JPH08506593A

JPH08506593A - 癌治療法

Info

Publication number: JPH08506593A
Application number: JP6518508A
Authority: JP
Inventors: ブラーンダス、ローン、ジェイ．; リード、ロン
Original assignee: ユニヴァーシティオブマニトバ
Priority date: 1993-02-17
Filing date: 1994-02-17
Publication date: 1996-07-16
Anticipated expiration: 2013-12-09
Also published as: EP0684817A1; AU693780B2; AU6035294A; KR960700698A; AU1480497A; GB9303210D0; JP2834328B2; JPH10182490A; WO1994018961A1

Abstract

(57)【要約】生きている動物の腫瘍細胞に対する生体内化学治療処理の改善が，初めに正常細胞の増殖を阻止し悪性細胞の増殖を促進する性質の，特に細胞間ヒスタミンレセプターに特異的に拮抗的である化合物を，正常細胞及び悪性細胞での細胞間ヒスタミンのレセプターへの結合を阻止するに充分な量投与することで行われる．化学治療剤による腫瘍細胞に対する増強された毒性効果は得られるが，正常細胞，特に骨髄細胞および胃及び腸細胞，に対するその化学治療剤の何らかの不利な効果も阻止される．このような処置に有用なある種のフッ素含有誘導体は新規化合物である．

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称癌治療法発明の分野本発明は、化学療法薬剤の治療学的指数を増加し、癌の成長を剌戟する化合物の同定とこれら化合物の癌治療への使用に関し、さらにこのような治療に有用な特定の新規化合物に関する。発明の背景最近の５０年間に人間の各種病気に対する治療法は、実効のある薬剤の同定確認とそれらの臨床使用への導入によって著しく進歩した。多分ペニシリンやインスリン程ドラマチックではないけれども各種の薬剤が通常の疾患の治療法及び／又は予後を改善した。これらは以下を含む：（１）精神病、特に精神分裂病（例えばフェノチアジン）及び主要な抑うつ病（例えば三環式抗うつ剤及びより新しくはフルオキセチンのような非三環式薬剤）；（２）へイフィーバー（hayfever ）、ぜんそく、じんま疹及び急性アレルギー性疾患（例えばＨ₁−拮抗剤）；（３）消化系潰瘍症（例えばＨ₂−拮抗剤）；（４）真菌症［イミダゾール、例えばクロトリマゾール（clotrimazole）、ケトコナゾール（Ketoconazole）］；（５）乳癌［例えばタモキシフェン（tamoxifen）］；及び（６）高血圧、不整脈及びアンギナ（angina）（β−アドレナリン作用性拮抗剤）。これら外見上異なる種類の薬剤は異なる化学構造、相互作用、及び指定の使用法を有するが、大抵の場合効能を生むメカニズムは不完全にしか理解されていない。例えば、フェノチアジンはドパミン（Ｄ₂）受容体の拮抗剤であると知られているけれども、カルモジュリン（calmodulin）、プロテインキナーゼＣ及びカルシウムチャンネルを含む他の多くの細胞内部位における相互作用がそれらの活動力にとって重要であると思われる。同様に、抗うつ剤は生命に必要な（biogenic ）アミン神経伝達物質の神経末端［特にセロトニン（serotonin）及びノレピネフリン（norepinephrine）］への摂取量を減らしてその際シナプス中の濃度を増加させるが、特定のアミンの摂取を抑制する効力と抑うつ剤としての効力との間の充分な相関は示されていない。他の例として、ヒスタミン拮抗剤はＨ₁とＨ₂受容体それぞれを結合させることによりその抗アレルギー性及び抗酸性効果を生ずると思われるが、リピド及びアイコサノイド（eicosanoids）の代謝に重要なＰ４５０ミクロソーム酵素は前者ならびにイミダゾールの結合の主要部位として確認されている。さらに、ドキセピン（doxepin）のような抗うつ剤はＨ₂受容体を結合しないけれども酸分泌を抑制するのに有力である。最後の例として、抗エストロゲン（antiestrogen）タモキシフェンはエストロゲン受容体を結合することにより乳癌の増殖を抑制すると考えられている。それにも拘らず、エストロゲン受容体を拒絶する乳癌の１０％にタモキシフェンが有効であると報告されている。これは別の作用メカニズムの存在を示唆している。最近、脳膜及び肝臓ミクロソーム中にＨ_ICと呼ばれるユニークな細胞内ヒスタミン受容体が存在することが報告されている。パラジフェニル−メタン誘導体、Ｎ，Ｎ−ジエチル−２−［４−（フェニルメチル）−フェノキシ］−エタナミン、塩酸（ＤＰＰＥ）は、_ICの有力な拮抗剤である。驚くことに、フェノチアジン、Ｈ₁拮抗剤、セロトニン（５Ｈ₁、及び５Ｈ₃）拮抗剤、トリフェニルエチレン抗エストロゲン及びβ−アドレナリン作用性拮抗剤を含む前記の多種の薬剤も、親和力の程度は異るが、ＤＰＰＥ及びＨ_IC結合に対して競合する。Ｈ₂拮抗剤及び他のイミダゾールはＤＰＰＥ結合に対して競合しないが、ＡＥＢＳ及びＨ_ICを結合させる化合物に対する親和力よりも低い親和力でＨ_ICに対して競合する。Ｈ_ICを結合することにより、ヒスタミンは血液の血小板中における凝集を調停する細胞内メッセンジャーとして機能し、正常及び悪性の細胞の増殖に関係する。Ｈ_ICにおけるヒスタミンの第２のメッセンジャー役もエストロゲン作用中及び脳機能中において仮定されている。したがって、フェノチアジン、抗うつ剤、抗エストロゲン、ヒスタミン（Ｈ₁，Ｈ₂，Ｈ₃）拮抗剤、セロトニン（５ＨＴ₁，５ＨＴ₃）拮抗剤、β−アドレナリン作用性拮抗剤及び抗真菌性剤を含む多種類の薬剤の作用にＨ_IC結合が共通している可能性がある。最近、公開された国際特許出願ＷＯ９２／１１０３５（米国特許出願Ｎｏ．７１１，９５７、１９９１年６月７日出願）に、ＤＰＰＥ又はその類似物とドキソルビシン（doxorubicin）［アドリアマイシン（Adriamycin）：登録商標］のような化学療法薬剤とを組合せる癌治療の新らしい方法が記載されている。動物及び人間では、この治療法は骨の骨髄及び粘膜の上皮を含む正常な幹細胞を保護し、一方、悪性の細胞については抗癌化学療法効果を強める結果を生ずる。この異なる作用のメカニズムは完全には理解されていないけれども、イン−ビトロ研究によれば、ＤＰＰＥは毒性の存在なくして正常の細胞増殖を抑制するが悪性の細胞増殖と細胞毒性を刺戟することを示している。ＤＰＰＥと併行して治療される腫瘍をもつ動物では化学療法へのレスポンスが増加することが示されている。さらに、イン−ビトロ試験においてＤＰＰＥは直接に正常な消化器系粘膜を保護する。この効果は、保護性プロスタグランジン（prostaglandin）、ＰＧＩ₂、の内因性レベルでのＤＰＰＥ誘導による増加に関係し、そしてインドメチシン（indomethicin）によって逆転される。発明の要約本明細書に提供される新規なデータは、（１）少量服用の単独のＤＰＰＥは生体内において腫瘍細胞の成長を直接剌戟し、（２）腫瘍促進ホルボール（phorbo l）エステル、ＰＭＡ（phorbol myristate acetate）、によって誘導される炎症性レスポンスを皮膚中に増加させることを示している。抗うつ剤、フェノチアジン、トリフェニルエチレン、ヒスタミン（Ｈ₁，Ｈ₂，Ｈ₃）拮抗剤、セロトニン（５ＨＴ₁，５ＨＴ₃）拮抗剤、β−アドレナリン作用性拮抗剤、及びイミダゾール類似物のような他の数種類の化合物もまた、ＤＰＰＥに対して得られた結果と同じ結果を生むことが確認されている。また、三環式抗うつ剤及び非三環式薬剤、フルオキセチン（fluoxetine）［プロザック（Prozac）：登録商標］、ならびにＨ₁−抗ヒスタミン及びβ−アドレナリン作用性拮抗剤も、ラットの肝ミクロソーム又は脳膜中において³Ｈ−ＤＰＰＥ及び³Ｈ−ヒスタミンのＨ_ICへの結合に対して競合し、同様に腫瘍の成長を促進することがわかった。したがって、本発明の一面においては動物中の癌細胞の治療法が提供され、それは以下からなる：（ａ）悪性の細胞の増殖を促進しながら正常な細胞の増殖を抑制する化合物を、正常な細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を抑制するのに充分な量で動物に服用させ、そして（ｂ）次いで１種類以上の化学療法剤を癌細胞に対してこの癌細胞にとって有毒な量で動物に服用させる。このようなやり方で、癌細胞については一種以上の化学療法剤から強い毒性効果が得られ、一方、骨の骨髄及び胃腸の細胞を含む正常な細胞についてはこの一種以上の化学療法剤から逆の面の効果が得られる。さらに、ＤＰＰＥのある種のフルオロ類似物が、正常な細胞増殖の抑制ならびに悪性の細胞増殖の促進に強い効力を示すことがわかった。このような化合物は新規化合物である。したがって、本発明の他の面においては次式を有する化合物が提供される：上式中、Ｙはフッ素、塩素又は臭素であり、Ｚは１〜３の炭素原子数を有するアルキレン基又は＝Ｃ＝Ｏ基であり、あるいはフェニル基が結合して三環を形成し、ｐは０又は１であり、Ｒ₁及びＲ₂は各々１〜３の炭素原子数を含むアルキル基であるか又は窒素原子と一緒に結合してヘテロ環を形成するものであり、ｎは１，２又は３である。薬剤学的に受け入れることのできるこの化合物の塩も同じく提供される。上記化合物は、各種基の同定によって任意の都合のよい方法でつくることができる。例えば、Ｚがカルボニル基である化合物は、ヒドロキシ置換フルオローベンゾフェノンをクロロ置換アミノ置換アルキル基と反応させることによってつくることができる。図面の簡単な説明図１〜図１０は、以降の実施例において行った実験で得られたデータをグラフ化したものである。発明の一般的説明本発明において、悪性の細胞の増殖を促進しながら正常の細胞の増殖を抑制する化合物ならどんな化合物も有用であり、正常な細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を抑制するのに充分な量で投与される。このような化合物は一般にｐｋｉが約５以上、好ましくは約５．５以上を示す。本発明において有用な特定化合物は次式のジフェニル化合物である：上式中、Ｘ及びＹは各々フッ素、塩素又は臭素であり、Ｚは１〜３の炭素原子数を有するアルキレン基又は＝Ｃ＝Ｏ基であり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ₁ 及びＲ₂は各々１〜３の炭素原子数を含むアルキル基であるか又は一緒になって窒素原子をもつヘテロ環を形成し、ｎは１，２又は３である。ジフェニル化合物の薬剤学的に受け入れ可能の塩も使用できる。別の方法として、次式の構造にしたがってベンゼン環を合して三環式環を生成させてもよい：本発明の好ましい一実施態様において、前記Ｘ基はｆであり、ＺはＣ＝Ｏであり、ｏは１、そしてｐは０である。より好ましくは次式を有する化合物である。：上式中、ｎ，Ｒ₁及びＲ₂は前掲のとおりである。好ましい一実施態様において、基はジエチルアミノ基である。ただしジメチルアミノのような他のアルキルアミノ基も使用して差支えない。好ましい別の実施態様ではモルホリノ基が使用される。ただし他のヘテロ環基、例えばペペラジノ基、を使用することもできる。ｏ及びｐはＺがアルキレン基であるときは通常０であり、ｎは２である。式Ｉの化合物の特に好ましい一実施態様において、Ｚは−ＣＨ₂−、ｎは２、ｏ及びｐはそれぞれ０であり、そしてはジメチルアミノ基である。この化合物、すなわちＮ，Ｎ−ジエチル−２−［４ −（フェニルメチル）−フェノキシ］エタナミンは、その塩酸塩の形態でＤＰＰＥとして略記されている。ベンゼン環を連結するメチル基に加えて、＝Ｃ＝Ｏのような他の連結基も使用できる。ハロゲン原子に加えてベンゼン環に他の置換も行うことができる。例えばイミダゾール基など。III式の化合物の特に好ましい実施態様においては、ｎは２であり、はジエチルアミノ基である。この化合物、すなわちＮ，Ｎ＝ジエチル−２−［４ −（４’−フルオロフェノン）フェノキシ］エタナミンは、その塩酸塩の形態でＤＦＰＥとして略記されている。この化合物は、Ｈ_IC結合競合分析において、正常細胞の増殖を抑制すること及び悪性細胞の増殖を促進することではＤＰＰＥの２倍から４倍の効力を示す。本方法において用いることのできる他の化合物は以下のものを含む：（ａ）三環式抗うつ剤［例えばアミトリプチリン（amitriptyline）、クロミプラミン（clomipramine）、イミプラミン（imipramine）及び同類の薬剤］、（ｂ）非三環式抗うつ剤（例えばフルオキセチン及び同類の薬剤）、（ｃ）フェノチアジン［例えばプロクロルペラジン（prochlorperazine）、トリフルオロペリジン（trifluoroperizine）、クロルプロマジン（chlorpromazin e）及び同類の薬剤］、（ｄ）Ｈ₁−抗ヒスタミン［例えばロラタジン（loratadine）、ヒドロキシジン（hydroxyzine）、フェニルトルオキサミン（phenyltoloxamine）、アステミゾール（astemizole）及びその同類物］、（ｅ）β−アドレナリン作用性アゴニスト（agonist）及び拮抗剤［例えばプロパノロル（propanolol）及び同類物］、（ｆ）セロトニン（５ＨＴ₁又は５ＨＴ₃）拮抗剤［例えばオンダンセルトロン（ondansertron）（５ＨＴ₃）及びシプロヘプタジン（cyproheptadine）（５ＨＴ₂）］、（ｇ）シメチジン（cimetidine）及びランチジン（rantidine）などのＨ₂拮抗剤、チオペラミド（thioperamide）などのＨ₃拮抗剤、及びケトコナゾールなどの抗真菌性剤を含むイミダゾール及びイミダゾール類似の化合物、及び、（ｈ）タモキシフェンなどのトリフェニルエチレン誘導体。一般的に、使用することのできる化合物は少なくとも２個のフェニル環からなる化学構造を有し、このフェニル環は、剛性の第３のフェニル又は非フェニルの環により、又は非剛性のメチル、酸素、又はフェニル環構造がエーテルによって連結されている他の分子部分、メルカプト又は他の環構造又は他の基によって、塩基性アルカリアミン又はイミダゾール又はアミノイミダゾール側鎖、例えばカルボキシアミド−アミノ−イミダゾールＬ６５１５８２に連結されている。この広範囲の化合物を化学療法薬剤の治療学的指数を増加させるために用いることができるけれども、ＤＰＰＥとその直接的な類似物が、化学療法薬剤との組合せに対しては前述の化合物群よりも著しく優れた薬剤である。というのは、ＤＰＰＥはＨ_ICに対してより効果的かつ選択的であるらしく、カルモジュリン、プロテインキナーゼＣ又はカルシウムチャンネルとの相互作用がなく、さらにＨ₁ ，５ＨＴ及びＤ₂などの他の共通受容体では単に弱い拮抗剤であるからである。例えば、ＤＰＰＥは化学療法を強化するための臨床に適切な投与量（約０．２〜１２ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１０ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇが最適の投与量）において人間では重大な毒性効果を生じさせないが、他方、例えばＨ_ICに拮抗するための適切な濃度では、抗うつ剤グループの薬剤は心臓の不整脈を生ぜしめる可能性があり、Ｈ₁拮抗剤は著しい鎮静か又はけいれんさえも起させ、そしてフェノチアジンは運動障害を生ぜしめる可能性がある。実施例実施例１本実施例は、ＤＰＰＥ単独の、腫瘍促進（tumor promoting）効果及びプロ− インフラマトリーレスポンス（pro-inflammatory response）効果を例示する。図１は、２×１０²Ｌ５１７８Ｙリンフォマセル（lymphoma cell）を４８時間前に皮下に接種された７匹のＤＢＡ／２マウス（seven DBA/2 mice）に対して、１日に１度の３回（once daily×３）皮下に投与されたＤＰＰＥ（１ｍｇ／ｋｇ又は４ｍｇ／Ｍ²）の腫瘍促進（tumor-promoting）効果を示す。腫瘍セル（ce ll）を接種された７匹のマウスの第２グループは照査基準として取り扱った（含塩物（saline）を１日に１度の３回投与（once daily×３））。１４日までに、４／７の照査基準と比較して、ＤＰＰＥ処理された７／７の動物は明らかに腫瘍を有していた。最後の４週間後、６／７の照査基準は、全体で表面積１４．５ｃｍ²（平均＝２．１±０．８ｃｍ²／動物）の腫瘍を有していた。一方、ＤＰＰＥ処理された７／７の動物は、全体で表面積３８．４ｃｍ²（平均＝５．５±０．７ｃｍ²／動物）の腫瘍を有していた。このように、ＤＰＰＥ処理された動物の腫瘍の量は、照査基準の腫瘍の量のおよそ２．５倍であった。同種類のマウス（ＤＢＡ／２）における、ＰＭＡが引き起こす炎症の増加に対するＤＰＰＥの効果を調べるために、３匹ずつにグループ分けされた動物の背を剃り、そして４８時間後に１７ｎＭのＰＭＡアセトン溶液を一箇所に局部的に塗布した。次いで、ＰＭＡ処理されたマウスに、（照査基準として）含塩物（sali ne）又はＤＰＰＥ（０時間及び２４時間で４又は３２ｍｇ／ｋｇ）を付与した。３匹の動物に、アセトンを媒質の照査基準（vehicle controls）として塗布した。４８時間後、それぞれのグループをＣＯ₂の窒息により犠牲（sacrificed）にし、注意深く皮を切り取り、その皮のシワをとるために紙片にピンで留め、ホルムアルデヒド中に浸した。皮の、Ｈ及びＥ−着色領域（H and E-stained sectio ns）を炎症の度合いとして評価した。ＤＰＰＥを受けた動物は、ＰＭＡに対する非常に大きなインフラマトリーレスポンス（inflammatory response）を、塩含有物（saline）又はアセトン照査基準と比較して、有することが観測された。最も強いインフラマトリーレスポンス（inflammatory response）は、ＤＰＰＥの多量の投与（high dose）（３２ｍｇ／ｋｇ又は１２８ｍｇ／ｋｇ）を受けた動物に見られた。その場合、上皮層において増大された分裂活性（mitotic activity）についても、ＰＭＡ及び含塩物（sali ne）で処置されたグループと比較して著しいものであった。本実施例で報告された実験結果は、明らかにＤＰＰＥは、腫瘍促進剤であるＰＭＡのインフラマトリーレスポンス（inflammatory response）を強めることを示している。実際、腫瘍の促進は、インフラマトリーレスポンス（inflammatory response）の存在を必要としているため、すなわち炎症を抑制する試薬によって明らかに妨害することができるため、ＤＰＰＥは、ＰＭＡとの共促進剤（co-promoter）として機能している。実施例２本実施例は、ある種の化合物類のＨ_IC結合及び腫瘍促進効果及び、ＤＰＰＥ及びある種の化合物類の抗増殖効果を示している。図２は２種の三環式試薬、すなわち、アミトリプチリン（amitriptyline）及びドキセピン（doxepin）の効能を肝臓ミクロソーム中での³Ｈ−ＤＰＰＥ結合を競うことで示している。ＤＰＰＥに対するＫ_d値は６５ｎＭであり、一方、Ｋ₁はドキセピンに対しては５μＭであり、アミトリプチリンに対しては１０μＭである。ドキセピンとフルオキセチン（fluoxetine）はまた脳膜内でＨ_ICに対する³Ｈ−ヒスタミン結合を競っている（Ｋ_f＝１０μＭ；図３）図４は、１×１０⁵Ｃ−３繊維肉腫細胞の臀部に皮下注射されたＣ３Ｈマウス内における、三環式試薬であるアミトリプチリンと非三環式試薬であるフルオキセチンの腫瘍促進効果を示している。使用された投与量は治療法ヒト投与量と同等であった（アミトリプチリンを８０ｍｇ／Ｍ²、フルオキセチンを２０−４０ｍｇ／Ｍ²）、ブラインド試験のため、ここに測定される感知される腫瘍の最初の発現は処理グループ（生食制御に対して抗うつ剤；各グループにおいてｎ＝１０）では気づかなかった。このデータから、両方の試験において、制御動物は６日まで主張は発現しなかったが、フルオキセチン処理動物では腫瘍は注射後３，４及び５日で、アミトリプチリン処理動物では、注射後４及び５日に発生している。つまり、両方の試験において、抗うつ剤処理動物の４／１０が、制御動物では見られないけれども、５日目までに腫瘍を有していた（制御試験の０／２０に対して両試験を合わせて８／１０）。逆に、図５は、アミトリプチリンとフルオキセチンの両方が、ＤＰＰＥ同様に、コンカナバリンＡ刺激正常リンパ球の増殖を細胞毒なしに阻害していることを示している（ＩＣ₅₀＝１０〜２０μＭ）。つまり、ＤＰＰＥより弱いけれども、これらの試薬が正常な幹細胞の増殖を阻害し、一方腫瘍細胞の増殖を増加させている。図６Ａはプロプラノロール（β−アドレナリン作用性拮抗）がミクロソーム中のＨ_ICに結合しているヒスタミンを阻害することを示しており、図６Ｂはプロプラノロールが正常リンパ球有糸分裂誘発を阻害することを示している。Ｃ−３繊維肉腫マウスモデルにおいて、プロプラノロールは図７に示されるように、２３日目において腫瘍重量を意味ありげに増加させた。同様に、図７に示されるように、ロラチジン（loratidine）（三環式非鎮静Ｈ₁−抗ヒスタミン）は強力に腫瘍成長を促進し、また、コンカナバリンＡ刺激有糸分裂誘発を阻害した（図８）。アステミゾール（astemizole）（非鎮静Ｈ¹−抗ヒスタミン）は同様にヒスタミン結合とコンカナバリンＡ刺激有糸分裂誘発を阻害することに強力であり（データは示していない）、そして、２つの別の試験では、図９に示すように、Ｃ− ３繊維肉腫の成長を強力に刺激している。本実施例において結合と増殖のデータを提供するための化合物は、それ故、悪性細胞増殖を促進（実施例１）するのではなく、正常細胞増殖を阻害することでＤＰＰＥのプロファイルを真似ている。このプロファイルに基づいて、これらの試薬は、適当な投与量レベルで、ＷＯ９２／１１０３５の手順で化学療法薬の治療法指数を増加させるかもしれない。実施例３本実施例はＮ，Ｎ−ジエチル−２−［４−（４’−フルオロフェノン）フェノキシ］エタンアミンの化学合成を説明する。ジエチルアミノエチルクロライド・ＨＣｌ（２ｇ）を水酸化カリウムで塩基性にされたＨ₂Ｏの５０ｍｌに溶解させ、２５ｍｌのトルエンで４回抽出して塩を形成し、Ｎａ₂ＳＯ₄の存在下に一夜乾燥させた。５ｇの４−フルオロ−４’ヒドロキシベンゾフェノンが水素化ナトリウム（６００ｍｇ）を含む蒸留トルエンの５０ｍｌの加熱混合物へ加えられた。ＤＥＡＥ塩（工程１）は前記ベンゾフェノン／トルエンに滴下され、その混合物は２０時間還流された。混合物は室温に冷却され、それから約１５０ｍｌのトルエンで３回洗浄された。トルエン洗浄は乾燥をもたらした。得られた析出物はエタノール中に取り出し、エーテル性ＨＣｌを用いて再結晶させた。結晶化は２回目に繰り返した。得られた結晶の薄層クロマトグラフィは融点１２８℃、分子量３５１．５の単一生成物を示した。この化合物のＩＲスペクトルはＣ＝Ｏ伸縮を示している。ＤＰＰＥの構造はマススペクトロスコピー及びＮＭＲによって下記であることが確認された。モルフォリン類似体もまたＤＥＡＥ・ＨＣｌを４−（２−クロロエチル）モルフォリン・ＨＣｌに代えた以外は上記手順を用いて製造された。実施例４本実施例では、ＤＰＰＥの結合特性及び抗増殖性を示す。ＤＦＰＥは、ラット肝臓ミクロソームでの結合において［³Ｈ］ＤＰＰＥと競合し、Ｋ_i値は約７０ｎＭである。ＤＦＰＥのＫ_i値は同じ分析法で得られたＤＰＰＥのＫ_d値に近い。ＤＦＰＥは、ラット皮質膜での結合において［³Ｈ］ヒスタミンと競合し、Ｋ_i値は０．３×１０^-6Ｍである。その値を、同じ分析法で得られたＤＰＰＥのＫ_i値０．９×１０^-6Ｍと比較すると、脳膜における非Ｈ₁非Ｈ₂ 部位（Ｈ_IC）でのヒスタミン結合阻害について、ＤＦＰＥの方がＤＰＰＥより３倍強力である（ブランデスら、キャンサー・リサーチ、４７：４０２５〜４０３１，１９８７（Brandes，L.J.et al.，Cancer Research，47：4025-4031， 1987））。ＤＦＰＥは、酢酸ミリスチン酸ホルボール（ＰＭＡ）誘発血小板凝集に拮抗し、ＩＣ₅₀は２０μＭである。その値を同じ分析法でＤＰＰＥについて得られたＩＣ₅₀値８０μＭと比較すると、ＰＭＡ誘発血小板凝集に対する拮抗作用において、ＤＦＰＥはＤＰＰＥより約４倍強力である。 in vitroにて３７℃で７日間インキュベートした後のＭＣＦ−７ヒト胸部癌細胞に対するＤＦＰＥ及びＤＰＰＥの成長阻害力及び殺細胞能力を図１０に示した。ＤＦＰＥのＩＣ₅₀値は、３．０×１０^-6Ｍである。それを同じ分析法でＤＰＰＥについて得られたＩＣ₅₀値６．５×１０^-6Ｍと比較する。その結果、ＤＦＰＥが、新規な抗ヒスタミン性を有し、血小板凝集に対する酢酸ミリスチン酸ホルボールの効果に拮抗し、ＭＤＦ−７ヒト胸部癌細胞に対して抗増殖性の細胞毒であって、そのいずれの効果もＤＰＰＥより約３〜４倍強力である。ＤＰＰＥはin vivo で抗エストロゲン性であるため、ラット子宮におけるタモキシフェン（tamoxifen）の効果を高めることが明らかになっていることから、ＤＦＰＥでも同様のスペクトルのin vivo 活性が予想されるが、全体的な効力は、ＤＰＰＥについて認められた効力の２〜４倍である。さらに、本明細書に記載の癌治療法においてＤＰＰＥの代替薬剤としてＤＦＰＥを用いて、従来の化学療法薬の治療指数を高めることができる。開示の摘要本開示内容を要約すると、本発明は、癌の成長を刺激し、化学療法薬の治療指数を高めることのできる化合物の確認及びその化合物の分類を提供するものである。さらに、新規化合物についても述べたものである。本発明の範囲内で改良が可能である。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年２月１３日【補正内容】また、三環式抗うつ剤及び非三環式薬剤、フルオキセチン（fluoxetine）［プロザック（Prozac）：登録商標］、ならびにＨ₁−抗ヒスタミン及びβ−アドレナリン作用性拮抗剤も、ラットの肝ミクロソーム又は脳膜中において³Ｈ−ＤＰＰＥ及び³Ｈ−ヒスタミンのＨ_ICへの結合に対して競合し、同様に腫瘍の成長を促進することがわかった。したがって、本発明の一面においては動物中の癌細胞の治療法が提供され、それは以下からなる：（ａ）悪性の細胞の増殖を促進しながら正常な細胞の増殖を抑制する化合物を、正常な細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を抑制するのに充分な量で動物に服用させ、そして（ｂ）次いで１種類以上の化学療法剤を癌細胞に対してこの癌細胞にとって有毒な量で動物に服用させる。このようなやり方で、癌細胞については一種以上の化学療法剤から強い毒性効果が得られ、一方、骨の骨髄及び胃腸の細胞を含む正常な細胞についてはこの一種以上の化学療法剤から逆の面の効果が得られる。さらに、ＤＰＰＥのある種のフルオロ類似物が、正常な細胞増殖の抑制ならびに悪性の細胞増殖の促進に強い効力を示すことがわかった。このような化合物は新規化合物である。したがって、本発明の他の面においては次式を有する化合物が提供される：上式中、Ｙはフッ素、塩素又は臭素であり、Ｚは１〜３の炭素原子数を有するアルキレン基又は＝Ｃ＝Ｏ基であり、あるいはフェニル基が結合して三環を形成し、ｐは０又は１であり、Ｒ₁及びＲ₂は各々１〜３の炭素原子数を含むアルキル基であるか又は窒素原子と一緒に結合してヘテロ環を形成するものであり、ｎは１，２又は３である。薬剤学的に受け入れることのできるこの化合物の塩も同じく提供される。上記化合物は、各種基の同定によって任意の都合のよい方法でつくることができる。例えば、Ｚがカルボニル基である化合物は、ヒドロキシ置換フルオローベンゾフェノンをクロロ置換アミノ置換アルキル基と反応させることによってつくることができる。図面の簡単な説明図１〜図１０は、以降の実施例において行った実験で得られたデータをグラフ化したものである。発明の一般的説明本発明において、悪性の細胞の増殖を促進しながら正常の細胞の増殖を抑制する化合物ならどんな化合物も有用であり、正常な細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を抑制するのに充分な量で投与される。このような化合物は一般にｐｋｉが約５以上、好ましくは約５．５以上を示す。本発明において有用な特定化合物は次式のジフェニル化合物である：請求の範囲１．動物のガン細胞の処置方法において（ａ）正常細胞の増殖を阻害する一方で悪性細胞の増殖を促進する化合物で、下記式：（上記式中、Ｘ及びＹは塩素または臭素であり、ｏ及びｐは０または１であり、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、またはこれらが一緒になって窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２または３である）ではない化合物を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに十分な量で、前記動物に投与する過程と、（ｂ）続いて、前記ガン細胞に対する少なくとも１種の化学療法剤を、該ガン細胞に対して毒性が得られる量で、前記動物に投与する過程とを有し、それによって、前記少なくとも１種の化学療法剤から前記ガン細胞に対する増強された毒性効果を得る一方で、前記少なくとも１種の化学療法剤の前記正常細胞に対する有害な効果を阻害する動物ガン細胞の処置方法。２．前記正常細胞が、骨髄細胞及び胃腸細胞を含む請求項１に記載の処置方法。３．前記化合物が下記式：（上記式中、Ｘ及びＹはそれぞれフッ素、塩素または臭素であり、Ｚは炭素が１〜３個のアルキレン基または＝Ｃ＝Ｏであるか、またはフェニル基が３環式の環を形成するものであり、ｏ及びｐは０または１であり、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、またはこれらが一緒になって窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２または３である）のジフェニル化合物またはその薬学的に許容される塩である請求項１に記載の処置方法。４．で表される基が、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基またはピペラジノ基である請求項３に記載の処置方法。５．Ｘがフッ素からなる基である請求項４に記載の処置方法。６．前記化合物が、下記式：（上記式中、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、またはこれらが一緒になって窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２または３である）の化合物またはその薬学的に許容される塩である請求項１に記載の処置方法。７．基が、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基、又はピペラジノ基である請求の範囲６記載の方法。８．がジエチルアミノ基であり、Ｚが−ＣＨ₂−であり、ｎが２である請求の範囲７記載の方法。９．化合物がその塩化水素塩の形である請求の範囲８記載の方法。１０．化合物が（ａ）三環又は非三環鎮静剤（ｂ）フェノチアジン（ｃ）Ｈ₁拮抗物質（ｄ）β−アドレナリン作働物質および拮抗物質（ｅ）セロトニン（５ＨＴ₁又は５ＨＴ₃）拮抗物質（ｆ）イミダゾールおよびイミダゾール様化合物および（ｇ）トリフェニルエチレン誘導体から選ばれる請求の範囲１記載の方法。１１．前記三環鎮静剤がアミトリプチリン、クロミプラミンおよびイミプラミンである請求の範囲１０記載の方法。１２．前記非三環鎮静剤がフルオキセチンである請求の範囲１０記載の方法。１３．前記Ｈ₁拮抗剤がロラタジン、ヒドロキシジン、フェニルトロキサミン又はアステミゾールである請求の範囲１０記載の方法。１４．前記β−アドレナリン作動物質または拮抗物質がプロパノロールである請求の範囲１０記載の方法。１５．前記セロトニン拮抗物質がオンダンセルトロン又はシプロヘプタジンである請求の範囲１０記載の方法。１６．前記イミダソール又はイミダゾール様化合物がシメチジン、ラニチジン、チオペラミド又はケトコナゾールである請求の範囲１０記載の方法。１７．前記トリフェニルエチレン誘導体がタモキシフェンである請求の範囲１０記載の方法。１８．下記式：（上記式中、Ｙはフッ素、塩素または臭素であり、Ｚは炭素原子が１〜３個のアルキレン基または＝Ｃ＝Ｏ基であるか、またはそれらフェニル環が一緒になって３環式の環を形成するものであり、ｐは０または１であり、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、または互いに連結して窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２または３である。）の化合物、またはその薬学的に許容される塩である化合物。１９．の基が、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基またはピペラジノ基である請求項１８記載の化合物。２０．Ｚが、＝Ｃ＝Ｏ基である請求項１９記載の化合物。２１．前記化合物は、下記式：を有し、その式中、ｎは２であり、はジエチルアミノ基である請求項２０記載の化合物。２２．塩酸塩の形態をとる請求項２１記載の化合物。２３．動物のガン細胞の処置において、意訳の医薬の製造に有用な、正常細胞の増殖を阻害する一方で悪性細胞の増殖を促進する化合物であって、下記式：（上記式中、ＸおよびＹは塩素または臭素であり、ｏおよびｐは０または１であり、Ｒ₁およびＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、または互いに連結して窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２または３である）のジフェニルメタン化合物ではない化合物の使用。２４．動物のガン細胞の処置において、医薬の製造に有用な、請求項１８乃至２２の何れか記載の化合物の使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者リード、ロンカナダ国、ヴイ６ティー１ゼット３ブリティッシュコロンビア、ヴァンクーヴァー、イーストモール 2146、ユニヴァーシティオブブリティッシュコロンビア、ファカルティオブファーマスーティカルサイエンス

Claims

【特許請求の範囲】１．動物のガン細胞の処置方法において（ａ）正常細胞の増殖を阻害する一方で悪性細胞の増殖を促進する化合物を、正常細胞中の細胞内ヒスタミンの結合を阻害するのに十分な量で、前記動物に投与する過程と、（ｂ）続いて、前記ガン細胞に対する少なくとも１種の化学療法剤を、該ガン細胞に対して毒性が得られる量で、前記動物に投与する過程とを有し、それによって、前記少なくとも１種の化学療法剤から前記ガン細胞に対する増強された毒性効果を得る一方で、前記少なくとも１種の化学療法剤の前記正常細胞に対する有害な効果を阻害する動物ガン細胞の処置方法。２．前記正常細胞が、骨髄細胞及び胃腸細胞を含む請求項１に記載の処置方法。３．前記化合物が下記式：（上記式中、Ｘ及びＹはそれぞれフッ素、塩素又は臭素であり、Ｚは炭素が１〜３個のアルキレン基又は＝Ｃ＝Ｏであるか、又はフェニル基が三環式の環を形成するものであり、ｏ及びｐは０又は１であり、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又はこれらが一緒になって窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２又は３である）のジフェニル化合物又はその薬学的に許容される塩である請求項１に記載の処置方法。４．で表される基が、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基又はピペラジノ基である請求項３に記載の処置方法。５．Ｘがフッ素からなる基である請求項４に記載の処置方法。６．前記化合物が、下記式：（上記式中、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又はこれらが一緒になって窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２又は３である）の化合物又はその薬学的に許容される塩である請求項１に記載の処置方法。７．基がジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基、又はピペラジノ基である請求の範囲６記載の方法。８．がジエチルアミノ基であり、Ｚが−ＣＨ₂−であり、ｎが２である請求の範囲７記載の方法。９．化合物がその塩化水素塩の形である請求の範囲８記載の方法。１０．化合物が（ａ）三環又は非三環鎮静剤（ｂ）フェノチアジン（ｃ）Ｈ₁拮抗物質（ｄ）β−アドレナリン作働物質及び拮抗物質（ｅ）セロトニン（５ＨＴ₁又は５ＨＴ₃）拮抗物質（ｆ）イミダゾール及びイミダゾール様化合物及び（ｇ）トリフェニルエチレン誘導体から選ばれる請求の範囲１記載の方法。１１．前記三環鎮静剤がアミトリプチリン、クロミプラミン及びイミプラミンである請求の範囲１０記載の方法。１２．前記非三環鎮静剤がフルオキセチンである請求の範囲１０記載の方法。１３．前記Ｈ₁拮抗剤がロラタジン、ヒドロキシジン、フェニルトロキサミン又はアステミゾールである請求の範囲１０記載の方法。１４．前記β−アドレナリン作動物質又は拮抗物質がプロパノロールである請求の範囲１０記載の方法。１５．前記セロトニン拮抗物質がオンダンセルトロン又はシプロヘプタジンである請求の範囲１０記載の方法。１６．前記イミダソール又はイミダゾール様化合物がシメチジン、ラニチジン、チオペラミド又はケトコナゾールである請求の範囲１０記載の方法。１７．前記トリフェニルエチレン誘導体がタモキシフェンである請求の範囲１０記載の方法。１８．下記式：（上記式中、Ｙはフッ素、塩素又は臭素であり、Ｚは炭素原子が１〜３個のアルキレン基又は＝Ｃ＝Ｏ基であるか、又はそれらフェニル環が一緒になって三環式の環を形成するものであり、ｐは０又は１であり、Ｒ₁及びＲ₂はそれぞれ１〜３個の炭素原子を含むアルキル基であるか、又は互いに連結して窒素原子を含む複素環を形成し、ｎは１，２又は３である。）の化合物、又はその薬学的に許容される塩である化合物。１９．の基が、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノ基、モルホリノ基又はピペラジノ基である請求項１８記載の化合物。２０．Ｚが、＝Ｃ＝Ｏ基である請求項１９記載の化合物。２１．前記化合物は、下記式：を有し、その式中、ｎは２であり、はジエチルアミノ基である請求項２０記載の化合物。２２．塩酸塩の形態をとる請求項２１記載の化合物。２３．動物のガン細胞の処置において正常細胞の増殖を阻害する一方で悪性細胞の増殖を促進する化合物の使用。２４．動物のガン細胞の処置における請求項１８乃至２２のいずれか記載の化合物の使用。