JPH08504837A

JPH08504837A - 新規ポリペプチドおよびこれから調製される抗ｈｉｖ剤

Info

Publication number: JPH08504837A
Application number: JP7511589A
Authority: JP
Inventors: 章義松本; 道典脇
Original assignee: Seikagaku Corp
Current assignee: Seikagaku Corp
Priority date: 1993-10-14
Filing date: 1994-10-12
Publication date: 1996-05-28
Also published as: HU217442B; FI952900A; AU682405B2; ATE177114T1; DE69416824T2; FI952900A0; CN1116427A; EP0677061B1; NO952321L; CN1038841C; CZ153395A3; DE69416824D1; NO952321D0; RU2136696C1; EP0677061A1; HUT72974A; NZ274560A; KR100208873B1; WO1995010534A1; AU7862894A

Abstract

(57)【要約】下記式式中Ａ₁はリジン、アルギニンおよびオルニチンから選ばれる塩基性アミノ酸の１個または少くとも２個を有するアミノ酸またはペプチド残基、該塩基性アミノ酸又はペプチド基のアミノ末端アミノ酸のＮ−α位がアシル基または置換チオカルバモイル基で置換されている；Ａ₂はチロシンまたはフエニルアラニン；Ａ₃はリジンまたはアルギニン；Ａ₄は−ＯＨまたは−ＮＨ₂；そしてＸはＤ−オルニチル−プロリン、プロリル−Ｄ−オルニチン、Ｄ−リジル−プロリン、プロリル−Ｄ−リジン、Ｄ−アルギニル−プロリン、プロリル−Ｄ−アルギニン、グリシル−オルニチン、オルニチル−グリシン、グリシル−リジン、リジル−グリシン、グリシル−アルギニン及びアルギニル−グリシンのごときペプチド、その構成アミノ酸であるＤ−リジン、Ｌ−リジン、Ｄ−オルニチン又はＬ−オルニチンの側鎖ω−アミノ基の水素原子はω−アミノアシル基で置換されていてもよく、これらペプチドは６位と８位のアミノ酸残基とペプチド結合を介して連結しているペプチドを示し；Ｔｒｐはトリプトフアン；Ｃｙｓはシステインあるポリペプチドを表し、その１例として下記式の化合物（１）を示す。

Description

【発明の詳細な説明】新規ポリペプチドおよびこれから調製される抗ＨＩＶ剤１．発明の分野本発明はリポ多糖類、特にエンドトキシンに強い親和性を示す新規ポリペプチド及び該ポリペプチドの製薬学的に許容できる塩に関し、更に該ポリペプチドの製剤組成による抗ウイルス剤（例えば抗ＨＩＶ剤）として用いる、製薬学的組成物に関する。２．発明の背景下記文献に示すように、従来、カブトガニからエンドトキシンに親和性を示し、抗菌性を示すポリペプチド２族が単離報告されている。例えば、Shigenagaら、J．Biol．Chem.，２６５：２１３５０〜２１３５４（１９９０）；Kawanoら、 J．Biol．Chem.，２６５：１５３６５〜１５３６７（１９９０）；Mutaら、J．B iochem．，１０８：２６１〜２６６（１９９０）；特開平２−１６７２３０号公報；特開平２−１５２９８７号公報；特開平２−５３７９９号公報；公表特許公報平２−５００１９４；Miyataら、J．Biochem．，１０６：６６３〜６６８（１９８９）；Akajiら、Chem．Pharm．Bull.３７：２６６１〜２６６４（１９８９）；TokunagaおよびIwanaga、代謝、２６：４２９〜４３９（１９８９）；S hiehら、ＦＥＢＳ Lett.，２５２：１２１〜１２４（１９８９）；Nakamuraら、J．Biol．Chem.，２６３：１６７０９〜１６７１３（１９８８）を参照。一つの族（タキプレシン族）は、日本産カブトガニTachypleus属から単離され、タキプレシンＩ、ＩＩ及びＩＩＩが同定されている。他の一族（ポリフエムシン族）は、米国産カブトガニLimulus polyphemusから単離され、ポリフェムシンＩ及びＩＩ同定されている。これらのアミノ酸配列を図１に示す。両族のポリペプチドは、そのいずれもが１７または１８個のアミノ酸残基からなり、４部位の共通する保存領域と、２対のジスルフィド橋を構造に有する（図１参照）。またタキプレシン、ポリフェムシンの両族とも、グラム陰性およびグラム陽性細菌の何れをも、またキャンデイダアルビカンスのごとき真菌に対し低濃度でその発育を阻害し、細菌リポ多糖と複合体を形成することが見出されている［Shig enagaら、J．Biol．Chem.，２６５：２１３５０〜２１３５４（１９９０）；Mut aら、J．Biochem．，１０８：２６１〜２６６（１９９０］。また、タキプレシン族のポリペプチドは、インフルエンザウイルス、水庖性口内炎ウイルス［Murakamiら、Chemotherapy，３７：３２７〜３３４（１９９１）］またはヒト免疫不全ウイルス［Morimotoら、Chemotherapy，３７：２０６〜２１１（１９９１）］のごときウイルスにある種の阻害作用を示すことが知られている。このような上記に示す性質を有するポリペプチドの存在は、カブトガニが生きた化石として太古より今日まで、外界の環境の変化に適応し、種の保存を可能とした鍵物質の１つとして興味深いことである。一方、高度に分化したヒトの生存維持に関し、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の感染により引き起こされる後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の発症に対し予防または治療効果の期待される薬剤の開発が望まれている。本発明者らは既に、前記したカブトガニの強い種の保存性に係わると予測されるエンドトキシン親和性ポリペプチドに着目し、該物質の構造変換と抗ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）活性の相関につき研究した結果、カブトガニの既知エンドトキシン親和性ポリペプチドの共通構造とは基本的に異なる新規ポリペプチド（当時）を見出した。驚くべきことに、この新規ポリペプチド（当時）はその抗ＨＩＶ活性値が、既知エンドトキシン親和性ポリペプチドの値と比較して少なくとも約５倍以上の優れた効果を有することを確認し、以下の文献に報告した。［Nakashimaら、Antim icrob．Agents Chemother.、３６：１２４９〜１２５５（１９９２）；Masudaら、Biochem．Biophys．Res．Commun.，１８９：８４５〜８５０（１９９２）；Ta mamuraら、Chem．Pharm．Bull.，４１：９７８〜９８０（１９９３）；Tamamura ら、Biochim. Biophys．Acta，１１６３：２０９〜２１６（１９９３）；Masud aら、J．Pharmacobio．Dyn.，１５：ｓ−９０（１９９２）；国際公開公報 WO ９２／０４３７４号；特開平５−１６３２９８号公報］（以下、前記抗ＨＩＶ活性値が、前出カブトガニの既知エンドトキシン親和性ポリペプチドに比して少くとも５倍以上の優れた効果を示した新規ポリペプチド（当時）のベストモード化合物としてＴ−２２化合物をもって代表する）Ｔ−２２化合物で代表するアミノ酸１６〜１８個からなるポリペプチドの活性発現の為の構造要件検討結果、本発明者らは、最小必須構造概念を中心とする本発明に到達した。一般に、ペプチド性の生理活性物質は該物質を医療用途に用いるとき、人体内投与により比較的高分子量の異種ペプチドは人体の自己防衛機能により異物質として認識され抗原物質となりやすく、そのためにも異物質と認識されにくい低分子化合物で、且つ高力価を維持した化合物が求められる。Ｔ−２２化合物はアミノ酸残基数１８個からなるポリペプチドである。我々はＴ−２２化合物と同等の抗ＨＩＶ力価を保持し、構成アミノ酸残基数の減少を目的にポリペプチドの活性発現の為の構造要件を鋭意検討した。その結果、４個の残基数を削減せしめることに成功し、本発明の基本構造を有するとき、特定部位を修飾することによつても活性の低下がみられず、むしろその修飾によつて基本構造の有する物理・化学的性質や治療用法の巾広い選択例えば、親水性、親油性、を増減したり、特定の組織臓器、細胞に選択的に集積すること又は体内での滞留時間を増減したりする方法や剤形の展開が可能となる必須構造を有する新規ポリペプチドに到達した。３．発明の要約本発明は、新規ポリペプチドに関するものであり、該ポリペプチドは、カブトガニ由来のエンドトキシンに高い親和性を有する既知ポリペプチドに立脚して発明された高い抗−ＨＩＶ活性を有する過去の新規ポリペプチドから発展せしめたものであり、以下の点で明瞭に異なる。アミノ酸残基１６〜１８個からなる過去の新規ポリペプチドは、４個のシステイン（２個のシスチン）残基と反転部位にβ−ターンを有する逆平行βシート構造より構成されている。本発明の新規ポリペプチドは、上記過去のポリペプチドと同様に、７位のＸ部にβ反転構造の存在を可能にする逆平行βシート構造をとる。しかし、本発明のポリペプチドは、アミノ酸残基数並びにシステイン残基数がそれぞれ４個及び２個減少している。更に、特定の領域を修飾しても、その生物活性は減少しない。本発明のポリペプチドは、抗−ＨＩＶ剤として、又遺伝子治療のためのＤＮＡ移入システムの１コンポネントとして利用可能である。第６セクションにて詳述するごとく、本発明のポリペプチドは、カブトガニ由来のエンドトキシンに高い親和性を有する過去の新規ポリペプチドに比して、明瞭に高い抗−ＨＩＶ活性値を有する。３．１定義ここに規定のポリペプチド配列において、各記号は国際的に認められた三文字表示によるアミノ酸残基または置換アミノ酸残基を示す。すなわち各記号は下記アミノ酸または置換アミノ酸の残基を示す。Ａｌａ（アラニン）；Ａｒｇ（アルギニン）；Ｃｙｓ（システイン）；Ｉｌｅ（イソロイシン）；Ｇｌｙ（グリシン）；Ｌｅｕ（ロイシン）；Ｌｙｓ（リジン）；Ｏｒｎ（オルニチン）；Ｐｈｅ（フエニルアラニン）；Ｐｒｏ（プロリン）；Ｔｒｐ（トリプトフアン）；Ｔｙｒ（チロシン）；Ｖａｌ（バリン）；ＤＡｒｇ（Ｄ−アルギニン）；ＤＬｙｓ（Ｄ−リジン）：ＤＯｒｎ（Ｄ−オルニチン）；Ａｃ−Ａｒｇ（Ｎ−α−アセチルアルギニン）；ＦＴＣ−Ａｒｇ（Ｎ−α−フルオレツセインチオカルバモイル化アルギニン）；Ｌａｕｒ−Ａｒｇ（Ｎ−α− ラウロイルアルギニン）；Ｍｙｒ−Ａｒｇ（Ｎ−α−ミリストイルアルギニン）；Ｎｉｃｏｔ−Ａｒｇ（Ｎ−α−ニコチノイルアルギニン）；Ｏｃｔ−Ａｒｇ（Ｎ−α−オクタノイルアルギニン）；Ｐａｒｍ−Ａｒｇ（Ｎ−α−パルミトイルアルギニン）；Ｐａｒｍ−Ｏｒｎ（Ｎ−α−パルミトイルオルニチン）；ＰＴＣ−Ａｒｇ（Ｎ−α−フエニルチオカルバモイル化アルギニン）；ε−Ｎ−Ａｃ−ＤＬｙｓ（ε−Ｎ−ω−アミノアセチル−Ｄ−リジン）及び ε−Ｎ−Ｂｕｔ−ＤＬｙｓ（ε−Ｎ−ω−アミノブチリル−Ｄ−リジン）。本明細書中用いられている以下の用語は、次の意味を表す。ＨＩＶ＝ヒト免疫不全ウイルス（全派生体）ＭＯＩ＝感染の多様性ＳＩ＝選択係数（ＥＣ50に対するＣＣ50の比）４．図面の説明図１は、タキプレシンＩ、タキプレシンＩＩ、タキプレシンＩＩＩ、ポリフェムシンＩ及びポリフェムシンＩＩのアミノ酸配列示す。保存共通アミノ酸は四角枠にて囲った。Ｃｙｓ−３又は−４と−16または−17，Ｃｙｓ−７又は−８と−12または−13間のジスルフィド結合は実線で示した。図２は、本発明のポリペプチド（１）合成のための合成経路図を示す。５．発明の詳細な説明本発明は、上記の観点に基づき完成され、下記式（Ｉ）式中A₁はリジン、アルギニンおよびオルニチンから選ばれる塩基性アミノ酸の１個または少くとも２個を有するアミノ酸残基またはペプチド残基、前記塩基性アミノ酸又はペプチド残基のアミノ末端アミノ酸残基のＮ−α位の水素原子がアシル基または置換チオカルバモイル基で置換されているＮ−αアシル置換アミノ酸残基、Ｎ−αアシル置換ペプチド残基、Ｎ−α置換チオカルバモイル化アミノ酸残基またはＮ−α置換チオカルバモイル化ペプチド残基を示し、Ａ₂はチロシンまたはフエニルアラニン残基を示し、Ａ₃はリジンまたはアルギニン残基を示し、Ａ₄は−ＯＨ（カルボキシル基由来）または−ＮＨ₂（酸アミド基由来）を示し、ＸはＤ−オルニチル−プロリン、プロリル−Ｄ−オルニチン、Ｄ−リジル−プロリン、プロリル−Ｄ−リジン、Ｄ−アルギニル−プロリン、プロリル−Ｄ−アルギニン、グリシル−オルニチン、オルニチル−グリシン、グリシル−リジン、リジル−グリシン、グリシル−アルギニン及びアルギニル−グリシンで示されるアミノ酸２個からなるペプチド残基群から選択され、その構成アミノ酸であるＤ −リジン、Ｌ−リジン、Ｄ−オルニチン又はＬ−オルニチンの側鎖ω−アミノ基の水素原子はω−アミノアシル基で置換されていてもよく、これらペプチド残基は６位と８位のアミノ酸残基とペプチド結合を介して連結しているペプチド残基を示し、Ｔｒｐはトリプトフアン残基を示し、Ｃｙｓはシステイン残基を示し、３位と１１位のシステイン残基はジスルフイド結合により連結していてもよい、で表わされるポリペプチド、又はその塩である。本発明の前記式（Ｉ）で示されるポリペプチドの具体例としては、下記（１）〜（２５）のものを挙げることができる。各記号は国際的に認められた三文字表示によるアミノ酸残基または置換アミノ酸残基を示す（セクション３．０参照）。前記先に本発明者らが公けにした高い抗ＨＩＶ活性を示すアミノ酸残基数１６〜１８個からなるポリペプチドに於けるベストモード化合物（以後「ｎ−１８ポリペプチド」又はＴ−２２と略称）に於ては、その高活性発現の要因として、該化合物分子中にシステイン４残基、芳香族アミノ酸４乃至５残基、塩基性アミノ酸８残基およびグリシン１残基が必須であつて、式（Ａ）で示される位置関係に於て２位〜１７位上のアミノ酸の性格が固定されており、１位に規定されるアミノ酸の数の増加に伴い相対活性値が増加するというｎ−１８ポリペプチドの構造活性相関を示された。「ｎ−１８ポリペプチド」は、下記式（Ａ）に規定される。式中Ａ₁はリジン、アルギニンからなる群から選択される２個を超えないアミノ酸を表し、Ａ₂はチロシン、フェニルアラニン又はトリプトファン残基を表わし、Ａ₃はリジン又はアルギニンを表し、Ａ₄はリジン、アルギニンからなる群から選択される少なくとも１個、２個を超えないアミノ酸残基を表し、Ａ₅は−ＯＨ（カルボキシル基由来）または−ＮＨ₂（酸アミド基由来）を示し、Ｃｙｓはシステイン残基を示し、Ｇｌｙはグリシン残基を示す；ここで３、７、１２および１６位のシステイン残基は、３位と１６位でジスルフイド結合（−Ｓ−Ｓ−）により、および／または７位と１２位でジスルフイド結合により連結していてもよい。ｎ−１８ポリペプチドに於いて、恐らくβ−ターン構造を持ったターン部分は９位及び１０位に位置し、３位から８位のペプチド部分と１１位から１６位までのペプチド部分が相互に相対している。本発明のポリペプチドは、ｎ−１８ポリペプチドと同様に、分子内水素結合とシステイン残基間のジスルフィド結合（−Ｓ−Ｓ−）の存在により逆平行βシート構造をとり、恐らくβ−ターン構造を持つターン部分は７位のＸ部分に位置し、３位から６位のペプチド部分と８位から１１位までのペプチド部分が相互に相対している。本発明に於ては、本発明の式（Ｉ）に於ける１位のアミノ酸残基数の関係は「ｎ−１８ポリペプチド」と同様であり本発明の化合物に於てアミノ酸残基数零すなわち−Ｈはベストモードに対応する高活性発現の基準から除外した。また当該位置のＮ末端アミノ酸残基のαアミノ基の水素原子のアシル基又は置換チオカルバモイル基による置換は本発明の式（Ｉ）で示される新規ポリペプチドの高度抗ＨＩＶ活性発現に重要な働きを示すことが確認され、アシル基または置換チオカルバモイル基の性質の違いの選択により本発明の新規ポリペプチドに親水性、親油性、明白な蛍光の性質等を付与することが可能となった。例えば、本発明のポリペプチドに於いてフルオレセイン置換チオカルバモイル基の蛍光性は、種々の目的のための高感度レポーター色素として使用しうる［Brand及びWitholt、”Methods in Enzymology”，Vol.ll，pp．776-856，Hirs編、Academic Press，New York(196 7); Brand及びGohlke，Annu．Rev．Biochem．41:843-868(1972); Stryer，Annu ．Rev．Biochem．47:819-846(1978)参照］。さらに、本発明のフルオレセイン置換チオカルバモイル化ポリペプチドは、さらに高い抗ＨＩＶ活性を示し得ることは非常に重要かつ有用である。すなわち、蛍光の性質を持った本発明のポリペプチドは、本発明の範囲に属するポリペプチドの抗ＨＩＶ活性発現機作解明の重要な手段として使用し得る。例えば、該ポリペプチドからなる薬剤動態を、投与後にＨＩＶ感染或いは非感染の体内、器官内、組織或いは細胞内に於ける消長、代謝或いは分布を蛍光顕微鏡により追跡検出可能である。分子レベルでは、該ポリペプチドの細胞内レセプターとの相互作用に伴う微妙な構造変化の情報をポリペプチド固有の蛍光プローブを使用することにより得られる。レセプター分子それ自身の単離、同定も、その蛍光プローブの使用により可能となる。またアシル基や置換チオカルバモイル基を介して糖鎖化合物、リピド化合物、核酸化合物、他のペプチド、蛋白質等の生理活性を付与することが可能となつた。また本発明の式（Ｉ）に於ける４位乃至６位のアミノ酸残基の性格と、８位乃至１０位のアミノ酸残基の性格は同一性格の繰返しであることが本発明の新規ポリペプチドの活性発現に重要な役割を有している。本発明の新規ポリペプチドの立体構造形成の点から、７位［Ｘ］で示される２個のアミノ酸からなるペプチド構造を折返し点として、３位乃至７位と７位乃至１１位のペプチド構造部分が相対した同一平面構造の形成がしやすいペプチドのアミノ酸配列順位を構成し、３位と１１位のシステインが、ジスルフイド結合を介して連結した場合、本発明の新規ポリペプチドのペプチド結合骨格から形成される立体構造が７位のグリシンと塩基性アミノ酸とからなるペプチド残基または、プロリン（オキシプロリンも原理的に同一効果を示す）とＤ型塩基性アミノ酸とならなるペプチド残基を、同一平面構造形成の必須因子としてターン構造及びβ−シート構造からなる平面構造を形成し３位と１１位のシステイン残基の側鎖のジスルフイド結合形成部分と５位と９位の塩基性アミノ酸残基の側鎖部分が骨格平面から同一側に配座し、４位と８位の芳香族アミノ酸残基の側鎖部分、並びに６位と１０位の塩基性アミノ酸残基の側鎖部分が前記ジスルフイド結合とは骨格平面から反対側に配座して存在する立体構造の形成をとり得ることが重要な特徴であり、これら構造をとり得るすがたとして、本発明の式（Ｉ）に示される新規ポリペプチドが創生され、ｎ−１８ポリペプチドに比し、４アミノ酸残基数の削減されたポリペプチドである。更に、「ｎ−１８ポリペプチド」と同様に、本発明の新規ポリペプチドは、非常に強い塩基性を示す。この強い塩基性故に酸付加により塩を形成する。たとえば無機酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸など）または有機カルボン酸（酢酸、トリフルオロ酢酸のごときハロゲン化酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、コハク酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、サリチル酸など）、グルクロン酸、ガラクッロン酸、グルコン酸、アスコルビン酸等の酸性糖類、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸塩類、アルギン酸等の多糖硫酸エステルを含む酸性多糖、または有機スルホン酸（メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸など）との塩を形成する。本発明の前記式（Ｉ）で示されるポリペプチドは、これらの医薬として許容しうる塩として用いることができる。以下さらに詳しく本発明の新規ポリペプチドについて説明する。５．１ポリペプチドの調製本発明の新規ポリペプチドは、それ自体公知の方法、例えばStewart＆Young著ピアス化学会社、ロックフォード、イリノイ州(1984)”固相ペプチド合成法”に記載されている固相合成技法によつて製造することができる。すなわち上記（Ｉ）構造を有する本発明の直鎖ポリペプチドは、１２位のＮ−保護アルギニンのカルボキシル基を直接、或いは場合によりカルボキシル基と結合しうる官能基およびカルボキシル基を有するスペーサーを介して（すなわち、アルギニンのカルボキシル基をｐ−カルボキシメチルベンジルエステルに変換して）、アミノ基を有する不溶性樹脂に結合させた後、本１２位のアルギニンを有する不溶性樹脂のアミノ基のＮ−保護基の保護基除去をした後、固相合成法に従い、下記式（Ｉ）［式中Ａ₁、Ａ₂、Ａ₃、Ａ₄、Ｃｙｓ、Ｔｒｐ及びＸの定義は前記式（Ｉ）と同じ］で示されるアミノ酸配列の１１位から１位までの各保護アミノ酸を順次結合し保護基保護化ペプチド樹脂とする。Ａ₁に於てアミノ末端アミノ酸残基のＮ−α位の水素原子がアシル基で置換されているＮ−αアシルアミノ酸残基またはＮ−α−アシルペプチド残基を選択する場合は該ペプチド樹脂に該当するアシル基の酸無水物または該当するカルボン酸を縮合剤を用いてＮ末端アミノ基をアシル化し、Ｎ −アシル化ペプチド樹脂とし、次いで不溶性樹脂およびアミノ酸の保護基を脱離させて、直鎖状の前記式（Ｉ）の本発明のポリペプチドを、前記式（Ｉ）中Ａ₁ に於てアミノ末端Ｎ−α位の水素原子が置換チオカルバモイル基で置換されているＮ−α−置換チオカルバモイル化アミノ酸残基またはＮ−α−置換チオカルバモイル化ペプチド残基を選択する場合は、置換イソチオシアネート化合物を微アルカリ条件下に反応することにより本発明のＮ末端Ｎ−α−置換チオカルバモイル化ポリペプチドを得ることができる。この場合１２位のアミノ酸残基のカルボキシル末端はフリー（Ａ₄が−ＯＨに相当）であることもできるし、あるいは酸アミド（Ａ₄が−ＮＨ₂に相当）に変換することもできる。さらに得られたポリペプチドは、その３位と１１位のシステインは、メルカプト基を介してジスルフイド結合（−Ｓ−Ｓ−）を形成することができる。これらのジスルフイド結合の形成は、例えば、空気酸化により、又はAtl1erto n，E.，ら；J．Chem．Soc.，Perkin Trans．１，１９８５，２０６５の方法に準じ、ジスルフイド結合を形成することができる。前記固相合成法に使用される各アミノ酸は特に表示しないかぎりはＬ体を示し、７位Ｘを構成するプロリンと対をなす塩基性アミノ酸はＤ体に限定される。本発明の新規ポリペプチドを合成する場合に使用される前記のアミノ基を有する不溶性樹脂としては、そのアミノ基を介してＣ末端のＮ-保護アルギニンあるいはリジンのカルボキシル基又は場合によりこれに結合しているスペーサーのカルボキシル基と結合可能であり、かつ、その後脱離可能なものであれば如何なるものでもよい。かかる不溶性樹脂としては、例えば、アミノメチル樹脂（アミノメチル化スチレン-ジビニルベンゼン共重合体）、ベンズヒドリルアミン樹脂、メチルベンズヒドリルアミン樹脂、アミノメチルフエノキシメチル樹脂及びこれらの誘導体等が挙げられるが、特にこれに限定されるものではない。ベンズヒドリルアミン樹脂、メチルベンズヒドリルアミン樹脂、ジメトキシベンズヒドリルアミン（ＤＭＢＨＡ）樹脂、アミノメチルフエノキシメチル樹脂を用いれば開裂によって直接アミドを与えるが、収率の点からはアミノメチル樹脂が好ましい。前述のカルボキシル基と結合しうる官能基およびカルボキシル基を有するスペーサーとしては、例えばアルギニンのカルボキシル基をp-カルボキシメチルベンジルエステルに変換しうるものが挙げられるが特に制限はない。保護アミノ酸とは、官能基を公知の方法により保護基で保護したアミノ酸であり、各種の保護アミノ酸が市販されている。本発明のポリペプチドを合成する場合には、以下に示す保護基のいずれかを選択するのが好ましい。まず、アミノ酸のα-アミノ基の保護基はBoc（t-ブチルオキシカルボニル）又はFmoc（９-フルオレニルメチルオキシカルボニル）である。アルギニン（Arg）のグアニジノ基の保護基は、Tos（トシル）、NO₂（ニトロ）、Mtr（４−メトキシ−２，３，６ −トリメチルベンゼンスルホニル）又はPmc（２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン-６-スルホニル）である。システイン（Cys）のメルカプト基の保護基としてはBzl（ベンジル）、MBzl（４−メトキシベンジル）、４-Me Bzl（４−メチルベンジル）、Acm（アセタミドメチル）、Trt（トリチル）、Npys（３−ニトロ−２−ピリジンスルフエニル）、t-Bu（t-ブチル）、 t-BuS（t-ブチルチオ）が挙げられるが、MBzl、４-MeBzl、Trt、Acm、 Npysが好ましい。チロシン（Tyr）の水酸基の保護基は、Bzl、C12・Bzl（２，６−ジクロロベンジル）、t-Buであるか、あるいは保護しなくてもよい。リジン（Lys）の ε−アミノ基の保護基は、Z（ベンジルオキシカルボニル）、ClZ（２-クロロベンジルオキシカルボニル）、Boc、 Npysであり、７位Ｘを構成するＤ又はＬリジンの側鎖ε−アミノ基の水素原子をω−アミノアシル化残基を選択した場合は該 ω−アミノ基は前出Ｚ、ＣｌＺ、Ｂｏｃ、Ｎｐｙｓで保護して使用しても良い。各保護基は、ペプチドの合成条件に応じ適当なものをそれ自体公知の中から選択することが好ましい。保護アミノ酸の結合は、通常の縮合法、例えば、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）法、ＤＩＰＣＤＩ（ジイソプロピルカルボジイミド）法［Tartar 、Ａら；J．Orｇ．Chem.，４４、５０００（１９７９）］、活性エステル法、混合あるいは対称酸無水物法、カルボニルジイミダゾール法、ＤＣＣ−ＨＯＢｔ（１-ヒドロキシベンゾトリアゾール）法［Keonig、Ｗら；Chem．Ber.，１０３、７８８、２０２４、２０３４（１９７０）］、ジフエニルホスホリルアジド法等に従って行なうことができるが、ＤＣＣ法、ＤＣＣ-ＨＯＢt法、ＤＩＰＣＤＩ- ＨＯＢｔ法、対称酸無水物法が好ましい。これらの縮合反応は、通常、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド又はＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）等の有機溶媒又はそれらの混合溶媒中で行なわれる。α−アミノ基の保護基の脱離試薬としては、トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン、ＨＣｌ／ジオキサン、ピペリジン／ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又はＮＭＰ等が用いられ、該保護基の種類により適宜選択する。また、合成の各段階における縮合反応の進行の程度はＥ．カイサーらの方法［Anal．Biochem.，３４，５９５（１９７０）］（ニンヒドリン反応法）によって検査される。以上のようにして、所望のアミノ酸配列を有する保護ペプチド樹脂を得ることができる。不溶性樹脂としてアミノメチル樹脂誘導体を用いた場合には、例えば適当な溶媒中においてアンモニアで処理することにより保護ポリペプチドを該樹脂より脱離させることができる。次いで該保護ポリペプチドを、フッ化水素で処理することにより、前記式で示される、全ての保護基が脱離したポリペプチドアミドが得られる。不溶性樹脂としてベンズヒドリルアミン樹脂、メチルベンズヒドリルアミン樹脂、アミノメチルフエノキシメチル樹脂、ＤＭＢＨＡ樹脂［Funakoshi、Ｓら；J．Chem.Soc.，Chem．Commun.，１９８８、３８２］を用いた場合には、フッ化水素、ＴＦＭＳＡ（トリフルオロメタンスルホン酸）［AcademicPress発行、E．Gross編集、Yajima，Ｈら；“The Peptides”vol ５、ｐ６５（１９８３）］、ＴＭＳＯＴｆ（トリメチルシリルトリフラート）［Fujii、Ｎら；J．Ch em．Soc.，Chem．Commun.,１９８７、２７４］またはＴＭＳＢｒ（トリメチルシリルブロミド）［Fujii、Ｎら；Chem．Pharm．Bull.，３５、３８８０（１９８７）］などで処理することにより、該樹脂および保護基を同時に脱離させることができる。次いで、所望により、２−メルカプトエタノール、ＤＴＴ（ジチオスライトール）などで還元することによりシステインのメルカプト基が還元型となっていることを確実ならしめた後、酸化処理することにより本発明に属する環状ポリペプチドを得ることができる。この際の酸化処理は、公知の方法を用いることができ、通常、大気中の酸素やフエリシアン酸塩（例えば、フエリシアン化カリウム）のような酸化剤を用いる。別法として、本発明のポリペプチドはリコンビナントＤＮＡ技法により調製することもできる。すなわち、本発明のポリペプチドをコードする配列のヌクレオチドをクローン化し、よく知られた既存の技術を用いて該ポリペプチドを発現させることが出来る。例えば、Mniatisら、Molecular Cloning，A Laboratory Mannual,Cold Spring H arbor Laboratory，Cold Spring Harbor，NY，1991を参照。かくして得られたポリペプチドは、ポリペプチドのそれ自体知られた手段、例えば、抽出、再結晶、各種クロマトグラフイー（ゲルろ過、イオン交換、分配、吸着、逆相）、電気泳動、向流分配等により単離精製することができるが、逆相高速液体クロマトグラフイーによる方法が最も効果的である。５．２本ポリペプチドの用途式（Ｉ）にて示す本発明のポリペプチドは、エンドトキシン結合能力、抗菌活性及びエンドトキシン感作血球溶血性を有する。加えるに、本発明のポリペプチドは抗ウイルス活性を有する。実施の態様として、本発明のポリペプチドは、抗 −ＨＩＶ活性を有する。セクション６に詳述するごとく、本発明のポリペプチドは、既知の高エンドトキシン親和性ポリペプチド（すなわち、タキプレシンＩ、ＩＩ及びＩＩＩ又はポリフェムシンＩ又はＩＩ）に比して極めて高い抗−ＨＩＶ活性を示す。標的細胞にＤＮＡを効率的に導入できる運搬システムの最近の開発により、遺伝病、癌、エイズ等のヒト遺伝子治療が実際に可能となってきた［Morgan及びAn derson、Annu.Rev.Biochem.，62:191-217(1993)］。ＤＮＡ移入システムとして、ポリカチオン、リン酸カルシウム、リポソーム融合、レトロウイルス、マイクロインジェクション、エレクトロポレーション及びプロトプラスト融合の使用が行われている。しかしながら、これら全ての方法について、細胞毒性、再現性の欠如、不便性、あるいはＤＮＡ運搬の効率の悪さ等一つ以上の問題を抱えている［Flegnerら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA,84:7413-74 17(1987)］。最近、陽イオン性脂質−ＤＮＡ複合体あるいは環状両親媒性ペプチド−ＤＮＡ複合体を使用する高効率のＤＮＡ移入方法が報告された［Legendre及びSzoka,Jr .,Proc.Nat1.Acad.Sci.USA,90:893-897(1993)］。ＤＮＡ移入複合体を形成し得るペプチドとしては、すべて陽イオン性のグラミシジンＳ、チロシジン、ポリミキシンＢ、ポリリシン及びメリチンが含まれる。これらのうち最も効果的な陽イオン性ポリペプチドは、グラミシジンＳである。このペプチドは、β−シートコンフォメーションを持つ両親媒性の環状デカペプチド抗生物質として知られており、細胞膜の透過性を高めるか又はこれを破壊することが出来る。この陽電荷と両親媒性が、高い移入効果に重要とされている。本発明のポリペプチドは、構造的特徴からみて、強い陽イオン性とβ−シートコンフォメーションを持つ両親媒的性質を持つことから、グラミシジンＳに代わり得る高い移入能を有するＤＮＡ複合体形成物質の候補と成り得る。実際、本発明のポリペプチドのリード化合物であるタキプレシンＩは、グラミシジンＳと同様に膜の透過性を高め、ＤＮＡと結合する事が報告されている［Matsuzakiら、Biochim.Biophys.Acta,1070：259-264(1991)及びYonezawaら、B iochemistry,31:2998-3004(1992)］。さらに、「ｎ−１８」の溶液構造は、両親媒性逆平行β−シート構造を持つタキプレシンＩと非常に似ていることも確認されている［Tamamuraら、Biochim.Biophys.Acta,1163:209-216(1993)］。それ故、本発明のポリペプチドは、遺伝子治療のためのＤＮＡ移入システムのコンポネントとしての用途の高い可能性が期待できる。本発明による抗ＨＩＶ剤は、有効成分として、前記式（Ｉ）で示されるポリペプチドまたはその塩と、薬剤の投与方法および投与形態に応じて選択された薬学的に許容されうる担体とからなる医薬組成物として調製される。薬学的に許容されうる担体としては、Hank's又はRinger's溶液、生理食塩液、グルコース生理塩溶液との混合液、及びヘパリン化クエン酸／クエン酸ソーダ塩／ブドウ糖溶液として知られる生理的緩衝液を適応できる。また、本発明の抗ＨＩＶ剤は、生体内部ウイルス疾患あるいは、生体外部ウイルス感染部の治療又は消毒対象に応じて、経口的にあるいは非経口的に投与され、その投与方法に応じて適宜な薬物担体により、粉末、顆粒、注射用もしくは内服用液剤、錠剤、座剤、ペッサリー、軟膏、クリーム、エアゾールなどの製剤として調製することができる。本発明の抗ＨＩＶ剤を、注射剤として直接、生体に投与する場合には、本発明のポリペプチドまたはその塩を、ヒト体重kg／１日あたり１０mg ないし５０００mgあて生理食塩液に溶解し点滴静注により連続的又は間欠的に投与することができる。６．実施例以下実施例を掲げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定を受けるものではない。ここに示す実施例にて、ポリペプチド（１）の製造例、及び該ポリペプチドの抗ＨＩＶ活性検定結果を既知エンドトキシン親和性ポリペプチドとともに示す。なお以下の実施例において、使用された装置および試薬は、下記のとおりである。ＨＰＬＣ装置：島津製作所ＬＣ−６ＡＤ型，同装置のカラム：アサヒパックＯＤＰ−９０（アサヒケミカル工業） Fmocアミノ酸及びアミノ樹脂：渡辺化学工業（株）製縮合剤：（株）ペプチド研究所及びアプライドバイオシステムズジヤパン（株）製ＦＡＢ-ＭＳ（ＦＡＢ−質量分析機）：ＶＧ社（米国）、ＺＡＢ-ＳＥ型６．１実施例１：ポリペプチド（１）の合成下記式に示すポリペプチド（１）の合成は以下の6.1.1-6.1.7に記述した。ポリペプチド（２）〜（13）、（22）、（23）及び（14）〜（21）、（24）、（ 25）の前駆体ポリペプチドは、ポリペプチド（１）の製造法に準じて合成した（当該構造式は表Ｉを参照）。上記式（１）中、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ＤＬｙｓおよびＰｒｏは前記したアミノ酸残基を示し、３位および１１位のＣｙｓ間の実線はジスルフイド結合を示す。６．１．１アミノメチル樹脂へのFmoc-ＤＭＢＨＡ-ＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＯＨ（３ −（α−Fmoc−アミノ−４−メトキシベンジル）-４-メトキシフエニル）プロピオン酸の導入アミノメチル樹脂（０．７４meg／g）２７０mg（０．２mmole）とFmoc-ＤＭＢＨＡ-ＣＨ₂-ＣＨ₂ＣＯＯＨ（ＭＷ５３７）２６８．５mg（０．５mmole、２．５e q）を固相合成用カラムに入れGuo，L．らの方法［Chem．Pharm．Bull.，３６、４９８９（１９８８）］に従いＤＭＦ中ＤＩＰＣＤＩ-ＨＯＢｔ法により２時間縮合反応を行った。縮合反応終了後、フリーのアミノ基を保護するための無水酢酸を用いてカップリングを行った（ＤＭＢＨＡ樹脂）。６．１．２ＤＭＢＨＡ樹脂への１２位アルギニンの導入 6.1.1で調製したＤＭＢＨＡ樹脂のFmoc基を２０％ピペリジン／ＤＭＦで除去後、ＤＭＢＨＡ樹脂に対しFmoc-Arg（Ｐｍｃ）-ＯＨの２．５eqを加えＤＭＦ中、ＤＩＰＣＤＩ−ＨＯＢｔ法によって縮合反応を行った。縮合反応の進行の程度はKaiser、E、ら［Anal．Biochem.，３４：５９５（１９７０）］のニンヒドリンの試験により測定して行った。６．１．３１１位システインの導入 6.1.2で調製したアルギニン導入ＤＭＢＨＡ樹脂のFmoc基を２０％ピペリジン／ＤＭＦで除去後ＤＭＢＨＡ樹脂に対しFmoc Cys（Ｔｒｔ）−ＯＨの２．５eq. を加え、ＤＭＦ中ＤＩＰＣＤＩ-ＨＯＢｔ法によって縮合反応を行った。縮合反応の進行の程度は6.1.2と同様にニンヒドリン試験により測定して行った。６．１．４１０位〜１位のアミノ酸の導入以下同様にして順次Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）、Ｐｒｏ、ＤＬｙｓ（Ｂｏｃ）、Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）、Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）、Ｔｒｐ、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）、Ａｒｇ（Ｐｍｃ）残基をＤＭＢＨＡ樹脂に導入して保護基保護化ペプチド（１）樹脂を得た。なお、固相合成に於ける各アミノ酸縮合反応は次表２の操作条件に従って行った。６．１．５脱保護基、樹脂からのポリペプチド（１）の除去並びに部分精製によるポリペプチド（１）の調製保護基保護化ポリペプチド（１）樹脂は、２０％ピペリジン／ＤＭＦ処理によりFmoc基を除去し、次いで該樹脂１００mg当り１Ｍ-ＴＭＳＯＴｆ-チオアニソール／ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）系（ｍ−クレゾール（１００eq）、エタンジチオール（３００eq）の存在するトリフルオロ酢酸１０ml）で２５℃ ２時間反応させた。反応混合液から樹脂を濾別し、トリフルオロ酢酸１mlにて２回洗浄し、濾液、洗液を合せたものに氷冷乾燥エーテル１００mlを加え、生じた沈殿物を遠心し、残渣をデカンテーションにより上清から分離した。得られた残渣を、冷エーテルで洗浄後４Ｎ酢酸１0mlに溶解し８３０mg、８０eqのジチオスライトールを加え、その混液を室温で一夜攪拌した。反応液を遠心し、上清をSephadexＧ-１０（３.７×５０cm）で処理し、４ＮＡｃＯＨでゲル濾過し、素通り画分である主溶出部分を集め、凍結乾燥して粉末状の部分精製未環化ポリペプチド（１）を得た。６．１．６空気酸化によるポリペプチド（１）の調製一方、Sephadexゲル濾過素通り画分の1/2量を濃アンモニア水にてpＨ７．５に調整し、通気により空気酸化を行い環化反応を行った。空気酸化終了後環化ペプチド（１）をダイアイオンＨＰ-２０樹脂１０ｇに吸着せしめ、次いで６０％ＣＨ₃ＣＮ（in １ＮＡｃＯＨ）を用いて脱着溶出した。該溶出液を室温下減圧濃縮してＣＨ₃ＣＮを除去し、さらに凍結乾燥により粉末化した。該粉末を少量の水に溶解し、その溶液をアサヒパックＯＤＰ−９０カラムにかけ、ＣＨ₃ＣＮのグラデイエント溶出による高速液体クロマトグラフイー（島津製作所ＨＰＬＣモデル：ＬＣ−６ＡＤ型）で精製し単一ピークのポリペプチド（１）を２７％の収率（保護基保護化ペプチド（１）樹脂から計算した値）で得た。６．１．７ポリペプチドの分析前記6.1.6で精製されたポリペプチドのＬｉｕらの方法［J．Biol.Chem.，２５１：１９３６（１９７６）］による酸加水分解およびロイシンアミノペプチダーゼ消化によるアミノ酸組成値は、前記式（１）のアミノ酸配列による組成の計算値とよく一致した。またＦＡＢ-ＭＳによる分子量値は［Ｍ＋Ｈ］⁺の計算値１９９６．１に対し、１９９６.３であった。得られたポリペプチド（１）の比旋光度［α］²⁰ _Dは−１７．２゜（Ｃ＝０．１１、１Ｎ酢酸）であった。６．２実施例３：ポリペプチド（１４）［ポリペプチド（１）のアミノ末端アミノ酸残基のＮ−α−アセチル化化合物］の合成下記構造式９のポリペプチド（１４）の合成は以下の6.2.1〜6.2.2に記載した。構造式９上記式（１４）中、Ａｃ−Ａｒｇ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ＤＬｙｓおよびＰｒｏは前記したアミノ酸残基を示し、３、１１位Ｃｙｓ間の実線はジスルフイド結合を示す。６．２．１．保護基保護化ペプチド（１）樹脂の部分アセチル化前記実施例１のステップ４（セクション6.1.4）で得た保護基保護化ペプチド（１）樹脂１.３０１ｇ（０．２５ｍｍｏｌ）を手動式固相合成反応容器にとり Fmoc基除去後Hudsonの方法［J．Org．Chem.、５３：６１７（１９８８）］に準じ、Ｎ端α−アミノ基のアセチル化を行い、Ｎ端α−アミノ酸アセチル化保護基保護化ペプチド（１）樹脂１．２４１ｇ（乾燥重量、収量１００％）を得た。その操作概略を表３に示した。本アセチル化は、ニンヒドリン反応が陰性になる迄操作１〜３を繰返し行った。６．２．２Ｎ端α−アミノ酸アセチル化保護基保護化ペプチド（１）樹脂の脱保護基、脱樹脂、部分精製並びに酸化によるペプチド（１４）の調製対応する保護基保護化ペプチド樹脂からの保護基の脱保護基、脱樹脂、部分精製並びに酸化によるペプチド（１４）の調製は、実施例１の6.1.5及び6.1.6のステップと同様に実施しポリペプチド（１４）を調製して得た。ポリペプチド（１４）の比旋光度は［α］²⁰ _D＝−１８．３゜（Ｃ＝０．０８、１Ｎ酢酸）であった。ポリペプチド（１４）はLiuらの方法［J.Biol．Chem., ２５１：１９３６（１９７６）］に従い０．２％トリプタミン含有４Ｍメタンスルホン酸と、１１５℃、２４時間酸加水分解を行いアミノ酸分析の結果、計算値と一致した。６．３実施例４：ポリペプチド（１９）［Ｎ−α−フルオレセインチオカルバモイル化ポリペプチド（１）］の合成下記構造式１０のポリペプチド（１９）の合成は、ポリペプチド（１）のアミノ末端アミノ酸残基のＮ−α−フルオレセインチオカルバモイル化により実施した。構造式１０上記式（１９）中、ＦＴＣ−Ａｒｇ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ｌｙｓ、ＤＬｙｓおよびＰｒｏは前述したアミノ酸残基を示し、３、１１位Ｃｙｓ間の実線はジスルフイド結合を示す。実施例１（6.1.6）により得たポリペプチド（１）の酢酸塩１０ｍｇ（３．９ μｍｏｌ）をＰＢＳ緩衝液（燐酸緩衝化生理食塩液ｐＨ７．５）１ｍｌに溶解し、氷冷下、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）アイソマーＩ（和光純薬工業（株）社）２．８ｍｇ（７．２μｍｏｌ）のＤＭＳＯ１ｍｌ溶液を滴加、室温中６〜７時間攪拌し、遊離アミノ基のフルオレセインチオカルバモイル化を行う。反応混合液をセフアデツクスＧ−２５（フアイン）カラム［５０ｍＭＰＢ（燐酸緩衝液）ｐＨ４.２平衡化済み］にて予備脱塩分画し、ペプチド画分をセツパツクＣ１８プラスＥＮＶカートリツジカラム（ミリポア社）に吸着させ、次いで８０％アセトニトリル／酢酸水溶液ｐＨ４．２で溶出し凍結乾燥して３．９３ｍｇ（収率３５％）のポリペプチド（１９）の酢酸塩を得た。得られたポリペプチド（１９）の酢酸塩の比旋光度[α]²⁰ _Dは−５．９°（Ｃ＝０．０６、Ｈ₂Ｏ）であつた。本化合物のLiuらの方法による酸加水分解物のアミノ酸分析から、ポリペプチド（１）の計算値よりアルギニン残基数１残基少い実測値が得られた。又、本化合物のトリフルオロ酢酸による部分加水分解（室温２時間）物の薄層クロマトグラフイ（ｎ−ブタノール：酢酸：水＝４：１：１）により、ＦＴＨ−Ａｒｇ（フルオレセイン−アルギニンチオヒダントイン）に一致する１つのメインスポツトが検出された。これら分析結果はＮ端アルギニン残基のα−アミノ基が選択的にフルオレセイン・チオカルバモイル化されていることを示す。６．４実施例２および比較例１及び２：ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対する抗ウイルス活性実施例１により合成したポリペプチド（１）のＨＩＶに対する抗ウイルス活性を以下の方法に従い試験し評価した。９６穴マイクロタイタープレートに、種々の濃度の試験物質と共にＨＩＶ感染ＭＴ−４細胞（２．５×１０４細胞／穴（well）、感染多重度（ＭＯＩ）：０．００１）を感染直後に加える。ＣＯ2インキュベーター中、３７℃で５日間培養した後、生存細胞数をＭＴＴ法［Pauwelsら；J．Virol．Methods ２０，３０９〜３２１（１９８８）］で測定した。抗ウイルス活性は、ＨＩＶ感染による細胞死を５０％抑制する濃度（ＥＣ₅₀：５０％ effective concentration）で表わす。一方、試験物質のＭＴ−４細胞に対する細胞毒性を知るために、ウイルス非感染細胞を上と同様に、種々の濃度の試験物質と共に培養を行った。細胞毒性は試験物質による５０％細胞障害濃度（ＣＣ₅₀：５０％ cytotoxic concentratio n）で表わす。また、ＣＣ₅₀とＥＣ₅₀の概略比（ＣＣ₅₀／ＥＣ₅₀）を有効比（ＳＩ）として表わした。下記構造式８の抗ウイルス性ポリペプチドをポリペプチド（１）の比較のために示す。構造式８表４にポリペプチド（１）、Ｔ−２２およびアジドチミジンのＥＣ₅₀とＣＣ₅₀ 及びＳＩ値を示す。上記表から明らかなように先に抗ＨＩＶ作用が明らかとなつているＴ−２２に比し本発明のポリペプチド（１）は細胞毒性が同等であるもののＴ−２２の約1/ 3の濃度で抗ウイルス作用を示た。ペプチドから４アミノ酸残基削減し、分子量が低分子化したにもかかわらず、本発明のポリペプチドは更に高められた活性を示した。アジドチミジン（ＡＺＴ）に比してもポリペプチド（１）のＥＣ₅₀値は若干高濃度であるものの細胞毒性は極めて低く、より安全な抗ＨＩＶ剤としての使用が期待出来る。６．５実施例５：ポリペプチド類の物性及び抗ＨＩＶ活性表５に実施例１、３および４の方法にて調製した本発明のポリペプチドの構造式、物性及び実施例２の抗ＨＩＶ試験法にて試験・評価した抗ウイルス活性を示す。但し、上記表中の本実施例の化合物は、特に表示しない限り３及び１１位のＣｙｓは相互にジスルフイド結合により連結していることを示す。また、上記表中“ＡＺＴ”はアジドチミジン（一般名ジドブジン）を示す。またＴ−２２は構造式８のポリペプチドを示す。［発明の効果］本発明によれば、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）に対する抗ウイルス作用を有する新規ポリペプチドを提供できる。また、親水性、親油性、より高い活性及び抗ＨＩＶ活性発現機作解明の付与が期待できる新規ポリペプチドを提供できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ【要約の続き】のＤＮＡ移入システムのコンポネントとしても有用である。

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式式中Ａ₁はリジン、アルギニンおよびオルニチンから選ばれる塩基性アミノ酸の１個または少くとも２個を有するアミノ酸残基またはペプチド残基、前記塩基性アミノ酸又はペプチド残基のアミノ末端アミノ酸残基のＮ−α位の水素原子がアシル基または置換チオカルバモイル基で置換されているＮ−αアシル置換アミノ酸残基、Ｎ−αアシル置換ペプチド残基、Ｎ−α置換チオカルバモイル化アミノ酸残基またはＮ−α置換チオカルバモイル化ペプチド残基を示し、Ａ₂はチロシンまたはフエニルアラニン残基を示し、Ａ₃はリジンまたはアルギニン残基を示し、Ａ₄は−ＯＨ（カルボキシル基由来）または−ＮＨ₂（酸アミド基由来）を示し、ＸはＤ−オルニチル−プロリン、プロリル−Ｄ−オルニチン、Ｄ−リジル−プロリン、プロリル−Ｄ−リジン、Ｄ−アルギニル−プロリン、プロリル−Ｄ−アルギニン、グリシル−オルニチン、オルニチル−グリシン、グリシル−リジン、リジル−グリシン、グリシル−アルギニン及びアルギニル−グリシンで示されるアミノ酸２個からなるペプチド残基群から選択され、その構成アミノ酸であるＤ −リジン、Ｌ−リジン、Ｄ−オルニチン又はＬ−オルニチンの側鎖ω−アミノ基の水素原子はω−アミノアシル基で置換されていてもよく、これらペプチド残基は６位と８位のアミノ酸残基とペプチド結合を介して連結しているペプチド残基を示し、Ｔｒｐはトリプトフアン残基を示し、Ｃｙｓはシステイン残基を示す、で表わされるポリペプチド、又はその塩。２．第１項に示すポリペプチド、又はその塩に於いて、Ａ₁がリジン、アルギニン及びオルニチンからなる群から選択される少なくとも１個の塩基性アミノ酸であるポリペプチド、又はその塩。３．第１項に示すポリペプチド、又はその塩に於いて、Ａ₁が２個の塩基性アミノ酸からなるペプチド残基であり、該塩基性アミノ酸がリジン、アルギニン及びオルニチンからなる群から選択されてなるポリペプチド、又はその塩。４．第１項に示すポリペプチド、又はその塩に於いて、Ａ₁が少なくても１個または２個の塩基性アミノ酸からなり、該塩基性アミノ酸のアミノ末端アミノ基のＮ−α位の水素原子がアシル基又は置換チオカルバモイル基で置換されているアミノ酸又はペプチド残基からなるポリペプチド、又はその塩。５．第１項に示すポリペプチド、又はその塩に於いて、３位及び１１位のシステイン残基がジスルフィド結合により相互に連結しているポリペプチド、又はその塩。６．下記式式中Ａ₁はリジン、アルギニンおよびオルニチンから選ばれる塩基性アミノ酸の１個または少くとも２個を有するアミノ酸残基またはペプチド残基、前記塩基性アミノ酸又はペプチド残基のアミノ末端アミノ酸残基のＮ −α位の水素原子がアシル基または置換チオカルバモイル基で置換されているＮ −αアシル置換アミノ酸残基、Ｎ−αアシル置換ペプチド残基、Ｎ−α置換チオカルバモイル化アミノ酸残基またはＮ−α置換チオカルバモイル化ペプチド残基を示し、Ａ₂はチロシンまたはフエニルアラニン残基を示し、Ａ₃はリジンまたはアルギニン残基を示し、Ａ₄は−ＯＨ（カルボキシル基由来）または−ＮＨ₂（酸アミド基由来）を示し、ＸはＤ−オルニチル−プロリン、プロリル−Ｄ−オルニチン、Ｄ−リジル−プロリン、プロリル−Ｄ−リジン、Ｄ−アルギニル−プロリン、プロリル−Ｄ−アルギニン、グリシル−オルニチン、オルニチル−グリシン、グリシル−リジン、リジル−グリシン、グリシル−アルギニン及びアルギニル−グリシンで示されるアミノ酸２個からなるペプチド残基群から選択され、その構成アミノ酸であるＤ −リジン、Ｌ−リジン、Ｄ−オルニチン又はＬ−オルニチンの側鎖ω−アミノ基の水素原子はω−アミノアシル基で置換されていてもよく、これらペプチド残基は６位と８位のアミノ酸残基とペプチド結合を介して連結しているペプチド残基を示し、Ｔｒｐはトリプトフアン残基を示し、Ｃｙｓはシステイン残基を示し、３位と１１位のシステイン残基はジスルフイド結合により連結している、で表わされるポリペプチド、又はその塩。７．第１項に示すポリペプチド、又はその塩の有効量及び製薬学的担体から構成される患者体内のＨＩＶの活動を阻害するための製薬学的組成物。８．第６項に示すポリペプチド、又はその塩の有効量及び製薬学的担体から構成される患者体内のＨＩＶの活動を阻害するための製剤学的組成物。