JPH0841083A - フォスファチジルコリンの精製方法 - Google Patents
フォスファチジルコリンの精製方法Info
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- JPH0841083A JPH0841083A JP20904194A JP20904194A JPH0841083A JP H0841083 A JPH0841083 A JP H0841083A JP 20904194 A JP20904194 A JP 20904194A JP 20904194 A JP20904194 A JP 20904194A JP H0841083 A JPH0841083 A JP H0841083A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 リン脂質含有組成物をシリカゲルカラムに通
液し、溶離液で溶出させてフォスファチジルコリンを分
取するに際し、溶離液として含水アルコールを使用し、
かつ、アルコールの濃度を経時的に変化させて溶出を行
う。低濃度から中濃度に経時的に変化させて溶出を行
う。溶離液は含水エタノールである。低濃度は５０〜８
０ｖｏｌ．％の濃度範囲のエタノール水溶液、中濃度は
８０〜９５ｖｏｌ．％の濃度範囲のエタノール水溶液で
ある。低濃度溶出の前に高濃度アルコールによる溶出を
行う。高濃度アルコールが９０〜１００ｖｏｌ．％の濃
度範囲のエタノール水溶液である。 【効果】 医薬品、化粧品に好適な純度の高いフォスフ
ァチジルコリンを効率よく精製することができる。シリ
カゲル使用によるフォスファチジルコリンの単離を効率
化することができる。
液し、溶離液で溶出させてフォスファチジルコリンを分
取するに際し、溶離液として含水アルコールを使用し、
かつ、アルコールの濃度を経時的に変化させて溶出を行
う。低濃度から中濃度に経時的に変化させて溶出を行
う。溶離液は含水エタノールである。低濃度は５０〜８
０ｖｏｌ．％の濃度範囲のエタノール水溶液、中濃度は
８０〜９５ｖｏｌ．％の濃度範囲のエタノール水溶液で
ある。低濃度溶出の前に高濃度アルコールによる溶出を
行う。高濃度アルコールが９０〜１００ｖｏｌ．％の濃
度範囲のエタノール水溶液である。 【効果】 医薬品、化粧品に好適な純度の高いフォスフ
ァチジルコリンを効率よく精製することができる。シリ
カゲル使用によるフォスファチジルコリンの単離を効率
化することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はフォスファチジルコリン
の精製方法に関するものである。詳細には、本発明は、
医薬品、化粧品に好適な純度の高いフォスファチジルコ
リンの精製方法に関するものである。
の精製方法に関するものである。詳細には、本発明は、
医薬品、化粧品に好適な純度の高いフォスファチジルコ
リンの精製方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】フォスファチジルコリン（ＰＣ）は医薬
品において安全性の高い乳化剤として静注薬等に用いら
れ、同様に化粧品の分野においても利用されている。し
かし、「製剤と機械（平成元年１２月１５日号）」でリ
ゾフォスファチジルコリン（ＬＰＣ）には赤血球の崩壊
といった問題が報告されているように、リゾフォスファ
チジルコリンの混入を避けることは、重要な課題であ
る。
品において安全性の高い乳化剤として静注薬等に用いら
れ、同様に化粧品の分野においても利用されている。し
かし、「製剤と機械（平成元年１２月１５日号）」でリ
ゾフォスファチジルコリン（ＬＰＣ）には赤血球の崩壊
といった問題が報告されているように、リゾフォスファ
チジルコリンの混入を避けることは、重要な課題であ
る。
【０００３】フォスファチジルコリンの精製方法とし
て、カドミウム塩として結晶精製する方法が古くから知
られているが、極めて毒性の高いカドミウムを医薬、化
粧品等の分野で使用することは不可能である。これに対
して特開昭６１−１４５１９０号では、シリカゲルカラ
ムによるカラムクロマトグラフィーを用いたフォスファ
チジルコリンの単離方法を開示している。この方法は、
低沸点石油エーテル留分、低級アルカノール及び水の混
合溶媒を溶離液としているが、この場合、実際にはリゾ
フォスファチジルコリンの溶出が極めて遅く、全体の作
業とすればシリカゲルの使い捨てや、リゾフォスファチ
ジルコリンを溶出させてシリカゲルを再生するために多
量の溶媒と時間が必要となる。また、フォスファチジル
コリンの純度としても実施例では８６％から９７％であ
って、純品とは言いがたいものであった。
て、カドミウム塩として結晶精製する方法が古くから知
られているが、極めて毒性の高いカドミウムを医薬、化
粧品等の分野で使用することは不可能である。これに対
して特開昭６１−１４５１９０号では、シリカゲルカラ
ムによるカラムクロマトグラフィーを用いたフォスファ
チジルコリンの単離方法を開示している。この方法は、
低沸点石油エーテル留分、低級アルカノール及び水の混
合溶媒を溶離液としているが、この場合、実際にはリゾ
フォスファチジルコリンの溶出が極めて遅く、全体の作
業とすればシリカゲルの使い捨てや、リゾフォスファチ
ジルコリンを溶出させてシリカゲルを再生するために多
量の溶媒と時間が必要となる。また、フォスファチジル
コリンの純度としても実施例では８６％から９７％であ
って、純品とは言いがたいものであった。
【０００４】特開昭５７−１２３１９４号では、珪酸ゲ
ルカラムを用い、炭素数１〜４のアルカノールの含水溶
媒に可溶なフォスファチジルコリン含有組成物と同溶媒
で４０〜９０℃にて不純物を分離する方法を提供してい
るが、ここの実施例で得られているフォスファチジルコ
リンは純度が８６〜９３％と充分なものではない。特開
昭５６−２３９９７号、特開昭４９−９３４００号で
は、フォスファチジルコリンの溶出にアンモニアを含む
アルコールを用いており、多種溶媒の使用による精留の
煩雑化やアンモニアの留去を完全に行う必要があり、珪
酸の溶出等、扱いにくい作業である。また、カラム中に
リゾフォスファチジルコリンが残りやすく、カラムの損
傷や再生のために溶媒や時間がかかる。
ルカラムを用い、炭素数１〜４のアルカノールの含水溶
媒に可溶なフォスファチジルコリン含有組成物と同溶媒
で４０〜９０℃にて不純物を分離する方法を提供してい
るが、ここの実施例で得られているフォスファチジルコ
リンは純度が８６〜９３％と充分なものではない。特開
昭５６−２３９９７号、特開昭４９−９３４００号で
は、フォスファチジルコリンの溶出にアンモニアを含む
アルコールを用いており、多種溶媒の使用による精留の
煩雑化やアンモニアの留去を完全に行う必要があり、珪
酸の溶出等、扱いにくい作業である。また、カラム中に
リゾフォスファチジルコリンが残りやすく、カラムの損
傷や再生のために溶媒や時間がかかる。
【０００５】「食品産業ハイセパレーション・システム
技術研究組合研究成果報告書平成元年度〜３年度」で
は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でのフォ
スファチジルコリンの単離を報告している。シリカゲル
カラムを用いてリン脂質をヘキサン／エタノール／水の
３成分混合系とエタノール／水の２成分系で精製条件の
検討を行っている。ヘキサンを含む系はリゾフォスファ
チジルコリンの溶出が遅く、溶媒と時間がかかりやす
い。
技術研究組合研究成果報告書平成元年度〜３年度」で
は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）でのフォ
スファチジルコリンの単離を報告している。シリカゲル
カラムを用いてリン脂質をヘキサン／エタノール／水の
３成分混合系とエタノール／水の２成分系で精製条件の
検討を行っている。ヘキサンを含む系はリゾフォスファ
チジルコリンの溶出が遅く、溶媒と時間がかかりやす
い。
【０００６】エタノール／水の系では、リン脂質の溶液
濃度がおよそ１％よりかなり低い場合、リゾフォスファ
チジルコリンは、フォスファチジルコリンより後に溶出
され、処理時間が長くなり、全体の使用溶媒量が多くな
る。原料リン脂質の溶液濃度がおよそ１％以上の場合で
あっても、カラム負荷量がシリカゲル１リットルあたり
およそ１０ｇ以下であると、リゾフォスファチジルコリ
ンはフォスファチジルコリンより後に溶出され、処理時
間が長くなり、使用溶媒量が多くなる。溶液濃度が１％
以上、カラム負荷量がシリカゲル１リットルあたりおよ
そ２０ｇ以上であると、フォスファチジルコリンの溶出
時間はあまり変化しないが、リゾフォスファチジルコリ
ンのみ溶出時間が短くなり、フォスファチジルコリンの
ピークの前半と重なるもののピークの後半にフォスファ
チジルコリンの純品が得られる。カラム負荷量がシリカ
ゲル１リットルあたりおよそ１０ｇ〜およそ２０ｇでは
フォスファチジルコリンとリゾフォスファチジルコリン
のピークが重なり、純品は得られない。
濃度がおよそ１％よりかなり低い場合、リゾフォスファ
チジルコリンは、フォスファチジルコリンより後に溶出
され、処理時間が長くなり、全体の使用溶媒量が多くな
る。原料リン脂質の溶液濃度がおよそ１％以上の場合で
あっても、カラム負荷量がシリカゲル１リットルあたり
およそ１０ｇ以下であると、リゾフォスファチジルコリ
ンはフォスファチジルコリンより後に溶出され、処理時
間が長くなり、使用溶媒量が多くなる。溶液濃度が１％
以上、カラム負荷量がシリカゲル１リットルあたりおよ
そ２０ｇ以上であると、フォスファチジルコリンの溶出
時間はあまり変化しないが、リゾフォスファチジルコリ
ンのみ溶出時間が短くなり、フォスファチジルコリンの
ピークの前半と重なるもののピークの後半にフォスファ
チジルコリンの純品が得られる。カラム負荷量がシリカ
ゲル１リットルあたりおよそ１０ｇ〜およそ２０ｇでは
フォスファチジルコリンとリゾフォスファチジルコリン
のピークが重なり、純品は得られない。
【０００７】また、エタノール／水の系で含水量が多い
とリゾフォスファチジルコリンは溶出が早くなるが、フ
ォスファチジルコリンは溶出が遅くなる。単一溶媒を終
始流しての検討ではフォスファチジルコリンの溶出時間
を短くするために、リゾフォスファチジルコリンがフォ
スファチジルコリンのピークの広い範囲に重なり、得ら
れるフォスファチジルコリンの純度低下、あるいは純品
のフォスファチジルコリンの収率の低下につながる。ま
た、この方法では原料にトリグリセリドのような中性脂
質が多く含まれるとトリグリセリドが素早く溶出されず
にフォスファチジルコリンのピークに重なりフォスファ
チジルコリンの純度低下等の問題を生じてしまう。
とリゾフォスファチジルコリンは溶出が早くなるが、フ
ォスファチジルコリンは溶出が遅くなる。単一溶媒を終
始流しての検討ではフォスファチジルコリンの溶出時間
を短くするために、リゾフォスファチジルコリンがフォ
スファチジルコリンのピークの広い範囲に重なり、得ら
れるフォスファチジルコリンの純度低下、あるいは純品
のフォスファチジルコリンの収率の低下につながる。ま
た、この方法では原料にトリグリセリドのような中性脂
質が多く含まれるとトリグリセリドが素早く溶出されず
にフォスファチジルコリンのピークに重なりフォスファ
チジルコリンの純度低下等の問題を生じてしまう。
【０００８】以上の公知文献における精製は、すべて、
カラムによってリン脂質組成物に含まれているエタノー
ルアミン含有リン脂質（フォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン）やスフ
ィンゴミエリン等の極性成分を分離する方法であって、
リゾフォスファチジルコリンの除去を目的とする本発明
の精製とは技術的に異なる。
カラムによってリン脂質組成物に含まれているエタノー
ルアミン含有リン脂質（フォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン）やスフ
ィンゴミエリン等の極性成分を分離する方法であって、
リゾフォスファチジルコリンの除去を目的とする本発明
の精製とは技術的に異なる。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、医薬品、化
粧品に好適な純度の高いフォスファチジルコリンを効率
よく精製することを目的とする。本発明は、シリカゲル
カラム使用によるフォスファチジルコリンの単離・精製
を効率よく行うことを目的とする。
粧品に好適な純度の高いフォスファチジルコリンを効率
よく精製することを目的とする。本発明は、シリカゲル
カラム使用によるフォスファチジルコリンの単離・精製
を効率よく行うことを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】本発明は、リン脂質含有
組成物をシリカゲルカラムに通液させてリン脂質を分取
するにあたり、溶離液であるアルコールの濃度を変化さ
せることによりフォスファチジルコリンを効率よく溶出
することを特徴とするフォスファチジルコリンの精製方
法である。
組成物をシリカゲルカラムに通液させてリン脂質を分取
するにあたり、溶離液であるアルコールの濃度を変化さ
せることによりフォスファチジルコリンを効率よく溶出
することを特徴とするフォスファチジルコリンの精製方
法である。
【００１１】原料のリン脂質含有組成物は、卵黄リン脂
質、精製大豆レシチンなどを使用する。卵黄リン脂質に
は、主成分であるフォスファチジルコリン、ホスファチ
ジルエタノールアミンと少量のスフィンゴミエリン、リ
ゾホスファチジルコリン等が含まれている。
質、精製大豆レシチンなどを使用する。卵黄リン脂質に
は、主成分であるフォスファチジルコリン、ホスファチ
ジルエタノールアミンと少量のスフィンゴミエリン、リ
ゾホスファチジルコリン等が含まれている。
【００１２】本発明の方法で使用するシリカゲルは、リ
ゾフォスファチジルコリンをフォスファチジルコリンよ
り先に溶出させるために、１００ミクロン以下という粒
子径が小さく、粒子径分布幅のせまいＨＰＬＣ用のシリ
カゲルを均質に充填したものを使用する。
ゾフォスファチジルコリンをフォスファチジルコリンよ
り先に溶出させるために、１００ミクロン以下という粒
子径が小さく、粒子径分布幅のせまいＨＰＬＣ用のシリ
カゲルを均質に充填したものを使用する。
【００１３】本発明で使用する溶離液は、メタノール、
エタノール、イソプロパノールなどのアルコールを含水
アルコールとして使用する。たとえばエタノールの場
合、リゾフォスファチジルコリンの溶出の目的には溶離
液であるエタノール／水系の水を増やしリゾフォスファ
チジルコリンを速やかに溶出させることと、フォスファ
チジルコリンの溶出にはエタノール／水系の水を減らし
フォスファチジルコリンの溶出を速やかに行うことを連
続して行うことにより、分離に要する時間の短縮及び純
品としてのフォスファチジルコリンの回収率向上が可能
となる。
エタノール、イソプロパノールなどのアルコールを含水
アルコールとして使用する。たとえばエタノールの場
合、リゾフォスファチジルコリンの溶出の目的には溶離
液であるエタノール／水系の水を増やしリゾフォスファ
チジルコリンを速やかに溶出させることと、フォスファ
チジルコリンの溶出にはエタノール／水系の水を減らし
フォスファチジルコリンの溶出を速やかに行うことを連
続して行うことにより、分離に要する時間の短縮及び純
品としてのフォスファチジルコリンの回収率向上が可能
となる。
【００１４】すなわち、本発明は、リン脂質含有組成物
をシリカゲルカラムに通液し、溶離液で溶出させてフォ
スファチジルコリンを分取するに際し、溶離液として含
水アルコールを使用し、かつ、アルコールの濃度を経時
的に変化させて溶出させることを特徴とするフォスファ
チジルコリンの精製方法である。
をシリカゲルカラムに通液し、溶離液で溶出させてフォ
スファチジルコリンを分取するに際し、溶離液として含
水アルコールを使用し、かつ、アルコールの濃度を経時
的に変化させて溶出させることを特徴とするフォスファ
チジルコリンの精製方法である。
【００１５】リゾフォスファチジルコリンの最短溶出条
件ではフォスファチジルコリンの溶出時間が長くなり、
フォスファチジルコリンの最短溶出条件ではリゾフォス
ファチジルコリンがフォスファチジルコリンのピークと
重なるため、時間は早くても純度または収率が充分では
ないが、はじめに低濃度のアルコール、例えば７０ｖｏ
ｌ．％のエタノールでリゾフォスファチジルコリンを溶
出させ、リゾフォスファチジルコリンの溶出が終わる少
し前から中濃度のアルコール例えば、８５ｖｏｌ．％の
エタノールでフォスファチジルコリンを速やかに溶出さ
せるのである。上記低濃度のエタノールは５０〜８０ｖ
ｏｌ．％、中濃度のエタノールは、８０〜９５ｖｏｌ．
％のエタノールが使用される。
件ではフォスファチジルコリンの溶出時間が長くなり、
フォスファチジルコリンの最短溶出条件ではリゾフォス
ファチジルコリンがフォスファチジルコリンのピークと
重なるため、時間は早くても純度または収率が充分では
ないが、はじめに低濃度のアルコール、例えば７０ｖｏ
ｌ．％のエタノールでリゾフォスファチジルコリンを溶
出させ、リゾフォスファチジルコリンの溶出が終わる少
し前から中濃度のアルコール例えば、８５ｖｏｌ．％の
エタノールでフォスファチジルコリンを速やかに溶出さ
せるのである。上記低濃度のエタノールは５０〜８０ｖ
ｏｌ．％、中濃度のエタノールは、８０〜９５ｖｏｌ．
％のエタノールが使用される。
【００１６】一方、その他の不純物、たとえば、リン脂
質組成物に含まれやすいフォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィ
ンゴミエリン等の極性成分は本発明の条件においてはフ
ォスファチジルコリンの溶出を目的とする操作（中濃度
エタノールによる溶出）で、フォスファチジルコリンよ
りはるかに早く溶出されることから、特別な操作を必要
としない。一方、トリグリセリド、ジグリセリド、モノ
グリセリド等のグリセリン脂肪酸エステル、遊離の脂肪
酸等の低極性成分は、溶出の初期に高濃度のアルコー
ル、たとえば９０ｖｏｌ％〜１００ｖｏｌ％、さらに好
ましくは９５ｖｏｌ％〜１００ｖｏｌ％のエタノール水
溶液を用いることにより溶出することができる。
質組成物に含まれやすいフォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィ
ンゴミエリン等の極性成分は本発明の条件においてはフ
ォスファチジルコリンの溶出を目的とする操作（中濃度
エタノールによる溶出）で、フォスファチジルコリンよ
りはるかに早く溶出されることから、特別な操作を必要
としない。一方、トリグリセリド、ジグリセリド、モノ
グリセリド等のグリセリン脂肪酸エステル、遊離の脂肪
酸等の低極性成分は、溶出の初期に高濃度のアルコー
ル、たとえば９０ｖｏｌ％〜１００ｖｏｌ％、さらに好
ましくは９５ｖｏｌ％〜１００ｖｏｌ％のエタノール水
溶液を用いることにより溶出することができる。
【００１７】その後に低濃度のアルコール例えば、７０
ｖｏｌ．％程度のエタノールで、リゾフォスファチジル
コリンを溶出する。リゾフォスファチジルコリンの溶出
が終了する少し前から中濃度のアルコール例えば、８５
％程度のエタノールでフォスファチジルコリンを溶出す
る。
ｖｏｌ．％程度のエタノールで、リゾフォスファチジル
コリンを溶出する。リゾフォスファチジルコリンの溶出
が終了する少し前から中濃度のアルコール例えば、８５
％程度のエタノールでフォスファチジルコリンを溶出す
る。
【００１８】すなわち、本発明は、リン脂質含有組成物
をシリカゲルカラムに通液し、溶離液で溶出させてフォ
スファチジルコリンを分取するに際し、溶離液として含
水アルコールを使用すること、まず高濃度アルコールに
よる溶出を行うこと、次いでアルコールの濃度を低濃度
から中濃度に経時的に変化させて溶出を行うことを特徴
とするフォスファチジルコリンの精製方法である。その
場合、高濃度アルコールは９０〜１００ｖｏｌ．％のエ
タノールが使用される。
をシリカゲルカラムに通液し、溶離液で溶出させてフォ
スファチジルコリンを分取するに際し、溶離液として含
水アルコールを使用すること、まず高濃度アルコールに
よる溶出を行うこと、次いでアルコールの濃度を低濃度
から中濃度に経時的に変化させて溶出を行うことを特徴
とするフォスファチジルコリンの精製方法である。その
場合、高濃度アルコールは９０〜１００ｖｏｌ．％のエ
タノールが使用される。
【００１９】溶離液の流速はおおむね１０ｍｌ／ｃｍ２
・ｍｉｎ程度で行われる。原料に用いるレシチン中のフ
ォスファチジルコリン純度は比較的低くても良く、リン
脂質以外の成分例えば中性脂質等がフォスファチジルコ
リン以上に含まれていても構わない。カラム被処理物が
リン脂質で構成され中性脂質をほとんど含まない場合は
低濃度アルコール、中濃度アルコールの順に、中性脂質
等の低極性成分を含む場合は、高濃度アルコール、低濃
度アルコール、中濃度アルコールの順に溶出を行う。
・ｍｉｎ程度で行われる。原料に用いるレシチン中のフ
ォスファチジルコリン純度は比較的低くても良く、リン
脂質以外の成分例えば中性脂質等がフォスファチジルコ
リン以上に含まれていても構わない。カラム被処理物が
リン脂質で構成され中性脂質をほとんど含まない場合は
低濃度アルコール、中濃度アルコールの順に、中性脂質
等の低極性成分を含む場合は、高濃度アルコール、低濃
度アルコール、中濃度アルコールの順に溶出を行う。
【００２０】中性脂質を含む場合は、常温を超える温度
の方が中性脂質の分離が良好である。しかし、通常カラ
ム分離で行われる様な溶離液の沸点以下の加温は行った
方が分離時間が短くなるものの、加温によって成分がわ
ずかではあるが加水分解する可能性等を考慮すると、加
温を避ける方が望ましい。また、カラムに不溶性成分が
詰まって安定した使用ができなくならないためには、カ
ラム分離にかける原料は使用するアルコールに可溶の成
分によって構成されていることが望ましい。原料の状態
としては、これにより限定されるものではないが、アル
コール溶液でおよそ１％〜３０％程度の固形物含量のも
のがふさわしい。
の方が中性脂質の分離が良好である。しかし、通常カラ
ム分離で行われる様な溶離液の沸点以下の加温は行った
方が分離時間が短くなるものの、加温によって成分がわ
ずかではあるが加水分解する可能性等を考慮すると、加
温を避ける方が望ましい。また、カラムに不溶性成分が
詰まって安定した使用ができなくならないためには、カ
ラム分離にかける原料は使用するアルコールに可溶の成
分によって構成されていることが望ましい。原料の状態
としては、これにより限定されるものではないが、アル
コール溶液でおよそ１％〜３０％程度の固形物含量のも
のがふさわしい。
【００２１】
【実施例】本願発明の詳細を実施例で説明する。本願発
明はこれら実施例によって何ら限定されるものではな
い。
明はこれら実施例によって何ら限定されるものではな
い。
【００２２】実施例１ 卵黄リン脂質（成分：フォスファチジルコリン、リゾフ
ォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィ
ンゴミエリン） 原料である卵黄リン脂質はキューピー（株）製卵黄レシ
チンＰＬ−１００Ｈ１８０ｍｇ、カラムは（株）ワイエ
ムシイ製Ａ−００３（内径４．６ｍｍ、カラム長さ２５
０ｍｍ）、溶離液流速：１．８ｍｌ／ｍｉｎ、７２％エ
タノールで溶離をはじめ、１０分後から溶離液を９０％
エタノールに変えて溶出を行った。１５分以降７５分ま
でのピークを集めてフォスファチシルコリン画分とし
た。フォスファチジルコリンの回収率は９０．２％で、
２次元展開ＴＬＣで単一スポットを示し、純品であるこ
とがわかった。
ォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノールア
ミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィ
ンゴミエリン） 原料である卵黄リン脂質はキューピー（株）製卵黄レシ
チンＰＬ−１００Ｈ１８０ｍｇ、カラムは（株）ワイエ
ムシイ製Ａ−００３（内径４．６ｍｍ、カラム長さ２５
０ｍｍ）、溶離液流速：１．８ｍｌ／ｍｉｎ、７２％エ
タノールで溶離をはじめ、１０分後から溶離液を９０％
エタノールに変えて溶出を行った。１５分以降７５分ま
でのピークを集めてフォスファチシルコリン画分とし
た。フォスファチジルコリンの回収率は９０．２％で、
２次元展開ＴＬＣで単一スポットを示し、純品であるこ
とがわかった。
【００２３】実施例２ 大豆分画レシチン（成分：フォスファチジルコリン、リ
ゾフォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノー
ルアミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、ト
リグリセライド、ジグリセライド、遊離脂肪酸） 大豆のペースト状レシチンを９０％エタノールで分別
し、可溶物としてフォスファチジルコリン３２％、フォ
スファチジルエタノールアミン１７％中性脂質３４％の
ペースト状の分別物を得た、この分別物２００ｍｇを原
料に実施例１と同じカラムを使いはじめに９５％エタノ
ールで中性脂質（トリグリセライド、ジグリセライド、
遊離脂肪酸）を溶出し、分離開始１８分で７０％エタノ
ールに変え、フォスファチジルエタノールアミンとリゾ
フォスファチジルコリンを溶出した。分離開始３０分で
９０％エタノールに変えてフォスファチジルコリンを溶
出させた。フォスファチジルコリン画分として分離開始
３５分から８５分の溶出物を集めた。このときフォスフ
ァチジルコリンの回収率は８６％で２次元ＴＬＣの結果
単一スポットを示した。
ゾフォスファチジルコリン、フォスファチジルエタノー
ルアミン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、ト
リグリセライド、ジグリセライド、遊離脂肪酸） 大豆のペースト状レシチンを９０％エタノールで分別
し、可溶物としてフォスファチジルコリン３２％、フォ
スファチジルエタノールアミン１７％中性脂質３４％の
ペースト状の分別物を得た、この分別物２００ｍｇを原
料に実施例１と同じカラムを使いはじめに９５％エタノ
ールで中性脂質（トリグリセライド、ジグリセライド、
遊離脂肪酸）を溶出し、分離開始１８分で７０％エタノ
ールに変え、フォスファチジルエタノールアミンとリゾ
フォスファチジルコリンを溶出した。分離開始３０分で
９０％エタノールに変えてフォスファチジルコリンを溶
出させた。フォスファチジルコリン画分として分離開始
３５分から８５分の溶出物を集めた。このときフォスフ
ァチジルコリンの回収率は８６％で２次元ＴＬＣの結果
単一スポットを示した。
【００２４】比較例１ 卵黄リン脂質（フォスファチジルコリン、リゾフォスフ
ァチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミン、
リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミ
エリン） 実施例１と同様に卵黄リン脂質を９０％エタノール単独
で溶出させたところ、１５分から７５分の画分はフォス
ファチジルコリンの回収率９２％であったがリゾフォス
ファチジルコリンが０．７％含まれていた。純品として
のフォスファチジルコリンを提供できる部分を回収した
場合、フォスファチジルコリンの回収率が４８％となっ
た。
ァチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミン、
リゾフォスファチジルエタノールアミン、スフィンゴミ
エリン） 実施例１と同様に卵黄リン脂質を９０％エタノール単独
で溶出させたところ、１５分から７５分の画分はフォス
ファチジルコリンの回収率９２％であったがリゾフォス
ファチジルコリンが０．７％含まれていた。純品として
のフォスファチジルコリンを提供できる部分を回収した
場合、フォスファチジルコリンの回収率が４８％となっ
た。
【００２５】比較例２ 大豆分画レシチン（フォスファチジルコリン、リゾフォ
スファチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミ
ン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、トリグリ
セライド、ジグリセライド、遊離脂肪酸） 実施例２と同様の操作を行い、溶離液を９０％エタノー
ルのみとした。分離開始３５分から７５分までの溶出物
を集めた。７５分から８５分は微量のフォスファチジル
コリンが含まれていたが収量に影響のない量であった。
得られた画分はフォスファチジルコリンの回収率７９％
で、中性脂質１２％、リゾフォスファチジルコリン０．
５％を含んでいた。また、純品としてのフォスファチジ
ルコリンを提供できる部分を回収した場合、フォスファ
チジルコリンの回収率は２４％であった。
スファチジルコリン、フォスファチジルエタノールアミ
ン、リゾフォスファチジルエタノールアミン、トリグリ
セライド、ジグリセライド、遊離脂肪酸） 実施例２と同様の操作を行い、溶離液を９０％エタノー
ルのみとした。分離開始３５分から７５分までの溶出物
を集めた。７５分から８５分は微量のフォスファチジル
コリンが含まれていたが収量に影響のない量であった。
得られた画分はフォスファチジルコリンの回収率７９％
で、中性脂質１２％、リゾフォスファチジルコリン０．
５％を含んでいた。また、純品としてのフォスファチジ
ルコリンを提供できる部分を回収した場合、フォスファ
チジルコリンの回収率は２４％であった。
【００２６】
【発明の効果】医薬品、化粧品に好適な純度の高いフォ
スファチジルコリンを効率よく精製することができる。
シリカゲル使用によるフォスファチジルコリンの単離を
効率化することができる。
スファチジルコリンを効率よく精製することができる。
シリカゲル使用によるフォスファチジルコリンの単離を
効率化することができる。
Claims (6)
- 【請求項１】 リン脂質含有組成物をシリカゲルカラム
に通液し、溶離液で溶出させてフォスファチジルコリン
を分取するに際し、溶離液として含水アルコールを使用
し、かつ、アルコールの濃度を経時的に変化させて溶出
を行うことを特徴とするフォスファチジルコリンの精製
方法。 - 【請求項２】 低濃度から中濃度に経時的に変化させて
溶出を行う請求項１記載のフォスファチジルコリンの精
製方法。 - 【請求項３】 溶離液が含水エタノールである請求項１
または２記載のフォスファチジルコリンの精製方法。 - 【請求項４】 低濃度が５０〜８０ｖｏｌ．％の濃度範
囲のエタノール水溶液、中濃度が８０〜９５ｖｏｌ．％
の濃度範囲のエタノール水溶液である請求項２または３
記載のフォスファチジルコリンの精製方法。 - 【請求項５】 低濃度溶出の前に高濃度アルコールによ
る溶出を行う請求項２、３または４記載のフォスファチ
ジルコリンの精製方法。 - 【請求項６】 高濃度アルコールが９０〜１００ｖｏ
ｌ．％の濃度範囲のエタノール水溶液である請求項５記
載のフォスファチジルコリンの精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20904194A JP3322761B2 (ja) | 1994-07-29 | 1994-07-29 | フォスファチジルコリンの精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP20904194A JP3322761B2 (ja) | 1994-07-29 | 1994-07-29 | フォスファチジルコリンの精製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0841083A true JPH0841083A (ja) | 1996-02-13 |
| JP3322761B2 JP3322761B2 (ja) | 2002-09-09 |
Family
ID=16566284
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20904194A Expired - Lifetime JP3322761B2 (ja) | 1994-07-29 | 1994-07-29 | フォスファチジルコリンの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3322761B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104230982A (zh) * | 2014-10-09 | 2014-12-24 | 陕西源邦生物技术有限公司 | 一种由大豆粉末磷脂提取高含量磷脂酰胆碱的方法 |
-
1994
- 1994-07-29 JP JP20904194A patent/JP3322761B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104230982A (zh) * | 2014-10-09 | 2014-12-24 | 陕西源邦生物技术有限公司 | 一种由大豆粉末磷脂提取高含量磷脂酰胆碱的方法 |
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3322761B2 (ja) | 2002-09-09 |
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