JPH04502629A - 還元不可逆性ボンベシンアンタゴニスト - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 還元不可逆性ボンベシンアンタゴニスト本発明は、ペプチド誘導体、それらを含 む医薬組成物、それらの製造方法、及びそれらの治療薬への適用に係わる。

本明細書においては、シンボル及び略号はペプチド化学で一般に用いられるもの である（Ｅｕ＋、Ｊ、ＢＩｏｃｈｅｒｎ、（１９８４ン　１３１１．　９−３７ 参照）。したがって、３文字のアミノ酸シンボルはＬ配置のキラルアミノ酸を意 味する。Ｄ−アミノ酸は小文字で表される（例えば、ａ　］　ａ＝Ｄ−Ａ　］　 ａ）。使用した他のシンボル及び略号は以下のとおりである。ＡＡ、アミノ酸； Ａｃ、アセチル；Ａｃ０Ｅｔ、酢酸エチル、ＢＢＳ、ボンベシン；Ｂｏｃ、ｔ− ブトキシカルボニル；ＢｕＯＨ，ｎ−ブチルアルコール、ＢＯＰ、ベンゾトリア ゾリルオキシ−トリス［ジメチルアミノコホスホニウムへキサフルオロホスフェ ート；Ｃａｂ、［ｐ−ビス（２−クロロエチル）アミノコベンゾイル；ｄｅｃ、 、分解；ＤＣＣ，Ｎ、Ｎ’　−ジシクロへキシルカルボジイミド；ＤＣＨＡ、ジ シクロヘキシルアミン、ＤＣＵＳＮ、Ｎ’　−ジシクロヘキシル尿素、ＤＭＡＰ 、４−ジメチルアミノピリジン、ＤＭＦ。

新たに蒸留したジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ，ジメチルスルホキシド；Ｄｎ ｐ、２．４−ジニトロフェニル、ＥＧＦ、上皮成長因子；ＥｔＯＨ，エチルアル コール、ＦＡＢ（またはＦＤ）−ＭＳ、ファーストアトムボンバードメント（＋ ｓｓｊ　！＋０１１１　ｂｏｍｂａｒｄｍ！ｎ１）（またはフィールドディソー プション（ｆｉｅｌｄ　ｄｅｓｏｒｐｌｉｏｌｌ））質量分析、ＥＣＣ，エチル クロロカルボン酸；ＥＩ−ＭＳ、電子衝撃（山ｃｌｒｏｅ　ｉｍｐｔｃｌ）質量 分析；Ｅｔ２０、ジエチルエーテル、Ｇｌｐ、Ｌ−ピログルタミン酸；ｈ−ＧＲ Ｐ（またはｐ−ＧＲＰ）、ヒト（またはブタ）ガストリン放出ペプチド；ＨＣＩ ／ＡｃＯＨ，氷酢酸中の無水塩化水素；ＨＯＢｔ、１−ヒドロキシベンゾトリア ゾール；　１．　Ｄ、　、内径；ＨＯＳ　ｕ　ｓ　Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ ド；Ｍｅ＋、［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニン；　 Ｍ　ｅ　ＯＨｓメチルアルコール；ｍ、ｐ、、融点；ｍｏｄ、、修飾；ｎ、ｄ。

、未測定；Ｎ１ｅＳＬ−ノルロイシン、ＮＭＭ、Ｎ−メチルモルホリン、ＮＭＲ ，核磁気共鳴；Ｏ３ｕ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル、Ｐｄ／Ｃ，活性炭上 のパラジウム、ＰＥ、石油エーテル４０’〜７０°　；ＲＰ−ＨＰＬＣ，逆相高 性能液体クロマトグラフィー；５ＣＬＣ，小細胞肺癌（＋ｍ１ｌｌ　ｃｅｌｌ　 ＩｕＢｃｘｒｅｉｎｏｍｘ　）　；　ＴＦＡ％　トリフルオロ酢酸、ＴＨＦ、テ トラヒドロフラン；ＴＬＣ，薄層クロマトグラフィー；ＴＯ８Ｘ１）−トルエン スルホニル；ＴｓＯＨ，ｐ−１ルエンスルホン酸。

二つのアミノ酸の間の大文字のブサイマは、アミド結合が括弧のなかに示した官 能基で置き換えられていることを示す。

本発明は、下記の式■のペプチドを提供する。

Ｒ−Ａ−Ｂ−Ｃ−Ｔ　ｒ　ｐ−Ａ　］　ａ−Ｖａ　ｌ　−Ｘ−Ｙ−Ｔ　−Ｗ■ （式中、Ｒは４−　（ＣＩ　ＣＨ２ＣＨ２）　２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ２Ｃｌ　（ ＮＨＲ，）Ｃｏ−（ｐＭｅｌ）；３−　（ＣＨＣＨ２ＣＨ）　Ｎ−ＣＨ−ＣＨ２ Ｃｌ　ＣＮＨＲ，’）ＣＯ−（ｍＭｅ　］）；　４−　（ＣＩＣＨ２Ｃ）Ｔ２） ２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＯ−（Ｃａｂ）；３−　（ＣＩＣ８２ＣＨ２）　２Ｎ−Ｃ６ Ｈ４−Ｃ０−；ＣＩＣ１−Ｔ２ＣＨ２Ｎ）（ＣＯ−；ＣｌＣＨ＝ＣＨ−Ｃｏ−。

ＢｒＣＨ＝ＣＨ−Ｃｏ−、ＣＨ２＝ＣＣｌＣｏ−、ＣＨ２＝ＣＢｒＣ０−（ｃ　 ｉ　ｓまたはｔ　ｒａｎｓ異性体のいずれか）；ＣＨミＣ−Ｃ０−；　Ｃ］　Ｃ Ｈ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ　（Ｎｏ）ＣＯ−；Ｃｌ　ＣＨ２Ｃｏ−ＣＨ（Ｒ２）ＮＨＣ Ｏ（ＣＨ２）　２Ｃｏ−の式の基を表し： Ａは原子価結合、または、Ｇａｙ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｕｙｓ もしくはＧｉｎ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙの残基を表し、 Ｂは原子価結合、または、Ａｓｎ、Ｔｈｒもしくはｐｈｅの残基を表し； ＣはＧｉｎまたはＨｉｓの残基を表し、ＸはＧｌｙまたはａｌａの残基を表し； Ｙは原子価結合、または、）（ｉｓ　（Ｒ３）、ｈｉｓ　（Ｒ３）、ＰｈｅＳｐ ｈｅ、Ｓｅｒ、ｓｅｒ、Ａｌａもしくはａｌａの残基を表し； 丁は原子価結合、または、Ｌｅｕ、Ｉｅｕ、Ｐｈｅもしくはｐｈｅの残基を表し ； ＷはＯＲ２、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ２）４ｃＨ３、ＮＨ（ＣＨ２）２Ｃ６Ｈ５、Ｍ ｅｔ−Ｒ４、Ｌｅｕ−Ｒ４、Ｉｌｅ　Ｒ４またはＮ　］　ｅ　Ｒ４の式の基を表 し； Ｒ１は水素原子、Ｂｏａ基または１〜１１個の炭素原子を有するアシル基を表す 。

Ｒ２は水素原子、１〜１１個の炭素原子を有する線状もしくは分枝の脂肪族鎖、 ベンジルまたはフェニル基を表す。

Ｒ２が表し得る好ましい脂肪族鎖としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１ ｓｏ−プロピル、ｎ−ブチル及び１ｓｏ−ブチルがある。

Ｒ３は水素原子、または、Ｔｏｓ、ＤｎｐもしくはＢｚｌ基を表し、 Ｒ４はＮＨ２、ＮＨ−ＮＨ２またはＯＲ２を表す。

さらに、一つ以上のペプチド結合（ＣＯＮＨ）が還元ペプチド結合（Ｃ）Ｔ２Ｎ Ｈ）で置き換えられている。

Ｒ１が表し得る好ましいアシル基は、アセチル、ホルミル、プロピオニル及びブ チリリルのような脂肪族アシル基、または、ニトロ、メトキシ、アミノの基また はハロゲン原子で任意に置換されたベンゾイルのような芳香族である。）好まし くは、式■において、ＲはｐＭｅｌまたはＣａｂを表し、Ｒ１は水素原子、Ｂｏ ａまたはアセチル基を表し、Ａは原子価結合を表し、Ｂは原子価結合またはｐｈ ｅ残基を表し、ＣはＧｌｎ残基を表１５、ＸはＨｉｓ　（Ｄｎｐ）、Ｈｉｓまた はＧｌｙの残基、最も好ましくはＧｌｙを表し、Ｙは原子価結合を表し、ＴはＬ ｅｕ残基を表し、ＷはＬ　ｅ　ｕ　Ｎ　Ｉ（２またはＮｌｅ　Ｎ　Ｈ２の式の基 を表し、還元ペプチド結合（Ｃ）Ｔ２Ｎ）Ｔ）がＴとＷの間にある。

これらのペプチドと医薬的に許容可能な酸の塩は本発明の範囲内である。このよ うな酸付加塩は、硫酸、リン酸、塩化水素酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸 、スルファミン酸、クエン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、コハ ク酸、酒石酸、ケイ皮酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、安息香酸、サリチル酸、グ ルコン酸、アスコルビン酸及び関連する酸のような種々の無機及び有機の酸から 誘導できる。

本発明のペプチドの合成は、伝統的な溶液法により行なうことができる。合成は 、保護したアミノ酸またはペプチドの適切な連続縮合から本質的に成る。縮合は 得られるペプチドがアミノ酸残基の所望の配列を有するように行なわれる。

ペプチド化学で知られている方法で縮合できるアミノ酸及びペプチドは、ペプチ ド結合の形成に関与しない、酸もしくはアルカリ処理または加水分解によって除 去できる適当な保護基でブロックされるアミノ基及びカルボキシル基を有する。

アミノ基の保護には下記の保護基が、例えば、使用できる。

ベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、トリチル、ホルミル、ト リフルオロアセチル、０−ニトロフェニルスルフェニル、４−メチルオキシベン ジルオキシカルボニル、９−フルオロメトキシカルボニル、３．５−ジメトキシ −α−α。

〜ジメチルベンジルオキシカルボニルまたはメチルスルホニルエトキシカルボニ ル。

カルボキシル基の保護には下記の保護基が、例えば、使用できる。メチル、エチ ル、ｔ−ブチル、ベンジル、ｐ−ニトロベンジルもしくはフルオレニルメチル、 アミド、ヒドラジド、ｔ−ブトキシカルボニルヒドラジドまたはベンジルオキシ カルボニルヒドラジド。

ヒドロキシアミノ酸のヒドロキシ官能基及びヒスチジンのイミノ官能基は適当な 保護基で（合成全体を通してまたは数ステップの間のみ）保護してもよいし、保 護しなくてもよい。ヒドロキシ官能基の保護には下記の保護基が、例えば、使用 できる。

ｔ−ブチル、ベンジル、アセチル。イミダゾールイミノ官能基の保護には下記の 保護基が、例えば、使用できる。２．４−ジニトロフェニル、トシル、ベンジル 。脱保護反応はペプチド化学でそれ自体が知られた方法により行う。

ペプチド結合を形成する、一つの分子のアミノ基と他の分子のカルボキシル基の 間の縮合は、混合した無水物、アジドもしくは活性化エステルのような活性化ア シル−誘導体を介して、または、ジシクロへキシルカルボジイミドのような縮合 剤のみの存在下またはそれと、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドもしくは１−ヒド ロキシベンゾトリアゾールのようなラセミ化防止剤または４−ジメチルアミノ− ピリジンのような活性化剤の存在下で遊離アミノ基と遊離カルボキシル基の直接 縮合により行なうことができる。縮合は、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセ トアミド、ピリジン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、またはＮ−メチル −２−ピロリドンのような溶媒中で行なうことができる。

還元ペプチド結合の形成は、Ｎ−保護したアミノ酸アルデヒドとＣ−保護したア ミノ酸またはペプチドを、ＮａＢＨ３ＣＮのような還元剤の存在下で縮合するこ とによって行なうことができる。アルデヒドも、また、Ｎ−保護したアミノ酸と Ｎ。

０−ジメチルヒドロキシルアミンを縮合し、得られたアミドをＬ　ｉＡ　Ｉ　Ｈ ｉ、のような適当な還元剤で還元することにより普通に得られる。

反応温度は、−３０℃から室温でよい。反応時間は一般には１〜１２０時間であ る。

合成の計画、保護基及び縮合剤はラセミ化の可能性を避けるように選択する。

生物学的活性 本発明のペプチドは、平滑筋組織の収縮、セントラルオリジン（ｃｅｎｔｒａｌ 　ｏｒｉｇｉｎ）の挙動の改変及び有糸分裂促進作用のような、ボンベシンで誘 導される１ｎｙｉｌｒｏ及びｊゎｙｉｙｏの効果に対する強力な拮抗作用を有す る。

ボンベシン（Ｂ　Ｂ　Ｓ）は、カエルの皮膚から最初に単離された、Ｇｌｐ−Ｇ ｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇａｙ−Ａｓｎ−ＧＩｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　Ｉ− Ｇａｙ−Ｈｉ　ｓ−Ｌｅｕ−Ｍｅｔ　ＮＨ２の式のテトラデカペプチドである。

生物学的活性は分子のＣ−末端部分にある。すなわち、ＢＢＳ　（６−１４）ノ ナペプチドは親代合物と同じ（らい活性がある。ベンベシンのヒトの対応物は、 ガストリン放出ペプチド（ｈ−ＧＲＰ）として知られている２７アミノ酸のペプ チドである。ボンベシン及びボンベシン様ペプチドは多くの生物学的活性を示す （］、ＨＷｅｌｓｈ　（１９８３）　’Ｂ＋ｔｉｎ　Ｐｅｐｊｉｄｅｓ’、　Ｄ 、Ｔ、　Ｋ＋ｉｅｇｅ＋、　ＬＪ、Ｂ＋ｏｖｎｉｊ！ｉｎ及びＪ、Ｂ、Ｍｕｌｉ ｎ　（編）、　Ｗｉｌｅ７１ｎｌｅｒｓｃｉｔｎｃｅ　Ｐｕｂ！、、９４１−９ ６０頁）。これらには、ヒト小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）に対する自己分泌（ｇｕｔ ｏｃ＋ｉｎ＊）成長促進効果（Ｆ、　Ｃｏ目１１１ａ他、（１９８５）　Ｃｘｎ ｅｅ＋Ｓυ＋ｖｅｙ、４．　７０７−７２７１　、ヒト前立腺癌細胞増殖の自己 分泌及び／または傍分泌（ｐａ＋ａｅｒｉｎｅ）の刺激（Ｍ、Ｂｏｌａｇｎｉ他 、　Ｃａｎｅｅｄ。

印刷中）及びＥＧＦ受容体の調節（１，２ｘｃｈａ＋２及びＥ、　Ｒｏ！ｅｎＨ ＋１　（１９［１５）　Ｃａｎｃｅｒ　５ｕｒｖｅ７ｓ、４．　７２９−７６５ ）がある。

受容体に対して天然のリガンドと競合するボンベシンアンタゴニストは、異常な 細胞増殖を導く現象のカスケードの誘発を阻害するであろう。

この方向の異なるアプローチが異なる研究グループによって行なわれている。ア ミノ酸の欠失、逆位及び置換の特徴を有する一連のＣ−末端ボンベシンのノナ及 びデカペプチドが、当方の先の特許出願の目的であった（ヨーロッパ特許出願第 ８９１０２２８３．２号）。しかし、これらのペプチドは、通常他のＢＢＳアン タゴニストと同様に、ＢＢＳ受容体に対して中程度の親和性を示す。

本発明の化合物は、アルキル化部分のために、親ペプチドよりも大きな受容体親 和性を示し、ボンベシンと共に与えられたときまたはボンベシンのチャレンジの ２４時間前に投与されたときのいずれにおいても受容体アンタゴニストとして機 能する。

さらに、還元ペプチド結合が存在するために、水溶性及び、多くの場合、拮抗特 性も増大する。

生物学的試験の結果 本発明の化合物のボンベシン受容体に対する結合親和性はマウス５ｗ１ｓｓ　３ Ｔ３繊維芽細胞で測定した（１．　ｚｘｃｈ＊Ｂ及びＥ、ＲＯ！ｅｎｇｕｌ　（ １９８５）　Ｐ＋ｏｃ、　Ｎ８１１．　Ａｃ１ｄ、Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、８２．　 ７６１６−７６２０１（表１）。

有糸分裂促進作用に対する効果は、無血清培地に維持した静止及び集密的マウス ５ｗ１ｓｓ　３７３繊維芽細胞で測定した（＾、Ｎ、Ｃ。

ＩｐＳ他（１９８５）　Ｂｉｏｃｈｔｍ　ｌ　２３１．７８１−７８５１゜第１ 組の実験では、類似体を単独またはボンベシンと組み合わせて与えた。第２組の 実験では、細胞をアルキル化ペプチドで前処理し、洗浄し、３７℃に２４時間保 ち、そして、ボンベシンでチャレンジした。

両方において、ＤＮＡ合成を［Ｈ３］チミジン取り込みとして評価した（表２） 。

さらに、０．１〜５０μＭの範囲のこれらのペプチドにさらすことにより、５ｃ ｔｃ細胞系（例えば、ＮＣｌ−Ｎ３４５、ＮＣｌ−Ｎ５９２、ＮＣ１−８６９、 ＮＣｌ−８１２８）並びに前立腺癌細胞系（例えば、ＤＵＩ４５及びＰＣ３）の 増殖が有意に減少した（表３）。

これらのペプチドをｌｎｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇの範囲の用量でヌードマウ スに非経口的に投与すると、上記の移植されたヒト５ＣＬＣ及び前立腺癌細胞系 の増殖が有意に減少した。

表１ ボンベシンアルキル化類似体のマウスＳｖｉ■３Ｔ３繊維芽細胞に対する結合親 和性 ＊ 化合物　Ｉ　Ｃ５ｏ（ｎＭ） １８３９±１７８ １１２８±１ １Ｉ＋　２３４０±２９１ １Ｖ　２．３±１．０ ｖ　０．９±０．５ 参照ペプチド： ＢＢＳ　１２．６±０．６５ スパンチド（Ｓｐｓｎｌｉｄｔ）　１１１００［ｐｒｏ２］　スパンチド　１４ ０００［Ｌｅｏ　マ（Ｃ）＋２−ＮＨ）　Ｌｅｕ　］　ＢＢＳ　２１４±３０本 平均値±Ｓ、　Ｅ、　Ｍ。

表２ マウス５ｖｉｉｓ　３Ｔ３繊維芽細胞における［Ｈ３］　チミジン取り込み５ｏ Ｍ　５０ｎｌＪ　Ｏ，５μＭ５μＭ　Ｏ，５μｉＪ　５ｕＭ　Ｏ，５μＭ　５μ ＭＩ　ｒ＋、ｄ、ｎ、ｄｌ、８　１．７　５４±５　７５±４６９±２　８４± ３ＩＩ　ｎ、ｄ、ｎ、ｄ、０．８　０．８　８６±３　９０±３５５±５　８６ ±６ＩＩＩ　ｎ、ｄ、ｎ、ｄ、１１．８　０．７　３４±２１８６±１４６±１ ４６１±１６ＩＶ　ｎ、ｄ、ｎ、ｄ、１．１　１．３　７９±７　８５±８　０ 　８５±７Ｖ　ｎ、ｄ、　ｎ、６冊０．９８３±８８５±７０３９±７参照ペプ チド： ＢＢＳ　３．０±１ ［Ｌｅｕ”’Ｖ　（ＣＨ２−Ｎｌ（）　Ｌｔｕ１４］ＢＢＳ１　１　２９±１０ ５６±４　０　Ｏ Ａ＝類似体をＢＢＳと共に与える Ｂ＝細胞を類似体で前処理し、洗浄し、３７℃に２４時間保ち、そしてＢＢＳで チャレンジする 表３ アルキル化類似体の５ＣＬＣ細胞系に対する“ｉｎｖ自ｒｏ″活性化合物　ＩＣ ５，（ｎＭ） ＮＣＩ−Ｎ５９２　ＮＣｌ−Ｈ６９ ＋＋　１１０　９４０ ＩＶ　７００　７８３ 参照ペプチド： ［Ｌ！ｕ　ＷｆｃＨ−ＮＨ）　Ｌｅｕ’１ＢＢＳ　５２０　１，６６０従って、 式！のペプチドは、ＧＲＰファミリーのペプチドにより、直接または他の成長因 子と協調してのどちらにおいても、増殖及び発達を調節されるヒト新生物の治療 に適用される。

さらに、これらのアルキル化類似体はこれらの疾患にともなう臨床症状及びＧＲ Ｐ様ペジペプチド剰分泌による臨床症状の治療法において使用できる。

本発明の化合物は通常の経路、例えば、非経口すなわち静脈注射もしくは注入、 または、筋肉注射、皮下注射、腔内及び鼻内投与により投与できる。

用量は、患者の年齢、体重及び状態並びに投与経路に依存する。

マウスにおける“ｉｎマ目ｒｏ＠及び５Ｉｒ１月マＯ”のデータに基づいて、ヒ トにおける治療用量はｌｎｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ１−日１〜６回の範囲と 推定できる。

さらに、本発明のペプチドの毒性はまったく無視できる。

本発明はまた、１種以上の医薬的に許容可能な賦形剤と共に、活性物質として式 （夏）の化合物を含む医薬組成物を提供する。

本発明の医薬組成物は、通常、従来の方法により調製され、医薬的に適切な形態 で投与される。

例えば、静脈注射もしくは注入用の溶液は、坦体として、例えば、滅菌水を含ん でいてもよいし、または、それらは、好ましくは、滅菌等張塩溶液の形態であっ てもよい。

筋肉注射用の懸濁液または溶液は、活性化合物と共に、医薬的に許容可能な坦体 、例えば、滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール（例えば、プロ ピレングリコール）、及び、所望の場合、適切な量のりドカイン塩酸を含んでい てもよい。

さらに、本発明では、本発明の組成物を患者に投与することから成る、神経内分 泌系の新生物（例えば、小細胞肺癌及び前立腺癌）または治療を必要とする患者 におけるこれらの疾患に伴う臨床症状を治療する方法を提供する。

ａ）ＴＬＣを、シリカゲル６０　Ｆ　２５４（Ｍｅｒｃｋ）のプレコートプレー ト（層の厚さ０．２５ｍｍ、長さ２０ｃｍ）上で、下記の溶出液を用いて行なっ た。

系Ａ：ｎ−ブタノール／酢酸／水＝６００／１５０／１５０（容量） 系Ｂ：クロロホルム／メタノール＝９９／１　（容量）系Ｃ：クロロホルム／メ タノール＝９０／１０（容量）系Ｄ：トルエン／酢酢酸エチル／酢酸氷水　１０ ０／１０／２０／１０（容量） ｂ）分析用ＲＰ−Ｆ（ＰＬＣをＬｉＣｂ＋ｏｃｏ＋ｂ　ｔ（ｉｂｅ＋　ＲＰ−１ ８カラム［ＩＪｔｒｃｋ）　（２５ＯＸ４ｍｍ１．Ｄ、、粒子径５μ）を付けた ｌｌｅｖｌｃｌｔＰｇｃｋｕｄ　Ｍｏｄ、１０８４装置で行なった。下記の溶出 液を用いた。

Ａ＝ＫＨ２ＰＯ４２０ｍＭ、ｐＨ３，５／アセトニトリル９／１（容量） Ｂ　＝Ｋ　Ｈ２Ｐ　０４　２０　ｍＭ−ｐ　Ｈ３，５／　７セトニトリル３／７ （容量） 溶出は、６０％から９０％Ｂの直線勾配を２０分間（系Ａ）または３０から７０ ％Ｂを１５分間（系Ｂ）、そして、イソクラチックを１５分間、流速１ｍ１７分 に設定した。

ペプチドは保持時間（ＲＴ）により特徴付けした。

Ｃ）調製用ＲＰ−ＨＰＬＣをＤｅｌ１ｇｐｔｃｋカラム（Ｗ１１ｅ＋ｓ）　（３ ０／１９ｍｍ１．Ｄ、、粒子径１０μ）を付けたＤｅｌｌｇ　Ｐｒｅｐ　３００ ０装置（Ｗａｔｅｒｓ）で行なった。下記の溶出液を用いた。

Ａ＝０．０５％ＴＦＡの水溶液 Ｂ＝０．０５％ＴＦＡのアセトニトリル／水　７／３（容量）溶液 流速＝２４ｍｌ／分、検出波長＝２２０ｎｍ溶出法は個々の実施例に示す。

各々の場合において、分画を分析用ＲＰ−Ｔ（ＰＬＣで調べ、９８％を超える純 度を示す画分をプールした。アセトニトリルを除去した後、溶液を凍結乾燥した 。

ｄ）アミノ酸分析は、酸加水分解物（６ＮＨＣ１＋０．１％ラフエノール中１０ ℃で２２時間または３Ｎメル力プトエタンスルホン酸中１００℃で１６時間のい ずれか、共にＮ２下）について行なった。天然のアミノ酸のみを測定した。通常 の加水分解条件での部分分解のために、Ｔｒｐはメルカプトエタンスルホン酸に よる加水分解物でのみ測定した。

実施例Ｉ Ｂｏｃ−ｐＭｅ　Ｉ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　Ｉ−ＧｌｙＢｏｃ−Ｖａ 　１−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　ｌ　（Ｉ　ａ）４３．４５ｇ　（２００ｍｍｏｌ）のＢ ｏｃ−Ｖａ　１−ＯＨを５００ｍ１の無水ＴＩ（Ｆに溶解させ、−２５℃に冷却 し、２２゜４８ｍ１　（２００ｍｍｏ＋）のＮＭＭで、続いて、１９．８０ｍ１ 　（２００ｍｍｏｌ）のＥＣＣで処理した。−１２℃で２分間撹拌した後、６７ ．４７ｇ　（２００ｍｍｏ　］）の）Ｉ−Ｇ　Ｉ　Ｙ−ＯＢｚ　Ｉ−ＴｓＯＨ及 び２２．４８ｍ］　（２００ｍ］）のＮＭＭの無水ＤＭＦ　５００ｍ　ｌ中の予 め冷却した溶液を加えた。

反応混合液を一１２℃で２時間撹拌し、次に塩を濾過し、溶液を減圧下で蒸発さ せた。油状の残渣を１２００ｍ１のＡｃＯＥｔに溶解させ、溶液を順次、１０％ クエン酸（５Ｘ１００ｍｌ）、ブライン、５９６ＮａＨＣＯ３（５Ｘ１００ｍｌ ）及びブラインで洗浄し、中性にした。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を蒸発させ 、残渣をシリカゲルのフラッシュ（Ｉｌｒｓｈ）　クロマトグラフィー（ＡｃＯ Ｅｔ／ＭｅＯＨ９５１５で溶出）により精製した。５６．６８ｇ（収率７８％） の化合物１ａをＰＥから得た。

ｍ、　ｐ、７６〜７８℃、　［αコ　−２８．０°　（Ｃ１、ＭｅＯＨ）　、Ｆ Ｄ−ＭＳ　：ｍ／ｚ３６５　（１００、ＭＨ＋）、ＲＨ−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−Ｏ Ｂｚ　ｌ　−ＨＣｌ　（Ｉｂ）５６．４０ｇ　（１５４，７５ｍｍｏ＋）のＢｏ ｃ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＢｚｌ　（Ｔａ）を、室温で３０分間、５７０ｍ１の１ ．３３Ｎ　ＨＣＩ／Ａｃ０）Ｔと反応させた。溶媒を減圧下で除去し、油状残渣 をＤＭＦから２回蒸発させ、Ｅｔ２０で洗浄した。４４．２ｇ（収率９５％）の 化合物１ｂを油として得た。

＋ ＦＤ−ＭＳ　：遊離塩基としてｍ／ｚ２６５（１００、ＭＨ）、Ｒｆｏ、５４、 ＲＴＢ９．４゜ ＾ ステップ３ Ｂｏａ−Ａｈａ−Ｖａｌ−Ｇａｙ−ＯＢｚｌ　（Ｉｃ）２７．８１ｇ　（１４７ ｍｍｏ　ｌ）のＢｏ　ｃ−Ａ　］　ａ−ＯＨ及び４４．２ｇ　（１４７ｍｍｏｌ ）のＨ−Ｖａ　ｌ　−Ｇ　Ｉ　ｙ−ＯＢｚｌ・Ｈｃ］　（Ｉｂ）から開始して、 洗浄におけるＡｃ０ＥｔをＣＨ２Ｃ】２で置き換えた他はＩａの調製に記載した 通りに操作し、５４．８２ｇ　（収率６８％）の化合物ＴｃをＣＨ２Ｃｌ２／Ｐ Ｅから得た。ｍ、ｐ、１４２〜１４６℃、ＦＤ−ＭＳ：ｍ／ｚ４３６（１００、 ＭＨ）　、ＲｆＢｏ、２６、ＲＴＡ９゜４゜ ステップ４ Ｈ−Ａｌａ−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　ｌ　−ＨＣｌ　（Ｉｄ）２７ｇ　（６ ２ｍｍｏ＋）のＢｏｃ−Ａｌａ−Ｖａｌ−（ｙｌｙ−ＯＢｚ　ｌ　（Ｉ　ｃ）か ら開始して、Ｉｂの調製に記載した通りに操作し、２２．６５ｇ　（収率９８％ ）の化合物１ｄをＭｅＯＨ／　Ａ　ｃ　ＯＥ　ｔ　／　Ｐ　Ｅから得た。ｍ、ｐ 、１７８〜１８１℃、ＦＤ−ＭＳ：遊離塩基としてｍ／ｚ３３６（１００、Ｍ） （＋）、ＲｆＯ，５３、ＲＴＢ７．０゜ ＾ ステップ５ Ｂｏａ−Ｔｒｐ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　Ｉ−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　Ｉ　（Ｉｅ）１８．４ １ｇ　（６０，５ｍｍｏ　ｌ）のＢｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ及び２２．５０ｇ　（６ ０，５ｍｍｏ　］）の］Ｈ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＢｚ１　（Ｉｄ）から 開始して、１ａに記載したとおりに縮合を行なった。そして、粗生成物をＤＭＦ に溶解させ、０℃で撹拌しながら１０％クエン酸水溶液中に溶液を滴下して沈澱 させた。沈澱を濾過し水で洗浄して中性にし、そして、４０％でＰ２Ｏ３上で乾 燥した。３５．７０ｇ（収率９５％）の化合物Ｉｅを得た。ｍ、ｐ、１５４〜１ ７７℃（ｄｅｃ、）、＋。

ＦＤ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ　６２１　（１００、Ｍ　）、ＲｆＢｏ、１０、Ｈ−Ｔ ｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　Ｉ−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　］　−ＨＣ］　（１ｆ） ３３．７５ｇ　（５４，２８ｍｍｏｌ）のＢｏａ−Ｔｒｐ−ＡＩａ−Ｖａｌ−Ｇ ｌｙ−ＯＢｚｌ　（Ｉｅ）を、室温で３０分間、３４０ｍ１の１．３３Ｎ　ＨＣ Ｉ／ＡｃＯＨ，３４ｍ１のアニソール及び１７ｍ１の２−メルカプトエタノール と反応させた。

溶媒を減圧下で除去し、油状残渣をＤＭＦから２回蒸発させた。

生成物はＭ　ｅ　ＯＨ／　Ｐ　Ｅから沈澱させ、ＰＥで数回洗浄し、そしてＥｔ ２０で洗浄した。２６．７５ｇ　（収率８８％）の化合物Ｉｆを得た。ｍ、ｐ、 １１８〜１２２℃、ＦＤ−ＭＳ　：遊離＋。

塩基としてｍ／ｚ５’２１　（１００、Ｍ　）、ＲｆＡｏ、６６、Ｂｏｃ−Ｇｉ ｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　］−Ｇａｙ−ＯＢｚ　１（Ｉｇ） １１．７３ｇ　（４７，６６ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｉｎ−ＯＨ及び２６．６ｇ 　（４７，６６ｍｍｏｌ）のＨ−Ｔｒｐ−ＡＩａ−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−ＯＢｚ　 １−ＨＣｌ　（Ｉ　ｆ）から開始して、ｒｅの調製に記載した通りに操作し、２ ９．８６ｇ（収率８３％）の化合物ＶＩＩをＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２／Ｅｔ２０ ／ＰＥから得た。ｍ、ｐ、２０８〜２１１℃（ｄｅｃ、）　、ＦＤ−ＭＳ　：ｍ ／ｚ７４９　（１００、Ｍ”）　、Ｒｆ　０．５１、ＲＴＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ｔｒ ｐ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　Ｉ−Ｇｌｙ−０）Ｔ　（Ｉｈ） １２ｍｌ　（３１８ｍｍｏｌ）の９９％ギ酸及び３３ｍ１　（３００ｍｍｏｌ） のＮＭＭのＭｅＯＨｌ　１中の溶液の５３ｍ１を、３ｇ　（４ｍｍｏ　ｌ）のＢ ｏａ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａｌ　−Ｇ　ｌ　ｙ−ＯＢｚ　］　（Ｔ　ｇ ）及び１．８６ｇの１０％Ｐｄ／ＣのＤＭＦ８０ｍ　ｌ中の懸濁液に撹拌しなが ら加えた。

反応混合液を室温で１時間撹拌し、触媒を濾過して除き、溶媒を真空下で蒸発さ せた。残渣をＡｃ０Ｅｔで摩砕し、２．２ｇ（収率８４％）の化合物Ｉｈを得た 。ＦＤ−ＭＳ：ｍ／ｚ６÷　＋ ８２（１００、ＭＮａ　）、６５９　（４０、Ｍ　）、ＲｆＡＯ。

２４．９３ｇ　（１００ｍｍｏ］）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ・Ｔ（２０を、２０ ０ｍ１のＤＭＦから蒸発させることにより脱水し、３５０ｍ１のＣＨ２Ｃｌ２に 溶解させた。９．９５ｇ（１０２ｍｍｏｌ）のＨＣＩ−ＨＮ（ＣＨ）ＯＣＨ３及 び３．０５ｇ　（２ｍｍｏ　＋）のＤＭＡＰを４０℃で撹拌しながら加え、続い てＤＭＦの数滴によりほぼ澄んだ溶液を得た。２０．６５ｇ　（１００ｍｍｏ　 ］　）のＤＣＣのＣＨ２ＣＩ　２１３０　ｍ　Ｉ中の溶液及び１１．２４ｍ１　 （１００ｍｍｏ　ｌ）のＮＭＭのＣＨ２ＣＩ　２１３０　ｍ　ｌ中の溶液を別々 に、反応温度を０℃に保ちながら３０分間で滴下した。室温でさらに１時間後、 反応混合液を塩とＤＣＵから濾過し、蒸発させた。残渣をＡｃ０Ｅ　ｔに溶解さ せ、他のＤＣＵから濾別し、順次、１０％クエン酸（５×１００ｍ１）　、５％ Ｎａ　ＨＣＯ３（１５×１００ｍ　ｌ）　、及びブラインで洗浄して中性にした 。溶媒を蒸発させた後、油状残渣をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィー （最初に、ＰＥ　／　Ｅ　ｔ　２０　８５　／　１５で（速く移動する不純物の 除去）、そしてｐＥ／Ｅｔ２０　１／１で溶出）で精製した。１７．３８ｇ（収 率５７％）の純粋な化合物１ｉを油として回収した。ＥＴ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ　 ２０１　（４、Ｍ−ＯｔＢｕ）、１７３　（２、Ｍ−Ｂｏｃ）　、Ｒｆ　０．４ ４、ＲＴｌｏ、４、ＲＴＢ１９゜Ｂ　＾ １゜ ８．４ｇ　（３０，５８ｍｍｏ＋）のＢｏｃ−Ｌｅｕ−Ｎ　（ＣＨ）ＯＣＲ（Ｉ ｉ）を３５０ｍ１の無水Ｅｔ２０に溶解させ、０℃で、１５分間で部分に分けて 加えた３、４８ｇ　（９１゜７４ｍｍｏｌ）のＬ　ｉＡ　Ｉ　Ｈ４と反応させた 。反応混合液を１５分間Ｏ℃で撹拌した後、反応温度を０℃に保ちながら、１７ ５ｍ１のＡｃ０Ｅｔ、次いで７００ｍ１の１０％クエン酸を加えた。３０分間撹 拌した後、反応混合液をＡｃ０Ｅｔ　（５×３００ｍｌ）で抽出し、合わせた有 機層を１０％クエン酸、そしてブラインで洗浄し中性にし、Ｎａ２ＳＯ４上で乾 燥した。溶媒を蒸発させ、６．２６ｇ（収率９５％）の粗油状化合物＋ｊを得た 。Ｅ　Ｔ　−ＭＳ　：ｍ／ｚ　１８６　（７、Ｍ−ＣＩ（Ｏ）　、ＲｔＢＯ，３ ８、ＲＴ７．７、ＲＴ、１５゜６、１４ｇ　（２８，５２ｍｍｏｌ）のＢｏｃ− Ｌｅｕ−Ｈ（１ｊ）の、１％ＡｃＯＨの無水ＭｅＯＨ溶液１００ｍ１中の溶液に ４．２４ｇ　（２８，５２ｍｍｏりのＨＣＩ・Ｈ−Ｍｅｔ−Ｎｌ２を加え、続い て、４．２１ｇ　（５７ｍｍｏｌ）のＮａ　Ｂ　）１３ＣＮを部分に分けて室温 において３０分間で加えた。

４０分間さらに撹拌した後、溶液を蒸発させ、残渣を３００ｍ１の５％Ｎ　ａ　 ＨＣＯ３に溶解し、生成物をＡｃ０Ｅｔ　（５×１００ｍｌ）で抽出した。育様 相をブラインで洗浄して中性にし、Ｎ　ａ　２　Ｓ　Ｏ４で乾燥し、濃縮した。

５．３０ｇ（収率５３％）の純粋な化合物Ｔｋを得た。ｍ、Ｉ）、１２４〜１２ ６℃、ＦＤ−ＭＳ　：ｍ／ｚ３４７　（１００、Ｍ’′）　、ＲｆＢＯ，１６、 Ｒ１，０４ｇ　（３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｌｅｕｖ（Ｃ）（２ＮＨ）Ｍ　ｅ　ｔ 　Ｎ　Ｈ２（Ｉ　ｋ　）の、１ｍｌのアニソール及び０．５ｍｌの２−メルカプ トエタノールを含む１．３３Ｎ　Ｉ（ＣＩ／ＡｃＯＨ１０ｍ１中の溶液を室温で ２０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、油状残渣をＤＭＦから３回及びＭ　 ｅ　ＯＨから１回蒸発させ、Ａｃ０Ｅｔ及びＥｔ２０で摩砕（１＋１ｌｏｒ山ｄ ）　した。

１．４４ｇ（収率９８．３％）の化合物ＴＩを２回で得た。ＥＴ−ＭＳ：遊離塩 基としてｍ／ｚ２４７（１、Ｍ＋°）、２０３（６、Ｍ−ＣＯＮＨ）、Ｒｆ　０ ．５８、ＲＴ、３．６゜２　＾ １．２９ｇ　（２，６８ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｈ３ｓ　（Ｄｎｐ）−ＯＨ−ｉＰ ｒＯＨをＤＭＦから３回蒸発させ、結晶化のイソプロピルアルコールを除去し、 そして、−２５℃に冷却した１５ｍ１のＤＭＦに溶解させ、０．３０ｍ１　（２ ，６８ｍｍｏ　Ｉ）のＮＭＭと、続いて０．２７ｍ１　（２，６８ｍｍｏ＋）の ＥＣＣと反応させた。−１２℃で２分間撹拌した後、０．８５８ｇ（２，６８ｍ ｍｏ　ｌ）のＨ−ＬｅｕＷ（ＣＨ２ＮＨ）Ｍｅ　ｔ−ＭＨ２−２ＨＣ１（Ｉ　］ ）及び００．６０ｍ１　（５，３６ｍｍ。

１）のＮＭＭのＤＭＦ１５ｍｌ中の冷溶液を加えた。反応混合液を一１２℃に６ ０分間、モして０℃に３０分間保った。溶媒を真空下で除去し、残渣をＡｃ０Ｅ ｔに溶解させ、５％ＮａＨＣＯ３そしてブラインで洗浄し中性にした。Ｎ　ａ　 ２　Ｓ　０４上で乾燥後、溶媒を蒸発させ、油状残渣をシリカゲルのフラン　シ ュクロマトグラフィー（含まれるＭｅＯＨの量が増加する（０．５％から１０％ へ）ＡｃＯＥｔで溶出）で精製した。生３ｇ（収率７０．７％）の化合物１ｍを 得た。ｍ、ｐ、７０℃（ｍｏｄ、）〜９０℃（ｄ　ｅ　ｃ、　）　、ＦＤ−ＭＳ 　：　ｍ／ｚ　６５１（１００、ＭＨ）、Ｒｆ　Ｏ，５７、ＲＴＡ１２．Ｏ２２ ”　２ＭＣＩ　（Ｉ　ｎ） １１６ｇ　（１，７８ｍｍｏｌ）のＢｏａ−Ｈｉ　ｓ　（Ｄｎｐ）−ＬｅｕＷ（ ＣＨ２Ｎ　Ｈ）　Ｍ　ｅ　ｔ　Ｎ　）（２（Ｉ　ｍ　）から出発し、ステップ１ ２に記載したとおりに操作し、１．０９ｇ（収率９８９６）の化合物ＩｎをＡｃ ０Ｅｔから得た。ｍ、　ｐ、１１０１？：（ｍｏ　ｄ、　）　〜２００℃（ｄ　 ｅ　ｃ、　）　、ＦＤ−ＭＳ　：遊離塩基としてｍ／ｚ５５１　（１００、ＭＨ ）　、ＲｆＡｏ、４１、Ｒ１５６ｍｇ　（１，１６ｍｍｏ　］）のＨＯＢｔ、２ ３９ｍｇ（１，１６ｍｍｏ　りのＤＣＣ，６６０ｍｇ　（１，０６ｍｒｎ。

］）のＨ−Ｈｉｓ　（Ｄｎｐ）−ＬｅｕＷ（ＣＨ２Ｎ　Ｈ）　Ｍ　ｅ　ｔＮＨ２ ・２　ＨＣｌ　（Ｉ　ｎ）及び０．２３ｍ１　（２，１２ｍｍｏ１）のＮＭＭを 、順次、７００ｍｇ　（１，０６ｍｍｏ＋）のＢｏｃ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ −Ｖａ　］−Ｇｌｙ−ＯＨ（１ｈ）のＤＭＦＢｍｌ中の溶液に加えた。反応混合 液を０℃で１時間及び室温で一晩撹拌し、そして、濾過し、真空下で蒸発させた 。油状残渣をＤＭＦに溶解し、５％Ｎ　ａ　ＨＣＯ３水溶液に撹拌しながら注い だ。懸濁液を濾過し、生成物を水で洗浄して中性にした。粗物質をフラッシュク ロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ８／２から成る溶出系）で精製した。

８２０ｍｇ（収率６５％）の化合物Ｔｏを、ＭｅＯＨ／Ａｃ０Ｅｔ／Ｅｔ２０か ら得た。ｍ、ｐ、１２８℃（ｍ−ｏ　ｄ、　）　〜１４５℃（ｄｅｃ、）、ＦＡ Ｂ−ＭＳ：ｍ／ｚｌ１９２　（２３、ＭＨ＋）、Ｒｆｏ、１０、ＲＴＡｌｏ、６ ゜ ステップ１６ Ｈ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａ　１−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ　（Ｄｎ８００ｍｇ　 （０，６７ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈ ｉｓ　（Ｄｎｐ）−ＬｅｕＩＦ　（ＣＨＮ）（）　Ｍｅ　ｔ　ＭＨ２（Ｉ　ｏ） を、８ｍｌの１．　３３ＮＨＣＩ／ＡｃＯＨ，０，８ｍｌのアニソール及びＱ、 ４ｍｌの２−メルカプトエタノールの混合物に溶解させ、室温で９０分間反応さ せた。溶媒を真空下で除去し、残渣をＥｔ２０で厚砕し、０．７６５ｍｇ　（収 率９８％）の化合物ｒｐを得た。ｍ。

ｐ、１６５℃　（ｍｏｄ、）　〜２２０℃（ｄｅｃ、）　、ＦＡＢ　−ＭＳ：遊 離塩基としてｍ／ｚ１０９２　（６、ＭＨ）、ＲｆＡＯ１２０、ＲＴ４．５、Ｒ Ｔ８１２．１゜ステップ１７ Ｂｏｃ−ｐＭｅ　Ｉ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　］−Ｇｌｙ３２１ｍｇ　 （０，６４ｍｍｏｌ）のＢｏＣ−ｐＭｅｌ−ＯＳｕ［ＤＭＦ５ｍｌ中の、２５９ ｍｇ　（０，６４ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−ｐＭｅ　Ｉ　−ＯＨ（本出願人のＵＫ特 許出願第ＨＯ６ｆ１００．９号参照）　、７７ｍｇ　（０，６７ｍｍｏ　Ｉ）の ＨＯＳｕ及び１３２ｍｇ　（０，６４ｍｍｏｌ）のＤＣＣからその場で調製した ］を、５００ｍｇ　（０，４３ｍｍｏ＋）のＨ−Ｇ　Ｉ　ｎ−Ｔ　ｒ　ｐ　−Ａ ｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ　（Ｄｎｐ）−Ｌｅｕｖ（ＣＨ２ＮＨ）　Ｍ　ｅ 　ｔ　ＭＨ２・２　ＨＣｌ　（Ｉ　ｐ）及び０．０９６ｍ１　（０，８７ｍｍｏ 　Ｉ）のＮＭＭのＤＭＦ１０ｍＩ中の冷却した溶液（０℃）に滴下添加した。反 応混合液を室温で一晩撹拌し、そして、５％Ｎ　ａ　ＨＣＯ３水溶液に滴下して 注いだ。懸濁液を室温で１０分間撹拌し、そして、濾過し、水で洗浄して中性に した。粗生成物（５２０ｍｇ、収率７８％）を、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶出液 Ａ中の溶出液Ｂの８０％から１００％の勾配、２０分間、流速３０ｍ１／分）に より精製した。２８６ｍｇ（収率４５％）の化合物Ｉを得た。ｍ、ｐ、１４０℃ （ｍｏｄ、）　〜１７０℃（ｄｅｃ、）　、ＡＡ比：Ｇｌｕｌ、ＧｌｙＯ，９３ （１）、Ａｌａｏ、９８　（１）、Ｖａｌｌ、００　（１）（ｐＭｅ　］、Ｔｒ ｐ、旧５（Ｄｎｐ）及びＬｅｕＴＦ（ＣＨ２Ｎ　Ｈ）　Ｍ　ｅ　ｔ　Ｎ　Ｈ２は ｎ、　ｄ、　）　、ＦＡＢ−ＭＳ　＋　ｍ／　ｚ　１＋ ４７８（１０、Ｍ）Ｔ　）、ＲｔＡｏ、５０、ＲＴＡ２７．Ｏ０実施例２ Ｂｏｃ−ｐＭｅ　１−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ調製 １８０ｍｇ　（０，１２ｍｍｏｌ）のＢｏａ−ｐＭｅ　］−］Ｇｌｎ−Ｔｒｐ− Ａｌａ−Ｖａ　］−Ｇｌｙ−Ｈｉ　ｓ　（Ｄｎｐ）−Ｌｅ　ｕｌＦ　（ＣＨＮＨ ）　Ｍｅ　ｔ−ＭＨ２（１）を７．２ｍｌの０゜０２Ｍ　ＫＨ２ＰＯ４（ＩＮ　 ＮａＯＨでｐＨ８に調整）に懸濁し、そして、７．２ｍ　ｌの２−メルカプトエ タノールを加えた。得られる溶液を室温で２０分間撹拌し、そして、真空下で濃 縮し、Ｅｔ２０に滴下して注いだ。粗生成物を濾過ｌ１、まず、シリカゲルのフ ラッシュクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ／ＭｅＯＨ７／３　ｖ／ｖの溶出系） 、そして、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶出液Ａ中の溶出液Ｂの３０％から９０％の 勾配、２０分間、流速２４ｍ１／分）により精製した。８２ｍｇ　（収率５２％ ）の化合物ＩＩを得た。ｍ、ｐ、７５℃（ｍｏｄ、）〜１２０℃（ｄｅｃ、）　 、ＡＡ比：Ｇｌｕｌ、Ｇｌｙｏ、９７（１）、Ａｌａｏ、９９　（１＞、Ｖａｌ ｌ、０２　（１）、Ｈｉｓｏ、９４　（１）（ｐＭｅｌ、Ｔｒｐ及びＬｅｕｖ（ ＣＨ２Ｎ）（）　Ｍ　ｅ　ｔ　Ｎ　Ｉ（２はｎ、　ｄ、　）　、ＦＡＢ−ＭＳ　 ：　ｍ／ｚ　１３＋ １２（７、Ｍ）（）、Ｒｆ　ｏ、１４、ＲＴＡ１８．１゜＾ 実施例３ Ａｃ−ｐＭｅ　１−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａ　１−Ｇａｙ−Ａｃ−ｐＭｅ 　＋　−０）Ｔ　（ＩＩＩ　ａ）０．９９１ｍｇ　（９ｍｍｏｌ）のアセチルイ ミダゾールのＤＭＦ　１０ｍ　ｌ中の溶液を、５００ｍｇ　（１，５ｍｍｏ＋） のＨ−ｐＭｅ　ｌ　−ＯＨ（ＳＩＧＭＡ　）のＤＭＦｌ　０ｍ　Ｉ中の溶液に撹 拌しながら滴下した。反応混合液を室温で５時間撹拌し、そして、溶媒を真空下 で蒸発させた。組物質をそのＤＣＨＡ塩を介して精製した。３１２ｍｇ（収率６ ０％）の化合物１１１ａをＡｃ０Ｅｔ／Ｅｔ２０から得た。ｍ、ｐ、５２〜５４ ℃、Ｅ　Ｔ　−ＭＳ　：ｍ／Ｚ３４６（２、Ｍ−）、Ｒｆ　Ｏ，３３、ＲＴＢ１ ２．８゜ステップ２ Ａｃ−ｐＭｅ　］　−］Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−７０ｍｇ　 （０，２ｍｍｏ　ｌ）のＡｃ−ｐＭｅ　Ｉ　−ＯＨを５ｍｌのＤＭＦに溶解させ 、そして、２３３ｍｇ　（０，２ｍｍ。

１）のＨ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ（Ｄｎｐ）−Ｌｅ ｕ　（ＣＨＮＨ）Ｍｅｔ−ＭＨ２−２ＨＣ１（Ｉｐ）を加え、続いて、５℃で、 ０．　０６６ｍ１　（０，６ｍｍｏｌ）のＮＭＭ及び８８．５ｍｇ　（０，２ｍ ｍｏ＋）のＢＯＰを加えた。反応混合液を室温で４．５時間撹拌し、そして、Ａ ｃ０Ｅｔに滴下して注いだ。粗生成物を濾過し、Ａｃ０Ｅｔで洗浄して、調製用 ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶出液Ａ中の溶出液Ｂの６０％から９０％の勾配、４０分間、 流速２４ｍ１／分）で精製した。１２８ｍｇ　（収率４５％）の化合物１１１を 得た。ｍ。

ｐ、１２４〜１５０℃（ｄｅｃ、）、ＡＡ比：Ｇｌｕｌ、Ｇｌｙｏ、８９　（１ ）、Ａｈａ０．９８　（１）、Ｖａｌｏ、９４（１）（Ｔｒｐ、Ｈｉｓ　（Ｄｎ ｐ）及びＬ　ｅ　ｕ　’Ｆ　（ＣＨ２Ｎ　Ｈ）Ｍｅｔ　ＭＨ２はｎ、ｄ、）　、 ＦＡＢ−ＭＳ　＋ｍ／ｚ１４２０÷ （１６、ＭＨ）、ＲｆＡｏ、　５７、ＲＴＡ１８．１５゜実施例４ Ｃａｂ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　Ｉ−Ｇａｙ−Ｈｉ　ｓの調製 ０．２０ｇ　（０，１７２ｍｍｏｌ）のＨ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ− Ｇｌｙ−）（ｉｓ　（Ｄｎｐ）−Ｌｅｕｖ（ＣＨ２ＮＨ）Ｍｅｔ−ＭＨ２−２Ｈ ＣＩ　（Ｉｐ）、０．０６８ｇ（０，２５８ｍｍｏ　１）の［ｐ−ビス（２−ク ロロエチル）アミノ］安息香酸（Ｃａｂ−ＯＨ）　、０．１１５ｇ　（０，２５ ８ｍｍｏりのＢＯＰ及び０．０５７ｍ１　（０，５１６ｍｍｏｌ）のＮＭＭから 開始し、化合物ＩＩ＋の調製で記載した通りに操作し、粗生成物を得て、調製用 ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶出液Ａ中の溶出液Ｂの３０％から９０％の勾配、２０分間、 流速２４ｍ１／分）で精製した。０．１３８ｇ（収率６０％）の化合物ＩＩ＋を 得た。ｍ、ｐ、１２８〜１５０℃（ｄｅｃ、）　、ＡＡ比：Ｇｌｕｌ、０２　（ １）　、Ｇｌｙｌ、Ａｌａｌ、００　（１）　、Ｖａ　１０．９５　（１）（Ｔ ｒｐ、Ｈｉｓ　（Ｄｎｐ）及びＬｅｕＩＦ（ＣＨＮＩ（）Ｍｅ　ｔ　ＮＨ２はｎ 、　ｄ、）　、ＦＡＢ−ＭＳ　：　ｍ／ｚ１３３６　（１３、ＭＨ）、Ｒｆ　Ｏ ，４７、ＲＴＡ１９゜＾ ９゜ 実施例５ Ｃａｂ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　］−Ｇｌ　ｙ−Ｈｉ　ｓ　−０，２ ０ｇ　（０，１５ｍｍｏｌ）のＣａｂ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　Ｉ− Ｇｌｙ−Ｈｉｓ　（Ｄｎｐ）−ＬｅｕＷ　（ＣＫＨ２ＰＯ４（ＩＮ　ＫＯＨでｐ Ｈ８，１に調整）に懸濁し、そして、１０．５ｍｌの２−メルカプトエタノール を加えた。

得られる溶液を室温で３０分間撹拌し、そして、真空下で濃縮した。生成物をＢ ｕＯＨで抽出し、有機層を水で２回洗浄し、蒸発させた。残渣をＭｅＯＨに溶解 させ、Ｅｔ２０で沈澱させた。粗生成物を、調製用ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶出液Ａ中 の溶出液Ｂの５０％から９０％の勾配、３０分間、流速２４ｍ１／分）で精製し た。９６ｍｇ　（収率５５％）の化合物Ｖを得た。ｍ。

ｐ、１２８〜１５０℃（ｄｅｃ、）　、ＡＡ比：Ｇｌｕｌ、０８（１）、Ｇｌｙ ｌ、Ａｌａｏ、９０　（１）、Ｖａｌｏ、９１（１）　、Ｔｒｐｌ、１０　（１ ）　、Ｈｉ　ｓｌ、０９　（１）（ＬｅＵマ（ＣＨＮ　Ｈ）　Ｍ　ｅ　ｔ　Ｎ　 Ｈ２はｎ、　ｄ、　）　、ＦＡＢ−ＭＳ　：ｍ／ｚｌ１７０　（２３、ＭＨ）　 、ＲｆＡｏ、３９、ＲＴＡ１４．１゜ 先の実施例に記載したとおりに操作して、下記のペプチドも調製した。

Ｈ−ｐＭｅ　１−Ｇｌｎ−Ｔ　ｒｐ−Ａｌ　ａ−Ｖａ　１−Ｇｌ　ｙ−ＬｅｕＷ 　（ＣＨＮＥＴ）Ｌｅｕ−ＮＨ２Ｈ−ｐＭｅ　Ｉ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖ ａ　１−Ｇｌｙ−ＬｅｕＷ（ＣＨＮ　Ｔ（）　Ｎ　ｌ　ｅ　Ｎ　Ｈ２Ａｃ−ｐＭ ｅ　］−］Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ１−Ｇｌｙ−ＬｅｕｔＦ　（ＣＨＮＨ ）Ｎｌ　ｅ−ＮＨ２Ａｃ−ｐＭｅ　］−］ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖ ａ　ｌ　−Ｇｌｙ−ＬｅｕｔＦ（ＣＨＮＨ）Ｎｌｅ−ＮＨ２Ｂｏｃ−ｐＭｅ　１ −ｐｈｅ−Ｇｌ　ｎ−Ｔｒｐ−Ａ　ｌ　ａ−Ｖａ　］−Ｇｌｙ−Ｌｅｕマ（ＣＨ ２Ｎ　Ｈ）　Ｎ　Ｉ　ｅ　Ｎ　Ｈ２Ｂｏｃ−ｐＭｅ　Ｉ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌ ａ−Ｖａ　Ｉ−Ｇｌｙ−ＬｅｕｔＦ　（ＣＨＮ）Ｔ）　Ｎｌ　ｅ−ＮＨ，。

Ｈ−ｐＭｅ　１−ｐｈｅ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａ　］　−Ｇｌｙ−Ｌｅ ｕｔＦ　（ＣＨＮＨ）Ｎｌｅ−ＮＨ，。

Ｃａｂ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕｖ（ＣＨＮ　Ｈ）　 Ｍ　ｅ　ｔ　Ｎ　）１２Ｃａｂ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａ　］−Ｇｌｙ− Ｌｅｕマ（ＣＨＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ，。

Ｃａｂ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇａｙ−ＬｅｕＷ（ＣＨＮ　Ｈ）　 Ｎ　ｌ　ｅ　Ｎ　Ｈ２Ｃａｂ−ｐｈｅ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｈａ−Ｖａ　１−Ｇ ｌｙ　−ＬｅｕＷ（ＣＨＮＨ）Ｍｅｔ−ＮＨ２ Ｃａｂ−ｐｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａ　１−Ｇａｙ−ＬｅｕＷ（ＣＨ ＮＨ）Ｌｅｕ−ＮＨ２ Ｃａｂ−ｐｈｅ−Ｇｉｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ　−ＬｅｕＷ（ＣＨ ＮＨ）Ｎｌ　ｅ−ＮＨ２国際調査報告 、Ｉｌｌ、ｌ、−ニー−＋ａｅｕ：ｅ、８．ａｓｌｌａ　ＰＣＴ／ＥＰ　９０１ ０１８３６ＳＡ　４１０９６

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. １．式Ｉ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ （式中、Ｒは４−（ＣｌＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＲ１ ）ＣＯ−；３−（ＣｌＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＨ２ＣＨ（ＮＨＲ１） ＣＯ−；４−（ＣｌＣＨ２ＣＨ２）２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＯ−；３−（ＣｌＣＨ２ ＣＨ２）２Ｎ−Ｃ６Ｈ４−ＣＯ−；ＣｌＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＯ−；ＣｌＣＨ＝Ｃ Ｈ−ＣＯ−，ＢｒＣＨ＝ＣＨ−ＣＯ−，ＣＨ２＝ＣＣｌＣＯ−，ＣＨ２＝ＣＢｒ ＣＯ−（ｃｉｓまたはｔｒａｎｓ異性体のいずれか）； ▲数式、化学式、表等があります▼ ＣＨ＝Ｃ−ＣＯ−；ＣｌＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｎ（ＮＯ）ＣＯ−；ＣｌＣＨ２ＣＯ −ＣＨ（Ｒ２）ＮＨＣＯ（ＣＨ２）２ＣＯ−の式の基を表し； Ａは原子価結合、または、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、 もしくはＧｌｎ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙの残基を表し、 Ｂは原子価結合、または、Ａｓｎ、ｐｈｅもしくはＴｈｒの残基を表し； ＣはＧｌｎまたはＨｉｓの残基を表し、ＸはＧｌｙまたはａｌａの残基を表し； Ｙは原子価結合、または、Ｈｉｓ（Ｒ３）、ｈｉｓ（Ｒ３）、Ｐｈｅ、ｐｈｅ、 Ｓｅｒ、ｓｅｒ、ＡｌａもしくはａＩａの残基を表し； Ｔは原子価結合、または、Ｌｅｕ、Ｉｅｕ、Ｐｈｅもしくはｐｈｅの残基を表し ； ＷはＯＲ２、ＮＨ２、ＮＨ（ＣＨ２）４ＣＨ３、ＮＨ（ＣＨ２）Ｃ６Ｈ５Ｍｅｔ −Ｒ４、Ｌｅｕ−Ｒ４、Ｉｌｅ−Ｒ４またはＮｌｅ−Ｒ４の式の基を表し； Ｒ１は水素原子、Ｂｏｃ基またはＣ１−Ｃ１１アシル基を表し、Ｒ２は水素原子 、１〜１１個の炭素原子を有する線状もしくは分枝の脂肪族鎖、ベンジルまたは フェニル基を表し、Ｒ３は水素原子、または、Ｔｏｓ、ＤｎｐもしくはＢｚｌ基 を表し、 Ｒ４はＮＨ２、ＮＨ−ＮＨ２またはＯＲ２を表し、一つ以上のペプチド結合（Ｃ ＯＮＨ）が還元ペプチド結合（ＣＨ２ＮＨ）で置き換えられている。） のペプチド及び医薬的に許容可能なその塩。
2. ２．ＲがｐＭｅｌまたはＣａｂを表し、Ｒ１が水素原子、Ｂｏｃまたはアセチル 基を表し、Ａ及びＹが原子価結合を表し、Ｂが原子価結合またはｐｈｅ残基を表 し、ＣがＧｌｎ残基を表し、ＸがＨｉｓ（Ｄｎｐ）、ＨｉｓまたはＧｌｙの残基 を表し、ＴがＬｅｕ残基を表し、ＷがＬｅｕ−ＮＨ２またはＮｌｅ−ＮＨ２の式 の基を表し、還元ペプチド結合（ＣＨ２ＮＨ）がＴとＷの間にある請求項１に記 載の式Ｉのペプチド。
3. ３．請求項１または２に記載のペプチドまたはそのようなペプチドの医薬的に許 容可能な塩を、医薬的に許容可能な希釈剤または担体と混合して含む医薬組成物 。
4. ４．末端カルボン酸基をペプチド結合のために活性化し、残余の基を保護して、 アミノ酸及び／またはアミノ酸誘導体を所望の配列で、及び／または、これらの アミノ酸またはそれらの誘導体を含むペプチド断片を所望の配列で縮合させて所 望のペプチドを得て、得られた化合物を脱保護し及び／または得られたペプチド を医薬的に許容可能なその塩に変換することから成る、請求項１または２に記載 のペプチドの製造方法。
5. ５．ヒト新生物の治療に適した医薬の製造における請求項１または２に記載のペ プチドの使用。