JPH07508273A - 神経ペプチドｙ拮抗剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔発明の名称〕 神経ペプチドＹ拮抗剤 〔本発明の背景〕 本発明は、改善された神経ペプチドＹ拮抗作用を示すペプチド、このようなペプ チドを含有する薬学的組成物及び動物及びヒトの医薬におけるこれらの使用に関 する。

〔背景技術〕

神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）は、３６残基のアミド化されたペプチドであり、１９ ８２年に脳組織から初めて単離された（Ｔａｔｅｍｏｔｏ　Ｋ、、Ｃａｒｌｑｕ ｉｓｔ　Ｍ、ａｎｄ　Ｍｕｔｔ　Ｖ、。

Ｎａｔｕｒｅ　２９６；　６５９−６６０．　１９８２）　ｏ　このペプチドは 、哺乳類の中枢神経系及び末梢交感神経系の全体に広く分布している。後者にお いて、該ペプチドはノルエピネフリンと共に局在化している。ＮＰＹの末梢投与 は、多くの血管床における血管収縮を誘導し、また、ノルエピネフリン及び他の 血管作動性物質によって誘導される血管収縮を強める。ＮＰＹが直接の効果を有 さない血管において、ＮＰＹは、食欲刺激剤として脳中で機能し、プロラクチン 成長ホルモン及びロイチナイジングホルモン（ｌｅｕｔｉｎｉｚｉｎｇ　ｈｏｒ ｍｏｎｅ）の放出を促進する。ＮＰＹは、中枢及び末梢神経に位置するレセプタ ーと結合することによってその効果を引き出すことが知られてイル。ＥＰＯ３５ ５７９４及びＤＥ３８１１１９３には、この上うなＮＰＹレセプターに結合し、 ＮＰＹ活性の拮抗剤として作用しうるＮＰＹ誘導体が開示されている。

〔発明の開示〕

今回、効果的なＮＰＹ拮抗剤となるペプチドのクラスが見出された。これらの拮 抗剤は、内因性のＮＰＹの作用を抑制し、従って、循環器系疾患、高血圧及び高 血圧性クリーゼ、（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅ　ｃｒｉｓｉｓ）　、血管痙摩、 大脳若しくは冠状血管痙彎（ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｏｒ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ｖａ ｓｏｓｐａｓｍ）　（例えば発作）食事障害（ｅａｔｉｎｇ　ｄｉｓｏｒｄｅｒ ｓ）　、Ｉｆ病、並びに緑内障にも有効である。このような化合物は、特にアン ギオテンシン変換酵素（ＡＧＥ）阻害剤、及びカルシウム拮抗剤と組み合わせて 使用することに適している。

本発明は、式（Ｉ）のペプチド又はそれらの多量体若しくはそれらの塩を提供す る。

Ｒ−Ｘ　ＡｒｇＸ６ＡｒｇＸ５−Ｒ２（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ、１）　（１）ここ で、Ｒ１＝ＸＩＸ２Ｘ３Ｘ４ 但し、 Ｘ＝１１ｅ若しくはＴｒｙ■ｌｅ、又はｄｅｓＮＨ２ＴｙｒＩ　ＩｅＸ２＝Ａｓ ｎ、　Ａｓｐ、　Ｃｙｓ、　Ｄｐｒ、　Ｇｌｕ若しくはＧｕｙＸ３＝Ｌｅｕ、Ｐ ｒｏ又は３，４−テ゛ヒト°口Ｐｒ。

Ｘ４”’Ａｉｂ、　Ａｓｐ、　Ｃｙｓ、　Ｄｐｒ、　Ｇｌｕ％Ｇｌｙ、　Ｉｌｅ 。

Ｏｒｎ、Ｔｙｒ又はＯ−メチルＴｈｒ Ｘ５＝Ｐｈｅ、Ｔｙｒ又は［０−（２，６−シ゛クロロへ゛ンジル）−Ｔｙｒコ Ｘ６＝Ｐｈｅ又はＬｅｕ ここで、 本発明に従った多量体は、２量体若しくは３量体を含有する。このような多量体 は、Ｇｌｙ残基を含有するペプチドが、以下のものから選択される基によってα 位で橋架けした場合ここで、ｎは先に定義したとおりである。

この他に、このような多量体は、ペプチドがラクタムで橋架けした場合にも生じ うる。このような多量体は１以上、好ましくは２つのこのような橋かけを含有し うる。

本発明のペプチドは２量体の形態で使用されることが好ましい。

本発明のペプチド若しくは多量体の塩も本発明の範囲内に含まれる。このような 塩は、当分骨で周知の任意の方法に従って調製される。

本発明のペプチド若しくは多量体の薬学的に許容しうる塩も、本発明の範囲に含 まれる。薬学的に許容しうる適切な塩には、ペプチドが十分に塩基性である場合 、即ち１以上の塩基性残基を含有する場合には酸付加塩が含まれる。

本発明のペプチドの薬学的に許容しうる適切な酸付加塩は、例えば塩酸、臭素酸 、硫酸若しくはリン酸のような無機酸と、又は例えば酢酸、クエン酸、マレイン 酸、フマル酸、琥珀酸、酒石酸若しくはトリフルオロ酢酸のような有機酸と形成 されうる。

Ｘ２の好ましい例には、Ｃｙｓ及びＧｕｌが含まれる。

Ｘ３の好ましい例には、Ｐｒｏが含まれる。

Ｘ４の好ましい例には、Ｃｙｓ、　Ｄｐｒ及びＯｒｎが含まれる。

Ｘ５の好ましい例には、Ｔｙｒが含まれる。

Ｘ６の好ましい例には、Ｌｅｕが含まれる。

Ｒ２の好ましい例には、−（ｃＨ２）ｎＮＨ２（但し、ｎは０である。）が含ま れる。

式（Ｉ）のペプチド、又はこれらの多量体若しくはこれらの塩の好ましいサブク ラスは、Ｘ５がＴｙｒであり、Ｘ６がＬｅｕであり、Ｒ及びＲ２が先に定義した 意味を有するものであす る。

アミノ酸残基に対する以下の略語を本明細書全体にわたって使用する。

２−メチルアラニンに対してはＡｉｂ、アルギニンに対してはＡｒｇ、アスパラ ギンに対してはＡｓｎ、アスパラギン酸に対してはＡｓｐ、システィンに対して はＣｙｓ、ジアミノプロピオン酸に対してはＤｐｒ、グルタミン酸に対してはＧ ｌｕ、グリシンに対してはＧｌｙ、イソロイシンに封子はＩＩｅ、ロイシンに対 してはＬｅｕ、オルニチンに対してはＯｒｎ、フェニルアラニンに対してはＰｈ ｅ、プロリンに対してはＰｒｏ、スレオニンに対してはＴｈｒ、及びチロシンに 対してはＴｙｒ。

本発明は、特に以下のペプチド又はこれらの薬学的に許容しうる塩に関する。

１１ｅＧ　ｌｕＰｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（ ２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：２）Ｉ　ｌｅＡｓｐＰｒｏＯｒ ｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：３）Ｉ　ｌｅＧ　ｌｕＰｒｏＤ ｐｒＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙ＋”　ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：４）１１ｅＡｓｐＰｒｏＤｐｒ ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏニア）Ｉ　ｌｅＤｐｒＰｒｏＡｓ ｐＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：５）及びＩ　１ｅＣｙｓＰｒｏ ＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，２’）。

（４，４’）−ジスルフィド２量体（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：６）Ｉ　Ｉ　ｅＣｙ ｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（４，２’）−ジスルフィド２量体（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：６）。

より特別には、本発明は以下のペプチド又はこれらの薬学的に許容しうる塩に関 する。

Ｉ　ｌｅＧ　１ｕＰｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状 （２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：２）Ｉ　ｌｅＡｓｐＰｒｏＯｒ ｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：３）１１ｅＧｌｕＰｒｏＤｐｒ ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：４）１１ｅＡｓｐＰｒｏＤｐｒ ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、　Ｎｏニア）及びＩ　ＩｅＤｐｒＰｒ ｏＡｓｐＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３，環状（２，４’）。

（２’、４）−ジアミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：５）。

本発明に従えば、循環器系疾患、高血圧、高血圧性クリーゼ、血管痙彎、大脳若 しくは冠状血管痙彎（例えば発作）食事障害、欝病、並びに緑内障を治療するた めの方法であって、治療的に効果があり、非毒性な量の本発明に従ったペプチド 又は多量体又は塩を哺乳類、例えばヒトに投与することを具備した方法も提供さ れる。更に、上記の何れか−の症状の治療のための医薬の製造における本発明に 従ったペプチド又は多量体又は塩の使用も提供する。

Ｘ３力吐ｅｕである本発明に従った式（１）のペプチドは、作動薬としての特性 も示す。これらの作動薬は、内因性のＮＰＹの作用に類似しているか、又は該作 用を高め、従って、ＮＰＹレセプターの活性化を要求する症状、例えば血管収縮 のような症状の治療に有効である。特に、これらは、高血圧、血管拡張、敗血症 によって起こるショック、リニチス（ｒｈ−ｙｎｉｔｉｓ）　、嚢包性線維症、 不安の治療、及び腎毒性に対する保護に有効である。

本発明の更なる特徴に従えば、薬学的に許容しうる希釈剤若しくは担体と混合さ れた本発明のペプチド又はこれらの多量体又はこれらの薬学的に許容しうる塩を 含有する薬学的組成物が提供される。

該組成物は、経口使用に適した形態、例えば錠剤、カプセル、水溶液若しくは油 状溶液、懸濁液若しくはエマルジョン；鼻腔的使用に適した形態、例えば嗅剤、 鼻内噴霧若しくは点鼻液；眼に使用しうる形態、例えば点眼液；膣若しくは直腸 に使用しうる形態、例えば生薬；吸入による投与に適した形態、例えば微細に粉 砕した粉末若しくは液体エアロゾル；又は非経口的な使用に適した形態（静脈内 、皮下、筋肉内、血管内又は注入を含む。）、例えば無菌の水性若しくは油性溶 液若しくは懸濁液でありうる。

一般に、上記組成物は、従来の賦形剤を用いて従来の方法で調製されうる。しか し、経口投与のための組成物の場合は、胃の酵素による消化作用からペプチド活 性成分を保護するために該組成物にコーティングを施すことが適切でありうる。

本発明の経口投与組成物は、単位投与量、例えば２．５から５００ｍｇ、好まし くは１から２００ｍｇのペプチドをそれぞれ単位投与量で含有する錠剤若しくは カプセルである。また、非経口投与に適した組成物は、ｌ　ｒｎｌの溶液当な１ ７０．５から１００ｍｇのペプチド、好ましくは１−の溶液当たり１から１０ｍ １のペプチドを含有するものである。

非経口組成物は、好ましくは、等張食塩水溶液若しくは必要であればｐＨ５から ９に緩衝された等張デキストロース溶液である。この他には、非経口組成物は徐 放しうるようにデザインされたものでありうる。この場合の単位投与量当たりの ポリペプチドの量は、一般に従来の注射可能な製剤を使用するときに要求される 量よりも多い。好ましい徐放製剤は、例えば連続的に放出する製剤、例えばＵＳ ４７６７６２８及びＵＳ５００４６０２　（これらはそのまま本明細書の一部を なす。）に開示されたタイプの製剤である。好ましい徐放性の非経口製剤には、 単位投与量当たり１０から１００ｍｇのポリペプチドが含有される。他の好まし い徐放製剤は、生体で分解され、生体に適合した共重合体を使用したマイクロカ プセル化されたポリペプチドである。

これらの製剤は、好ましくは静脈内で投与されるが、投与は、皮下、筋肉内、又 は皮肉注射によっても行われうる。

経皮投与に適した医薬は、必要に応じて緩衝された、一般式の化合物、又はこれ らの薬学的に許容しうる塩の水溶液の形態を取りうるか、又は、受動的拡散又は 電気的に補助された輸送、例えばイオン浸透療法（例えば、Ｐ’ｈａｒｍａｃｅ −ｕｔ　１ｃａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　３　（６）　、３１８　（１９８６）参 照）によって運搬されうる。

本発明の組成物は、通常、−日の経口投与量が０．１ｍｇ／ｋｇ体重から５０ｍ ｇ／ｋｇ体重、最も好ましくは０．５ｍｇ／ｋｇから１０　ｍｇ／　ｋｇであり 、−日の経皮経口投与量が、２０マイクログラム／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ、最 も好ましくは５０マイクログラム／ｋｇから２ｍｇ／ｋｇであるように投与され るであろう。

本発明のペプチドは、アナローブ化合物の合成に適用しうる ペプチド化学の分野で周知の何れの手段によっても調製されうる。従って、例え ば本発明のペプチドは、“’５ｏｌｉｄ　ＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔ ｈｅｓｉｓ　（固相ペプチド合成）　”　ｂｙ　Ｓｔｅｗａｒｔａｎｄ　Ｙｏｕ ｎｇ　（ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　Ｐｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、ｌ１ｌｉｎｏｉｓ、１９８４）、”Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ　ｏ ｆＰｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　（ペプチド合成の原理）　”　（Ｐｕ ｂｌｉ−ｓｈｅｄ　ｂｙ　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、　Ｂｅｒｌｉｎ、 　１９８４）。

”Ｐｒａｃｔｉｃｅ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　（ペプチド 合成の実際）　”　（Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｙ　Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌ ａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ。

１９８４）及び町ｈｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ａ　Ｔｅｔｒａｐｅｐｔｉ ｄｅ　（テトラペプチドの合成）　”　（Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、、８３ 　２１４９（１９６３））に開示された手順に類似の手順で得ることができる。

本発明の多量体はこれ以後に説明される方法又はペプチド化学の分野で周知の任 意の方法によって得ることかできる。

本発明の塩は、当分野で周知の何れの手順でも調製することができる。

ペプチドの合成と精製 ペプチドは、Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ　Ｍｏｄｅｌ　４３０Ａ　 ペプチド合成機を用い、”５ｏｌｉｄ　Ｐｈａｓｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔ ｈｅｓｉｓ１、Ｔｈｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ　ｏｆ　ａ　Ｔｅｔｒａｐｅｐｔｉ ｄｅ　（固相ペプチド合成１．テトラペプチドの合成）　”Ｊ、Ａｍ、Ｃｈｅｍ 、Ｓｏｃ、。

８３２１４９　（１９６３）においてＲ，Ｂ、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄによって開 示された固相法の改良変形法を用いて合成した。

ＭＢＨＡ樹脂はルイスビル（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ）　、　Ｋｙのアドバンスド ケムテック（Ａｄｖａｎｃｅｄ　ＣｈｅｍＬｅｃｈ）から入手した。

ＢＯＰ試薬は、セントハイアシンセ、ケベック、カナダのリケローバイオテクノ ロジー（Ｒｉｃｈｅｌｉｅｕ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉ−ｅｓ　ｉｎ　５ｉ Ｈｙａｃｉｎｔｈｅ、Ｑｕｅｂｅｃ、Ｃａｎａｄａ）より入手した。

大多数の、使用されなりｏｃ及びＦｍｏｃで保護された天然のアミノ酸は、トー ランス、ＣＡのバーケムケミカル社（ｔｈｅ　Ｂａｃｈｅｍ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ 　Ｃｏ、ｏｆ　Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）から入手した。こららのアミノ酸には 、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ　（４ＭｅＢｚｌ）、Ｂｏｃ−Ｐｈｅ、　Ｂｏｃｌ（ｉｓ（Ｃ ＢＺ）、Ｂｏｃ−１１ｅ、１／２Ｈ２０−Ｂｏｃ−Ｌｅｕ、Ｈ２Ｏ、Ｂｏｃ−Ａ ｓｎ　（Ｘａｎ）、Ｂｏｃ−Ｎｌｅ、　Ｂｏｃ−Ｐｒｏ％Ｂｏｃ・Ａｒｇ（Ｔｏ ｓ）、Ｂｏｃ４’ｒｐ、Ｂｏｃ−Ｔｙｒ　（２−Ｂｒ−ＣＢＺ）、Ｆｍｏｃ　− Ｃｙｓ　（Ｔｒｔ）、Ｆｍｏｃ−ｌｉｅ、　Ｆｍｏｃ−ＬｅｕＳＦｍｏｃｏＡｓ ｎ　（Ｔｒｔ）、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏｌ　Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ　（ＰＭＣ）、Ｆｍｏ ｃ−Ｔｙｒ　（Ｏｔ−７’チル）、及びＦｍｏｃ−Ｔｙｒ　（０−２，６−シ゛ クロロへ゛ンシ゛ル）が含まれる。カリフォルニアのバーケムからは、Ｂｏｃ　 ６−アミノカプロン酸（Ａｈａ）及びＢｏｃ−３，４−デヒドロプロリンも供給 された。

Ｏ−メチルホモセリン（ＭｅＯＴｈｒ）は、ギリシャのバイオヘラスＳ、　Ａ、 （Ｂｉｏｈｅｌｌａｓ　Ｓ、Ａ、ｏｆ　Ｇｒｅｅｃｅ）によって供給された。Ｂ ｏｃ−アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）及びパラヒドロキシフェニルプロピオン酸（［ （ｄｅ−ＮＨｚ）ｙ］は、ランカンコマ、ＮＹ、のフル力ケミカルコーポレーシ ョン（Ｆｌｕｋａ　Ｃｈｅｍ−ｉｃａｌ　Ｃｏｒｐ、ｏｆ　Ｒｏｎｋｏｎｋｏｍ ａ、Ｎ、Ｙ、）から入手した。

Ｂｏｃ−ベンゾチェニルアラニン（ＢｚＴｈ　ｉＡ　Ｉａ）は、オールバ二一、 ＯＲのシンセテツク（ＳｙｎｔｈｅＴｅｃｈ　ｏｆ　Ａｌｂａｎｙ、ＯＲ）から 入手した。ミルウオーキー、ＷＳのアルドリッチケミカルカンパニー（Ａｌｄｒ ｉｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、ｏｆ　Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ。

ＷＳ）から１−メチルイミダゾール、フェニルプロピオン酸［（ｄｅ−ＮＨｚ） 　Ｆｌ、及び３，４−ジクロロフェニル酢酸が供給された。Ｂｏｃ−Ａｓｐ　（ ＯＦｍ）及びｌ−ナフチル−３−アラニンは、フィラデルフィア、ＰＡのバーケ ムバイオサイエンスＩｎｃ。

（Ｂａｃｈｅｍ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ　Ｉｎｃ、ｏｆ　Ｐｈ１ｌａｄｅｌｐｈ ｉａ、ＰＡ）から入手した。

方法Ａ　：　ｔ　−Ｂ　ｏ　ｃ化学を用いるペプチド合成はとんどのペプチドは 、以下のようなりｏｃ保護の手順で合成された。

Ｂｏｃで保護されたアミノ酸は、Ｄｕｎｇ　Ｌｅ−Ｎｇｕｙｅｎ。

Ａｎｎｉｅ　Ｈｅｊｋ、ａｎｄ　Ｂａｒｔｒａｎｄ　Ｃａ５ｔｒｏ、Ｊ、Ｃｈｅ ｍ、Ｓｏｃ、。

Ｐｅｒｋｉｎｓ　Ｔｒａｎｓ、１．　１９１４　（１９８７）によって開示され たようなりＯＰカップリング手段に適合したプログラムを用いて、ＭＢＨＡ（メ チルベンズヒドリル）樹脂（アドバンスドケムテック、ルイスビル、ケンタラキ ー（ＡｄｖａｎｃｅｄＣｈｅｍ、Ｔｅｃｈ、Ｌｏｉｓｅｖｉｌｌｅ、Ｋｅｎｔｕ ｃｋｙ）カタログ１９９０〜９１　１２９頁、５Ａ５０１６）に結合された。カ ップリングプロトコルには、ｌｍＭｏ１のＢｏｃで保護されたアミノ酸、１　ｍ Ｍｏ１のＢＯＰ及び１　ｍｌのＩＭＩ−メチルイミダゾールを７　ｍｌのＤＭＦ に溶解することを含む。該混合物を０゜５ｍＭｏｌの樹脂に加え、１時間混合し 、濾過した。この手順を、アップライドバイオシステムダ４３０Ａペプチド合成 機で自動で行った。該合成機は、上記カップリングステップを行うためのショー トプログラムルーチンを用いてアミノ酸カートリッジに詰められたＢｏＣで保護 されたアミノ酸とＢＯＰを備えている。その後、一連のＤＭＦ及びＣＨ２Ｃｌ。

洗浄とＴＦＡ脱保護ステップを、製造者（アツプライドバイオシステムズ、フォ スター市、ＣＡ）によって提出されているプログラムを用いてアップライドバイ オシステムダモデル４３０Ａペプチド合成機で行った。この手順を、所望の配列 が該合成機で構築されるまで、夫々の所望のアミノ酸に対して自動で繰り返した 。

ペプチドを樹脂上で構築した後、５ａｋａｋｉｂａｒａ、ｅｔ　ａｌ、。

ｉｎ　Ｂｕｌｌ、Ｃｈｅｍ、Ｓｏｃ、Ｊａｐ、、４０．　２１６４　（１９６７ ）に開示された方法の変形法で、液体ＨＦを含有する１０％アニソールを用い脱 保護及び樹脂からの切り放しを行った。次に、ペプチドと樹脂を酢酸エチルで洗 浄し、ペプチドを１〜１０％酢酸溶液で樹脂から抽出した。次に、このペプチド 溶液を凍結乾燥し、乾燥した固体ペプチドを得た。

ジスルフィドの橋架を含有するペプチドを例で説明したように調製した。

方法Ｂ　：　Ｆｍｏ　ｃ化学を用いたペプチド合成幾つかのペプチドは、強酸に 対して不安定な機能を有しており、Ｆｍｏｃで保護した手順で合成された。該ペ プチドは、カップリング試薬としてＢＯＰを用い、ミリダン９０５０ペプチド合 成機で自動化された方法で構築された。４−（２’　。

４′−ジメトキシフェニル−ＦＭＯＣ−アミノメチル）−フェノキシ樹脂（「リ ンク樹脂（Ｒｉｎｋ　ｒｅｓｉｎ）　Ｊ　）　（バーケム　トーランス、カリフ ォルニア、カタログ１９９１〜９２１３６頁ＲＭＩＳ７０）（２，２ｇ、０．１ ９８．ｍＭ）を、３．２ｇの酸で洗浄したガラスピーズ（シグマ、２５０〜２１ ２ミクロンのサイズ）と混合し、ペプチド合成機の流動反応容器（Ｆｌｏｗ−ｔ ｈｒｏｕｇｈ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｖｅｓｓｅｌ）に導νまた。側鎖を適切に保 護したＦｍｏ　ｃアミノ酸を、０．８ｍｍｏｌの分量で各々カートリッジに入れ た。ＢＯＰ試薬（３５４ｍｇ、０．　８ｍｍｏｌ）及びｌ−ヒドロキシベンゾト リアゾール（１２２ｍｇ１０．　９ｍｍｏｌ）を密封する前に夫々のカートリッ ジに加えた。自動合成には約２０時間を要した。ペプチドを標準のトリフルオロ 酢酸法を用いて樹脂から切り放した。樹脂／ガラスピーズ混合物をプラスチック 製のスクリュニドツブサルステッド管（Ｓａｒｓｔｅｄｔ　ｔｕｂｅ）　（５０ ｍｌの容量）に導いた。これに、１０ｍ１の以下の溶液を加えた：９ｒｎｔのＴ ＦＡ、０．５ｎ！！のチオアニソール、０．３ｍｌのエタンジチオール、及び０ ．２ｍｇのアニソール。これの切り放した反応混合物を４時間放置した。樹脂と ガラスピーズを濾過し、ＴＦＡを濾液から減圧下に除去した。ジエチルエーテル を残渣に加え、ペプチドを沈殿させ、これを濾過し、エーテルで洗浄し、乾燥し た。粗製のペプチドを標準の分取ＨＰＬＣクロマトグラフィー法を用いて精製し た。

次にペプチドを、ウォータース４８４紫外光検出器を備えたウォータースデルタ プレツブ（Ｄｅｌｔａ　Ｐｒｅｐ）　４０００システムでウォータースプレパッ ク（デルターノベツクＣ工８）カラムを用い逆相の液体クロマトグラフィーによ って精製した。精製は、０．１％ＴＦＡ水溶液でカラムを平衡をこし、２０分間 で１〜４０％からアセトニトリルの直線濃度勾配で、２０ｒｎｌ／ｍｉｎの流速 、２２０ｎｍにおり）て展開することによって達成された。サンプルを手動で集 め、ウォータースラジアルーパック（デルタ−パックＣｌ８）カラムを用ν１、 ウォータース分析用ＨＰＬＣシステム（６００Ｅポンプ及びシステムコントロー ラー、４９４フオトダイオードアレイ検出器、及び７１２ＷＩＳＰオートサンプ ラーを備えてν）る。）で純度をチェックした。２．５ｍｌの流速を、２００ｎ ｍにおり）て１０分で１０〜６０％のＡＣＮからＯ，１％ＴＦＡ／アセトニトリ ルの濃度勾配を用いて使用した。

方法Ｃ：２量化ノナペプチド（アミド橋架けしたもの保護された２、３−ジアミ ノプロピオン酸の合成（Ｓ）　−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミ ノ）−３−（（９Ｈ−フロシン−９−イルメトキシ）カルボニル）アミノ）プロ ピオン酸［（ｓ）　−２−（（ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎ−ｙｌ）ａ ｍｉｎｏ）−計（（９Ｈ−Ｆｌｏｒｅｎ−９−ｙｌｍｅｔｈｏｘｙ）ｃａｒｂｏ ｎｙｌ）　−ａｍｉｎｏ）ｐｒｏｐｉｏｎｉｃ　ａｃｉｄｌ　：１０　ｇ（４２ ｍＭｏｌ）のＮ　ａ　ＣＢＺ−ジアミノプロピオン酸（フル力、カタログ１９９ ０〜９１　１３６８頁Ｎｏ。

９６０８５）の７５ｍ１１．４−ジオキサン溶液を７５　ｒｎｅのＩＮ水酸化ナ トリウム水溶液、次いで９．　１　ｇ　（３５ｍＭｏｌ）の９−フルオレニルメ チルクロロホーメート　（アルドリッチ、カタログ１９９２〜９３　６２０頁Ｎ ｏ、１６，０５１−２）及び５　ｇ　（１５ｍＭｏｌ）のＮ−（９−フルオレニ ルメトキシカルボニルオキシ）琥珀酸イミド（アルドリッチ、カタログ１９９２ 〜９３　６２０頁Ｎｏ、２８，９５０−７）で処理した。生じた混合物を２５℃ で４時間撹拌し、次ν）で濃塩酸水溶液でｐＨ２に酸性化し、エーテルで抽出し た。これを硫酸マグネシウムで乾燥し、揮発物をエバポレートして白色の発泡体 を得た。この発泡体を再度１５０ｍ１の３０％臭化水素酢酸溶液に溶解した。２ ５℃で１時間撹拌した後、揮発物を減圧下に除き、残った酢酸を３回トルエンと 共にエノ（ボレートした。エーテルで粉末化し、ベージュ色の固体を得た。この ものを１，４−ジオキサン（７５ｍｌ）中でスラリーにした。

トリエチルアミン（１２，５ａ＋０を加え、次いでジ−ｔ−ブチルジカーボネー ト（１３，０８ｇ、６０ｍＭｏｌ）及びエーテル（７５＋ｎｅ）を加え、該スラ リーを２５℃で３時間撹拌した。得られた混合物をエーテルで希釈し、ＩＮ塩酸 水溶液で抽出した。有機層を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、揮発物を 減圧下に除去した。１５％ジクロロメタン−ヘキサンから再結晶し、所望の２カ 所が保護されたジアミノプロピオン酸を白色のパウダーとして得た。

１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ）　δ　１．４６　（９Ｈ）、３．６４　（２Ｈ）、 ４．２０（ＬＨ）、４．２９　（ＬＨ）、４．４２　（２Ｈ）、５．４６　（Ｌ Ｈ）、５．８８（ＬＨ）、７．３１　（２Ｈ）、７．３３　（２Ｈ）、７．５７ 　（２Ｈ）、７．７６（２Ｈ）。

元素分析二計算値　Ｃ：６４．７８　Ｈ：６．１５　Ｎ　６．５７実測値　Ｃ： ６４．７１　Ｈ：６．１８　Ｎ　６．５５２量化ノナペプチドの合成： ２量化ペプチドを、標準のＢＯＣプロトコルを用いて固相で構築した。ジアミノ プロピオン酸及びＡｓｐ／Ｇｌｕの側鎖の保護にはＦｍｏ　ｃ及び９−フルオレ ニルメチルエステル基をそれぞれ用いて行った。末端のＢｏｃ基を脱保護する前 に、９−フルオレニルで誘導された側鎖の保護基を、ジクロロメタン中で５０％ ピペリジンで処理することによって除去した。

ＢＯＰ　（２等量）のＤＭＤ溶液を加え、混合物を２５℃で４８時間、又は負の ニンヒドリン試験が観測されるまで振蓋した。生じたペプチドを更に加工処理し 、単離し、通常の方法（ＨＦ処理、分取ＨＰＬＣによる精製、ＦＡＢ−ＭＳによ る特徴化及びアミノ酸分析）で特徴化した。

ＦＡＢ−ＭＳ分析： 高速原子衝撃（ＦＡＢ）質量分析を、データ取得のためのＶＧ　１ｌ−２５０Ｊ データシステムを用い、ＥＢＱＱジオメトリ−のＶＧ　７０ＳＱ質量分析計で得 た。この質量分析計は、７キロボルトの加速電圧及び１０００の分解能（１０％ の谷解像度（ｖａｌｌｅｙ　ｄｅｆｉｎｉｔｉｏｎ）で操作された。実験に使用 されるＦＡＢガンは、７キロボルトの電圧及び１ミリアンペア−の電流で操作す るＩｏチックＦＡＢＩＩＮである。

キセノンを、１×１０“５ミリバールの圧力の供給源圧で衝撃ガスとして使用し た。注目のサンプルをＦＡＢ−ＭＳで分析する前にグリセロールに溶解した。

本発明は、以下の例によって例示されるが、これは制限を意味するものではない 。

夫々のペプチドの合成法が示される。全てのペプチドは、ＨＰＬＣで精製した。

夫々の例の分析データ及び構造は、表に示されている。

例１　：　ＩｌｅＡｓｎＰｒｏＡｉｂＴｙｒＡｇｒＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ２ （ＳＥＱ。

ＩＤ、Ｎｏ：８） このペプチドを方法Ａによって合成した。分析データは表中にある。ＨＰＬＣで 精製した。

例２　：　ＩＩｅＡｓｎＰｒｏ（０−メチルＴｈｒ）ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇ Ｔｙｒ−ＮＯ２（ＳＥＱ、ＩＤ、ＮＯ：９） このペプチドを方法Ａによって合成した。分析データは表中にある。

例３　：　ＩＩｅＡｓｎＰｒｏＡｉｂ［＋１　（２，６−ジクロロベンジルＡｒ ｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ２（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：１０）方法Ｂによって合 成した。

例４　：　Ｉ　ｌ　ｅＡｓｎＰｒｏＩ　ｌｅＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇ［Ｏ−　 （２．６−シ゛クロロへ゛　ンシ゛ル）−Ｔｙｒｅ−ＮＯ２　（ＳＥＱ．ＩＤ． Ｎｏ：１１）方法Ｂによって合成した。

例５　：　ｌｌｅＡ３ｎＰｒｏＩｌｅ［叶　（２，６−シ゛クロロへ゛ンシ゛ル ）Ｔｙｒｅ・ＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ２　（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：１２ ）方法已によって合成した。

例６　：　ＩＩｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇ’Ｔｙｒ−ＮＯ ２，環状（２．２’）、（４，４’　）−シ゛スルフィト°　２ｌ体及びＩ　ｌ 　ｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓ　−ＴｙｒＡｅｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ２，環状（ ２．４’）、　（４．２’）−シ゛スルフィド２量体（ＳＥＱ．　ＩＤ．Ｎｏ　 ：６）の合成還元ペプチド１１ｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇ Ｔｙｒ−ＮＯ２（ＳＥＱ．　Ｉ　Ｄ．　Ｎｏ　：　６）を、方法Ａにおいて先に 説明したようなペプチド合成機で構築し、液体ＨＦで樹脂から切り放し、分取Ｈ ＰＬＣで精製した。この調製物は、分析用のＨＰＬＣで単一ビークであり、標準 条件で７．３５分で溶出した。このペプチドはまた、キャピラリーゾーン電気泳 動（ＣＺＥ）で１００％の純度であることことが観測された。正確な構造は、Ｆ ａｂ−ＭＳで確認した（ＭＨ＋＝１　１　８　５．７）、このペプチドは、ペプ チドの一ＳＨ部分の存在を示すエルマン試薬で黄色になった。４　０ｍｇのペプ チドを５　０　０　ｍ／！の２０ｍＭリン酸ナトリウムバッファー（ｐＨ８．５ ）に溶解し、フェリシアン化カリウムの０．１Ｍ溶液を、ペプチド溶液の色が黄 色のままになるまで１００マイクロリツトルづつ加えた。次に、この溶液を凍結 乾燥し、分取用ＨＰＬＣで精製し、分析用ＨＰＬＣで２種類のものから成る１０ ０ミリグラムの固体を得た。第一のビーク　（固体の２３％）は、標準の条件で ７。

４６分で溶出した。第二のビーク（固体の７７％）は、７。

７９分で溶出した。ビーク＃１のＣＺＥは、１つのビーク（ＣＺＥを基準にして １００％純度）を与えた。ビーク＃２は、ＣＺＥの定量で２種類のもの（１　： 　２）を与えた。この調製物は、エルマン試験で黄色にならなかった。即ち遊離 のーＳＨ基が存在しない。ビーク＃２のＦＡＢ−ＭＳは、この２種のペプチドが ２種類の２量体タイプであり、その各々は同じモノマーを含んでいるが、それぞ れ、同じか又は逆の方向に配列されたモノマーを有していることを示した（ＭＨ ＋＝２３６７、４）　。

例６　（ａ）　：ＩｌｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ− ＮＯ２。

環状（２．２’）、（４．４′）・シ゛スルフィド　２ｌ体（ＳＥＱ，ＩＤ．Ｎ ｏ　＋６）及びＩ　ｌ　ｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ −ＮＯ２，環状（２．４’）。

（４　、　２　’　）−ジスルフィド２量体（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ　：６）の合 成このペプチドを、Ｂｏｃ−Ｃｙｓ　（Ｓ−Ｆｍｏｃ）として導入されたシステ ィン以外標準の側鎖保護基を用い、０．５ｍＭスケールで、方法Ａで先に説明し た自動Ｂｏｃ−保護手段によって構築した。最後のＢｏｃ基を脱保護した後、ペ プチド樹脂を、５０％ピペリジンのＤＭＦ溶液で酸素で溶液を一定に飽和させな がら３時間処理した。液体ＨＦで樹脂からペプチドを切り放し、２００ｍｇの粗 製ペプチドを得た。このものを分取用ＨＰＬＣで精製した後、５０ｎ＋ｇの純粋 な生成物を得た。

この物質は、ＨＰＬＣとＦＡＢ−ＭＳで示された例６で得られたビーク＃２と特 別がつかなかった。ＣＺＥは、例６のピ−ク＃２で得られたのと同じ２種類の生 成物の存在を示した。

例７　：　１１ｅＡｓｐＰｒｏＤｐｒＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３ ，環状（２，４’）、（２’　、４）−シ゛アミド　（ＳＥＱ、４Ｄ、Ｎｏニア ）方法Ｃによって合成した。

例８　：　ＩｌｅＤｐｒＰｒｏＡｓｐＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３ ，環状（２，４’）、（２’　、４）−ジアミド　（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：５） 方法Ｃによって合成した。

例９　：　１１ｅＧｌｕＰｒｏＤｐｒＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３ ，環状（２，４’）、（２’　、４）−シ゛アミド　（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ：４ ）方法Ｃによって合成した。

例１０　：　ｌ１ｅＡｓｎＰｒｏｌ　ｌｅＰｈｅＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−Ｎ Ｏ３（ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　：１３） 方法Ａによって合成した。

例１　１　：　ｌ１ｅＡｓｎ（３，４−テ゛ヒドロＰｒｏ）ＩＩｅＴｙｒＡｒｇ Ｌｅｕ−ＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３（ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ、１４）方法Ａによって 合成した。

例１２　：　（１１ｅＡｓｎＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−Ｎ Ｏ３）２（ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　：１５） モノマー構造のものを方法Ａを用いて調製した。ＦＡＢ−ＭＳ　（ＭＨ”＝　１ １９７．　０）　、キャピラリーゾーン電気泳動、及びアミノ酸分析（Ａｒｇ： ２．０１．　Ａｓｐ：０．８３．　Ｉｌｅ：０．９６．　Ｌｅｕ：１．００．　 Ｐｒｏ：１．４４．　Ｔｙｒ：１．８４）でこの構造を確認した。約１００ｍｇ 　（８，４Ｘ１０゛５モル）のモノマーを５０＋ｔのＮａ２ＰＯ４バッファー（ ｐＨ＝８）に溶解した。

Ｋ　Ｆｅ　（ＳＣＮ）６の０．１水溶液（ｌｏｘｌｏｏ、ｙ、１Ｘ１０＝モル） を加え、黄色の色がもはや消失しなくなるまで撹拌した。この物質を凍結乾燥し 、先に説明したようなＣ１８分取用ＨＰＬＣで精製した。この２量体構造は、Ｆ ＡＢ−ＭＳ　（ＭＨ＋＝２３９１．６）　、キャピラリーゾーン電気泳動、及び アミノ酸分析（Ａｒｇ：　１．９８．　Ａｓｐ：１．１４．　Ｉｌｅ：０．８７ ．　Ｌｅｕ：　１．０３．　Ｐｒｏ：　１．００．　Ｔｙｒ：　１．９７）によ って確認した。

例１３　：　（ＩｌｅＣｙｓＰｒｏｌｌｅＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−Ｎ Ｏ３）２（ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　＋１６） モノマー構造物を方法Ａを用いて調製した。ＦＡＢ−ＭＳ（ＭＨ＋＝１１９６． １）　、キャピラリーゾーン電気泳動、及びアミノ酸分析（Ａｒｇ：　２．０８ ．　Ｉｌｅ：１．２８．　Ｌｅｕ：　１．００゜Ｐｒｏ：　１．３１．　Ｔｙｒ ：　１．８０）でこの構造を確認した。約１００ｍｇ　（８，４Ｘ１０’モル） のモノマーを５０ａ＋ｔのＮ　ａ　２　ＰＯバッファー（ｐＨ＝８）に溶解した 。Ｋ　４　Ｆ　ｅ　（Ｓ　ＣＮ　）６０　、　１　Ｍ水溶液（１０Ｘ　１００　 ｐｅ、Ｉ　Ｘ　１０−４モア１／）　ヲ加え、黄色の色がもはや消失しなくなる まで撹拌した。この物質を凍結乾燥し、先に説明したようなＣ１８分取用ＨＰＬ Ｃで精製した。この２量体構造は、ＦＡＢ−ＭＳ　（ＭＨ＋＝２３７４．１）、 キャピラリーゾーン電気泳動、及びアミノ酸分析（Ａｒｇ：　２．７６、Ｉｌｅ ：　１．５６．　Ｌｅｕ：　１．００．　Ｐｒｏ：１．１８．　Ｔｙｒ：　１． ６０）によって確認した。

例１４： １１ｅＡｓｎＰｒｏ　ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３（ＳＥＱ、ＩＤ 、Ｎｏ二１７）１ｍ １１ｅＡｓｎＰｒｏ　ＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＯ３（ＳＥＱ、ＩＤ 、Ｎｏ：１７）（Ｐｉｍ＝２．６−ジアミツビメリン酸り、Ｄ）８０ｍ６（７） ５％Ｎ　ａ　ｚ　ＣＯ３及び５０ｍ／１．４−ジオキサンに（±）−２，６−ジ アミツビメリン酸（（±）−２，６−ｄｉａｍｉｎｏｐｉｍｅｌｉｃ　ａｃｉｄ ）　（５ｇ、　２６．３ｍｍｏｌ、アルドリッチ）を溶解し、０℃に冷却した。

２４．２ｍｌ　（１０５゜２　ｍｍｏ　ｌ、アルドリッチ）のジーｔｅｒｔ−ブ チルカーボネートをジオキサン中に含有する溶液を滴下した。添加が完了した後 、混合物を室温に暖め、１６時間撹拌した。ジオキサンを減圧下に除去し、水層 をＩＮＨｃＩでｐＨ＝１に酸性化した。

無色のオイルを得、これをｌ　ＯＪ、の酢酸エチルに溶解した。

これに、１０．６ｍｌ　（５２，６ｍｍｏｌ、アルドリッチ）のジシクロヘキシ ルアミンを加えた。この混合物を２５０　＋ｎ／のジエチルエーテルで希釈し、 −夜冷却した。白色固体を濾過し、乾燥して９．６ｇ　（４８，２％）を得、更 に精製することなく使用した。ＮＭＲｄｍｓｏ　（ｐｐｍ）：　１．０・２．０ ｍ、４４Ｈ；　１．４ｓ、１８Ｈ；　３．５−３−６ｍ、２Ｈ；　６．０−６． １ｍ、　２Ｈ。

ｐ−メチルベンズヒドリルアミン、ＭＣＩ樹脂（ＭＢＨＡ）のサンプル（ｏ、５ ｍｍｏｌ）　（先述のようにして得られる）をアップライドバイオシステムＩｎ ｃ、モデル４３０Ａペプチド合成機に導入し、Ｄａｎｇ　Ｌｅ　Ｎｅｇｙｅｎ　 ｅｔ　ａｌ　（ｉｂｉｄ）によって開示されたＢＯＰカップリング手段に適合し たプログラムを用いて、以下のアミノ酸（夫々１．０ｍｍｏｌ）をＭＢＨＡ樹脂 にカップリングした。Ｂｏａ−Ｔｙｒ　（２−Ｂｒ−ＣＢＺ）、Ｂｏｃ−Ａｒｇ 　（Ｔｏｓ）、Ｂｏｃ−ＬｅｕｌＢｏｃ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）、及びＢｏｃ−Ｔ ｙｒ　（２−Ｂｒ−ＣＢＺ）。次に、５０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／ＣＨ ２Ｃｌ２を用いてＭＢＨＡ樹脂を脱保護した。該樹脂をＡＢＩ−４３０Ａから除 去し、１８４ｍｇ　（０，２５ｍｍｏｌ）のＢｏｃ　（Ｌ、　Ｄ）　−Ｐ　１ｎ −ＤＣＨＡ、１１２ｍｇ　（０，２５ｍｍｏｌ）のＢＯＰ試薬、及び２５ｐｅ　 （０，２５ｍｍｏｌ）のＮ−メチルイミダゾール（アルドリッチ）共にと手動で １時間振蓋した。樹脂を再度ＴＦＡで脱保護し、ＡＢＩ−４３ＯＡに戻し、ここ で以下の残りのアミノ酸を加えた：　Ｂｏｃ−Ｐｒｏ、　Ｂｏｃ−Ａｓ　ｎ　（ Ｘａｎ　）、及びＢｏｃ−１１ｅ。

ペプチドをＨＦ／１％アニソールを用い０℃で樹脂から切り放し、１０％酢酸水 溶液で抽出し、凍結乾燥した。ウォータースプレーパックデルタ−パックＣ１８ カラム上で０．　１％ＴＦＡ／Ｈ２０からアセトニトリルでペプチドを溶出し、 精製を行った。ＨＰＬＣ純度を先に説明した分取用ＨＰＬＣシステムと同一の分 析システムを用いて確認した（単一ピークのみ）。

ＦＡＢ−ＭＳは、２３４２．７　（ＭＨ＋）で正しいペプチドを示した。アミノ 酸分析により以下の結果を見出し、これを確認した。Ａｒｇ（４，２９）、Ａｓ ｐ（１，４３）、ｌ１ｅ（１，４５）、Ｌｅｕ（２，００）、Ｐｒｏ（２，０８ ）、及びＴｙｒ　（３，９１）。

例１５　：　Ｉ　ｌｅＧｌｕＰｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−Ｎ ｌ２．環状（２，４’）、（２’４）−シ゛アミド　（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ　： ２）方法Ａによって合成した。Ｎｏｃｙ−Ｇｌｕ　（ＯＦｍ）を、バーケム。

Ｉｎｃ、（）−ランス、ＣＡ）より購入した。アルファーｂｏｃ−デルタ−ｆｍ ｏｃ−オルニチンを、アルファーｂｏｃ−オルニチン（バーケムバイオサイエン スＩｎｃ、、　フィラデルフィアＰＡから得られる）から、アルファーｂｏａ− ガンマ−ｆｍｏｃ−ジアミノプロピオン酸に対する方法Ｃで説明したのと同様の 手順を用いて合成した。

１ＮＭＲ（３００ＭＨｚ）　δ　１．４５　（９Ｈ）、１．４７−１．９９　（ ４Ｈ）。

３．２３　（２Ｈ）、４．２１　（ＬＨ）、４．４２　（２Ｈ）、５．０２　（ ＬＨ）。

５．１０　（ＬＨ）、６．００　（ＬＨ）、７．２２−７．７９　（８Ｈ）。

元素分析　計算値　伝　６６．０６．　Ｈ：　６．６５．　Ｎ：　６．１６゜実 測値　伝　６５．９３．　Ｈ：　６．６９．　Ｎ：　５．９７例１６　：　１１ ｅＡｓｐＰｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒＮＨ２，環状（２，４’ ）、（ｚ’　、４）−シ゛アミド　（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ　：３）例１５で説明 したように合成した。

皿上ヱニＴｙｒＩｌｅＡｓｎＬｅｕＩ　１ｅＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ− Ｎｌ２（ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ、１８） 方法Ａによって合成した。

例１８　：　ｄｅｓＮＨ２Ｔｙｒ１１ｅＡｓｎＬｅｕＩｌｅＴｙｒＡｒｇＬｅｕ Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｎｌ２　（ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：１８）方法Ａによって 合成した。

生物学的評価 放射性レセプター結合アッセイ ラット脳膜を、異なった濃度の幾つかのペプチドの存在下、及び１　ｍｌの最終 容積で３７℃で平衡になるまで３Ｈ−ＮＰＹでインキュベートした。非特異的結 合をｌｏｏｎＭの冷ＮＰＹを加えることによって決定した。インキュベーション の終点で、サンプルを濾過（ＧＦ／Ｃフィルター）するか、若しくは０．５ｍｅ の冷インキュベーションバッファーを加え、チューブを１５，０００ｇで１０分 間遠心した。上清を捨て、ベレット若しくは濾過物を再懸濁し、液体シンチレー ションで計測した。直線回帰によってＩＣＫＢ　及びＨ２Ｏ２ｄ’　ｍａｘ ｉｌｌ率を計算するコンピュータプログラムを用いて結果を処理した。利用しう る場合に、工Ｃ５ｏの結果を表の列（ａ）に示した。

凰凶遣Ｊ」ヨニＬ釦因肛定 ヒト赤白血病（ＨＥＬ）細胞をフルカー２（１時間にｌμＭ）で導入し、洗浄し 、次いでキュベラ）（２５ｍｔ中５×１０５細胞）中に置いた。ＳＬＭスペクト ロフルオロメーターにおいて３４０及び３８０ｎｍで同時に励起した。ＮＰＹ及 び／又はベブチドアナローグを添加した後の蛍光の変化は、５１０ｎｍの放出光 を測定することによって追跡した。カルシウム濃度は、３４０／３８０ｎｍの蛍 光の比を用いてコンピュータプログラムを通して測定しうる。ベブチドアナロー グの作動活性は、１１００ｎのペプチドで細胞を刺激したときに誘導される蛍光 を記録することによって試験した。また、拮抗活性は、１１００ｎの該アナロー ブの存在下において、５ｎＭのＮＰＹで誘導される蛍光の減少を観測することに よって試験した。利用しうる場合には、結果を表の列（ｃ）に示した。

１１００ｎ濃度の夫々の化合物によって達成されるＨＥＬ細胞の（５ｎＭのＮＰ Ｙによって誘導される）細胞内カルシウムの増加　の阻害は、表の列（ｂ）に示 した。

単離された注入用ラット腎臓製剤 雌ＣＤラット　（２００〜４００ｇ）を、アセプロマシン（２゜８　ｍ　ｇ／　 ｋ　ｇ）及びケタミン（１１２ｍｇ／ｋｇ）の混合物の静脈内注射（ｉｎｊｅｃ ｔｅｄ　ｉ、ｐ、）で麻酔にかけた。このラットの腹部を中線に沿って開いた。

腎臓動脈及び下降大動脈（ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ　ａｏｒｅａ）を清浄にし、血 流による破壊が最小になるように、Ｔｙｇｏ　ｎ管（Ｔｙｇｏｎ　ｔｕｂｉｎｇ ）及び煽動ポンプを取り付けた先を丸くしたステンレスＭ２０Ｇの針を用いて、 基部腎臓動脈を通して１つの腎臓にカニユーレを挿入した。最初の結紮が完了し てすぐ、腎臓の液体注入（１０＋ｎ／！　／　ｍ　ｉ　ｎ　）を開始し、腎臓を 動物から除去し、定温の液体注入チャンバーに置いた。注入圧は、オンラインス ターザム（ｏｎ−１ｉｎｅ　Ｓｔａｔｈａｍ）圧力変換器で追跡し、グラスポリ グラフ（Ｇｒａｓｓ　Ｐｏｌｙｇｒａｐｈ）によって変化を記録した。

薬剤の投与：神経ペプチドＹ及び他の作動薬を、針の先端から約６インチの位置 にある注入ボート（全容量的０．３ｍＺ）を通して一回のポーラスインジェクシ ョン（０，１ｏ＋／）で投与した。よく混合させ、一定の濃度（０，１５ｍ１を １０ｍ１に希釈する）を可能にする煽動ポンプの前に位置する注入ボートを通し て、拮抗薬を５分間（０，１５ｍｅ／ｍ１ｎ）腎臓に注入した。

液体注入バッファー（ｍＭ　：ＮａＣｌ　１２２：ＫＣｌ４．７３　；　ＮａＨ ＣＯ１５，５；ＫＨ２ＰＯ４１，１９；ＣａＣ］　２．５　：ＭｇＣＩｚ　１． １９　ニゲルコース　１１．５及び１％ＢＳＡｐＨ７，４゜このバッファーを、 ９５％０　５％Ｃ○２で一定にバブリングした。

２ゝ 結果二上記の実験手順を用いて、我々は、以下の化合物ににおけるＮＰＹで誘導 される液体注入圧の増加の阻害に対すＩ　１ｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇ ＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２環状（２，２°）、（４，４’　）・ジスルフィド （ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ　：６）　２．５及び １　１ｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２環状（２ ，４’）、（４，２”）−シ゛スルフィド　２量体（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ　：６ ）　２．５１１ｅＧＩｕＰｒｏＤｐｒＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２ 環状（２，４’）、（２’　、４）−シ゛アミド（ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ　：４） 　０．５配列表 （１）　一般情報 （Ｃ）市：ベラケンハム（Ｂｅｃｋｅｎｈａｍ）（Ｄ）州：ケント（Ｋｅｎｔ） （Ｅ）国：英国 （Ｆ）郵便番号：ＢＲ３３ＢＳ （Ａ）名前：アレジャンドロ・ジョーズ・ダニエルズ（Ａｌｅｊａｎｄｒ。

Ｊｏｓｅ　ＤＡＮＩＥＬＳ） （Ｂ）ストリート：５４３０フオーチユーンズ・リッジ・Ｒｄ。

（Ｆｏｒｔｕｎｅｓ　Ｒｉｄｇｅ　Ｒｄ、）（Ｃ）市：ダーラム（Ｄｕｒｈａｍ ） （Ｄ）州：ノースカロライナ（Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ）（Ｅ）国：米国 （Ｆ）郵便番号：２７７１３ （Ａ）名前：デニス・バイヤー（Ｄｅｎｎｉｓ　ＨＥＹＥＲ）（Ｂ）ストリート ：２２　ポーチライト・コート（Ｐｏｒｃｈ　ｌ　ｉｇｈ　ｔ（Ｄ）州：ノース カロライナ（Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ）（Ｅ）国：米国 （Ｆ）郵便番号：２７７０７ （Ａ）名前：アントニオ・ランダヴアゾ（Ａｎｔｏｎｉｏ　ＬＡＮＤＡＶＡＺＯ ）（Ｂ）ストリート：６００−８Ｂ３１　オードボン・レイク・Ｄｒ。

（Ａｕｄｏｂｏｎ　Ｌａｋｅ　Ｄｒ、　）（Ｃ）市：ダーラム（Ｄｕｒｈａｍ） （Ｄ）州：ノースカロライナ（Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ）（Ｅ）国：米国 （Ｆ）郵便番号：２７７１３ （Ａ）名前：ヨハン・ヤコブ・レバン０ｏｈａｎｎ　Ｊａｋｏｂ　ＬＥＢＡＮ） （Ｂ）ストリート：１６０５　クリフストリート　（Ｃ１ｉｆｆ　５ｔｒｅｅｔ ）（Ｃ）市：ダーラム（Ｄｕｒｈａｍ） （Ｄ）州：ノースカロライナ（Ｎｏｒｔｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ）（Ｅ）国：米国 （Ｆ）郵便番号：２７７０７ （Ａ）名前：アンドレアス・スバルテンシュテイン（ＡｎｄｒｅａｓＳＰＡＬＴ ＥＮＳＴＥＩＮ） （Ｂ）ストリート：４１０５　ブリュースター　Ｄ　ｒ　、（Ｂｒｅｗｓｔｅｒ Ｄｒ、　） （Ｃ）市：ラーリ　（Ｒａｌｅｉｇｈ）（Ｄ）州：ノースカロライナ（Ｎｏｒｔ ｈ　Ｃａｒｏｌｉｎａ）（Ｅ）国：米国 （Ｆ）郵便番号：２７６０６ （ｉｉ）発明の名称：ペプチド （ｉｉｉ）配列の数：１８ （ｉｖ）コンピューター読み込み可能形式％式％ （Ｂ）コンピュータ：ＩＢＭＰＣ互換機（Ｃ）オペレーティングシステム：　Ｐ Ｃ−ＤＯＳ／ＭＳ−ＤＯ３（Ｄ）ソフトウェア：パテントイン　リリース＃１． ０、バージョ：／　１１．２５　（ＥＰＯ） （２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　１に対する情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状（ｓｔｒａｎｄｅｎｅｓｓ）　：未知（Ｄ）トポロジー：直線 （１１）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特Ｗ１： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）である。」 （ｉ、）特徴： （！Ｘ）特徴： （ｉｘ）特徴： （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： ｌｉｅ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（ ２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　３の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （貨）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： １１ｅ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（ ２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　４の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：４ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａｉ％ｒである。」（ｘｉ）配列表示：ＳＥＱ 　ＩＤ　Ｎｏ：　４：１１ｅ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅ ｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　５の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ＝９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：２ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａ力匂ｐｒである。」（ｘｉ）配列表示：ＳＥ Ｑ　ＩＤ　ＮＯ：　５：１１ｅ　Ｘａａ　Ｐｒｏ　Ａｓｐ　丁ｙｒ　Ａｒｇ　Ｌ ｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　６の情報：（ｉ）配列特 性 （Ａ）長さ；９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー二直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （、ｉ）配列表示：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　６：１１ｅ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　Ｃｙ ｓ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　 ７の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆ　１ｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｅ３）ロケーシ ョン：４ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａｌＪｃ′Ｄｐｒである。」（Ｘυ配列表示： 　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　７：１１ｅ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａｒ ｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　８の情報：（ｉ） 配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （１１）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ・５ｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：４ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａがＡｉｂである。」（ｘｉ）配列表示：　Ｓ ＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　８＋ｌｉｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　 Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　９の情報：（ｉ）配列 特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （１ｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：４ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａが０−メチル１「である。」（Ｘｌ）配列表 示：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　９：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａ ｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１０の情報：（ ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：４ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａがＡｉｂである。」（１ｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（Ｂ）ロケーション ：５ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａがＯ−（２，６−ジクロロベンジル）Ｔｙｒ である。」 （、ｉ）配列表示：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１０：ｌｉｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　 Ｘａａ　Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ ：　１１の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （１夏）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆ　ｉｅｄ・５ｉｔｅ）（Ｂ）ロケーショ ン：９ （Ｄ）他の情報：／注＝　ｒＸａａが０−（２，６−ジクロロベンジル）Ｔｙｒ である。」 （ｘｉ）配列表示：ＳＥＱ　１０　Ｎｏ：　１１：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｉ ｌｅ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ： 　１２の情報：（１）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー二直線 （１１）分子タイプ：ペプチド （ｘｌ）配列表示：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１２：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　 Ｉｌｅ　Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ ：　１３の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （目）分子タイプ：ペプチド （ｘｌ）配列表示：ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　１３：ｌｉｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　ｌ ｉｅ　Ｐｈｅ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ： 　１４の情報：（Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｘｉ）配列表示：ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　１４：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｘａａ　Ｉ ｌｅ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ： 　１５の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉ蔦）分子タイプ：ペプチド （、ｉ）配列表示：ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１５：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｃ ｙｓ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯ： 　１６の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （１１）分子タイプ：ペプチド （ｘｌ）配列表示：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１６：ｌｉｅ　Ｃｙｓ　Ｐｒｏ　 Ｉｌｅ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎ伝 １７の情報：（ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：９アミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状：二本鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （１１）分子タイプ：ペプチド （ｉｘ）特徴： （Ａ）名前／鍵：修飾部位（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ−ｓｉｔｅ）（ｘｉ）配列表示： 　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　１７：１１ｅ　Ａｓｎ　Ｐｒｏ　Ｘａａ　Ｔｙｒ　Ａ ｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１８の情報：（ ｉ）配列特性 （Ａ）長さ：ｌＯアミノ酸 （Ｂ）タイプ：アミノ酸 （Ｃ）鎖状ニー重鎖 （Ｄ）トポロジー：直線 （ｉｉ）分子タイプ：ペプチド （ｘｉ）配列表示：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１８：Ｔｙｒ　Ｉｌｅ　Ａｓｎ　 Ｌｅｕ　Ｉｌｅ　Ｔｙｒ　Ａｒｇ　Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｔｙｒ＋□Ａ、ｌｉ□陶　 ＰＣＴ／ＧＢ　９３１０１２９７フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，６識別記号　庁内整理番号Ａ６１Ｋ　３８１００　 ＡＢＮ ＢＵ （７２）発明者　へイヤー、デニス アメリカ合衆国、ノース・カロライナ州２７７０７、ダラム、ポーチライト・コ ート（７２）発明者　ランダバゾ、アントニオアメリカ合衆国、ノース・カロラ イナ州２７７１３、ダラム、オードポン・レイク・ドライブ　６００−８ビー３ １ Ｉ Ａ６１Ｋ　３７１０２　ＡＡＫ ＢＬ （７２）発明者　レバン、ヨハン・ヤコブアメリカ合衆国、ノース・カロライナ 州２７７０７、ダラム、クリ７・ストリート１６０５（７２）発明者　スバルテ ンスタイン、アンドレアスアメリカ合衆国、ノース・カロライナ州２７６０６、 ラレイ、ブリュースター・ドライブ４１０５

Claims (23)

【特許請求の範囲】
1. １．式（Ｉ）のペプチド又はそれらの多量体若しくはそれらの塩。 Ｒ１−Ｘ５ＡｒｇＸ６ＡｒｇＸ５−Ｒ２（Ｉ）（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ．１） ここで、Ｒ１＝Ｘ１Ｘ２Ｘ３Ｘ４ 但し、 Ｘ１＝Ｉｌｅ若しくはＩｌｅＴｒｙ、又はＩｌｅｄｅｓＮＨ２ＴｙｒＸ２＝Ａｓ ｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｄｐｒ、Ｇｌｕ若しくはＧｌｙＸ３＝Ｌｅｕ、Ｐｒｏ又は ３，４−デヒドロＰｒｏＸ４＝Ａｉｂ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｄｐｒ、Ｇｌｕ、Ｇｌ ｙ、Ｉｌｅ、Ｏｒｎ、Ｔｙｒ又はＯ−メチルＴｈｒ Ｘ５＝Ｐｈｅ、Ｔｙｒ又は［０−（２，６−ジクロロペンジル）−Ｔｙｒ］ Ｘ６＝Ｐｈｅ又はＬｅｕ ここで、 Ｒ２＝−（ＣＨ２）ｎＣＨ３，−（ＣＨ２）ｎＮＨ２又は▲数式、化学式、表等 があります▼（但し、ｎ＝１〜４）
2. ２．請求の範囲１項に記載のペプチドであって、Ｘ２がＤｐｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｐ 及びＧｌｕから選択されるペプチド。
3. ３．請求の範囲第１項又は２項に記載のペプチドであって、Ｘ３がＰｒｏである ペプチド。
4. ４．請求の範囲第１項から第３項の何れかに記載のペプチドであって、Ｘ４がＡ ｓｐ、Ｃｙｓ、Ｄｐｒ及びＯｒｎから選択されるペプチド。
5. ５．請求の範囲第１項から第４項の何れかに記載のペプチドであって、Ｘ５がＴ ｙｒであるペプチド。
6. ６．請求の範囲第１項から第５項の何れかに記載のペプチドであって、Ｒ２が− （ＣＨ２）ｎＮＨ２であるペプチド。
7. ７．請求の範囲第１項から６項の何れかに記載のペプチドの多量体。
8. ８．請求の範囲第７項に記載の多量体であって、該多量体が２量体又は３量体で あるもの。
9. ９．請求の範囲第７項又は第８項に記載の多量体であって、Ｇｌｙ残基を含有す るペプチドが、α位で橋架し、（−ＣＨ２−）ｎ，−ＣＨ２−Ｓ−ＣＨ２−，▲ 数式、化学式、表等があります▼，−ＣＨ２−Ｓ−Ｓ−ＣＨ２−，▲数式、化学 式、表等があります▼，及び▲数式、化学式、表等があります▼， ▲数式、化学式、表等があります▼及び▲数式、化学式、表等があります▼ここ で、ｎ＝０〜４である； から選択される１以上の基によって１以上のブリッジを形成する多量体。
10. １０．ペプチド、これらの多量体又はこれらの塩であって、該ペプチドが、 ＩｌｅＧｌｕＰｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，４′），（２′，４）−ジアミド（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：２）ＩｌｅＡｓｐＰ ｒｏＯｒｎＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２，４′），（２ ′，４）−ジアミド（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ：３）ＩｌｅＧｌｕＰｒｏＤｐｒＴｙ ｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−２，環状（２，４′），（２′，４）−ジアミド （ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：４） 及び ＩｌｅＤｐｒＰｒｏＡｓｐＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，４′），（２′，４）−ジアミド（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：５）から選択される 構造を有するもの。
11. １１．ペプチド、これらの多量体又はこれらの塩であって、該ペプチドが、 ＩｌｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，２′），（４，４′）−ジスルフィド２量体（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：６）及び ＩｌｅＣｙｓＰｒｏＣｙｓＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，４′），（４，２′）−ジスルフィド２量体（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：６）から 選択される構造を有するもの。
12. １２．ペプチド、これらの多量体又はこれらの塩であって、該ペプチドが、 ＩｌｅＧｌｕＰｒｏＤｐｒＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，４′），（２′，４）−ジアミド（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：４）の構造を有する もの。
13. １３．ペプチド、これらの多量体又はこれらの塩であって、該ペプチドが、 ＩｌｅＤｐｒＰｒｏＡｓｐＴｙｒＡｒｇＬｅｕＡｒｇＴｙｒ−ＮＨ２，環状（２ ，４′），（２′，４）−ジアミド（ＳＥＱ．ＩＤ．Ｎｏ：５）の構造を有する もの。
14. １４．請求の範囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチド又は多量体の薬 学的に許容しうる塩。
15. １５．ヒトのような哺乳類の医学的治療における使用のための請求の範囲第１項 から第１３項の何れかに記載のペプチド若しくは多量体、又はこれらの薬学的に 許容しうる塩。
16. １６．ヒトにおける循環器系疾患、高血圧、高血圧性クリーゼ、血管痙攣、大脳 若しくは冠状血管痙攣、食事障害、鬱病、並びに緑内障の治療における使用のた めの請求の範囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチド若しくは多量体、 又はこれらの薬学的に許容しうる塩。
17. １７．発作の治療における使用のための請求の範囲第１項から第１３項の何れか に記載のペプチド若しくは多量体、又はこれらの薬学的に許容しうる塩。
18. １８．ヒトのような哺乳類の医学的な治療のための医薬の製造のための請求の範 囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチド若しくは多量体、又はこれらの 薬学的に許容しうる塩の使用。
19. １９．ヒトのような哺乳類における循環器系疾患、高血圧、高血圧性クリーゼ、 血管痙攣、大脳若しくは冠状血管痙攣、食事障害、鬱病並びに緑内障の治療のた めの医薬の製造のための請求の範囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチ ド若しくは多量体、又はこれれらの薬学的に許容しうる塩の使用。
20. ２０．ヒトのような哺乳類における発作の治療のための医薬の製造のための請求 の範囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチド若しくは多量体、又はこれ らの薬学的に許容しうる塩の使用。
21. ２１．請求の範囲第１項から第１３項の何れかに記載のペプチド若しくは多量体 、又はこれらの薬学的に許容しうる塩を、これらに対して許容しうる担体と共に 含有する薬学的製剤。
22. ２２．循環器系疾患、高血圧、高血圧性クリーゼ、血管痙攣、大脳若しくは冠状 血管痙攣、食事障害、鬱病並びに緑内障の治療のための方法であって、治療的に 効果のある非毒性量の請求の範囲第１項から第１３項の何れに記載のペプチド若 しくは多量体をヒトに投与することを要求する方法。
23. ２３．治療的に効果のある非毒性量の請求の範囲第１項から第１３項の何れかに 記載のペプチド若しくは多量体をヒトに投与することを要求する発作の治療のた めの方法。