JPH07508498A

JPH07508498A - スタフィロコッカス・エピダーミジス関連ｉ及びｉｉ型表面抗原

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Publication number: JPH07508498A
Application number: JP5509411A
Authority: JP
Inventors: フアツトム，アリ・イブラーヒーム; ライト，デイー・クレイグ; カラカワ，ウオルター・ダブリユ
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1991-11-22
Filing date: 1992-11-20
Publication date: 1995-09-21
Anticipated expiration: 2023-05-21
Also published as: CA2123811C; JP4353789B2; US5866140A; AU3074792A; DK0648127T3; US5961975A; DE69233012D1; EP0648127A1; NO941877L; NO941877D0; JP2004155789A; JP4087896B2; AU681573B2; CA2123811A1; DE69233012T2; WO1993009811A1; EP0648127B1; FI942359A; FI111336B; ATE237351T1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ　（スタフィロコッカス・エビダーミジス）の特定の血清型、かかる血清型を同定する方法、及びかかる血清型に関連する表面抗原を使用して生成されるワクチンに係わる。本発明は更に、５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染したまたは感染に感受性のヒト及び動物の能動及び受動免疫方法にも係わる。

コアグラーゼ陰性の５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓによる感染は、入院患者における画面症の主因である。特に、正式には病原体とは考えられていないＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓが、この画面症の重要な要因であることが見い出された。

Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に起因する罹Φ率及び致死率は、医療補装具を必要とする、中音で特に高い。これは、かかる医療補装具、例えばカテーテル及び心臓弁に付着しコロニー形成し得る、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓによって生成される粘質層（ｓｌｉｍｅ）の結果であると考えられる。

粘質層がＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓによる感染の作用を担う要因であると考えられることから、異物への付着を仲介する表面の態様が注目されていた。細胞外粘質層は種々の研究者によって同定されており、この粘質層の生成を促進する培養条件が使用されている。

３、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓによって生成される粘質層に注目する上に、これまでの研究は主に、単離された細菌の限定数の特異株に向けられていた。Ｉｃｈｉｍａｎらは３種のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株を研究し、これらをＢｒａｉｎ　１ｌｅａｒｔ　Ｉｎｆｕｓｉｏｎ　（ＢＩＩＩ）ブロス中で培養した。しかしながら、これらの培養微生物由来の細胞表面多糖を用いてマウスを免疫しても、異種株に対する防御を与える上で有効ではなかった。単離された表面多糖の特性分析は血清学的不均一性を示した。Ｉｃｈｉｍａｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ａｐｐｌ、　Ｂａｃｔ、　５１　：　２２９−２４１　（１９８１）。

Ｉｃｈｉｍａｎによれば、臨床使用に有効なワクチンとなるためには、各感染性株を単離し、６株に対してワクチンを開発する必要がある。このことは、実用的見地からは容認し本発明の第１の目的は、限定数の優勢な血清型を再現可能に同定し得る、臨床Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ細胞を培養する方法を提供することである。

本発明の別の目的は、臨床Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に係わる優勢な血清型を同定及び特性分析することである。

本発明の更に別の目的は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する臨床使用に有効なワクチンを提供することである。

本発明の更に別の目的は、はとんどのＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ臨床病原株に対して有効なワクチンを提供することである。

本発明の更に別の目的は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒａ＋１ｄｉｓの臨床単離体に関連する表面抗原に特異的なポリクローナル抗血清を調製することである。

本発明の別の目的は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染を防御または治療するために使用し得る、臨床Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの優勢な血清型に関連する表面抗原に対するモノクローナル抗体を提供することである。

本発明の更に別の目的は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染を防御または治療するための過免疫ＩＶＩＧを提供することである。

本発明の上記目的及び他の目的は、実質的にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓのＩ型及び■型表面抗原の少なくとも一方からなる組成物によって達成される。該組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチンも提供される。免疫促進量の該ワクチンを被験者に投与し得る。この被験者は、前記ワクチンを投与するときに既にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染していてもよい。或いは、ワクチンを血漿ドナーに投与し、該ドナーを刺激して、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリンを産生させることもできる。次いで、免疫促進量の過免疫グロブリンを被験者に投与することができる。

更に本発明によって、実質的にＩ型または■型表現抗原に結合する抗体からなる組成物が提供される。好ましい実施態様においては、かかる抗体は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒＩＩｌｉｄｉｓに感染したヒト被験者由来の生物試料を与えるステップを含む方法によって入手されるものではない。本発明の抗体組成物はモノクローナル抗体組成物であり得る。免疫促進量の本発明抗体組成物、特にモノクローナル抗体組成物を被験者に投与し、Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染を予防または治療し得る。

■型表面抗原に特異的な抗体と■型表面抗原に特異的な抗体とを含む、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ培養物の血清型分類キ・ソトが提供される。好ましい実施態様においては、抗体はモノクローナル抗体である。更に、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体の血清型を分類する方法であって、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの単離体の細胞を、使用可能なホスフェートのレベルがｉｎ　ｖｉｖｏで使用可能なホスフェートのレベルをシミュレートしている環境において増殖させるステップと、細胞を、抗Ｉ型特異的抗体及び抗■型特異的抗体からなる群から選択される型特異的抗体と混合するステップと、細胞及び抗体の混合物の凝集反応をモニターするステップとからなる方法も提供される。

本発明の他の目的、構成及び利点は以下の詳細説明から明らかとなろう。しかしながら、詳細説明及び特定の実施例は、本発明の好ましい実施態様を示す一方で、単に例示のために与えるものであり、この詳細説明から、本発明の思想及び範囲内での種々の変更及び修正が当業者には明ら驚くべきことに、本発明によって、粘質層形成を最少限に抑えると共に莢膜多糖の産生を増強する条件下でＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓを培養すると、はとんどのＳ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ臨床症例に共通する限定数の血清型が同定され得ることが見い出された。特に８５％以上の臨床単離体が、それぞれＩ型及び■型と命名された２種の優勢な血清型の一方を示す。これら２種の血清型のちととなる表面抗原は酸性多糖類であり、アミノウロン酸及び他のアミノ糖を含むと判定された。かかる多糖類は負電荷を帯びており、逆免疫電気泳動においては正極に向かって移動する。またこれら多糖類は型特異的であって、免疫沈降は同種型の抗血清のみと単一バンドを生成する。

各血清型に関連する酸性多糖抗原は、本明細書に記載の方法に従って培養、血清型分類及び精製された実質的に純粋な形態のＳ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体から回収可能な量で得られる。特に、精製抗原は１％未満のタンパク質及び１％未満の核酸しか含まない。この点に関して“回収可能な”量とは、単離された酸性多糖の量が放射性標識より感度の低い方法、例えばイムノアッセイによって検出可能であり、酸性多糖自体を溶液に変えることを含む更なる操作を実施し得ることを意味する。

本発明の酸性多糖抗原の組成物は実質的に、それぞれＩ型及び■型に関連する酸性多糖抗原の一方または両方からなる。即ち、かかる組成物は、被験者にワクチンとして投与されたとき酸性多糖エピトープに対する免疫応答を妨害するいなかる物質をも含むべきではない。好ましい実施態様においては、該組成物は両方の本発明酸性多糖抗原を含む。

Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの血清型は、ｉｎ　ｖｉｖｏ条件を出来る限り綿密に模倣する培地上で増殖させた臨床単離体において同定し得る。特にこの培地は、使用可能なホスフェートの量が低い環境を与えるべきである。このような培地は細菌による粘質層生成を最少限に抑えると共に、莢膜多糖、特に本発明の酸性多糖の産生を増強する。このことは、Ｂ［ＩＩブロス及びトリプシン分解ダイズブロス（ｔｒｙｐｔｉｃ　ｓａｙ　ｂｒｏｔｈ。

ＴＳＰ）　、Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの研究に一般に使用されている培地、及び１ｍｌ当たり約２．５＋ｎｇのホスフェートを有するような使用可能なホスフェートの量が高いものとは明らかに対照的である。これらの培地は粘質層生成を増強する。ｉｎ　ｖｉｖ。

条件をシミュレートする培地上で増殖させた場合、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓは、ガラスまたはブスチックに付着しない表面抗原を産生ずる。本発明の好ましい培地は改良コロンビアブロス（Ｄｉｆｃｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｄｅｔｒｏｉｔ、　Ｍｉｃｈｉｇａｎ）であり、これは使用可能なホスフェートのレベルが７６μｇ／ｍｌである培地である。このような培地は、ヒトにおいてｉｎ　ｖｉｖｏで使用可能Ｍ　（ａｖａｉｌａｂｌｅ）’７ホスフエートレベル、即ち約２３〜４６μｇ／ｍｌをシミュレートする。Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓをこの培地で増殖させると、粘質層はわずかじかまたは全く生成されない。

多糖類は、コロンビアブロス上で増殖させたＳ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの臨床単離体の細胞及び上清の両方から抽出し得る。

最初のステップにおいて、培養物を遠心し、細胞及び上清をプールする。

多糖は、上清からは、上清を濃縮し、水で洗浄し、次いでそれを順次濃縮することにより抽出することができる。

最終沈殿物を水に溶解し、透析し、凍結乾燥する。

多糖を細胞から抽出するためには、まず細胞を酵素、即ちリゾスタフィンまたはりゾチームを用いて破壊し、次いて遠心する。上清を沈殿させ、次いで遠心する。上清を順次濃縮し、インキュベートし、次いで遠心によりペレット化する。ベレットを水に再溶解し、透析し、凍結乾燥する。

或いは、凍結乾燥した物質をトリクロロ酢酸を用いて抽出し、次いで遠心する。

エタノールを用いて順次沈殿し、蒸留水に溶解し、透析し、凍結乾燥する。

細胞及び上清から得た粗抽出物は更に処理する。各ケースで、凍結乾燥した物質をａ！衝液液中溶解し、同じ緩衝液で平衡化しておいた分離カラムに添加する。

カラムを添加用緩衝液で洗浄し、塩濃度勾配を用いて溶出する。抗原を含むフラクションをプールし、濃縮し、透析し、凍結乾燥する。より精製するために分離を繰り返してもよい。精製された多糖のサイズを適当なカラム上で決定し、次いでフラクションをプールし、濃縮し、透析し、凍結乾燥する。

Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの優勢な血清型は最初は、種々の地理的位置にある病院から得た１グループ約５〜１０のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体から２つの単離体を選択することにより同定される。ＭｃＣａｒｔｙ及びＬａｎｃｅｆ　１ｅｌｄに記載のごとき免疫方法を使用し、かかる２つの単離体の各々を用いてウサギ抗血清を生成する。Ｊ、　Ｅｘｐ、　Ｍｅｄ、　１０２：　１１− ２８　（１９５５）。無莢膜Ｓ。

ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉＳ株を用いて抗血清を吸収させる。必要であれば、他の血清型に対する活性を確実に排除するために更なる吸収を実施してもよい。

上記２つの抗血清を使用し、選択しなかった他のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体を分類する。最初に選択した２つの単離体が、他方の単離体と同一の反応パターンを示すことで明らかにされるように、同じ型のものであれば、最初に選択した２つの単離体と反応しなかった単離体グループから別の単離体を選択する。ウサギ抗血清をこの単離体に対して生成し、次いでそれを残りの単離体との反応性について試験する。このプロセスを、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する優勢な抗血清が同定されるまで継続する。驚くべきことに、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの臨床症例の約８５％が、Ｉ型及び■型と命名された２種の血清型の一方に分類されることが判明した。

次いで血清型を分類するために、同定された■型または■型巣離体からそれぞれ生成される全細胞ワクチンを用いて免疫したウサギから型特異的ポリクローナル抗体を製造する。代表的なＩ型及び■型Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ微生物は１９９１年１１月１９日ｆ寸けでＲｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍｄ、の＾ｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅ　Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏｎに寄託され、それぞれ受託番号５５２５４及び５５２５３が与えられている。単離体の血清型の分類は、Ｉ型及び■型巣離体に対する抗血清を使用し、Ｓ、　ａｕｒｅｕｓについて以前に記載されているような細菌凝集アッセイによって実施し得る。Ｎｅ１．１ｅｓ　ｅｔ　ａｌ、、Ｉｎｆｅｃｔ、Ｉｍｍｕｎ、　４６：　１４−１８　（１９８５）。

血清学的分類のためには、細胞をコロンビアブロス上でＣＯ□圧力下て増殖させる。細胞をプレートから取り出してリン酸緩衝塩水溶液（ＰＢＳ）中に移す。プロテアーゼを添加し、得られた幾分粘着質の墾濁液を破壊し、均一な細胞ｖｆＩＡ液を生成する。酵素破壊に次いで、凝集アッセイの準備として、多糖莢膜を細胞表面に固定する。固定した細胞を遠心し、新鮮なＰＢＳ中に再懸濁する。次いで、マイクロタイタープレート上または凝集試験においてはガラススライド上で、Ｉ型または■型に対する抗血清を用いて血清型を分類する。

Ｉ型及び■型の各血清型は、それに関連する特異的表面抗原を有する。かかる表面抗原はウサギ抗血清によって認識される。所定の割合の単離体は、Ｉ型及び■ 型巣離体に対して生成された抗血清のサブセットに関して分類不可能である。

Ｉ型及び■型に関連する表面抗原は、代わりにティコイル酸によって被覆されている無莢膜単離体には存在しない。

それらはオートクレーブ処理によって除去または破壊され得、特異的抗血清との反応性が喪失される。■型の表面抗原は■型の表面抗原と交差反応せず、逆も同様である。

ｉｎ　ｖｉｔｒｏ食作用アッセイにおいて、各表面抗原に対する抗体は、対応する血清型のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株に対する感染防御を与えることが示されている。これらの２種の血清型に基づくワクチンを使用し、臨床Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株の大部分に対して感染を防御することができる。

多糖自体は一般に、ヒト、特に耐性が低下した患者において弱いＴ細胞非依存性免疫原である。従って、多糖を通常はポリペプチドまたはタンパク質である免疫担体（ｉｍｍｕｎｏｃａｒｒｉｃｒ）に結合することが好ましく、このことは、弱い免疫原に対して免疫応答を誘導するようＴ細胞とＢ細胞とが効果的に相互作用するために重要である。能動免疫においても、受動免疫の有志者において高力価化の抗血清を調製することにおいても、免疫担体は免疫原性を増強する。

本発明の特に好ましい免疫担体としては、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａｅｒｏｇｉｎｏｓａ　Ｅｘ。

ｔｏｘｉｎ＾もしくはその誘導体、及び免疫担体として一般に使用される他のタンパク質が挙げられる。１型及び■型表面抗原の両方を同じ免疫担体に結合することもできる。

本発明は更に、かかる血清型を有する細菌に結合するまたはそれを中和する抗血清またはモノクローナル抗体（マウスまたはヒト）を生成するための、２種の血清型に対応する多糖の使用にも係わる。かかる抗体を生産する方法は、＾ｕｓｕｂｅ１．　ｅｔ　ａｌ、、　（編）、第１１章、　ＭＥＴＩＩＯＤＳ　ＯＦ　ＩＩＹＢＲＩＤＯＭＡＦＯＲＭ＾Ｔｌ０Ｎ　２５７−７１．　Ｂａｒｔａｌ＆ｌｌ１ｒｓｈａｕｔ　（編）　、　Ｉｌｕｍａｎａ　Ｐｒｃｓｓ、Ｃ１１ｆｔｏｎ、ＮＪ　（１９８８）　；　Ｖｉｔｃｔｔａ　ｅｔ　ａｌ、、Ｉｍｕｎｏｌ、Ｒｅｖ、　６２：　１５９−８３　（１９８２）　；及びＲａ５ｏ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｒｅｖ、　６２　：９３−１１７　（１９８２）に記載されている。

ポリクローナル抗体生産のための接種材料は一般には、多糖−免疫担体を、生理食塩水のごとき生理学上容認可能な希釈剤またはヒトに使用するのに適した他のアジュバント中に分散させて水性組成物を形成することにより調製される。免疫促進量の接種材料を哺乳動物に投与し、接種しだ哺乳動物を、多糖表面抗原が防御性の尻重型または抗■型抗体を誘導するのに十分な時間維持する。

抗体は、適当に選択及び精製した後の、一般に使用される種々の動物、例えばヤギ、霊長類、ロバ、ブタ、ウサギ、ウマ、ニワトリ、モルモット、ラットまたはマウス由来の抗血清調製物、及び場合によってはヒト抗血清を含み得る。

動物抗血清は、ホルマリンで死滅させたＩ型または■型Ｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓを動物に通常の方法で接種し、動物から採血し、血清を回収することにより誘導し得る。

このように誘導した抗体は良く知られた方法によって所望の程度にまで回収及び単離し得、例えばイムノアフィニティー　ロマトグラフィーでは、５ｅｐｈａｄｅｘ”のごときクロマドグラフィーカラム充填材に抗原を結合させ、このカラムに抗血清を通し、そうすると特異的抗体は保持されるが他の免疫グロブリン及び夾雑物は分離され、次いでカオトロピック物質を用いて溶出することにより精製抗体を回収し、更に必要によっては、例えば血液型抗体または他の非病原性種が結合されたカラムを通すことにより更に精製する。この方法は、問題の病原体に対する抗体力価を発した患者の血清から所望の抗体を単離する場合に好ましくなり得、このとき、表面抗原に結合することが可能な抗体の保持が保証される。それらは、Ｓ、　ｅｐｉｄｃｒｍｉｄｉｓに対する受動免疫用製剤に使用し得る。

モノクローナル抗体組成物は、検出可能な範囲内でただ１種の、Ｉ型または■型いずれかに関連する多糖表面抗原に効率的に結合することが可能な抗体結合部位を含む。モノクローナル形態の適当な抗体は、慣用のハイブリドーマ法を使用して作製し得る。

本発明のモノクローナル抗体組成物を製造するハイブリドーマを形成するためには、ミエローマまたは他の不死化細胞系を、本発明のポリペプチドを用いて過免疫した哺乳動物の末梢血、リンパ節または牌臓から得られるリンパ球と融合する。ミエローマ細胞系はリンパ球と同じ種に由来するのが好ましい。牌細胞は一般に、ポリエチレングリコール１５００を使用してミエローマ細胞に融合される。

融合ハイブリッドはＩＩＡＴに対する感受性によって選択される。本発明の抗体分子を分泌するハイブリドーマはＥＬＩＳＡを使用して同定し得る。

Ｂａ１ｂ／ｃマウス牌臓、ヒト末梢血、リンパ節または牌細胞は、ネズミまたはヒトハイブリドーマを作製する上で使用するのに好ましい材料である。本発明に使用するのに適したマウスミエローマとしてはヒポキサンチン−アミノプテリン −チミジン感受性（１１４Ｔ）細胞系が挙げられるが、好ましいミエローマはＰ３Ｘ６３−八ｇ８．６５３である。ヒトモノクローナル抗体生産に好ましい融合相手はＳ　１１　Ｍ　−Ｄ　３３、即ち＾ＴＣＣ。

Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍｄ、から名称ＣＩ？Ｌ１６６８で入手可能なヘテロミエローマである。

本発明のモノクローナル抗体組成物は、適当なポリペプチド特異性を有する抗体分子を分泌するハイブリドーマを含む栄養培地からなるモノクローナルハイブリドーマ培養を開始することにより製造し得る。培養物には、ハイブリドーマが抗体分子を培地中に分泌するのに十分な条件及び時間が維持される。次いで、抗体を含む培地を回収する。

抗体分子を良（知られた方法で更に単離することができる。

かかる組成物の製造に有効な培地は当分野において良く知られていると共に市販もされており、合成培地、近文系マウスなどが挙げられる。合成培地の例としては、４．５ｇ／ｌグルコース、２０ｍＭグルタミン及び２０％ウシ胎児血清を補充したダルベンコ最少必須培地が挙げられる。近文系マウスの例としてはＢａ１ｂ／ｃが挙げられる。

本発明における有用性に影響するのは主として抗体の抗原特異性であるが故に、種間融合のごときモノクローナル抗体組成物を製造する他の方法も考えられる。

感染個体から得られるヒトリンパ球をヒトミエローマ細胞系に融合してハイブリドーマを生成し、それを、Ｉ型及び■型表面抗原を認識する抗体の生産についてスクリーニングすることができる。この点に関しては、感染ヒト被験者由来の生物試料を使用しない方法がより好ましい。例えば、本明細書に記載のワクチンで免疫した被験者は、本発明の抗体組成物に適当に使用される個体源の役割を果たし得る。

特に好ましい実施言様においては、モノクローナル抗体は、Ｓ、　ａｕｒｅｕｓに対する型特異的モノクローナル抗体について記述されているのと同様の方法を使用し、Ｉ型及びＨ型表面抗原に対して生産される。精製モノクローナル抗体は、一群の臨床単離体を使用する細菌凝集アッセイによって特性分析される。

本発明に従って製造されるモノクローナル及びポリクローナル抗体組成物を使用し、Ｉ型または■型Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉＳ感染の予防または治療のために免疫応答を誘導し得る。

この点で、抗体調製物はポリクローナル組成物であり得る。

このようなポリクローナル組成物は、Ｉ型及び■型の両方に結合する抗体を含んでもよいし、２つの型の一方のみに結合する抗体を含んでもよい。ポリクローナル抗体組成物は、■型及び■型の両表面抗原を用いてチャレンジされ、刺激されて、Ｉ型及び■型の両表面抗原に対する特異的抗体を産生ずる動物由来の、好ましくはアフィニティー精製されたポリクローナル抗血清であり得る。別の方法は、■型表面抗原に対するモノクローナル抗体と■型表面抗原に対するモノクローナル抗体との混合物である“作製ポリクローナル（ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ　ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ）　’″混合物を使用することである。

両タイプのポリクローナル混合物において、多特異的（ｐｏｌｙｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体を相互に化学的に結合し、いずれかの表面抗原に結合し得る単−多特異的分子を形成することができる。このような結合を行う１つの方法は、例えば２種の抗体をペプシン消化し、還元切断してＦ　ａｂ’フラグメントの混合物を形成し、次いでジスルフィド結合を酸化によって回復し、元の抗原の各々に特異的なＦ　ａｂ’部分を有するハイブリッドフラグメントを含むＦ　（ａｂ’　）、フラグメントの混合物を生成することにより、二価Ｆ　（ａｂ“）２ハイブリツドフラグメントを作製することである。このようなハイブリッド抗体フラグメントを作製する方法は、Ｆｅｔｅａｎｕ、　ＬＡＢＥＬＥＤ　ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ　ＩＮ　ＢＩＯＬＯＧＹ　ＡＮＤ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　３２１−２３．　ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ　Ｉｎｔ’ｌ　Ｂｏｏｋ　Ｃｏ、　８９　（１９７８）　；　Ｎ１５ｏｎｏｆｆ、　ｅｔ　ａｌ、。

＾ｒｃｈ　Ｂｉｏｃｈｅｍ、Ｂｉｏｐｈｙｓ、　９３　：　４７０　（１９６１）　：及びＨａｍｍｅｒｌｉｎｇ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、ＥｘｐｏＭｅｄ、　１２８：　１４６１　（１９６８）　：及び米国特許第４．３３１．６４７号に記載されている。

本発明に従って製造される抗体組成物は、抗体全体、抗体フラグメント、またはサブフラグメントを含み得る。抗体は、任意のクラス、例えばＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡＳＩｇＤ。

ＩｇＥの全免疫グロブリン（ＩｇＧ）、二重表面抗原特異性を有するキメラ抗体もしくはハイブリッド抗体、またはハイブリッドフラグメントを含むフラグメント、例えばＦ（ａｂｏ）２、Ｆ　ａｂ’、Ｆａｂなどであり得、更に、任意の免疫グロブリンまたは任意の天然、合成、もしくは特異的抗原に結合して複合体を形成することにより抗体のように作用する遺伝子操作タンパク質を含む。特にＦａｂ分子は、遺伝子的に形質転換されたＥ、　ｃｏｌｉなどの宿主中で発現及び組立てし得る。先祖抗体を生成する被験者に等しいまたはそれを超える潜在的多様性を有するＦ　ａｂ’の集団を発現するために、λベクター系が使用可能である。ｌ１ｕｓｅ、　ｆ、Ｄ、、　ｅｔ　ａｌ、、　５ｃｉｅｎｃｅ　２４６　：　１２７５−８１　（１９８９）参照。

Ｉ型及び／または■型に関連する酸性多糖抗原は、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に抗戦する細胞性免疫応答及び／または１ｎｖｉｖｏ抗体産生を誘導するワクチンとして使用し得る組成物中の有効成分となり得る。但し、該組成物は該有効成分のための医薬的に容認可能な担体をも含む。この点で、医薬的に容認可能な担体は、不活性であるかまたはさもなければ医薬的に容認可能であると共に、ワクチン投与においてポリペプチド有効成分と相容性であるが故に、医薬を投与するためのビヒクルとして使用し得る材料である。適当な賦形剤に加え、医薬的に容認可能な担体は、希釈剤、アジュバント、抗酸化剤、保存剤及び可溶化剤といった慣用ワクチン添加剤を含み得る。

本発明によれば、このようなワクチンを、まだＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染していない被験者に投与し、該被験者において細菌の対応血清型に対する（体液性または細胞性）応答を誘導し得る。或いは、本発明のワクチンは、既にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染しているが、ワクチンに応答して産生される抗体が感染の更なる広がりを効果的に防止するのに十分に早い段階にある被験者に投与することもできる。

別の方法によれば、本発明のワクチンは、Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉＳに対する抗体を含む特異的ワクチンによるチャレンジに応答して産生されるグロブリン源（“過免疫グロブリン”）として作用する被験者に投与することができる。このように処置された被験者の血漿から慣用の血漿分画法によって過免疫グロブリンを得、これを、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する耐性を付与するためまたはこれを治療するために別の被験者に投与することができる。

哺乳動物において画面症を誘導するにはかなり多数の微生物が必要であったり、宿主の耐性を低下させるべく何らかの操作が必要である。しかしながら、１ｎｖｉｔｒｏ食作用はｉｎ　ｖｉｖｏ防御免疫の相関として研究し得る。このモデルにおいては、型特異的モノクローナル及びポリクローナル抗体のｉｎ　ｖｉｔｒｏでＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓをオプソニン化（ｏｐｓｏｎｉｚｅ）する能力が、Ｋｏｊｉｍａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、Ｉｎｆｅｃｔ　Ｄｉｓ、　１６２　：　４３５−５５１　（１９９０）及びＦａｔｔｏｍ、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｉｎｆｅｃｔ、Ｉｍｍｕｎ、　５８：　２３６７−２３７４　（１９９０）に記載の方法に従って測定される。！型及び■型ワクチンによって誘導される抗体は型特異的食作用を促進する。

以下、実施例によって本発明を更に説明する。

実施例１　：　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株の収集Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの臨床単離体を、種々の地理的位置にある病院から入手した。単離体は全て血液単離体であった。

単離体がＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓであることを確認した。はとんどのケースで、感染経緯と処置結果の概要、並びに生化学的同定及び抗菌物質感受性判定の結果が病院から与えられた。

実施例２　：　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株の培養単離体を、４％ＮａＣ１を補充したコロンビア寒天（Ｄｉｆｃｏ）プレート上で、３７°Ｃ，ＣＯ２下で増殖させた。単離したコロニーを取り出し、４％ＮａＣ１を補充したコロンビアブロス（Ｄｉｆｃｏ）を含む５００ｍ１フラスコに移した。３〜５時間増殖させた後、１．２リツトルのコロンビア塩ブロスを含む６つの２リソトルフエルンバツハフラスコをそれぞれ、５０ｍ１の出発物質と共にインキュベートした。フエルンバッハフラスコをＮｅｗ　Ｂｒｕｎｓｗｉｃ　ｋシェーカー上で３７℃で一晩増殖させた。１０．０００　ｇで３０分間遠心することにより細胞を回収し、上清及び細胞をプールした。

実施例３　：　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの優勢血清型の同定５〜１０のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体を種々の病院から入手し、実施例２に記載のごと（コンロンビアブロス中で増殖させ回収した。２つの単離体由来の細胞を１％ホルマリンを用いて固定した。ＭｃＣａｒｔｙ及びＬａｎｃｅｆｉｅｌｄ　（前出）の免疫方法を使用し、選択した単離体の各々に特異的なウサギ抗血清を生成した。無莢膜Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄ　ｓ株を用いて抗血清を吸収させた。必要であれば、他の血清型に対する活性を確実に除去するために、更に吸収を実施する。

２つの抗血清を使用し、選択しなかった他のＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ単離体を分類した。最初に選択した２つの単離体が、他方の単離体との同一の反応パターンによって示されるように、同じ型のものであったならば、最初に選択した２つの単離体と反応しなかった単離体のグループから別の単離体を選択した。この単離体に対してウサギ抗血清を生成し、次いでこのプロセスを、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒａ＋１ｄｉｓに対する２種の最も優勢な血清型が同定されるまで継続した。これらの２種の血清型は、臨床単離体の約８５％を占めた（実施例７の表１参照）。

実施例４：■型及び■型持異的ウサギ抗血清の調製精製酸性多糖抗原を、■型または■型のいずれかであると同定されたＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓから得、実施例２に記載のごとくコロンビアブロス中で増殖させ回収した。細胞を１％ホルマリンを用いて固定した。ＭｃＣａｒｔｙ及びＬａｎｃｅｆｉｅｌｄ（前出）の免疫方法を使用し、Ｉ型及び■型の各々に特異的なウサギ抗血清を生成した。

無莢膜Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ株を用いて抗血清を吸収させた。

上清を濃縮し、蒸留水で洗浄し、次いで、５〜ｌＱｍＭ　ＣａＣｌ２を補充した２５％エチルアルコールを用いて４℃で一晩６時間沈殿させた。遠心後、上清を５〜ｌｏｏ＋Ｍ　ＣａＣ１，を補充した７５％エチルアルコール中で沈殿させた。７５％沈殿物を蒸留水中に溶解し、蒸留水で一晩透析し、次いで凍結乾燥し細胞から。

細胞を酵素リゾスタフィンまたはりゾチームで破壊するかまたは５％トリクロロ酢酸を用いて４℃で２〜３日問抽出した。次いで細胞を１０．０００　ｇで３０分間遠心した。上清を５〜１０ｍＭ　ＣａＣ１゜を補充した２５％エチルアルコールを用Ｌ）で４°Ｃで一晩沈殿させた。遠心後、上清を５〜ＬＯｍＭ　ＣａＣｌ２を補充した７５％エチルアルコール中で沈殿させた。４℃で一晩インキユベートした後、沈殿物を１０．０００　ｇで３０分間遠心することによりベレット化し、蒸留水中に再び溶解し、蒸留水で一晩透析し、次いで凍結乾燥した。

実施例５で得た粗凍結乾燥抽出物を０．０５Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液ｐＨ６，０中に終ａ度５０〜１００ｍｇ／ｍｌとなるよう溶解した。粗抽出物に核酸及び／またはタンノくり質が高度（こ混入している場合、更に処理する前に、ＲＮＡ５ｅ、　ＤＮＡ５ｅ及び／またはプロテアーゼを用いて前処理してもよい。溶解した粗抽出物を、同じ緩衝液で平衡化しておいたＤＥＡＥセファロースカラムに約１０ｍｇ／ｍｌゲルで添加した。カラムを添加用緩衝液で、２０．６ｎｍにおける吸収が認められなくなるまで洗浄してから、カラムを、０．０５Ｍ酢酸すトリウム緩衝液ｐＨ６，０中のＯ〜０．３Ｍ　ＮａＣｌｆｉ度勾配を用いて溶出した。実施例４に従って調製した型特異的抗血清を使用する免疫沈降によって、抗原を含むフラクションを同定した。■型及びＵ型抗原は、既知の５ｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓアミノウロン酸ポリマーと同じモル濃度で溶出した。精製１型及び ■型抗原の酸加水分解も、それらがアミノウロン酸を含むことを示した。

抗原を含むフラクションをプールし、限外濾過＾ｍ１ｃｏｎ膜上で濃縮し、蒸留水で４回透析し、凍結乾燥した。抗原をより精製することが所望される場合はこのプロセスを繰り返した。精製多糖のサイズを、セファロース６Ｂカラムまたは５ｅｐｈａｃｒｙｌ　Ｓ−３００カラムのごときゲル濾過カラムにおいて決定した。抗原は、Ｓ、　ａｕｒｅｕｓ由来の５型及び８型抗原の莢膜抗原と同じ位置に溶出した。多糖フラクションをプールし、限外濾過Ａｍ１ｃｏｎ膜上で濃縮し、蒸留水で透析し、凍結乾燥した。この精製の結果、Ｉ型または■型抗原は実質的に純粋な形態となった。

精ｆｉＩ型及び■型抗原のタンパク質及び核酸分析から、いずれの抗原もタンパク質及び核酸を含まないことが明らかとなった。トリプンン加水分解からは、Ｉ型及び■型抗原はトリプシン耐性であることが明らかとなった。細胞を１００℃ で３０分間熱処理すると、表面抗原は選択的に除去され、ティコイル酸は除去されなかった。熱処理の前、細胞は抗ティコイル酸抗血清と反応しなかったが、熱処理後は細胞は反応した。

実施例７：臨床単離体の血清型分類実施例２に記載のごとくコロンビアブロス中またはコロンビア寒天プレート上で増殖させた臨床単離体を１％ホルマリンを用いて固定した。単離体を寒天プレート上で増殖させた場合は、まず細胞をプレートから掻き取り、ＰＢＳ中に懸濁させ、２０〜５０μｇ／＋＋１のプロテアーゼを補充した。細胞をコロンビアブロス中で増殖させた場合は、ＰＢＳ中に再懸濁させ、２０〜５０μｇ／ｍｌのプロテアーゼを補充した。細胞をＰＢＳで光学密度０５にまで希釈した。混合物を３７℃で１時間インキュベートし、次いで１％ホルマリンを用いて室温で一晩かけて固定した。細胞をＰＢＳで洗浄し、９６ウエルマイクロタイタープレート中またはガラススライド上でホルマリン固定細胞懸濁液を用いてためし凝集反応を実施した。

等容積の細胞と実施例４に従って調製した抗血清とを混合し、マイクロタイタープレート中で凝集させた。或いは、細胞と実施例４に従って調製した抗血清を等容積でガラススライド上で混合し、数分間回転させた。凝集の有無を評価した。

米国内各地から入手し確認済みの画面単離体の血清型分類を表１に示す。所定の割合の単離体は分類不可能であった（　ＮＴ）。

表１供給源　１型　■型　ＮＴ　合計ワシントンＤ、Ｃ，１６（４１％）　２１（５４％）２（５％）　３９（１００％）メリーランド　４（８％’）　２８（６２％）　１３（２９％）　４５（１００％）テネシー　０（０％）　１２（９２％）ｌ（８％）　１３（１００％）ロンドン　９（２３％）　２７（６９％）３（７％’Ｉ　３９（１００％）マサチューセッツ　１（１０％）　８（８０％）　１（１０％＞　１０（１００％）合計　３０（２０％）９６（６６％）　２０（１４％）　１４６（１００％）ＢＡＬＢ／ｃマウスをホルマリン固定細菌を用いて免疫した。

血清を得、実施例７に記載のごとき細菌凝集アッセイによって型特異的応答についてスクリーニングした。過免疫応答の証拠に、マウスは融合の３日前に免疫された。免疫マウス由来の牌細胞をＡＧ６５３細胞系もしくはＳＩＩＭ　Ｄ３３　（いずれも＾ＴＣＣ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、　Ｍｄ　から入手可能）由来の細胞またはかかる細胞系のクローンもしくはサブクローンに、Ｆｕｌｌｅｒｅｔ　ａｌ、、ＣＬＩＲＲＥＮＴ　ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ　ＩＮ　ＭＯＬＥＣＩＪＬＡＲＢＩＯＬＯＧＹ、ＮｅｗＹｏｒｋ：Ｊ、Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ　（１９８９）、　１１．３．２−１１．１１．４章に記載の方法を使用して融合した。ハイブリドーマを、ホルマリンで固定した全細菌または精製細胞表面成分のいずれかで被覆したマイクロタイタープレートを使用する、細菌凝集アッセイまたはＥＬＩＳＡによって型特異的抗体についてスクリーニングした。陽性ウェル由来の細胞を、限界希釈法によりクローニングした。ｍｇ量の抗体を腹水中に調製し、プロティンＡ１プロテインＧまたはＤＥＡＥセファロ−カラムクロマトグラフィーによって精製した。

実施例９　：　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ食作用アッセイ多形核好中球（ＰＭＮ）及び単球をヒト末梢血から調製した。ＰＭＮ及び単球を、５％熱失活化ウつ胎児血清を含むＰＲＭＩ　（Ｇｉｂｃｏ）または類似の細胞培地中に再懸濁した。コロンビアブロス中で増殖させたＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ細胞を洗浄し、試験抗体と一緒にＰＭＮまたは単球に加えた。３７℃で静か１こ回転しながらインキュベートした後、０．６０及び１２０分後に試料を取り出し、コロンビア塩寒天プレート上に塗り広げた。３７°Ｃで一晩インキユベトした後、コロニーの数を数えた。

補正書の写しく翻訳文）提出！（特許法第１８４条の７第１項）■、特許出願の表示　ＰＣＴ／ＵＳ　９２１０９７８４２、発明の名称　スタフィロコッカス・エビダーミジス関連■及び１１型表面抗原３、特許出願人住　所　アメリカ合衆国、メリーランド・２０８５２、ロックビル、ウィルキンス・アベニュー・１２２８０名称　ユニパックス・バイオロジクス・インコーホレイテッド（ほか２名）４、代　理　人　東京都新宿区新宿１丁目１番１４号　山１１Ｊビル（ほか２名）５　補正書の提出年月口　１９９３年３月２６日補正請求項［１９９３年３月２６日（９３，０３，２６）付けで国際事務局によって受理、原請求項１６及び１７は補正され、残りの請求項は補正されない（２頁）コ８、請求項１に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。

９　請求項２に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。

１０、被験者に、免疫促進量の請求項９に記載のワクチンを投与するステップを含む免疫療法。

１１、前記被験者が、前記ワクチンを投与するときには既にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染している請求項１０に記載の免疫療法。

１２、　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する免疫治療薬を製造する方法であって、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリンが産生されるよう、血漿ドナーを請求項９に記載のワクチンを用いて免疫するステップを含む方法。

１３、　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリ１４、被験者に、免疫促進量の請求項１３に記載の過免疫グロブリンを投与するステップを含む免疫療法。

１５、実質的に、請求項１に記載の表面抗原に結合する抗体からなる組成物。

１６　前記組成物がモノクローナル抗体組成物である請求項１５に記載の組成物。

１７、前記抗体が、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染したヒト被験者由来の生物試料を与えるステップを含む方法によって得られるのではない請求項１５に記載の組成物。

１８　被験者に、免疫促進量の請求項１５に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。

１９　被験者に、免疫促進量の請求項１６に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。

２０、Ｉ型表面抗原に特異的な抗体、及び■型表面抗原に特異的な抗体を含む、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ培養物の血清型分類キノ）・。

２１　前記抗体がモノクローナル抗体である請求項２０に記載の血清型分類キット。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）■、特許出願の表示　ＰＣＴ／ＵＳ　９２１０９７８４２、発明の名称　スタフィロコッカス・エビダーミジス関連Ｉ及び１１型表面抗原３、特許出願人住　所　アメリカ合衆国、メリーランド・２０８５２、ロックビル、ウィルキンス・アベニュー・＋２２８０名　称　ユニパックス・バイオロジクス・インコーホレイテッド（ほか２名）４、代　理　人　東京都新宿区新宿１丁目１番１４号　山田ビル５、補正書の提出年月ＥＪ　１９９３年１１１１３０６　添附ｎ類の目録請求の範囲ｌ　実質的にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの■型及び■型表面抗原の少な（とも一方からなる組成物。

２、前記表面抗原が免疫担体に結合されている請求項１に記載の組成物。

３、実質的に、請求項１に記載の両表面抗原からなる組成物。

４、各表面抗原が免疫担体に結合されている請求項３に記載の組成物。

５、両表面抗原が同じ免疫担体に結合されている請求項３に記載の組成物。

６、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの単離体の血清型を分類する方法であって、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの単離体の細胞を、使用可能なホスフェートのレベルがｉｎ　ｖｉｖｏで使用可能なホスフェートのレベルをシミュレートする環境で増殖させるステップ：前記細胞を、尻重型特異的抗体及び抗■型特異的抗体からなる群から選択される型特異的抗体と混合するステップ：及び前記細胞と抗体の混合物の凝集反応をモニターするステップからなる方法。

７　前記単離体をコロンビアブロス上で増殖させる請求項６に記載の方法。

８．請求項１に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。

９、請求項２に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。

１０　被験者に、免疫促進量の請求項９に記載のワクチンを投与するステップを含む免疫療法。

１１　前記被験者が、前記ワクチンを投与するときには既にＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染している請求項１０に記載の免疫療法。

１２　、　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する免疫治療薬を製造する方法であって、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリンが産生されるよう、血漿ドナーを請求項９に記載のワクチンを用いて免疫するステップを含む方法。

１３、　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリン。

１４、被験者に、免疫促進量の請求項１３に記載の過免疫グロブリンを投与するステップを含む免疫療法。

１６、前記組成物がモノクローナル抗体組成物である請求項１５に記載の組成物。

１７、前記抗体が、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染したヒト被験者由来の生物試料を与えるステップを含む方法によって得られるのではない請求項１６に記載の組成物。

１８、被験者に、免疫促進量の請求項１５に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。

１９、被験者に、免疫促進量の請求項１６に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。

２０．１型表面抗原に特異的な抗体；及び■型表面抗原に特異的な抗体を含む、Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ培養物の血清型分類キット。

２１、前記抗体がモノクローナル抗体である請求項２０に記載の血清型分類キット。

２２、前記細胞を型特異的抗体と混合するステップが、細胞を抗Ｉ型特異的抗体と混合するステップである請求項６に記載の方法。

２３、実質的にＡＴＣＣ５５２５４に特異的な抗体と反応するＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの表面抗原からなる請求項１に記載の組成物。

２４、前記抗体がモノクローナル抗体である請求項２４に記載の組成物。

２５、前記組成物が、ＡＴＣＣ５５２５４に対する抗血清と免疫沈降して単一バンドを生成する請求項１に記載の組成物。

２６、請求項２４に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。

２７、被験者に、免疫促進量の請求項２６に記載のワクチンを投与するステップを含む免疫療法。

２８　、　Ｓ、ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する免疫治療薬を製造する方法であって、Ｓ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリンが産生されるよう、血漿ドナーを請求項２６に記載のワクチンで免疫するステップを含む方法。

３０、被験者に、免疫促進量の請求項２９に記載の過免疫グロブリンを投与するステップを含む免疫療法。

３１、実質的にＡＴＣＣ５５２５３に特異的な抗体と反応するＳ、　ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの表面抗原からなる請求項１に記載の組成物。

３２、前記組成物が、＾ＴＣＣ５５２５３に対する抗血清と免疫沈降して単一バンドを生成する請求項３１に記載の組成物。

フロントページの続き（７２）発明者　ファットム、アリ・イブラーヒームアメリカ合衆国、メリーランド・２０８５２、ロックビル、ロアー・ドライブ・１７１０（７２）発明者　ライト、ディー・フレイブアメリカ合衆国、メリーランド・２０８７８、ゲイサーズバーグ、メイン・コープ・テラス・１４７４０（７２）発明者　カラカワ、ウオルター・ダブリュアメリカ合衆国、ペンシルバニア・１６８６５、プレイド・ドライブ・１１９

Claims

【特許請求の範囲】

１．実質的にＳ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓのＩ型及びＩＩ型表面抗原の少なくとも一方からなる組成物。
２．前記表面抗原が免疫担体に結合されている請求項１に記載の組成物。
３．実質的に、請求項１に記載の両表面抗原からなる組成物。
４．各表面抗原が免疫担体に結合されている請求項３に記載の組成物。
５．両表面抗原が同じ免疫担体に結合されている請求項３に記載の組成物。
６．Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの単離体の血清型を分類する方法であって、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの単離体の細胞を、使用可能なホスフェートのレベルがｉｎｖｉｖｏで使用可能なホスフェートのレベルをシミュレートする環境で増殖させるステップ；前記細胞を、抗１型特異的抗体及び抗ＩＩ型特異的抗体からなる群から選択される型特異的抗体と混合するステップ及び前記細胞と抗体の混合物の凝集反応をモニターするステップからなる方法。
７．前記単離体をコロンビアブロス上で増殖させる請求項６に記載の方法。
８．請求項１に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。
９．請求項２に記載の組成物と、無菌の、医薬的に容認可能な担体とを含むワクチン。
１０．被験者に、免疫促進量の請求項９に記載のワクチンを投与するステップを含む免疫療法。
１１．前記被験者が、前記ワクチンを投与するときには既にＳ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染している請求項１０に記載の免疫療法。
１２．Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ感染に対する免疫治療薬を製造する方法であって、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリンが産生されるよう、血漿ドナーを請求項９に記載のワクチンを用いて免疫するステップを含む方法。
１３．Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗体を含む過免疫グロブリン。
１４．被験者に、免疫促進量の請求項１３に記載の過免疫グロブリンを投与するステップを含む免疫療法。
１５．実質的に、請求項１に記載の表面抗原に結合する抗体からなる組成物。
１６．前記組成物がモノクローナル抗体組成物である請求項１４に記載の組成物。
１７．前記抗体が、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに感染したヒト被験者由来の生物試料を与えるステップを含む方法によって得られるのではない請求項１４に記載の組成物。
１８．被験者に、免疫促進量の請求項１５に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。
１９．被験者に、免疫促進量の請求項１６に記載の組成物を投与するステップを含む免疫療法。
２０．Ｉ型表面抗原に特異的な抗体；及びＩＩ型表面抗原に特異的な抗体を含む、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ培養物の血清型分類キット。
２１．前記抗体がモノクローナル抗体である請求項２０に記載の血清型分類キット。