JPH0866134A - サクラの多芽体による増殖方法 - Google Patents
サクラの多芽体による増殖方法Info
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- JPH0866134A JPH0866134A JP26825993A JP26825993A JPH0866134A JP H0866134 A JPH0866134 A JP H0866134A JP 26825993 A JP26825993 A JP 26825993A JP 26825993 A JP26825993 A JP 26825993A JP H0866134 A JPH0866134 A JP H0866134A
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- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
(57)【要約】
［目的］ サクラの多芽体を誘導・増殖することによっ
て、サクラの大量増殖を行なうことを目的とする。 ［構成］ サクラの外植片を液体培地から成る誘導培地
で回転培養して多芽体を誘導し、この多芽体を増殖培地
で培養して増殖・伸長させ、さらに固体培地から成る苗
化培地で多芽体を構成する腋芽を発根させるとともに、
馴化を行なうようにしたものである。
て、サクラの大量増殖を行なうことを目的とする。 ［構成］ サクラの外植片を液体培地から成る誘導培地
で回転培養して多芽体を誘導し、この多芽体を増殖培地
で培養して増殖・伸長させ、さらに固体培地から成る苗
化培地で多芽体を構成する腋芽を発根させるとともに、
馴化を行なうようにしたものである。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はサクラ（Ｐｒｕｎｕｓ
ｊａｍａｓａｋｕｒａ Ｓｉｅｂ．）の多芽体による増
殖方法に係り、とくに植物組織培養技術を用いたサクラ
の大量増殖技術に関するものであって、大量増殖能を有
するサクラの多芽体の誘導による増殖方法に関するもの
である。
ｊａｍａｓａｋｕｒａ Ｓｉｅｂ．）の多芽体による増
殖方法に係り、とくに植物組織培養技術を用いたサクラ
の大量増殖技術に関するものであって、大量増殖能を有
するサクラの多芽体の誘導による増殖方法に関するもの
である。
【０００２】
【従来の技術】サクラの増殖は、現在、実生、挿し木、
接ぎ木の３つの方法によって行なわれている。実生によ
る増殖方法は、サクラの場合に、自家不和合性が強い品
種が多いために、得られた個体は雑種の可能性が高く、
商業的な大量増殖の技術としては利用が困難である。ま
た挿し木による増殖方法は、前年枝挿し、緑枝挿し等が
挙げられるが、何れの方法においても活着が悪く、後の
樹勢も弱い。
接ぎ木の３つの方法によって行なわれている。実生によ
る増殖方法は、サクラの場合に、自家不和合性が強い品
種が多いために、得られた個体は雑種の可能性が高く、
商業的な大量増殖の技術としては利用が困難である。ま
た挿し木による増殖方法は、前年枝挿し、緑枝挿し等が
挙げられるが、何れの方法においても活着が悪く、後の
樹勢も弱い。
【０００３】そのために商業的な大量増殖の方法とし
て、接ぎ木による増殖方法が利用されている。この方法
は、切り接ぎ、削り接ぎ等の枝接ぎ、芽接ぎ、根接ぎ、
寄り接ぎ等が挙げられる。何れの方法においても熟練と
労力とを要する。また穂木は台木の影響を受けて子細な
変異を生ずる。また穂木・台木間には、親和性があるた
めに、誤った台木を用いると、活着しないか、活着して
も生育不良のために、枯死の危険性がある。従って有効
な増殖技術ではない。
て、接ぎ木による増殖方法が利用されている。この方法
は、切り接ぎ、削り接ぎ等の枝接ぎ、芽接ぎ、根接ぎ、
寄り接ぎ等が挙げられる。何れの方法においても熟練と
労力とを要する。また穂木は台木の影響を受けて子細な
変異を生ずる。また穂木・台木間には、親和性があるた
めに、誤った台木を用いると、活着しないか、活着して
も生育不良のために、枯死の危険性がある。従って有効
な増殖技術ではない。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】これらの問題を解決す
る手段として、植物組織培養技術を用いた大量増殖の方
法が考えられる。植物培養技術を用いて誘導・再生した
個体は、自根を有するために効率的な大量増殖が可能で
ある。またサクラの植物体外植片よりカルスを誘導増殖
し、カルスから不定芽を誘導・作出し、それらを植物体
に再生する方法は、マザクラ（Ｐｒｕｎｕｓ ｌａｎｎ
ｅｓｉａｎａ Ｗｉｌｓ．）において、松田等［Ｊａｐ
ａｎ Ｊ． Ｂｒｅｅｄ，ｖｌｏ．３３，Ｎｏ．４：４
８４〜４８６（１９８３）］によって報告されている
が、再分化率が非常に低く、増殖効率の点から、商業的
な増殖技術には至っていない。
る手段として、植物組織培養技術を用いた大量増殖の方
法が考えられる。植物培養技術を用いて誘導・再生した
個体は、自根を有するために効率的な大量増殖が可能で
ある。またサクラの植物体外植片よりカルスを誘導増殖
し、カルスから不定芽を誘導・作出し、それらを植物体
に再生する方法は、マザクラ（Ｐｒｕｎｕｓ ｌａｎｎ
ｅｓｉａｎａ Ｗｉｌｓ．）において、松田等［Ｊａｐ
ａｎ Ｊ． Ｂｒｅｅｄ，ｖｌｏ．３３，Ｎｏ．４：４
８４〜４８６（１９８３）］によって報告されている
が、再分化率が非常に低く、増殖効率の点から、商業的
な増殖技術には至っていない。
【０００５】またサクラの休眠芽や新梢、新梢腋芽等の
茎頂組織から直接植物体を再生させる方法は、酒谷およ
び天野［奈良林試研報 Ｎｏ．１７：２１〜３１（１９
８７）］、片野および入江［植物組織培養 コロキウム
資料集 Ｎｏ．２：７４〜７５（１９９０）］、田鎖お
よび石原［園芸学会要旨 東北支部 昭６２：８１〜８
２（１９８７）］等によって報告されている。何れも増
殖率が低く、少量の外植片から多数の再生個体を得る大
量増殖技術は開発されていない。
茎頂組織から直接植物体を再生させる方法は、酒谷およ
び天野［奈良林試研報 Ｎｏ．１７：２１〜３１（１９
８７）］、片野および入江［植物組織培養 コロキウム
資料集 Ｎｏ．２：７４〜７５（１９９０）］、田鎖お
よび石原［園芸学会要旨 東北支部 昭６２：８１〜８
２（１９８７）］等によって報告されている。何れも増
殖率が低く、少量の外植片から多数の再生個体を得る大
量増殖技術は開発されていない。
【０００６】上述のように、組織培養によるサクラ植物
体の大量増殖技術は、商業的に適用可能な技術には至っ
ておらず、技術の開発が望まれている。本発明は、サク
ラの多芽体を誘導・増殖させることによる商業的なサク
ラの大量増殖技術の開発を目的とするものである。
体の大量増殖技術は、商業的に適用可能な技術には至っ
ておらず、技術の開発が望まれている。本発明は、サク
ラの多芽体を誘導・増殖させることによる商業的なサク
ラの大量増殖技術の開発を目的とするものである。
【０００７】本発明でいう多芽体とは、非常に短縮した
状態の腋芽の集合体である。すなわち個々の腋芽は芽と
しての機能が備わっているために、容易に苗化させるこ
とができる。
状態の腋芽の集合体である。すなわち個々の腋芽は芽と
しての機能が備わっているために、容易に苗化させるこ
とができる。
【０００８】
【課題を解決するための手段とその作用】本願発明者等
は、商業的なサクラの大量増殖技術の開発を目的とし
て、使用する培地組成および培養工程について研究を行
なった結果、多芽体によるサクラの商業的な大量増殖方
法を見出した。
は、商業的なサクラの大量増殖技術の開発を目的とし
て、使用する培地組成および培養工程について研究を行
なった結果、多芽体によるサクラの商業的な大量増殖方
法を見出した。
【０００９】すなわち本発明によるサクラの植物体の作
成方法は、液体培地で回転培養して多芽体を誘導すると
ともに、この多芽体をさらに別の培地で培養して増殖・
伸長させる工程とを含むものである。ここで回転培養に
用いられる液体培地は、無機塩類、炭素源、ビタミン
類、オーキシンおよび／またはサイトカイニンを含む液
体培地である。また増殖・伸長させる別の培地は、無機
塩類、炭素源、ビタミン類を含む固体培地または液体培
地である。
成方法は、液体培地で回転培養して多芽体を誘導すると
ともに、この多芽体をさらに別の培地で培養して増殖・
伸長させる工程とを含むものである。ここで回転培養に
用いられる液体培地は、無機塩類、炭素源、ビタミン
類、オーキシンおよび／またはサイトカイニンを含む液
体培地である。また増殖・伸長させる別の培地は、無機
塩類、炭素源、ビタミン類を含む固体培地または液体培
地である。
【００１０】本発明によるサクラ植物体の作成は、まず
サクラの外植片を液体培地で回転培養し、多芽体を得、
この多芽体をさらに別の培地で培養することにより増殖
させ、さらに発根させることによりサクラ植物体を得る
ものである。以下の説明において、多芽体を得るための
液体培地を「誘導培地」とし、多芽体を増殖させるため
の培地を「増殖培地」とし、また多芽体を構成する腋芽
を発根させてサクラの植物体を得るための培地を「苗化
培地」とそれぞれ言うことにする。
サクラの外植片を液体培地で回転培養し、多芽体を得、
この多芽体をさらに別の培地で培養することにより増殖
させ、さらに発根させることによりサクラ植物体を得る
ものである。以下の説明において、多芽体を得るための
液体培地を「誘導培地」とし、多芽体を増殖させるため
の培地を「増殖培地」とし、また多芽体を構成する腋芽
を発根させてサクラの植物体を得るための培地を「苗化
培地」とそれぞれ言うことにする。
【００１１】サクラ外植片 多芽体を得るための外植片としては、茎頂組織を有する
ものであればよく、本願発明に使用し得るサクラ外植片
としては、休眠芽、新梢、新梢腋芽等を例示することが
できる。
ものであればよく、本願発明に使用し得るサクラ外植片
としては、休眠芽、新梢、新梢腋芽等を例示することが
できる。
【００１２】多芽体の誘導工程 多芽体をサクラ外植片から誘導するための誘導培地は、
無機塩類、炭素源、ビタミン類、オーキシンおよびサイ
トカイニンを含むものである。なお場合によってはオー
キシンを含まず、サイトカイニン単独でも誘導できるこ
とがある。
無機塩類、炭素源、ビタミン類、オーキシンおよびサイ
トカイニンを含むものである。なお場合によってはオー
キシンを含まず、サイトカイニン単独でも誘導できるこ
とがある。
【００１３】このような液体培地として、具体的には、
従来から植物の組織培養に用いられる基本培地、例え
ば、Ｂ−５培地（Ｇａｍｂｏｒｇら：Ｅｘｐ．Ｃｅｌ
ｌ． Ｒｅｓ．，５０：１５１〜１５８，１９６８）、
ＭＳ培地（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ＆ Ｓｋｏｏｇ：Ｐｈｙ
ｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ，１５：４７３〜４９７，１９６
２）、ＬＳ培地（Ｌｉｎｓｍａｉｒ ＆ Ｓｋｏｏｇ：
Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ，（Ｃｐｈ．），１８：１
００〜１２７，１９６５）、Ｗｈｉｔｅ培地（Ｗｈｉｔ
ｅ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｒｏｎａｌｄ Ｐｒｅｓｓ，１
９６３）、Ｎ−Ｎ培地（Ｎｉｔｃｈ ＆ Ｎｉｔｃｈ：
Ｐｌａｎｔａ，７２：３５５〜３７０，１９６７）、Ｗ
ＰＭ培地（Ｌｏｙｄら：Ｐｒｏｃ．Ｉｎｃ．Ｐｒｏｃ．
Ｉｎｔ．Ｐｌａｎｔ，Ｐｒｏｐ．，Ｓｏｃ．，３０：４
２１〜４２７，１９８１）等が挙げられ、さらにオーキ
シンおよびサイトカイニンを添加して調製される液体培
地であってもよい。
従来から植物の組織培養に用いられる基本培地、例え
ば、Ｂ−５培地（Ｇａｍｂｏｒｇら：Ｅｘｐ．Ｃｅｌ
ｌ． Ｒｅｓ．，５０：１５１〜１５８，１９６８）、
ＭＳ培地（Ｍｕｒａｓｈｉｇｅ＆ Ｓｋｏｏｇ：Ｐｈｙ
ｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ，１５：４７３〜４９７，１９６
２）、ＬＳ培地（Ｌｉｎｓｍａｉｒ ＆ Ｓｋｏｏｇ：
Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ，（Ｃｐｈ．），１８：１
００〜１２７，１９６５）、Ｗｈｉｔｅ培地（Ｗｈｉｔ
ｅ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｒｏｎａｌｄ Ｐｒｅｓｓ，１
９６３）、Ｎ−Ｎ培地（Ｎｉｔｃｈ ＆ Ｎｉｔｃｈ：
Ｐｌａｎｔａ，７２：３５５〜３７０，１９６７）、Ｗ
ＰＭ培地（Ｌｏｙｄら：Ｐｒｏｃ．Ｉｎｃ．Ｐｒｏｃ．
Ｉｎｔ．Ｐｌａｎｔ，Ｐｒｏｐ．，Ｓｏｃ．，３０：４
２１〜４２７，１９８１）等が挙げられ、さらにオーキ
シンおよびサイトカイニンを添加して調製される液体培
地であってもよい。
【００１４】培地の炭素源としては、単糖類としては、
グルコース、ガラクトース、フルクトース、マンニトー
ル、ソルビトール、二糖類としては、シュクロース、マ
ルトース、ラクトース等を例示することができる。
グルコース、ガラクトース、フルクトース、マンニトー
ル、ソルビトール、二糖類としては、シュクロース、マ
ルトース、ラクトース等を例示することができる。
【００１５】炭素源濃度は５〜５０ｇ／ｌの範囲が好ま
しい。オーキシンとしては、ナフタレン酢酸（ＮＡ
Ａ）、２．４−Ｄ、インドール酢酸（ＩＡＡ）、インド
ール酪酸（ＩＢＡ）、ピクロラム等を例示することがで
き、サイトカイニンとしては、ベンジルアデニン（Ｂ
Ａ）、４ージフェニルウレア（４ＰＵ）、イソペンテニ
ルアデニン（２ｉｐ）、ゼアチン、カイネチン等を例示
することができ、オーキシンおよびサイトカイニンを組
合わせて、またはオーキシンおよびサイトカイニンを単
独で使用することができる。例えばオーキシンを０．０
０１〜２．０ｍｇ／ｌ、サイトカイニンを０．００１〜
１０ｍｇ／ｌ単独で、または組合わせて添加することが
好ましい。またジベレリン生合成阻害剤を上記誘導培地
に添加することにより、多芽体の誘導率が向上する場合
がある。ジベレリン生合成阻害剤としては、アンミドー
ル等を例示することができる。培地のｐＨは、５．０〜
６．０に調製されたものが好ましい。
しい。オーキシンとしては、ナフタレン酢酸（ＮＡ
Ａ）、２．４−Ｄ、インドール酢酸（ＩＡＡ）、インド
ール酪酸（ＩＢＡ）、ピクロラム等を例示することがで
き、サイトカイニンとしては、ベンジルアデニン（Ｂ
Ａ）、４ージフェニルウレア（４ＰＵ）、イソペンテニ
ルアデニン（２ｉｐ）、ゼアチン、カイネチン等を例示
することができ、オーキシンおよびサイトカイニンを組
合わせて、またはオーキシンおよびサイトカイニンを単
独で使用することができる。例えばオーキシンを０．０
０１〜２．０ｍｇ／ｌ、サイトカイニンを０．００１〜
１０ｍｇ／ｌ単独で、または組合わせて添加することが
好ましい。またジベレリン生合成阻害剤を上記誘導培地
に添加することにより、多芽体の誘導率が向上する場合
がある。ジベレリン生合成阻害剤としては、アンミドー
ル等を例示することができる。培地のｐＨは、５．０〜
６．０に調製されたものが好ましい。
【００１６】上記のように調製された培地は、オートク
レーブ等により高温加圧滅菌処理を行なって使用され
る。
レーブ等により高温加圧滅菌処理を行なって使用され
る。
【００１７】次に外植片から多芽体を誘導するための具
体的な培養条件を以下に記す。上述した誘導培地をまず
調製し、無菌の、または無菌化した外植片を置床する。
外植片の無菌化は、エチルアルコール水溶液、次亜塩素
酸ナトリウム水溶液等を用いて常法により実施できる。
外植片を置床後に、２０〜３０℃の温度の下で１〜５ｒ
ｐｍで垂直回転培養を行なうことにより、外植片から多
芽体が形成される。この工程では５００〜３００００ｌ
ｕｘ、１８〜２４時間日長下で良好な結果が得られる。
体的な培養条件を以下に記す。上述した誘導培地をまず
調製し、無菌の、または無菌化した外植片を置床する。
外植片の無菌化は、エチルアルコール水溶液、次亜塩素
酸ナトリウム水溶液等を用いて常法により実施できる。
外植片を置床後に、２０〜３０℃の温度の下で１〜５ｒ
ｐｍで垂直回転培養を行なうことにより、外植片から多
芽体が形成される。この工程では５００〜３００００ｌ
ｕｘ、１８〜２４時間日長下で良好な結果が得られる。
【００１８】なお回転培養は、本願発明においてとくに
特定されるものではないが、本願発明では、例えばＨＳ
Ｋ−ＲＢ（株式会社広島設備開発製）等の装置によって
行なわれてよい。
特定されるものではないが、本願発明では、例えばＨＳ
Ｋ−ＲＢ（株式会社広島設備開発製）等の装置によって
行なわれてよい。
【００１９】多芽体の増殖工程 上記工程で得られた多芽体は、下記の増殖培地で培養す
ることによって、多芽体を構成する短縮した腋芽を増殖
させることができる。
ることによって、多芽体を構成する短縮した腋芽を増殖
させることができる。
【００２０】増殖培地は無機塩類および炭素源、ビタミ
ン類を必須成分とし、培地固化剤を添加したものであっ
てよく、また液体培地であってもよい。具体的には上述
のＢ−５培地、ＭＳ培地等を例示することができる。培
地の炭素源としては、誘導培地と同様のものを例示する
ことができる。培地固化剤としては、寒天、ゲルライト
等を例示することができ、例えば寒天の場合には６〜１
５ｇ／ｌの量を用いることが好ましい。
ン類を必須成分とし、培地固化剤を添加したものであっ
てよく、また液体培地であってもよい。具体的には上述
のＢ−５培地、ＭＳ培地等を例示することができる。培
地の炭素源としては、誘導培地と同様のものを例示する
ことができる。培地固化剤としては、寒天、ゲルライト
等を例示することができ、例えば寒天の場合には６〜１
５ｇ／ｌの量を用いることが好ましい。
【００２１】また上記の増殖培地に、オーキシン、サイ
トカイニン等を単独または組合わせて添加することによ
り、より好ましい結果が得られる。オーキシンとして
は、多芽体誘導培地に示したものを例示することがで
き、例えば０．０５〜２．０ｍｇ／ｌの濃度が好まし
い。サイトカイニンとしては、ベンジルアデニン等を例
示でき、例えばベンジルアデニンの場合には０．０１ｇ
／ｌ以上でとくに有効である。
トカイニン等を単独または組合わせて添加することによ
り、より好ましい結果が得られる。オーキシンとして
は、多芽体誘導培地に示したものを例示することがで
き、例えば０．０５〜２．０ｍｇ／ｌの濃度が好まし
い。サイトカイニンとしては、ベンジルアデニン等を例
示でき、例えばベンジルアデニンの場合には０．０１ｇ
／ｌ以上でとくに有効である。
【００２２】多芽体増殖工程は、前記工程で得られた多
芽体を上述した多芽体増殖培地に移し、２０〜３０℃、
５００〜１００００ｌｕｘ、８〜１６時間日長下で４〜
２４週間静置培養することによって成し得られる。
芽体を上述した多芽体増殖培地に移し、２０〜３０℃、
５００〜１００００ｌｕｘ、８〜１６時間日長下で４〜
２４週間静置培養することによって成し得られる。
【００２３】苗化工程 上述の多芽体誘導工程および／または増殖工程で得られ
た多芽体は、下記の苗化培地で培養することによって、
サクラ植物体を得ることができる。
た多芽体は、下記の苗化培地で培養することによって、
サクラ植物体を得ることができる。
【００２４】苗化培地は、無機塩類および炭素源、ビタ
ミン類を必要成分とし、培地固化剤を添加したものであ
る。具体的には、上述のＢ−５培地、ＭＳ培地等を例示
することができる。培地の炭素源としては、誘導培地と
同様のものを例示することができる。また培地の固化剤
としては、増殖培地で用いたものと同様のものを例示す
ることができる。
ミン類を必要成分とし、培地固化剤を添加したものであ
る。具体的には、上述のＢ−５培地、ＭＳ培地等を例示
することができる。培地の炭素源としては、誘導培地と
同様のものを例示することができる。また培地の固化剤
としては、増殖培地で用いたものと同様のものを例示す
ることができる。
【００２５】また上記の苗化培地に、オーキシンを添加
することによって、より好ましい結果が得られる。オー
キシンとしては、誘導培地に示したものを例示すること
ができ、例えばＩＢＡの場合には、０．０５〜２．０ｍ
ｇ／ｌの濃度が好ましい。
することによって、より好ましい結果が得られる。オー
キシンとしては、誘導培地に示したものを例示すること
ができ、例えばＩＢＡの場合には、０．０５〜２．０ｍ
ｇ／ｌの濃度が好ましい。
【００２６】上述の苗化培地に多芽体の腋芽を置床し、
２０〜３０℃、５００〜１００００ｌｕｘ、８〜１６時
間日長下で静置培養することにより、発根を伴った植物
体を得ることができ、さらに土壌への馴化、鉢上げを行
なうことにより、サクラ植物体を作出することができ
る。
２０〜３０℃、５００〜１００００ｌｕｘ、８〜１６時
間日長下で静置培養することにより、発根を伴った植物
体を得ることができ、さらに土壌への馴化、鉢上げを行
なうことにより、サクラ植物体を作出することができ
る。
【００２７】馴化の土壌としては、パーミキュライト、
ピートモス、パーライト、桐生砂、鹿沼土、水ゴケ等を
例示することができる。本発明により作出されたサクラ
植物体は、茎頂組織から直接誘導されたものであって、
脱分化を伴っていないクローン植物であり、形態および
染色体数の観察の結果、変異が見られなかった。
ピートモス、パーライト、桐生砂、鹿沼土、水ゴケ等を
例示することができる。本発明により作出されたサクラ
植物体は、茎頂組織から直接誘導されたものであって、
脱分化を伴っていないクローン植物であり、形態および
染色体数の観察の結果、変異が見られなかった。
【００２８】
【実施例】実施例１ 〈材料および方法〉サクラ品種センダイヤ（Ｐｒｕｎｕ
ｓ ｊａｍａｓａｋｕｒａ Ｓｉｅｂ．ｃｖ． ｓｅｎ
ｄａｉｙａ，ｃｖ．ｎｏｖ．）の側枝休眠芽を一芽一節
に調製し、７０％エタノール水溶液および次亜塩素酸ナ
トリウム水溶液により表面殺菌し、滅菌水によって洗浄
後、顕微鏡下で茎頂組織を摘出し、外植片とした。外植
片を多芽体誘導培地に２５ｍｌ培地当り１片を置床し、
７００〜１００００ｌｕｘ、２４時間日長下で、直径が
１ｍ、２ｒｐｍの回転培養装置ＨＳＫ−ＲＢ（株式会社
広島設備開発製）で垂直回転培養を行なった。
ｓ ｊａｍａｓａｋｕｒａ Ｓｉｅｂ．ｃｖ． ｓｅｎ
ｄａｉｙａ，ｃｖ．ｎｏｖ．）の側枝休眠芽を一芽一節
に調製し、７０％エタノール水溶液および次亜塩素酸ナ
トリウム水溶液により表面殺菌し、滅菌水によって洗浄
後、顕微鏡下で茎頂組織を摘出し、外植片とした。外植
片を多芽体誘導培地に２５ｍｌ培地当り１片を置床し、
７００〜１００００ｌｕｘ、２４時間日長下で、直径が
１ｍ、２ｒｐｍの回転培養装置ＨＳＫ−ＲＢ（株式会社
広島設備開発製）で垂直回転培養を行なった。
【００２９】ここで用いた誘導培地とは、２％シュクメ
ロース、０．００５〜０．０５ｍｇ／ｌＮＡＡ．０．１
〜５．０ｍｇ／ｌＢＡを含むＢ−５液体培地である。
ロース、０．００５〜０．０５ｍｇ／ｌＮＡＡ．０．１
〜５．０ｍｇ／ｌＢＡを含むＢ−５液体培地である。
【００３０】〈増殖培地〉２〜３％シュクロース、０．
１ｍｇ／ｌＩＢＡ、０．１〜１．０ｍｇ／ｌＢＡを含む
Ｂ−５およびＭＳ寒天培地（寒天１０ｇ／ｌ）である。
１ｍｇ／ｌＩＢＡ、０．１〜１．０ｍｇ／ｌＢＡを含む
Ｂ−５およびＭＳ寒天培地（寒天１０ｇ／ｌ）である。
【００３１】〈苗化培地〉３％シュクロース、０．０５
〜０．１ｍｇ／ｌＩＢＡを含むＭＳ寒天培地（寒天１０
ｇ／ｌ）である。
〜０．１ｍｇ／ｌＩＢＡを含むＭＳ寒天培地（寒天１０
ｇ／ｌ）である。
【００３２】〈結果〉約４週間後から多芽体の誘導が見
られた。培養開始約１２週間後に計数したところ、１外
植片につき２０〜５０個の腋芽から成る多芽体が誘導さ
れた。さらに得られた多芽体を上記の増殖培地に置床し
たところ、継続的に増殖を続け、約２４週間後に多芽体
の腋芽数が３０〜４０倍に増殖した。増殖した腋芽か
ら、増殖培地上で２０〜５０ｍｍの発根を伴わない幼植
物体が形成された。得られた腋芽を苗化培地に置床した
ところ、約４週間後に増殖した腋芽の約３０〜４０％に
発根が見られた。発根した腋芽は、根に付着した寒天を
洗い流し、バーミキュライト、ピートモス、パーライト
等の用土へ馴化し、活着後、腐葉土、川砂等を混合した
普通の畑土に鉢上げを行ない、植物体を得た。得られた
植物体について調査を行なったところ、形態的な変異等
は観察されなかった。
られた。培養開始約１２週間後に計数したところ、１外
植片につき２０〜５０個の腋芽から成る多芽体が誘導さ
れた。さらに得られた多芽体を上記の増殖培地に置床し
たところ、継続的に増殖を続け、約２４週間後に多芽体
の腋芽数が３０〜４０倍に増殖した。増殖した腋芽か
ら、増殖培地上で２０〜５０ｍｍの発根を伴わない幼植
物体が形成された。得られた腋芽を苗化培地に置床した
ところ、約４週間後に増殖した腋芽の約３０〜４０％に
発根が見られた。発根した腋芽は、根に付着した寒天を
洗い流し、バーミキュライト、ピートモス、パーライト
等の用土へ馴化し、活着後、腐葉土、川砂等を混合した
普通の畑土に鉢上げを行ない、植物体を得た。得られた
植物体について調査を行なったところ、形態的な変異等
は観察されなかった。
【００３３】実施例２ 〈材料および方法〉誘導培地に添加するＮＡＡ（オーキ
シン）濃度およびＢＡ（サイトカイニン）濃度を種々に
変えて多芽体の誘導率をセンダイヤについて観察した。
なおそれ以外の条件は上記実施例１と同様である。
シン）濃度およびＢＡ（サイトカイニン）濃度を種々に
変えて多芽体の誘導率をセンダイヤについて観察した。
なおそれ以外の条件は上記実施例１と同様である。
【００３４】実施例１と同様の方法で外植片を調製し、
２％のシュクロース、０，０００５，０．０１，０．０
２，０．０４，０．０５，０．１ｍｇ／ｌＮＡＡと０．
００２，０．１，０．２，１．０，２．０，４．０，
６．０ｍｇ／ｌＢＡを組合わせて添加したＢ−５液体培
地に２５ｍｌ培地当り外植片１片を置床した。培養条件
は約７００〜１００００ｌｕｘ、２４時間日長下であっ
て、直径が１ｍの装置で回転数が２ｒｐｍの垂直回転培
養を行なった。
２％のシュクロース、０，０００５，０．０１，０．０
２，０．０４，０．０５，０．１ｍｇ／ｌＮＡＡと０．
００２，０．１，０．２，１．０，２．０，４．０，
６．０ｍｇ／ｌＢＡを組合わせて添加したＢ−５液体培
地に２５ｍｌ培地当り外植片１片を置床した。培養条件
は約７００〜１００００ｌｕｘ、２４時間日長下であっ
て、直径が１ｍの装置で回転数が２ｒｐｍの垂直回転培
養を行なった。
【００３５】〈結果〉培養１２週間後に、０．００５〜
０．０４ｍｇ／ｌのＮＡＡと、０．２〜４．０ｍｇ／ｌ
のＢＡを組合わせて添加した培地において、多芽体が誘
導された。誘導率は３０〜８０％で、とくに０．００５
〜０．０２ｍｇ／ｌのＮＡＡと、１．０〜４．０ｍｇ／
ｌのＢＡの組合わせがとくに好ましい結果をもたらし
た。
０．０４ｍｇ／ｌのＮＡＡと、０．２〜４．０ｍｇ／ｌ
のＢＡを組合わせて添加した培地において、多芽体が誘
導された。誘導率は３０〜８０％で、とくに０．００５
〜０．０２ｍｇ／ｌのＮＡＡと、１．０〜４．０ｍｇ／
ｌのＢＡの組合わせがとくに好ましい結果をもたらし
た。
【００３６】実施例３ 苗化培地に添加するＩＢＡ濃度を２．０ｍｇ／ｌとし、
腋芽を置床し、１週間後にＩＢＡを添加しないＭＳ寒天
培地に移植してその発根率をセンダイヤについて観察し
た。なお苗化培地のＩＢＡ濃度以外については、上記実
施例１と同様の条件とした。
腋芽を置床し、１週間後にＩＢＡを添加しないＭＳ寒天
培地に移植してその発根率をセンダイヤについて観察し
た。なお苗化培地のＩＢＡ濃度以外については、上記実
施例１と同様の条件とした。
【００３７】〈結果〉腋芽をＩＢＡを添加しないＭＳ寒
天培地に移植して約１週間後から発根が見られた。移植
４週間後に観察したところ、発根率は８０〜９０％に向
上した。発根が見られた植物体について馴化を行なった
ところ、ほとんどの個体が活着し、植物体が得られた。
天培地に移植して約１週間後から発根が見られた。移植
４週間後に観察したところ、発根率は８０〜９０％に向
上した。発根が見られた植物体について馴化を行なった
ところ、ほとんどの個体が活着し、植物体が得られた。
【００３８】
【発明の効果】以上のように本発明は、サクラの植物外
植片を液体培地で回転培養して多芽体を得、この多芽体
をさらに別の培地で培養して増殖・伸長し、さらに固体
培地において上記の増殖・伸長された多芽体を発根さ
せ、馴化を行なうことによって植物体を得るようにした
ものである。
植片を液体培地で回転培養して多芽体を得、この多芽体
をさらに別の培地で培養して増殖・伸長し、さらに固体
培地において上記の増殖・伸長された多芽体を発根さ
せ、馴化を行なうことによって植物体を得るようにした
ものである。
【００３９】従って本発明によれば、少量の外植片から
多数の再生個体を得る極めて増殖率の高いサクラの大量
増殖が可能になる。
多数の再生個体を得る極めて増殖率の高いサクラの大量
増殖が可能になる。
Claims (3)
- 【請求項１】サクラ（Ｐｒｕｎｕｓ ｊａｍａｓａｋｕ
ｒａ Ｓｉｅｂ．）の植物外植片を液体培地で回転培養
して多芽体を誘導する工程と、 誘導された多芽体を培地で培養して多芽体を構成する腋
芽を増殖・伸長させる工程と、 増殖・伸長した多芽体を構成する腋芽を固体培地で培養
して発根させ、順化を行ない、サクラの植物体を作出す
る工程と、 から成るサクラの多芽体による増殖方法。 - 【請求項２】多芽体を得るための外植片として、休眠
芽、新梢、新梢腋芽の内の何れかが用いられることを特
徴とする請求項１に記載のサクラの多芽体による増殖方
法。 - 【請求項３】誘導された多芽体を増殖・伸長させる工程
に移すことにより、多芽体を構成する腋芽を伸長させる
と同時に多芽体を増殖させることを特徴とする請求項１
に記載のサクラの多芽体による増殖方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26825993A JP3576579B2 (ja) | 1993-09-30 | 1993-09-30 | サクラの多芽体による増殖方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26825993A JP3576579B2 (ja) | 1993-09-30 | 1993-09-30 | サクラの多芽体による増殖方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0866134A true JPH0866134A (ja) | 1996-03-12 |
| JP3576579B2 JP3576579B2 (ja) | 2004-10-13 |
Family
ID=17456094
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26825993A Expired - Fee Related JP3576579B2 (ja) | 1993-09-30 | 1993-09-30 | サクラの多芽体による増殖方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3576579B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102657098A (zh) * | 2012-06-05 | 2012-09-12 | 上海闵行区苗圃 | 樱桃砧木嫩茎段离体培养方法 |
| CN105340742A (zh) * | 2015-11-16 | 2016-02-24 | 广州天适集团有限公司 | 一种云南樱桃成年优良单株“广州”樱的组培快繁方法 |
| KR101641301B1 (ko) * | 2015-12-31 | 2016-07-20 | 농업회사법인 주식회사 유니플랜텍 | 사과목 생산방법 |
| CN106538392A (zh) * | 2016-12-08 | 2017-03-29 | 上海杉植物科技有限公司 | 一种白樱花组织培养与快速繁殖方法 |
| CN114097616A (zh) * | 2021-11-19 | 2022-03-01 | 灵宝市鼎宏农业科技开发有限公司 | 一种大樱桃繁育方法 |
-
1993
- 1993-09-30 JP JP26825993A patent/JP3576579B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102657098A (zh) * | 2012-06-05 | 2012-09-12 | 上海闵行区苗圃 | 樱桃砧木嫩茎段离体培养方法 |
| CN105340742A (zh) * | 2015-11-16 | 2016-02-24 | 广州天适集团有限公司 | 一种云南樱桃成年优良单株“广州”樱的组培快繁方法 |
| KR101641301B1 (ko) * | 2015-12-31 | 2016-07-20 | 농업회사법인 주식회사 유니플랜텍 | 사과목 생산방법 |
| CN106538392A (zh) * | 2016-12-08 | 2017-03-29 | 上海杉植物科技有限公司 | 一种白樱花组织培养与快速繁殖方法 |
| CN114097616A (zh) * | 2021-11-19 | 2022-03-01 | 灵宝市鼎宏农业科技开发有限公司 | 一种大樱桃繁育方法 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3576579B2 (ja) | 2004-10-13 |
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