JPH0786118B2 - 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 - Google Patents
新規糖タンパク複合体およびその製造方法Info
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- JPH0786118B2 JPH0786118B2 JP3090002A JP9000291A JPH0786118B2 JP H0786118 B2 JPH0786118 B2 JP H0786118B2 JP 3090002 A JP3090002 A JP 3090002A JP 9000291 A JP9000291 A JP 9000291A JP H0786118 B2 JPH0786118 B2 JP H0786118B2
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- JP
- Japan
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- glycoprotein complex
- chromatography
- chlorella
- cvs
- antitumor
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、クロレラ属の単細胞
緑藻が藻体外に産生する糖タンパク複合体に関し、特に
は抗腫瘍作用を有する糖タンパク複合体に係る。
緑藻が藻体外に産生する糖タンパク複合体に関し、特に
は抗腫瘍作用を有する糖タンパク複合体に係る。
【０００２】
【従来の技術】従来、抗腫瘍作用を示すタンパク質ある
いは多糖として、キノコや細菌由来のものが知られてい
る。これらはいずれも、生体の腫瘍に対する防御機能を
高めることにより抗腫瘍作用を示すことが見出されてい
る。
いは多糖として、キノコや細菌由来のものが知られてい
る。これらはいずれも、生体の腫瘍に対する防御機能を
高めることにより抗腫瘍作用を示すことが見出されてい
る。
【０００３】一方、クロレラ属の単細胞緑藻（以下、ク
ロレラと記載することがある）などの緑藻については、
分子量が12万であり、数種類の糖で構成されている抗腫
瘍糖タンパク質の抽出・分離が報告されている（特開昭
61-69728号公報）。この物質は、アミラーゼを用いた加
水分解処理によって抗腫瘍作用が増強され、直接的殺細
胞作用を示す。しかしながら、この物質は細胞内物質で
あるため多様な成分を含み、その上藻体外に分泌されな
いので分画精製および大量採取が困難であった。
ロレラと記載することがある）などの緑藻については、
分子量が12万であり、数種類の糖で構成されている抗腫
瘍糖タンパク質の抽出・分離が報告されている（特開昭
61-69728号公報）。この物質は、アミラーゼを用いた加
水分解処理によって抗腫瘍作用が増強され、直接的殺細
胞作用を示す。しかしながら、この物質は細胞内物質で
あるため多様な成分を含み、その上藻体外に分泌されな
いので分画精製および大量採取が困難であった。
【０００４】クロレラが藻体外に産生する物質として
は、粘質多糖（特公昭61-96992号公報）やMoore,B.G.、
Tischer,R.G.の多糖類（Science 、145 ：586-587 、19
64）などが知られているが、これらの物質に抗腫瘍作用
は認められていない。
は、粘質多糖（特公昭61-96992号公報）やMoore,B.G.、
Tischer,R.G.の多糖類（Science 、145 ：586-587 、19
64）などが知られているが、これらの物質に抗腫瘍作用
は認められていない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】上述のように、従来、
クロレラが多糖類を藻体外に産生することは知られてい
るが、これらの物質には抗腫瘍作用は認められていな
い。また、クロレラが藻体外に産生する糖タンパク複合
体も知られていない。
クロレラが多糖類を藻体外に産生することは知られてい
るが、これらの物質には抗腫瘍作用は認められていな
い。また、クロレラが藻体外に産生する糖タンパク複合
体も知られていない。
【０００６】この発明は、クロレラ属の単細胞緑藻が藻
体外に産生し、かつ抗腫瘍作用を有する新規糖タンパク
複合体、およびその製造方法を提供することを目的とす
る。
体外に産生し、かつ抗腫瘍作用を有する新規糖タンパク
複合体、およびその製造方法を提供することを目的とす
る。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記事情
に鑑み、鋭意研究の結果、クロレラが培養液中に産生す
る、抗腫瘍作用を有する新規の糖タンパク複合体を見出
した。
に鑑み、鋭意研究の結果、クロレラが培養液中に産生す
る、抗腫瘍作用を有する新規の糖タンパク複合体を見出
した。
【０００８】この発明による糖タンパク複合体は、クロ
レラ属の単細胞緑藻が藻体外に産生する糖タンパク複合
体であって、構成糖として50％以上のガラクトースを含
有する多糖類とタンパク質とを含み、該多糖類の含有率
が50ないし70％、該タンパク質の含有率が30ないし50
％、および平均分子量が20万であることを特徴とする。
レラ属の単細胞緑藻が藻体外に産生する糖タンパク複合
体であって、構成糖として50％以上のガラクトースを含
有する多糖類とタンパク質とを含み、該多糖類の含有率
が50ないし70％、該タンパク質の含有率が30ないし50
％、および平均分子量が20万であることを特徴とする。
【０００９】以下、この発明による糖タンパク複合体の
製造方法について説明する。
製造方法について説明する。
【００１０】クロレラの培養法としては、独立栄養性
（Autotrophic ）、従属栄養性（Heterotrophic ）もし
くは混合栄養性（Mixotrophic ）のいずれの方法を用い
てもよいが、効率を考慮すると従属栄養条件下もしくは
混合栄養条件下で培養することが好ましい。培養の際に
は、クロレラ以外の微生物が混入しないように、各機器
類、培養液等の滅菌および取扱いには十分注意する必要
がある。
（Autotrophic ）、従属栄養性（Heterotrophic ）もし
くは混合栄養性（Mixotrophic ）のいずれの方法を用い
てもよいが、効率を考慮すると従属栄養条件下もしくは
混合栄養条件下で培養することが好ましい。培養の際に
は、クロレラ以外の微生物が混入しないように、各機器
類、培養液等の滅菌および取扱いには十分注意する必要
がある。
【００１１】培養は、まず、寒天斜面培地で保存してい
た種株の小規模培養を坂口フラスコを用いて行なう。続
いて、一般的なクロレラの液体培養用培地を用いて、徐
々にスケールアップしながら数日ないし数週間培養す
る。得られたクロレラ培養液は遠心分離機にかけて、目
的とする糖タンパク複合体を含有する上清（ＣＶＳと略
す）とクロレラ藻体とに分離する。
た種株の小規模培養を坂口フラスコを用いて行なう。続
いて、一般的なクロレラの液体培養用培地を用いて、徐
々にスケールアップしながら数日ないし数週間培養す
る。得られたクロレラ培養液は遠心分離機にかけて、目
的とする糖タンパク複合体を含有する上清（ＣＶＳと略
す）とクロレラ藻体とに分離する。
【００１２】得られたＣＶＳから限外ろ過、透析もしく
はゲルろ過クロマトグラフィーにより高分子成分（ＣＶ
ＳーＵと略す）を分離し、次いで疎水クロマトグラフィ
ー、陰イオンクロマトグラフィー、キレートクロマトグ
ラフィー等を用いて精製して目的とする糖タンパク複合
体を得る。
はゲルろ過クロマトグラフィーにより高分子成分（ＣＶ
ＳーＵと略す）を分離し、次いで疎水クロマトグラフィ
ー、陰イオンクロマトグラフィー、キレートクロマトグ
ラフィー等を用いて精製して目的とする糖タンパク複合
体を得る。
【００１３】得られた糖タンパク複合体は抗腫瘍作用を
有しており、抗腫瘍剤の主成分として使用することがで
きる。なお、培養液の上清であるＣＶＳおよび粗精製物
であるＣＶＳーＵもそのまま抗腫瘍剤として使用するこ
とが可能である。
有しており、抗腫瘍剤の主成分として使用することがで
きる。なお、培養液の上清であるＣＶＳおよび粗精製物
であるＣＶＳーＵもそのまま抗腫瘍剤として使用するこ
とが可能である。
【００１４】
【実施例】実施例１ クロレラの培養および糖タンパク
複合体の調製 寒天斜面培地（グルコース培地）で保存していた種株
（クロレラ工業社内番号CK-22 ）１白金耳を坂口フラス
コに接種し、４日間振とう培養した。その後、培養液を
10リットルのジャーファメンターに移し、３日間培養し
た。この培養液をさらに１トンタンクに移し、４日間培
養した後培養液を収穫した。ここで使用した培地の組成
および培養条件は以下の通りである。
複合体の調製 寒天斜面培地（グルコース培地）で保存していた種株
（クロレラ工業社内番号CK-22 ）１白金耳を坂口フラス
コに接種し、４日間振とう培養した。その後、培養液を
10リットルのジャーファメンターに移し、３日間培養し
た。この培養液をさらに１トンタンクに移し、４日間培
養した後培養液を収穫した。ここで使用した培地の組成
および培養条件は以下の通りである。
【００１５】培地組成（培地１リットル当り） グルコース 100 ｇ 尿素 7.5 ｇ リン酸ーカリウム 2.5 ｇ 硫酸マグネシウム・７水和物 2.5 ｇ 培養条件 pH 7.0 (NaOH にて調整） 37℃ 得られたクロレラ培養液を6000rpm で15分間遠心分離
し、目的とする糖タンパク複合体を含有する上清（ＣＶ
Ｓ）とクロレラ藻体とに分離した。このＣＶＳをＰＴＨ
Ｋ膜（Millipore Laboratory製、200 倍）を用いて限
外ろ過した後、凍結乾燥して高分子成分（ＣＶＳーＵ）
を得た。ＣＶＳーＵの収量は、培養液１リットル当り２
ないし３ｇであった。 実施例２ 糖タンパク複合体の精製 実施例１で得たＣＶＳーＵ 10ｇを、次に示す方法で活
性画分を確認しながら順次分画した。
し、目的とする糖タンパク複合体を含有する上清（ＣＶ
Ｓ）とクロレラ藻体とに分離した。このＣＶＳをＰＴＨ
Ｋ膜（Millipore Laboratory製、200 倍）を用いて限
外ろ過した後、凍結乾燥して高分子成分（ＣＶＳーＵ）
を得た。ＣＶＳーＵの収量は、培養液１リットル当り２
ないし３ｇであった。 実施例２ 糖タンパク複合体の精製 実施例１で得たＣＶＳーＵ 10ｇを、次に示す方法で活
性画分を確認しながら順次分画した。
【００１６】まず、ＣＶＳーＵをフェニルーセファロー
ス CL-4B （疎水クロマトグラフィー）にかけ、1/10Ｍ
リン酸緩衝液（pH 6.81）を用いて溶出して親水性の強
い最初の画分（Ｐ１と略す）を分取した。次いで、この
画分を陰イオン交換クロマトグラフィーにかけて２番目
の画分（Ｐ１Ｑ２と略す）を分取した。このＰ１Ｑ２
を、さらにキレートクロマトグラフィーにかけて分画
し、２番目に溶出した抗腫瘍活性の高い画分（Ｑ２Ｃ２
と略す）2.2 ｇを得た。
ス CL-4B （疎水クロマトグラフィー）にかけ、1/10Ｍ
リン酸緩衝液（pH 6.81）を用いて溶出して親水性の強
い最初の画分（Ｐ１と略す）を分取した。次いで、この
画分を陰イオン交換クロマトグラフィーにかけて２番目
の画分（Ｐ１Ｑ２と略す）を分取した。このＰ１Ｑ２
を、さらにキレートクロマトグラフィーにかけて分画
し、２番目に溶出した抗腫瘍活性の高い画分（Ｑ２Ｃ２
と略す）2.2 ｇを得た。
【００１７】得られた抗腫瘍活性成分（Ｑ２Ｃ２）の化
学的性状を調べるために以下の測定を行なった。
学的性状を調べるために以下の測定を行なった。
【００１８】（ａ）一般分析 糖、タンパク質、脂質、核酸、リン酸基および硫酸基に
ついて、それぞれの含有率を求めた。この際、全糖につ
いてはフェノール・硫酸法によりガラクトース換算で、
タンパク質についてはLowry 法によりウシ血清アルブミ
ン換算で、脂質についてはクロロホルム・メタノール抽
出による重量法およびガスクロマトグラフィーによる脂
肪酸の検出によって、リン酸基についてはBartlett法に
よって、および硫酸基についてはDodgson-Price の比濁
法によって求めた。結果を以下に示す。
ついて、それぞれの含有率を求めた。この際、全糖につ
いてはフェノール・硫酸法によりガラクトース換算で、
タンパク質についてはLowry 法によりウシ血清アルブミ
ン換算で、脂質についてはクロロホルム・メタノール抽
出による重量法およびガスクロマトグラフィーによる脂
肪酸の検出によって、リン酸基についてはBartlett法に
よって、および硫酸基についてはDodgson-Price の比濁
法によって求めた。結果を以下に示す。
【００１９】糖 51.8％ タンパク質 36.3％ 脂質 検出せず 核酸 検出せず リン酸基 検出せず 硫酸基 検出せず なお30サンプルについて同様の測定を行なったところ、
糖およびタンパク質の含有率はそれぞれ50〜70％、およ
び30〜50％の範囲内にあった。
糖およびタンパク質の含有率はそれぞれ50〜70％、およ
び30〜50％の範囲内にあった。
【００２０】（ｂ）糖組成 糖組成は、 2.5Ｍトリフルオロ酢酸を用いて 100℃で 7
時間加水分解した後、トリフルオロ酢酸誘導体としてガ
スクロマトグラフィーにより測定した。結果を以下に示
す。なお、含有率は（ｗ／ｗ）％で示した。
時間加水分解した後、トリフルオロ酢酸誘導体としてガ
スクロマトグラフィーにより測定した。結果を以下に示
す。なお、含有率は（ｗ／ｗ）％で示した。
【００２１】ラムノース 14.4 アラビノース 1.0 キシロース 0.8 マンノース 4.8 グルコース 痕跡 ガラクトース 76.9 グルコサミン 2.1 （ｃ）アミノ酸組成 アミノ酸組成は、0.05％β- メルカプトエタノール含有
6Ｎ塩酸を用いて 110℃で24時間加水分解した後、フェ
ニルチオヒダントイン誘導体として高速液体クロマトグ
ラフィーにより測定した。結果を以下に示す。なお、含
有率は（ｗ／ｗ）で示した。
6Ｎ塩酸を用いて 110℃で24時間加水分解した後、フェ
ニルチオヒダントイン誘導体として高速液体クロマトグ
ラフィーにより測定した。結果を以下に示す。なお、含
有率は（ｗ／ｗ）で示した。
【００２２】アスパラギン酸 11.1 グルタミン酸 13.7 セリン 6.2 スレオニン 6.9 ヒスチジン 6.2 グリシン 5.6 アラニン 9.5 チロシン 5.2 アルギニン 2.8 メチオニン 0.9 バリン 7.0 プロリン 5.4 フェニルアラニン 3.6 リジン 3.5 イソロイシン 3.0 ロイシン 9.5 （ｄ）赤外線吸収スペクトル Ｑ２Ｃ２の赤外線吸収スペクトルを図１に示す。
【００２３】（ｅ）元素分析 元素分析の結果は以下の通りである。
【００２４】Ｃ 41.1％ Ｈ 5.9％ Ｎ 4.4％ （ｆ）分子量 Ｑ２Ｃ２を、 0.1Ｍリン酸緩衝液（pH 6.81 ）を溶出液
として、Sephacryl S-300 HR（10×460 mm）を用いたゲ
ルろ過クロマトグラフィーにかけた。その結果を図２に
示す。図２において、破線は糖を、実線はタンパク質
（280 nmにおけるＵＶ吸収）をそれぞれ表わす。また、
種々のタンパク質（分子量マーカー）と溶出時間との関
係を図２の場合と同様にして測定し、結果を図３に示し
た。図２および図３より、Ｑ２Ｃ２の平均分子量は20万
であることが明らかになった。
として、Sephacryl S-300 HR（10×460 mm）を用いたゲ
ルろ過クロマトグラフィーにかけた。その結果を図２に
示す。図２において、破線は糖を、実線はタンパク質
（280 nmにおけるＵＶ吸収）をそれぞれ表わす。また、
種々のタンパク質（分子量マーカー）と溶出時間との関
係を図２の場合と同様にして測定し、結果を図３に示し
た。図２および図３より、Ｑ２Ｃ２の平均分子量は20万
であることが明らかになった。
【００２５】（ｇ）溶解性 Ｑ２Ｃ２は水に易溶である。 実施例３ 各成分の抗腫瘍効果 まず、ＣＤＦ１マウスに、Meth-A繊維肉種をマウス一匹
当り約 3×106 個細胞づつ皮下移植した。移植の 2日、
4日および 6日後に、一回にマウス一匹当り 5mg／ＰＢ
Ｓ（リン酸緩衝生理食塩水） 0.2mlのＣＶＳーＵを、静
脈内、皮下、腹腔内、もしくは腫瘍内注射により投与し
た。
当り約 3×106 個細胞づつ皮下移植した。移植の 2日、
4日および 6日後に、一回にマウス一匹当り 5mg／ＰＢ
Ｓ（リン酸緩衝生理食塩水） 0.2mlのＣＶＳーＵを、静
脈内、皮下、腹腔内、もしくは腫瘍内注射により投与し
た。
【００２６】飼育期間中にこれらのマウスの腫瘍サイズ
を測定してその体積を算出し、対照群との比較により抗
腫瘍作用を判定した。なお、各試料（ＣＶＳ−Ｕ）の滅
菌は沸騰水中で30分間行なった。また、対照群として
は、ＰＢＳのみを投与したマウスを用いた。その結果を
表１に示す。
を測定してその体積を算出し、対照群との比較により抗
腫瘍作用を判定した。なお、各試料（ＣＶＳ−Ｕ）の滅
菌は沸騰水中で30分間行なった。また、対照群として
は、ＰＢＳのみを投与したマウスを用いた。その結果を
表１に示す。
【００２７】
【表１】 表１に示すように、ＣＶＳ−Ｕは腫瘍内注射のみなら
ず、静脈内注射でも顕著な腫瘍抑制効果を示した。さら
に、腹腔内および皮下注射によっても明らかな抗腫瘍効
果が認められた。
ず、静脈内注射でも顕著な腫瘍抑制効果を示した。さら
に、腹腔内および皮下注射によっても明らかな抗腫瘍効
果が認められた。
【００２８】そこで、投与も行ない易く、最も安定して
強い効果の得られる腫瘍内注射の系について、さらに詳
細な検討を行なった。
強い効果の得られる腫瘍内注射の系について、さらに詳
細な検討を行なった。
【００２９】まず、ＣＤＦ１マウスに、Meth-A腫瘍を、
マウス一匹当り約 3×106 個細胞づつ皮下移植した。次
いで、移植の2日、 4日および 6日後に、一回に一匹当
り 1もしくは 5mg／ＰＢＳ 0.2mlのＣＶＳ−Ｕもしくは
Ｑ２Ｃ２、またはＰＢＳ（対照）を腫瘍内に投与した。
マウス一匹当り約 3×106 個細胞づつ皮下移植した。次
いで、移植の2日、 4日および 6日後に、一回に一匹当
り 1もしくは 5mg／ＰＢＳ 0.2mlのＣＶＳ−Ｕもしくは
Ｑ２Ｃ２、またはＰＢＳ（対照）を腫瘍内に投与した。
【００３０】飼育期間中にこれらのマウスの腫瘍サイズ
を測定してその体積を算出し、対照群との比較により抗
腫瘍効果を判定した。なお、各試料の滅菌は沸騰水中で
30分間行なった。その結果を表２に示す。
を測定してその体積を算出し、対照群との比較により抗
腫瘍効果を判定した。なお、各試料の滅菌は沸騰水中で
30分間行なった。その結果を表２に示す。
【００３１】
【表２】 表２に示すように、Ｑ２Ｃ２は原料であるＣＶＳ−Ｕと
比較して明らかに強い抗腫瘍効果を示し、腫瘍の増殖を
約90％抑制した。すなわち、抗腫瘍活性はＱ２Ｃ２に局
在し、Ｑ２Ｃ２は抗腫瘍糖タンパク複合体であると考え
ることができる。 実施例４ 生体内での腫瘍に対する防御機能の増強 ＣＶＳ−Ｕによる抗腫瘍効果が生体防御を介しているか
どうかを調べるために以下の実験を行なった。
比較して明らかに強い抗腫瘍効果を示し、腫瘍の増殖を
約90％抑制した。すなわち、抗腫瘍活性はＱ２Ｃ２に局
在し、Ｑ２Ｃ２は抗腫瘍糖タンパク複合体であると考え
ることができる。 実施例４ 生体内での腫瘍に対する防御機能の増強 ＣＶＳ−Ｕによる抗腫瘍効果が生体防御を介しているか
どうかを調べるために以下の実験を行なった。
【００３２】ＢＡＬＢ／Ｃマウスに Meth-A 腫瘍を移植
する系において、他の条件は実施例１と同様にして実験
を行なった。ＢＡＬＢ／Ｃマウスは、正常のnu／+ マウ
ス（胸腺を有するマウス）およびnu／nuマウス（胸腺が
欠損しているためにＴリンパ球が無く、正常な免疫反応
が行なわれないマウス）を用いた。結果を表３に示す。
なお、表中の数値は、腫瘍移植の14日後のものである。
する系において、他の条件は実施例１と同様にして実験
を行なった。ＢＡＬＢ／Ｃマウスは、正常のnu／+ マウ
ス（胸腺を有するマウス）およびnu／nuマウス（胸腺が
欠損しているためにＴリンパ球が無く、正常な免疫反応
が行なわれないマウス）を用いた。結果を表３に示す。
なお、表中の数値は、腫瘍移植の14日後のものである。
【００３３】
【表３】 表３に示すように、ＣＶＳーＵは正常なnu／+ マウスで
は約70％の腫瘍増殖抑制率を示したが、Ｔリンパ球がな
く生体防御機能が低下しているnu／nuマウスでは効果が
認められなかった。これより、ＣＶＳ−Ｕの抗腫瘍効果
には、生体防御反応、特にＴリンパ球が関与しているこ
とが判明した。
は約70％の腫瘍増殖抑制率を示したが、Ｔリンパ球がな
く生体防御機能が低下しているnu／nuマウスでは効果が
認められなかった。これより、ＣＶＳ−Ｕの抗腫瘍効果
には、生体防御反応、特にＴリンパ球が関与しているこ
とが判明した。
【００３４】
【発明の効果】以上のように、この発明による新規の糖
タンパク複合体は、クロレラ属の単細胞緑藻により藻体
外に産生されるものであって、従来公知の、クロレラが
産生する多糖類もしくは糖タンパク質とは著しく異なる
化学的組成、すなわちガラクトースに富む多糖類とタン
パク質とを含むものである。この糖タンパク複合体は、
藻体外、すなわち培養液中に産生されるので、分離精製
が容易であり、かつ生産性も非常に高く、安価に製造す
ることができる。加えて、クロレラの培養液は、従来廃
棄していたものであるので、産業廃棄物の有効利用にも
なる。
タンパク複合体は、クロレラ属の単細胞緑藻により藻体
外に産生されるものであって、従来公知の、クロレラが
産生する多糖類もしくは糖タンパク質とは著しく異なる
化学的組成、すなわちガラクトースに富む多糖類とタン
パク質とを含むものである。この糖タンパク複合体は、
藻体外、すなわち培養液中に産生されるので、分離精製
が容易であり、かつ生産性も非常に高く、安価に製造す
ることができる。加えて、クロレラの培養液は、従来廃
棄していたものであるので、産業廃棄物の有効利用にも
なる。
【００３５】さらに、この糖タンパク複合体は、生体の
防御機能を高めることによる、抗腫瘍作用を有してい
る。
防御機能を高めることによる、抗腫瘍作用を有してい
る。
【図１】この発明の糖タンパク複合体の赤外線吸収スペ
クトルを示す特性図。
クトルを示す特性図。
【図２】この発明の糖タンパク複合体のゲルろ過クロマ
トグラフィーのパターンを示す特性図。
トグラフィーのパターンを示す特性図。
【図３】ゲルろ過クロマトグラフィーにおける種々の分
子量のタンパク質と溶出時間との関係を示す相関図。
子量のタンパク質と溶出時間との関係を示す相関図。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 1/34 8318−4Ｈ Ｃ１２Ｐ 21/00 Ａ 9282−4Ｂ //(Ｃ１２Ｐ 21/00 Ｃ１２Ｒ 1:89）
Claims (4)
- 【請求項１】 クロレラ属の単細胞緑藻が藻体外に産生
する糖タンパク複合体であって、構成糖として50％以上
のガラクトースを含有する多糖類とタンパク質とを含
み、該多糖類の含有率が50ないし70％、該タンパク質の
含有率が30ないし50％、および平均分子量が20万である
糖タンパク複合体。 - 【請求項２】 請求項１記載の糖タンパク複合体を含有
する抗腫瘍剤。 - 【請求項３】 クロレラ属の単細胞緑藻を培養し、その
培養液を遠心して上清を分離し、この上清を精製して平
均分子量20万の画分を得ることを特徴とする請求項１記
載の糖タンパク複合体の製造方法。 - 【請求項４】 前記精製を、まず限外ろ過、透析もしく
はゲルろ過クロマトグラフィーにより行ない、次いで疎
水クロマトグラフィー、陰イオンクロマトグラフィーも
しくはキレートクロマトグラフィーにより行なうことを
特徴とする請求項３記載の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3090002A JPH0786118B2 (ja) | 1991-03-28 | 1991-03-28 | 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3090002A JPH0786118B2 (ja) | 1991-03-28 | 1991-03-28 | 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04300898A JPH04300898A (ja) | 1992-10-23 |
| JPH0786118B2 true JPH0786118B2 (ja) | 1995-09-20 |
Family
ID=13986400
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3090002A Expired - Lifetime JPH0786118B2 (ja) | 1991-03-28 | 1991-03-28 | 新規糖タンパク複合体およびその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0786118B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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1991
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