JPH09206088A

JPH09206088A - リン脂質中の長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮方法

Info

Publication number: JPH09206088A
Application number: JP8017558A
Authority: JP
Inventors: Yoshikazu Inoue; 良計井上; Takafumi Ishihara; 隆文石原; Yoshitarou Takahashi; 是太郎高橋; Masafumi Hosokawa; 雅史細川; Masayo Ono; 雅代小野
Original assignee: BIZEN KASEI KK
Current assignee: BIZEN KASEI KK
Priority date: 1996-02-02
Filing date: 1996-02-02
Publication date: 1997-08-12

Abstract

(57)【要約】【課題】長鎖高度不飽和脂肪酸を豊富に含むリン脂
質を提供する。【解決手段】長鎖高度不飽和脂肪酸を含有するリン
脂質にリパーゼを作用させる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、リン脂質中の長鎖
高度不飽和脂肪酸の濃縮方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】長鎖高度不飽和脂肪酸として魚油由来の
エイコサペンタエン酸やドコサヘキサエン酸が知られて
いる。このような長鎖高度不飽和脂肪酸は体内に吸収さ
れてアラキドン酸カスケードの中でプロスタグランジン
やトロンボキサン等の形になり、人体に作用することが
知られている。最近これらが様々な薬効を有することが
認められてきているため、医薬品として、或いは健康食
品として注目を浴びつつある。

【０００３】このような高度不飽和脂肪酸は大半がトリ
グリセリドやエステル等の誘導体の形で利用されている
が、実際にはその大半が生体内でリン脂質の形態で存在
している。従来の食生活では、リン脂質とトリグリセリ
ドとの摂取バランスが良好であった。しかし、最近の食
生活の変化の中で、食品からのリン脂質の摂取が減少
し、他方、サラダ油やバター等のトリグリセリド型脂質
の摂取量が増加して、これらの摂取バランスが大きく崩
れてきた。

【０００４】このため、大豆レシチンや卵黄レシチン摂
取が推奨されているものの、これらに含まれているリン
脂質は大半が飽和脂肪酸やリノール酸までの不飽和結合
が２つ以下の脂肪酸が結合したものであった。

【０００５】ここで、不足しがちな長鎖高度不飽和脂肪
酸を含有するリン脂質を補うため、魚を食べたり、大豆
をそのままの形で調理して食べることが望ましいが、嗜
好の面でこのような食品の摂取はむしろ減少している。

【０００６】このような問題を解決する方法として、ド
コサヘキサエン酸を含有する餌を与えられた親による鶏
卵から得られる卵黄油や魚卵等からの抽出油が提案され
ている。しかし、このようにして得られた鶏卵でも長鎖
高度不飽和脂肪酸の含有量が低く、一方、魚卵等では非
常に高価でかつその大量入手が困難である、等の問題が
ある。

【０００７】一方、アラキドン酸を摂取するための食品
として、通常の卵黄油等を挙げることができるが、一般
にリン脂質の含有量が３０重量％程度で、アラキドン酸
の含有量も１．６重量％程度と低く、より高濃度のアラ
キドン酸を含む食品が求められている。このように、長
鎖高度不飽和脂肪酸を豊富に含むリン脂質を得る方法は
事実上なかった。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記従来の
問題点を解決する、すなわち、長鎖高度不飽和脂肪酸を
豊富に含むリン脂質を得る方法を提供することを目的と
する。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明のリン脂質中の長
鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮方法は、上記目的を達成する
ため、請求項１に記載の通り、長鎖高度不飽和脂肪酸を
含有するリン脂質にリパーゼを作用させることにより構
成されている。

【００１０】

【発明の実施の形態】本発明において、原料とする長鎖
高度不飽和脂肪酸を含有するリン脂質は、その長鎖高度
不飽和脂肪酸の含有量が高いものであることが望まし
い。長鎖高度不飽和脂肪酸の含有量の少ない原料を用い
た場合にも本発明の効果である濃縮効果は得られるが、
長鎖高度不飽和脂肪酸の含有量の絶対値が低いものしか
得られない。

【００１１】本発明において、上記濃縮対象の長鎖高度
不飽和脂肪酸が、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタ
エン酸、アラキドン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−
リノレン酸、γ−リノレン酸のうち１種乃至２種以上で
あると、優れた濃縮効果が得られる。特にドコサヘキサ
エン酸、エイコサペンタエン酸、及びアラキドン酸では
極めて優れた効果が得られるので、これらの含有量の高
い原料を用いることが望ましい。

【００１２】ここで、原料とする長鎖高度不飽和脂肪酸
を含有するリン脂質として、卵黄リン脂質、イカ皮、魚
卵、或いは魚肉より抽出したものを用いると非常に高い
長鎖高度不飽和脂肪酸含有量のリン脂質が得られる。

【００１３】本発明においてリパーゼは、動植物及び微
生物から得られる。例えば動物の膵液や唾液に含まれる
ものや、肝臓組織由来のものが知られている。植物由来
のものとしては、米糠や、小麦、菜種、或いは大豆等多
くに含まれている。また微生物由来のものとしては、カ
ビ、酵母、各種細菌から得ることができる。こうした微
生物としては、ムコールミイヘイ（Ｍｕｃｏｒｍｉｅ
ｈｅｉ）、キャンディダシリンドラシェ（Ｃａｎｄｉｄ
ａｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａ）、キャンディダルゴサ
（Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ）、アルカリゲネスＳ
Ｐ（ＡｌｃａｌｉｇｅｎｅｓＳＰ）、キャンディダア
ンタルチカ（Ｃａｎｄｉｄａａｎｔａｒｃｔｉｃａ）
等が知られている。

【００１４】なお、上記リパーゼが１，３特異性を有す
るものであると特に高い濃縮効果が得られる。ここで、
１，３特異性とは、リン脂質の内、グリセロリン脂質を
構成するグリセリン部のα及びα’位のエステル結合に
対して活性を有する性質のことであり、このような特異
性を有するリパーゼとしては、ノボノルディスク社のリ
ポザイムＩＭや天野製薬リパーゼＡＹＡｍａｎｏ３０等
が挙げられる。

【００１５】一方、１，３特異性を有さないランダム型
のリパーゼでも濃縮目的の長鎖高度不飽和脂肪酸のエス
テル結合に作用しにくい基質特性を有するものであるな
らば好適に使用できる。このようなものとして、ドコサ
ヘキサエン酸に対して作用しにくい名糖産業のリパーゼ
ＯＦ等が挙げられる。

【００１６】上記のようなリパーゼを用いる濃縮とは例
えば次のようにして行われる。長鎖高度不飽和脂肪酸含
有リン脂質を溶剤に溶解した後、リパーゼを添加し、２
〜６０時間２０〜６０℃に保ち、濾過後水洗を行って濃
縮作業が完了する。この溶液から長鎖高度不飽和脂肪酸
が濃縮されたリン脂質を取り出す方法としては、濃縮の
結果生じた脂肪酸をクロマトグラムによって、或いは、
アルカリを作用させて、除去し、その後溶剤を蒸発除去
する方法が挙げられる。なお、クロマトグラムに用いる
カラムの固定層としては、シリカゲル、活性白土、珪藻
土等の一般に用いられる無機系固定層の他、各種有機高
分子ゲル等を用いることも可能である。

【００１７】ここで溶剤としては適宜選択可能ではある
が、製品を食品として用いる場合にはヘキサンやエタノ
ールを用いることが望ましい。また、原料に中性脂肪等
が含まれていた場合には、このほかに適宜、中性脂肪除
去工程を組み合わせる。

【００１８】用いるリパーゼとしては粉末状のものが扱
いやすく、また、処理時間が短くて済む。添加量として
は、原料を１００重量部としたとき、１重量部以上１０
０重量部以下である。１重量部未満では本発明の効果が
充分ではなく、また１００重量部を越えて添加しても効
果が飽和してしまう。１０重量部以上７０重量部以下の
範囲での添加で充分な効果と良好な経済性が得られるの
で添加量としてはこの範囲であることが望ましい。

【００１９】また、濃縮工程での温度としては、通常４
０℃前後であることが望ましいが、高温に保つことによ
り濃縮効果が促進されることがあるため、適宜調整す
る。濃縮を行う時間としては２時間以上行うことによっ
て、効果が確実なものとなるが、２４時間程度行うと充
分な効果が得られることが多い。しかし、リパーゼの添
加量や、温度によっても異なるため予め調べることが必
要である。

【００２０】なお、上記条件を調整して、リパーゼの使
用量をできるだけ減らしながら２４時間程度の処理時間
になるようにすると実施しやすく、また、効率的かつ経
済的である。

【００２１】

【実施例】

〔実施例１〕ドコサヘキサエン酸を高濃度で含有する原
料として卵黄を選択した。エタノール水溶液（７０重量
％）を用いて、乾燥卵黄からリン脂質を含む油分を抽出
した。このものに含有されている燐分から算出されたリ
ン脂質（燐含量（％）を２５．４倍して算出）は５２．
３重量％であり、またエステル交換してメチル化した後
ガスクロマトグラフィーにより分析したところ、ドコサ
ヘキサエン酸成分は１１．８重量％であることが判っ
た。

【００２２】上記抽出物１０ｇをヘキサン１０００ｍｌ
に溶解し、これにノボノルディスク社のリポザイムＩＭ
（粉状）を５．３ｇ添加し、その後撹拌しながら４０℃
に保った。２４時間後、発生した固形成分を濾過により
除去し、分液ロートを用いて水洗し、次いで溶剤を留去
して濃縮した。

【００２３】この濃縮物をシリカゲル（メルク社製シリ
カゲル６０（７０〜２３０メッシュ））を固定層として
充填したカラム（直径：３．３ｃｍ、カラム長：２０ｃ
ｍ）に導入し、これにアセトンを流して中性脂肪成分を
除去し、次いで、エタノールを流してリン脂質を抽出し
た。次いで溶媒成分をロータリーエバポレーターで減圧
・留去した後、更に凍結乾燥を行い、リン脂質を含む油
分を３．１５ｇを得た。このものの分析を行ったとこ
ろ、リン脂質６４．３重量％であり、またドコサヘキサ
エン酸成分は２２．３重量％であった。

【００２４】〔実施例２〕イカ皮より抽出されたリン脂
質を含有する油分（リン脂質：３０．８重量％、ドコサ
ヘキサエン酸：３５．４重量％）１０ｇをヘキサン１０
００ｍｌに溶解し、これに水５ｍｌを加え、次いでリパ
ーゼＯＦ（名糖産業製、粉状）を８ｇ添加し、攪拌しな
がら３０℃に保った。８時間後これを濾過して分液ロー
トを用いて水洗した後油相を取り出して、溶剤を留去し
て濃縮した。

【００２５】これをシリカゲルカラム（実施例１で用い
たものと同等のもの）に導入し、これにアセトンを流し
て中性脂肪成分を除去し、次いで、エタノールを流して
リン脂質を抽出した。次いで溶媒成分をロータリーエバ
ポレーターで減圧・留去した後、更に凍結乾燥を行い、
リン脂質を含む油分２．７０ｇを得た。得られたものの
分析を行ったところ、リン脂質４１．８重量％であり、
またドコサヘキサエン酸成分は６３．３重量％であっ
た。

【００２６】〔実施例３〕実施例１同様に卵黄から油分
を抽出し、そのリン脂質分を調べたところ７０．４重量
％であった。またこのもののアラキドン酸成分をエステ
ル交換によりメチル化してガスクロマトグラフィーによ
り分析したところ２．８重量％であることが判った。

【００２７】上記抽出物１０ｇをヘキサン１０００ｍｌ
に溶解し、これにノボノルディスク社のリポザイムＩＭ
２．５ｇを添加し、その後撹拌しながら４０℃に保っ
た。２４時間後、発生した固形成分を濾過により除去
し、分液ロートを用いて水洗し、次いで溶剤を留去して
濃縮した。

【００２８】この濃縮物をシリカゲルカラム（実施例１
で用いたものと同等のもの）に導入し、これにアセトン
を流して中性脂肪成分を除去し、次いで、エタノールを
流してリン脂質を抽出した。次いで溶媒成分をロータリ
ーエバポレーターで減圧・留去した後、更に凍結乾燥を
行い２．７５ｇのリン脂質を含む油分を得た。このもの
の分析を行ったところ、リン脂質７３．５重量％であ
り、またアラキドン酸成分は８．１重量％であった。

【００２９】

【発明の効果】本発明に係るリン脂質中の長鎖高度不飽
和脂肪酸の濃縮方法は非常に容易でかつ、高い濃度まで
長鎖高度不飽和脂肪酸の含有量を高めることのできる優
れた方法である。また同時にこの方法は６時間乃至２４
時間程度の比較的短い時間で処理を行うことができるも
のである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者小野雅代北海道札幌市中央区南二条西18丁目291番地37

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】長鎖高度不飽和脂肪酸を含有するリン脂
質にリパーゼを作用させることを特徴とするリン脂質中
の長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮方法。
【請求項２】上記濃縮対象の長鎖高度不飽和脂肪酸
が、ドコサヘキサエン酸、エイコサペンタエン酸、アラ
キドン酸、α−リノレン酸、ジホモ−γ−リノレン酸、
γ−リノレン酸のうち１種乃至２種以上であることを特
徴とする請求項１に記載のリン脂質中の長鎖高度不飽和
脂肪酸の濃縮方法。
【請求項３】上記リパーゼが１，３特異性を有するも
のであることを特徴とする請求項１または請求項２に記
載のリン脂質中の長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮方法。
【請求項４】上記リパーゼがドコサヘキサエン酸、エ
イコサペンタエン酸、アラキドン酸、α−リノレン酸、
ジホモ−γ−リノレン酸、及び、γ−リノレン酸の各エ
ステル結合の少なくともに１つに対し、作用しにくい基
質特異性を有するものであることを特徴とする請求項２
に記載のリン脂質中の長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮方
法。
【請求項５】上記長鎖高度不飽和脂肪酸を含有するリ
ン脂質が卵黄リン脂質、イカ皮、魚卵、或いは魚肉より
抽出したものであることを特徴とする請求項１乃至請求
項４に記載のリン脂質中の長鎖高度不飽和脂肪酸の濃縮
方法。