JPH09502704A

JPH09502704A - 新規な１，２−ジチイン抗感染症剤

Info

Publication number: JPH09502704A
Application number: JP7507760A
Authority: JP
Inventors: ヴイ．トゥロング，ティーン; イー．ビーラー，ドナルド; エム．デナー，ジェフリー; ヘクター，リチャード; エス．テンペスタ，マイケル; ローヴ，バーナード; ヤン，ウ; コリーダ，マサト
Original assignee: シェイマンファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド; ザリージェンツオブザユニバーシティーオブミシガン
Priority date: 1993-08-24
Filing date: 1994-08-24
Publication date: 1997-03-18
Also published as: US5556875A; AU7604694A; CA2170140A1; EP0714297A4; EP0714297A1; US5668168A; WO1995005817A1

Abstract

(57)【要約】この発明は、抗感染症剤として有用な１,２−ジチイン化合物の新規なグループ、及び同化合物を製造するための新規な合成方法に関する。本化合物は、真菌感染症、特にカンジダ・アルビカンス、クリプトコックス・ネオフォルマンス又はアスペルギルス・フミガーツスによって引き起こされる感染症を治療するのに特に有効である。

Description

【発明の詳細な説明】新規な１,２−ジチイン抗感染症剤１．発明の分野この発明は、抗真菌剤、抗感染症剤及び細胞障害剤として有用である１,２− ジチイン複素環式物質の新規なグループに関する。本発明は、更に、誘導体の合成に広い適用性を有する、置換１,２−ジチイン環系を得るための合成法を詳述する。２．発明の背景１,２−ジチイン類は、ベンゼンの２つの連続ＣＨ基と置き換わった２つの硫黄原子を有する６員複素環式化合物である。１,２−ジチイン分子は、それらのアンチ芳香族性−非平面環系のために、理論化学者及び分光学者達による熱心な研究の主題となっている。Aihara，J．Bull．Chem．Soc．Jpn．1990，63，2899 −2903；Cirmiraglia，R．ら，J．Mol．Str（Theochem）1991，230，287-293。今日では、チアルブリン（thiarubrine）類と呼ばれる８種の１,２−ジチイン含有アセチレン化合物が天然供給源から、主として植物の Asteraceae から単離されている。Constabel，C.P.；Towers，G.H.N．Planta Medica 1989，55，35-37 ；Balza，F．ら，Phytochemistry 1990，29，2901；Towers G.H.N．ら，1993，米国特許第５,２０２,３４８号；Ellis，S．ら，Phytochemistry 1993，33，224 -226。これら８種の他のものでは、Aspilia mossambicesis 及び A．plurisetta の若い葉から単離されたチアルブリンＡ（１）及びチアルブリンＢ（２）が、抗ウィルス活性及び抗生物質活性を含む幅広いスペクトルの生物活性を示すことが分かっている。Balza，F．ら，Phytochemistry 1 989，28，3523；Freeman，F．ら，Sulfur Rep．1989，9，207-247；Freeman，F ．Heterocycles 1990，701-750；Schroth，W．ら，Angew．Chem.，Int．Ed．Eng l．1967 6，698-699；Schroth，W．ら，Chem．1965，5，352-353 及び353-354。天然から誘導したもの（Bohlman，F．ら，“Naturally Occurring Acetylenes ”1973，Academic Press，London）であろうと合成で誘導したもの（Meryら，19 72，Ger．Offen．No.2，118，437）であろうと、アセチレン化合物自体が抗感染症性並びに細胞障害性を有することは周知である。全ての天然１,２−ジチイン類（チアルブリン類）は、Ｃ−３又はＣ−３とＣ−６のいずれかにポリアセチレン側鎖を有する。アセチレンを含有するこれら８種の天然１,２−ジチイン類（チアルブリン類）のいずれも全合成されたことがなく、アセチレンのない１,２ −ジチインの生物学的データも何ら報告されたこともない。チアルブリン中でのアセチレン結合の存在がそれらの全合成を難しくしている。更に、それらの著しい抗真菌活性におけるそれらアセチレン結合の役割は不明なままである。チアルブリン類の生来の細胞障害性及びその熱及び光不安定性も、それらのヒト用薬物としての潜在的な治療用途を大きく制限している。この欠点を克服するために、アセチレン側鎖のない一連の新規な１,２−ジチイン類を合成して、抗感染症剤としての潜在的な用途について生物学的に評価した。１,２−ジチイン及びその３,６−ジ置換類似体の最初の合成は、Schroth とその共同研究者によって１９６０代にドイツで報告された。Schroth，W．ら，Ange w．Chem.，Int．Ed．Engl．1967，6，698-699；Schroth，W．ら，Chem．1965 5 ，352-353及び 353-354。この方法は、ジアリールジチイン類の合成（スキームＩ）に最も有用であった。かくして、還流エタノール中、ＫＯＨの存在下で１, ４−ジフェニル−１,３−ブタジイン（３）を２当量のベンジルチオールで処理すると、ビスベンジルチオール付加体（４）が殆ど完全な立体選択性及び位置選択性で８５％の収率で得られた。液体アンモニア中で−７８℃で４をＮａで処理することにより２つのベンジル基を還元的に除去した後、Ｋ₃[Ｆｅ(ＣＮ)₆]で酸化的にジチイン環形成を行うと、深赤色の３,６−ジフェニル−１,２−ジチイン（５）が約５１％の通し収率で得られた。しかしながら、液体アンモニア中でナトリウムでベンジル基を還元的に除去した後にＫ₃[Ｆｅ(ＣＮ)₆]で酸化的に閉環することを含むこの方法は、３位及び６位に非芳香族置換基を有する１, ２−ジチイン類の合成にはあまり有効ではない。３．発明の要旨本発明は、抗感染症活性を有する下式の新規なジチイン化合物及びその薬学的に許容できる塩に向けられている。〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立に、水素、ハロゲン、アルキル又はアルケンであり；そしてＲ₃及びＲ₄は独立に、水素、アルキル又はアルケンである。この際、該アルキル又はアルケンは任意に環式基を含有し、そして非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、オキシ、エーテル、カルボニル、カルボキシル、メルカプト、カルボアルコキシ(carbalkoxy)、シアノ、ニトロ、アシルオキシ、スルファミル、アミノ、アシルアミノ、カルバミル、アリール及びアラルキルからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；該アルキル又はアルケンは好ましくはＣ１〜Ｃ２０の範囲の大きさであり、該アリール基及びアラルキル基は独立に、非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、エーテル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ及びアミノからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；そしてＲ₄とＲ₂、Ｒ₂とＲ₁、又はＲ₁とＲ₃は、任意に共に結合している。〕この置換ジチイン化合物は、Ｒ₄とＲ₂、Ｒ₂とＲ₁、又はＲ₁とＲ₃が、カルボニル、カルバメート、スルフェート、スルホン、スルホネート、スルホンアミド、ホスフェート、ホスホネート、ホスホンアミド、エステル、尿素、チオ尿素及びアミドからなる群から選ばれる基を介して結合した構造を有していてもよい。次の表は、合成してそれらの生物活性について検討した幾つかの新規な１,２ −ジチインを纏めたものである。我々は、議論し易くするためにそれら化合物にアルファベットを付した。本発明は、更に、上記のジチイン化合物を合成する新規な方法であって、塩基性溶液中で１,４−ジ置換ジイン（但し、該１,４−ジ置換ジインは、１, ４−ジアリールジインではないものとする。）をベンジルチオールと反応させてビスベンジルチオール付加体を生成させ；次いで、該ビスベンジルチオール付加体を該塩基性溶液から溶媒抽出と結晶化、蒸留又はクロマトグラフィーにより分離し；次いで、該分離した付加体を液体アンモニア中でアルカリ金属と反応させて該付加体からベンジル基を還元的に除去してビスチオール体を生成させ；次いで、該ビスチオール体を酸化体により酸化してジチイン化合物を生成させる、方法に向けられている。この方法は、好ましくは、水酸化カリウム及びエタノールを含む塩基性溶液；アルカリ金属として金属ナトリウム；及び酸化体としてＫ₃[Ｆｅ(ＣＮ)₆]を用いることによって行われる。この方法は、好ましくは、水酸化カリウム及びＤＭＦを含む塩基性溶液；アルカリ金属としてリチウム；及びＫＩ及びＩ₂を含む酸化体を用いることによって行われる。本発明は、更に、感染症を治療する新規な方法であって、そのような感染症を有する温血動物に上記構造を有する治療有効量のジチイン化合物を投与することを含む方法に向けられている。本ジチイン化合物は、特にカンジダ・アルビカンス(Candida albicans)、クリプトコックス・ネオフォルマンス(Cryptococcus neoformans)又はアスペルギルス・フミガーツス(Aspergillus fumigatus)によって引き起こされる真菌感染症に対して特に有効である。本ジチイン化合物の治療有効性は、下記の微量希釈肉汁アッセイ（microdilut ion broth assay）により定めることができ、ＭＩＣが５０μｇ／ｍＬ未満であるのが有効と考えられる。本ジチイン化合物は、局所的に、静脈内に、経口で、又は腹腔内に、又はエアロゾルにより投与することができる。４．１,２−ジチイン類の用途本発明の新規な１,２−ジチイン類は、強い抗真菌活性を示し、カンジダ(cand ida)属、アスペルギルス(Aspergillus)属及びクリプトコックス(Cryptococcus) 属の株を死滅させるのに特に有効である。本１,２−ジチイン化合物は、種々の感染症、特に上に列挙したタイプの微生物により引き起こされる感染症の治療に有利に用いられる。例えば、３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインと称される新規な１,２−ジチインは、強力で幅広いスペクトルの抗真菌活性を有しており、このことは、in vivo 薬物治療に対する有用性、即ちヒトの患者における有用性を示すものである。我々は、以下に示す一連の生物学試験で、アセチレン側鎖を含有しない１,２−ジチインが、非常に低濃度でカンジダ・アルビカンス、クリプトコックス・ネオフォルマンス及びアスペルギルス・フミガーツスの強力な阻害物質であり、アセチレン含有チアルブリン類で認められる同時発生的な毒性がないことを証明した。５．方法５.１ in vitro 感受性試験 in vitro 感受性試験を行って、次の化合物、即ち、チアルブリンＡ、及び下記の一連の新規な非アセチレン系１,２−ジチイン化合物の最小阻止濃度（ＭＩＣ）及び最小殺真菌濃度（ＭＦＣ）を測定した。ＭＩＣ試験は、微量希釈肉汁アッセイにより行った。試験した真菌は、カンジダ・アルビカンスＡＴＣＣ１０２５９及びＢ３１１株、クリプトコックス・ネオフォルマンスＡＴＣＣ３６５５６、アスペルギルス・フミガーツスＡＴＣＣ１３０７３、及びトリコフィトン・ルブルム(Trichophyton rubrum)ＡＴＣＣ１８７６２であった。酵母は酵母形態学的寒天培地（yeast morphology agar）上で増殖させ、糸状真菌はサブロー寒天培地上で増殖させた。全試験を９６ウェルマイクロタイタープレート中のサブロー肉汁中で行った。化合物を段階的に希釈し、次いでＣ.アルビカンスについては２×１０⁴ｃｆｕ／ｍＬで、Ｃ.ネオフォルマンスについては４×１０⁴ ｃｆｕ／ｍＬで、Ａ.フミガーツスについては１×１０³ｃｆｕ／ｍＬで、そしてＴ.ルブルムについては１×１０³ｃｆｕ／ｍＬで接種した（全て最終濃度として表した）。全ての真菌についてプレートを３０℃で４８時間インキュベートした。但し、Ｔ.ルブルムについては５日間インキュベートした。増殖を完全に阻害する最低濃度としてＭＩＣを読み取った。ＭＩＣ終了点を測定した後、５０μｌを取り出して酵母形態学的寒天培地上にプレートして生存している微生物を検出し、そして３０℃で４８時間インキュベートした。ＭＦＣは、そのウェルが増殖をもたらさない最低濃度であると定めた。５.２皮膚毒性学試験チアルブリンＡ及び新規な１,２−ジチイン化合物３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインの、ＩＣＲマウスで皮膚過敏を引き出す能力について試験した。５匹のグループに分けた動物各々を軽く麻酔してから、予め水性媒体 (aquaphor)に溶かしておいた試験物質を１０ｍｇの量で右耳の背側面に局所的に塗布した。試験物質なしの水性媒体を対照としてその左耳に塗布した。皮膚過敏及び紅斑の徴候について動物達を５日間にわたって毎日検査し、１５が重い毒性を示すものとして１から１５のスケールで主観的に評価した。５.３全身毒性学試験チアルブリンＡ及び新規な３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインの全身毒性の可能性についても評価した。５匹又は６匹のグループに分けたＩＣＲマウス各々に所定試験化合物の溶液を、チアルブリンＡについては連続３日間にわたりそして該１,２−ジチインについては連続５日間にわたり腹腔内注射した。各動物を毎日計量しそして１４日間かけて死亡率を観察した。チアルブリンＡについてのＬＤ₅₀は０.６ｍｇ／ｋｇと測定された。同じルートにより３０ｍｇ／ｋｇまでの用量で投与した３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインは無毒で、対照と比較して何の明白な体重減少もなかった。５.４１,２−ジチインの生物活性ＭＩＣ及びＭＦＣ測定の結果を表１ａ及び１ｂに示す。分かるように、これら結果は、これまで知られていなかった１,２−ジチイン化合物が良好な in vitro 活性を有することを示しており、それら一連のもののうちより活性なメンバーについての結果はチアルブリンＡで得られた結果と類似している。重要なことは、全ての試験化合物についてのＭＦＣが、一般にＭＩＣの１回希釈の範囲内にあったということであり、このことは殺真菌作用のメカニズムを示唆するものである。これら結果は、幅広いスペクトルの医学的に重要な真菌に対するこれら新規な非アセチレン系１,２−ジチイン化合物の強力な抗真菌活性を示している。皮膚過敏性試験（表２を参照のこと）からの結果は、５日目までにアセチレン含有チアルブリンＡが著しい毒性を引き出したことを示し、処理した耳についての平均評点が９でそれら５匹の動物の対照の耳についての正常な読み取り値が４であった。対照的に、アセチレン側鎖を欠く１,２−ジチイン（３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン）で処理したマウスは、５日間にわたって皮膚過敏又は紅斑の徴候を示さなかった。全身毒性学検討からの結果は、チアルブリンＡが約０.６ｍｇ／ｋｇ（総用量では１.８ｍｇ／ｋｇ）のＬＤ₅₀用量と、高度に毒性であることを示したのに反して、同じルートにより３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインを与えた全てのマウスは、１日当たり３０ｍｇ／ｋｇの用量（総用量で１５０ｍｇ／ｋｇ）で生存しかつ対照と比較して何の明白な体重減少もなかった。全体として、これら結果は、１,２−ジチイン類の化合物はアセチレン含有チアルブリン類の有害な毒性学的特性なしに強力な抗真菌プロフィールを有することを示している。このことは、チアルブリン類に見出されるアセチレン部分が、観察されたチアルブリン毒性の大きな原因であることを立証している。また、これらアセチレン部分は、その抗感染症特性に部分的に寄与しているに過ぎない一方で、１,２−ジチイン環は抗感染症活性の重要な薬作用発生団(pharmacophore)である。実施例１１,６−ジヒドロキシ−２,４−ヘキサジインへのベンジルチオール付加１００ｍＬ丸底フラスコに４０ｍＬのＤＭＦ、１ｍＬの水、及び３００ｍｇのＫＯＨペレットを仕込んだ。この混合液に２.５９ｍＬのベンジルチオール（２２mmol，２.２当量）を添加した。室温で２０分間攪拌した後、１.１０ｇの１,６−ジヒドロキシ−２,４−ヘキサジイン（Ｉ）（１０mmol）をこの溶液に添加すると、熱くなり（フラスコを水浴中で冷却した）そして即座に深赤色に変色した。次いで、この反応混合液を室温で３時間攪拌してから１５０ｍＬの水を注ぎ込んだ。得られた混合液をＥｔＯＡｃ（１×２００ｍＬ，１×１００ｍＬ）で抽出してから合わせたＥｔＯＡｃ層を水（２回）及び食塩水で続けて洗浄して乾燥（ＭｇＳＯ₄）した。溶媒を減圧留去すると僅黄色固体残渣が得られ、これをヘキサン／ＣＨＣｌ₃／ＥｔＯＡｃから再結晶して、２.３４ｇ（６５％）の淡黄色ビスベンジルチオール付加体 II を得た：ｍｐ１２１.５〜１２３℃；Ｒｆ０.３６（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：１）；¹H NMR（300 MHz，CDCl₃ ）δ 1.65(t，2H，J=6.3Hz)，3.90(s，4H)，4.15(d，4H，J=6.3Hz)，6.81(s，2 H)，7.22-7.29(m，10H)；¹³C NMR（75 MHz，CDCl₃）δ 37.70(t)，66.42(t)，12 7.19(d)，128.58(d)，128.86(d)，129.08(d)，137.95(s)，138.24(s)；IR（KBr ）3422，3388，3061，2925，1548 ｃｍ^-1。元素分析 C₂₀H₂₂O₂S₂・1/2 H₂O についての計算値：C，65.36；H，6.31。実測値：C，65.73；H，6.23。実施例２３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＡ）還流管及び２つのゴム性隔壁を備えた２５ｍＬ三頸丸底フラスコに約１０ｍＬの液体アンモニアを−７８℃で仕込んだ。その温度でこの液体アンモニアにまず４２ｍｇのリチウム（４当量）を添加してから４ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の５３８ｍｇのジオール(II)を添加した。このジオール溶液の添加が完了した後まもなく、この溶液の青色が消えてこの混合液は白色懸濁液になった。この混合液の青色を維持するよう追加量のリチウムを添加した。得られた混合液を−７８℃で１時間攪拌した時点で、青色が消えるまで数滴のメタノールを添加した。この反応混合液を室温まで徐々に温め、その間に蒸発によりアンモニアを除去すると、黄色溶液が得られた。残留アンモニアをロータリーエバポレーターで留去することにより除去した。得られた残渣を攪拌しながら６ｍＬの水と１０ｍＬのエーテルで処理して得られた混合液を０℃まで冷却し、１５ｍＬの２０％ＫＩ水溶液に溶かした７６１ｍｇのヨウ素（３.００mmol，２.９当量）で処理した。次いで、この混合液を室温まで温めて深赤色のエーテル層と橙色の水層を分液した。水層をエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出して合わせたエーテル層を０.１ＭＮa₂ＳＯ₄水溶液（１５ｍＬ）、水（２０ｍＬ）、及び食塩水（２０ｍＬ）で続けて洗浄して、最後に乾燥(Ｎa₂ＳＯ₄)した。溶媒をロータリーエバポレーターで留去してからＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）を溶離液とするシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１２５ｍｇの３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン(４７％)を赤色固体として得た：ｍｐ６４〜６６ ℃（クロロホルム／ヘキサン）；Ｒｆ０.１４（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：１）；¹H NMR（360 MHz，CDCl₃）δ 1.77(t，2H，J=6.2Hz)，4.29(d，4H，J=6.2Hz )，6.40(s，1H)；¹³C NMR（90 MHz，CDCl₃）δ 64.63(t)，125.17(d)，134.96(s )。元素分析C₆H₈O₂S₂についての計算値：C，40.89；H，4.58。実測値：C，41.06 ；H，4.71。実施例３３,６−ビス（アセチルオキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＢ）ピリジン（１５ｍＬ）中の３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン、つまりジチインＡ（６００ｍｇ，３.４０mmol）の攪拌溶液に無水酢酸（２. ０ｍＬ，１０００ mol％）を滴下した。暗所で一晩攪拌した後、この混合液をジエチルエーテル（２００ｍＬ）で希釈して、ジエチルエーテル（５０ｍＬ）と３ .０ＭＨ₃PＯ₄（２００ｍＬ）中に分配した。そのジエチルエーテル層を３.０ＭＨ₃PＯ₄（２００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ₃（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎa₂ＳＯ₄）し、そして溶媒をロータリーエバポレーターで留去した。得られた油状残渣を１：３／ジエチルエーテル：ヘキサンを溶離液として用いるシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、４０ｍｇのジチインＢを赤色オイル（８７０ｍｇ）として得た：¹H NMR(CDCl₃)δ 6.38(s，2H)，4.70(s，4H)，2.10(s，6H)：¹³C NMR δ 170.37， 130.48，127.75，65.19，20.77。実施例４３,６−ビス（ベンゾイルオキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＦ）ピリジン（１.０ｍＬ）中の３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン、つまりジチインＡ（２０ｍｇ，０.１１３mmol）の攪拌溶液に塩化ベンゾイル（０.１３ｍＬ）を一度に添加した。暗所で室温で一晩攪拌した後、この混合液をジエチルエーテル（１０ｍＬ）で希釈して３.０ＭＨ₃PＯ₄（２０ｍＬ）とジエチルエーテル（５.０ｍＬ）中に分配した。そのジエチルエーテル層を飽和ＮａＨＣＯ₃（２０ｍＬ）で洗浄し、乾燥(Ｎa₂ＳＯ₄)し、そして溶媒をロータリーエバポレーターで留去した。得られた油状残渣を１：３／ジエチルエーテル：ヘキサンを溶離液として用いるシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、赤色オイル（４０.１ｍｇ）を得た：¹ H NMR（CDCl₃）δ 8.07(d，4H)，7.59(t，2H)，7.46(t，4H)，6.50(s，2H)，4. 98(s，4H)；¹³C NMR δ 165.91，133.37，130.63，129.78，128.55，128.49，12 7.70，65.65。実施例５３,６−ビス（プロピオニルオキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＧ）テトラヒドロフラン（２.０ｍＬ）中の３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１ ,２−ジチイン、つまりジチインＡ（２０ｍｇ，０.１１３mmol）及びトリエチルアミン（０.３０ｍＬ）の攪拌溶液に塩化プロピオニルを全混合物液が固体になるまで滴下した。この固体化混合物に１.０ＭＨ₃PＯ₄（２０ｍＬ）を添加して標的化合物をジエチルエーテル（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせたエーテル抽出液を飽和ＮａＨＣＯ₃（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎa₂ＳＯ₄）し、そして溶媒を留去して、赤色オイル(２２.２ｍｇ)を得た：¹H NMR（CDCl₃）δ 6.38( s，2H)，4.72(s，4H)，2.39(q，4H)，1.16(t，6H)。実施例６３,６−ビス（イソブチリルオキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＨ）ピリジン（２.０ｍＬ）中の無水イソ酪酸（０.２ｍＬ，１,０００ mol％）の攪拌溶液に３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン、つまりジチインＡ（２０ｍｇ，０.１１３mmol）を一度に添加した。暗所で室温で一晩攪拌した後、この混合液をジエチルエーテル（２０ｍＬ）で希釈して、３.０ＭＨ₃PＯ₄ （８０ｍＬ）とジエチルエーテル（３０ｍＬ）中に分配した。そのジエチルエーテル層を飽和ＮａＨＣＯ₃（１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎa₂ＳＯ₄）し、溶媒を留去して、生成物を赤色オイル（３２ｍｇ）として得た：¹H NMR（CDCl₃） δ 6.37(s，2H)，4.71(s，4H)，2.60(m，2H)，1.19(d，6H)。実施例７３,６−ビス（シクロプロパンカルボニルオキシメチル）−１,２−ジチイン（ジチインＩ）テトラヒドロフラン（２.０ｍＬ）中のトリエチルアミン（０.３ｍＬ）の０℃ の攪拌溶液に塩化シクロプロパンカルボニル（０.１０ｍＬ）を滴下した後、テトラヒドロフラン（１.０ｍＬ）中の３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチイン、つまりジチインＡ（２０ｍｇ，０.１１３mmol）を添加した。暗所で室温で一晩攪拌した後、この混合液をエーテル（２０ｍＬ）で希釈して、１.０ＭＨ₃PＯ₄（８０ｍＬ）とジエチルエーテル(３０ｍＬ)中に分配した。そのジエチルエーテル層を飽和ＮａＨＣＯ₃ （１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎa₂ＳＯ₄）し、溶媒を留去して、赤色オイル（３１.５ｍｇ）を得た：¹H NMR(CDCl₃)δ 6.38(s，2H)，4.71(s，4H)，1.67(m ，2H)，1.04(m，4H)，0.92(m，4H)。実施例８３,６−ビス[(メトキシメチルオキシ)メチル]−１,２−ジチイン（ジチインＤ）２ｍＬの乾燥塩化メチレン中の１８.７ｍｇのジオールジチインＡ及び１８５ μＬのＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０モル当量）の冷やした（０℃ ）溶液に４８.４μＬの塩化メトキシメチル（６.０モル当量）を一度に添加した。室温で一晩攪拌した後、この溶液を塩化メチレン（３０ｍＬ）で希釈して、得られた混合液をまず水（２０ｍＬ）で洗浄してから食塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。その有機層を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、そして溶媒をロータリーエバポレーターで留去して得られた粗生成物を、ヘキサン／ＣＨＣｌ₃／ＥｔＯＡｃ（５：５：１）を溶離液とするシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、２５.２ｍｇのメトキシメチルエーテルジチインＤ（９０％収率）を橙赤色粘稠液体として得た：Ｒｆ０.４５（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：４）；¹H NMR （360 MHz，CDCl₃）δ 3.40(s，6H)，4.22(s，4H)，4.67(s，4H)，6.36(s，2H) ；¹³C NMR(90 MHz，CDCl₃)δ 55.54(q)，68.83(t)，95.76(t)，126.45(d)，132. 34(s)。実施例９３,６−ジホルミル−１,２−ジチイン（ジチインＥ）２ｍＬの塩化メチレン中の１９.４ｍｇのジオールジチインＡの懸濁液に室温で１０２ｍｇの１,１,１−トリアセトキシ−１,１−ジヒドロ−１,２−ベンズヨードキソール−３(１Ｈ)−オン（Dess-Martin 試薬）を一度に添加した。その温度で４０分間攪拌した後、この反応混合液を１５ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液中の１００ｍｇのＮa₂Ｓ₂O₃で処理した。得られた混合液を塩化メチレン（２× １５ｍＬ）で抽出して、合わせた有機層を食塩水（２０ｍＬ）で洗浄して乾燥（ＭｇＳＯ₄）した。溶媒をロータリーエバポレーターで留去して得られた粗生成物をＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）を溶離液とするシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、１８.５ｍｇ（＞９８％）のジアルデヒドジチインＡを深紫色結晶として得た：ｍｐ５６〜５８℃，Ｒｆ０.２３（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン＝１：１）；¹H NMR（360 MHz，CDCl₃）δ 7.30(s，2H)，9.60 (s，2H)；¹³ C NMR（90 MHz，CDCl₃）δ 141.52(d)，142.05(s)，186.54(d)；IR（KBr）3050 ，2958，2925，2851，1670 ｃｍ^-1；UV(CDCl₃)λ_max 557（ε 2,250）及び 281 nm(ε 29,400)。元素分析 C₆H₄S₂O₂についての計算値：C，41.84；H，2.34。実測値：C，41.84；H，2.49。上の合成ルートの概略を示す一般的フローシートを以下に示す。一般的フローシートここに記載しかつ特許請求した発明は、ここに開示した具体的態様により範囲を限定されない。というのは、これら態様は本発明の幾つかの側面の説明として意図されたものだからである。あらゆる均等な態様がこの発明の範囲内のものであると考えられる。実際、ここに示しかつ記載したものに加えて本発明の種々の変更がこれまでの記載から当業者には明らかとなろう。かかる変更も添付の請求の範囲に属すると考えられる。本願に引用した全ての文献は、参照によりそっくりそのままここに組み入れられるものとする。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年８月１４日【補正内容】 17．感染症を治療する方法であって、そのような感染症を有する温血動物に治療有効量の下式のジチイン化合物及びその薬学的に許容できる塩を投与することを含む方法。〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立に、水素、ハロゲン、アルキル又はアルケンであり；そしてＲ₃及びＲ₄は独立に、水素、アルキル又はアルケンである。この際、該アルキル又はアルケンは任意に環式基を含有し、そして非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、オキシ、エーテル、カルボニル、カルボキシル、メルカプト、カルボアルコキシ、シアノ、ニトロ、アシルオキシ、スルファミル、アミノ、アシルアミノ、カルバミル、アリール及びアラルキルからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；該アリール基及びアラルキル基は独立に、非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、エーテル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ及びアミノからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；そしてＲ₄とＲ₂、Ｒ₂とＲ₁、又はＲ₁とＲ₃は、任意に共に結合している。〕 18．感染症が真菌性である、請求項17の方法。 19．真菌感染症が、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)、クリプトコックス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoformans）又はアスペルギルス・フミガーツス(Aspergillus fumigatus)によって引き起こされる、請求項18の方法。 20．ジチイン化合物の治療有効性が、微量希釈肉汁アッセイにより、ＭＩＣが５０μｇ／ｍｌ未満であるように定められる、請求項19の方法。 21．ジチイン化合物を局所投与する、請求項17の方法。 22．ジチイン化合物を静脈内投与する、請求項17の方法。 23．ジチイン化合物を腹腔内投与する、請求項17の方法。 24．ジチイン化合物を経口投与する、請求項17の方法。 25．ジチイン化合物をエアロゾルにより投与する、請求項17の方法。 26．下記工程：水酸化カリウムとＤＭＦを含む塩基性溶液中で１,４−ジ置換ジイン（但し、該１,４−ジ置換ジインは、１,４−ジアリールジイン又は１,４−ジアルキルジインのいずれでもないものとする。）を非置換ベンジルチオールと反応させてビスベンジルチオール付加体を生成させる工程；該ビスベンジルチオール付加体を該塩基性溶液から溶媒抽出と結晶化により分離する工程；液体アンモニア中で該分離した付加体から該非置換ベンジル基をリチウムで還元的に除去してビスチオール体を生成させる工程；該ビスチオール体をＫＩとＩ₂を含む酸化体で酸化してジチイン化合物を生成させる工程を含む方法により合成されるジチイン化合物。 27．３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインをアシル化する方法により合成されるジチイン化合物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者トゥロング，ティーンヴイ. アメリカ合衆国 94608 カリフォルニア州エメリーヴィル，＃3103，クリスティーアベニュー 6400番地 (72)発明者ビーラー，ドナルドイー. アメリカ合衆国 94015 カリフォルニア州ダリーシティー，＃122，キャンパスドライブ 880番地 (72)発明者デナー，ジェフリーエム. アメリカ合衆国 94015 カリフォルニア州ダリーシティー，＃106，キャンパスドライブ 850番地 (72)発明者ヘクター，リチャードアメリカ合衆国 94038 カリフォルニア州モスビーチ，リンダヴィスタ 872番地 (72)発明者テンペスタ，マイケルエス. アメリカ合衆国 94038 カリフォルニア州モスビーチ，ピー．オー．ボックス 782 (72)発明者ローヴ，バーナードアメリカ合衆国 12351 ニューヨーク州ホームズ，ボックス 134，ルーラルルート１番地 (72)発明者ヤン，ウアメリカ合衆国 48105 ミシガン州アンアーバー，＃10，ハバードロード 2151番地 (72)発明者コリーダ，マサトアメリカ合衆国 48104 ミシガン州アンアーバー，チェロキーロード 1635 番地

Claims

【特許請求の範囲】１．下式を有するジチイン化合物。２．下式を有するジチイン化合物。３．下式を有するジチイン化合物。４．下式を有するジチイン化合物。５．下式を有するジチイン化合物。６．下式を有するジチイン化合物。７．下式を有するジチイン化合物。８．下式を有するジチイン化合物。９．下式を有するジチイン化合物。 10．下式を有するジチイン化合物。 11．下式を有するビスベンジルチオール付加体。 12．ジチイン化合物を合成する方法であって、塩基性溶液中で１，４−ジ置換ジイン（但し、該１,４−ジ置換ジインは、１,４−ジアリールジインではないものとする。）を置換又は非置換ベンジルチオールと反応させてビスベンジルチオール付加体を生成させ；次いで、該ビスベンジルチオール付加体を該塩基性溶液から溶媒抽出と結晶化により分離し；次いで、液体アンモニア中で該分離した付加体からアルカリ金属で該置換又は非置換ベンジル基を還元的に除去してビスチオール体を生成させ；次いで、該ビスチオール体を酸化体により酸化してジチイン化合物を生成させる方法。 13．塩基性溶液が水酸化カリウム及びエタノールを含み；アルカリ金属がナトリウムであり；そして酸化体がＫ₃[Ｆｅ(ＣＮ)₆]である、請求項12の方法。 14．塩基性溶液が水酸化カリウム及びＤＭＦを含み；アルカリ金属がリチウムであり；そして酸化体がＫＩ及びＩ₂を含む、請求項13の方法。 15．塩基性溶液中で１,４−ジ置換ジインを非置換又は置換ベンジルチオールと反応させる工程を含むビスベンジルチオール付加体の生成方法。 16．３,６−ビス（ヒドロキシメチル）−１,２−ジチインをアシル化する工程を含む置換ジチイン化合物の生成方法。 17．感染症を治療する方法であって、そのような感染症を有する温血動物に治療有効量の下式のジチイン化合物及びその薬学的に許容できる塩を投与することを含む方法。〔式中、Ｒ₁及びＲ₂は独立に、水素、ハロゲン、アルキル又はアルケンであり；そしてＲ₃及びＲ₄は独立に、水素、アルキル又はアルケンである。この際、該アルキル又はアルケンは任意に環式基を含有し、そして非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、オキシ、エーテル、カルボニル、カルボキシル、メルカプト、カルボアルコキシ、シアノ、ニトロ、アシルオキシ、スルファミル、アミノ、アシルアミノ、カルバミル、アリール及びアラルキルからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；該アリール基及びアラルキル基は独立に、非置換であるか、又はヒドロキシル、ハロ、エーテル、シアノ、ニトロ、カルボキシ、カルボアルコキシ及びアミノからなる群から選ばれる少なくとも１の官能基で置換されており；そしてＲ₄とＲ₂、Ｒ₂とＲ₁、又はＲ₁とＲ₃は、任意に共に結合している。〕 18．感染症が真菌性である、請求項17の方法。 19．真菌性感染症が、カンジダ・アルビカンス(Candida albicans)、クリプトコックス・ネオフォルマンス(Cryptococcus neoformans)又はアスペルギルス・フミガーツス(Aspergillus fumigatus)によって引き起こされる、請求項18の方法。 20．ジチイン化合物の治療有効性が、微量希釈肉汁アッセイにより、ＭＩＣが５０μｇ／ｍｌ未満であるように定められる、請求項19の方法。 21．ジチイン化合物を局所投与する、請求項17の方法。 22．ジチイン化合物を静脈内投与する、請求項17の方法。 23．ジチイン化合物を腹腔内投与する、請求項17の方法。 24．ジチイン化合物を経口投与する、請求項17の方法。 25．ジチイン化合物をエアロゾルにより投与する、請求項17の方法。 26．下記工程：水酸化カリウム及びＤＭＦを含む塩基性溶液中で１,４−ジ置換ジイン（但し、該１,４−ジ置換ジインは、１,４−ジアリールジインではないものとする。）を非置換ベンジルチオールと反応させてビスベンジルチオール付加体を生成させる工程；該ビスベンジルチオール付加体を該塩基性溶液から溶媒抽出と結晶化により分離する工程；液体アンモニア中で該分離した付加体から該非置換ベンジル基をリチウムで還元的に除去してビスチオール体を生成させる工程；該ビスチオール体をＫＩ及びＩ₂を含む酸化体で酸化してジチイン化合物を生成させる工程を含む方法により合成されるジチイン化合物。 27．３，６−ビス（ヒドロキシメチル）−１，２−ジチインをアシル化する方法により合成されるジチイン化合物。