JPH08217795A - 溶解性に優れた小麦蛋白加水分解物及びその製造法並びに透明性化粧料。 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】 化粧水やシャンプーなどの透明性化粧品に好
適な小麦蛋白加水分解物とその製法を提供する。 【構成】 ２種以上のエンド型蛋白加水分解酵素を組み
合わせて用いて、酸性下で小麦蛋白を加水分解して得ら
れる重量平均分子量が１，０００〜４，０００で、分子
量４，０００以下のペプチドの割合が７５％以上であっ
て、ｐＨ２〜１０の領域内の水ならびに５０％エタノー
ル水溶液に透明に溶解でき、かつ安定に保つことができ
る小麦蛋白加水分解物を得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、溶解性に優れた小麦蛋
白加水分解物、より詳しくはｐＨ２〜１０の領域の水並
びに５０％エタノールに透明に溶解でき、いずれの場合
にも、安定に透明性を保つことができる小麦蛋白加水分
解物、並びにその製造法に関するものである。また、本
発明に係る溶解性に優れた小麦蛋白加水分解物は透明性
が要求される化粧料、例えば、化粧水、シャンプーなど
に好適に配合できる。

【０００２】

【従来の技術】周知の通り、化粧料に蛋白質またはその
加水分解物を配合することによって、保湿効果、はり、
すべりなどの感触を与えることができるので、コラーゲ
ン、ケラチン、シルク、卵白などの動物性蛋白質が利用
されてきたが、動物起源のものは臭い、刺激性があるな
どの点で問題があるため、近年では、より低刺激性であ
って、かつ原料の安定供給が可能な植物起原のもの、例
えば小麦、大豆などの蛋白またはその加水分解物が利用
されるようになってきている。

【０００３】かかる植物性蛋白加水分解物の製造には酸
分解法、アルカリ分解法、酵素分解法などの諸方法やこ
れらの組み合わせが一般的に用いられている。しかし、
前二者は分解条件が過酷であるため複雑な生成物による
刺激性や着色などから敬遠され、現在では、主に酵素に
よる分解法が用いられている。特に、化粧料用途を目的
とする場合、要求される機能性から小麦蛋白の酵素分解
にはエンド型の酵素が用いられ、重量平均分子量が１，
０００〜１０，０００程度に分解したものが使用されて
いる。

【０００４】しかしながら、小麦蛋白質は元来難分解性
であるため単一のエンド型酵素の作用では充分分解しき
れず、濾過後も比較的高分子量のペプチドが最終製品に
残留するため、水溶液のｐＨ変動や冷水に対する溶解性
並びにアルコール水溶液などに対する溶解性に劣り、濁
りや沈澱を惹起する要因となっている。

【０００５】また、小麦蛋白加水分解物は、化粧料に適
したｐＨ域である弱酸性から中性、弱アルカリ性に至る
領域のｐＨ変動や冷所保存中において、しばしば混濁や
沈澱をおこすため、優れた性質を有しながら、冬期間や
寒冷地にも適した安定な透明性化粧料の処方組みが困難
とされている。

【０００６】当業者間においては、上記混濁や沈澱を少
なく抑える努力がなされているが、化粧料にとって望ま
しいｐＨ領域に調整できなかったり、混濁や沈澱の抑制
を目的とする増粘剤などの併用によって使用感が低下し
たり、透明性化粧料にとって大切な外観の美麗さや清潔
感が失われたり、また添加剤併用のために皮膚への刺激
性を高める結果となり、折角の植物性蛋白加水分解物の
機能が生かされず、広く応用されてはいないのが現状で
ある。

【０００７】従来の化粧料用植物性蛋白加水分解物を得
る技術としては、特開昭６２−５３９０９号公報、特開
昭６３−２５３０１２号公報および特開平５−９２１号
公報に開示されている各技術があげられる。しかしなが
ら、これらの各技術は、いずれもエンド型蛋白加水分解
酵素を使用しているものの２種以上を組み合せて使用す
ることを意図したものではなく、また、透明性化粧料用
途を意図したものでもなかったため、該用途において充
分な性能を具備した小麦蛋白加水分解物は得られていな
い。

【０００８】詳言すれば、特開昭６２−５３９０９号公
報記載の技術は、分子量１，０００から１０，０００程
度の平均分子量を有する植物種子蛋白の水溶性加水分解
物を含有する化粧料に関するものであり、該公報に示さ
れる小麦蛋白質の加水分解例には、エンド型酵素である
ペプシンのみを用いて加水分解後加熱し、濾過処理した
液に防腐剤を添加し、３日間放置後再度濾過を行い透明
な液を得ている記述があるが、蛋白加水分解物の製造工
程が複雑で、かなりの長時間を要している。なお、この
公報の実施例３を追試したところ、得られた小麦蛋白加
水分解物は水溶液や５℃下の水溶液中では濁りが認めら
れ、また、該水溶液のｐＨの変動や低温域に温度低下さ
せることにより新たな濁りの発生が認められた。

【０００９】特開昭６３−２５３０１２号公報記載の技
術は、分子量が１万以下にあり、主体成分の分子量が
２，０００から５，０００付近にあるグルテン加水分解
抽出物含有化粧料に関するもので、実施例１では小麦蛋
白質をエンド型であるアルカリプロテアーゼのみを用い
て加水分解後、二度の濾過を行い、さらに高分子量の加
水分解ペプチドを除くために限外濾過膜を通して、分子
量１０，０００以上のペプチドを除去して低分子量帯を
得ており、該公報には、得られる加水分解物は「水及び
５０％エタノールに可溶である」と記載されているが、
製造工程が煩雑で、かなりの長時間を要している。な
お、この公報の実施例１を追試したところ、得られた小
麦蛋白加水分解物は低濃度では常温の水に溶解はするも
のの、濃度が高くなるにつれて濁りの増加が認められ、
また、低温域の冷水や５０％エタノールのいずれにも溶
解性が不充分なため濁りが認められた。

【００１０】特開平５−９２１号公報記載の技術は、小
麦蛋白加水分解物を含有する化粧料に関するものであ
り、該公報には酸性側に至適ｐＨを有するエンド型ペプ
チダーゼを用いるとされているが特に限定はなく、主と
して分子量分布について規定しているものである。な
お、この公報の参考例１に従って小麦蛋白加水分解物を
作製し溶解性を調べたところ常温の水には溶解するが、
冷水中では濁りがみられ、また、該水溶液のｐＨを中性
付近で変動させることにより新たな濁りの発生が認めら
れた。

【００１１】上述の通り、上掲各公報に開示されている
各技術においては、エンド型酵素を用いてはいるものの
その組み合せや製造条件について詳細に究明されてはお
らず、透明性化粧料に要求される溶液透明性とその安定
性を満たす小麦蛋白加水分解物は得られていないといえ
る。

【００１２】

【発明が解決しようとする問題点】本発明は、小麦蛋白
加水分解物水溶液のｐＨが２〜１０の範囲、ならびに室
温以下の冷水及び５０％エタノールにも透明に溶解で
き、かつその透明性を安定に保つことができるので、透
明性化粧料、例えば化粧水、シャンプーなどに好適に配
合できる小麦蛋白加水分解物の製法、および該製法によ
って得られる加水分解物を含有する透明性化粧料の提供
を技術的課題とする。

【００１３】

【問題点を解決するための手段】前記技術的課題は、２
種以上のエンド型蛋白加水分解酵素を組み合せて用いて
酸性下において小麦蛋白質を加水分解して得られる重量
平均分子量が１，０００〜４，０００であり、分子量
４，０００以下のペプチドの割合が７５％以上であっ
て、ｐＨ２〜１０の領域内の水並びに５０％エタノール
水溶液に透明に溶解する小麦蛋白加水分解物を得ること
にある。

【００１４】また、本発明は、２種以上のエンド型蛋白
加水分解酵素を組み合せて用いて酸性下において小麦蛋
白質を加水分解して得られる、重量平均分子量が１，０
００〜４，０００であり、分子量４，０００以下のペプ
チドの割合が７５％以上であって、ｐＨ２〜１０の領域
内の水並びに５０％エタノール水溶液に透明に溶解する
小麦蛋白加水分解物の製造法である。

【００１５】上記製造法の実施に当っては、２種以上の
エンド型の蛋白分解酵素として、アスパルティックタイ
ププロテイナーゼと、メタロタイププロテイナーゼ、セ
リンタイププロテイナーゼ及びシステインタイププロテ
イナーゼから選ばれる１種又は２種以上のプロテイナー
ゼとを組み合わせて使用することが重要であり、また、
分解ｐＨにおける酵素活性比率がアスパルティックタイ
ププロテイナーゼ１００部に対してメタロタイププロテ
イナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及びシステイン
タイププロテイナーゼから選ばれる１種又は２種以上が
１〜１５部であること、さらにはｐＨ３．０〜５．０に
おいて加水分解することが必要である。

【００１６】また、本発明は、２種以上のエンド型蛋白
加水分解酵素を組み合せて用いて、酸性下で小麦蛋白質
を加水分解して得られる重量平均分子量が１，０００〜
４，０００で、分子量４，０００以下のペプチドの割合
が７５％以上であって、ｐＨ２から１０の領域内の水並
びに５０％エタノール水溶液に透明に溶解する小麦蛋白
加水分解物を含有する透明性化粧料である。

【００１７】本発明をより詳しく説明すれば、次の通り
である。本発明においては、２種以上のエンド型の蛋白
分解酵素を組み合せて用い、小麦蛋白質を原料として酸
性下、好ましくはｐＨ３．０〜５．０において、５〜３
０時間加水分解することにより、高分子量帯のペプチド
を沈澱し難い長さにまで切断し、透明性化粧料に最適な
分子量分布を持つ小麦蛋白加水分解物を得ることができ
る。

【００１８】エンド型蛋白分解酵素は、一般に、酵素の
活性基別にアスパルティックタイププロテイナーゼ、メ
タロタイププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナー
ゼ及びシステインタイププロテイナーゼに類型化されて
いる。本発明においてはこれらのタイプのうちで、アス
パルティックタイププロテイナーゼを必須構成酵素と
し、これとメタロタイププロテイナーゼ、セリンタイプ
プロテイナーゼ、及び、システインタイププロテイナー
ゼから選ばれる１種又は２種以上の酵素と組み合わせて
用い、且つ、その量比は分解条件のｐＨにおける酵素活
性比率から前記割合で併用することが最も重要である。

【００１９】元来、酵素には至適ｐＨが存在するが、エ
ンド型の蛋白分解酵素であるアスパルティックタイププ
ロテイナーゼは概して至適ｐＨは酸性側に存在する。し
かし、メタロタイププロテイナーゼの至適ｐＨは中性付
近にあり、セリンタイププロテイナーゼはアルカリ性側
に存在する。また、システインタイププロテイナーゼは
酸性側からアルカリ性域の広範にわたって至適ｐＨを有
する。

【００２０】本発明の実施に当っては、アスパルティッ
クタイププロテイナーゼと組み合わせて用いるメタロタ
イププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及び
システインタイププロテイナーゼの本来の至適ｐＨをか
なり下回った酸性下、好ましくは３．０〜５．０のｐＨ
域において小麦蛋白質を加水分解することが有効であ
る。

【００２１】即ち、メタロタイププロテイナーゼである
サーモリシンの酵素活性を一例として上げるならば、本
発明者の測定結果によれば、その至適ｐＨは７付近に存
在し、この時の活性単位は２，６００，０００（Ｕ／
ｇ）であるが、これをｐＨ４．５の低ｐＨにおいても活
性単位は２０，０００（Ｕ／ｇ）を有しており、至適ｐ
Ｈの１００分の１にも満たないが、本発明においてはこ
の活性の存在が極めて有効に作用する。

【００２２】本発明に用いるアスパルティックタイププ
ロテイナーゼとしてはペプシン、カテプシン、及び、微
生物産生の酸性プロテイナーゼ（Aspergillus 属、Peni
cillium 属などの酸性プロテイナーゼ）などが知られて
おり、メタロタイププロテイナーゼとしてはコラーゲナ
ーゼ及び微生物産生の中性プロテイナーゼ（サーモリシ
ンなど）が知られており、セリンタイププロテイナーゼ
としてはトリプシン、キモトリプシン及び微生物産生の
アルカリプロテイナーゼ（ズブチリシンなど）が知られ
ており、システインタイププロテイナーゼとしてはパパ
イン、ブロメライン、フィシンなどが知られている。

【００２３】上記各蛋白分解酵素には、アスパルティッ
クタイププロテイナーゼ、メタロタイププロテイナー
ゼ、セリンタイププロテイナーゼ及びシステインタイプ
プロテイナーゼの単一酵素として存在するものもある
が、アスパルティックタイププロテイナーゼ、メタロタ
イププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及び
システインタイププロテイナーゼをそれぞれ特定量含有
している複合酵素として存在するものが多い。後者を高
純度精製することによって各単一酵素を分離することも
できるが、分離することなく複合酵素のままで使用する
こともできる。

【００２４】複合酵素のままで使用する場合には、該複
合酵素中に存在する各活性基別プロテイナーゼの酵素力
価を測定し、その値から算定して本発明に規定する分解
ｐＨにおける酵素活性比率をバランスよく選択すればよ
い。なお、カビ由来の蛋白加水分解酵素のように本発明
に規定する各活性基別プロテイナーゼをバランスよく含
有している酵素を選定することが好ましい。

【００２５】なお、各活性基別酵素力価の測定方法は次
の通りである。 （酵素力価の測定） （１）エンド型蛋白加水分解酵素の測定 至適ｐＨに調整した酵素溶液１．０ｍｌを試験管にと
り、３７℃の恒温水槽に入れ５分間予熱した後、カゼイ
ン溶液２．０ｍｌを加えよく振り混ぜ直ちに３７℃の恒
温水槽に入れ、１０〜３０分間放置する。これに７．５
％トリクロロ酢酸溶液２．０ｍｌを加えよく振り混ぜ、
室温にて３０分間放置した後、濾紙で濾過する。その濾
液を水を対象として波長２８０ｎｍの吸光度Ａ_t を測定
する。別に空試験として、酵素溶液１．０ｍｌをとり、
７．５％トリクロロ酢酸溶液２．０ｍｌを加えよく振り
混ぜた後、カゼイン溶液２．０ｍｌを加えたものにつ
き、以下同様に操作して吸光度Ａ_o を測定する。活性単
位（Ｕ）は、波長２８０ｎｍの吸光度を１分間に０．０
０１変化させるときの酵素量とする。 活性単位（Ｕ／ｇ）＝（Ａ_t −Ａ_o ）×ｎ／ｔ×１０００ ｔ：反応時間 ｎ：酵素溶液の希釈倍数

【００２６】（２）各活性基別プロテイナーゼの活性測
定 アスパルティックタイププロテイナーゼ、メタロタイプ
プロテイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ、及び、
システインタイププロテイナーゼの活性測定はそれぞ
れ、ペプスタチン溶液、ＥＤＴＡ溶液、フェニルメチル
スルフォニルフルオイド溶液及びパラクロロメルクリ安
息香酸（ＰＣＭＢ）溶液を活性阻害剤として加え、ヘモ
グロビンを基質として、加水分解条件のｐＨで前記と同
様の方法に従い酵素活性測定し、活性単位から活性基別
酵素量比及び酵素量を求める。

【００２７】本発明に係る小麦蛋白加水分解物の代表的
な製造法は次の通りである。即ち、小麦蛋白質を酸性ｐ
Ｈ域３．０〜５．０において、エンド型蛋白分解酵素で
あるアスパルティックタイププロテイナーゼと、メタロ
タイププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及
びシステインタイププロテイナーゼから選ばれる１種又
は２種以上を組み合わせてなる酵素を用いて、３０〜５
０℃で、５〜３０時間加水分解した後、濾過することに
より、本発明に係る蛋白加水分解物が得られる。

【００２８】上記酵素を用いるに当って複数の蛋白分解
酵素によって同時に加水分解することが好適であるが、
複数の蛋白分解酵素を順次使用して段階的に加水分解す
ることもできる。

【００２９】上記製造法によって得られる本発明に係る
蛋白加水分解物は、重量平均分子量が１，０００〜４，
０００であり、分子量４，０００以下のペプチドの割合
が７５％以上であって、ｐＨ２〜１０の領域内の水並び
に５０％エタノール水溶液に透明に溶解する小麦蛋白加
水分解物である。

【００３０】

【作用】本発明に係る小麦蛋白加水分解物の透明溶解性
は、上記エンド型の蛋白加水分解酵素の組み合わせによ
り得られる該小麦蛋白加水分解物の分子量分布に起因し
ている。図１は後述する実施例８によって得た小麦蛋白
加水分解物の０．１％水溶液を、ゲル濾過法によって測
定した分子量分布のチャートである。このものは図１に
示すとおり、重量平均分子量が１，０００〜４，０００
で、分子量４，０００以下のペプチドの割合が７５％以
上である。

【００３１】本発明に係る小麦蛋白加水分解物の分子量
分布は、図１に示される固有のものであり、５℃下にお
ける蛋白加水分解物の水溶液の透明性及び室温下におけ
る５０％エタノール水溶液の透明性が、従来の小麦蛋白
加水分解物とは明らかに異なるものである。

【００３２】本発明に係る小麦蛋白加水分解物の良好な
溶解性は、第一に、エンド型酵素の組み合わせ、即ち、
アスパルティックタイププロテイナーゼの酵素とメタロ
タイププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及
びシステインタイププロテイナーゼから選ばれる酵素が
共存することによる複数酵素の基質特異性に基づいてお
り、第二に、単一なエンド型酵素処理である前掲各公報
に記載されている小麦蛋白加水分解物とは分子量分布を
異にしており、分子量４，０００以下のペプチドを７５
％以上含有し、かつ、重量平均分子量が１，０００〜
４，０００であることによって、広いｐＨ域の水や室温
以下０℃〜１５℃の低温域の冷水並びに５０％エタノー
ル水溶液も透明に溶解して、安定に保つ。

【００３３】なお、本発明における分子量分布は、ゲル
濾過法、Ａｓａｈｉｐａｋ ＧＳ−５２０カラム（旭化
成社製）を用いて、分子量既知の物質（リボヌクレアー
ゼＡ、アプロチニン、ブラジキニン）を分子量マーカー
として検量線を作成し、その検量線をもとに重量平均分
子量を算出したものである。溶離液には０．１％トリフ
ルオロ酢酸を含む４０％アセトニトリル溶液を用い、２
２０ｎｍの吸光度を測定した。分析は分子量マーカーの
リボヌクレアーゼＡが９．２８分に溶出する流速で行っ
た。

【００３４】本発明に係る小麦蛋白加水分解物は、重量
平均分子量が１，０００〜４，０００で、分子量４，０
００以下のペプチドが７５％以上であることが必要であ
る。分子量４，０００以下のペプチドが７５％未満また
は分子量４，０００以上のペプチドが２５％以上では高
分子量帯が増加し、透明性に大きな影響を及ぼす。即
ち、ｐＨ２〜１０の範囲の水及び室温以下０℃〜１５℃
の低温域の冷水並びに５０％エタノール水溶液に透明に
溶解せず、また、安定に保つことができない。また、分
子量が１，０００以下のペプチドは化粧料に期待される
小麦蛋白質の特性が失われてしまい好ましくない。

【００３５】本発明に係る小麦蛋白加水分解物を含有す
る化粧水などの皮膚用化粧料は、肌に塗布することによ
ってベタつきのない、しっとりとした潤いのある感触が
得られ、またシャンプーなどの毛髪用化粧料に使用する
と泡沫の感触を改善し指通りがよく、洗髪中の髪同士の
きしみを抑え、乾燥後は毛髪に良好なすべり感と自然な
光沢性を与える。また、本発明の優れた特性のため化粧
料に止まらず飲料、食品などの処方に際して沈降抑制の
ための増粘剤などを必要とせず、処方のｐＨも自在に調
節でき、冬期間や寒冷地または冷蔵中でも満足出来る製
品の作成が容易となる。

【００３６】

【実施例】次に比較例と実施例とによって本発明をより
具体的に説明する。

【００３７】比較例１ 粉末状小麦グルテンをｎ−ヘキサンによって脱脂し、脱
脂グルテン８０ｇを希塩酸水溶液に徐々に分散してグル
テン分散液を調整した。これにペプシン〔ペプシンＦ：
商品名、天野製薬社製〕０．４ｇを添加し、４０℃でｐ
Ｈ２．５に保って５時間反応を行った。反応後分散液を
７０℃で３０分間加熱し、水酸化ナトリウム水溶液でｐ
Ｈ５．０に調整し遠心（５，０００ｇ×２５分間）し、
上澄液を濾過助剤を用いて濾過し、さらに孔径０．４５
μｍのメンブランフィルターに通して濾過した。得られ
た濾液を凍結乾燥して精製物を得た。ここに得られた小
麦蛋白加水分解物は、特開昭６２−５３９０９号公報の
実施例３に記載されるものに相当する。なお、ペプシン
は、アスパルティックタイププロテイナーゼのみが作用
する。

【００３８】比較例２ 粉末状小麦グルテン１００ｇを０．１Ｎ−ＮａＯＨ４．
５Ｌに徐々に分散しグルテン分散液を調製した。これに
アルカリプロテアーゼ（Ｓｉｇｍａ社製）０．１ｇを添
加し、４０℃ｐＨ１２．０で６時間反応を行った。反応
後分解液を８０℃で２０分間加熱し、冷却後塩酸にてｐ
Ｈ５．０に調整して遠心（５，０００×５分間）し、上
澄液を濾過助剤を用いて濾過した。得られた濾液を分子
量１万の濾過膜を用いて限外濾過を行い、透過液を凍結
乾燥して精製物を得た。ここに得られた小麦蛋白加水分
解物は、特開昭６３−２５３０１２号公報の実施例１に
記載されるものに相当する。なお、アルカリプロテアー
ゼはセリンタイププロテイナーゼが主要酵素として作用
する。

【００３９】比較例３ 粉末状小麦グルテン１０７ｇを０．０２Ｎ−クエン酸水
溶液７００ｍｌに徐々に分散しグルテン分散液を調整し
た。これに酸性プロテイナーゼ〔プロテアーゼアマノ
Ｍ：天野製薬社製〕０．１６ｇを添加し、４５℃、ｐＨ
４．０で５時間反応を行った。反応後分解液のｐＨを
５．０に調整し、８０℃で３０分間加熱して遠心（５，
０００×２０分間）し、上澄液を濾過助剤を用いて濾過
した。濾液を孔径０．４５μｍのメンブランフィルター
に通して濾過し、凍結乾燥して精製物を得た。ここに得
られた小麦蛋白加水分解物は、特開平５−９２１号公報
の参考例１に記載されるものに相当する。なお、ｐＨ
４．０においてアマノＭはアスパルティックタイププロ
テイナーゼとして作用する。

【００４０】実施例１〜７ ◎ アスパルティックタイププロテイナーゼとメタロタ
イププロテイナーゼの組み合わせ酵素による小麦蛋白質
分解物の製造法；粉末状小麦グルテン１００ｇを希塩酸
溶液７００ｇ中に分散させ、ｐＨ４．５の小麦蛋白分散
液を調製した。これにＰＤ酵素（盛進製薬社製：アスパ
ルティックタイププロテイナーゼとして８０，０００Ｕ
／ｇ、メタロタイププロテイナーゼ２，０００Ｕ／ｇ）
を500, 438, 375, 250, 125, 63, 0 mg 、及びサーモリ
シン（生化学工業社製：メタロタイププロテイナーゼと
して２０，０００Ｕ／ｇ）0, 1.8, 3.5, 7.0, 10.5, 1
2.3, 14.0ｍｇを表１に示す如く組み合わせて加え（活
性比率として、アスパルティックタイププロテイナー
ゼ：メタロタイププロテイナーゼ＝１００：３〜８）、
１５〜３０時間反応させた。反応後、５０００ｒｐｍに
て１０分間遠心分離して未分解物を除き、上澄液を９０
℃で１０分間加熱して酵素を失活させた。冷却後パーラ
イト（商品名：トプコパーライト、東興パーライト工業
社製）２０ｇ及び珪藻土（商品名：ラジオライト、昭和
化学社製）１０ｇを加えて撹拌して濾過し、得られた濾
液を０．４５μｍのメンブランフィルターにて濾過し
た。この濾液を噴霧乾燥して小麦蛋白加水分解物の粉末
を得た。

【００４１】

【表１】

【００４２】上記実施例において得た各小麦蛋白加水分
解物の冷水（５℃）並びに５０％エタノール水溶液（２
０℃）への溶解性の評価結果を表２に示す。

【表２】

【００４３】試験例１ 小麦蛋白加水分解物水溶液のｐＨ変化による透明溶解性
の比較試験；比較例１、２及び３で得られた各小麦蛋白
加水分解物並びに代表的なエンド型酵素の組み合せの例
として実施例４で得られた小麦蛋白加水分解物とを用い
て、各１％水溶液を調製し、それぞれ、６Ｎ塩酸または
６Ｎ水酸化ナトリウム液を撹拌しながら滴下してｐＨを
２〜１０まで０．５ずつ変化させ１３点、合計５２点の
水溶液を調製した。

【００４４】それぞれのｐＨにおける２０℃下、１時間
後の６６０ｎｍにおける水溶液の透過率を濁度の指標と
して測定し、図２に示した。図２より、本発明に係る小
麦蛋白加水分解物は、比較例１、２および３の分解方法
による小麦蛋白加水分解物よりも広範なｐＨ域において
透明性に優れ、特に中性付近で使用されることの多い化
粧料には最適であることが確認できる。また試験後、実
施例４の水溶液を５℃の低温下における保存においても
透明性を保つことが確認できる。

【００４５】試験例２ 小麦蛋白加水分解物の冷水中での透明溶解性の比較試
験；比較例１、２、３および実施例４で得られた小麦蛋
白加水分解物を、それぞれ１％から１０％まで濃度を変
えて純水に溶解し、５℃で１時間保った後、７℃下６６
０ｎｍにおける水溶液の透過率を濁度の指標として測定
し、図３に示した。図３より、本発明の小麦蛋白加水分
解物は、比較例１、２および３の分解方法による小麦蛋
白加水分解物に比べて５〜１０％の高濃度域においても
冷水中での溶解性が優れ、また、実施例４の小麦蛋白加
水分解物を用いて実施例１２に従い透明化粧水を作製
し、これを５℃下で保存すると長期において安定に透明
性を示し、冷所での保存も可能であることが確認でき
る。

【００４６】試験例３ 小麦蛋白加水分解物の５０％アルコール水溶液での透明
溶解性の比較試験；比較例１、２、３および実施例４で
得られた各小麦蛋白加水分解物を、それぞれ１％から１
０％まで濃度を変えて５０％アルコール水溶液に溶解し
２０℃下、６６０ｎｍにおける水溶液の透過率を濁度の
指標として測定し、図４に示した。図４より、本発明の
小麦蛋白加水分解物は、他の比較例１、２および３の分
解方法による小麦蛋白加水分解物に比べて５〜１０％の
高濃度域においても５０％アルコール水溶液に対する溶
解性がすぐれ、エタノールを含有する事の多い透明ロー
ションなどの化粧料にも安定的に配合できることが示さ
れた。

【００４７】実施例８ ◎アスパルティックタイププロテイナーゼとセリンタイ
ププロテイナーゼの組み合せ酵素による小麦蛋白加水分
解物の製造法；小麦蛋白（生グルテン、水分含量：約６
７％）２７０ｇを希塩酸水溶液５３０ｇ中に徐々に分散
させて、ｐＨ４．５の小麦蛋白分散液を調製した。これ
にＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属由来プロテアーゼ〔プロテ
アーゼＡ「アマノ」：商品名、天野製薬社製、アスパル
ティックタイププロテイナーゼ２５７，０００Ｕ／ｇ、
セリンタイププロテイナーゼ１１，０００Ｕ／ｇ〕１６
０ｍｇを加えて、４５℃で２４時間反応させた。反応
後、濾過液を９０℃で１０分間加熱してプロテアーゼを
失活させた。冷後、パーライト〔トプコパーライト：商
品名、東興パーライト工業社製〕２７ｇ、活性炭〔タケ
コール：商品名、武田薬品工業社製〕１０ｇ、ケイソウ
土〔ラジオライト：商品名、昭和化学社製〕５ｇを加え
て撹拌して濾過、得られた濾液を噴霧乾燥して小麦蛋白
加水分解物の粉末４０．２ｇを得た。ここに得た小麦蛋
白加水分解物の分子量分布を図１に示した。また、ここ
に得た小麦蛋白加水分解物の重量平均分子量は２，３４
０であった。

【００４８】実施例９ ◎アスパルティックタイププロテイナーゼとメタロタイ
ププロテイナーゼ及びシステインタイププロテイナーゼ
の組み合せ酵素による小麦蛋白加水分解物の製造法；粉
末状グルテン１００ｇを希塩酸溶液７００ｇ中に分散さ
せ、ｐＨ４．５の小麦蛋白分散液を調製した。これに実
施例１〜７で使用したＰＤ酵素２５０ｍｇ及びブロメラ
インＦ（商品名：天野製薬社製、システインタイププロ
テイナーゼとして１７５，０００Ｕ／ｇ）を１１．０ｍ
ｇを加えて（活性比率としてアスパルティックタイププ
ロテイナーゼ：メタロタイププロテイナーゼ：システイ
ンタイププロテイナーゼ＝１００：２．５：９．５）、
４５℃にて２４時間反応させた。以下、実施例１〜７と
同様に操作して小麦蛋白加水分解物を得た。この溶解性
の試験結果を表３に示す。

【００４９】実施例１０ ◎実施例９の組み合せにおいてシステインタイププロテ
イナーゼ量が多い酵素による小麦蛋白加水分解物の製造
法；実施例９と同様に小麦蛋白分散液を調製し、ＰＤ酵
素２５０ｍｇ及びブロメラインＦ２５．７ｍｇを加えて
（活性比率としてアスパルティックタイププロテイナー
ゼ：メタロタイププロテイナーゼ：システインタイププ
ロテイナーゼ＝１００：２．５：２２．５）、４５℃に
て２４時間反応させた。以下、実施例１〜７と同様に操
作して小麦蛋白加水分解物を得た。この溶解性の試験結
果を表３に示す。

【００５０】実施例１１ アスパルティックタイププロテイナーゼと、メタロタイ
ププロテイナーゼ及びセリンタイププロテイナーゼとの
組み合せ酵素による小麦蛋白加水分解物の作製方法；粉
末状グルテン１００ｇを希塩酸溶液７００ｇ中に分散さ
せ、ｐＨ４．５の小麦蛋白分散液を調製した。これにモ
ルシンＦ（商品名：盛進製薬社製、アスパルティックタ
イププロテイナーゼとして１６０，０００Ｕ／ｇ）を１
２５ｍｇ及びプロテアーゼＮ（商品名：天野製薬社製、
アスパルティックタイププロテイナーゼとして５，００
０Ｕ／ｇ、メタロタイププロテイナーゼとして５，００
０Ｕ／ｇ、及びセリンタイププロテイナーゼとして３
０，０００Ｕ／ｇ）を４０ｍｇを加えて（活性比率とし
て、アスパルティックタイププロテイナーゼ：メタロタ
イププロテイナーゼ及びセリンタイププロテイナーゼ＝
１００：６．９）、４５℃にて２４時間反応させた。以
下、実施例１〜７と同様に操作して小麦蛋白加水分解物
を得た。この溶解性の試験結果を表３に示す。

【００５１】

【表３】

【００５２】実施例１２ 透明化粧水の調製；実施例３で得た小麦蛋白加水分解物
を下記に示す処方に従って配合した透明化粧水を調製し
た。 透明化粧水の処方： 小麦蛋白加水分解物 ０．４重量％ １，３−ブチレングリコール ４．０重量％ メチルパラベン ０．１重量％ エタノール ４．０重量％ 精製水 ９１．５重量％ ─────────────────────── １００．０重量％ 調製法：エタノールにメチルパラベンを溶解し、１，３
−ブチレングリコール、精製水を加えて撹拌混合し、小
麦蛋白加水分解物を加えてよく撹拌する。クエン酸、ク
エン酸ナトリウムでｐＨを調整して仕上げる。 上記の処方で調整した透明化粧水は無色透明で室内保存
では長期間安定であり肌に使用すると、ベトつきがな
く、肌にしっとりとした感触と、はりを与えた。

【００５３】実施例１３ 透明液状ヘアーシャンプーの調製；実施例８で得た小麦
蛋白加水分解物を下記に示す処方のように配合した透明
液状ヘアーシャンプーを調製した。 透明液状ヘアーシャンプーの処方： 小麦蛋白加水分解物 ０．４重量％ Ｎ−ヤシ油脂肪酸アシル−Ｌ−グルタミン酸 トリエタノールアミン（３０％水溶液） ４０．０重量％ ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン （３０％水溶液） ４．０重量％ ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド ８．０重量％ メチルパラベン ０．２重量％ エデト酸四ナトリウム ０．２重量％ 精製水 ４７．２重量％ ───────────────────────────── １００．０重量％ 調製法：小麦蛋白加水分解物以外の原料を計量、混合
し、８０℃に加温して撹拌溶解する。５０℃に冷却して
小麦蛋白加水分解物と必要であれば香料を添加し、撹拌
して溶解、３０℃まで冷却する。 上記の処方で調製した透明液状シャンプーは室温下長期
間安定であり、洗髪に使用すると、泡が滑らかで指通り
がよく、かつ乾燥後は櫛通りがよく自然な光沢を与え
た。

【００５４】

【発明の効果】本発明に係る小麦蛋白加水分解物は、ペ
プチドの重量平均分子量が、１，０００〜４，０００
で、分子量４，０００以下のペプチドの割合が７５％以
上という特定の分子量分布を有していることに起因し
て、その溶液の透明安定性が優れている。

【００５５】本発明に係る小麦蛋白加水分解物は、その
水溶液が２〜１０のｐＨの領域内の水及び室温以下の低
温域の冷水並びに５０％エタノール水溶液にも透明に溶
解でき、かつ、その透明性を安定に保つため、透明性化
粧料の処方中に沈降抑制のための増粘剤などを使用せず
に冬期または寒冷地にも適する処方を容易に配合でき、
またその処方のｐＨも自在に調節できる。従って、天然
蛋白質の性質を保持し、皮膚や頭髪に穏やかな透明性化
粧料の提供が可能である。また該加水分解物を含有する
皮膚用化粧料は肌に塗布することによってしっとりとし
た潤いのある感触が得られ、また毛髪用化粧料では毛髪
に良好なすべり感と自然な光沢性を与える。

【００５６】なお、本発明に係る小麦蛋白加水分解物は
化粧料や医薬部外品に留まらず、透明性が期待される食
品用途などにも広範囲に応用が可能である。

【００５７】また、本発明に係る小麦蛋白加水分解物の
製造方法は、エンド型の蛋白分解酵素がアスパルティッ
クタイププロテイナーゼと、メタロタイププロテイナー
ゼ、セリンタイププロテイナーゼまたはシステインタイ
ププロテイナーゼ或いはそれらの組み合わせで小麦蛋白
質を処理することにより、濁りや沈澱を惹起する要因と
なる高分子量のペプチドを著しく減少させるものである
から、濾過後の長時間の凝集沈降工程、複数回の濾過工
程および一旦濾過したのちに限外濾過膜処理などの分子
量分別処理を必要とせずに、単純な工程で目的とする特
定の分子量をもった小麦蛋白加水分解物を製造すること
ができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】 実施例８で得られた小麦蛋白加水分解物の分
子量分布を示す図である。

【図２】 試験例１による小麦蛋白加水分解物水溶液の
ｐＨ変化による透明溶解性の比較試験の結果である。

【図３】 試験例２による小麦蛋白加水分解物の冷水へ
の透明溶解性の比較試験の結果である。

【図４】 試験例３による小麦蛋白加水分解物の５０％
アルコール水溶液での透明溶解性の比較試験の結果であ
る。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ２種以上のエンド型蛋白加水分解酵素を
   組み合せて用いて酸性下において小麦蛋白質を加水分解
   して得られる重量平均分子量が１，０００〜４，０００
   であり、分子量４，０００以下のペプチドの割合が７５
   ％以上であって、ｐＨ２〜１０の領域内の水並びに５０
   ％エタノール水溶液に透明に溶解する小麦蛋白加水分解
   物。
2. 【請求項２】 ２種以上のエンド型蛋白加水分解酵素を
   組み合せて用いて酸性下において小麦蛋白質を加水分解
   することを特徴とする請求項１記載の小麦蛋白加水分解
   物の製造法。
3. 【請求項３】 エンド型蛋白加水分解酵素として、アス
   パルティックタイププロテイナーゼとメタロタイププロ
   テイナーゼ、セリンタイププロテイナーゼ及びシステイ
   ンタイププロテイナーゼから選ばれる１種又は２種以上
   とを組み合せて用いる請求項２記載の小麦蛋白加水分解
   物の製造法。
4. 【請求項４】 分解ｐＨにおける酵素活性比率が、アス
   パルティックタイププロテイナーゼ１００部に対してメ
   タロタイププロテイナーゼ、セリンタイププロテイナー
   ゼ及びシステインタイププロテイナーゼから選ばれる１
   種又は２種以上のプロテイナーゼ１〜１５部である請求
   項３記載の小麦蛋白加水分解物の製造法。
5. 【請求項５】 加水分解時のｐＨ値が３．０〜５．０で
   ある請求項２乃至請求項４記載のいずれかに記載の小麦
   蛋白加水分解物の製造法。
6. 【請求項６】 請求項１記載の小麦蛋白加水分解物を含
   有する透明性化粧料。