよびＩＬ−４Ｒ：Ｆｃ融合分子の構築に用いた一般的方法と同じ方法を用いて、４１ＢＢ：ＦｃおよびＣＤ４０：Ｆｃ分子を構築した。次いで、それらのそれぞれの細胞表面リガンドに結合させたＦｃ融合タンパク質は、ビオチニル化した抗ヒトＩｇＧ１次いでストレプトアビジン −フィコエリトリンを用いて検出された。染色強度は、ＦＡＣＳ（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅａｃｔｉａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ）（蛍光活性化細胞選別）走査流動細胞計測法（ｓｃａｎｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｅｒ）によって測定した。結果を表１１に示す。細胞表面ＴＮＦ−αの増加に於ける化合物１の特異性は明らかである。細胞は、化合物１の存在下で４時間ＰＭＡおよびイオノマイシンで刺激し、次いで上述の方法に従ってＴＮＦＲ：Ｆｃで染色すると、３０４０ＭＦＩを示したが、これに比較して化合物１非存在下では８３であった。化合物１の影響は、ＴＮＦＲ：Ｆｃ結合に特異的であったが、これに対して４１ＢＢ：ＦｃまたはＣＤ４０：Ｆｃ結合の増加は検出されなかった。刺激１８時間後では、細胞表面ＴＮＦ−αは、化合物１非存在下でのＴＮＦＲ：Ｆｃ結合が７ＭＦＩであったのに比較して、化合物１存在下では実質上１００倍（ＭＦＩは６１６であった）に増加する結果になった。同条件下で、４１ＢＢ：ＦｃおよびＣＤ４０：Ｆｃ結合は、おおよそ２倍に増加したのみであった。実施例１３生体内（ｉｎｖｉｖｏ）でのＴＡＣＥの阻害５００μｇの化合物Ａ：化合物１：対照雌Ｂａｌｂ／ｃマウス（１８−２０ｇ）に４００μｇのＬＰＳを静脈内注射した。同時に、マウスに、０．０２％ＤＭＳＯを含む０．５ｍｌの食塩水中に溶解した５００μｇの化合物Ａまたは化合物１を皮下注射した。対照のマウスは、ＬＰＳを静脈内に、食塩水／ＤＭＳＯを皮下に注射された。ＬＰＳ注射２時間後、それぞれの処理群当たり２匹のマウスから、血清を集め、プールした。ＴＮＦ− αのレベルはＥＬＩＳＡによって定量し、結果を表ＩＩＩに示した。化合物１を加えると、化合物１はＴＮＦ−αの分泌を少なくとも８０％、ＴＮＦ−αを検出することが出来ないので実質的には１００％阻害する。これに比較して、化合物Ａでは、食塩水／ＤＭＳＯ対照と比較してＴＮＦ−αのレベルがおおよそ６０％減少した。上記の方法と同様の方法で、マウスに４００μｇのＬＰＳを静脈内注射した。同時に、マウスは、０．０２％ＤＭＳＯを含む０．５ｍｌの食塩水に溶解した５００μｇの化合物１を皮下注射された。２時間後、血清を集め、プールした。ＴＮＦ−αのレベルはＥＬＩＳＡによって定量した。結果を表ＩＶにｐｇ／ｍｌで示す。実験１では、化合物１は、ＬＰＳのみを接種されたマウスのＴＮＦ−αレベルと比較して、血清ＴＮＦ−αレベルを８２％減少させた。ＬＰＳ＋食塩水を接種されたマウスと比較すると、化合物１は血清のＴＮＦ−αレベルを７６％減少させた。実験２では、化合物１は、ＬＰＳのみを接種されたマウスのＴＮＦ−αレベルと比較して、血清のＴＮＦ−αレベルを８９％減少させた。ＬＰＳ＋食塩水を接種されたマウスと比較すると、化合物１は血清のＴＮＦ−αレベルを８５％減少させた。実験３では、化合物１は、ＬＰＳのみを接種されたマウスのＴＮＦ −αレベルと比較して、血清のＴＮＦ−αレベルを８５％減少させた。ＬＰＳ＋食塩水を接種されたマウスと比較すると、化合物１は血清のＴＮＦ−αレベルを８４％減少させた。全体では、化合物１は、ＬＰＳのみを接種されたマウスのＴＮＦ−αレベルと比較して、血清のＴＮＦ−αレベルを８５．４±２．９８％減少させた。表ＩＩＩおよびＩＶから、化合物１は、ＬＰＳによって誘導した敗血症症候群のネズミのモデルに２５ｍｇ／ｋｇ投与した場合、血清ＴＮＦ−αレベルを、実質上、少なくとも８０％減少させた。２５０μｇの化合物Ａ：化合物１：対照雌のＢａｌｃ／ｃマウス（１８−２０ｇ）に４５０μｇのＬＰＳを静脈注射した。同時に、マウスは、０．０２％ＤＭＳＯを含む０．２５ｍｌの食塩水中に溶解した２５０μｇの化合物Ａまたは化合物１を皮下注射された。対照マウスはＬＰＳを静脈内に、食塩水／ＤＭＳＯを皮下に注射された。ＬＰＳを注射してから２時間後、それぞれの処理群から３匹ずつの血清を集めた。ＴＮＦ−αレベルはＥＬＩＳＡによって定量した。結果は、それぞれの処理群からのＥＬＩＳＡで得られた光学濃度（ＯＤ）の平均で表し、結果を表Ｖに示す。対照サンプルのバックグラウンドＯＤは０．１６２±０．００３であった。表Ｖは、ＬＰＳで刺激したマウスにおいて血清ＴＮＦ−αの遊離を阻害する化合物１および化合物Ａの影響について示している。化合物１は、対照のそれと比較して血清のＴＮＦ−αレベルを減少させ、それによって２５０μｇ／ｍｌではＴＮＦ−αの分泌が完全に阻害されることが示された。化合物Ａでは、ＬＰＳ＋食塩水、ＬＰＳ＋食塩水＋ＤＭＳＯ、および化合物Ａの間のＯＤの読みが同様であることから示されるように、血清のＴＮＦ−αレベルの減少効果は示さなかった。実施例１４化合物Ａおよび化合物１の血清安定性化合物１および化合物Ａを、それぞれ、正常なマウスの血清中で５０μＭになるように希釈し、３７℃でインキュベーションした。種々の時間に、アリコートを採取し、氷冷したＰＢＳで１００倍に希釈し、精製したＴＡＣＥに対する阻害効率について試験した。４０分後、化合物Ａはこの化合物の濃度で３−４倍の損失に相当する阻害効果で減少を示したが、化合物１は阻害効果では減少が示されなかった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｃ 323/60 9450−4ＨＣ０７Ｆ 9/09 ＫＣ０７Ｆ 9/09 9450−4ＨＬ 9450−4ＨＵ 8517−4ＨＣ０７Ｋ 5/078 Ｃ０７Ｋ 5/078 9051−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＢＮ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者スリース，ポール・アールアメリカ合衆国ワシントン州98119，シアトル，ウエスト・アーマー・ストリート 836

Claims

【特許請求の範囲】１．式（Ｉ）式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボキシルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は、それぞれ他とは独立的に、水素、アルキレン（シクロアルキル）、ＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁ からＣ₈のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、自然に生じるα−アミノ酸の保護されたまたは保護されていない側鎖；または、−Ｒ⁶Ｒ⁷基であり、そのうちＲ⁶は置換または非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり、Ｒ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ(Ｎ⁴)(Ｒ⁵)またはハロゲンであり、この中のＲ⁴およびＲ⁵は、それぞれ他とは独立的に、ハロゲンまたは置換あるいは非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり；ｎは０、１または２であり；ｎが１である場合、Ａは保護されたまたは保護されていないα−アミノ酸ラジカルであり；ｎが２である場合、Ａは同一のまたは異なる保護されたあるいは保護されていないα−アミノ酸ラジカルであり；さらに、Ｂは非置換または置換のＣ₂からＣ₈のアルキレンであり；および、その薬学上許容しうる塩である：の化合物。２．ＢがＣ₂からＣ₆のアルキレンである、請求項１記載の化合物。３．Ｂがジメチレンである、請求項２記載の化合物。４．Ｘがヒドロキサム酸である、請求項１記載の化合物。５．Ｘがヒドロキサム酸である、請求項３記載の化合物。６．Ｒ¹が水素である、請求項５記載の化合物。７．Ｒ²がＣ₁からＣ₆のアルキルまたはＣ₁からＣ₆のアルキレンアリールである、請求項１記載の化合物。８．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキル、Ｃ₁からＣ₆のアルキレンフェノール、Ｃ₁からＣ₆のアルキレン（シクロアルキル）またはＣ₁からＣ₆のアルキレンアリールからなる基から選択される、請求項１記載の化合物。９．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキルである、請求項８記載の化合物。１０．Ｒ³がｔ−ブチルである、請求項９記載の化合物。１１．Ｒ³がメチレンフェノールである、請求項１３記載の化合物。１２．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキレンアリールである、請求項８記載の化合物。１３．Ｒ³がメチレン（２'-ナフチル）である、請求項１２記載の化合物。１４．Ａがアラニルまたはセリルラジカルであり、ｎが１である、請求項１記載の化合物。１５．Ａがアラニルであり、ｎが１である、請求項１４記載の化合物。１６．Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−（アミノ）エチルアミドである、請求項１記載の化合物。１７．Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−アミノ−２−ジメチルブタノイル−Ｌ−アラニン、２ −（アミノ）エチルアミドである、請求項１記載の化合物。１８．有効量の生物学的に活性な式（ＩＩ）の化合物：式中：Ｘはヒドロキサム酸、チオール、ホスホリルまたはカルボニルであり；ｍは０、１または２であり；Ｒ¹、Ｒ²およびＲ³は、それぞれ他とは独立的に、水素、アルキレン（シクロアルキル），ＯＲ⁴、ＳＲ⁴，Ｎ(Ｒ⁴)(Ｒ⁵)、ハロゲン、置換または非置換のＣ₁ からＣ₈のアルキル、Ｃ₁からＣ₈のアルキレンアリール、アリール、自然に生じるα−アミノ酸の保護されたまたは保護されていない側鎖；または、−Ｒ⁶Ｒ⁷基であり、そのうちのＲ⁶はＣ₁からＣ₈のアルキルであり、Ｒ⁷はＯＲ⁴、ＳＲ⁴、Ｎ (Ｒ⁴)(Ｒ⁵)またはハロゲンであり、そのうちのＲ⁴およびＲ⁵は、それぞれ他とは独立的に、ハロゲンまたは置換あるいは非置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり；ｎは０、１または２てあり；Ｙはハロゲン、置換あるいは非置換のＣ₁からＣ₈のアルキル、アルキレン（シクロアルキル）、−Ｒ⁸−ＣＯＯＲ⁹基または−Ｒ¹⁰Ｎ(Ｒ¹¹)(Ｒ¹²)基であり；この中のＲ⁸はＣ₁からＣ₈のアルキレンであり；Ｒ⁹は水素、またはＣ₁からＣ₈のアルキルであり；Ｒ¹⁰はＣ₁からＣ₈のアルキレンであり；かつＲ¹¹およびＲ¹²は、それぞれ他とは独立的に、水素または非置換あるいは置換のＣ₁からＣ₈のアルキルであり；ｎが１の場合は、Ａは保護されたまたは保護されていないα−アミノ酸ラジカルであり；ｎが２の場合は、Ａは同一のまたは異なる保護されたあるいは保護されていないα−アミノ酸ラジカルであり；および、その薬学的に許容しうる塩であり；式（ＩＩ）中の化合物は、ＬＰＳで誘導した敗血症症候群のマウスモデルに２５ｍｇ／ｋｇで投与した場合に、血清のＴＮＦ−αレベルを少なくとの８０％減少させる能力を持つ；ならびに、薬学的に許容しうる担体を含む組成物をヒトに投与することからなる、ＴＮＦ−αの過剰生産またはアップレギュレーション生産することによって特徴付けられる病気を持つヒトの治療方法。１９．ＢがＣ₂からＣ₆のアルキレンである、請求項１８記載の方法。２０．Ｂがジメチレンである、請求項１９記載の方法。２１．Ｘがヒドロキサム酸である、請求項１８記載の方法。２２．Ｒ¹が水素またはＣ₁からＣ₆のアルキルである、請求項１８記載の方法。２３．Ｒ¹が水素である、請求項２２記載の方法。２４．Ｒ²が水素またはＣ₁からＣ₆のアルキルである、請求項１８記載の方法。２５．Ｒ²がイソブチルである、請求項２４記載の方法。２６．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキル、Ｃ₁からＣ₆のアルキレンフェノール、Ｃ₁からＣ₆のアルキレン（シクロアルキル）またはＣ₁からＣ₆のアルキレンアリルからなる基より選択される、請求項１８記載の方法。２７．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキルである、請求項２６記載の方法。２８．Ｒ³がｔ−ブチルである、請求項２７記載の方法。２９．Ｒ³がＣ₁からＣ₆のアルキレンアリルである、請求項２６記載の方法。３０．Ｒ³がメチレン（２'-ナフチル）である、請求項２９記載の方法。３１．Ａがアラニルまたはセシルラジカルであり、かつｎが１である、請求項１８記載の方法。３２．Ａがアラニルであり、かつｎが０または１である、請求項３１記載の方法。３３．Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−（２'-ナフチル）アラニル−Ｌ−アラニン、２−（アミノ）エチルアミドである、請求項１８記載の方法。３４．Ｎ−｛Ｄ，Ｌ−２−（ヒドロキシアミノカルボニル）メチル−４−メチルペンタノイル｝−Ｌ−３−アミノ−２−ジメチルブタノイル−Ｌ−アラニン、２ −（アミノ）エチルアミドである、請求項１８記載の方法。３５．活性成分として請求項１記載の化合物からなる、ＴＮＦ−α関連障害、病態、または病気を治療する薬剤組成物。３６．請求項１記載の化合物およびＴＮＦ−α結合活性をもつタンパク質からなる、ＴＮＦ−α関連障害、病態または病気を治療する薬剤組成物