JPH07505865A

JPH07505865A - ボンベシンのフェニルアラニン類似体類

Info

Publication number: JPH07505865A
Application number: JP5513250A
Authority: JP
Inventors: エドワーズ，ジャドソン　ヴィー．; ファンガー，ブラッドフォード　オー．
Original assignee: メレルダウファーマスーティカルズ　インコーポレイテッド
Priority date: 1992-02-07
Filing date: 1993-01-07
Publication date: 1995-06-29
Also published as: NO942919D0; AU668909B2; FI943638A; AU3439993A; NZ246815A; ZA93716B; CA2129032A1; EP0626973A1; FI943638A0; NO942919L; KR950700325A; HUT71585A; HU9402285D0; WO1993016105A1; IL104621A0; MX9300602A; US5428018A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称　ボンベシンのフェニルアラニン類似体類発明の分野本発明は薬剤として有用であり得る新規なボンベシンフェニルアラニン類似体に間する。

発明の背景ボンベシン（ｌ　Ｄ番２）は蛙のボンビナ　ボンビナ（Ｂｏｍｂｉｎａｂｏｍｂｉｎａ）の皮膚からもともと単離された１４個のアミノ酸のペプチドである。ボンへシンはまたガストリン放出ペプチド（１０雲１）及びリドリン（ｌＤ１１３）（配列同定の節を参Ｍ）を含めた幾つかの他のペプチドと構造的に関連している。

ボンベシンは神経系の刺激、腎臓血液流の減少、脳下垂体ホルモンの分泌、成長の促進、記憶の保持、小腸のミオサイトの筋肉電気的及び収縮活性の誘発、胃及び膵臓の分泌の誘発及び免疫機能を支えることを含めたある範囲の効果を有することが知られている。これらは体内のボンベシン作用の可能な模倣物、又は阻害剤としてのボンベシン類似体の設計及び開発に於いて、これらの活性を調節することにかなりの興味がもたれている。

ボンへシン依存性の応答は、ボンへシンと結合する高親和性（ＫＯ＝ｌｎｍ）１１胞表面レセプター類を通じて起きる。

ボンへシンの細胞表面レセプターへの結合は幾つかの組織に於いて細胞分裂促進応答を刺激する０分裂促進応答はスイス３Ｔ３胚１に芽細胞細胞、人気管支表皮細胞、人手細胞肺癌細胞、ラフトガストリン細胞及びラット膵＊ｍ胞を含めた幾つかの細胞型で実証されている。同様に消化機能に対して重要な胃及び膵臓の分泌のボンへシンによる誘発は膵臓細胞（Ｂ−細胞）及び腸ガストリン細胞（Ｇ− 細胞）上で見出されるレセプターを通して起きる。

ボンへシンのその細胞外レセプターへの結合はＧ−蛋白質の活性化を含めた幾つかの細胞内１８号を呼び起こし、これがさらにホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）を活性化する。ＰＬＣは更にホスファチジルイノシトールホスフェート（Ｐｌ）をイノシトール　１，４．５−トリホスフェ−）　（ＩＦ３）及びジアシルグリセロール（ＯＡ（：）に変換する。ＩＦ５とＤＡＣは細胞で媒介される出来事に対する細胞内信号であると信じられる。

構造活性研究はレセプター結合がアミド化Ｃ−末端を含有しているペプチドリガント及び一般に最後の８つのアミノ酸の存在を必要とすることを示している。最近の研究は種々の異なる種類のＣ−末端修飾類似体を使用してレセプター相互作用を選択的に調節するためにボンへシンのカルボキシ末端くＣ−末端）領域を修飾することに集中している。これらの修飾は例えばＤ−アミノ酸の取り込み、非ペプチド結合、アミド、及びエステル修飾を含んでいる。これらの変更は改良された特性を有するある種のペプチド頚を生した。

出願人はデヒドロフェノールアラニンを含有している天然のボンへシンの線状のペプチド類似体を造フた。出願人はこれらの類似体がボンへシンレセプターとして作用し、ボンへシンの細胞応答に必要な細胞内信号を誘発又は防止することを実証した０本発明のペプチド類似体は有意義な細胞分裂及び／又は抗分泌活性を潜在的に有し、従って成長治療及び／又は消化の病気の処置に対する科学的に興味あるそして治療的に有意義な補助物質を提供し得る。さらに修飾されたフェニルアラニン官能基は強められた効力と延された作用期間を提供し得る。

発明のまとめ特許請求されているのは以下に与えられる式ｌ及び２のペプチド誘導体である。

式ｌのペプチドは構造式Ｇｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｔ−Ｐｈｅ−−Ａ２−Ｙ　（式　１）〔式中、Ａ１は　Ｈｉｓ、　Ｌｅｕ、　Ｈｉｓ−Ｌｅｕ、又は結合でありＰｈｅ”はｐｈｅ、Δ”Ｐｈｅ、及びΔＥＰｈｅからなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで上記修飾されたフェニルアラニン誘導体は修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素においてＣ１〜Ｃ４アルキル基によって更にＩ！換されることも出来、Ａ２はＰｈｅ、　Ｌｅｕ、　Ｐｈｅ−Ｌｅｕ、又は結合でありＹは０Ｈ５（Ｃｓ−Ｃ８）アルコキシエステル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ＋〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜ＣＯ）アルキルアミン、（Ｃｔ〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である。）の構造のものであるか又は式ｌの該化合物はその製薬上受入れられる塩である。

式２のペプチドはＸ−＾３−Ｐｈｅ”−Ａａ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ −Ｌｅｕ−Ｙ　（式　２）〔式中Ａ３は　Ｇｌｐまたは結合でありＰｈｅ−はｐｈｅ、ΔｚＰｈｅ及びΔＥＰ　ｈ　ｅ　ｂ）らなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで該修飾されたフェニルアラニン誘導体は更に該修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素に於て、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基て置換されることも出来、Ａ４はｃｒｙ又は結合であり、Ｘは、アミノ末端酸がＧｌｐで従ってＸが省略される場合を除いて、水素、１〜８個の炭素原子の１又は２個のアルキル基、２〜８個の炭素原子のｌ又は２個のアシル基、カルボヘンシロキシ又はｔ−ブチルオキシカルボニルから選択されるアミノ末端置換基であり、Ｙは０Ｈ１（Ｃ＋〜Ｃ８）アルコキシエステル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ０〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミン、（Ｃ，〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である。〕の構造のものであるか又は式２の該化合物は製薬上受入れられるその塩である。

式Ｉ及び１１の好ましい誘導体は、その群の中に含まれ、そして選択されたそれらの置換基を含有する式■及び１１の好ましい誘導体であるサブグループを形成するようにＪ！沢されることが出来る。

発明の詳細な記載次の一般的な省略文字は、この明＋ａ書を通じて使用される（１）アミノ酸とそれらの３文字コート、（２１飾されたフェニルアラニン及びそれらの構造、（３）末端アミノ及びカルボキシ置換基である。

（１）アミノ酸とそれらの３文字コートし一アミノ酸　Ｄ−アミノ酸Ａｌａ−アラニン、　ａｌａ　−Ｄ−アラニン、Ａｒｇ−アルギニン、　ａｒｇ　−Ｄ−アルギニン、Ａｓｎ−アスパラギン、　ａｓｎ　−Ｄ−アスパラギン、Ａｓｐ−アスパラギン酸、ａｓｐ　−Ｄ−アスパラギン酸、Ｃｙｓ−システィン、　ｃｙｓ　−Ｄ−システィン、Ｇｌｙ−グリシン、Ｇｌｕ−グルタミン酸、　ｇｌｕ　−Ｄ−グルタミン酸、Ｖａｌ−バリン、　ｖａｌ　−Ｄ−バリン、Ｇｌｎ−グルタミン、　ｇｌｎ　−Ｄ−グルタミン、Ｈｉｓ−ヒスチジン、　ｈｉｓ　−Ｄ−ヒスチジン、１ｌｅ−イソロイシン、　ｉｌｅ　−Ｄ−イソロイシン、Ｌｅｕ−ロイシン、　ｌｅｕ　−Ｄ−ロイシン、Ｌｙｓ−リジン、　ｌｙｓ　−Ｄ−Ｕジン、Ｐｈｅ−フェニルアラニン、　ｐｈｅ　 −Ｄ−フェニルアラニン、Ｍｅｔ−メチオニン、　＋ｇｅｔ　−Ｄ−メチオニン、Ｐｒｏ−プロリン、　ｐｒｏ　−Ｄ−プロリン、５ｅｒ−セリン、　ｓｅｒ　 −Ｄ−セリン、Ｔｈｒ−スレオニン、　ｔｈｒ　−Ｄ−スレオニン、Ｔｒｐ　− ）リブトファン、ｔｒｐ　−Ｄ−トリプトファン、Ｔｙｒ−チロシン、　ｔｙｒ　−Ｄ−チロシン、（２）：１飾されたフェニルアラニン及びそれらの構造Ｒ、＝　ＨｌまたはＣ１−ＣａアルキルＲ、＝　ＨｌまたはＣｔ　−Ｃ４アルキル（３）アミノ及びカルボキシ末端酸置換基＾Ｃ−ア七チルＡｚｔ　−アゼチジン−２−カルボキシレートＣｉｎ　−シナモイルＤｈＣｉｎ　−３，４−ジヒドロシナモイルＯａｃ　−８−アミノオクタン酸Ｏｃｔ　−ｎ−オクタンＳｕｃ　−サクシニルＧｌｔ　−グルタリルＴｆａ　−）リフルオロアセチル＃−Ｃ−末端アミドボンへシンペプチド類両性類の供給源から１３個ものボンベシン様のペプチドが単離されており、鳥のプロヘントリクルス（ｐｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌｕｓ）から１つ、モして哺乳類の組織から５又は６個が単離されている。ボンベシンペプチドは、それらの−次構造、それらの薬理学的活性、及びそれらのレセプター親和性に基づいて、３つのサブファミリーに分割できる。ボンベシンサブファミリーはＣ−末端テトラペプチド−Ｇｌｙ−１１ｉｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ−１ＬＨ２によって特徴付けられ、リドリン／シナテンシンサブファミリーはテトラペプチド−ＧＩｙ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｍｅｔ−Ｎｌ２によって特徴付けられ、フィロリドリンサブファミリーはテトラペプチド−Ｇｌｙ−５ｅｒ−Ｐｈｅ（Ｌｅｕ）Ｎｅｔ−Ｎｌ（２によ）て特徴付けられる。

ボンベシンサブファミリー内に存在するのは哺乳類起源のガストリン放出ペプチド（ＧＲＰ）である０人、豚、及びイヌＧＲＰはＮ−末端トデカペプチドにおいてそれぞれ異なるが、同しカルボキシアミノ酸配列を有している（残基１３−２７）。更に踊乳類ＧＲＰのＣ−末端デカペプチドは蛙のボンベシンの末ｉｃ−末端デカペプチドと同じであるが、ただ一つの違う点はＣ−末端から８の位置においてＧｌｎ残基の代りに］１（ｓ残基て置換されていることである。リドリン／タナテンシン様のファミリー内に存在する哺乳類のペプチドはニューロメジンＢである。

ボンベシンの幾つかの配列変化の配列同定は、特許請求の範囲の前に含められている。例えばボンへシン（ｌ　［１１１２）、カストリン放出ペプチド（ＩＤｓｌ）、リドリン（１０１１３）。

ここて「ボンへシン又は天然のその変形（バリアント）」という用語はボンへシン（１０１１２）の全てのサブファミリーと天然の変形を含み［ファルコニエリ等のＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＰｅｐｔｉｄｅｓ、　２１，１−１ｆ、３、（＋９８８）既知のボンベシン関連ペプチドのリストについてのものを参照、そして参照により本明細書に取り込む］、即ち、ＧＲＰ及びリドリン等に関連する配列を含めるものである。定義される置換基Ａ、、Ａ２、Ａ３、及びＡ４についての「その変形（バリアント）」という用語は、任ｊＦ　Ｉｔ加的に、ボンへシンの１〜５個のアミノ酸を含むか、又は、内部アミノ酸の連続領域と接するところに於ける関連する変形を含む、但しそれが結合である場合又はアミン又はカルボキシ末端酸が環状誘導体であって、それにより配列１〜５のアミノ酸がオミットされる場合はこの限りではない。

アミノ酸とその変更通常用いられているように、本明細書では、記載されているペプチドの構造はアミノ末端が頁の左側に表われ、カルボキシ末端が頁の右側に表われるようになっている。

１〜８個の炭素原子のアルキル基及びアルコキシ基のアルキル部分は直鎖、分枝鎖又は環状のアルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチル、ペンチル、イソペンチル、第二ペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、シクロヘキシル及びシクロベンチルメチル、ヘプチル、オクチル（Ｏｃｔ）、及び８−アミンオクタン＠　（Ａｏｃ）である。

２〜８個の炭素原子のアシル基は、１又は２個のカルボニル部分を基あたりに有する、直鎖、分枝鎖、環状、飽和、及び不飽和アシル基、例えばアセチル（Ａｃ）、アゼチジン−２−カルボキシレート（Ａｚｔ）、ベン゛ゾイル、サクシニル、シナモイル（Ｃｉｎ）、３．４−ジヒドロシナモイル（ＤｈＣｉｎ）、マレイル（Ｍａｌ）、バルミチル、ラウリル、オクタノイル、及びグルタリル（Ｇｌｔ）を含むものとする。アルキル及びアシル置換基の両方がハロゲン置換基を有するものを含むものとし、ハロゲン基はフルオロ、クロロ、ブロモ又はヨードてあり、例えばトリフルオロアセチル（Ｔｆａ）である、Ｎ−末端アミノ酸残基の環状誘導体はピログルタミン酸（ｐＧｌｕ）及びホモセリンラクトン（）Ｉｓｅ）を含む。

１〜４個の炭素原子のアルキル基及びアルコキシ基のアルキル部分は直鎖、分枝鎖アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、第三ブチルを包含するものとする。

グリシンを例外として天然のアミノ酸はキラル炭素原子を含有する。特定して別に示されない限り本明細書で記載される光学活性アミノ酸はＬ−立体配置である（ここに記載のアミノ酸とそれらの文字コート参照）。しがしＡ１、Ａ２、Ａ３、及びＡ４基のアミノ酸の任意のものはＤ−又はＬ−立体配置の何れかであることが指定出来る。

Ａ１−Ａ４のアミノ酸は本質的に、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、メチオニン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システィン、プロリン、ヒスチジン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、アルギニン、オルニチン、及びリジンである天然のアミノ酸からなると更に指定できる。また含められるのは天然のアミノ酸のＤ−異性体、即ちＤ−アラニン、Ｄ−バリン、Ｄ−ロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−セリン、Ｄ−メチオニン、Ｏ−スレオニン、Ｄ−フェニルアラニン、Ｄ−チロシン、Ｄ−）リブトファン、Ｄ−システィン、Ｄ−プロリン、Ｄ−ヒスチジン、０−アスパラギン酸、ローアスパラギン、０−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン、Ｄ−アルギニンである。前に示したようにＤ−アミノ酸は、それらの３文字の最初の文字又は１文字コートが小文字とすることて表わすことができる。

即ち、Ｄ−アラニンに対しては（Ｄ−ａｌａ、　ａｌａ、又はａ）　、Ｄ−フェニルアラニンに対しては（Ｄ−Ｐｈｅ、　ｐｈｅ又はｆ）である。

一群のアミノ酸はある種の電荷特性によって定義できる。ｇＳ鎖の２つの一般特性が存在する。即ち非極性と極性である。非極性残基はこれらの次の基からなっている：疎水性残基であって、（１）脂肪族炭化水素側鎖を有するもの：　Ｇｌｙ、　Ａｌａ、　Ｖａｌ、Ｌｅｕ、　１ｌｅＳＮｌｅ、　Ｐｒｏ及び（２）芳香族基、Ｐｈｅ及びＴｒｐ及び（３）疑似的炭化水素、Ｎｅｔのものを含む。極性アミノ酸は３つの群を造る。（１）酸性疎水残基Ａｓｐ、　Ｇｌｕ及びＴｙｒ、（２）中性残基であってヒドロキシ含有残基な有するものＳｅｒ及びＴｈｒ　；アミド類、Ａｓｎ及びＣ１ｎ；芳香族、Ｔｙｒ及びＴｒｐ；スルフヒドリル基、Ｃｙｓ及び小さく構造的に収容できるアミノ酸、Ａｌａ及びＧｌｙ、及び（３）塩基性疎水残基、Ｈｉｓ、　Ｌｙｓ及びＡ　ｒ　ｇ　ｅＹは、末端置換基が環状の基又は式２であってＹが無いものでない限り、末端アミノ酸を置換又は修飾するために使用することができる化学基を命名している。更に与えられるＹ置換基はアミノ酸のカルボニルを通じて結合されると理解される（Ｃｏ−Ｙ）、従ってＹはカルボキシ末端酸（−０）１）、Ｃ、−Ｃ８アルコキシエステル、カルボキサミド、モノ又はジＣ、−Ｃ８アルキルエステル、Ｃ、−Ｃ８アルキルアミン又はＣ、−Ｃ、チオアルキルエーテル、又は置換基の何れかに加え、又は何れかと関連した製薬上受は入れられる塩。

式ｌのポリペプチドは非毒性、有機又は無機酸との製薬上受は入れられる塩を形成できる。適当な塩を形成する無機酸の例には塩酸、臭化水素酸、硫酸及び燐酸及び酸金属塩、例えばオルト燐酸−水素ナトリウム及び硫酸水素カリウムが含まれる。適当な塩を形成する有機酸の例にはモノ、ジ及びトリカルボン酸が含まれる。そのような酸の例は例えば酢酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマール酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、サルチル酸、２−フェノキシ安息香酸、スルホン酸、例えばメタンスルホン酸及び２−ヒドロキシエタンスルホン酸が含まれる。カルボキシ末端アミノ酸部分の塩は無毒カルボン酸塩であって、適当な＠機又は有機塩基の任意のものと形成されるものが含まれる０例示するとこれらの塩はアルカリ金属、例えばナトリウム及びカリウムとのもの、アルカリ土類金属、例えばカルシウム及びマグネシウムとのもの、アルミニウムを含めた１１１Ａ族の軽金属とのもの、有機第一級、第二級及び第三級アミン、例えばトリエチルアミンを含めたトリアルキルアミン、プロ力イン、ジヘンジルアミン、１−エタナミン、Ｎ、Ｎ’−ジヘンジルエチレンジアミン、ジヒドロアビエチルアミン、Ｎ−（低級）アルキルピペリジン及び任意の他の適当なアミンとのものが含まれる。

ペプチドの一般的合成本発明の式１のペプチド類は、当業者に容易に知られる種々の手順によってつくることができる。このような手順は固相逐次及びブロック合成、遺伝子クローニング、及びそれらの技術の組合せを包含している。固相逐次手順は、この分野で知られた確立された液相及び自動化法を組合せて用いて実施できる。

Ｙがアミノ置換基のアミド官能基を有する式１のペプチドは、メチルベンズヒドリルアミン型樹脂に結合されたカルボキシ末端アミノ酸を伝統的に有する。アミド官能基を有するペプチドの製造は当業者に知られている。

固相ペプチド合成の技術に知られているように、アミノＷ類の多くは合成中にＬＬ必要とするような官能基をもっている。適当な保護基の使用と選定は、保護しようとするアミノ酸と、ペプチド上の他の保護アミノ酸残基の存在に依存する。

一般にこのようなＩ１１鎖保護基の選択には、α−アミノ部分の保護基の解裂中に解裂により除去されないものでなくてはならないということが必要とされる。

例えば、リジンに適した側鎖保護基はベンジロキシカルボニル及びｉｌ　ＩＱベヘンロキシカルボニル［この置換基はハロ（例えばクロロ、ブロモ、フルオロ）及びニトロから選ばれるコ（例えば２−クロロベンジロキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジロキシカルボニル、３．４−ジクロロペンシロキンカルボニル）、トシル、ｔ−アミロキシカルボニル、ｔ−ブチロキシカルボニル、及びジイソプロピルメトキシカルボニルである。スレオニンとセリンのアルコール性ヒドロキシル基はアセチル、ベンゾイル、第三ブチル、トリチル、ヘンシル、２．６−ジクロロベンジル又はヘンシロキシカルボニル基で保護できる。好ましい保護基はヘンシルである。各々のペプチドに対する適当な保護基の選択及び使用は当業者の能力の範囲内のことである。

ポリペプチド配列へ導入される各アミノ酸に使用されるα−アミノ保護基は、この技術で知られた任意のこのような保護基てありうる。本発明での使用に考えられるα−アミノ保護基の部類には、（１）ホルミル、トリフルオロアセチル、フタリル、トルエンスルホニル（トシル）、ヘンセンスルホニル、ニトロフェニルスルフェニル、トリチルスルフェニル、０−ニトロフェノキシアセチル、及びα −クロロブチリルのようなアシル型の保護基；（２）ヘンシロキシカルボニル及び＃：ｌｌｌ！ヘンシロキシカルボニル、例えばｐ−クロロヘンシロキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジロキシカルボニル、ｐ−ブロモヘンシロキシカルボニル、ｐ−メトキシヘンシロキシカルボニル、Ｉ−（ｐ−ビフェニル）−１−メチルエトキシカルボニル、α−ジメチル−３，５−ジメトキシベンジロキシカルボニル、及びヘンズヒドロキシ力ルボニルのような芳香族ウレタン型保護基：（３）第三ブチロキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロビロキシカルボニル、エトキンカルボニル、及びアミロキシカルボニルのような脂肪族ウレタン保護基；（４）シクロベンチロキシカルボニル又はアダマンチロキンカルボニルのようなシクロアルキルウレタン型保護基；（５）フェニルチオカルボニルなとのチオウレタン型保護基；（Ｇン）リフェニルメチル（トリチル）及びヘンシルのようなアルキル型の保護基；（７）トリメチルシランのようなトリアルキルシラン基がある。

好ましいα−７ミノ侃謹基は第三ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である。

ペプチド配列の伸長は、標準的な方法、メーカーの方法、及び当業者に知られた方法を用いて行なわれた。活性化アミノ酸の結合によるペプチド鎖の伸張は、アミノ酸のし及びＤ異性体の両方について知られており、当業者に知られた結合剤を用いて一般に達成される。

適当なカップリング試薬の選択はこの技術の範囲内にある。添加アミノ酸がＧｌｎ、　Ａｓｎ又はＡｒｇの場合の特に適したカップリング試薬は、Ｎ、Ｎ’−ジイソプロピル力ルポジイミトと１−ヒドロキシヘンシトリアゾールである。これらの試薬の使用はニトリル及びラクタムの形成を予防する。その他のカップリング剤は（１）カルボジイミド（例えばＮ、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイミドとＮ−エチル−Ｎ“−（γ−ジメチルアミノプロピルカルポジイミド）；（２）シアナミド類（例えばＮ、Ｎ−ジヘンジルシアナミド）；（３）ケテンイミン類；（４）イソキサゾリウム塩（例えばＮ−エチル−５−フェニル−イソキサゾリウム−３°−スルホネート）；（５）環中に１−４個の窒素を含有する芳香族性て単環の窒素含有複素環式アミド類、例えばイミダゾリＦＸ１．ビラゾリド類及び１，２．４−　）リアゾリト類、有用な特定的な複素環式アミド類はＮ、Ｎ ’−カルボニルジイミダゾールカルボニル−ジー１．２．４−）リアゾールを包含する。；（６）アルコキシル化アセチレン（例えばエトキシアセチレン）；（７）アミノ酸のカルボキシル部分と混合集水物を形成する試薬（ｆＦＡえはエチルクロロホルメートとイソブチルクロロホルメート）又はカップリングしようとするアミノ酸の対称無水物（例えばＢｏｃ−Ａｌａ−０−Ａｌａ−Ｂｏｃ）　；及び（８）一つの環窒素上に１個のヒドロキシ基をもワた窒素含有複素環式化合物類（例えばＮ−ヒドロキシフタルイミド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド及び１ −ヒドロキシヘンシトリアゾール）、及び（９）ジフェニルホスホリルアジドである。

その他の活性化試薬と、ペプチドのカップリングにおけるそれらの使用は、カブール（Ｋａｐｏｏｒ）、Ｊ．　Ｐｈａｒａ＋．　Ｓｃｉ−５９巻ｌ−２７頁（１９７０年）に記載されている。出願人らはＡ　ｒｇ。

Ａｓｎ及びＧｌｎを除き、全てのアミノ酸に対するカップリング試薬として対称的無水物の使用を好ましいと考える。

各保護アミノ酸又はアミノ酸配列は、約４倍過剰量で固相反応器に導入され、ジメチルホルムアミド：塩化メチレン（　Ｍｌ）又はジメチルホルムアミドのみ、又は好ましくは塩化メチレンのみの媒体なとの中でカップリングが行なわれる。

不完全なカップリングが起こる場合は、固相反応器での次のアミノ酸の力・ノブリングに先立って、α・アミノイ′ｉ謹基の除去前に、カップリング手順を繰り返す。合成の各段階におけるカップリング反応の成功は、イー・カイザー（　Ｅ．　Ｋａｉｓｅｒ）ら、Ａｎａｌｙｔ．　Ｂｉｏｃｈｅｍ．　３４巻５９５頁（１９７０年）に記載されるように、ニンヒドリン反応によってモニターされる。

配列カップリングの終了後、Ｂｏｃ保護基はその場に残されるか、又は除去され、Ｎ−末端アミノ基がこの分野で知られた方法でアルキル化又はアシル化される．所望のＮ−末端が形成された後、次に保護された基の除去と樹脂からのペプチドの離脱は、この分野で知られるフッ化水素溶濠を用いて達成される。

本発明の重要な面は、フェニルアラニンの類似体を式■の構造中に入れることである．一般にフェニルアラニン類似体（Ｐｈｅ−）は（１）保護されたフェニルアラニン類似体Ｐｈｅ−とじてペプチド鎖中に入れられる＊Ｐｈｅ−は修飾されたフェニルアラニンを含有するグルー及びサブグループを指すものとして一般に使用され、これには（１）Ａ，−Ｐｈｅ−及び　Ａ３Ｐｈｅ−ジペプチド類似体、（　２　）　Ｐｈｅ−Ａ２及び　Ｐｈｅ″Ａ４ジペプチド類似体、又は（　３　）　ＡＩ−Ｐｈｅ−Ａ２トリペプチド頚似体が含まれる．これらの化合物を合成する為の方法は反応経路１以下に描かれる。

Ｃｊｉ１点ｔＬ＆Ｐｈｅ−Ｈ（ＬＸ（＊（７）１＆炙（Ｒ　＝　Ｈ）式Ｉの化合物はＲ１が水素であると選択されている反応経路１に従って、修飾されたフェニルアラニン誘導体（　ｐｈｅ−）を有する配列中において式１サブユニットな入れることか出来る：　（１）ＡＩ−Ｐｈｅ−又はＡ３−Ｐｈｅ−ジペプチド類似体くあわせてここてＡ−Ｐｈｅ−と記＠　）　（２）Ｐｈｅ”−Ａ２又はＰｈｅ −−Ａ４ジペプチド類似体（あわせてここでＡ−Ｐｈｅ−Ａと記載）、又は（３）Ａｔ−Ｐｈｅ”−Ａ２又はＡ３−Ｐｈｅ−＾４トリペプチド類似体（ここであわせてＡ−Ｐｈｅ”−Ａと記載）。

反応経路１段階ド結合　↓ ↓ 段Ｆ１２：環化段階３：開環　↓ 式３の化合物はサブユニット構造Ａ−Ｐｈｅ−の合成の為に、アミノ酸が必要とされる保護基を含有している、Ａ，又はＡ３アミノ酸のいずれかと定義され得る．もし式３の化合物が保護されたアミノ酸を表わすならば、Ｒ１及びＲ２は合成の為に適当に保護されたＡ，又はＡ３アミノ酸を形成するものである．そうでない場合には式３の化合物は構造式Ｐｈｅ−のサブユニットを形成する為に式４の化合物の為の適当なα−アミノ保護基であり得る，　Ｐｈｅ−のサブユニットと一致するものは、Ａ３がアミノ末端保護基Ｘに対する結合である化合物てあり、ここてＲ，とＲ２基は適当に定義される保護基を形成するものである．もし式３の化合物がアミノ保護基であるならばそのようなα−カルボニル置換基はｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ酸又はα−アミノ保護基アセチル、プロピルなどの適当な保護されたアミノ酸を含んでいる。

式４の好ましいエステルは示されるようにり．Ｌ−３−フェニル七リン（ｔ）　、Ｌ．−β−ＰｈＳｅｒ）エチルエステルであるが他の適当な酸保護基と共に予備形成され得る．同様に好ましい具体例としてり、Ｌ−Ｐｈｅはアミドの塩で有り得る（図示なし）、好ましい塩はり、Ｌ−３−フェニルセリンアルキルエステルのｐ−）ルエンスルフォネートである。

反応経路ｌの第１の段階は式３及び４の化合物類を結合することである０式３及び式４の化合物の間のアミド結合形成はこの分野で知られた幾つかの適当な結合試薬を使用して行なうことが出来、式５の化合物を形成する。

そのような結合試薬の一つはイソブチルクロロホルメートである。

反応経路の第２段階は式５の化合物の環化である。Ａ−０し−β−ＰｈＳｅｒのアザラクトン化はへルグマン法を使用してなされる。ヘルプマン法で適当に用いられるものは式５のアザラクトン化されたフェニルセリン残基の同時の脱水である。アザラクトン化を通しる環化によって二重結合を含有するデヒドロアミノ酸が立体選択的にΔ２立体位置に導入される。

反応の第３段階はアザラクトンの開環である。これは環の環化されたカルボニルの親核攻撃によって達成される。ここでこの戦略は適当なカルボニル末端保護デヒドロフェニルアラニン（△ｐｈｅ）を提供する為に用いることが出来るか、又はｌ又はそれ以上の隣接するアミノ酸にアミド結合を形成する為に用いることが出来、ここであとのアミノ酸のαアミノ基はアザラクトンの開環の為の適当な親核試薬を提供している。この後者の戦略は、与えられたペプチド配列中に絹み込む為に、Ｐｈｅ−Ａサブユニット＾−Ｐｈｅ−Ａ　）リペプチドサブユニットの化合物を合成する為に使用できる。

４番目の段階はΔｌ立体配置に選択された（１飾されたフェニルアラニンを有しているｐｈｅ−ペプチドを単離することである。

所望のｐｈｅ−立体配置ペプチドの単離に続いてΔ’ｐｈｅペプチドは式Ｉペプチドの合成の為樹脂支持体に結合されるか、又は別の方法として、前に合成されたペプチド配列中に絹み込むことが出来、式１１の化合物を与える。

別の方法としてｐｈｅ°ペプチドがペプチド配列の他のサブユニットと共に絹み込まれる前にΔＥコンフォーマーは光異性化によって形成できるか及び／又はＰｈｅ−のアミノ窒業はアルキル化できる。

Ｐｈｅ−ペプチドサブユニットは、追加的な合成の為の樹脂支持体上に直接ｐｈｅ°ペプチドを組み込むことにより、又はサブユニットとして、後に固体支持体上での合成中に、ペプチド配列の他のサブユニットに連結できる。別の方法として複数のアミノ酸サブグループを液相法によりまたは固相法と組合せて結合できる。

Ｐｈｅ−α保護基は任意の適当な手順、例えば塩化メチレン中のトリフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸単独、またはジオキサン中のＨＣＩを使用する等によって除去できる。脱保護は０℃から室温の間の温度で実施される。特定のαアミノ保護基の除去の為の他の標準の解裂試薬及び条件を使用できる。αアミノ保護基を除去した後、他のアミノ保護アミノ酸は前に述へたように所望の順序で段階的に結合される。同様にｐｈｅ−サブペプチド単位のカルボキシ保護基は除去でき、そして適当に脱保護されたサブユニットに組み込むことが出来る。

式１１のペプチド中の様に、Ｐｈｅ−サブユニットが配列の一部として絹み込まれる事が望まれる時は、カルボキシ保護基は除去出来、そしてその後適当な結合試薬を使用して既存の配列に結合できる。

所望のアミノ酸配列が得られた後、ペプチドは樹脂から除去される。これは樹脂結合ポリペプチドをジクロロメタン（ＤＣＭ）中のアミノ酸アルコール及び酢酸で処理するなと加水分解によって行なうことができる。保護基はこの技術で周知の他の手順によって除去できる。典型的には、保護基の除去はペプチド鎖合成が完了してから行なわれるが、保護基はその他の任意適当な時に除去できる。ベブチ）＄１１１は、主に分離用逆相高性能液体クロマトグラフィ及び当業者に知られた手法によって達成される。

鳳」ＬＬｈ　ｔｓ月ドニ限」１札０＝或−り凪工己四しビニ旦」工水発明の化合物はαアミノ基のＣ３〜Ｃ４１１！飾を有しているＰｈｅ−誘導体も含む。

反応経路１１はＲ４がメチル、エチル、プロピル、ブチル、または類似の、与えられた修飾フェニルアラニンのα窒素のＣ１〜Ｃ４炭素原子のアルキル置換基である式７Ａの化合物を造ることを示している。

反応経路１１ ↓Ｃ１１３１、に２Ｃ６３，１８−ＣＲＯＷＮ−６Ｒ＝Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−）１ｉｓアルキル化は適当なアルキルハライドを使用して実施できる。特定して言うとＲが水素の式７の化合物は、アルキルハライドとのその後の反応にかけられ、式７Ａの修飾されたジペプチドを造ることが出来る。示されているのは置換基Ｒ４基がメチルである溶化メチルとの反応である。Ｃ１〜Ｃ４の池の所望のアルキル化誘導体を対応するアルキル化ハライドを使用して形成することが出来る。

反応経路１１に従って式７ペブチトはＣ１〜Ｃ，ｌアルキルハライドとの反応によってアルキル化出来る。反応経路１１に示されているのは１８−クラウン−６の存在下で炭酸カリウムの溶液中てＢｏｃ−Ｌｅｕ−Δ”−Ｐｈｅ−ＯＭｅとヨウ化メチルとの反応によって合成されるＢｏｃ４ｅｕ−Δｚ−（Ｃ）１３）Ｐｈｅ−ＯＭｅである。メチル化ペプチドＢｏｃ−Ｌｅｕ−△”−Ｐｈｅ−ＯＭｅは次にＢｏｃ保護基の脱保護の後、ペンタペプチドブロックＡｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−１１ｉｓ−０１１と反応される。

別の方法として、アルキル化反応の選択性の為、ρｈｅ−ペプチドを大きなペプチド配列中に組み込んだ後にｐｈｅ”ペプチドを還元的アルキル化にかけることが出来る。ペプチドのアルキル化はＣ１〜Ｃ４アルキルとしてＲ１を有している式１１の類似体を合成するのに用いる時に適している。

７または７Ａペプチドの光異性化は反応経路１１１に示される。

反応経路ｌ１１Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−△２−Ｐｈｅ−ＯＭｅが△ｌ及び△ε立体配置の異性体混合物に光異性化されているのが特定して示されている。

光異性化は好適な光伝達溶媒中に７又は７Ａペプチドを入れることによってなされる。好ましい溶媒はＤＭＦ／Ｍ　ｅ　ＯＨである。ペプチド溶液を次に適当なフィルターを用いて光分間反応室中で照射する。

水銀アークランプによる光源を試料をＩＫ！射するのに使用する０反応は異なる間隔てサンプリングし、そして分析的ＲＰ　／　＋１　Ｐ　Ｌ　Ｃによって反応をモニター−することによって、理想的な時間と照射の強度を決定する。各異性体は分離用ＲＰ　／　ＩＩ　Ｐ　Ｌ　Ｃによって単離することが出来、そしてそれらの構造は分析的に確認される。

治療的用途本発明のペプチド誘導体かボンへシンのアゴニスト又は拮抗剤として作用する能力は、ファンガーら、Ｒｅｇ、Ｉ’ｅｌ）１３２：２４１−２５１．１９！’１１．の方法を使用して、そのようなペプチドが放射性ヨウ素化ボンへシン／ＧＲＰと、噴孔類のボンヘノン／ＧＲＰ受容体について競争する能力によって実証出来、そしてファンガーら、Ｒｅｇ、Ｐｅｐｔ、３２：２４１２５１゜１９！３１．の方法を使用して、ボンへソン誘発フォスファチジルイノシイトールの代謝回転を刺激するその化合物の能力によって、実証することが出来る。この化合物はボンへシン受容体と相互作用するので受容体応答のそれらの７ゴニズム又は拮抗の知識は、この分野のボンへシン作用化合物で知られる様な可能性ある冶僚法を示されることを可能とする。

消化の刺激／抑制ボンへシン類似体が消化を刺激する特定の薬類学的効果は全身的（土羽によって刺激された。例えばボンへシン類似体を静脈内注射すると胃酸の分泌を刺激できる［つオルシュ、Ｊｌ、Ａｎｎｕ、　Ｒｅｖ、　Ｐｈ　５ｉｏ１．５０．４１− ６３、（１９８Ｂ）に於いて調べられている］。ボンへシンペプチドの末梢及び中枢の投与の両方が胃をからにすることを遅らせる一方、試験管内で胃腸の平滑筋を刺激する。また、例えばボンへシンの外部からの１２与が、単離された血管ＷＩ流クラット胃の中のガストリンとソマトスタチンの両方の放出を誘発する。

同様にモルモットの心房（ａｎｔｒｉｕｍ）縦方向筋肉片は自発的な収縮の頻度を直接刺激し、そして結腸の粘膜筋の収縮を指示する。しかしながらこれらの効果はそれらの投与が脳又はを髄に対する投与であるならば、起きないかもしれないことに注意すべきである。

そのペプチドを消化を刺激／抑制するために出願人が使用するのは、従ってこれらの効果が消化の必要なメカニズムと一致するとき、そして末梢の投与と一致するときに有用である（即ち脳又はを髄に注射されない）。

消化性；＊　＊疾患の自然な経過は、反復する悪化と鎮静である。このため、潰瘍性疾患は慢性病として処置されるへきである。消化性（食道、胃、及び−二指ｍ＞潰瘍は、酸とペプシンに露出される胃腸管の区域に生ずる。

ボンへシンレセプターの拮抗剤である本発明化合物類は、胃腸及び／又は膵臓のイ責瘍を処置するのに有用であり、また膵臓及び／又は胃から生ずるその結果の過剰な分泌、特に塩酸とペプシンの過剰分泌に対して有効である。このようなものとして、本発明化合物類は潰瘍を処置するための適当な介入剤として役立つ。

成長の刺激／抑制ボンベシンのｌＩ胞裏表面レセプターの結合は、幾つかの組織に於ける細胞の有糸分裂応答を刺激する。ボンベンンペプチドが有糸分裂発生剤として機能できることについての最初の実証はスイス３Ｔ３ねすみ胚繊維芽細胞に対して実証された。［ロセンカート及びシンネット−スミス、ＢＢＲＣ１４０，３７９−３８５（Ｉ！１１８３）］。レブレサ［レブレサＪ、Ｊ、、等Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　１０２．８７−９６　（１９８８）コによる後の研究でボンへシンが細胞分裂、及び成長が拘束された目の嚢胞の発達を再活性化できることが示された。同様のクローナル成長速度における増加及びコロニー形成効率がウィリー等、１９８４によってＧＲＰとＧＲＰＵＩＩｕ体に対し観測された［ウィリー、Ｊ、Ｃ，、等、Ｅｘｐ、　Ｃｅ１ｌ　Ｒｅｓ　１５３．２４５−２４８　（１０８４）］。

幾つかのグループが幾つかの大小細胞肺癌細胞系統に於いて、ボンへシン／　ＧＲＰに対する高親和性レセプターの存在を観ＩＩＩし、そしてボンへシンが培地に加えられたペプチドと共にチミジン取込の水準を高めることが出来たことを観測している［ウニバー等、Ｊ、Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、７５．３０６−３０９　（１９８５）：カーネー等、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ、　４７．８２１−８２５、（１り８７）を繋照］。ラットの胃の洞粘膜中のガストリン細胞に対する測定可能な影響がレヒ［レヒ等、Ｇａ５ｔｒｏｅｎｔｅｒ＋＋ｌｏｇｙ、８４．９１４−９１９　（１０８３）］によってボンへシンのあとに続いて認められた。ボンヘシンの慢性的処置はまた、投与に依存する膵臓細胞の肥大を誘発することが示された（ロステ等、１９８５ａ　）　、成長を刺激するためにペプチドを出願人が使用することは、従ってこれらの効果が成長の必要なメカニズムと一致するとき、そして末梢投与で見られる効果と一致するときに有用である。

がん療法へのボンへシン拮抗剤の使用は、小細胞肺癌（５ＣＬＣ）及び前立腺がんの処置と、その他種々のがん症状の予防に対して示唆される。この分野の経験者は、がん療法を必要とする状況を容易に認識できる。

本明細嘗て使用される用語「腫Ｎ’ＡＷａｒとは、良性及び悪性の腫瘍又は新生物を意味し、メラノーマ、リンパ腫、白血病、及び肉腫を包含する。Ｉ！瘍組織の例示は、悪性メラノーマと菌状息肉症のような皮膚腫瘍；白血病、例えば急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄球性白血病、又は慢性骨髄球性白血病のような血液性１！瘍；ホジキン病や悪性リンパ腫のようなリンパ腫；卵巣及び子宮Ｉ！瘍のような婦人科のｌｌ！瘍；前立腺、膀胱、又は〒丸のＩ！瘍のような泌尿器系の腫瘍；軟組織肉腫、骨性又は非骨性肉腫、乳房のｌＩＩ瘍；下垂体、甲状腺、及び副腎皮質の腫瘍；食道、胃、腸、結腸の腫瘍のような胃腸管のｌＩ＊瘍；膵臓と肝臓の腫瘍；喉頭乳頭腫及び肺腫瘍を包含する。

用語「成長を抑制する」及びがん処置の考え方は、温血動物の急速に増殖する腫瘍の成長と転移を鈍化、中断、抑制、又は停止させることを意味する。温血動物の処置は、！！瘍細胞が必ず破壊されるか、或いは全面的に排除されるという意味での腫瘍の「治癒」を一般に提供するものではないことが理解される。

治療的投与本発明のペプチド誘導体の患者の処置に使用する時の適当な投与量は、１日当たり患者の体重ｋｇ当たり０．２ｍｇ／Ｊないし２５０　ｎｇ／ｋｇであるが、特定の患者及び選択されるペプチド誘導体を含めた他の要因によって変わる。特定の芝５者に適した投与量は、容易に決定できる。典型的には、投与量適たり活性化合物５−１００　Ｂで、−日１〜４回投与されるのが好ましい。必要な本発明のペプチドの量は、当業者に容易に決定できる。

本明細嘗て使用される用語の「患者」とは、ヒトを含めた霊長類、羊、馬、牛、豚、犬、猫、ラット、及びハツカネズミのような哺乳類を意味するものとして扱われる。

ペプチド誘導体類の幾つかは経口投与後、ｌｉを通過して生き残り得るが、出願人らは非経口投与、例えば皮下、静脈内、筋肉内又は腹膜内；デボ−注射による投与；移植製剤；又は鼻、のど、電管なとの粘膜へ、例えば本発明のペプチド誘導体を含有するアエロゾル缶で、スプレー又は乾燥粉末型としての適用が好ましいと考える。

非経口投与には、化合物類は製薬担体を伴った生理学的に受入れられる希釈剤中の化合物の溶液又は懸濁液の注射可能な適量投与物として投与でき、製薬担体は、表面活性剤その他の製薬上受は入れられる助剤の添加を伴って、又は伴っていない水や油類のような滅菌液体でありうる。これらの製剤に使用できる油類の例は、石油、動植物、又は合成起源のもの、例えば落花生油、大豆浦、及び鉱油である。一般に、水、食塩水、デキストロース水溶液、及び関連する糖溶液、エタノール及びプロピレングリコールやポリエチレングリコールのようなグリコール類が、特に注射ンα用に好ましい液体担体である。

実施例この実施例は次の非限定的実施例により説明される。

実施例１と」二に」二Ｚフー乞渉工り二−ＬＬｄ二社ニし工≦ヨ火」と去＞ｘ二り基エステル（１）ｐ−）ルエンスルホン酸（０，０（ｉ７モル　１２．７ｇ）及び　［１，Ｌ−３ −フェニルセリン（アルドリッチ）（６，０ｇ、０．０３３モル）のエタノール溶液（５０１１１）を２４時間還流した。溶媒を除去し生じる残留物を繰返しエーテルで洗浄し白色固体を生じた（１２．８ｇ収率９５％）。Ｒｒ（Ａ）０．６３；融点１６５１６７℃。

第三ブチルオキシカルボニル−ロイシルＤ、Ｌ−フェニルセリ　ン　（２）３０ｍｌの乾燥テトラヒドロフラン中のＢｏｃ−ロイシン−（１゜７ｇ、７．５モル）の溶液を一５℃に冷却し、Ｎ−メチルモルホリン（０，９９ｇ、８．０モル）及びイソブチルク口ロホルメー）　１．０ｇ、７．５モル）を加え１時間攪拌した。１０１のジオキサン／水（７：３）であって、トリエチルアミン（０，９０９ｇ、８゜９モル）を含有するもののなかの１の溶１夜（３，０ｇ、７．５モル）を製造した。混合物を３時間攪拌し水を加えテトラヒドロフランを蒸発させた。生しる油をＥｔＯＡｃて抽出し通常のワークアップにかけ、油を生しく２゜９ｇ、０．００７モル、収率９４％）、ＴＬＣで均質物であると判断された。

（Ｒｒ（Ａ）０．９１゜Ｒｒ（Ｂ）０．７０）、このエーテルを２０１のメタノール中に溶解し、２０１のＩＮ水酸化ナトリウムを加えた。混合物を３時間攪拌し次に真空で１縮した。水溶液を氷上で攪拌しながら４Ｎ塩酸で酸性にし、そして溶液なＥｔＯＡｃて抽出した。プールした抽出物を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空で蒸発させ、白色固体を生し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶した（２．７ｇ、９５工収＄）。Ｒｆ（Ａ）０．７９．Ｒｒ（Ｂ）０．８３．　融点７５〜７８℃。

Ｂ　ｏ　ｃ　−Ｌ　ｅ　ｕ−Δ１Ｐｈｅ（３）のアズラクトン６１の無水酢酸中の２　（２，６ｇ、６モル）と酢酸ナトリウム（０，５ｇ）の溶液を室温で８時間攪拌した。反応を真空で蒸発乾固した。生じる残留物を、ＥｔＯＡｃ（６０ｍｌ）及び水（２０ｍｌ）と共に攪ｒｌ　Ｌ、、水相をＥＬＯＡｃから分離した。

ＥｔＯＡｃ抽出物を通常のワークアップにかけ生しる白色固体をエーテル／ヘキサンから再結晶した。（収率１．８６ｊ；、９０％）：Ｒｒ（Ａ）０．８８．　Ｒｒ（Ｂ）Ｏ，Ｇ１３：融点１１８〜１２０℃。

Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Δ”−Ｐｈｅ−アズラクトンの開環を０．７１０５ｇ（１，９モル）のペプチド及び０．０２３ｇ（０，１９モル）のＤＭＡＰを３０〜４０１のメタノ−中におよそ１２時間置くことによって達成した。反応を酢酸エチル中て酸及び塩基洗浄でワークアップし、白色固体を生じた。残留物を酢酸エチルヘキサンから再結晶した（収率０．７０ｇ）。Ｒ、（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン、ｌ：ｌ）　０．４８、Ｒｒ（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン：アセトン。

２：ｌ：ｌ）　０．７７、Ｒｙ（ｔ−ＢｕＯＨ：１ｌＯＡｃ：１１２０．２：ｌ：ｌ）０．８９．　ｗ１点１８２℃（補正していないガーレンカンブ）。

Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ −Δ”Ｐｈｅ−ＯＭｅ（５）Ｔ−Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−ΔＺＰｈｅ−を３０１のＣＨ２Ｃｌ２：ＴＦＡ（１：０．７５；ｖ／ｖ）中に混合した。溶媒を除去し、Ｈ− Ｌｅｕ−Δ”Ｐｈｅ−Ｏｗｅをえた。この残留物を、エーテルとすり砕き、白色固体として単離した。これを、次に２０ｍ１のＤＭＦ中の　Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ− Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−ＯＨ（３６ｍｇ）と反応させｐｎを７．０にジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）で調節しそしてジフェニルホスホリルアジドを加えた（ＤＰＰＡ；９μリツトル）、脱保護化合物４を反応混合物に０℃で加え、−夜反応させた。

反応混合物から次にＤＭＦを蒸発させ、生じる混合物を逆相高性能液体クロマトグラフィ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）上で精製した。

ＦＡＢ−ＭＳは生成物の所望の塊を確認した。アミノ酸分析を使用して生成物のアミノ酸組成物を期待通り確認した。

Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌ　−Ｈｌｓ−Ｌｅｕ −ΔＥＰｈｅ−ＯＭｅ（６）デヒドロ−Ｚ−フェニルアラニンの組込をベルブマン法によってＴ−Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−△ｚＰｈｃ−ＯＭｅの製造を通じて達成した。

配列を延長していフて所望の類１ｇ体を与えることを、液相断片カップリングで達成した。Δ口への光異性化は、Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−）１ｉｓ−Ｌｅｕ−Δ”Ｐｈｅ−ＯＭｅ　で達成した。Δ２化合物（ｌｏ、ｏｍｇ）を３００１のＤＭＦ／ＭｅＯＨ（１：　Ｉ　。

Ｖハ）中に溶解し、光分解反応室中で照射したくエースグラス）　、　３００ｎｍ以下のＵＶ光をフィルターしてしまう為にパイレックスガラススリーブフィルターを取り付けた水銀アークランプと共にハノビア電源を用いた。反応室を攪拌しながら水冷した。分析的ＲＰ／ＨＰＬＣによってモニターしながら反応を３．５及び５時間においてサンプリングした。反応溶Ｉαを次に回転蒸発によって１縮し、分離用ＲＰ　／　ＨＰ　Ｌ　Ｃによって精製した。凍結乾燥フラクション類を次にＦ　Ａ　Ｂ　／　Ｍ　ｓによって分析し、そしてアミノ酸分析は所望化合物であることを確認した。

これらの種類の手順によって合成される他の実施例にはぜ欠のものが含まれる・（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｌｅｕ”、Δ”Ｐｈｅ９）リ　ト　リン−ＯＭｅ（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｌｅｕ８．Ｎ（閂ｅ）Δ１Ｐｈｅ９）リ　ト　リン−ＯＭｅ（Ａｃ−０−Ｐｈｅ’、Ｌｅｕ８．Ｎ（Ｅｔ）△”Ｐｈｅ９）リ　ト　リン− 〇Ｍｅ（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｌｅｕ”、ΔＥＰｈｅ９）リ　トリンーＯＭｅ（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｄ−Ａｌａ６．Ｌｅｕ８．Ｎ（Ｍｅ）△’ｒ’ｈｅ９）リ　トリンーＯＭｅこれらの手順によって造られ得る化合物には次のものが含まれる。

Ｇｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−△”Ｐｈｅ−Ｐｈｃ４ｅｕ −ＯＨＧｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｔ−Ｇｌｙ−１１ｉｓ−Ｌｅｕ− △’Ｐｈｅ−ＯＭｅＧｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ −Ｌｅｕ−Ｎ（Ｃ）１３）△”Ｐｈｅ−ＯＭｅＮａ　−７’ｔチル−Ｄ−Ｐｈｅ −Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−〜’ａｌ−Ｈｉｓ−ΔεＰｈｅＮａ　−？七ｆ１１ −Δ　’Ｐｈｅ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｔ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ− Ｌｅｕ実施例２１又はそれ以上のマウスからのすい臓をプールし、モして１２０ＩＩＭＮａＣ１，５ｍＭにＣ１及びプロテアーゼ阻害剤１ｍ　（ｊμｇ／ｌアプロチニン、ロイペプチン、ペプスタチン；４ｇｇ／ｌのバシトラシン、アンチパイン、ヘスタチン；１００μＭ　Ｐ　Ｍ　Ｓ　Ｆ　：　ＩｍＭ　ＥＤＴＡ）を含有している５０ｍＭｈ　ＨＥ　Ｐ　ＥＳ　（ｐ）１７．４）中で４℃でホモチナイズし、３７，５００ｘ　ｇて１５分間遠心した。ペレットをｌｏｍＭＥ　Ｄ　Ｔ　Ａ　、　３００＋ｓＭＫ　Ｃ１及びプロテアーゼ阻害剤類を含有している５０＋ＭＨＥ　ＰＥ　Ｓ　（ＩＩＨ，７，４）中に再懸濁し、次に４℃で３０分間培養した。懸濁漬を上記の様に遠心しそしてベレットを０．８μｇ／ｌチオルファン及びプロテアーゼ阻害剤類を含有している５０＋＊ＭＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ　（ｐＨ，７，４）中で２回洗浄し、再度遠心分離した。組織を次に培養緩衝液（４ＩＩｇすい臓あたり１　ｍｌ）中に再す濁し、室温で１５分間培養し次に２５０μリツトルを検定開始の為に各検定試験管に加えた。培養緩衝液ヲ含有シテイル検定試験管は５０ｗＭ　ＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ　（ｐＨ７，４）、０．５％ＢＳＡ、プロテアーゼ阻害剤類、：）＋Ｍ　ＭｎＣｌ２．０．８μｇ／ｍｌチオルファン、１μ門ソマトスタチン、及び種々の１度の１２５１−ＧＲＰ及び必要とされるペプチド類であって最終容量５００μリツトルからなっている。平衡まで検定を９０分閉室温で進行させた。この時間の後に各試験管の内容物を急速に０．１％ポリエチレンイミン中に予Ｉｌｌ漫ｉｉａ！　Ｌ／たワットマンＧＦ／Ｂろ紙上で急速に濾過しソシテ試験管トロ紙を急速に氷冷５０ｍＭＨＥ　Ｐ　Ｅ　Ｓ　（１））１７．４）で３回洗浄した。ろ紙に結合した放射能をガンマ計数管中で定量した。試験化合物又は標準物質によるヨウ素化ＧＲＰ結合の競争を、ペプチドの非存在下での１２５１−ＧＲＰ結合のパーセントとして表現した。ｎ相性と最大結合をＬＩＧＡＮＤで計算したく英国ケンブリッジのバイオソフト）。

実施例３ホスファチジルイノシトール代謝回転により実証されるボンへシン受容体呵１工土類似体の効果マウスからのすい臓を３５０μｍで組織チョッパーで細かく切りそしてクレブス（Ｋｒｅｂｓ）　−ヘベス（Ｈｅｐｅｓ）″ｔｊ！衝Ｉｒｌ中にプールした［　ｌｌ８ｍＭ　ＮａＣｌ、１．２ｍＭ　Ｋ２ＰＯ４，４，７ｍＭにＣ１、１，２ｍＭ　ＭｇＳＯ４、１，ＯｍＭ　ＣａＣｌ２、　ｌ　Ｉ　、　７ＩＩＭグルコース、２０＋ｎＭ　Ｈｅｐｅｓ（ｐＨ７，４）］　、細かく切った組ｍを酸素化したクレブス−・＼ペスて一度洗７９シ、次に３７℃のｍ素化したクレブスーヘベス緩？ｌｉ　ＲＩ中で３０分閉環養し、ここで１５分後に新たな緩衝液とした。組織を次に２００μＣｉの［：３Ｈ］イノシトールを含有しているこの緩衝液中で３７℃で１時間培英した。組織を次に２度洗浄し、更に３０分閉環素化クりブスーヘペス（ｌｏｍＭＬビを含有）中で３７℃で培養しそして１５分後に新たな緩衝液に変えた。

組織の塊の一部（検定試験管あたりおよそｌ０Ｂ）を次にプロテアーゼ阻害剤類（４０μｇ／ｍｌパンドラシン、４０μ８／−１０イペブチン、４μｇ７ｍｌキモスタチン、０．８μｇ／−１チオルファン）、０．１％ＢＳＡ、及び０．１− １０００μ門ペプチドと共にい゛緩衝液中に入れた。室温で６０分復水スファチジルイノシトール代謝回転を９４０μｍクロロホルム：メタノール（１：２）の添加によって停止し、続いて３１０μｍのクロロホルム、続いて３１０μｍの水によフて停止した。各試験管を次に各回５８間３回渦巻かせそして次に２５００Ｘｇて８分間遠心分離し、相を分離した。５０μｍの底の層（クロロホルム）を各試験管から抜出し、計数バイアル中に入れ、乾燥し、螢光流体中で計数した。

９００μｍの上の層（水層）を次に２．１ｗｌの水と混合し、そして０．５＊ＩバイオラドＡＣ弓×８（ホルメート）イオン交換カラムに装填した。カラム上の物質を順番に（１）　１０ｍ１の水（２）　５１１１の５＋ｍＭジナトリウムテトラボレー）　／６０ｍＭ蟻酸ナトリウム（３）０．１Ｍ蟻酸中の１Ｍ蟻酸アンモニウム１０１で洗浄した。最後（第三）の洗液を集め１１を１４１のバイオ− セーフ又はＥ−カラム螢光剤と混合しそして計数した。

これらの計数ＩＩＩＩ（合計イノシトールホスフェート類）の対応する有機相の計数ＩＩｍ（組織中に取込床れたイノシトール）に対する比を次に各試料について計算した。試験化合物及び／又は標準物質の存在下に於ける比率は、次に対照試験管（即ち刺激性アゴニストが存在しない場合）に刻する比と比較された。ホスファチジルイノシトール代謝回転を刺激する試験化合物の能力をコンピュータープログラムの助けを惜りて測定した。

表１中に以下に挙げられるのは合成されたボンへシン類似体に対する受容体親和性（Ｋ　ｄ　）及びＰ＋代謝回転についての幾つかの実験の結果である。

表１ ■ガストリン放出ペプチド　０．０７＋−■ボンへシン　Ｏ，＋５＋− ■リドリン　０．０７５　＋　− ｒＶ（Ａｃ−Ｄ４ｈｅ１．Ｌｃｕ’、△”Ｐｈｅ９）リトリ＞−ＯＭｅ　１．１８　（＋）　”Ｖ（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’、１．ＣＨ８，Ｎ（Ｍｅ）ΔｚＰｈｅ９）リドリン−ＯＭｅ　（＋）　Ｎ、Ｄ、　Ｎ、Ｄ。

■（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｌｅｕ’、Ｎ（Ｅｔ）Δｚｒｈｅ９）リド１ルーＯＭｅ　（＋）　Ｎ、Ｄ、　Ｎ、Ｄ。

１’１ｌ（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｌｅｕ８．△εｐｈｅ９）リドリン−ＯＭｅ　１８．５６　（＋）　（−）■（Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ’　、Ｄ−Ａｌａ６．Ｌｅｕ’、Ｎ（Ｍｅ）△ＥＰｈｅ９）リドリン−ＯＭｅ　６５．３３　＋　−ＩＸ（Ｐｈｅ８ψ［ＣＨ２５０２コＬｅｕ９）リドリン　９．９　（−）　＋（Ｎ、Ｄ、＝測定されず）正及び負のアゴニスト又は拮抗剤活性がそれぞれ十又は−の印で示される。０内の十及び−の印は試験からの予備的な結果を示している。

表１において挙げられたペプチドは方法の所で記載した様にマウスのすい域中の競争的な結合とＰＩ代謝回転決定の両方に於て試験された。類似体ＩＶは最も高い親和性で結合する。ＩＶは拮抗剤であるが、図２に示されるように部分的なアゴニスト活性を有している。Δ［立体配位のものはアゴニストであってΔｌよりもより弱い受容体親和性を有している。ΔｚＰｈｅ残基のＮ−アルキル化はアゴニストを生じるよってある（Ｖｌｌ＋）、下から２番目のアミド結合で骨格置換を含有している以前に報告されたプソイドペプチド拮抗剤（１×）とこれは対象的である。

配列リスト（１）一般情報（ｉ）出願人：エトワーズ、ジャトソン　ブイファンガー、ブラッドフォード　ディー（１、発明の名称：ボンへシンのフェニルアラニン類似体（ｉｉｉ）配列数：１２（１ｖ）連絡先（Ａ）　宛先：マリオン　メレル　ダウ　インコーボレーテット（Ｂ）　街　：　２＋１０イースト　ガルプライス　口−ド（Ｃ）　市　：シンシナチ　ピーオーボックス＋５６３００（Ｄ）　州　ニオバイオ（Ｅ）　国　ニアメリカ合衆国（Ｆ）　郵便番号：　４５２１５−６３００（ｖ）コンピューター読取り形式（Ａ）　媒体タイプ：フロッピーディスク（Ｂ）　コンピューター　：　ＩＢＮ　ＰＣ互換型（Ｃ）　Ｏ５：　ＰＣ−ＤＯ５／ＭＳ−ＤＯ５（０）　ソフトウＩ７：Ｐａｔｅｎｌｎ　Ｒｅ１ｅａｓｅ　雲１．０＋Ｖｅｒ、１１１．２５（ν））現在の出願データ（Ａ）　出願番号：Ｕｓ（Ｂ）　出願口　：（Ｃ）　分類　。

（ｖｉｉｉ）弁理士／代理人情報（Ａ）　名前：コリアー、ケネス　ジエイ（Ｂ）　登録番号：　３４．９８２（Ｃ）　参Ｗ　／　Ｆ”ｆ　ッ）番号：　ＭＯ＋６１４　ＵＳ（１ｘ）テレコミニュケーション情報（Ａ）　電話：　（５１３）　９４８−７８３４（８）　ＦＡＸ　：　（５１３）　９４８−７９６１（Ｃ）　テレックス：　２１４３２０（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：ｌに間する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ２７ｇのアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）分子タイプ：蛋白質（１ｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：修飾位置（Ｂ）　位置　：２７（０）他の情報　二／注二″カルボキシ末端でのメチオニンのアミド化” （１ｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：１１飾位置（Ｂ）　位置　：　１．．２７（Ｄ）　他の情報　：／注＝″大ガストリック放出ペプチド（人Ｇ　ＲＰ　）　 ” （ｘｉ）　配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　５Ｅ（１１０ＮＯ：Ｉ：Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｍｅｔ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｎ　ＨｉｓＴｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｈｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２＋ｍ間する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ１１４個のアミノ酸（Ｂ）　種類二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：蛋白質（ＩＸ）特徴（Ａ）名前／キー：１［１飾されている場所（８）位置　：１（Ｄ）他の情報　：／注：゛２＼ａａはピロリドンカルボン酸”（ｉｘ）特徴（Ａ）名前／キー：１１マ飾されている場所（Ｂ）位置　：１４（Ｄ）ｔｌｈの情報　：／注＝”カルボキシ末端のメチオニンのアミド化” （ＩＸ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）位置　：　１．、＋４（０）他の情報　：／注＝゛２両生類ボンへシン”（＼１）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２：ＸａａＧｌｎＡｒｇＬｅｕＧｌｙＡｓｎＧｌｎＴｒｐＡｌａＶａｌＧｌｙＨｉｓＬｅｕＸａａ（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：３に間する情報（ｉ）配列の特徴（Ａ）　長ざ１９個のアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ＩＩ）配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）：ペプチド（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：（１マ飾されている場所（Ｂ）位置　：１（Ｄ）他の情Ｎ：／ｉ主＝　”　Ｘ　ａ　ａはピロリドンカルボン酸”（１ｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）　位置　：９（０）他の情報　：／注：゛′カルボキシ末端でのメチオニンのアミド化” （１ｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）　位置　：　１．．９（Ｄ）　他の情報　：／注＝”両性類リドリン”（ｘｌ）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：３：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｉｒ１ｓ　Ｐｈｅ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　１０１１０：４に間する情報（ｉ）配列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（８）　タイプ：アミノ酸（０）トポロジー：直鎖状（１１）配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：ペプチド（１ｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）　位置　：１（Ｄ）　Ｉｌｌ！の情報　：／注＝”Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ”（ｉｘ）特徴（Ａ）　名前／キー：ｖｉ飾されている場所（Ｂ）　位置　：９（０）　他の情報　：／注＝ｌ′デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ”（ｘｉ）　配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：４：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　）ｌｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５ニ間する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ：９Ｎのアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）配列ノルＪ類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：　ヘア　チト（１χ ）特徴（Ａ）　名前／キー：ペプチド（Ｂ）　位置　：１（Ｄ）　他の情報　：／注”Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ”（１λ）特徴（Ａ）　名前／キー；１１；飾されている場所（Ｂ）　位置　：９（Ｄ）　他の情報　：／注＝”Ｎ（Ｍｅ）、デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ″（λ １）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：５：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｈｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：６に間する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ１９ｇのアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：ペプチド（１に）特徴（Ａ）名前／キー：ｌｌｉ飾されている場所（Ｂ）位置　＝１（Ｄ）ｆｌ！！の情報　；／注：”ＡＣ−Ｄ−Ｐｈｅ”（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー＝Ｉｌｌ飾されている場所（Ｂ）位置　：９（Ｄ）他の情報　：／注＝”Ｎ（Ｍｅ）、デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ”（ｘｌ）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｈｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯニアに関する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（０〉トポロジー：直鎖状（１１）配列（＋）　ＩＩ　ｘｉ　（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：　’＜　ブチ）（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）位置　：１（Ｄ）他の情報　：／注＝”Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ”（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：（１飾されている場所（Ｂ）位置　：９（Ｄ）他の情報　：／注：゛デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ”（ｘｉ）　配列（ＳＥＱＵＥＮｃＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）　：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯニア：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　）ｌｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＯ１０ＮＯ：８ｉ、：関する情報（ｉ）　ｌＲ，列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（８）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（目）配列（Ｄ　ｆ（Ｘｉ　（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：　ペプチド（ｉｘ）特徴（Ａ）名前／キー：１１！飾されている場所（Ｂ）位置　：１（０）他の情報　：／注：”Ａｃ−Ｄ−Ｐｈｅ”（１λ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）位置　二６（Ｄ）他の情報　：／注：”Ｄ−Ａｌａ”（ｉｘ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（Ｂ）位置　：９（Ｄ）他の情報　：／注＝１’ＢＭｅ）＋デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ”（ｘｉ）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：８：Ｘａａ　Ｇｉｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｘａａ　Ｈｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：９に間する情報（ｉ）配列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：ペプチド（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（８）位置　：Ｉ（Ｄ）他の情報　：／注”’Ｇｌｐ” （ＩＸ）特徴（Ａ）名前／キー：　ＩＩ！飾されている場所（Ｂ）位置　＝７（Ｄ）他の情報　：／注＝″デルタ　ｚ−Ｐｈｅ”（ｘｉ）　Ｆ！２列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　ｌ［ｌ　ＮＯ：９：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｘａａ　Ｐｈｅ　Ｌｅｕ（２）　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：ｌＯに間する情報（１〉配列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（０）トポロジー：直鎖状（１））配列の種類（ＭＯＬＥＣＵＬＥ　ＴＹＰＥ）　：ベブチト（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：　ｔ１飾されている場所（Ｂ）位置　：　Ｉ（Ｄ）他の情報　：／ｌ主”’Ｇｌｐ”（１ｘ）特徴（Ａ）名前／キー：修飾されている場所（［＋）位置　：９（Ｄ）他の情報　：／注：゛°デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ”特表千７−５０５８６５　（１５）（ｘｌ）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）　：　Ｓεα１０　ＮＯ：１０：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　ｌ−１ｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：Ｉｌに関する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ１９個のアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（１１）配列の種Ｈ（ＭＯＬＥＣｕＬＥ　ＴＹＰＥ）　：　ヘブチド（ＩＸ）特徴（Ａ）名前／キー：　Ｉｌ飾されている場所（Ｂ）位置　：１（Ｄ）他の情報　：／注＝　”　に　＋　ｐ　”（＋×）特徴（Ａ）名前／キー：１１！飾されている場所（Ｂ）位置　：９（０）他の情報　：ｌ注＝　Ｎ　＜　ｃ　Ｈ３）デルタ　ｚ−Ｐｈｅ−ＯＭｅ” （λ１）配列（ＳＥＱＵＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲＩＰＴＩＯＮ）：　ＳＥＱ　１０　ＮＯ：Ｉｌ：Ｘａａ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｌ　Ｇｌｙ　Ｈｉｓ　Ｌｅｕ　Ｘａａ（２）　ＳＥｏ　１０　ＮＯ：１２に関する情報（１）配列の特徴（Ａ）　長さ２９ｇのアミノ酸（Ｂ）　タイプ：アミノ酸（０）トポロジー：直鎖状く口）配列の種類（Ｍｏｌ、ＥＣＵＬＥ　Ｔｌ／ＰＥ）　：ペブチト（＼１）配列（ＳＥＱｌｊＥＮＣＥ　ＤＥＳＣＲ１１’Ｔｌ０Ｎ）：　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１２：Ｘａａ　Ｇｌｙ　Ｇｌｎ　Ｔｒｐ　Ａｌａ　Ｖａｔ　Ｇｌｙ　）ｌｉｓ　Ｌｅｕ補正書の写しく翻訳文）提出１１（特許法第１８４条の７％第１項）（平成６年８月５日

Claims

【特許請求の範囲】

１．請求されるのは、式１のペプチドＧｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｒ−Ｐｈｅ■−Ａ２−Ｙ（式１）〔式中Ａ１は　Ｈｉｓ，Ｌｅｕ，Ｈｉｓ−Ｌｅｕ，又は結合でありＰｈｅ−はｐｈｅ、 ΔｚＰｈｅ，及びΔＥＰｈｅからなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで該修飾されたフェニルアラニン誘導体は該修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素において水素又はＣ１〜Ｃ４アルキル基によって更に置換されることも出来、Ａ２はＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ−Ｌｅｕ、又は結合であり、そしてＹはＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシエステル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミン、（Ｃ１〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である〕、又は、式１の該化合物はその製薬上受入れられる塩。
２．請求されるのは、式２のペプチドＸ−Ａ３−Ｐｈｅ■−Ａ４−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ −Ｌｅｕ−Ｙ（式２）〔式中Ａ３はＧｌｐまたは結合でありＰｈｅ−はｐｈｅ、ΔＺＰｈｅ及びΔＥＰｈｅからなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで該修飾されたフェニルアラニン誘導体は該修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素において、水素、又はＣ１〜Ｃ４アルキル基で更に置換されることも出来、Ａ４はＧｌｙ又は結合でありＸは、アミノ末端酸がＧｌｐであって従ってＸが省略される場合をのぞいて、水素、１〜８個の炭素原子の１又は２個のアルキル基、２〜８個の炭素原子の１又は２個のアシル基、カルボベンジロキシ又はレブチルオキシカルボニルから選択されるアミノ末端置換基であり、ＹはＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシエスチル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミン、（Ｃ１〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である〕又は、式２の該化合物は製薬上受人れられるその塩。
３．製薬上受入れられる塩でありうる請求項１又は２に記載のペプチド又は製薬上受入れられる担体を使用する製剤組成物。
４．請求項１又は２に記載のうちの一つのペプチドの有効量を患者に投与することからなる、必要とする患者の消化を刺激する方法。
５．請求項１又は２に記載のうちの一つのペプチド誘導体の有効量を患者に投与することからなる、必要とする患者の食物摂取を減少させる方法。
６．請求項１又は２に記載のうちの一つのペプチド誘導体の有効量を患者に投与することからなる、肺、膵臓、又は腸が起源の臓器組織の成長を刺激する方法。
７．式１Ｇｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｒ−Ｐｈｅ■−Ａ２−Ｙ（式１）のペプチド誘導体を製造する方法であって、ａ）適当に結合されたＣ− 末端保護された、Ａ１−Ｐｈｅ−−Ａ２−Ｙペプチド〔式中Ａ１は　Ｈｉｓ，Ｌｅｕ，Ｈｉｓ−Ｌｅｕ，又は結合であり、Ｐｈｅ−ｐｈｅ、ΔｚＰｈｅ，及びΔＥＰｈｅからなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで該修飾されたフェニルアラニン誘導体は該修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素において水素又はＣ１〜Ｃ４アルキル基によって更に置換されることも出来、Ａ２はＰｈｅ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ−Ｌｅｕ、又は結合であり、そしてＹはＯＨ、（Ｃ１〜Ｃ８）アルコキシエスチル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミン、（Ｃ１〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である〕を有する樹脂を用い、ｂ）式１Ｇｌｐ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙの配列の次の保護されたαアミノ酸を、順次段階（ａ）の該樹脂に結合させ、そして、ｃ）該保護された基及び樹脂を段階（ｂ）のペプチドから取除き、そして式１のペプチドを精製することからなる方法。
８．式２Ｘ−Ａ３−Ｐｈｅ■−Ａ４−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ −Ｌｅｕ−Ｙ（式２）のペプチド誘導体の製法であって、ａ）適当に結合されたＣ−末端保護された、Ｌｅｕ誘導体を有する樹脂を用い、該樹脂と結合した、Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ −Ｙの保護されたアミノ酸配列を達成する為に、保護されたαアミノ酸を順次該樹脂に結合させ、ｂ）適当にＡ３−Ｐｈｅ−−Ａ４−保護されたペプチド〔但し、式中Ａ３はＧｌｐまたは結合でありＰｈｅ−はｐｈｅ、ΔＺＰｈｅ及びΔＥＰｈｅからなる群から選択される修飾されたフェニルアラニン誘導体であり、ここで該修飾されたフェニルアラニン誘導体は該修飾されたフェニルアラニン誘導体のα窒素において、水素又はＣ１〜Ｃ４アルキル基で更に置換されることも出来、Ａ４はＧｌｙ又は結合でありＸは、アミノ末端酸がＧｌｐであって従ってＸが省略される場合をのぞいて、水素、１〜８個の炭素原子の１又は２個のアルキル基、２〜８個の炭素原子の１又は２個のアシル基、カル水ベンジロキシ又はレブチルオキシカルボニルから選択されるアミノ末端置換基であり、ＹはＯＨ、（Ｃｌ〜Ｃ８）アルコキシエスチル、カルボキサミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミド、モノ又はジ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルアミン、（Ｃ１〜Ｃ４）チオアルキルエーテル、から選択されるカルボキシ末端置換基である〕を段階ａ）の該樹脂に結合し、ｃ）該保該基及び樹脂を段階ｂ）のペプチドから取除き、そして式２のペプチドを精製することからなる方法。
９．製薬上活性物質として使用するための、請求項１又は２に記載のペプチドのいずれか一つのペプチド誘導体又は製薬上受人れられるその塩。
１０．必要とする患者の消化を刺激する、同時、別々又は経時的使用の為の製剤処方の製造用の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。
１１．必要とする患者の食物摂取を減少させる、同時、別々又は経時的使用の為の製剤処方の製造用の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。
１２．必要とする患者の、肺、膵臓、又は腸起源の組織から選択される臓器組織の成長を刺激する、同時、別々又は経時的使用の為の製剤処方の製造用の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。
１３．必要とする患者の消化を刺激する、医薬製造の為の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。
１４．必要とする患者の食物摂取を減少させる、薬剤製造の為の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。
１５．必要とする患者の、肺、膵臓、又は腸起源の組織から選択される臓器組織の成長を刺激する、薬剤製造の為の請求項１又は２に記載のペプチドの用途。